專利名稱：具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物。
背景技術：
莪術油是存在于中藥莪術中的揮發油，體內外試驗已證實莪術油對流感病毒A1、A3、合胞病毒均具有明顯的抗病毒作用，抗病毒范圍廣，且無毒副作用。《中國藥典》(2005年版一部)記載，在莪術中莪術油的含量大于1.5％，可通過傳統的蒸餾法或超臨界CO2萃取等方式得到。中國藥典2000年版二部收載的含莪術油提取物的莪術油葡萄糖注射液，已廣泛用于治療小兒肺炎、病毒性肺炎、急性上呼吸道感染、病毒性腸炎及病毒性心肌炎、腦炎等疾病。
柴胡為中國藥典收載的一味常用中藥，性苦、微寒，具有和表解里，疏肝，升陽的功效，用于感冒發熱、寒熱往來等，柴胡主要有效成分為揮發油和柴胡皂苷。李秀琴等在“柴胡揮發油提取方法的研究”(《中國藥學雜志》2004，39(2)103-105)中報道，柴胡中約含有0.15％的揮發油。柴胡揮發油毒性低，有一定的解熱作用，臨床上有以柴胡揮發油制成的注射液供肌內注射，用于治療感冒、流行性感冒及瘧疾等的發熱。衛生部藥品標準中藥成方制劑第17冊中收載的柴胡注射液，為以柴胡的水蒸氣蒸餾液制成的滅菌水溶液。臨床使用中發現，無論是柴胡注射液，還是莪術油葡萄糖注射液，其功效作用方面都不夠全面，與實際治療需要尚存在有不相適應之處。
發明內容
鑒于此，本發明首先將提供一種能具有更為理想的抗病毒和解熱作用的藥物組合物。在此基礎上，本發明還將提供一種所說抗病毒和解熱藥物組合物的制備方法。
本發明具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物，是以莪術油和至少含有柴胡揮發油的柴胡提取物成分為基本有效藥用成分，與藥物中可以接受的輔助添加成分共同組成。其中，所說兩有效藥用成分以其相應提取原料的生藥重量份計的比例是莪術/柴胡為1/0.5～20。
上述的藥物組合物中，所說有效藥用成分中的柴胡提取物成分可以單獨采用為柴胡揮發油。其中，所說的有效藥用揮發油成分既可以直接使用已有市售的相應商品揮發油，也可以由相應的莪術和/或柴胡生藥原料中制取得到。例如，在采用由目前已有市售的商品莪術油與由柴胡生藥原料方式制取得到的柴胡揮發油的方式制備藥物時，所說有效藥用成分的莪術油/柴胡生藥的重量份比例范圍相應可以為1/25～1000，進一步的較好比例范圍是1/50～400，最佳比例范圍是1/100～200。
以上述組成為基礎，對于口服型藥物而言，所說有效藥用成分中的柴胡提取物成分，在含有柴胡揮發油的同時，還可以含有與該柴胡揮發油量相當的同一比例量柴胡生藥原料的柴胡皂苷成分提取物，有利于療效的提高。
在上述使用莪術油和柴胡提取物兩有效藥用成分的基礎上，為進一步提高對所說適應癥的功效和作用，還可以在所說有效藥物成分中進一步增加黃芩苷，其與柴胡提取原料生藥的重量份比為1/10～20。
將上述的有效藥用成分與藥學上可以接受和使用的輔料、載體等輔助添加成分混合，并按相應的制劑方式處理，即可制備得到相應的藥物制劑，如多種常用形式的口服制劑、注射劑、滴鼻劑、噴霧劑、氣霧劑或噴霧吸入劑等。藥效學試驗結果表明，本發明上述有效藥用組成形式的藥物在抗病毒和解熱作用方面，可以產生協同增效的作用，使療效更為滿意。
由抗病毒和解熱試驗結果顯示，本發明上述的藥物組合物，可用于治療感冒、流行性感冒及瘧疾等的發熱，小兒肺炎、病毒性肺炎、病毒性感冒，急性上呼吸道感染、病毒性腸炎及病毒性心肌炎、腦炎等病毒性疾病。特別是制成高濃度的乳劑型滴鼻劑、噴霧劑等制劑后，通過鼻腔和口腔粘膜給藥吸收，能具有比目前的莪術油葡萄糖注射液和柴胡注射液更好的藥效作用，同時還可避免中藥注射劑過敏等不安全隱患，具有使用方便，患者容易接受等諸多優點。
如上述，有效藥用成分中的莪術揮發油以使用有市售的商品莪術油最為方便。如果有效藥用成分的莪術揮發油和柴胡提取物均采用由生藥原料提取得到的方式時，一種可供參考的方式和步驟可以為a、將所說比例量的原料生藥莪術和柴胡以蒸餾方式提取揮發油成分，以藥物中可以接受的水不溶油性成分，如藥物中允許使用或允許直接作為藥物制劑輔助成分使用的植物油、動物油、礦物油或合成油脂中的至少一種，與水共同組成的兩相體系作為蒸餾液的收集介質；b、由提取揮發油后的柴胡剩余物，按目前已有報道和使用的方式提取柴胡皂苷；c、由a步收集介質中的揮發油成分，或由a步得到的揮發油成分和b步的柴胡皂苷成分為有效藥用成分，與藥物中可接受的輔助添加成分按相應的制藥方法和工藝加工處理，即可制成為相應的口服型、注射型或其它可用形式的藥物制劑。例如，與在口服制劑中可以被接受的崩解劑、賦形劑、潤滑劑、粘合劑、填充劑等常用的輔助添加成份混合后，按相應的常規工藝方法處理，即可制成為片劑、滴丸劑、膠囊劑或適當形式的緩釋劑、控釋劑等固體制劑形式的口服藥物；與常用的增溶劑、助溶劑、乳化劑、潤濕劑等表面活性劑、pH調節劑、稀釋劑、穩定劑、增稠劑等混合，按相應的常規工藝方法處理，即可制成為乳劑、噴霧劑、滴鼻劑、氣霧劑等相應的藥物制劑。按注射藥物制劑中允許使用的適當溶劑和附加劑配合及相應的工藝操作處理后，可以制備成相應的乳劑或粉針等肌肉或靜脈形式的注射制劑藥物。
上述制備中所說的對揮發油的提取過程，既可以將原料生藥莪術和柴胡混合后同時蒸餾和收集餾出物，也可以采用將兩原料生藥分別蒸餾和收集后再混合處理的方式進行。
由于在蒸餾時采用了油/水兩相的介質體系作收集餾出液，因此揮發油成分即可被富集于油相收集層中，并減少了損失。當油相層使用的是藥物中可以接受的水不溶油性成分時，如藥學中允許使用的大豆油、紅花油、棉籽油、玉米油、橄欖油、芝麻油、輕質礦物油、液體石蠟、硬脂酸、硅油等中的一種或幾種時，富集有餾出揮發油成分的該油相混合物無需分離即可直接用于下步的制劑。
當還需加用黃芩苷作為有效藥用成分時，可以在上述的c步制劑過程中按所說比例量加入。
作為本發明上述藥物有效藥用成分的莪術油，其來源除可為市售的商品莪術油外，也可以采用以常規蒸餾方法或CO2超臨界萃取技術從中藥原料莪術中提取得到莪術油成分。
由抗病毒和解熱試驗結果顯示，本發明上述的藥物組合物，可用于治療感冒、流行性感冒及瘧疾等的發熱，小兒肺炎、病毒性肺炎、病毒性感冒，急性上呼吸道感染、病毒性腸炎及病毒性心肌炎、腦炎等病毒性疾病。
以下通過具體實施方式
的實例再對本發明的上述內容作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例。在不脫離本發明上述技術思想情況下，根據本領域普通技術知識和慣用手段做出的各種替換或變更，均包括在本發明的范圍內。
具體實施例方式
實施例1取柴胡500g，切斷，加水溫浸，經水蒸氣蒸餾，常規方式直接收集初餾液，再重蒸餾，收集重餾液約1000ml，加入市售成品的注射用莪術油0.5g和聚山梨酯80適量，攪拌使油完全溶解，再加入氯化鈉9g，溶解后，濾過，加注射用水至1000ml，調節pH值，精濾，灌封，滅菌，即得溶液型注射液。
實施例2將柴胡250g，切斷，裝入常規的蒸餾器中，加水溫浸，以普通的油水分離器作為蒸餾液收集裝置，并在其中的下層裝入適量水，上層裝入大豆油5g。對柴胡蒸餾提取5小時，分離收集上述裝置中的油相層，得富集有柴胡揮發油的大豆油，加入市售成品莪術油10g，作為油相備用。將蛋黃卵磷脂0.6g加蒸餾水50ml分散，加入甘油2.3g、西黃芪膠1g、尼泊金乙酯0.1g和食用香精適量，攪拌使溶解，加熱至70℃，并繼續攪拌，同時緩慢加入油相，高速均質8分鐘制得初乳，將初乳過高壓乳勻機循環6次，在低速攪拌下加蒸餾水至100ml，過濾、分裝，置專用滴鼻瓶中或噴霧瓶中，即得滴鼻劑和噴霧劑。
實施例3將柴胡1000g，裝入常規的水蒸氣蒸餾器中，以普通的油水分離器作為蒸餾液收集裝置，并在其中的下層裝入適量水，上層裝入注射用大豆油20g。對柴胡水蒸氣蒸餾提取5小時，分離收集上述裝置中的油相層，得富集有柴胡揮發油的大豆油，再加入大豆油80g、成品莪術油10g和辛葵酸甘油酯10g，作為油相預熱至55℃，備用。將注射用大豆磷脂12g加注射用水500ml分散，再加入注射用甘油25g，攪拌使溶解，加熱至55℃，并繼續攪拌，同時緩慢加入油相，高速均質6分鐘制得初乳，將初乳過高壓乳勻機循環4次，即得亞微乳。低速攪拌下將亞微乳加注射用水至1000ml，過濾、分裝，滅菌，即得乳劑型注射液。
實施例4將柴胡6000g和莪術3000g，粉碎，裝入常規的蒸餾器中，加水溫浸，以普通的油水分離器作為蒸餾液收集裝置，并在其中的下層裝入適量水，上層裝入大豆油50g。蒸餾提取6小時，分離收集上述裝置中的油相層，得富集有柴胡揮發油和莪術油的大豆油，加入大豆卵磷脂25g作為油相備用。實測顯示，其中莪術揮發油的蒸餾收得率一般至少可達2％。取甘油25g、α-生育酚1g、山犁酸1g、卡波姆10g溶于適量的蒸餾水中作為水相。分別加熱至55℃，混勻，先在組織搗碎機中分散乳化3-4分鐘，再加蒸餾水至1000ml，調節pH值6.0-7.0，經高速乳勻機乳化至油滴粒徑小于5um。分裝，置專用滴鼻瓶中，每瓶10ml，即為所述的滴鼻劑。或置耐壓容器中，加閥門、封帽，壓入拋射劑，搖勻，即得氣霧劑。
實施例5
將柴胡2000g，切斷，裝入常規的水蒸氣蒸餾器中，加水溫浸，以普通的油水分離器作為蒸餾液收集裝置，并在其中的下層裝入適量水，上層裝入橄欖油50g。對柴胡水蒸氣蒸餾提取4-6小時，分離收集上述裝置中的油相層，得富集有柴胡揮發油的橄欖油，備用。提取柴胡揮發油后的藥液，濾過，濾液備用，藥渣再加水煎煮2次，濾過，煎液與濾液合并，按常規方式通過大孔吸附樹脂柱吸附，用適量水洗滌除雜，再用70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮、干燥，即得柴胡總皂苷，粉碎成細粉，備用。
取明膠110g加水浸泡溶脹，加甘油45g和適量防腐劑加熱混合均勻，作為膠囊殼材料。另取橄欖油260g與蜂蠟17g加熱融化，加入黃芩苷144g和上述柴胡總皂苷，過膠體磨，再入莪術油10g和上述富集有柴胡揮發油的橄欖油，混合均勻，制成軟膠膠囊1000粒，即得所述的膠囊劑。
實施例6取莪術200g和柴胡2000g，粉碎，裝入常規的水蒸氣蒸餾器中，以普通的油水分離器作為蒸餾液收集裝置，并在其中的下層裝入適量水，上層裝入大豆油30g，經水蒸氣蒸餾提取5小時，分離收集上述裝置中的油相層，得富集有莪術油和柴胡揮發油的大豆油，預熱至80℃，加入到PEG-6000熔融液中，攪拌混勻，在滴丸機中制成1000粒滴丸，即為所述的丸劑型藥物。
以莪術油注射液(0.1g莪術油/250ml)與含柴胡揮發油的商品柴胡注射液(1g柴胡藥材/ml)配制成不同比例形式的本發明藥物組合物作為試驗藥物，以病毒唑為陽性對照藥物，進行抗病毒作用的藥效學試驗。經預試驗顯示，莪術油注射液與柴胡注射液對RSV病毒的半數有效濃度分別為0.005mg/ml和0.5mg/ml，以10倍上述半數有效濃度分別按1∶0(I)、4∶1(II)、2∶1(III)、1∶1(IV)、1∶2(V)、1∶4(VI)、1∶10(VII)和0∶1(VIII)的比例配制成本發明的各試驗藥物組，分別相當于莪術油/原料生藥柴胡重量比例為1/0、1/25、1/50、1/100、1/200、1/400、1/1000和0/1各組。
一、實驗方法采用組織細胞半數感染量(TCID50)的方法，根據藥物對細胞病變的抑制效果，以確定試驗藥物對HSV-I和RSV的抗病毒效果。
1.藥液配制用RPMI-1640對上述各試驗藥物進行對倍稀釋，稀釋倍數為1∶2、1∶4、1∶8、1∶16和1∶32。病毒唑的濃度分別為0.062，0.031，0.015和0.008mg/ml。
2.對Vero細胞和Hep-2細胞的最大無毒濃度測定在96孔細胞培養板的Vero單層細胞和Hep-2單層細胞中分別加入不同濃度的試驗藥物，置37℃和5％CO2培養箱中96小時，觀察細胞病變，測定其對Vero細胞和Hep-2單層細胞的最大無毒濃度。
3.對HSV-I病毒致Vero細胞病變的抑制試驗在96孔細胞培養板的Vero單層細胞內，每孔感染HSV-I 10TCID50(7LgTCID50)病毒液，2小時后傾去病毒液，每孔內再加入不同濃度的試驗藥物或病毒唑，培養96小時后觀察細胞病變。
4、對RSV病毒致Hep-2細胞病變的抑制試驗在96孔細胞培養板的Hep-2單層細胞內，每孔感染RSV 10TCID50(6LgTCID50)病毒液，2小時后傾去病毒液，每孔內再加入不同濃度的試驗藥物或病毒唑，培養96小時后觀察細胞病變。
二、實驗結果1.各試驗藥物對Vero細胞的最大無毒濃度，經CPE法測定均小于1∶2。正式藥物試驗中則采用小于1∶2的藥物進行體外抗病毒試驗。
2.各試驗藥物對HSV-I病毒致Vero細胞病變的抑制作用，對RSV病毒致Hep-2細胞病變的抑制作用。試驗結果如表1所示。其中，試驗藥物中的II～VII組為不同比例的本發明藥物組合物，I、VIII兩組分別為以單一莪術油和柴胡揮發油為有效成分的藥物組。
表1 不同組成的試驗藥物體外抗病毒作用
注“-”表示細胞無病變；“1+”約25％細胞發生病變、“2+”約50％細胞發生病變、“3+”約75％細胞發生病變，“4+”約100％細胞發生病變。
表1的試驗結果表明本發明藥物組各種組成比例的莪術油/柴胡組合物(II～VII)對HSV-1和RSV均具有顯著的抑制作用，且強于單獨使用形式的莪術油(I)和柴胡(VIII)，其中優選的比例為1∶1(IV)和1∶2(V)。
在上述試驗結果的基礎上，以上述IV組(莪術油/柴胡為1/100)組成形式的藥物為試驗藥物進行解熱作用的藥效學試驗。其中，莪術油為市售商品莪術油，符合中國藥典2005年版一部莪術油質量標準的規定；柴胡按實施例3的水蒸氣蒸餾方式提取柴胡揮發油，分別制成相應的乳劑型注射液。試驗藥物為柴胡注射乳劑(0.5g/ml)、莪術油注射乳劑(5mg/ml)、本發明組合物注射乳劑(0.5g柴胡、5mg莪術油/ml)。
取體重2.0-2.5kg的健康家兔，雌雄兼用，實驗前禁食2h，測量家兔正常體溫2次，相隔30min，選取體溫在38.3-39.3℃之間，且兩次體溫之差不超過0.2℃之家兔40只，隨機分為4組，每組8只。分別經耳緣靜脈注射三聯菌苗1ml/kg，當體溫升高1℃以上(約2h)時，1組肌注滅菌生理鹽水(4ml/kg)；2-4組分別肌注柴胡、莪術油和本發明藥物組合物注射乳劑各4ml/kg，于給藥后1、2、3、4、5小時測定動物體溫，記錄家兔體溫變化，結果見表2。
表2 解熱作用實驗結果(x±s)
與生理鹽水組比較*p＜0.05，**p＜0.01表2結果顯示，本發明組合物組對致熱家兔體溫有明顯的降溫作用，與生理鹽水(NS)空白對照組在5h內經t檢驗比較，有顯著性差異(p＜0.01)，而柴胡組與生理鹽水組在5h內經t檢驗比較，無顯著性差異(p＞0.05)，莪術油組與生理鹽水組在5h內經t檢驗比較，僅在2h和3h有明顯差異(p＜0.05)。上述試驗結果充分表明本發明藥物組合物(莪術油/柴胡)具有明顯的解熱作用，且顯示協同增效作用，優于單獨使用形式的莪術油和柴胡。
上述試驗結果清楚顯示，本發明有效藥用成分組成形式的上述藥物組合物在綜合的抗病毒和解熱作用方面，可具有顯著的協同增效作用，其結果明顯優于其中有效藥用成分莪術油和柴胡的單獨作用，因而具有令人滿意的開發前景和價值。
權利要求
1.具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物，其特征是以莪術油和至少含有柴胡揮發油的柴胡提取物成分為基本有效藥用成分，與藥物中可以接受的輔助添加成分共同組成，以所說有效藥用成分相應提取原料生藥重量份計的比例是莪術/柴胡為1/0.5～20。
2.如權利要求1所述的具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物，其特征是所說有效藥用成分中的柴胡提取物成分為柴胡揮發油，其中莪術油/柴胡生藥的重量份比例為1/25～1000。
3.如權利要求2所述的具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物，其特征是所說有效藥物成分中莪術油/柴胡生藥的重量份比例為1/50～400。
4.如權利要求3所述的具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物，其特征是所說有效藥物成分中莪術油/柴胡生藥的重量份比例為1/100～200。
5.如權利要求1所述的具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物，其特征是所說有效藥用成分中的柴胡提取物成分為與同一比例用量的柴胡生藥相當的柴胡揮發油和柴胡皂苷。
6.如權利要求1所述的具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物，其特征是所說的有效藥物成分中還有黃芩苷，其與柴胡生藥的重量份比為1/10～20。
7.如權利要求1至6之一所述的具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物，其特征是為口服制劑、注射劑、滴鼻劑、噴霧劑或氣霧劑。
8.制備如權利要求1所述的具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物的方法，按下列步驟進行a、將所說比例量的原料生藥莪術和柴胡以蒸餾方式提取揮發油成分，以藥物中可以接受的水不溶油性成分與水共同組成的兩相體系作為蒸餾液的收集介質；b、由提取揮發油后的柴胡剩余物提取柴胡皂苷；c、由a步收集介質中的揮發油成分，或由a步得到的揮發油成分和b步的柴胡皂苷成分為有效藥用成分，與藥物中可接受的輔助添加成分制備成相應的藥物制劑。
9.如權利要求8所述的制備方法，其特征是所說的揮發油提取為對原料生藥莪術和柴胡的混合物共同蒸餾的方式進行，蒸餾液收集介質中含有揮發油的混合油相成分無需分離直接用于c步制劑。
10.如權利要求8或9所述的制備方法，其特征是在所說的c步中還加入所說比例量的黃芩苷作為有效藥用成分。
全文摘要
具有抗病毒和解熱作用的藥物組合物及其制備方法。該藥物以莪術油和至少含有柴胡揮發油的柴胡提取物成分為基本有效藥用成分，與藥物中可以接受的輔助添加成分共同組成，以其相應提取原料生藥重量份計的有效藥用成分比例是莪術/柴胡為1/0.5～20。在此基礎上還可以添加黃芩苷作用有效藥物成分。
文檔編號A61K9/08GK1850258SQ20061002039
公開日2006年10月25日 申請日期2006年3月2日 優先權日2006年3月2日
發明者陳剛, 楊秀清, 周家明 申請人:成都厚發科技開發有限公司