植物型皮膚黏膜消毒劑的制作方法

專利名稱：植物型皮膚黏膜消毒劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種殺菌用品，具體說是純植物型提取的用于皮膚黏膜消毒的液體消毒制劑。
背景技術：
由于近期人們對殺菌、消毒的意識驟然加強。殺菌、消毒液和殺菌、消毒氣霧劑類日化產品有了極大的需求。衛生防疫部門的有關專家推薦使用過氧乙酸、含氯殺菌劑(如84消毒液)、過氧化氫水溶液、臭氧處理以及紫外線照射等，對病毒、病菌有較佳殺滅作用，其缺點是沒有持效性。對醫院、學校、商店、公交等流動性病危群體和場所缺乏持續殺滅作用。近來開發的以三氯生、間二對氯苯酚等殺菌劑為主要殺菌成分的高效、廣譜、長效型殺菌消毒液和殺菌消毒氣霧劑對病菌、病毒具有持續殺滅作用，單獨使用或與上述殺菌消毒劑配合使用對殺滅和抑制各類病菌、病毒，防止傳染病傳播效果較好。目前，在對病原體進一步深入認識的前提下，還應重點加強各類高效、廣譜、長效型殺菌消毒液和殺菌消毒氣霧劑產品的開發和生產。
目前醫療單位、家庭、賓館、公眾娛樂場所等所使用的消毒產品一般都是化學制劑，按化學成份劃分，常用的化學消毒劑有含氯消毒劑、過氧化物類消毒劑、醛類消毒劑、雜環類消毒劑、含碘消毒劑、醇類消毒劑、季銨鹽類消毒劑、酚類消毒劑、雙胍類消毒劑以及其他消毒劑。
化學消毒劑通過本身化學成份對細胞的毒性分子進行侵入、破壞從而達到殺菌作用，有些消毒劑對人體有毒害作用，有些消毒劑生物降解速度極慢，及易造成環境污染；有些消毒劑對物品有腐蝕性及其他損害作用。并且，使用化學消毒法，在大多數情況下不如熱力消毒法效果可靠。因此，只有必須時方可使用化學消毒劑進行消毒。
應用于皮膚黏膜消毒的消毒制劑主要有1、過氧乙酸過氧乙酸對微生物的殺滅作用主要依靠其強氧化能力，其可破壞細菌芽孢的通透屏障，進而破壞和溶解核心，使DNA、RNA、蛋白質的物質破壞漏出，引起芽孢死亡。過氧乙酸常用于被病毒污染物品或皮膚消毒，一般物品消毒時可用濃度為0.5％，皮膚消毒時可用濃度為0.2％-0.4％，作用時間為3分鐘。
但是有機物能降低過氧乙酸的殺菌作用，殺滅有20％血清保護的細苗繁殖體所需過氧乙酸濃度需增加4～15倍，而對細菌芽孢需增加2～3倍。
過氧乙酸溶液不穩定，貯存時需置于通風陰涼處，用前先測定共有效濃度；用蒸餾水、去離子水或純凈水配制稀釋液，稀釋液常溫下保存不宜超過48h。
過氧乙酸對金屬有很強的腐蝕性，有堿類或有機物混入時劇烈分解，甚至發生爆炸。
高濃度的藥液具有強腐蝕性和刺激性，而且其氣味人很難接受。
2、醇類消毒劑①乙醇屬于中效消毒劑，殺菌作用較快，對人體無刺激，毒性較小等。乙醇殺菌對濃度有一定要求，其有效體積分數應為65％～75％。水對乙醇發揮殺菌作用非常必要，因此用于消毒時需對乙醇進行稀釋，但濃度低于30％時殺菌作用很小，濃度過強或過弱，殺菌作用都會降低。75％的單方乙醇消毒制劑對人體無毒，但由于人的體質不同，個別人對乙醇過敏，接觸后可引起皮疹、紅斑。乙醇消毒制劑經常使用，皮膚會因此而產生脫脂而干燥、粗糙等現象。
②異丙醇異丙醇的殺菌作用強于乙醇。但其屬于輕度有毒物質，超過一定濃度時，對呼吸道黏膜和眼結膜有強烈刺激作用，并可引起細胞組織壞死。異丙醇溶液溶脂性強，反復接觸皮膚可使皮膚干燥脫脂。另外，有機物和低溫都可使異丙醇的殺菌效果減弱。
3、含碘消毒劑 常見的碘伏和碘酊。它們賴以鹵化微生物蛋白質使其死亡。可殺滅細菌繁殖體、真菌和部分病毒。可以用于皮膚、黏膜消毒，醫院常用于外科洗手消毒。一般碘酊的使用濃度為2％，碘伏使用濃度為0.3％至0.5％。但碘離子極其活潑，其氧化力非常強，是一種不穩定的物質，會減少有效含量和降低消毒作用。
由于現有技術中用于皮膚黏膜的消毒劑大多為化學合成物，如含碘制劑、醇類消毒劑等，這些物質一般穩定性差，對人體刺激性大，長期使用對人體有一定的潛在危害性。

發明內容
本發明的目的在于提供一種殺菌效果顯著，殺菌因子穩定性能強，使用方便，無毒無刺激性的植物型皮膚黏膜消毒劑。
為達到上述目的，本發明采用的技術方案為皮膚黏膜消毒劑，它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成的
牡丹皮40-60份 黃芩40-60份皮膚黏膜消毒劑，它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成的牡丹皮50份黃芩50份上述的皮膚黏膜消毒劑的制備工藝如下(1)、將牡丹皮經水蒸餾器蒸餾獲得蒸餾液，備用；(2)、將牡丹皮藥渣和黃芩加水煎煮2次，每次2小時，再濃縮為相對密度為1.1-1.12的濃縮液；(3)、再加入3倍量的95％的乙醇，醇沉、提醇、過濾后，加入步驟(1)中的蒸餾液和水，冷藏過濾，配制成丹皮酚含量為0.12～0.13mg/ml，黃芩苷含量為3.5～4.5mg/ml的消毒劑，即可。
本發明是一種純植物提取的皮膚黏膜消毒制劑。它消除了化學制劑的作用濃度大、刺激性強、相對因子不穩定性、對皮膚黏膜的腐蝕性等缺點。
另外作用于皮膚黏膜消毒的植物型消毒劑，中藥消毒劑由于其使用安全、效果理想、氣味芬芳、對人體無害、對物品無腐蝕作用。
具體實施例方式殺菌、消毒是日用產品應用與發展的重要功能，日用產品的殺菌消毒功能一般通過加入適量的殺菌消毒劑實現。理想的殺菌劑應具備如下條件一、對自然界中的微生物有廣譜的藥效；二、少量即可有效；三、有良好的配伍性；四、溶解性、分散性優良，不影響產品的基本效能；五、安全性高，對人體無毒，無刺激，不會產生過敏，無毒副作用。
具體實施例1皮膚黏膜消毒劑，它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成的牡丹皮50g 黃芩50g上述的皮膚黏膜消毒劑的制備工藝如下(1)、將牡丹皮經水蒸餾器蒸餾獲得蒸餾液，備用；(2)、將牡丹皮藥渣和黃芩加水煎煮2次，每次2小時，再濃縮為相對密度為1.1-1.12的濃縮液；(3)、再加入3倍量的95％的乙醇，醇沉、提醇、過濾后，加入步驟(1)中的蒸餾液和水，冷藏過濾，配制成丹皮酚含量為0.12～0.13mg/ml，黃芩苷含量為3.5～4.5mg/ml的消毒劑，即可。
具體實施例2皮膚黏膜消毒劑，它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成的牡丹皮40g 黃芩60份上述的皮膚黏膜消毒劑的制備工藝與具體實施例1相同。
具體實施例3皮膚黏膜消毒劑，它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成的牡丹皮60g 黃芩40g上述的皮膚黏膜消毒劑的制備工藝與具體實施例1相同。
牡丹皮的主要成份是丹皮酚。牡丹皮為毛茛科植物牡丹{PaeoniaSuffruticosa Andr}的干燥根皮。
《神農本草經》記載，牡丹皮具有清熱涼血，活血化瘀等功效。《中藥現代研究與應用》論述牡丹皮提取物具有抗菌抗炎，止血鎮痛，消熱消腫等作用。牡丹皮中丹皮酚的質量分數大約為1.0％～3.0％，丹皮酚對金黃色葡萄球菌、糞鏈球菌、大腸桿菌等有較強的殺菌作用。丹皮酚有鎮痛作用，是一種嗎啡類的鎮痛劑，口服丹皮酚有明顯的清濕解熱作用。現代研究表明丹皮酚在體內可以迅速地吸收、代謝和排泄。由于丹皮酚毒副作用較小，可以廣泛地安全用于醫藥、食品和日化產品中。
黃芩的主要有效成份為黃芩甙。黃芩的抗微生物的作用已早為醫學界所認識，其清熱解毒作用的實質就是對細菌和病毒等致病原的抑制或殺滅作用。近年來對黃芩的黃酮類提取物對微生物的作用有了進一步的深入研究。體外培養證實，黃芩苷能抑制金黃色葡萄球菌外毒素誘發的T淋巴細胞的增殖，降低炎癥介質IL-1、IL-6及TNF和巨噬細胞炎癥蛋白(macrophageinflammatory protein，MIP)的水平，進一步的分子生物學研究還證實，黃芩苷降低了MIP-B及其mRNA的表達。因此，Krakauer等認為黃芩甙減輕金黃色葡萄球菌外毒素誘發的病理損害可能是通過阻斷細胞的信號通訊通路而發揮作用。另外黃芩甙與β-內酰胺類青霉素如羥氨芐青霉素合用能有效提高對耐青霉素酶金黃色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcusaureus，MRSA)的抗菌效價。
該產品采用牡丹皮與黃芩1∶1的配比經提取分離工藝，經對其效用成份檢驗，確定其含量為丹皮酚0.12～0.13mg/ml，黃芩苷3.5-4.5mg/ml。
該產品生產工藝明了優化，且生產成本低廉，產品效果殺菌顯著，殺菌因子穩定性能強，使用方便，無毒無刺激性等，是一安全可靠的消毒劑。
該產品經中國人民解放軍軍事醫學科學院消毒檢測中心按衛生部頒發的《消毒技術規范》(2002版)檢測其對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、白色念球菌都有很好的抑制及殺滅作用，且穩定性好；急性毒性評價標準檢測表明，屬實際無毒；屬無刺激性。
該產品經西北大學生命科學院抗菌試驗及作用機理試驗表明因其中含有藥用有效成分丹皮酚和黃芩苷，其產品具有很好的殺菌效果。丹皮酚可有效抑制mRNA的轉錄，而黃芩苷可顯著抑制細胞內白三烯的生物合成，從而起到殺菌作用。
牡丹皮和黃芩的體外抑制試驗一、牡丹皮的體外抑菌試驗研究試驗藥液的制備；取牡丹皮粉碎成粒徑20～40目，稱取50g加水1000ml置水蒸餾器中浸泡2小時，之后蒸餾提取，收集12倍量的餾出液，備用。
普通培養基的制備將金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、綠膿桿菌、炭疽桿菌、變形桿菌，分別用取菌環致密接種到普通營養培養基表面，以無菌操作將含牡丹皮浸出液的直徑的濾紙片貼到培養基上，37℃培養24h，觀察測量抑菌環直徑。
血平板培養基的制備普通營養瓊脂培養基礎上高壓消毒后，冷卻至56℃時加上5％～10％無菌脫纖維綿羊血混勻，倒入培養皿中制備。
將甲型鏈球菌、乙型鏈球菌用取菌環分別致密度接種到血平板營養基上后，以無菌操作將含牡丹皮浸出液的直徑4nm的濾紙片貼到培養基上后，37℃培養24h觀察測量抑菌環直徑。
表1牡丹皮的抑菌作用


實驗結果表明，牡丹皮對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、綠膿桿菌、炭疽桿菌、變形桿菌、甲型鏈球菌、乙型鏈球菌均有明顯的抑菌作用。現代研究證明牡丹皮具有抗菌作用。所含丹皮酚是抗菌的主要成分。實驗證明，牡丹皮煎劑對枯草桿菌、大腸桿菌、傷寒與副傷寒桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌、葡萄球菌、鏈球菌等均有較強的抗菌作用。該實驗為牡丹皮在本消毒劑配方提供了實驗依據。
二、黃芩的體外抑菌實驗實驗藥液的制備取黃芩粉碎成粒徑20～40目，稱取50g加水600ml文火煎煮2小時，靜置，濾過，濾液濃縮至50ml(濃度100％)備用。
普通培養基的制備將大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌。綠膿桿菌分別用取菌環致密接種到普通營養培養基表面，以無菌操作將含黃芩浸出液的直徑4mm的濾紙片貼到培養基上，37℃培養24h觀察測量抑菌環直徑。
血平板培養基的制備在普通營養瓊脂培養基礎上高壓消毒后，冷卻至56℃時加上5％～10％無菌脫纖維綿羊血混勻，倒人培養皿中制備。
將乙型鏈球菌用取菌環分別致密接種到血平板營養培養基上后，以無菌操作將含黃芩浸出液的直徑4mm的濾紙片貼到培養基上后，37℃培養24h觀察測量抑菌環直徑。
表2黃芩的體外抑菌實驗


實驗結果表明黃芩對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、綠膿桿菌、乙型鏈球菌均有明顯的抑菌作用。現代研究證實，黃芩有較廣的抗菌作用。在試管內對痢疾桿菌、白喉桿菌、綠膿桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌及腦膜炎球菌等均有抑制作用。另有解熱、抗炎、抗變態反應的作用。本次試驗證明黃芩有明顯的抑菌作用，為本消毒劑配方提供了科學依據。
皮膚黏膜消毒劑的抗菌消炎效果及作用機理用打孔法和試管法試驗消毒劑的殺菌效果；供試菌種黃色八疊球菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、福氏志賀氏菌；用mRNA含量測定法、放射免疫分析法和熒光分光光度法進行作用機理研究。
殺菌實驗表明，此消毒劑對黃色八疊球菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、福氏志賀氏菌等具有較強的抑制和殺滅作用。
作用機理研究顯示，此消毒劑對菌體的mRNA轉錄有抑制作用，并顯著抑制細胞內白三烯的生物合成。
皮膚黏膜消毒劑殺滅微生物試驗實驗材料金黃色葡萄球菌(ATCC 6538)、大腸桿菌(8099)、銅綠假單胞菌(ATCC 15442)，白色念球菌(ATCC 10231)；中和劑為10g/L甘氨酸、3.0％吐溫-80和3g/L卵磷脂的PBS；稀釋液(胰蛋白胨生理鹽水溶液)Ph7.0±0.2；TSB營養肉湯、TSA培養基；試驗載體為10mm×10mm平紋棉布片等。
檢測依據《消毒技術規范》2002版，2.1.1.5.6和2.1.1.7.5項。
一、中和劑去除殘留消毒劑鑒定試驗試驗分組第1組消毒劑+菌懸液→培養第2組(消毒劑增懸液)+中和劑→培養第3組中和劑+菌懸液→培養第4組(消毒劑+中和劑)+菌液→培養第5組稀釋液+菌懸液→培養第6組稀釋液+中和劑+培養基→培養(1)試驗用的天然植物型皮膚黏膜消毒劑為原液，作用時間為0.5min，試驗溫度為20℃±1℃。試驗重復3次。
實驗結果如下表表3中和劑鑒定實驗結果


(2)用標準硬水將天然植物型皮膚黏膜消毒劑原液按1∶1(消毒劑標準硬水)稀釋，同時所用中和劑用PBS也按1∶1(中和劑PBS)稀釋。作用時間為0.5min，試驗溫度為20℃±1℃。試驗重復3次。
實驗結果如下表表4中和劑鑒定實驗結果

實驗結果表明所用中和劑(10g/L甘氨酸、3.0％吐溫-80和3g/L卵磷脂的PBS)可中和本發明中和劑樣品，且中和劑和中和產物對金黃色葡萄球菌的生長基本無影響。
二、殺菌實驗試驗用天然植物型皮膚黏膜消毒劑為原液，作用時間為0.5min、1.0min、1.5min，試驗溫度為20℃±1℃。
實驗結果如下表表5消毒劑原液殺菌實驗

本發明消毒劑現場消毒鑒定試驗實驗材料自然菌；中和劑為10g/L甘氨酸、3.0％吐溫-80和3g/L卵磷脂的PBS；稀釋液為0.1％吐溫-80的PBS，pH7.2-7.4；TSA培養基和無菌棉拭；試驗載體為10mm×10mm平紋棉布片等。
一、手現場消毒試驗實驗依據《消毒技術規范》2002版，消毒產品檢驗技術規范2.1.2.6項。消毒前，受試者雙手相互搓擦后，五指并攏，用無菌棉拭子在含10ml稀釋液的試管中沾濕，對其左手五指屈指面從指尖到指柱往返涂擦2遍，以無菌操作方式將采樣端剪入原稀釋液試管內，作為陽性對照組。采樣后，用此消毒劑原液5ml對手進行消毒處理，消毒作用3.0min后，用無菌棉拭子在含10ml中和劑溶液的試管中沾濕，對其右手用同樣方法進行采樣，作為試驗組。將對照組與試驗組樣液充分敲打以適宜稀釋度吸收1.0ml接種平皿，一式兩份，各組接種平皿后傾注TSA培養基，冷凝后連同未接種的試驗用培養基平板一起，置37℃培養箱內培養48h，計數存活菌落數，計算殺滅對數值。
經30人重復試驗，作用時間3.0min，對手部表面的自然菌平均殺滅對數值＞1.00。結果如下表表6消毒劑原液對手消毒現場試驗結果


注陰性對照組無菌生長二、皮膚現場消毒試驗實驗依據《消毒技術規范》2002版，消毒產品檢驗技術規范2.1.2.8項。消毒前，受試者左右前臂內側中段相互充分搓擦后，將規格板防于受試者左前臂內側中段表面，用無菌棉拭子在含10ml稀釋液的試管中沾濕，于管壁上擠干后，在規格板框定的區域內，橫向往返涂擦10遍，縱向往返涂擦3遍。每涂擦一遍，將棉拭子轉動一遍。以無菌操作方式將采樣端剪入原稀釋液試管內，作為陽性對照組。采樣后，用此消毒劑原液3ml對右前臂內側進行消毒處理，消毒作用1.0min后，用無菌棉拭子在含有10ml中和劑溶液的試管中沾濕，對其右前臂用同樣方法進行采樣，作為試驗組。將對照組與試驗組洋液充分敲打，以適宜稀釋度吸收1.0ml接種平皿，一式兩份，各組接種平皿后傾注TSA培養基，冷凝后連同未接種的試驗用培養基平板一起，置37℃培養箱內培養48h，計數存活菌落數，計算殺滅對數值。
經30人重復試驗，作用時間1.0min，對手部表面的自然菌平均殺滅對數值＞1.00。結果如下表表7消毒劑原液對皮膚消毒現場試驗結果


注陰性對照組無菌生長消毒劑穩定性試驗樣品送檢時檢測其殺菌效果，然后將消毒劑放置54℃恒溫箱中14天后，在試驗溫度20℃±1℃條件下，作用時間0.5min，對金黃色葡萄球菌的殺菌效果。

注放置前陽性對照平均對數值及范圍5.97(5.96～6.00)放置后陽性對照平均對數值及范圍5.85(5.85～5.87)天然植物形皮膚黏膜消毒劑的毒理學實驗1、急性經口毒性試驗次消毒劑原液經口染毒小鼠LD50＞5000mg/kg，毒性分級屬實際無毒。
2、急性眼刺激試驗積分指數最高為0，刺激強度屬無刺激性。
3、陰道黏膜刺激試驗對家兔陰道黏膜的刺激指數為0，刺激強度屬無刺激性。
4、多次完整皮膚刺激試驗消毒劑多次作用于家兔皮膚，連續14天，給藥側積分均值為0，皮膚刺激指數＜0.5，刺激強度屬無刺激性。
5、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗消毒劑對小鼠骨髓嗜多染紅細胞無致微核作用。
6、亞急性毒性試驗最大未觀察到有害作用劑量(NOAEL)為1000mg/kg體重。
權利要求
1.皮膚黏膜消毒劑，其特征在于它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成的牡丹皮40-60份 黃芩40-60份。
2.根據權利要求1所述的皮膚黏膜消毒劑，其特征在于它所含的有效成分是由下述重量配比的原料制成的牡丹皮50份 黃芩50份。
3.根據權利要求1或2所述的植物型抗菌劑，其特征在于所述的皮膚黏膜消毒劑的制備工藝如下(1)、將牡丹皮經水蒸餾器蒸餾獲得蒸餾液，備用；(2)、將牡丹皮藥渣和黃芩加水煎煮2次，每次2小時，再濃縮為相對密度為1.1-1.12的濃縮液；(3)、再加入3倍量的95％的乙醇，醇沉、提醇、過濾后，加入步驟(1)中的蒸餾液和水，冷藏過濾，配制成丹皮酚含量為0.12～0.13mg/ml，黃芩苷含量為3.5～4.5mg/ml的消毒劑，即可。
全文摘要
本發明涉及一種殺菌用品，具體說是純植物型提取的用于皮膚黏膜消毒的液體消毒制劑。現有技術中用于皮膚黏膜的消毒劑大多為化學合成物，如含碘制劑、醇類消毒劑等，這些物質一般穩定性差，對人體刺激性大，長期使用對人體有一定的潛在危害性。本發明由牡丹皮，黃芩經浸泡、煎煮提取濃縮液，醇沉提醇而成，其消毒劑中丹皮酚含量為0.12～0.13mg/ml，黃芩苷含量為3.5～4.5mg/ml，所以是純中藥制成。本發明抗菌殺毒作用強，殺菌效果穩定性不變，對人體皮膚粘膜無刺激、無毒副作用，易溶于水，色淺，無味，不污染人體衣物，用后見效快，適用范圍廣，使用方法簡單，貯藏攜帶方便，具有芳香氣味。
文檔編號A61P31/00GK101077362SQ200610042868
公開日2007年11月28日 申請日期2006年5月25日 優先權日2006年5月25日
發明者宋凱 申請人:西安格潤森生物制藥股份有限公司