專利名稱：一種穩定的脂質體組合物的制作方法
技術領域：
本發明屬于藥物制劑領域，涉及一種穩定的脂質體組合物，具體涉及一種以飽和磷脂和膽固醇為成膜脂質的脂質體組合物，尤其涉及一種包含紫杉醇的脂質體組合物。
背景技術：
脂質體(liposome)的主要成分和結構與人體細胞膜相近，生物相容性優良，已廣泛被用作藥物傳輸的載體。脂質體常用的脂質材料有天然卵磷脂、天然大豆磷脂。這些脂質由于其分子中含有不飽和的脂肪酸基，易氧化水解成過氧化物、丙二醛、脂肪酸及溶血磷脂，后者可進一步水解成甘油磷酸復合物及脂肪酸等。磷脂的氧化水解還可使膜的流動性降低，促進藥物滲漏。這些不穩定因素不利于脂質體產品的制備、貯存和臨床上的安全使用。
脂肪酸基飽和的磷脂可有效避免上述氧化水解過程。這種含有飽和脂肪酸基的磷脂稱為飽和磷脂，如氫化飽和卵磷脂、氫化飽和大豆磷脂，及合成磷脂如二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰絲氨酸、二硬脂酰磷酰絲氨酸、二棕櫚酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰肌醇、二硬脂酰磷酰肌醇、二棕櫚酰磷脂酸、二硬脂酰磷酸，以及二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺。這些飽和磷脂具有不易氧化、水解慢，在體內穩定的優點。其中氫化飽和卵磷脂、氫化飽和大豆磷脂價格低廉，來源廣泛，是制備脂質體較理想的飽和磷脂。
但飽和磷脂制備脂質體亦存在一些問題，如飽和磷脂相變溫度高，制備過程中需要較高溫度，由此會影響到熱敏藥物的穩定性。飽和磷脂具有較強的剛性，形成脂質體彎曲的雙分子膜比較困難。在先的公開文獻對飽和磷脂用于制備脂質體作了很多探索，多采用兩種或以上的飽和和/或不飽和磷脂制備脂質體。CN95192734提及以基本飽和的中性磷脂和基本飽和的帶電磷脂制備大多層脂質體，用以包封非電解水溶性藥物。在該公開文件中，制備得到的脂質體粒徑大小在0.5～3.0微米的范圍內，如此寬范圍粒徑分布的脂質體在給藥后，很難達到被動靶向集中的目的，且用于靜脈給藥存在風險。還有研究利用飽和磷脂的相變溫度通常高于不飽和磷脂的相變溫度的特點以避免被包裹的藥物的泄漏，提高脂質體的穩定性。這方面的研究有CN01135935所提及的，采用相變溫度高的第一磷脂與相變溫度低(低于貯存溫度)的第二磷脂制備脂質體。其中第一磷脂選自氫化天然磷脂或長碳鏈飽和的磷脂，第二磷脂選自不飽和磷脂或短碳鏈飽和的磷脂，因其相變溫度的不同，而使雙層膜上雙相共存，形成兩相之間的邊界障礙，避免疏水性藥物的自行聚集析出和破壞脂質體的結構及穩定，因此提高疏水性藥物的包封量，使得藥脂比提高。在該公開文件中，采用兩種及以上的飽和或/和不飽和磷脂，未提及以一種飽和磷脂和膽固醇制備脂質體的技術方案。
抗癌藥物紫杉醇(paclitaxe)是從短葉紅豆杉(Taxus brevifolia Nutt.)的樹皮中提取的天然產物，具有良好的抗腫瘤活性，但因其在水中的溶解度極微，僅在甲醇、乙醇、二甲基亞砜等有機溶劑中可溶，因而給紫杉醇靜脈給藥帶來極大困難。解決其溶解性的公知的方法之一，是采用表面活性劑聚氧乙烯蓖麻油和乙醇作為溶劑溶解紫杉醇，如1992年美國食品藥品管理局(FDA)批準的紫杉醇注射液(美國百時美施貴寶公司生產，商品名為Taxol，在中國注冊的商品名為泰素)。聚氧乙烯蓖麻油雖能增加紫杉醇的水溶性，但由于其在體內降解時能釋放組織胺，從而可能發生嚴重的超過敏反應。此外，紫杉醇本身亦有毒性。因此我們期望制備一種不含聚氧乙烯蓖麻油和乙醇，在體內能夠定向分布，從而降低全身毒性的紫杉醇制劑。為達到此目的，脂質體不失為其理想的載體之一。
紫杉醇脂質體的研究從1990年代初開始進行。在WO9513053中，提及以帶有負電荷的脂質和兩性脂質制備紫杉烷類藥物的脂質體，以使制備的脂質體帶有電荷，防止聚集。公知的，微粒所帶的電荷將影響其在體內的處置。還有研究使用特殊的脂質，如在WO9318751、US5424073、US5648090、CN99801424中，提及紫杉醇脂質體配方中，添加一種特別的磷脂，心磷脂(cardiolipid)；這種磷脂較為特殊，其分子結構具有一個較大的親水基與四個脂肪碳鏈，從而提升包裹的紫杉醇的量。但這種磷脂非常昂貴。在中國已經上市的注射用紫杉醇脂質體，如南京思科藥業有限公司生產的力撲素，仍存在發生超敏反應的風險，需要提前注射地塞米松等進行抗過敏性預處理。因此，迫切需要提供一種更為安全、有效的新型紫杉醇脂質體組合物。
發明內容
本發明提供了一種以飽和磷脂和膽固醇作為成膜脂質的脂質體組合物及其制備方法。
本發明還提供了一種在制備和貯存過程中穩定的含有抗癌藥物的脂質體組合物及其制備方法。尤其提供了一種穩定的紫杉醇脂質體組合物，其不含聚氧乙基代蓖麻油，避免了含聚氧乙基代蓖麻油導致的超敏反應，提高了用藥安全性和患者的順應性。
制備本發明脂質體的必需組分之一是飽和磷脂。通常，這種飽和磷脂含有的飽和脂肪酸基的碳原子數為14～18。碳原子數小于14，脂質體容納內水相的能力降低，并且給予后，脂質體在血中的穩定性降低。另一方面，碳原子數過多，生物相容性降低，并且由于其碳鏈增長，相變溫度升高，生產脂質體過程中需要非常高的溫度，這對藥物及脂質體的穩定性都是不利的因素。因此，本發明所使用的飽和磷脂選自例如氫化飽和的大豆磷脂或卵磷脂、二棕櫚酰磷酯膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿。本發明使用的飽和磷脂不限于以上磷脂種類，凡含有的飽和脂肪酸基的碳原子數為14～18的磷脂，均可用于本發明的目的。
本發明優選的飽和磷脂選自氫化飽和的大豆磷脂、氫化飽和的卵磷脂、二棕櫚酰磷酯膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿。
如本領域技術人員所公知，飽和磷脂相變溫度高，剛性大，單獨形成彎曲的穩定的雙分子膜有一定困難。在本發明脂質體中，添加膽固醇與飽和磷脂一起作為成膜脂質，可以調節脂質雙分子膜的流動性。按照本發明，膽固醇與飽和磷脂的摩爾比例為1∶5至1∶1，優選1∶3至1∶1。
除上述必需的飽和磷脂和膽固醇之外，可以任選的加入抗氧劑如天然型或合成的維生素E，以防止藥物的氧化。按照本發明，抗氧劑與成膜脂質的重量比為1∶1000至1∶100，優選1∶300至1∶100。
采用常用的脂質體制備方法可以得到本發明的脂質體，例如采用高壓勻化法、微孔擠壓法、超聲分散法，優選采用高壓勻化法。上述提到的參考文獻中的制備方法均引入本文作為參考。
如本領域技術人員所公知，其中含有活性化合物的脂質體可用冷凍干燥來穩定，以制成適宜的組合物形式。在該過程中，需要加入冷凍賦形劑，依靠其穩定膜作用，保證脂質體的完整性。已知的冷凍賦形劑是多元醇類，如甘油、葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、氨基酸等。在本發明中，優選蔗糖作為凍干賦形劑。按照本發明，凍干賦形劑與成膜脂質的重量之比為1∶8至1∶1，本發明優選1∶4至1∶1。
本發明的載藥脂質體組合物形式可通過上述冷凍干燥的方法來制備。例如，將活性成分、飽和磷脂、膽固醇，如果必要，和抗氧化劑，按比例溶解在適宜的溶劑中成澄明溶液，在50℃～65℃恒溫下，按照常規方法，如減壓蒸發法，如果必要，在惰性氣體存在下減壓蒸發，除去該液體混合物中的溶劑，使之成膜，再加入溶有按比例計算的凍干賦形劑的水溶液，水化、超聲或勻漿至細度為0.1～0.3微米之間，以0.22微米的微孔濾膜過濾除菌，分裝入西林瓶等適宜的容器中，通過冷凍干燥從該混合物中除去溶劑，得到干燥的含藥脂質體，再將包裝容器封口或壓蓋，在封口和壓蓋之前可通惰性氣體。
在上述脂質體的制備方法中，不限制所使用的與脂質相關的溶劑的量，并且使脂質體溶解的液體的量是適宜的。通常，適宜的溶劑為非極性的或弱極性的并且能夠蒸發后不留下毒性殘余物。按照常規方法，如就通常所使用的有機溶劑而言，選自甲醇、乙醇、氯仿或它們的混合物。在本發明中，優選乙醇。本發明中采用的惰性氣體選自氮氣、氦氣、氬氣。以該制備方法制得的干燥的含藥脂質體能夠長期穩定貯存。
本發明的脂質體可以用作抗癌藥物的載體，活性成分與成膜脂質的摩爾比例為1∶50至1∶20。
在本發明中，優選的是，抗癌藥物為紫杉烷及其衍生物，更優選紫杉醇。紫杉醇作為活性成分，與成膜脂質的摩爾比例為1∶45至1∶25，以1∶35至1∶30為佳。
這種載有紫杉醇的脂質體組合物可通過上述的制備方法來制備。例如，將紫杉醇、飽和磷脂、膽固醇，如有必要，和抗氧化劑，按比例溶解在適宜的溶劑中成澄明溶液，在50℃～65℃恒溫下，按照常規方法，如減壓蒸發法，如果必要，在惰性氣體存在下減壓蒸發，除去該液體混合物中的溶劑，使之成膜，再加入溶有按比例計算的凍干賦形劑的水溶液，水化、超聲或勻漿至細度為0.1～0.3微米之間，以0.22微米的微孔濾膜過濾除菌，分裝入西林瓶等適宜的容器中，通過適宜的方法如冷凍干燥從該混合物中除去溶劑，得到干燥的紫杉醇脂質體，再將包裝容器封口或壓蓋，在封口和壓蓋之前可通惰性氣體。
通過上述方法制備所得的紫杉醇脂質體，其平均粒徑在100納米～300納米之間。這種紫杉醇脂質體一方面避免了由于藥物溶劑帶來的全身毒性；另一方面，該粒徑范圍內的脂質體在給藥后首先被體內的網狀內皮系統吞噬，具有被動靶向性，能夠降低紫杉醇自身對全身的毒副作用，提高人體耐受性。
該法制得的干燥的紫杉醇脂質在低溫下貯存，定期測定其氧化水解產物，結果表明，該紫杉醇脂質體具備良好的抗氧化性能。以注射用水復溶后，其平均粒徑在0.1～0.3微米，復溶的脂質體室溫存放12小時，紫杉醇脂質體不發生聚集，無紫杉醇結晶析出，可用于靜脈注射給藥。以上結果表明，以飽和磷脂和膽固醇作為成膜脂質制備的紫杉醇脂質體，具備良好的穩定性，能夠滿足生產、貯存和臨床應用的需要。
將本發明紫杉醇脂質體以40mg/kg/次和50mg/kg/次靜脈注射多次給藥，小鼠未表現出毒副反應，各項生理指標正常。市售紫杉醇注射液(商品名泰素)以33.3mg/kg/次，以1ml/min靜脈注射給藥后，動物出現短暫昏迷，本發明脂質體以等劑量或更高劑量同樣方式給藥后，動物正常。動物試驗結果表明，本發明紫杉醇脂質體可以提高生物體的耐受性。抑瘤試驗表明本發明脂質體具有至少與泰素相當的抑瘤效果。
本發明脂質體組合物，采用飽和磷脂和膽固醇作為成膜脂質，這些均為商業上可得到的藥用制劑材料。本發明制備工藝簡單，步驟少，采用的制劑設備為常規設備，便于投入工業化生產。以紫杉醇作為活性成分制得的脂質體組合物，避免了含聚氧乙基代蓖麻油的紫杉醇制劑導致的超敏反應。根據復溶后紫杉醇脂質體的粒徑分布和初步急毒試驗結果，可分析得知其靜脈注射后具有被動靶向特性，定向分布于網狀內皮系統，從而降低紫杉醇的全身毒性，提高了患者用藥的耐受性。根據在先文件公開的紫杉醇的藥理作用和臨床適應癥，該紫杉醇脂質體組合物可以適當方式和合理劑量安全地用于哺乳動物卵巢癌、卵巢轉移性癌、乳腺癌、非小細胞肺癌的治療。
下面對本文所用術語作特別說明本發明所用的術語“脂質體”，如本領域技術人員所公知，指由具有兩親性的磷脂分子和膽固醇聚合而成的封閉性小囊。在本文中，指一般意義上的單室脂質體。
本發明所用術語“成膜脂質”，指構成脂質體雙分子層的材料，在本文中指磷脂和膽固醇所構成的總體。
本發明所用術語“飽和磷脂”，指磷脂分子中的脂肪酸基是飽和的，即脂肪酸基中基本不含“C＝C”雙鍵。文中“氫化磷脂”、“氫化飽和磷脂”與該術語具有同樣的含義。
本發明所用術語“粒徑”，是指以激光粒徑測定儀測得的脂質體的平均粒徑。
下面結合實施例對本發明作進一步詳細的說明，實施例作為例證的目的給出，不構成對本發明范圍的限制。
圖1實施例1制得的脂質體的電鏡照片圖2實施例1制得的脂質體凍干前粒徑分布圖3實施例1制得的脂質體復溶后粒徑分布實施例1紫杉醇脂質體的制備處方紫杉醇 0.15g氫化大豆磷脂4g膽固醇 0.6g
維生素E25mg蔗糖 12g注射用水 120ml分別稱取處方量的紫杉醇、氫化大豆磷脂、膽固醇、維生素E加入100ml無水乙醇，溶解后，以旋轉蒸發儀在氮氣存在情況下，抽干溶劑，制備成膜，置真空干燥器中過夜放置，除去殘留溶劑。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，55℃水浴，磁力攪拌1小時，超聲分散，用高壓均質機均質，0.22微米PVDF膜無菌過濾，分裝入西林瓶，冷凍干燥。將西林瓶通氮氣，壓蓋密封。
制得的脂質體的電鏡照片見圖1(放大50000倍)。
按照中國藥典2005版二部附錄XIX E中方法，測得樣品的包封率為93.0％。
按照中國藥典2005版二部附錄XIX E中方法，以激光粒徑測定儀測定凍干前脂質體樣品，其平均粒徑為138.6納米，注射用水復溶樣品的平均粒徑為178.5納米。其粒徑分布圖見圖2和圖3。
實施例2紫杉醇脂質體的制備處方紫杉醇0.15g氫化卵磷脂4g膽固醇1g維生素E 20mg蔗糖 15g注射用水 150ml分別稱取處方量的紫杉醇、氫化大豆磷脂、膽固醇、維生素E加入100ml無水乙醇，溶解后，用旋轉蒸發儀制備成膜，置真空干燥器中過夜放置，除去殘留溶劑。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，58℃水浴，磁力攪拌1小時，超聲分散，依次采用0.8，0.4，0.2微米聚碳酸酯膜，用擠出器高壓擠出，分裝入西林瓶，冷凍干燥，壓蓋密封。
與實施例1同樣方法測定，凍干前樣品的平均粒徑為164.6納米，包封率為92.1％。
實施例3紫杉醇脂質體的制備處方紫杉醇 0.15g氫化大豆磷脂3.5g膽固醇 1.5g維生素E 16mg蔗糖5g注射用水50ml分別稱取處方量的紫杉醇、氫化大豆磷脂、膽固醇、維生素E加入100ml無水乙醇，溶解后，用旋轉蒸發儀制備成膜，置真空干燥器中過夜放置，除去殘留溶劑。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，60℃水浴，磁力攪拌1小時，超聲分散，用高壓均質機均質，用0.2微米聚碳酸酯膜擠出，0.22微米PVDF膜無菌過濾，分裝入西林瓶，冷凍干燥，壓蓋密封。
與實施例1同樣方法測定，凍干前樣品的平均粒徑為152.6納米，包封率為90.6％。
實施例4紫杉醇脂質體的制備處方紫杉醇0.15g二硬脂酰磷脂酰膽堿2.5g膽固醇1.2g維生素E 4mg蔗糖 15g注射用水 150ml分別稱取處方量的紫杉醇、氫化大豆磷脂、膽固醇、維生素E加入100ml無水乙醇，溶解后，用旋轉蒸發儀制備成膜，置真空干燥器中過夜放置，除去殘留溶劑。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，50℃水浴，磁力攪拌1小時，超聲分散，用高壓均質機均質，用0.2微米聚碳酸酯膜擠出，0.22微米PVDF膜無菌過濾，分裝入西林瓶，冷凍干燥，壓蓋密封。
與實施例1同樣方法測定，凍干前樣品的平均粒徑為143.8納米，包封率為88.2％。
實施例5紫杉醇脂質體的制備處方紫杉醇0.15g二棕櫚酰磷脂酰膽堿2g膽固醇0.5g維生素E 25mg蔗糖 6.5g注射用水 75ml分別稱取處方量的紫杉醇、氫化大豆磷脂、膽固醇、維生素E加入100ml無水乙醇，溶解后，用旋轉蒸發儀制備成膜，置真空干燥器中過夜放置，除去殘留溶劑。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，58℃水浴，磁力攪拌1小時，超聲分散，依次采用0.8，0.4，0.2微米聚碳酸酯膜，用擠出器高壓擠出，分裝入西林瓶，冷凍干燥，壓蓋密封。
與實施例1同樣方法測定，凍干前樣品的平均粒徑為138.6納米，包封率為86.4％。
實施例6紫杉醇脂質體的制備處方紫杉醇0.15g氫化卵磷脂4g膽固醇0.4g蔗糖 35g
注射用水 200ml分別稱取處方量的紫杉醇、氫化大豆磷脂、膽固醇加入100ml無水乙醇，溶解后，用旋轉蒸發儀制備成膜，置真空干燥器中過夜放置，除去殘留溶劑。加入以注射用水溶解的蔗糖溶液，55℃水浴，磁力攪拌1小時，超聲分散，用高壓均質機均質，用0.2微米聚碳酸酯膜擠出，0.22微米PVDF膜無菌過濾，分裝入西林瓶，冷凍干燥，西林瓶中通以氬氣，壓蓋密封。
與實施例1同樣方法測定，凍干前樣品的平均粒徑為178.5納米，包封率為92.4％。
實施例7紫杉醇脂質體組合物的穩定性試驗該試驗旨在考察實施例中制備的脂質體樣品的貯存穩定性和使用穩定性。
將實施例1、2、3中制得的干燥的紫杉醇脂質體組合物在2～10℃長期穩定貯存，觀察其外觀，以注射用水復溶后，以顯微鏡觀察，結果見表1；將此溶液室溫存放12小時，定時觀察，結果見表2。由結果可知，紫杉醇脂質薄膜在2～10℃貯存12個月后，復溶后不發生聚集，無紫杉醇結晶析出；復溶后放置12小時，不發生聚集，無紫杉醇結晶析出。
表1紫杉醇脂質體低溫(2～10℃)放置穩定性試驗結果
表2紫杉醇脂質體復溶后室溫放置穩定性試驗結果
實施例8紫杉醇脂質體的急性毒性試驗該實施例旨在考察本發明紫杉醇脂質體按常規方式給藥后的即時毒性反應和多次給藥的耐受性。
將實施例1中制備的紫杉醇脂質體以注射用水復溶。試驗動物昆明種雌性小鼠，體重18～20g，隨機分為4組，每組5只，陰性組給以與試驗組最高體積的相應溶劑。在第1，4，7天對各組以靜脈注射給藥。
試驗結果(1)即時毒副反應觀察各組小鼠給藥后即時觀察，無明顯毒副反應。(2)小鼠體重變化紫杉醇組給藥后小鼠體重變化不大，第三次給藥后小鼠體重有下降，之后體重逐步上升。空白溶劑組小鼠體重逐步上升。
具體結果見表3。
表3紫杉醇脂質體急性毒性試驗中動物體重變化
實施例9抗腫瘤作用試驗以實施例1中制備的紫杉醇脂質體組合物進行初步抗腫瘤試驗。實驗動物采用C57BL/6黑小鼠，雄性，體重19～22g，隨機分組，每組10只。取B16黑色素瘤源，采用勻漿法，以生理鹽水1∶6制備成瘤細胞懸液，右腋皮下接種B16黑色素瘤，腫瘤接種后24小時，小鼠尾靜脈注射給藥，觀察即時反應及體重變化。實驗結束后，剖取腫瘤稱重，按下式計算腫瘤抑制率。
腫瘤抑制率％＝[(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重]*100％試驗結果(1)即時反應觀察紫杉醇脂質體各組給藥后無即時明顯毒副性反應。泰素各組小鼠靜脈給藥后(注速為1ml/min)，即時小鼠呈半昏迷狀態，15分鐘左右可逐漸恢復。(2)各組動物體重均無明顯變化。(3)在總劑量相等的情況下，紫杉醇脂質體與泰素的抑瘤效果無明顯差異(見表4)。
表4紫杉醇脂質體不同給藥方案對小鼠黑色素瘤B16(皮下接種)療效試驗
權利要求
1.一種脂質體，其特征在于，脂質體的成膜脂質由飽和磷脂和膽固醇組成，活性成分包裹在脂質體中。
2.如權利要求1所述的脂質體，其特征在于，其中飽和磷脂選自氫化飽和卵磷脂、氫化飽和大豆磷脂。
3.如權利要求1所述的脂質體，其特征在于，其中飽和磷脂選自二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿。
4.如權利要求1至3任一所述的脂質體，其特征在于，膽固醇與飽和磷脂的摩爾比例為1∶5至1∶1。
5.如權利要求4所述的脂質體，其特征在于，膽固醇與飽和磷脂的摩爾比例為1∶3至1∶1。
6.如權利要求5所述的脂質體，其特征在于，還含有抗氧化劑。
7.如權利要求6所述的脂質體，其特征在于，抗氧化劑選自天然型維生素E或合成維生素E，其與成膜脂質的重量比為1∶1000至1∶100。
8.如權利要求7所述的脂質體，其中活性成分選自抗腫瘤藥物。
9.如權利要求8所述的脂質體，其中活性成分選自紫杉烷或其衍生物。
10.如權利要求9所述的脂質體，其中活性成分為紫杉醇。
11.如權利要求10所述的脂質體，其特征在于，紫杉醇與成膜脂質的摩爾比例為1∶45至1∶25。
12.如權利要求11所述的脂質體，其特征在于，脂質體的平均粒徑在100納米至300納米范圍內。
13.一種包含權利要求1至12任一所述脂質體的組合物，其特征在于，還包含藥學上可接受的賦形劑。
14.如權利要求13所述的脂質體組合物，其特征在于，含有凍干賦形劑。
15.如權利要求14所述的脂質體組合物，其特征在于，凍干賦形劑選自蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖。
16.如權利要求15所述的脂質體組合物，其特征在于，凍干賦形劑為蔗糖。
17.如權利要求14至16任一所述的脂質體組合物，其特征在于，按重量比，成膜脂質與凍干賦形劑的比例為1∶8至1∶1。
18.如權利要求17所述的脂質體組合物，其特征在于，按重量比，成膜脂質與凍干賦形劑的比例為1∶4至1∶1。
19.一種制備權利要求14至18任一所述脂質體組合物的方法，其步驟為將活性成分與磷脂、膽固醇，如有必要，和抗氧化劑，按比例攪拌溶于乙醇中，使溶液成澄明溶液，然后放入溫度為50℃～65℃的恒溫水浴中，在旋轉蒸發器中減壓除去溶劑后成膜，再加入凍干賦形劑的水溶液，水化、超聲或勻漿或擠出至細度為0.1～0.3微米之間，以0.22微米的微孔濾膜過濾除菌，分裝于容器內，冷凍干燥后通入惰性氣體，密封容器，得到紫杉醇脂質體組合物。
20.如權利要求19所述的制備方法，其特征為，惰性氣體選自氮氣、氦氣、氬氣。
21.如權利要求19所述的制備方法，其特征為，所采用的分裝容器為西林瓶。
22.權利要求13-18任一所述脂質體組合物在治療癌癥方面的應用。
23.如權利要求22所述的應用，使用之前以注射用水復溶，再以5％葡萄糖溶液稀釋。
24.如權利要求22所述的應用，其使用方式為靜脈注射或腹腔注射或瘤體注射。
25.如權利要求22所述的應用，其中癌癥種類為卵巢癌、卵巢轉移性癌、乳腺癌、非小細胞肺癌。
26.如權利要求22所述的應用，其特征在于與順鉑聯合應用。
全文摘要
一種穩定的脂質體組合物，由飽和磷脂和膽固醇作為成膜脂質，加入維生素E作為抗氧劑，以蔗糖作為凍干賦形劑，采用薄膜蒸發－冷凍干燥的方法制備。這種脂質體可作為抗癌藥物紫杉醇的載體，穩定性試驗結果表明其在放置過程中穩定，動物試驗結果表明制得的紫杉醇脂質體組合物具有與市售紫杉醇注射液相當的抑瘤作用，而耐受性提高。
文檔編號A61K47/24GK1947703SQ20061002872
公開日2007年4月18日 申請日期2006年7月7日 優先權日2006年7月7日
發明者郭建輝, 劉善奎, 翟晨淏 申請人:上海艾力斯醫藥科技有限公司