專利名稱：：構樹果色素的制備方法及其用途的制作方法
技術領域：
：本發明涉及醫藥、食品和飲料等
技術領域：
，具體地說是涉及中藥楮實子的一種成分的制備方法及其用途，更具體地說是涉及構樹果色素的制備方法及其用途。
背景技術：
：(一)中藥楮實子的研究概況1、概述中藥楮實子為桑科植物構樹Broussonetiapapyrifera(L.)Vent.的成熟果實，為常見的傳統中藥。然而，楮實子及其原植物在名稱、應用等方面，本草記載與現代記載并不完全一致，有的實際上已隨著歷史變遷而發生變化。構樹原名楮，亦名穀，現代文獻一般認為始載于《名醫別錄》，列入上品“主陽痿水腫，益氣，充肌膚，明目”。楮實子為其果實，始載于《素問病機保命集》“楮實子丸，治水氣，潔凈府。”在古文獻研究整理過程中，發現楮實子具有益氣、充肌膚，明目，久服不饑、不老，輕身功效，且可食可藥。《本草蒙荃》也云“赤者頻服，不老不饑，筋力倍暗，行及奔馬”。劉漢基《藥性通考》載“楮實子，陰痿能強，水腫可退，充肌膚，助腰膝，益氣力，補虛勞，悅顏色，壯筋骨，明目。補陰妙品，益髓神膏。”。中國歷版藥典均有收載，歷代醫家也認為楮實為補益藥，具有補腎、清肝、明目、利尿的功效，用于腰膝酸軟，虛勞骨蒸，頭暈目昏，目生翳膜，水腫脹滿。現代研究也表明中藥楮實子具有改善記憶、增強免疫等方面的作用。這些似都突出強調楮實補益的神奇功效，現代藥典記載楮實子為補腎藥，古本草也多記載有楮實子為強壯劑，是否真有此效，尚值得進一步研究。2、植物分類與資源概況構樹，桑科落葉喬木，高達16m，莖葉有乳汁，嫩葉有柔毛，后脫落。葉互生，寬卵形至矩圓狀卵形，長7～20cm，寬6～15cm，不分裂或不規則的3至5裂，先端尖，基部圓形或心形，邊緣有粗鋸齒，上面有糙毛，下面密生柔毛，三出脈；葉柄長2.5～8cm。花單性，雌雄異株；雄花序葇荑狀，長6～8cm，萼4裂，雄蕊4；在江蘇地區3月中旬萌芽長葉，4月中旬開花，花粉彈出；雌花序頭狀，直徑1.2～1.8cm，成熟時可達3cm；雄花被片和雄蕊均為4；雌花苞片棒狀，先端有毛，花被管狀，花柱側生，絲狀。聚花果球形，徑約3cm，肉質，7～9月為果熟期，成熟時紅色，果熟后長時期掛存在樹枝上。其中雄花序初生時應為葇荑狀，但有時也會隨環境發生某些變態，而呈球狀，并結有不育果，但此現象不普遍。11月初至12月上旬，葉片逐漸凋落。構樹屬隸屬于桑科Moraceae桑亞科Moroideae構樹族broussonetieae。構樹屬BroussonetiaL′Hert.ExVent.在分類學上位置為離瓣花亞綱，單花被類，蕁麻目，桑科(本科主產熱帶，約72屬，1000種以上，中國入藥者6屬約35種)，構樹族Trib.BroussonetiaGaud.。構樹屬全世界共有5種，分布于亞洲東部及太平洋島嶼。構樹是中國分布很廣的鄉土樹種，分布于中國大部分地區，主要分布河北、山西以南各地，資源十分豐富，其蘊藏量十分大，中國本屬有4種構樹組Sect.BroussonetiaCorner有構樹Broussonetiapapyrifera(L.)vent、小構樹B.kazinokiSieb.、藤構B.kaempferiSieb.var.australissuzuki(原變種葡蟠B.kaempferiSieb.var.kaempferi僅產于日本)三種，落葉花桑組Sect.Allaeanthus(Thw.)Corner中國僅落葉花桑一種Broussonetiakurzii(Hook.f.)Corner，主要分布于云南南部西雙版納至蒙自紅河熱帶季雨林中，海拔200～600米地區。在國外錫金、不丹、印度東北部、緬甸北部、老撾、越南、泰國有分布。構樹組除上述三種外，另還報導了一新種江西構B.jiangxiensisZ.X.Yu，sp.nov.主要分布于南昌梅嶺、瑞金縣、宜豐縣。以及小構樹的一變種乳陽小構樹B.kazinokiSieb.var.ruyangensisP.H.liangetX.W.Wei，var.nov.主要分布于廣東乳陽。構樹在中國的分布十分廣泛，這在上述古代本草的記載中也可看出，無論是滁州、明州，河南，還是荊楊、交廣、幽州、中州、江南均分布，在《山海經》卷一南三經中也提到，“東三百里首山，其陰多穀柞，草多術莞……西五十里穀山，其同多穀，其下多桑，爽水出焉”。“近道雖有，滎陽(屬河南)獨多。每產廢田”，“谷田久廢，必生構”也可見構樹的適應性很強，無論是溝邊、路旁、山坡、庭園，構樹都極易繁殖生長，并且普遍要比其伴生木本植物長得好。至于《齊民要術》云“楮宜澗谷間種之，地欲極良”。實際上并非如此，只不過肥沃的土地構樹能長得更好罷了。據發明人的調查，構樹廣泛分布于中國大部分地區，除新疆、黑龍江、內蒙古、寧夏、青海等以外的省區均有分布。構樹、小構樹、藤構的分布見表1。構樹野生或栽培，且多數為野生狀態；生于海拔1400m以下的山坡、田野路旁、溝邊、墻隙或林中。構樹的繁殖力強，在溫熱、濕潤的氣候條件下能良好生長，對土壤要求不高，從沙壤土到粘壤土均能生長。構樹應用廣泛，實用價值與經濟價值較高。其纖維可制紙，構樹的葉、枝、皮、根皮、乳汁、根皮、果實都可以作藥用或食用；《本草綱目》、《圖經本草》、《花鏡》、《植物名實圖考》等對此均有記載。如未成熟之果實，李時珍云“半熟時水澡去子，蜜煎作果食”。《花鏡》云“結實紅如楊梅，但無核而不堪食。……子亦可佐食”。據發明人研究，楮實未成熟果實確實含有較多的氨基酸、糖類，然味感甚一般。除嫩葉食用外，葉還可用于食療，如藥性論云“葉干炒末，搜面作馎任食，主水痢。”表1、構樹屬資源在中國的分布情況樹皮、莖、葉均含鞣質，可提制栲膠；其葉還含有豐富的蛋白質，可以作為飼料，也可以用作養蠶；其皮或枝干含優質的纖維，可以用于造紙張，尤以宋金元時期為盛；例如，構樹屬三種植物的樹皮纖維質優韌性強、拉力大，可制人造棉，作混紡和單紡纖維，制棉紙、高麗紙及北方宣紙用；亦可代麻用，供制繩索，織麻袋用。構皮潔白的韌皮纖維中含纖維素36.4％。纖維長度為5.5～11cm；單纖維長3.9～8.7mm，平均5.4～7.9mm；直徑11.6～30.4um，平均19.8um；單纖維平均拉力為14.4g，是造紙的上等原料。其果實含有豐富的脂肪油，含量高可達40％，可供制肥皂，潤滑油及油漆用。構樹的雄花序拌面可蒸食，嫩葉也有食用價值，成葉富含蛋白，可作飼料；構樹葉搗爛還可用于防治農業害蟲，2倍水浸液，防治蚜蟲效果為80％，葉的五倍水煮液，防治棉蚜蟲殺蟲率達86％，對28星瓢蟲殺蟲率為80.4％；對豆蚜為75.6％；對斜紋蛾為43％。在藥用方面，楮實及構樹各個部分均有記載。楮實子《名醫別錄》載為上品甘、寒，無毒。功用大補益，主治陰痿水腫、益氣、充肌膚，明目，久服不饑、不老，輕身。《日華子本草》云壯筋骨，助陽氣，補虛勞，助腰膝，益顏色。《本草匯言》健脾養腎，補虛勞，明目。《本經逢原》“楮實，走肝腎血分，壯筋骨，益顏色。脾胃虛人禁用”。《抱樸子》“楮實，赤者服之，老者成少，令人徹視見鬼神，道者染須年七十，眼之更少壯，到百四十歲，能行及走馬。”《本草蒙荃》也云“赤者頻服，不老不饑，筋力倍暗，行及奔馬”。劉漢基《藥性通考》載“楮實子，陰痿能強，水腫可退，充肌膚，助腰膝，益氣力，補虛勞，悅顏色，壯筋骨，明目。補陰妙品，益髓神膏。”，這些似乎都突出強調楮實補益的神奇功效，是否真有此效，尚值得進一步研究。例如，構樹各部分還具有較好的藥用功效，構葉、莖等也具治癮癢疹、腳氣、腳癬等功效；葉搗汁服可治鼻衄、治痢疾；葉的膠質可擦治癬瘡；葉及樹皮中的乳汁，可敷蛇、蟲、蜂、蝎、犬咬；樹皮治水腫，利小便。果實用作強壯劑，性甘寒、無毒，有消水腫、壯筋骨、明目、健胃之效，能治陰痿水腫、益氣、充饑、明目和治喉痹喉風。另一方面，吳儀洛《本草從新》曰“楮實，陶隱居、蘇頌、抱樸子，皆甚言其功。而方書用之為補者，除楊氏還少丹而外，不多見”。黃宮繡《本草求真》云“骨鯁可用楮實煎湯以服，以紙燒灰存性調服，以治血崩血暈。脾胃虛人禁用，久服令人骨痿，豈非性屬陰寒，虛則受其益，過則增其害之意乎。”楮實特別是久服令人骨痿，似乎與其壯筋骨有背，與濟生秘覽治骨哽也不能一致。清.《本草思辯錄》則認為“楮實補陰伸陽，與純補陰有之別。水腫者，陰不與陽化而水聚。肌膚不充者，陽不得陰濟而氣乏也。目不明者，陰不升而陽無光也。故楮實皆能勝任之。由于骨屬腎，甘能損腎。腎傷于濕者，腰腳為之痿軟，濕亦陰也。楮實甘寒益陰而不能益陽，久服骨何能不軟。壯筋骨之說實是有誤。”說明古人對楮實能否壯筋骨之功效有爭論。除了楮實以外，構樹的葉及楮紙在古代也均有作藥用的記載《別錄》云“葉味甘，無毒。主小兒身熱，食不生肌，可作浴湯。又主惡瘡，生肉”。楮紙也可用于鼻衄、蓐中血暈、金瘡出血等。楮樹白色乳汁還可治皮膚瘙癢及蝎咬痛不止。此外，構樹枝能治風疹，目赤腫痛，小便不利。嫩根或根皮有清熱，涼血，利濕，祛瘀功效，可治咳嗽吐血，水腫，血崩，跌打損傷。楮樹白皮即構樹皮，古又稱穀白皮，能行水，止血；治水腫氣滿、氣短咳嗽，腸風血痢，婦人血崩。莖主癮疹癢，單煮洗浴。現民間也有用其新鮮莖皮乳汁內服治水腫或外敷治癬。構樹還是一種優良的環保植物，構樹對環境適應性強，耐干旱瘠薄，生長迅速，抗煙力強，葉上下表面粗糙，被細柔毛，其吸塵、除污、固沙固水能力都較強，可用于環保綠化和環境治理。3.采制方法構樹主要是果實入藥，藥典收載的品種也是其果實，名楮實子。果實成熟時采收，洗凈，曬干，除去灰白色膜狀宿萼及雜質。關于采收時間，各地成熟時間并不一致，大致在農歷8～9月間，即白露前后。《名醫別錄》云“八月、九月采實，日干，四十日成”。齊民要術云“楮宜澗谷間種之，地欲極良。秋上楮子熟時，多收凈淘，曝令燥”。《本草圖經》“八月、九月采，水浸去皮穰，收取中子”。宋《急救》“去殼用米”。明《普濟方》“水淘去浮者，焙干”。明《瑤醫》“去膜，陰干”。清《鉤元》“去皮核”。從上看來，古代楮實的采收時間也多在八九月間，古代主要是指陰歷。采收方法多是成熟果實水洗取子干燥。而現在采收方法一般已不用水洗，等楮實近成熟，曬干，搗舂，除去外衣，篩取果實曬干。而發明人經對照實驗發現，仍待成熟時取實水洗曬干，時間既快，取得的果實又色澤紅潤，飽滿，質量較佳。至于炮炙方法，有用酒蒸方法，雷公云“凡使，采得后用水浸三日，將物攪旋投水，浮者去之，然后曬干，卻用酒浸一伏時了，便蒸，從已至亥出，焙令干用”。明《本草蒙荃》亦云“待深秋采挖，浸水以去皮瓤，取中子曝干，投酒再浸晝夜，務蒸從已至亥，任用煎嘗為丸”。明《入門》“入藥水沉去浮者，去皮酒浸蒸半日，焙干”。也有用酒浸、酒拌方法，宋《總錄》“酒浸一宿蒸熟”。明《原始》“用酒浸一時焙干用”。明《醫學》“酒拌”。其它還有炒制法，宋《圣惠方》“水淘去浮者微炒搗如泥”。現在臨床應用中一般都是將楮實子干燥后直接用于配方應用，并無上述炮炙方法。宋《急救》也云“去子微炒”。此外，還有熬成膏、搗成泥應用的，如明《醫學》“一斗，水二斗，熬成膏子”。宋《圣惠方》“搗如泥。”4.化學成分研究構樹及楮實的化學成分研究甚少，就目前其的化學研究表明果實含皂式0.5％～1％、對-香豆酸、維生素B、C、胡蘿卜素、環木波羅烯醇(cycloartenol)以有及黃酮醇色素類成分，種子油含飽和脂肪酸、油酸、亞油酸等。楮白皮含鞣質、異葉波羅密素(isocycloheterophylin)。構樹莖含鞣質、木質素(lignin)。從構樹的莖皮有及根皮中還分得了數種異戊二烯黃酮醇類化合物構樹醇E(broussoflavonolE，[8，2’，6-tri-(3，3-dimethylallyl)-5，7，3’，4’-tetrahydroxy-flavol])、構樹醇F(broussoflavonolF，[8，3’-di-(3，3-dimethylallyl)-5，7，4’-trihydroxyflavol])、鯊烯(squalene)、二十八-1-醇(octacosan-1-ol)、二十四酸(lignocericacid)、4’-羥基-順-肉桂酸二十八碳酯(4’-hydroxy-cis-cinnamicacidoctacosylester)以及(-)marmesin(4’-hydroxy-trans-cinnamicacidtetracosyl，hexacosylandoctacosylesters的混合物)、broussonauroneA[5-(2，2-dimethylallyl)-6，3’，4’-trihydrooxyaurone]，broussoflavanA，butyrospermolacetate，erythrinasinatekazinolsAandB，broussochalconesAandB。另日本學者羽野芳生等從構樹根皮中分離出3種新黃酮衍生物構樹黃酮(broussoflavoneA～C)，從根皮的正己烷提取物中得到4種新的酚性成分構樹酚A～D(kazinolA～D)。構樹葉含有豐富的微量元素，尤以鐵、錳、鋅的含量較高，并含粗蛋白、粗脂肪、各種氨基酸。其中氨基酸的含量苷氨酸約占干物質的1.27％，胱氨酸1.12％，亮氨酸1.09％，其它還有蘇氨酸、絲氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸等。韓國有人對小構樹果實的揮發性成分及脂肪酸成分進行了分析，揮發油中含有41種成分，包括4-碳(2.4)、7aldehydes(20％)、3ketones(1.0％)、7pterpenes(18.0％)、8acid(42％)、4alcs(4.2％)、5phenols(9.8％)。脂肪酸的主要組成為linoleicacid19.61％、oleicacid3.52％、palmiticacid3.40％、stearicacid0.85％、linolenicacid0.39％。并對其果實的游離糖、氨基酸、有機酸、微量元素等進行了分析。日本學者還對小構樹的糖類成分隨生長時間變化的分析，其中glucose為主要的糖類，其含量生長時間迅速提高，而frucose、sucrose增長較慢。Titratableacidity則在下降。多酚類，主要是assocd.tannins也在下降。L-ascorbicacid及totalascorbicacid增加。Dehydro-L-ascorbicacid則有波動。在成熟小構樹果實中，L-ascorbicacid的含量較高，為44mg％，totalascorbicacid則為61mg％。5.藥理作用研究5.1促進記憶作用戴新民等報道，采用復雜食餌迷宮法對100％諸實液和50％楮實液進行觀察，結果表明，楮實液普遍有縮短小鼠走迷宮取食所需時間，減少錯誤次數的作用趨勢，用藥1天(簡稱d)有效，4d、5d有顯著的效果。認為楮實對學習記憶影響，可能是特異性作用記憶過程本身，即作用于與學習記憶有關的腦機能部位，也可能通過非待異性改變機體機能狀態。表明楮實液對正常小鼠的學習和記憶有顯著的促進作用。采用一次訓練被動回避性反應一跳臺法，用楮實對四種化學藥品所致記憶障礙的改善試驗，結果表明，東莨菪堿引起的記憶障礙模型與老年性健忘癥非常相似，楮實能有效地拮抗東莨菪堿阻抑小鼠的記憶獲得，表明可能直接影響神經介質而發揮作用。50％楮實液對氯霉素造成的記憶鞏固缺損有明顯作用，實驗結果表明能使小鼠測驗時的錯誤次數顯著減少，潛伏期顯著延長。推斷楮實除能改善機體的神經機能狀態外，也許還通過影響腦內蛋白質的合成而發揮對記憶的良好作用。楮實對低濃度乙醇造成的記憶再缺損有顯著的拮抗作用。楮實對亞硝酸鈉中毒缺氧也有明顯的保護作用，對亞硝酸鈉造成的記憶鞏固不良有明顯的改善作用，表明楮實對小鼠學習和記憶的促進與提高機體耐缺氧能力、改善腦部氧代謝、促進需氧代材等多種途徑有關。5.2增強免疫作用李瑞荃等以主含楮實的補腎復方“益視片”對實驗性“腎陽虛”大鼠紅細胞免疫功能的影響結果顯示與正常對照組比較，病理對照組大鼠紅細胞C3b受體花環率明顯下降(P≤0.05，紅細胞免疫復合物花環率明顯上升(P≤0.01，表明實驗性“腎陽虛”大鼠紅細胞免疫功能低下。與病理對照組比較，“益視片”治療組大鼠紅細胞C3b受體花環率明顯升高(P≤0.05，紅細胞免疫復合物花環率明顯下降(P≤0.05，提示以楮實為主藥的補腎復方“益視片”具有提高實驗性“腎陽虛”大鼠紅細胞免疫功能的作用。5.3抗菌作用楮樹75％乙醇提取液體外對紅色毛癬菌、堇色毛癬菌和鐵色毛癬菌有抑制作用。平板打洞法表明，其枝、葉等的1∶1煎劑，對金黃色辮繅球菌、大腸桿菌和綠膿桿菌有抑制作用。另外從構樹切口木質部長出棕色組織的丙酮提取物也示有抗真菌作用。5.4降血脂作用張尊祥等采用生化分析法，測定老年癡呆患者血液中過氧化脂質(簡稱LPO)、超氧化物歧酶(簡稱SOD))、總膽固醇(簡稱Tch)、甘油三醇(簡稱TG)和高密度脂蛋白(簡稱HDL)的水平，并與吡拉西坦組、對照組和用藥前比較，結果顯示血清中LPO、TC和TG水平有顯著下降(P≤0.05，而SOD和HDL水平顯著升高，楮實可能通過改變老年癡呆患者血液中的某些生化水平，通過提高血中HDL水平和體內SOD活性，直接淬滅體內過多的LPO，降低血中TC和TG水平，使老年癡呆患者病情得到緩解。5.5抗氧化作用構樹葉提取物表明具有顯著的抗氧化作用。6.楮實的臨床應用研究6.1治療老年癡呆戴新民等報道用楮實治療56例老年癡呆認知、生活自理能力及腦電圖變化情況，并與15例吡拉西坦(腦復康)組比較，療效標準以認知功能評定量表提高率及臨床療效綜合評定。結果對智力影響，楮實組總有效率為78.8％，吐拉西坦組為13.3％，有非常顯著性差異；對生活自理能力楮實組總有效率為57.66％，吡拉西坦組未產生明顯效果；楮實對腦電圖異常從69.7％下降至42.44％，吡拉西坦組對腦電圖異常率從66.66％下降至60.0％。說明楮實組的抗老年癡呆作用要強于吡拉西坦組。6.2治療肝炎周德華用楮實子30～45g入煎劑，補脾腎而不溫，利尿而不傷正，能軟堅散瘀，治療黃疸型肝炎有特殊療效。趙新敏等用楮實、北沙參、生熟地等配伍治療肝炎后肝硬化屬肝腎陰虛癥50例，治療3個月，總有效率88％，HBSAg轉陰率為67.7％。江楊清等伍用楮實等清肝膽濕熱，養陰利水，治療因黃疸半年，伴肝大腹水，發燒23d入院的患者。101d后，復查肝功能正常，血清膽紅素0.8mg％。金實等報道了用楮實配伍成“扶正消使湯”治療陰虛明顯的肝硬化腹水65冽，總有效率90.7％，腹圍平均縮小7.8cm，SGPT、TTT、A、G治療前后均有非常顯著性差異(P＜0.01，MAO有顯著性差異(P＜0.01)。季泉盛等治療熱毒瘀絡型的肝硬腹水37例，用楮實、桅子、大黃等伍用，顯效27例，好轉6例，無效4例。此外還有報道楮實配伍各種中藥對慢性活動性肝炎、肝腫大、遷延性肝炎都取得了良好的效果。6.3治療腎病周仲瑛等用楮實子補益肝腎，調整內分泌失調，取其補陰氣，助陽氣，利水之功，治療更年期面浮脛腫有特殊效果，并認為楮實子補肝腎之功與枸杞子相仿，利水消腫與澤瀉相似，兼有二者之長而無助水傷陰之弊，治陰虧水腫收效甚佳，故稱之為扶正利水之效。武志宏伍用諸實子、熟地、山茱肉等組成健腎丸防治腎病復發，賴祥林等用楮實、茯苓、金櫻子、車前子等治療慢性腎炎用麻腎氣虛型患者，藍華生等以健運脾胃為主，采用黃芪伍用楮實子等治療慢性腎功衰竭兼水腫者都有一定的效果。6.4治療眼科疾病楊元璋等用楮實子為主藥制成“陳氏駐景九”，取其補養肝腎之功治療中心性視網膜炎，效果滿意，治療多例均使視力恢復正常。王明芳等伍用楮實等治眼底出血也取得了一定療效。此外對肝腎不足型角膜炎翳陷、變性近視、多種老年癡呆等疾患、青少年近視、眼底水腫而體虛者、肝腎不足型中心性漿液性脈絡膜視網膜病變、缺血性視乳頭病變及孔源性視網膜脫離復位術后諸證都取得了療效。6.5治療不孕不育朱明達報道了應用楮實子研制“還少丹”加味治療男性不育癥41例，其中包括陽萎、早泄、滑精、不射精和精子異常各類患者。結果痊愈57例，總有效率為89.8％。用楮實子、菟絲子、枸杞子等組成的“生精助育湯”治療男性不育也有較好效果。另外，以楮實子、益母草、女貞子等為基本方從肝腎論治，對不孕癥多有效果。6.6其它應用唐幼麟等用威靈仙與楮實子各等量，組成“化鐵丸”，用楮實子、茯苓、公丁香三味組成“楮桃丸”，治療晚期血吸蟲病肝脾腫大伴發輕度腹水129例，追蹤觀察表明，有80％以上的肝脾腫大有不同程度縮小，體征、體力也得到改善。江克明等報道用楮實配丹參取其補腎納氣之功治老年早博如高血壓心臟病早博和肺原性心臟病早博。許繼平等報道伍用豬實擬方“扶肺煎”治療中、晚期肺癌63例，結果對患者低下的B淋轉、T淋轉、C3均有明顯的提高作用(P＜0.01、P＜0.05)，并證明存活率較化療組延長。姚天源用鹿角霜、楮實子、鹿蹄草等制“補腎通痹湯”治療肥大性腰椎炎280例，結果痊愈162例，顯效81例，有效32例，總有效率98.2％。樊瑩介紹了周仲瑛用楮實子治療屬陰精虧損、體虛者的震顫麻痹，取得較為理想的臨床效果。(二)老年癡呆癥的研究進展1、概述癡呆癥包括阿爾茨海默癥(Alzheimer’sDisease，或稱阿爾茲海默癥，簡稱AD)、多重梗塞型癡呆(MultimfarctDementia)、酒精性癡呆(AlcoholicDementia)及正常腦壓水腦癥(NormalPressureHychocephalus)。AD是一種慢性原發、進行性腦變性疾病，是發生于老年期或老年前期的一種進行性的神經退行性疾病，是進入暮年后的一種常見病態反應，屬于非正常衰老狀態的早老性癡呆病癥。由于AD好發病于60歲以上老年人，所以習慣被稱為老年癡呆癥或早老性癡呆癥。AD以記憶減退、認知障礙，行為異常和語言能力喪失位特征，主要表現為大腦皮層獲得性高級功能的全面障礙和認知功能明顯受損，腦功能退化衰亡，即記憶功能迅速衰減及識別能力障礙，并伴有行為或人格方面的改變。該類疾病病程一般較長，約為3～20年。對AD患者常年的護理費用是巨大的，不僅對整個社會的醫療保障系統有極大影響，對中國未來社會的小家庭模式也是極大的挑戰。因此，其發生給社會、家庭均帶來了沉重的經濟負擔和精神負擔，也給患者自身帶來極大的痛苦。目前，該疾病仍是全球較為棘手的病癥之一，積極研究開發新的治療方法是一件刻不容緩的事情。2、病理表現及發病機制AD的主要病理表現是在前腦基底、海馬和大腦皮層細胞外神經炎斑的形成，細胞內神經纖維纏結的出現以及神經細胞和突觸數目的減少。斑點主要由淀粉樣前體蛋白(簡稱APP)的蛋白水解產物β淀粉樣蛋白(簡稱Aβ)聚集組成。在正常情況下，APP水解產物是可溶性的Aβ40，而在病理條件下，APP水解產物是長的易形成纖維的Aβ1-42，它先以一種未成熟的、非纖維狀的分散的斑點形式存在，最終經過構象改變，聚合成一種有毒的纖維狀物質，即形成斑點。神經纖維纏結主要存在于錐狀神經元的胞內和異常的神經軸突中，為一非水溶性結構，其主要組成為直徑10nm的雙螺旋纖維結構(簡稱PHF)，主要成分是一種微管結合蛋白，即tau蛋白，正常的tau蛋白能穩定微管蛋白的相互作用，而PHFs中的tau蛋白則以超磷酸化的形式存在。AD的病因學復雜，目前主要有兩種假說tau蛋白假說和淀粉樣蛋白假說。tau蛋白假說的主要論點是由于tau蛋白的超磷酸化導致微管蛋白的不穩定，引起高爾基體結構發生改變，從而影響APP的代謝，產生過量的Aβ。該假說還未在細胞或者動物個體水平得到證實。淀粉樣蛋白假說的主要論點是在細胞外神經病變發生的周圍淀粉樣蛋白的聚集，導致神經炎斑的形成和隨后神經纖維纏結的形成。因此，淀粉樣蛋白是AD病理鏈形成的起因。支持淀粉樣蛋白假說的證據很廣泛。在AD病人中，對神經元的功能缺失和死亡起關鍵警示作用的是APP的蛋白水解過程，由此導致了Aβ的產生增加，并在大腦中以神經毒性形式聚集。Aβ是一種含有40～43個氨基酸的蛋白結構，一部分嵌在細胞膜內，另一部分則裸露在細胞外。Aβ蛋白的前身是淀粉樣前體蛋白(簡稱APP)，共長695～770個氨基酸，其絕大部分裸露在細胞外，一小部分嵌在細胞膜內及細胞質中。能夠切除APP的3種酶是α分泌酶、β分泌酶(beta-siteAPP-cleavingenzyme，簡稱BACE)及γ分泌酶。Aβ的形成需要APP在β分泌酶作用下斷裂形成N端的Aβ和在γ分泌酶作用下斷裂形成C端的Aβ。α分泌酶能夠在Aβ內部斷裂APP，從而阻礙了Aβ的形成。由α分泌酶及γ分泌酶切除之產物則比Aβ小一點，稱為P3蛋白。Aβ及P3皆會自細胞膜上游離出去，其中游離的Aβ又會自行凝聚成團，形成所謂的斑點。以神經退行級聯的特殊位點為靶點的藥物正在研發中，由于在AD病理形成過程中，從APP轉化成神經毒性的Aβ形式是一個決定性事件，研發能夠阻斷β分泌酶或γ分泌酶的藥物是一個熱點。能夠降低Aβ生成的特殊的γ分泌酶抑制劑被開發出來，但由于它有阻斷γ分泌酶斷裂Notch和其它蛋白底物的副作用，它在人體的應用并不可行。BACE缺乏的小鼠能降低Aβ的生成而無明顯異常生理現象，證實BACE抑制劑能夠減少Aβ生成而無明顯副作用，但是有可能存在除APP外的其他的有重要生理學意義的BACE的底物，抑制它們的形成可能引起其他嚴重問題。盡管在抑制β分泌酶和γ分泌酶方面作了許多努力，直接作用于α分泌酶卻被忽視。目前極少有人考慮以α分泌酶作為藥物靶點，α分泌酶在Aβ序列內部斷裂，產生一條大的、可溶性的細胞外片段(簡稱sAPPa)和一條小的細胞內片段(簡稱C83)，這些片段并未表現出病理毒性，并且sAPPa還可能具有神經保護性能。由于α分泌酶和β分泌酶競爭APP，促進α分泌酶能夠導致減少的病理性片段。理論上，直接或間接的α分泌酶的促進劑都有利于AD治療。3、流行病學情況隨著發達國家和發展中國家人均壽命的提高，患癡呆癥的老年人數迅速增加。在所有的癡呆癥中，以AD所占的比例最高(約50％～60％)。據資料報道，隨著年齡的增長，在人體組織老化和基因的影響下，癡呆現象的發生率不斷升高；其中，AD隨年老急劇上升，從60歲起，每4年～5年上升一倍；AD的發病率在65歲左右的老年人中約占10％，在85歲以上的老年人中約占47％，已經成為人類的第四號殺手。過去學術界曾認為中國是AD低危險性國家，然而，早前于安徽屯溪召開的第二屆中國老年人癡呆癥和抑郁癥學術研討會暨國際老年癡呆學術研討會上，這一觀點受到挑戰。有5份研究報告表明，中國也是AD高危國家，這次會議報道的大量研究成果還表明，中國對AD的研究正在迅速接近國際先進水平。目前全球的AD病人估計在1200萬左右，中國現有老年癡呆患者大約為300萬～400萬，且呈迅速上升趨勢，確診后一般約7年～9年內死亡。有資料表明，中國60歲以上人口早在1998年已達1.2億，并以年均3.2％的速度遞增，大大高于人口增長速度。75歲以上的老人有2000萬，80歲以上老人有800萬，并以年均5.4％的速度增加，下世紀中葉可達4億左右，將成為世界上老齡人口最多的國家。1988年中美上海調查研究表明，中國65歲以上老年人的癡呆發生率為4.6％，其中AD的比重為63％，多發梗塞性癡呆為28％，腦組織損傷后遺癥、化學藥物中毒以及神經系統失調或營養缺乏導致的癡呆約占10％。上海的流行病學調查顯示，中國55歲、65歲以上癡呆的患病率分別為2.57％和4.6％。北京老年病醫療研究中心對北京地區2788名60歲以上老人的調查發現，有208名老人患有癡呆癥，患病率達7.5％。其中女性病人139人，患病率達9.7％，顯著高于男性的5.8％。他們的研究還表明，高齡、低教育水平、居住在農村是老年癡呆癥的高危因素。而解放軍總醫院對1728名離退休老干部的調查表明，有癡呆家庭史、“文革”中受迫害、電磁場暴露、腦外傷亦是老年癡呆癥的危險因素。在廣州城區75歲以上老年人癡呆患病率的調查中，AD患病率為7.49％。4、老年癡呆癥的治療藥物AD是老年人的常見病之一，是一種漸進性的神經功能退化性失調癥，目前本病的病因尚未得到充分闡明，一直是治療上的一個棘手問題。抗癡呆藥物的研究和開發已引起世界各國醫藥界的高度重視。近年來，隨著對老年人神經生理、生化、藥理等方面研究的不斷深入，導致相關藥物的開發研究不斷取得進展。2001年有1270多種產品投放市場，這些產品中90％是80年代發現、90年代研究與開發成功的，此類藥物開發的新產品數目超過了任何其它治療類藥物開發的數目。經過近10年的臨床表明，乙酰膽堿酯酶(簡稱AChE)抑制劑對AD具有一定的治療作用，其主要藥物他克林、利斯的明、多奈哌齊、加蘭他敏已是這一領域中的代表性品種，從而也推動了癡呆治療藥品市場的發展進程。(1)腦代謝激動劑研究發現，老年癡呆癥患者存在有糖代謝及核酸、蛋白質、脂質等代謝系統障礙，同時其腦血流量及耗氧量明顯低于同齡正常人。因此，腦代謝激動劑和腦循環改善劑，特別是具有腦血管擴張作用的腦代謝激動劑就成為治療本病可供選用的藥物。此類藥物有吡拉西坦、腦復康、吡硫醇、腦復新、氫化麥角堿、喜得鎮、都可喜、長春胺、長效長春胺、長春乙酯、尼莫地平、尼莫通、桂利嗪、環扁桃酯、氯酯醒、己酮可可堿、巡能泰、麥角溴煙酯等。這些藥物對老年癡呆癥的某些癥狀如記憶力減退、適應環境能力降低等，有程度不同的改善作用。(2)擬膽堿藥現已知腦內乙酰膽堿含量與記憶密切相關，老年或癡呆病人腦內乙酰膽堿量減少，補充膽堿類藥物能改善其記憶和思維能力。但直接給予膽堿或卵磷脂并不能使乙酰膽堿增加。有人試以膽堿或卵磷脂與能通過血腦屏障的膽堿酯酶抑制劑毒扁豆堿合用于本病患者，可使其記憶力有提高，而單獨給予卵磷脂效果不明顯。另有人單用毒扁豆堿給本病患者靜注，記憶測定成績較安慰劑提高約20％，并發現對行為障礙也有效。研究認為，膽堿酯酶抑制劑可延遲乙酰膽堿的代謝分解，從而延長突觸后受體的興奮。另外，國內研制的哈伯因(石杉堿甲)，系中國學者從石杉屬植物千層塔中分離到的一種新生物堿，藥理實驗證明，本品具有很強的擬膽堿活性，是一種高效、可逆的膽堿酯酶抑制劑。(3)乙酰膽堿酯酶抑制劑(AcetylcholinesteraseInhibitors)乙酰膽堿酯酶抑制劑包括毒扁豆堿(商品名Synapton，Forest實驗室生產)、四氫氨基吖啶(他克林，商品名Cognex，Parke-Davis公司生產)、donepezil(商品名Aricept，輝瑞/衛材公司生產)、metrifonate(拜耳公司生產)和rivastigmine(商品名Exelon，諾華公司生產)。這些化合物通過抑制乙酰膽堿酯酶在神經腱內濃縮乙酰膽堿，并能持續更長的作用時間。四氫氨基吖啶是第一個通過FDA并在臨床上治療阿爾茨海默病的膽堿酯酶抑制劑，但規定仍需作改進。該品生物利用度要低于rivastigmine和donepezil，并有較大的副作用。多奈哌齊(Donopozil)是第二代也是第二個被美國FDA特許用于治療阿爾默海茨病(老年癡呆)的膽堿酯酶抑制劑，于1997年被FDA批準用于臨床，可促進輕、中度老年癡呆病人的認知能力以及改善病人的精神狀態和保持腦功能活性等作用。與第一代膽堿酯酶抑制劑相比，該品有多項優點(1)作用時間長，每日只須口服一次；(2)藥效強、療效高；(3)安全性高、選擇性高，藥物不良反應小。目前該品已進入中國銷售，國內也有廠家生產。SanochemiaPharmazeutikaAG公司(維也納、奧地利)宣布第一個在歐洲上市的乙酰膽堿酯酶抑制劑-Reminyl(加蘭他敏)。該品被批準在瑞典上市，并報送歐盟以期獲準進入歐洲其它市場。麥的NeuroSearch公司最近利用NS2330進行臨床研究開發。NS2330增加多巴胺和去甲腎上腺素的活性，同時也激活其抑制機制以刺激乙酰膽堿在大腦皮層(包括感知部位)的釋放。這樣所有三個神經傳遞素的功能都將受到阿爾茨海默病的影響。該公司希望NS2330能夠具有較好的治療效果，目前該藥的I期臨床工作已經完成，FDA也同意該公司繼續II期臨床工作。其它用來研究的化合物還包括xanomeline(諾和諾德/禮來公司生產)、besperidine(赫司特公司生產)和talsaclidine(勃林格殷格翰/法瑪西亞普強公司)。①他克林他克林的化學名為四氫氨基吖啶(簡稱THA)，商品名Cognex，該藥是美國華納—蘭伯特公司開發并第一個上市的中樞系統的非競爭、可逆性膽堿酯酶抑制劑，1993年獲得FDA批準后首先在美國上市，是改善AD認知癥新藥和老年益智藥物，同年在英國、法國、加拿大等國上市，其化合物專利于1996年到期，目前市場上主要是美國派德—戴維斯的產品。他克林尤其對女性AD癥具有顯著的療效，與卵磷脂合用可獲得理想的效果，能明顯改善患者的記憶力，因此他克林已被認為是治療、預防早老性癡呆僅有的幾種藥物之一。他克林的不足之處是對肝功能及轉氨酶指數有較大影響，制約了市場的開發，其銷售額的增長也遠不如其它AD藥物。經過進一步的研究，在他克林母核的基礎上加成篩選，由德國赫斯特魯塞爾公司研制出維那克林。該藥是他克林1位羥基衍生物，其藥物作用機制得到相應的改善，但仍有一些不良反應，隨著醫學的發展，將被新一代乙酰膽堿酯酶抑制劑所替代。②多奈哌齊多奈哌齊是具有高度選擇性、可逆性治療AD的藥物，為第二代中樞性乙酰膽堿酯酶抑制劑，是日本衛材制藥公司開發的藥物，1996年11月25日獲得FDA的特許批準用于臨床，商品名安理申。1997年初首先在美國上市，由衛材/輝瑞共同開發全球市場，1999年10月安理申在中國上市，目前已形成了世界50多個國家地區的銷售網絡。多奈哌齊是第二個獲準治療老年癡呆癥的藥物，其最大優勢是治療達標劑量小、毒副作用低，耐受性好。專家普遍認為，該藥在AD治療藥物中處于領先地位，在四個主要品種中占據了60％的市場份額，預計這一優勢將延續到能夠對疾病治療產生重要影響的新藥問世為止。據PharmaBusiness雜志報道在2000年全球最暢銷500種藥品中，日本衛材公司銷售額為4.31億美元，輝瑞公司的銷售額為1.19億美元，分別比上一年增長了27.3％和30.8％。2001年多奈哌齊在全球排第101名，銷售額合計約6.83億美元，2002年在全球超過了1100億日元，已是AD市場中的佼佼者。2001年中國醫藥研究開發中心、重慶桑田藥業開發了多奈哌齊原料藥及其片劑產品，國家藥品監督管理局批準其以四類新藥生產。③利斯的明利斯的明是氨基酸甲酸類腦選擇性膽堿酯酶抑制劑，屬于該類藥的第二代產品，由瑞士諾華制藥英國公司開發，商品名艾斯能，1997年12月首先在瑞士上市，次年在英國上市。2000年4月21日獲得FDA批準，同年6月底在美國上市，從而擴展了阿爾茨海默癥治療藥物市場的格局。研究結果顯示該藥雖然半衰期相對較短，但對膽堿酯酶抑制作用可達10小時，該藥不經肝臟及P450代謝，對輕、中度早老性癡呆癥耐受性較好，同時具有抑制腦內的丁酰膽堿酯酶作用，在歐洲、美國等45個國家進行的一項前瞻性、隨機多中心雙盲研究中獲得較高的評價。由于利斯的明在藥物市場中獲得越來越多的份額，2000年的銷售額比上一年增長了83％，為1.195億美元，2001年利斯的明在全球銷售額增加101％，已達2.4億美元。④加蘭他敏加蘭他敏屬于第二代乙酰膽堿酯酶抑制劑藥物，其藥物成份與歐洲山區水仙花鱗莖提取的生物堿相同，該植物藥在一些國家、地區已經有過30多年的臨床應用，用于治療逆轉神經肌肉阻滯、重癥肌無力和幼兒腦型麻痹癥等。加蘭他敏是希雷與強生公司合作開發的化學合成藥物，制劑有片劑、膠囊、口服液等，臨床用于改善AD患者總體功能。該藥具有雙重作用機制，能較好的刺激和抑制乙酰膽堿酯酶，并且能夠調節腦內的煙堿受體位點，可顯著改善輕、中度早老性癡呆病人的認知功能，延緩腦細胞功能減退的進程。加蘭他敏于2000年7月被歐盟批準后在英國、愛爾蘭首次上市，2001年獲美國FDA許可用于治療阿爾茨海默癥，現已在25個國家上市。希雷公司負責在英國、愛爾蘭的銷售，強生公司負責美國和其它歐洲國家的銷售。國外報道2001年加蘭他敏銷售額為1.36億美元。1998年上海申興制藥廠已生產加蘭他敏原料藥，1999年國家藥品監督管理局批準蘇州第六制藥廠生產四類新藥氫溴酸加蘭他敏膠囊，2001年上海申興產量同比增長3倍，年產量達到30kg。該藥進入市場后，臨床推廣長足邁進，2000年已在中國主要城市重點醫院抗癡呆藥品中嶄露頭角。近幾年，乙酰膽堿脂酶抑制劑已成為AD的一線治療藥物，確認了其有效緩解認知功能障礙的地位，產品銷售量占據了抗癡呆藥物中的最大份額，研究表明石杉堿甲、毒扁豆堿、美曲磷脂對阿爾茨海默癥也有一定的治療作用，中科院上海藥物所開發的石杉堿甲化合物已申請了國際專利，其作用機制正在進行深入的研究，北京四環制藥、寧波立華制藥、上海漢殷藥業和上海醫科大學紅旗藥廠獲得了新藥證書和生產文號。(4)鉀通道阻滯劑研究表明，非選擇性的鉀通道阻滯劑通過延遲去極化和延長突觸前神經末梢的鈣流入引起神經遞質(包括Ach)釋放增加。若要想這類藥物用于治療老年癡呆，則所用藥物應具備能增加乙酰膽堿的釋放而不減少膜磷脂酰膽堿組成的優點，而減少膜磷脂酰膽堿的組成可能是AchE抑制劑存在的副作用。磷脂酰膽堿是膽堿的貯存庫，被神經元用來合成Ach。膜磷脂酰膽堿的損失使乙酰膽堿的合成受到限制，導致膽堿輸出量減少。臨床研究已表明非選擇性鉀通道阻滯劑對改善患者的識別能力僅有中度作用，其作用不強可能是這些藥物的中樞神經系統穿透力低，選擇性差或活性不夠等，有待于進一步研究加以完善。(5)谷氨酸受體調控劑在老年疾呆癥患者的大腦中，皮質皮層和離皮層途徑的錐體細胞發生了神經纖維混亂和退化。據報道，這些錐體細胞以谷氨酸為興奮遞質。這些神經元受損，功能喪失時會導致老年癡呆癥；但若功能過強，則會產生興奮性毒性，引起神經元死亡，造成多種神經退化性疾病。因此，調控退化的谷氨酸神經元的突觸活性有望治療老年癡呆癥。研究表明，直接活化突觸后受體將有利于谷氨酸的傳遞，其部分激動劑具有這樣的優點，即當內源性谷氨酸低于正常水平時起激動劑作用，而當谷氨酸釋放過量時起拮抗劑作用，因此，部分激動劑會對興奮毒性情況產生神經保護作用。已有報道的藥物如美金剛胺(memantine)，當谷氨酸以病理量釋放時，美金剛胺會減少谷氨酸的神經毒性作用；當谷氨酸釋放過少時，美金剛胺可以改善記憶過程所需谷氨酸的傳遞，臨床研究表明，美金剛胺用于老年癡呆癥患者具有較好的耐受性，在精神病理學和行為測定中產生溫和的有統計學意義的顯著改善。(6)5-羥色胺3受體拮抗劑5-羥色胺3(簡稱5-HT3)受體拮抗劑原用于止吐，現有研究根據5-HT3受體在大腦中的分布狀態，推測此類拮抗劑應有其它中樞神經系統的作用。如5-HT3拮抗劑昂丹司瓊樞復寧能改善膽堿能神經功能正常和不足的動物如鼠、狨等的識別能力；在50歲以上與老年有關的記憶力受損(AAMI)病人的臨床試驗中，昂丹司瓊能使相當于喪失6年的記憶力得到改善。因此，昂丹司瓊及其他5-HT3受體拮抗劑(托烷司瓊、格拉司瓊等有可能給老年癡呆患者帶來福音。(7)天然藥物方面的研究現今很多醫藥公司還把目光移向天然藥物，試圖從中開發出有效的治療藥物。在這方面同樣也取得了一定的進展。①阿樸脂蛋白E4(ApoE4)眾所周知，阿爾茨海默病的發病情況與遺傳基因有著較為緊密的聯系，阿樸脂蛋白E4ApoE4是特別值得讓大家去注意并朝著治療和預防阿爾茨海默病的方向進行研究。在藥物開發中，ApoE4已經進行過人體藥物臨床試驗，并極有可能成為療效比較確切的藥品。②β-淀粉素(體)(Beta-amyloid)β-淀粉素是一種不能溶解的多肽。該種物質能夠有效防止激烈氧化過程中導致的二乙基溴乙酰胺的破壞。在從事阿爾茨海默病研究理論中就是利用β-淀粉素限制自由基的產生以及清除自由基，以防止自由基所帶來的損害。這種類型的化合物包括idebenone(武田公司、Osaka日本)，該化合物既是一種自由基的清道夫也是某種神經增長因子的刺激物。早期研究表明，idebenone能有效治療中度癡呆癥。盡管葛蘭素威康公司(英國)和美國家用產品公司已經在少數一些國家上市，但它已經從日本退出市場，而且其III期臨床試驗已經被停止。(8)其它類型藥物的研究進展2000年上半年，一些研究表明，雌激素替代療法可以較明顯地延緩婦女阿爾茨海默病的發作，并能降低阿爾茨海默病的病情嚴重化。個別臨床研究也發現雌激素治療能夠提高感知度。雌激素對抗氧劑和抗炎藥的作用能力可以減少發病的機率，推動乙酰膽堿的產生、促進神經細胞的生長和存活。2000年年中，日本的ToyamaChemical公司期望開始在英國進行T-588的II期臨床研究，并能在美國進行較早的試驗。在紐約大學的合作下，公司發現T-588可以保護大腦神經細胞。日本藤澤制藥公司的FK-960在日本和美國進行。該藥能夠提高感知度，具有新的作用機制。在最近有關研究報道是表明，咀嚼可以防止上年紀的人記憶力衰退，但其作用機制現在仍然沒有明確。研究人員通過研究小鼠的遺傳改變來研究人體老化的跡象。實驗表明，拔除牙齒以防止咀嚼的小鼠的記憶力要遜于正常對照小組。此外，研究人員還研究了咀嚼時大腦的活動情況，并發現下巴的活動可以增強腦部海馬區的信號。來自肯塔基州立大學的研究人員發現減少食用量可以保護大腦避免因年齡引起紊亂，這種紊亂類似于阿爾茨海默病。最近出版的研究論文表明，通過喂養減少食物量的小鼠，研究人員發現它們大腦的損傷能減少。對熱量攝入量和人體神經變性疾病的研究還沒有開始，但有一些相關性研究顯示，相比于美國和加拿大，中國和日本由于攝入較少的熱量，因此相應的阿爾茨海默病的發病率也減少。加拿大的神經生物技術公司在2000年上半年宣布了一個較為確切的產品memantine。該產品是一種非競爭性N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)阻斷劑，在美國進行了III期臨床試驗，主要用于治療阿爾茨海默病。5、老年癡呆癥的市場發展前景2000年世界七大藥品市場表明，AD藥品市場已從90年代中期的4億多美元增長了近一倍，2001年全球AD市場價值已近12億美元；國外分析家預測在未來十年內AD患者將會增加到20％左右，AD藥品市場的增長速度將有較大幅度的上升。由于患者的不斷增多，AD治療藥物的市場銷售額也一直在穩步增長。90年代該類藥物已成為暢銷藥物，1995年世界銷售額已達50億美元。21世紀初，該類藥物的銷售額超過了排列在前三位的治療心血管病藥物、治療胃腸道病藥物和抗感染藥物市場的份額，其發展勢頭看好。目前，該類疾病已越來越受到中國國家和社會的高度重視，而且由于該類疾病類似于糖尿病等富貴病，一樣需要長期服用治療藥物，因此其用藥市場隨著人口老齡化而逐漸擴大，市場前景看好。基于此，為及時了解中國治療AD藥物的市場狀況，中國國家食品藥品監督管理局南方醫藥經濟研究所信息中心選取中國六個主要用藥城市(北京、上海、廣州、南京、杭州、成都)的百家抽樣醫院、60名醫生專家和120名消費者，對中國國內老年癡呆癥用藥市場(1999年及2000年)及其主要競爭品種進行了全面的市場調研活動。(1)1999年～2000年中國治療老年癡呆藥物醫院用藥金額情況分析從1999年～2000年六城市(北京、上海、廣州、南京、杭州、成都)抽樣醫院治療老年癡呆癥用藥金額構成情況來看，2000年六城市抽樣醫院銷售總金額較1999年同比增長28.49％。而在治療老年癡呆藥主要品種中，使用金額百分比較大的品種排名依次為吡拉西坦、銀杏葉制劑、氫化麥角堿、阿米三嗪/蘿巴新、阿尼西坦、尼麥角林、胞磷膽堿、石杉堿甲、多奈哌齊、吡硫醇、長春西汀、加蘭他敏、氯酯醒、艾地苯醌。其中前四位品種市場份額(金額百分比)較大。具體品種中，吡拉西坦的市場份額(金額百分比)2000年較1999年上升了8個百分點，仍居首位，金額增長率達55.59％。銀杏葉制劑、氫化麥角堿保持較穩定的市場份額，使用金額都保持一定的增長。使用金額增長較快的品種有石杉堿甲、加蘭他敏，其中加蘭他敏增長幅度最高。阿米三嗪/蘿巴新、阿尼西坦、尼麥角林、胞磷膽堿、長春西汀和吡硫醇總體市場出現萎縮，而艾地苯醌基本退出市場競爭。多奈哌齊由于是較新的品種，在1999年未見銷售，但在2000年市場份額(使用金額百分比)占0.45％，顯示出一定的市場潛力。(2)1999年～2000年中國治療老年癡呆藥物醫院用藥金額走勢分析從1999年～2000年六城市老年癡呆用藥金額走勢情況來看，2000年整體用藥水平要明顯高于1999年整體用藥水平，出現上升趨勢。其中1999年用藥金額高峰期和2000年用藥金額高峰期均出現在二季度(2000年用藥量高峰期是第三季度)，表明在2000年二季度高價品種的使用量相對要高。從六城市用藥情況中可以反映出中國城市的一個用藥趨勢。(3)主要用藥城市醫院用藥情況分析從各品種在各城市的用藥金額排序情況來看，其銷售情況表現得較好的品種主要有銀杏葉制劑、吡拉西坦、氫化麥角堿和阿米三嗪/蘿巴新。其中銀杏葉制劑2000年在上海、廣州、杭州和成都地區排在第一位，在北京地區排名第二，南京地區排名第三，表現得相當好，較1999年有所增長，其幾個主打品牌達納康、銀杏天保、活血寧膠囊、百路達膠囊、天保寧、銀可絡的市場反應有口皆碑；其次表現較好的則為吡拉西坦，該品2000年在北京和南京地區占據第一的位置，在其它幾個城市也是前三名之列，只有在杭州地區較弱(排名第5)；氫化麥角堿總體情況排在第三位，不過2000年排名較1999年排名有所提高。氫化麥角堿在各城市的排名基本保持不變，并在個別城市如上海和成都地區排名上升，而在南京地區排名下降一個位置。(4)其它方面的市場評價隨著治療AD藥物臨床推廣的普及，AD已越來越受到社會和家庭的重視，從調查的醫生信息反饋來看，68％的醫生認為社會大眾已經開始關心和重視AD，與此同時，8.16％的醫生認為市場供給嚴重不足，63.2％的醫生認為市場供給不足。可見，AD用藥市場供給不足，市場仍有空間，有近八成醫生認可市場前景較好。同樣，隨著近年來OTC市場的蓬勃發展，有相當部份品種(口服劑型)也在零售藥店中進行銷售，由于長期服藥的特點，越來越多的患者選擇直接從藥店進行購藥治療。從中國國家藥品監督管理局南方醫藥經濟研究所零售研究部對這類藥品的監測結果顯示，銀杏葉制劑的市場份額(銷售金額百分比)約占市場的4成左右，中成藥較受零售市場的青睞，都可喜(阿米三嗪/蘿巴新)的市場份額約占3成左右，其余品種則占據余下的市場份額。從所調查的消費者情況反映，有67.80％的消費者是從醫院藥房獲得所需藥品的；而有27.97％的消費者直接到藥店購買；4.24％的病患者從所在單位門診部獲得；還有0.85％的病患者到批發商處購買。這表明，目前來說，醫院雖然是老年人用藥的主要銷售渠道，但也可以看出，零售渠道也占有不可忽視的比例。AD的治療占世界藥品市場的第七位，到2005年底價值61億美元。而目前抗AD藥物主要是緩解癥狀，并不遏制病情的發展。因此，研究出一種有效的治療方法來阻止潛在的發病過程是很必要的，所以本發明認為研制用于預防、診斷、檢測、保護和治療AD等方面的產品特別是藥物能夠具有顯著的社會效益和經濟效益。(三)常用中草藥有效成分的提取分離方法1、溶劑提取法(1)原理溶劑提取法是根據中草藥中各種成分在溶劑中的溶解性質，選用對活性成分溶解度大，對不需要溶出成分溶解度小的溶劑，而將有效成分從藥材組織內溶解出來的方法。當溶劑加到中草藥原料(需適當粉碎)中時，溶劑由于擴散、滲透作用逐漸通過細胞壁透入到細胞內，溶解了可溶性物質，而造成細胞內外的濃度差，于是細胞內的濃溶液不斷向外擴散，溶劑又不斷進入藥材組織細胞中，如此多次往返，直至細胞內外溶液濃度達到動態平衡時，將此飽和溶液濾出，繼續多次加入新溶劑，就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出。中草藥成分在溶劑中的溶解度直接與溶劑性質有關。溶劑可分為親水性有機溶劑及親脂性有機溶劑，被溶解物質也有親水性及親脂性的不同。有機化合物分子結構中親水性基團多，其極性大而疏于油；有的親水性基團少，其極性小而疏于水。各類溶劑的性質，同樣也與其分子結構有關。這樣，發明人就可以通過對中草藥成分結構分析，去估計它們的此類性質和選用的溶劑。總的說來，只要中草藥成分的親水性和親脂性與溶劑的此項性質相當，就會在其中有較大的溶解度，即所謂“相似相溶”的規律。這是選擇適當溶劑自中草藥中提取所需要成分的依據之一。(2)溶劑的選擇運用溶劑提取法的關鍵，是選擇適當的溶劑。溶劑選擇適當，就可以比較順利地將需要的成分提取出來。選擇溶劑要注意以下三點①溶劑對有效成分溶解度大，對雜質溶解度小；②溶劑不能與中藥的成分起化學變化；③溶劑要經濟、易得、使用安全等。常見的提取溶劑可分為以下三類①水水是一種強的極性溶劑。中草藥中親水性的成分，如無機鹽、糖類、分子不太大的多糖類、鞣質、氨基酸、蛋白質、有機酸鹽、生物堿鹽及苷類等都能被水溶出。為了增加某些成分的溶解度，也常采用酸水及堿水作為提取溶劑。②親水性的有機溶劑也就是一般所說的與水能混溶的有機溶劑，如乙醇(又稱酒精)、甲醇(又稱木精)、丙酮等，以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比較好，對中草藥細胞的穿透能力較強。親水性的成分除蛋白質、粘液質、果膠、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。難溶于水的親脂性成分，在乙醇中的溶解度也較大。還可以根據被提取物質的性質，采用不同濃度的乙醇進行提取。用乙醇提取比用水量較少，提取時間短，溶解出的水溶性雜質也少。乙醇為有機溶劑，雖易燃，但毒性小，價格便宜，來源方便，有一定設備即可回收反復使用，而且乙醇的提取液不易發霉變質。由于這些原因，用乙醇提取的方法是歷來最常用的方法之一。甲醇的性質和乙醇相似，沸點較低(64℃)，但有毒性，使用時應注意。③親脂性的有機溶劑也就是一般所說的與水不能混溶的有機溶劑，如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等。這些溶劑的選擇性能強，不能或不容易提出親水性雜質。但這類溶劑揮發性大，多易燃(氯仿除外)，一般有毒，價格較貴，設備要求較高，且它們透入植物組織的能力較弱，往往需要長時間反復提取才能提取完全。如果藥材中含有較多的水分，用這類溶劑就很難浸出其有效成分，因此，大量提取中草藥原料時，直接應用這類溶劑有一定的局限性。(3)提取方法用溶劑提取中草藥成分，常用浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法及連續回流提取法等。同時，原料的粉碎度、提取時間、提取溫度、設備條件等因素也都能影響提取效率，必須加以考慮。①浸漬提取法(簡稱浸漬法)浸漬法系將中草藥粉末或碎塊裝入適當的容器中，加入適宜的溶劑(如乙醇、稀醇或水)，浸漬藥材以溶出其中成分的方法。本法比較簡單易行，但浸出率較差，且如用水為溶劑，其提取液易發霉變質，須注意加入適當的防腐劑。②滲漉提取法(簡稱滲漉法)滲漉法是將中草藥粉末裝在滲漉器中，不斷添加新溶劑，使其滲透過藥材，自上而下從滲漉器下部流出浸出液的一種浸出方法。當溶劑滲進藥粉、溶出成分比重加大而向下移動時，上層的溶液或稀浸液便置換其位置，造成良好的濃度差，使擴散能較好地進行，故浸出效果優于浸漬法。但應控制流速，在滲渡過程中隨時自藥面上補充新溶劑，使藥材中有效成分充分浸出為止。或當滲滴液顏色極淺或滲涌液的體積相當于原藥材重的10倍時，便可認為基本上已提取完全。在大量生產中常將收集的稀浸出液作為另一批新原料的溶劑之用。③煎煮提取法(簡稱煎煮法)煎煮法是中國最早使用的傳統的浸出方法。所用容器一般為陶器、砂罐或銅制、搪瓷器皿，不宜用鐵鍋，以免藥液變色。直火加熱時最好時常攪拌，以免局部藥材受熱太高，容易焦糊。有蒸汽加熱設備的藥廠，多采用大反應鍋、大銅鍋、大木桶，或水泥砌的池子中通入蒸汽加熱。還可將數個煎煮器通過管道互相連接，進行連續煎浸。④加熱回流提取法應用有機溶劑加熱提取，需采用回流加熱裝置，以免溶劑揮發損失。小量操作時，可在圓底燒瓶上連接回流冷凝器。瓶內裝藥材約為容量的20％～60％，溶劑浸過藥材表面約1～2cm。在水浴中加熱回流，一般保持沸騰3～6小時，放冷過濾，再在藥渣中加溶劑，作第二、三次加熱回流分別約半小時，或至基本提盡有效成分為止。此法提取效率較冷浸法高，大量生產中多采用連續提取法。⑤連續回流提取法應用揮發性有機溶劑提取中草藥有效成分，不論小型實驗或大型生產，均以連續提取法為好，而且需用溶劑量較少，提取成分也較完全。實驗室常用脂肪提取器或稱索氏提取器。連續提取法，一般需數小時才能提取完全。提取成分受熱時間較長，遇熱不穩定易變化的成分不宜采用此法。2、分離和純化方法上述提取法所得到的中草藥提取液或提取物仍然是混合物，需進一步除去雜質，分離并進行精制。(1)溶劑分離法一般是將上述總提取物，選用三、四種不同極性的溶劑，由低極性到高極性分步進行提取分離。水浸膏或乙醇浸膏常為膠狀物，難以均勻分散在低極性溶劑中，故不能提取完全，可拌入適量惰性填充劑，如硅藻土或纖維粉等，然后低溫或自然干燥，粉碎后，再以選用溶劑依次提取，使總提取物中各組成成分，依其在不同極性溶劑中溶解度的差異而得到分離。利用中草藥化學成分，在不同極性溶劑中的溶解度進行分離純化，是最常用的方法。(2)溶劑萃取法①萃取法溶劑提取萃取法又簡稱萃取法，是利用混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數的不同而達到分離的方法。萃取時如果各成分在溶劑中分配系數相差越大，則分離效率越高；如果在水提取液中的有效成分是親脂性的物質，一般多用親脂性有機溶劑，如苯、氯仿或乙醚進行萃取，如果有效成分是偏于親水性的物質，在親脂性溶劑中難溶解，就需要改用弱親脂性的溶劑，例如乙酸乙酯、丁醇等。還可以在氯仿、乙醚中加入適量乙醇或甲醇以增大其親水性。提取黃酮類成分時，多用乙酸乙脂和水萃取。提取親水性強的皂苷則多選用正丁醇、異戊醇和水作萃取。不過，一般有機溶劑親水性越大，與水作萃取的效果就越不好，因為能使較多的親水性雜質伴隨而出，對有效成分進一步精制影響很大。②逆流連續萃取法是一種連續的溶劑萃取法。其裝置可具有一根、數根或更多的萃取管。管內用小瓷圈或小的不銹鋼絲圈填充，以增加溶劑萃取時的接觸面。如果一種中草藥的水浸液需要用比水輕的苯、乙酸乙酯等進行萃取，則需將水提濃縮液裝在萃取管內，而苯、乙酸乙酯貯于高位容器內。萃取是否完全，可取樣品用薄層層析、紙層析及顯色反應或沉淀反應進行檢查。③逆流分配法逆流分配法又稱逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法。逆流分配法與溶劑逆流萃取法原理一致，但加樣量一定，并不斷在一定容量的溶劑中，經多次移位萃取分配而達到混合物的分離。④液滴逆流分配法液滴逆流分配法又稱液滴逆流層析法。為近年來在逆流分配法基礎上改進的溶劑萃取法。對溶劑系統的選擇基本同逆流分配法，但要求能在短時間內分離成，并可生成有效的液滴。由于移動相形成液滴，在細的分配萃取管中與固定相有效地接觸、摩擦不斷形成新的表面，促進溶質在溶劑中的分配，故其分離效果往往比逆流分配法好。(3)大孔吸附樹脂法大孔吸附樹脂是20世紀60年代發展起來的一類有機高聚物吸附劑，具有良好的吸附性能，近十余年來逐漸被應用于中草藥化學成分的提取分離和中藥新藥的開發研制。大孔吸附樹脂為吸附和篩選原理相結合的分離材料。它的吸附性是由于范德華引力或生成氫鍵的結果。篩選原理是由于其本身多孔性結構所決定。由于吸附和篩選原理，有機化合物根據吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附樹脂上經一定的溶劑洗脫而分開。這使得有機化合物尤其是水溶性化合物的提純得以大大簡化。大孔吸附樹脂的骨架由苯乙烯和二乙烯苯縮聚而生成，由于改性劑的加入，大孔吸附樹脂的極性發生改變，按照樹脂的表面性質，吸附樹脂一般分為非極性、中極性和極性三類。非極性吸附樹脂是由偶極矩很小的單體聚合物制得的不帶任何功能基的吸附樹脂。典型的例子是苯乙烯-二乙烯苯體系的吸附樹脂，如D101、XAD-1、DiaionHP-10大孔吸附樹脂。中極性吸附樹脂指含酯基的吸附樹脂，如丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯與雙甲基丙烯酸酯等交聯的一類共聚物。它是在非極性大孔吸附樹脂的基礎上，加入丙烯酸甲酯或丙烯腈縮聚而成，如中國國內經常使用的AB-8大孔吸附樹脂。極性吸附樹脂是指含酰胺基、腈基、酚羥基等含氮、氧、硫極性功能基的吸附樹脂。此外，有時把含氮、氧、硫等配體基團的離子交換樹脂稱作強極性吸附樹脂，強極性吸附樹脂與離子交換樹脂的界限很難區別。極性大孔吸附樹脂可以由甲基丙烯酸甲酯、丙烯酰胺或亞砜類縮聚而成，如日本三菱化工的DiaionHP2MG、美國Rohm-hass公司的XAD-10，XAD-9大孔吸附樹脂。與活性炭和其它吸附劑相比，大孔吸附樹脂具有很多的優點，如對某種物質的吸附選擇性較高；物理化學穩定性和機械強度較好；品種規格較多，可根據需要改變樹脂物理或化學結構；吸附樹脂一般為球狀顆粒，流體阻力較小等等。因而被廣泛應用于化工、醫藥等領域，近年來關于大孔吸附樹脂在天然產物提取分離中的應用研究報道越來越多。大孔吸附樹脂對中草藥化學成分如生物堿、黃酮、皂苷、香豆素及其他一些苷類成分都有一定的吸附作用。對糖的吸附能力很差，對色素的吸附能力較強。(4)沉淀法是在中草藥提取液中加入某些試劑使產生沉淀，以獲得有效成分或除去雜質的方法。如鉛鹽沉淀法鉛鹽沉淀法為分離某些中草藥成分的經典方法之一。由于醋酸鉛及堿式醋酸鉛在水及醇溶液中，能與多種中草藥成分生成難溶的鉛鹽或絡鹽沉淀，故可利用這種性質使有效成分與雜質分離。然后將鉛鹽沉淀懸浮于新溶劑中，通以硫化氫氣體，使分解并轉為不溶性硫化鉛而沉淀。(5)鹽析法鹽析法是在中草藥的水提液中，加入無機鹽至一定濃度，或達到飽和狀態，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而與水溶性大的雜質分離。常用作鹽析的無機鹽有氯化鈉、硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等。(6)透析法透析法是利用小分子物質在溶液中可通過半透膜，而大分子物質不能通過半透膜的性質，達到分離的方法。反之也可將大分子的雜質留在半透膜內，而將小分子的物質通過半透膜進入膜外溶液中，而加以分離精制。(7)結晶、重結晶和分步結晶法鑒定中草藥化學成分，研究其化學結構，必須首先將中草藥成分制備成單體純品。在常溫下，物質本身性質是液體的化合物，可分別用分餾法或層析法進行分離精制。一般地說，中草藥化學成分在常溫下多半是固體的物質，都具有結晶體的通性，可以根據溶解度的不同用結晶法來達到分離精制的目的。3、常用干燥方法(1)真空干燥是基于這樣一基本原理水的飽和蒸氣壓與溫度緊密相關，在真空狀態下，水的沸點降低，即在真空下操作也就是在低溫下操作，可避免在高溫下營養成分如維生素等的破壞，同時提高了干燥速度。真空干燥在食品、制藥、化工等行業有廣泛的應用，中國也開發和引進了各種真空干燥設備，其結構形式多種多樣。常用的形式主要有箱式真空干燥器、雙錐式真空干燥器、帶式真空干燥器等。這些傳統的真空干燥裝置主要采用熱風，蒸汽或電等加熱，利用熱傳導、對流或輻射原理將熱量從外部傳到物料內部。真空干燥具有干燥溫度低，干燥室內相對缺氧，可避免脂肪氧化，色素褐變等一系列優點，適合于熱敏感性食品物料的干燥，此外設備成本、干燥費用也相對較低。(2)噴霧干燥是流化技術用于液態物料干燥的一種方法。因是瞬間干燥，特別適用于熱敏性物料，故所得產品質量好，保持原來的色香味，且易溶解。利用噴霧干燥來制備微囊的研究正在進行，它是將心料混懸在衣料的溶液中，經離心噴霧器將其噴入熱氣流中，所得的產品是衣料包心料而成的微囊，這種微囊粉末可采用于直接壓片，也可制備膠囊劑、糖漿劑或混懸劑。(3)冷凍干燥是將干燥液體物料冷凍成固體，在低溫減壓條件下利用冰的升華性能，使物料低溫脫水而達到干燥的一種方法。由于物料在高度真空及低溫條件下干燥，故對某些極不耐熱物品的干燥很適合。王大林報道了一種噴霧通氣凍干新技術，是利用冷的空氣或氮氣作為介質，迅速流經凍結物使水升華，噴霧凍干制得的產品微粒小、干燥快、時間短、均勻、流動性好，并具良好的速溶性。近年來，對膏狀物料和粘稠物料干燥的研究取得了較大進展，流態化技術、噴射技術、惰性載體技術，則是在此研究基礎上發展起來的。旋轉閃蒸干燥機、熱噴射氣流干燥機、惰性載體干燥機均適合熱敏性物料和膏狀物料的干燥。這些新的研究成果用于中藥制劑生產，將大大改善中藥加工的技術水平，提高生產效率。(4)遠紅外加熱干燥法是一項新的干燥技術，其干燥原理是將電能轉變為遠紅外輻射，從而被藥材的分子吸收，產生共振，引起分子和原子的振動和轉動，導致物體變熱，經過熱擴散、蒸發和化學變化，最終達到干燥的目的。遠紅外干燥可節省電能20％～50％，效果較好。(5)微波干燥法是一項20世紀60年代迅速發展起來的新技術，微波干燥實際上是通過感應加熱和介質加熱，使被干燥物中的水分和脂肪不同程度地吸收微波能量，并把它轉變為熱量從而達到干燥的目的。微波干燥可殺滅微生物和霉菌，并具有消毒作用。目前中國生產的微波加熱成套設備有915mhz和2450mhz兩個頻率。經文獻檢索等，到目前為止，尚未發現有中藥楮實子的活性部位構樹果色素用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗氧化及其相關疾病方面的報道。
發明內容本發明所需要解決的技術問題是公開了中藥楮實子的活性部位構樹果色素具有抗氧化作用，該活性部位是用于制備抗氧化產品的活性成分，以克服現有技術存在的上述缺陷。也就是說，本發明意在明確了制備抗氧化產品的活性成分，以及抗氧化產品的應用。所述的抗氧化產品是指用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究因過氧化引起的疾病如老年癡呆等的起因、早期發生發展，或后期的發病，以及過氧化引起的相關疾病的產品中的一種或多種；也就是說主要針對過氧化的起因、發生發展到后期的發病全過程。所述的抗氧化產品是包括醫藥、食品或飲料等領域產品中的一種或多種，例如包括藥物、試劑、食品、保健食品、添加劑或飲料等中的一種或多種，優選藥物、保健食品或添加劑等中的一種或多種，進一步優選藥物。所述的因過氧化引起的疾病及其相關疾病是包括老年性疾病等各類疾病等中的一種或多種，所述的老年性疾病是包括癡呆癥等各類老年疾病等中的一種或多種，所述的老年性疾病的相關疾病是包括衰老、腫瘤、炎癥、腦缺血等疾病和病理生理現象中的一種或多種；優選癡呆癥，進一步優選阿爾茨海默癥、多重梗塞型癡呆、酒精性癡呆及正常腦壓水腦癥等中的一種或多種，再優選阿爾茨海默癥。(一)技術構思1、概述隨著世界范圍內的回歸自然熱，人們越來越崇尚應用天然植物治療疾病及保健。目前世界上有120多個國家和地區使用傳統藥物，歐洲一些國家在植物藥的有關法規中明文列出被認可允許在藥店以藥物或OTC藥物銷售的藥用植物(法國196種，德國128種)。美國FDA(食品和藥品管理局)提出了把植物產品作為藥品進行申報的草案，將對草藥進行立法，把草藥作為治療藥物納入醫療保險而不再是作為營養補劑和替代藥物，也為中藥的現代化和國際化發展提供了新的機遇和廣闊前景。自主開發創新藥物是中國目前的一項緊迫任務，中國醫藥學具有悠久的歷史，在預防和治療疾病方面也積累了豐富的經驗，因此積極尋找有效的活性成分或者其組合物或者是在現有化合物中探尋未經發現的奇妙藥理用途，是新藥研究、開發的一條有效途徑。隨著人口的老齡化現象在中國日趨嚴重，衰老及老年癡呆癥、骨質疏松癥等疾病嚴重影響老年人的生活與健康。從中藥中尋找開發具有這方面活性的先導化合物或新藥，也會具有較好的社會效益與經濟效益。為了從中國傳統中藥中篩選開發抗氧化抗衰老的新藥，并為開發中國特有中藥楮實子資源，建立中藥楮實子科學的質量評價體系，闡明楮實子補腎作用機理及其抗氧化抗衰老的物質基礎與分子機理，在國家自然科學基金與聯合利用研究基金資助下，開展了本發明的研究，具有良好的藥用價值和廣闊的開發應用前景。2、探討抗氧化抗衰老的機理中醫把腎看作是人身體最重要的部分，認為腎“先天之本”，是元陰元陽(機體各臟陰陽的根本)之所。正如陳自明在《婦人良方》中指出，夫人之生，以腎為主，人之病多由腎虛而致。五臟之陰非此不能滋；五臟之陽非此不能發。腎藏精，主水，主生殖，主骨生髓，腎氣盛衰關系著人本的生老病死。中醫認為，腎乃“先天之本”，腎藏精，主水，主生殖，主骨生髓，腎氣盛衰關系著人的生老病死。腎虛會導致不同程度的神經、內分泌、免疫系統的功能紊亂。腎虛證都有不同程度的神經、內分泌、免疫系統的功能紊亂。腎虛也是骨質疏松癥、老年性癡呆發病的重要因素，運用補腎中藥則能改善這些癥狀。通過應用補腎中藥，則可能不同程度地改善這些癥狀。根據“腎主骨”“腎藏精、主骨”，骨質疏松屬中醫“腎虛骨萎”的范疇。根據理論上推測，補腎中藥楮實子可能對骨質疏松有效，經發明人初步實驗證實確實具有作用。如能從楮實子中開發研制出抗骨質疏松的新藥，將會有較大的經濟效益和社會效益。近2年的藥理與臨床研究也表明，該藥還具有抗老年癡呆或延緩老年癡呆的作用，具有開發成為治療老年性疾病新藥的潛力。發明人在前期治療骨質疏松癥作用機制的研究中，初步發現補腎中藥楮實子具有較好的抗骨質疏松作用，并且楮實子具有分布廣，資源多，而且歷版中國藥典均有收載。3、尋找能夠用于制備抗氧化產品的化合物或組合物的理論設想與研究基礎構屬多種植物國內外雖有一些研究報道，但并未受到人們足夠的重視，尚未能得到有效的開發利用。迄今為止，其補腎作用以及抗老年癡呆、抗骨質疏松的物質基礎究竟是什么，通過什么途徑而起作用，值得作進一步的研究，且有關的化學成分尚無報導。對構樹、楮實進行了本草考證，結果認為構樹在《神農本草經》以前就有記載，藥用的記載始于《名醫別錄》，列為上品。楮實子之名始載于《素問病機保命集》。楮實、楮桃、楮實子含義并非完全一致，楮實子是構樹果實而非種子。新華本草綱要等書記載有誤，應予糾正。穀樹、殼樹、桑穀、穀桑、谷樹、殼樹均指構樹，楮與構也是同一種植物，而非二種。此外對古代與現代楮實子的采收方法、分布及其應用進行了比較考證。基于此，發明人擬對構屬植物進行生藥學研究，對楮實子抗骨質疏松、老年癡呆活性成分進行篩選研究，以闡明其作用的物質基礎。對于科學評價楮實子，合理開發利用中國中藥資源，開發防治老年性疾病的中藥新藥，改善老年人的生活質量具有較重大的經濟價值和社會意義(二)中藥楮實子新的活性部位構樹果色素的制備方法包括如下步驟①取構樹果，加丙酮等有機溶劑于室溫下浸泡，得浸出液；②將浸出液過濾、蒸餾回收丙酮等有機溶劑，得到構樹果色素產品。構樹果色素易溶于水，用蒸餾水可配制成10％色素水溶液；能溶于甲醇、乙酸等強極性溶劑，不溶于無水乙醇、氯仿、苯、乙醚等弱極性有機溶劑中。該色素水溶液對熱穩定，在加熱100℃情況下顏色仍保持不變，且對光極不穩定，自然光下放置1d，顏色開始變淡變黃；該構樹果色素水镕液在pH1～8范圍內均為桔紅色，PH9～12范圍內顏色變深至藍色。(三)構樹果色素的藥理作用研究1.構樹果色素體外抗氧化研究1.1.構樹果色素對超氧陰離子自由基的清除作用(PontiV，DianzaniMV，CheesemanKJ，etal.Studiesonthereductionofnitrobluetetra-zoliumchloridemediatedthroughtheactionofNADHandphenazinemethosulate[J].ChemBiolInteract，1978，23281)在16mmol/LTris-HCl緩沖液(pH8.0)中含NADH73μmol/L，PMS15μmol/L，NBT50μmol/L產生O2-，空白管不加PMS，對照管不加構樹果色素(簡稱FBH)，FBH的終濃度為20mg/L、40mg/L、80mg/L、160mg/L，總體積為3ml，于560nm處測吸收度，計算抑制率。結果顯示，FBH能明顯清除NADH-PMS-NBT系統產生的超氧陰離子自由基，且呈量效關系(表2)。表2、ScavengingeffectofFBHonO2-producedbypyrogallicacidn＝4，x±s，*P＜0.05**P＜0.01vscontrolgroup1.2.FBH對H2O2系統產生的羥基自由基的清除作用以Smirnoff等(SmirnoffN，CumbesQJ.Hyroxylradicalscavengingactivityofcompatiblesolutes.[J].Phytochemistry，1989，28(4)1057-1060.)的方法為基礎并改進。即采用亞鐵離子催化過氧化氫產生羥自由基(·OH)方法。以·OH氧化水楊酸所得產物的吸收度示·OH多少，吸收度越大，·OH越多，3mL反應液中含0.15mol/LFeSO4，6mmol/LH2O2，2mmol/L水楊酸鈉和不同質量濃度的FBH，最后加H2O2啟動反應，37℃反應1h，在510nm處測定吸收度，吸收度越小，清除效果越好。按照下式計算清除率清除率＝[A0-(Ai-Ai0)]/A0×100％(A0為對照，不加FBH時的吸收度；Ai為某質量濃度的FBH時的吸收度，Ai0為無水楊酸時的FBH吸收度值)。結果表明，FBH能顯著清除H2O2系統產生的羥基自由基，且呈量效關系(見表3)。表3、ScavengingactivitiesofFBHfor·OHproducedbyH2O2systemn＝4，x±s，*P＜0.05**P＜0.01vscontrolgroup1.3.FBH對誘導的H2O2小鼠紅細胞溶血作用的影響(WuYJ，LiWG，ZhangZM，etal.Antioxidativeactivityof4-oxy-and4-hydroxy-nitroxidesintissuesandeyethrocytesfromrats[J].ActaPharmacolSin，1997，18150)小鼠經眼球取血，肝素抗凝，4℃離心3000r/min，10min，得紅細胞，用冰冷生理鹽水溶液洗3次，制成0.5％懸浮液。取紅細胞懸液1ml，模型管加H2O2(使終濃度為100mmol/L)，受試物管中加入H2O2(終濃度為100mmol/L)以及不同濃度的FBH(終濃度分別為20，40，80，160mg/L)，同時設未誘導溶血的空白對照管。上述各管混勻后37℃水浴中溫育1h，以生理鹽水稀釋5倍，離心3000r/min，10min，上清液在415nm波長處測吸收度。計算溶血率及抑制率溶血率＝(A受試物/A模型組)×100％，抑制率＝(模型組溶血率-受試物溶血率)/(模型組溶血率-空白組溶血率)×100％與對照組比，H2O2明顯誘導了紅細胞溶血的發生，模型組的吸收度值明顯升高(P＜0.01)；同時FBH對由H2O2引起的該效應均有抑制作用，并表現出一定的量效關系(表4)。1.4.FBH對肝組織勻漿脂質過氧化的作用(龔國清，劉同征，李立文，等。西紅花酸的體外抗氧化作用的研究[J]。中國藥科大學學報，2001，32(4)306-309)小鼠脫頸椎處死，迅速取肝，置于4℃PBS中洗凈表面殘血，用濾紙吸干，制成10％的勻漿備用。取上述組織勻漿1ml，加入不同濃度的FBH溶液0.5ml，(終濃度分別為20mg/L、40mg/L、80mg/L、160mg/L)，以DMSO為陽性對照藥(終濃度為1.5μmol/L)，終反應體積為1.5ml。37℃水浴中溫育，且于不同時間點吸取0.1ml混懸液，按丙二醛測定試劑盒操作測定MDA的生成量(見圖1)。由圖1可見，肝勻漿在自氧化的過程中，氧化產物MDA生成量是隨時間的延長而增加的，在0～1小時間，MDA的含量增長最快，在以后增長較緩慢。在各個時間段中，FBH和DMSO對肝勻漿的自氧化有顯著的抑制作用，且FBH呈現良好的量效關系。表4、EffectofFBHonthehemolysisofmouseRBCinducedH2O2n＝4，x±s，△△P＜0.01vscontrolgroup*P＜0.05**P＜0.01vsmodelgroup1.5.FBH對VitC-Fe2+系統誘導肝線粒體氧化損傷的影響(羅景慧，楊迎暴，林永成，等。海洋真菌Halorosellinaoceanicum323代謝產物的體外抗菌素氧化活性研究[J]。中藥材，2004，27(3)188-192)1.5.1.線粒體的制備昆明種小鼠，脫頸椎致死，取肝臟置于預冷至0℃～4℃的0.25mol/L，pH7.4的蔗糖溶液中洗滌，洗凈血液，用濾紙吸去肝組織表面的溶液，稱重，以1∶8的比例加入預冷的蔗糖溶液，將肝組織用剪刀剪碎，置于勻漿器中打成勻漿，以低溫離心10min，取上清液低溫離心10min，分離沉淀，用預冷的0.25mol/L的蔗糖溶液洗滌兩次，每次離心10min，即得到純化的線粒體，沉淀物用緩沖液(Tris-HCl20mmol/L，pH7.0，KCl175mmol/L)混懸，取線粒體混懸液涂片，用1％的詹納斯綠B液染色20min，覆上蓋玻片，顯微鏡鑒定，線粒體藍綠色，呈小棒狀或者啞鈴狀。用雙縮脲測定線粒體蛋白含量。1.5.2.FBH對VitC-Fe2+系統誘導肝線粒體形態改變的影響反應體系為反應體積3ml，0.1mmol/LVitC，5μmol/LFeSO4，含有1.0mg線粒體蛋白質，加入各種濃度的FBH或者緩沖液，37℃水浴中溫育30min。于520nm處測線粒體懸液的濁度變化。光密度的下降表示線粒體膨脹度增加。結果表明FBH能明顯抑制由FeSO4/VitC所引起的線粒體的形態改變效應(見圖2)。與對照組比較差異具有統計學意義。2.討論超氧陰離子自由基、羥基自由基等活性氧自由基是在機體代謝過程中產生的。在生理狀態下，活性氧自由基處于較低的水平，其產生和與清除處于動態平衡，但在某些病理情況下，這種平衡被打破，將導致機體損傷。其中羥基自由基的危害最大，可導致多種疾病的發生，許多病理生理現象如衰老、腫瘤、炎癥、腦缺血等均與氧自由基有密切聯系。本研究采用H2O2和Fe2+系統產生羥基自由基，利用NADH-PMS-NBT系統產生超氧陰離子自由基，來研究FBH的清除自由基活性，結果表明FBH于體外可清除O2-、·OH。另一方面活性氧可促發多不飽和脂肪酸的脂質過氧化(簡稱LPO)，反應中產生的各種中間過氧化產物也具有損傷作用，LPO反應的終產物丙二醛(簡稱MDA)可使含氨基的蛋白質、核酸、腦磷脂發生交聯并喪失其活性。本研究結果顯示FBH能顯著地抑制H2O2誘導的小鼠紅細胞溶血和降低肝勻漿自氧化產物MDA的含量。線粒體是細胞內能量代謝的主要場所，參與包括自由基生成、脂質代謝等在內的許多生理和生化過程。近年來的研究還表明，線粒體是多類藥物的細胞內靶點。因此維持其結構和功能正常對生物體的正常活動有著至關重要的意義。本研究證實FBH可降低VitC-Fe2+系統誘導肝線粒體的腫脹，表明其對自由基過度生成而引起的線粒體功能損傷有一定的保護作用。以上結果說明FBH有明顯的體外抗氧化作用，又是一種天然水溶性色素，對于進一步開發成抗衰老藥物或保健食品輔料有較大的參考價值。(四)構樹果色素的用途本發明的目的是提供一種用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗氧化及其相關疾病的產品，是包括醫藥、食品或飲料等領域產品中的一種或多種，例如包括藥物、試劑、食品、保健食品、添加劑或飲料等中的一種或多種，優選藥物、保健食品或添加劑等中的一種或多種，進一步優選藥物。本發明通過藥理活性篩選證明，構樹果色素是預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗氧化及其相關疾病的合適產品。1、構樹果色素及其組合物的使用方法與要求本發明構樹果色素可以單獨或與其它活性組分再進一步聯合使用，包括用于制備用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗氧化及其相關疾病的產品，是包括醫藥、食品或飲料等領域產品中的一種或多種，例如包括藥物、試劑、食品、保健食品、添加劑或飲料等中的一種或多種，優選藥物、保健食品或添加劑等中的一種或多種，進一步優選藥物。在具體使用方面，本發明構樹果色素能夠單獨使用，還能夠與其他許多化學物質一起使用。無論這些化學物質是否具有生物活性或具有治療疾病的功能，包括輔助功能如協同放大作用、拮抗或緩解組合物的副作用等，這些化學物質是包括醫藥學上可接受的載體、食品、天然產物、化學合成藥物或人類用藥等中的一種或多種；優選包括醫藥學上可接受的載體或者食品等中的一種或多種；進一步優選醫藥學上可接受的載體。本文使用的“醫藥學上可接受的載體”包括任何和所有的生理適用的溶劑、分散介質、胞衣、抗菌劑和抗真菌劑、等滲劑或吸收延遲劑等中的一種或多種。醫藥學上可接受載體的例子包括一種或多種的水、鹽水、磷酸緩沖鹽水、葡萄糖、甘油或乙醇等及其組合物中的一種或多種。在許多情況下，在該組合物中最好包括等滲劑，例如，糖、諸如甘露醇、山梨醇、山梨醇的多元醇或氯化鈉等中的一種或多種。醫藥學上可接受載體還可以包含少量的輔助物質，例如潤濕劑或乳化劑、防腐劑或緩沖液等中的一種或多種，它們增強了該組合物的有效期或效力。從具體的分類上看，所說的醫藥學上可接受的載體是指醫藥學領域常規的藥物載體，包括賦形劑，如淀粉或水等中的一種或多種；潤滑劑，如甘油、硬脂酸鎂或聚乙二醇等中的一種或多種；崩解劑，如瓊脂、碳酸氫鈉或微晶纖維素等中的一種或多種；吸收促進劑，如季銨化合物等；填充劑，如淀粉或乳糖等中的一種或多種；粘接劑，如預膠化淀粉、糊精、纖維素衍生物、藻酸鹽或明膠等中的一種或多種；滲透壓調節劑，如葡萄糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇等中的一種或多種；稀釋劑，如水等；表面活性劑，如十六烷醇等；吸附載體，如高嶺土或皂粘土等中的一種或多種；另外，還可以在組合物中加入其它輔劑，如香味劑或甜味劑等中的一種或多種。例如，將構樹果色素溶解、混懸或乳化于適宜的水性溶劑中(例如，蒸餾水、生理鹽水等中的一種或多種)或油性溶劑中(例如，植物油例如橄欖油、芝麻油、玉米油或丙二醇等中的一種或多種)中，即可制得注射制劑，其中溶劑中可含有分散劑(例如，聚山梨酯80、聚氧乙烯硬化蓖麻油60或聚乙二醇等中的一種或多種)、滲透壓調節劑(例如，氯化鈉、甘油、D9-甘露糖、D-山梨醇或葡萄糖等中的一種或多種)。在這種情況下，如有必要，可加入添加劑，例如增溶劑(例如，水楊酸鈉或醋酸鈉等中的一種或多種)、穩定劑(例如，人血清白蛋白等)、止痛劑等。本發明構樹果色素還可以以組合物的形式聯合使用，特別是與用其它化學物質如藥物對動物尤其是哺乳動物包括人或其他動物進行治療所用的組合物或者是類似的組合物。所述哺乳動物，包括人、小鼠、大鼠、羊、猴、牛、豬、馬、兔、犬、黑猩猩、狒狒、狨、獼猴或恒河猴等中的一種或多種，優選人、小鼠、大鼠、猴、豬、兔或犬等中的一種或多種，進一步優選人、大鼠或猴等中的一種或多種。例如，可以將本發明組合物加入適于給與受治療者的藥用組合物中。通常，該藥用組合物包含本發明組合物和藥學上可接受的載體。構樹果色素及其藥物組合物可以有各種形式，包括液體、半固體或固體等劑量形式中的一種或多種；其中所說的藥物組合物，包括治療有效量的組合物為活性成分，以及一種或多種醫藥學上可接受的載體。該藥物組合物可以采用本領域公知的常規生產方法制成各種劑型，例如使活性成分與一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。所述的劑型包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑或注射劑等中的一種或多種，采取口服或注射(包括靜脈注射、靜脈滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一種或多種)、粘膜透析等中的一種或多種給藥途徑進行抗氧化及其相關疾病的預防、診斷、檢測、保護、治療或科學研究。該藥物組合物一般必須無菌且在生產儲存條件下穩定。可以將該組合物配制成溶液、微乳液、分散液、脂質體或其它適合于高藥物濃度的有序結構。通過將所需量的構樹果色素或其組合物與所需上述成分的一種或組合一起加入適當的溶劑中并接著進行除菌過濾制備無菌注射液。一般而言，通過將該組合物加入含有基本分散介質和所需的上述其它成分的無菌溶液中制備分散液。在用于制備無菌注射液的無菌粉劑的情況下，推薦的制備方法是真空干燥和冷凍干燥。例如，通過諸如卵磷脂的包衣、在分散液的情況下通過保持所需顆粒大小和通過使用表面活性劑，可以保持溶液的適當流動性。通過在該組合物中包括延遲吸收的藥劑(例如單硬脂酸鹽或明膠)可以達到注射組合物的延長吸收。用于患者時，本發明所述的構樹果色素劑量為5～20mg/kg·d，該劑量或用量通常是根據患者或使用者的年齡和體重以及身體狀況或患者癥狀的狀況來決定。本發明構樹果色素及其藥用組合物可以包括“治療有效量”或“預防有效量”的構樹果色素。“治療有效量”是指在必要的劑量和時間下有效達到所需治療效果的量。構樹果色素的治療有效量可以根據諸如個體的病況、年齡、性別和體重以及該組合物在該個體引起所需反應的能力等因素而變化。治療有效量亦指該組合物的有益治療效果超過其任何毒性或有害效果的量。“預防有效量”是指在必要劑量和時間下有效達到所需預防效果的量。因為預防劑量用于患病前或疾病早期的受治療者，預防有效量通常小于治療有效量。構樹果色素的治療或預防有效量的典型的非限制性范圍是5～20mg/kg，更優選為5～10mg/kg。應注意，劑量值將根據欲減輕的疾病類型和嚴重性變化，也就是說用于患者時，構樹果色素的劑量或用量，通常根據患者或使用者的年齡和體重以及身體狀況或患者癥狀的狀況來決定。另外，應理解，對于任何特定受治療者，應隨著時間根據個體需要和給與或監督給與所述構樹果色素的人的專業判斷調整特定劑量制度，并且本文設定的劑量范圍僅為例證性的，并不會限制要求保護的構樹果色素的范圍或實踐。也就是說，需要根據治療的對象、給藥途徑、所治療疾病和狀況等，變化構樹果色素的每次和/或每日的劑量或用量。例如，經靜脈給予哺乳動物，尤其是成年人(如體重60kg)，所述構樹果色素的單劑量約為5～10mg，優選約10mg，優選每日給藥1～3次。可以調整劑量單位，以提拱最佳所需反應(例如，治療或預防應答)。例如，可以單次大劑量給藥，可以在一段時間內給予幾個均分量或根據治療情況的迫切性按比例降低或增加劑量。配制易于給藥和劑量統一的劑量單位形式的非腸道組合物尤其有利。本文使用的劑量單位形式，指適于欲治療的哺乳動物受治療者的單元劑量的物理分離單位；每個單位含有預定量的計算用于與所需藥用載體一同產生所需治療效果的活性物組合物。本發明的劑量單位形式的規格，由以下確定并直接取決于以下(a)該組合物的獨特特征和欲達到的特定治療或預防效果，和(b)在混合這種用于治療個體敏感性組合物的技術中的內在限制。2、構樹果色素及其組合物的藥物劑型和給藥途徑本發明所述的構樹果色素及其組合物制備的用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗氧化及其相關疾病的產品，其中按照飲料、食品
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的要求制備的產品能夠用于預防、保護和治療抗氧化及其相關疾病；按照醫藥
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的要求制備的產品能夠用于患者的治療或保健，既能夠單獨直接用于制備治療或保健的藥物，也能夠與許多化學物質進行混合或組合，直接或間接用于制備治療或保健的藥物。這里所述的化學物質與本節上文中所述的相同。在本發明中，所需物料包括本發明的原料、上述配套使用的化學物質等，均應根據實際情況和需要，采用食品級或藥用級的物料。本發明所述的構樹果色素及其藥物組合物，可以用本領域已知的各種方法給藥，盡管在許多治療用途中推薦的給藥途徑/給藥方式是眼藥水外用或經球旁注射法行眼內注射法給藥。但是，技術人員會理解給藥途徑/給藥方式隨所需的結果而變化。在某些具體實施中，該活性化合物可以與保護該化合物免于快速釋放的載體一同制備，例如空釋制劑，包括移植物傳遞系統、透皮貼傳遞系統或微囊傳遞系統等中的一種或多種。此外，還可以使用生物可降解的、生物相容性聚合物，例如乙烯乙酸乙酯、聚酐、聚羥基乙酸、膠原蛋白、聚正酯或聚乳酸等中的一種或多種。制備這種制劑的許多方法均已申請專利或一般為本領域技術人員所知(參見例如SustainedandControlledreleaseDrugDeliverySystems，J.R.Robinson編輯，MarcelDekker，Inc.，紐約，1978)。本發明所述的構樹果色素及其藥物組合物，通常通過口服、鼻吸入、直腸或腸胃外給藥等中的一種或多種方式，施用于需要這種治療的患者。用于口服時，可將其制成常規的固體制劑如片劑、粉劑、粒劑或膠囊等中的一種或多種。在實施時，本發明構樹果色素可以與惰性稀釋劑或可同化的食用載體一同口服。構樹果色素(和其它成分，如果需要)亦可以包于硬或軟殼明膠膠囊、壓制成片劑或直接加入受治療者的膳食中。關于口服治療給藥，可以將構樹果色素與賦形劑一起加入并以可食片劑、膠囊、懸液、糖漿或糯米紙囊劑等中的一種或多種形式使用。為了以非腸道給藥之外給予本發明構樹果色素，可能需要用防止其失活的材料對該組合物包衣或與該組合物一同給予。亦可以將補充的活性化合物加入該組合物中。在具體實施時，將本發明構樹果色素與一種或多種可以用于治療疾病的其它治療藥物共配制和/或共給予。這種聯合使用，可以優越地利用較低劑量的該給予的治療藥物，因此避免可能的毒性或與各種單一療法相關的并發癥。如果要制成液體制劑如水劑、油懸浮劑或其它液體制劑中的一種或多種，如糖漿、酊劑或酏劑等中的一種或多種；用于腸胃外給藥時，可將其制成注射用的溶液劑、水劑或油性懸浮劑等中的一種或多種。以上所述的使用形式中，優選的形式是片劑、粉劑、粒劑或膠囊等中的一種或多種，進一步優選膠囊。本發明的主要適合對象是中老年人群，選擇膠囊用于預防，則每天一次，抑制過氧化變性、延緩衰老。綜上所述，本發明對構樹果色素進行了理論探索，經過大量的實驗研究特別是長期的藥理學試驗，發現所述及的構樹果色素有顯著的預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗氧化及其相關疾病的活性。因此，構樹果色素特別是其藥物組合物可用于制備抗氧化產品，是包括醫藥、食品或飲料等領域產品中的一種或多種，例如包括藥物、試劑、食品、保健食品、添加劑或飲料等中的一種或多種，優選藥物、保健食品或添加劑等中的一種或多種，進一步優選藥物，再優選以本發明構樹果色素及其組合物為原料制備而成的藥物。(五)技術特長本發明系統性地研究構樹果色素，對構樹果色素的藥用用途進行開發，發現了該化合物能夠用于抗氧化，構樹果色素是有效的自由基清除劑，另外還可增加組合物的滲透能力；副作用小，外用為主；藥物釋放快，所需劑量小，符合預防為主的原則，可以替代目前常用的老年癡呆等抗氧化相關疾病的藥物。現有產品的抗氧化作用，有些機理不明或未得到實驗的確切證明；而發明人發現構樹果色素或其組合物同時具有抗氧化、抗游離基的產生等作用，并可在衰老發生初期時就可預防和延緩衰老。本發明通過實驗研究結果，還證實了抗氧化的作用，故需盡早防治，以預防為主；用藥方便，口服為主，隨時可用；適應人群廣泛，包括中老年易感人群。(六)構樹果色素的開發應用前景目前世界天然藥物貿易額加上保健品和化妝品，已超過400億美元。中國作為一個傳統醫藥大國，中藥年出口額占國際市場份額2％還不到，另一方面，隨著全球經濟一體化進程加快，中國加入世界貿易組織后，國內市場受國際醫藥大市場沖擊的廣度和深度將進一步加劇，近幾年甚至還有下降。中國中藥出口下降的重要原因之一就是中藥材的質量不穩定，直接影響了中成藥的質量，也嚴重阻礙了中藥的現代化進程。中國擁有世界上最豐富的藥用植物種質資源，據1995年全國中藥資源普查結果表明，已被應用的植物來源中藥有11118種(包括208個種下單位)，國家有關部門也正在不斷加大對中藥研究、開發的扶持力度，如95攻關項目，攀登計劃，973計劃均十分重視中藥。目前全國約有2500余家中醫院，1000余家中藥工業企業，加上國外需求不斷增加，中藥材消耗量十分巨大。全國現有600多個中藥材生產基地，栽培面積約600萬畝，全國經營生產的中藥材有1000多種，經常使用的400余種，常年栽培的100余種，而選育的優良中藥材品種，不到10種，除少數品種外，大多數中藥材形不成規模，存在問題較多，例如由于農藥殘留量與重金屬含量超標等問題常常制約著中國中藥的出口。因此一方面要提高中藥材的質量，保持質量穩定可控，就必須要實施中藥材GAP，形成規模化生產，在產量數量上保證對中藥材的需要，另一方面，必須要大力推進中藥資源的現代開發研究，加大科技含時，提高產品附加值。老年癡呆已成為影響中國人口生活質量的重要致病原因，本發明設計的新型的抗氧化產品構樹果色素及其組合物，綜合考慮了社會保健需要的主要趨勢，抓住重點，針對性強；構樹果色素制劑外用為主，使用方便，具有較強的創新性和較大的臨床應用潛在價值。構樹果色素藥理作用較強，性質穩定，使用制備的制劑質量穩定，預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗氧化及其相關疾病的效果明顯，故其更適于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗氧化及其相關疾病產品的工業化生產，為預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗氧化及其相關疾病提供了一種新的藥物來源。本發明構樹果色素安全低毒，其原料來源豐富、價廉，制備工藝簡單，且使用范圍較廣，因此容易推廣應用，研制預防、診斷、保護和治療因過氧化引起的疾病等方面產品特別是治療老年癡呆等疾病的藥物，能夠在較短的時間內產生顯著的社會效益和經濟效益。總之，本發明開發構樹果色素的新用途，積極適應了現代健康、醫療需求，以及科研領域的工作需要和人性化服務的需要，是用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗氧化及其相關疾病等方面的安全原料。圖1表示構樹果色素對肝組織勻漿脂質過氧化的作用Fig1.EffectofFBHonMDAproductionofliverhomogenateinducedbyauto-oxidation(x±s，n＝4，*P＜0.05**P＜0.01vscontrolgroup)圖2表示FBH對VitC-Fe2+系統誘導肝線粒體氧化損傷的影響Fig2.EffectofFBHonthedilataltionoflivermitochondriainducedbyVitC-Fe2+system(x±s，n＝6*P＜0.05**P＜0.01vsmodelgroup)。具體實施例方式本發明研究了現有物質構樹果色素的新的藥理作用和新的用途，提供了一種能夠用于制備抗氧化及其相關疾病的預防、診斷、保護、研究和治療等產品的原料，便于醫療行業和相關行業如食品、飲料等領域的安全使用。(一)構樹果色素的提取方法1.材料1.1.藥材新鮮成熟的構樹果。1.2.動物昆明種小鼠，雌雄兼用，體重30±3g，由第二軍醫大學實驗動物中心提供。1.3.儀器離心機(AnKeTDL-5型離心機，上海安亭科學儀器廠)；紫外分光光度計(UV-1100，上海天美科學儀器有限公司)；恒溫水浴槽(HWS24型電熱恒溫水浴鍋，上海一恒科技有限公司)。1.4.試劑還原型輔酶I(簡稱NADH-2Na)為Sigma產品；硫代巴比妥酸(簡稱TBA)及吩嗪硫酸甲酯(簡稱PMS)為上海生化試劑廠產品，氮藍四唑(簡稱NBT)為上海前進試劑廠生產；MDA生物試劑盒，南京建成生物工程研究所生產。丙酮、無水乙醇、甲醇、氨水、冰醋酸等試劑(分析純)、TLC硅膠板。2.實驗方法2.1.構樹果色素的制備采摘新鮮成熟的構樹果實，經第二軍醫大學生藥教研室鄭漢臣教授鑒定。晾干后搗爛成漿，加丙酮于室溫下浸泡，傾出浸泡液，再次加入丙酮浸泡至構樹果漿無色為止。合并浸出液，經過濾、蒸餾回收丙酮，得到構樹果色素產品。用蒸餾水配制成10％色素水溶液，進行TCL分析，展開劑為正丁醇∶冰醋酸∶水(4∶1∶5)。2.2.構樹果色素的理化性質2.2.1.溶解性構樹果色素易溶于水，能溶于甲醇、乙酸等強極性溶劑，不溶于無水乙醇、氯仿、苯、乙醚等弱極性有機溶劑中。2.2.2.耐熱實驗配制0.2％色素水溶液，水浴加熱至沸0.5～1.0h，觀察顏色變化。結果表明該色素水溶液對熱穩定，在加熱100℃情況下顏色仍保持不變。2.2.3.色素的耐光性將構樹果色素水溶液于自然光下放置0.5d、1d、2d及5d，以避光存放的色素水溶液作對照，分別觀察其顏色變化。結果表明該色素水溶液對光極不穩定，自然光下放置1d，顏色開始變淡變黃。2.2.4.pH的影響構樹果色素水镕液在pH1～8范圍內均為桔紅色。PH9～12范圍內顏色變深至藍色。(二)構樹果色素的常用劑型本發明制備液體制劑一般采用常規制備方法，取構樹果色素或其組合物，加入輔料，加入蒸餾水進行稀釋，濾去不容物，裝瓶，滅菌，封口即得。本發明制備粉針劑一般采用常規的冷凍干燥法，以水作為溶媒，其步驟為取構樹果色素或其組合物，加入賦形劑，加水溶解，加入活性炭，過濾除菌，灌裝，半軋塞，冷凍干燥，壓塞軋蓋即可。所用的賦形劑選自甘露醇、水解明膠、葡萄糖、乳糖、右旋糖苷等中的一種或幾種。每瓶含構樹果色素或其組合物10～100mg。本發明制備粉針劑也可采用噴霧干燥法，以水作為溶媒，其步驟為取構樹果色素或其組合物，加或不加賦形劑(賦形劑同上)，加水溶解，加入活性炭，過濾除菌，噴霧干燥，無菌分裝，壓塞軋蓋即可。每瓶含構樹果色素或其組合物10～100mg。本發明制備小針劑時，以注射用水作為溶媒配制即可，也可加適量輔料，輔料選自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸芐酯、二甲基乙酰胺中的一種或幾種。每支含構樹果色素10～100mg。本發明制備葡萄糖輸液或氯化鈉輸液，以注射用水作為溶媒，加入適量葡萄糖或氯化鈉配制即可，也可加適量輔料，輔料選自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸芐酯、二甲基乙酰胺中的一種或幾種。每瓶含構樹果色素10～100mg。本發明制備片劑、膠囊、顆粒劑、口服液等口服制劑，輔料可以是乳糖、淀粉、糊精、硬脂酸鹽等，按常規技術制備。在本發明中，以上所述的具體實施方式和以下所述的實施例均是為了更好地闡述本發明，并不是用來限制發明的范圍。下面通過實施例對本發明作詳細描述。實施例1、構樹果色素粉針劑的制備取構樹果色素38g，加入甲基纖維素20g，加5000ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至10,000ml，加3.0g針用活性炭，充分攪拌30分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；灌裝到無菌的西林瓶中，每瓶2ml，半軋塞；冷凍干燥，再壓塞軋蓋即可。實施例2、構樹果色素粉針劑的制備(1)處方注射用構樹果色素38g甘露醇40g注射用水加至10000ml共制成5000瓶(2)制備工藝按以上處方稱取處方量構樹果色素，加入到適量注射用水中，攪拌使其溶解；加入處方量甘露醇，攪拌使完全溶解，加注射用水至全量；加入液體量的0.1％針用活性炭，充分攪拌30分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；灌裝，半軋塞；冷凍干燥，壓塞軋蓋。共制得4867瓶，成品率為97.35％。實施例3、構樹果色素粉針劑的制備取構樹果色素38g，加5000ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至10,000ml，加1g針用活性炭，充分攪拌30分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；冷凍干燥得無菌粉末，分裝成1000瓶。實施例4、構樹果色素粉針劑的制備取構樹果色素40g，加入乳糖50g，加5000ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至10,000ml，加1.5g針用活性炭，充分攪拌30分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；噴霧干燥得無菌粉末，分裝成1000瓶。實施例5、構樹果色素小針劑的制備取構樹果色素5g，加500ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至1000ml，用0.22μm微孔濾膜過濾；分裝灌封，每瓶10ml，滅菌即可。實施例6、構樹果色素小針劑的制備取構樹果色素10g，加入丙二醇3g，加1000ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至2000ml，加1.5g針用活性炭，充分攪拌30分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；分裝灌封，每瓶5ml，滅菌即可。實施例7、構樹果色素片劑的制備方法1取構樹果色素計80g，微晶纖維素80g、乳糖15g、預膠化淀粉60g，過篩，混合均勻，用適量10％PVP乙醇溶液制軟材，制粒，干燥，加入硬脂酸鎂3g，整粒，壓片，制成1000片。實施例8、構樹果色素片劑的制備方法2(1)處方構樹果色素1000.0g微晶纖維素1170.0g預膠化淀粉690.0g乳糖125.0g5％PVP無水乙醇適量硬脂酸鎂15.0g共制成10000片(2)制備工藝按以上處方分別稱取處方量的主藥與輔料，按等量遞加法混合均勻后照處方工藝項下進行制軟材、制顆粒，干燥，整粒等過程，計算好片重后用單沖壓片機和10.5mm淺凹沖模壓片，控制裸片硬度5-7kg，共制得片劑9698片，成品率為96.98％。采用滾轉噴霧法包衣，包衣工藝如下包衣液的配制胃溶薄膜衣料85G61235，由上海卡樂康包衣技術有限公司提供包衣工藝將待包衣裸片(硬度5kg-7kg)放入包衣鍋中，啟動攪拌裝置和鼓風加熱裝置，待裸片溫度升至40℃時，開始打開噴槍對準片床的上1/3處噴入包衣液包衣，控制片床溫度38℃-42℃，氣磅壓力6kg，包衣液流速為50mL/min，包衣膜重占包衣片重的3％。實施例9、組合物粉針劑的制備取上述得到的組合物30g，加入右旋糖苷30g，加500ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至2000ml，加3.0g針用活性炭，充分攪拌30分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；灌裝到無菌的西林瓶中，每瓶2ml，半軋塞；冷凍干燥，再壓塞軋蓋即可。實施例10、組合物粉針劑的制備(1)處方注射用組合物半成品150g甘露醇400g注射用水加至10000ml共制成10000瓶(2)制備工藝按以上處方稱取處方量組合物，加入到適量注射用水中，攪拌使其溶解；加入處方量甘露醇，攪拌使完全溶解，加注射用水至全量；加入液體量的0.1％針用活性炭，充分攪拌30分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；灌裝，半軋塞；冷凍干燥，壓塞軋蓋。共制得9735瓶，成品率為97.35％。實施例11、組合物粉針劑的制備取上述得到的組合物60g，加500ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至1000ml，加1g針用活性炭，充分攪拌30分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；冷凍干燥得無菌粉末，分裝成1000瓶。實施例12、組合物粉針劑的制備取上述得到的組合物40g，加入乳糖50g，加100ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至1000ml，加1.5g針用活性炭，充分攪拌30分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；噴霧干燥得無菌粉末，分裝成1000瓶。實施例13、組合物小針劑的制備取上述得到的組合物5g，加100ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至1000ml，用0.22μm微孔濾膜過濾；分裝灌封，每瓶10ml，滅菌即可。實施例14、組合物小針劑的制備取上述得到的組合物10g，加入丙二醇30g，加200ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至1000ml，加1.5g針用活性炭，充分攪拌30分鐘；脫炭過濾；用0.22μm微孔濾膜過濾；分裝灌封，每瓶5ml，滅菌即可。實施例15、組合物氯化鈉輸液的制備取上述得到的組合物1g，加入氯化鈉90g，加1000ml注射用水，攪拌使其溶解；加注射用水至10000ml；用0.22μm微孔濾膜過濾；分裝灌封，每瓶250ml，滅菌即可。備注在本發明的圖、表中的FBH均表示構樹果色素；Min均表示分鐘；A520nm均表示波長在520納米(簡稱nm)處。權利要求1.構樹果色素在制備抗氧化產品中的應用。2.構樹果色素的組合物在制備抗氧化產品中的應用。3.根據權利要求1或2所述的構樹果色素的應用，其特征在于，所述的抗氧化產品是指用于預防、診斷、檢測、保護、治療和研究因過氧化引起的疾病的起因、早期發生發展，或后期的發病，以及過氧化引起的相關疾病的產品中的一種或多種。4.根據權利要求3所述的構樹果色素的應用，其特征在于，所述的抗氧化產品是包括醫藥、食品或飲料領域產品中的一種或多種。5.根據權利要求4所述的構樹果色素的應用，其特征在于，所述的抗氧化產品是包括藥物、試劑、食品、保健食品、添加劑或飲料中的一種或多種。6.根據權利要求1或2所述的構樹果色素的應用，其特征在于，所述的因過氧化引起的疾病及其相關疾病是包括老年性疾病各類疾病中的一種或多種。7.根據權利要求6所述的構樹果色素的應用，其特征在于，所述的老年性疾病是包括癡呆癥各類老年疾病中的一種或多種。8.根據權利要求7所述的構樹果色素的應用，其特征在于，所述的癡呆癥是包括阿爾茨海默癥、多重梗塞型癡呆、酒精性癡呆及正常腦壓水腦癥中的一種或多種。9.根據權利要求8所述的構樹果色素的應用，其特征在于，所述的癡呆癥是阿爾茨海默癥。10.根據權利要求1或2所述的構樹果色素的應用，其特征在于，所述的構樹果色素的制備方法包括如下步驟①取構樹果，加丙酮等有機溶劑于室溫下浸泡，得浸出液；②將浸出液過濾、蒸餾回收丙酮等有機溶劑，得到構樹果色素產品。全文摘要本發明涉及構樹果色素的抗氧化作用及其用途。構樹果色素是有效的自由基清除劑，具有抗氧化、抗游離基產生等作用，并可在衰老發生初期時就可預防和延緩衰老，還可增加組合物的滲透能力。超氧陰離子自由基、羥基自由基等活性氧自由基可導致多種疾病和病理生理現象的發生，如衰老、腫瘤、炎癥、腦缺血等，其中老年癡呆已成為影響中國人口生活質量的重要致病原因；本發明發現新型的抗氧化活性部位構樹果色素及其組合物，藥理作用較強，性質穩定，安全低毒，效果明顯，使用方便，針對性強，符合社會保健的主要發展趨勢，為預防、診斷、檢測、保護、治療和研究抗衰老等相關疾病提供一種新的藥物來源，具有較強的創新性和較大的臨床應用潛在價值。文檔編號A61P39/06GK1861118SQ20061002505公開日2006年11月15日申請日期2006年3月24日優先權日2006年3月24日發明者秦路平,龐素秋,黃寶康,張巧艷,張宏,韓婷申請人:中國人民解放軍第二軍醫大學