專利名稱：RGD多肽接枝聚(羥基乙酸－L－賴氨酸－L－乳酸)/β－磷酸三鈣復合材料及其制備方法
技術領域：
本發明涉及組織工程中用于神經組織及骨組織缺損修復的生物材料，具體地指一種用于制作神經導管或多孔骨支架的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料，以及該復合材料的制備方法。
背景技術：
組織缺損，比如周圍神經缺損，是臨床上常見的損傷。傳統的治療方法主要是采用自體的神經、骨骼肌、血管、膜管等天然生物活性材料對其進行修復。但其缺點是需要二次手術，且自體生物活性材料的獲取量有限，修復后如果再缺血會產生塌陷，使組織再生不良和粘連，導致吸收疤痕組織增生等。同種異體神經移植也被應用，但其缺點是容易發生免疫反應，并且手術成功率較低。采用非天然生物材料如脫鈣骨管、尼龍纖維管、硅膠管、聚氨酯管等，也可以達到修復神經缺損的效果，但這些非天然生物材料不能被人體降解和吸收，需要二次手術取出，這又會對神經組織造成新的損傷。
為了解決上述難題，科研人員一直在努力尋找能有效誘導神經等組織缺損修復的生物降解材料。目前，用于制備神經導管的生物材料主要是一些可降解的天然高分子材料和合成高分子材料。天然高分子材料如膠原、纖維蛋白等，其特定的氨基酸序列使它們具有細胞識別信號，有利于細胞粘附，生物相容性和細胞親和性好，但缺點是生物降解性能和力學性能較差。合成高分子材料如聚羥基乙酸(PGA)、聚乳酸(PLA)、羥基乙酸和乳酸的共聚物(PLGA)等，其生物降解性能和力學性能都優于天然高分子材料，但其生物相容性、細胞親和性一般不如天然高分子材料，且其降解產物呈酸性，容易造成組織無菌性壞死。
發明內容
本發明的目的就是要提供一種既具有良好的生物相容性和細胞親和性、又具有良好的生物降解性和力學性能、還可以有效避免組織無菌性壞死的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料及其制備方法。
為實現上述目的，本發明所提出的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料，由β-磷酸三鈣顆粒和RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)兩相混合組成，其中RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的分子量為3～30萬，RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)中L-賴氨酸的摩爾含量為0.1％～5％，RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的分子結構式如下，式中X∶Y＝1∶10～1∶500， β-磷酸三鈣顆粒均勻地分散在RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的基體中間，β-磷酸三鈣顆粒與RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的重量比在1∶10～1∶100之間。
本發明的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料的制備方法，包括如下步驟1)首先將聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)與GRGDY短肽(甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-酪氨酸序列，Gly-Arg-Gly-Asp-Tyr)進行聚合反應，使GRGDY短肽中的RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列，Arg-Gly-Asp)接枝到聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)中的L-賴氨酸的側氨基上，生成RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)；2)然后將所生成的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶于有機溶劑中，并將β-磷酸三鈣顆粒加入到RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的有機溶液中，充分混合均勻；3)再采用真空干燥的方式，使上述有機溶劑揮發掉，最后獲得RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料。
上述聚(羥基乙酸L-賴氨酸L-乳酸)通過L-賴氨酸與α-羥基酸(羥基乙酸，L-乳酸)的共聚反應自行制備。具體地可以先將Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸與溴乙酰溴進行反應，合成單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮；再將該單體與L-丙交酯聚合，生成聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-L-乳酸)；最后將所得聚合物經過鈀/碳催化氫解脫芐氧羰基，生成聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)。
本發明充分利用了天然高分子材料和合成高分子材料本身固有的優點，將天然高分子材料與合成高分子材料有機地結合為一體，用RGD多肽進行接枝，然后將RGD多肽接枝的聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)與無機材料β-磷酸三鈣微粉顆粒進行復合。由于所復合的β-磷酸三鈣(β-Ca3(PO4)2，β-TCP)是一種具有良好生物相容性的生物降解陶瓷材料，可用于組織缺損的修復，將其復合到高分子降解材料中后，既可以增加所制作的神經導管的強度，又可以在降解過程中釋放出鈣離子(Ca2+)和磷酸根離子(PO43-)，其產物顯弱堿性，能中和高分子有機物降解產生的酸性，且鈣離子還是促使神經元生長必需的重要物質。而所接枝的多肽含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp，RGD)序列，能識別細胞，與細胞表面的受體結合，引導細胞粘連，提高細胞的粘附力。因而，本發明的復合材料既具有天然高分子良好的生物相容性和細胞親和性，有利于細胞粘附；又具有合成高分子材料良好的生物降解性能和力學性能；同時還可以改善高分子材料生物降解產生的酸性環境，有效避免組織無菌性壞死。非常適合作為制備神經導管或多孔骨支架的材料，用于神經組織及骨組織缺損的修復。
圖1為RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料的1000倍顯微結構示意圖；圖2為RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料的5000倍顯微結構示意圖。
具體實施例方式
以下結合附圖和具體實施例對本發明的復合材料及其制備方法作進一步的詳細描述實施例1本發明的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料的制備方法，包括如下步驟1)單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮的制備將50克Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸和50毫升三乙胺(Triethylamine，(C2H5)3N)加入到500毫升二氧六環(1，4-Dioxane，C4H8O2)中，在10～25℃的溫度條件下滴加30毫升溴乙酰溴(Bromoacetyl Bromide，BrCH2COBr)，用薄層色譜法(Thin Layer Chromatography，TLC)跟蹤反應，反應完畢后，用乙醚提取反應產物2次，合并提取液，再用水洗提取液2～3次，加入硫酸鈉干燥，真空回收溶劑，殘留產物用于下步反應。
將上述殘留產物在50～110℃的溫度條件下滴加到含39g NaHCO3的N，N-二甲基甲酰胺(N，N-Dimethylformamide，DMF)懸浮液1500ml中，用TLC跟蹤反應，反應完畢后，真空回收溶劑，用乙酸乙酯提取反應產物數次，合并提取液，用水洗提取液2～3次，然后加入硫酸鈉干燥，真空回收溶劑，得蠟狀固體，再將蠟狀固體溶于乙酸乙酯中，通過柱層析純化，真空蒸發洗脫液乙酸乙酯，得到單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮的粗品，最后用乙酸乙酯/正己烷重結晶，獲得單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮。
2)聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-L-乳酸)的制備按照摩爾比為1∶9分別稱取單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮10g和L-丙交酯40.5g，置于干凈的安培瓶中，然后注入濃度為30mg/ml的辛酸亞錫氯仿溶液5ml，抽真空使氯仿揮發，在酒精噴燈上將安培瓶熔斷封口，置于溫度為90～140℃的油浴中聚合12～72小時，生成聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-L-乳酸)。
3)聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的制備將聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-L-乳酸)20克溶于200ml氯仿中，經1克10％的鈀/碳催化氫解脫芐氧羰基，生成聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)。
4)RGD多肽接枝聚(羥基乙酸L-賴氨酸-L-乳酸)的制備將10克聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶于300毫升二氯甲烷(Methylene chloride，CH2Cl2)中，同時加入二甲亞砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)450毫升，再加入0.5～1.6克GRGDY短肽(甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-酪氨酸序列，Gly-Arg-Gly-Asp-Tyr，GRGDY)和0.5克N，N′-羰基二咪唑(N，N′-Carbonyldiimidazole，CDI)，在溫度為0～5℃的條件下反應3～5小時，真空回收二氯甲烷(CH2Cl2)，殘留液變渾濁后，再加入水，析出聚合物，經過濾和高真空干燥，得到分子量為3～15萬的目標聚合物——RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)，RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)中L-賴氨酸的摩爾含量為2％～5％。RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的分子結構式如下所示，式中X∶Y＝1∶10～1∶500，
5)β-磷酸三鈣顆粒的合成采用固相反應法制備β-磷酸三鈣(β-TCP)，即將34.4克CaHPO4·2H2O和10克CaCO3混合均勻后，直接在溫度940℃左右的條件下燒成制得β-磷酸三鈣粉末，然后將β-磷酸三鈣粉末加水球磨8～12小時，干燥后在有機溶劑無水乙醇中分散、分級、再干燥，選擇β-磷酸三鈣粒徑在0.05～2μm之間的顆粒備用。
6)RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)與β-磷酸三鈣顆粒復合將10克RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶于有機溶劑氯仿中，再將0.2克β-TCP顆粒加入到RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶液中，超聲波分散，充分混勻，待溶劑揮發后，形成RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-TCP復合體。
將所制備的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料置于1000倍和5000倍的電子顯微鏡下觀察，其微觀結構如圖2和圖3所示，由圖中可以看出β-磷酸三鈣顆粒比較均勻地分散在RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的基體中，β-磷酸三鈣顆粒的粒徑在0.05～2μm之間。
實施例21)單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮的制備將50克Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸和50毫升三乙胺加入到500毫升二氧六環中，在10～25℃的溫度條件下滴加30毫升溴乙酰溴，用TLC跟蹤反應，反應完畢后，用乙醚提取反應產物2次，合并提取液，再用水洗提取液2～3次，加入硫酸鈉干燥，真空回收溶劑，殘留產物用于下步反應。
將上述殘留產物在50～110℃的溫度條件下滴加到含39g NaHCO3的DMF懸浮液1500ml中，用TLC跟蹤反應，反應完畢后，真空回收溶劑，用乙酸乙酯提取反應產物數次，合并提取液，用水洗提取液2～3次，然后加入硫酸鈉干燥，真空回收溶劑，得蠟狀固體，再將蠟狀固體溶于乙酸乙酯中，通過柱層析純化，真空蒸發洗脫液乙酸乙酯，得到單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮的粗品，最后用乙酸乙酯/正己烷重結晶，獲得單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮。
2)聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-L-乳酸)的制備按照摩爾比為1∶19分別稱取單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮5g和L-丙交酯42.75g，置于干凈的安培瓶中，然后注入濃度為30mg/ml的辛酸亞錫氯仿溶液5ml，抽真空使氯仿揮發，在酒精噴燈上將安培瓶熔斷封口，置于溫度為90～140℃的油浴中聚合12～72小時，生成聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-L-乳酸)。
3)聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的制備將聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-L-乳酸)20克溶于200ml氯仿中，經1克10％的鈀/碳催化氫解脫芐氧羰基，生成聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)。
4)RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的制備將10克聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶于300毫升二氯甲烷中，同時加入450毫升DMSO，再加入0.2～0.6克GRGDY短肽和0.3克CDI，在溫度為0～5℃的條件下反應3～5小時，真空回收二氯甲烷，殘留液變渾濁后，再加入水，析出聚合物，經過濾和高真空干燥，得到分子量為5～25萬的目標聚合物——RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)，RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)中L-賴氨酸的摩爾含量為1％～2.5％。
5)β-磷酸三鈣顆粒的合成采用固相反應法制備β-磷酸三鈣(β-TCP)，即將34.4克CaHPO4·2H2O和10克CaCO3混合均勻后，直接在溫度940℃左右的條件下燒成制得β-磷酸三鈣粉末，然后將β-磷酸三鈣粉末加水球磨8～12小時，干燥后在有機溶劑無水乙醇中分散、分級、再干燥，選擇β-磷酸三鈣粒徑在0.05～2μm之間顆粒備用。
6)RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)與β-磷酸三鈣顆粒復合將10克RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶于有機溶劑氯仿中，再將0.5克β-TCP顆粒加入到RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶液中超聲波分散，充分混勻，待溶劑揮發后，形成RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-TCP復合體。
實施例31)單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮的制備將50克Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸和50毫升三乙胺加入到500毫升二氧六環中，在10～25℃的溫度條件下滴加30毫升溴乙酰溴，用TLC跟蹤反應，反應完畢后，用乙醚提取反應產物2次，合并提取液，再用水洗提取液2～3次，加入硫酸鈉干燥，真空回收溶劑，殘留產物用于下步反應。
將上述殘留產物在50～110℃的溫度條件下滴加到含39g NaHCO3的DMF懸浮液1500ml中，用TLC跟蹤反應，反應完畢后，真空回收溶劑，用乙酸乙酯提取反應產物數次，合并提取液，用水洗提取液2～3次，然后加入硫酸鈉干燥，真空回收溶劑，得蠟狀固體，再將蠟狀固體溶于乙酸乙酯中，通過柱層析純化，真空蒸發洗脫液乙酸乙酯，得到單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮的粗品，最后用乙酸乙酯/正己烷重結晶，獲得單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮。
2)聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-L-乳酸)的制備按照摩爾比為1∶49分別稱取單體3-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2，5-二酮2g和L-丙交酯44.2g，置于干凈的安培瓶中，然后注入濃度為30mg/ml的辛酸亞錫氯仿溶液5ml，抽真空使氯仿揮發，在酒精噴燈上將安培瓶熔斷封口，置于溫度為90～140℃的油浴中聚合12～72小時，生成聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-L-乳酸)。
3)聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的制備將聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-L-乳酸)20克溶于200ml氯仿中，經1克10％的鈀/碳催化氫解脫芐氧羰基，生成聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)。
4)RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的制備將10克聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶于300毫升二氯甲烷中，同時加入450毫升DMSO，再加入0.03～0.3克GRGDY短肽和0.1克CDI，在溫度為0～5℃的條件下反應3～5小時，真空回收二氯甲烷，殘留液變渾濁后，再加入水，析出聚合物，經過濾和高真空干燥，得到分子量為8～30萬的目標聚合物——RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)，RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)中L-賴氨酸的摩爾含量為0.1％～1％。
5)β-磷酸三鈣顆粒的合成采用固相反應法制備β-磷酸三鈣(β-TCP)，即將34.4克CaHPO4·2H2O和10克CaCO3混合均勻后，直接在溫度940℃左右的條件下燒成制得β-磷酸三鈣粉末，然后將β-磷酸三鈣粉末加水球磨8～12小時，干燥后在有機溶劑無水乙醇中分散、分級、再干燥，選擇β-磷酸三鈣粒徑在0.05～2μm之間顆粒備用。
6)RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)與β-磷酸三鈣顆粒復合將10克RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶于有機溶劑氯仿中，再將1克β-TCP顆粒加入到RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶液中超聲波分散，充分混勻，待溶劑揮發后，形成RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-TCP復合體。
權利要求
1.一種RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料，其特征在于該材料由β-磷酸三鈣顆粒和RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)兩相混合組成，其中RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的分子量為3～30萬，RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)中L-賴氨酸的摩爾含量為0.1％～5％，RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸L-乳酸)的分子結構式如下，式中X∶Y＝1∶10～1∶500， β-磷酸三鈣顆粒均勻地分散在RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的基體中間，β-磷酸三鈣顆粒與RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的重量比在1∶10～1∶100之間。
2.根據權利要求1所述的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料，其特征在于所說的β-磷酸三鈣顆粒的粒徑在0.05～2μm之間。
3.根據權利要求1或2所述的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料，其特征在于所說的β-磷酸三鈣顆粒與RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的重量比在1∶10～1∶50之間。
4.一種權利要求1所述的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料的制備方法，包括如下步驟1)首先將聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)與GRGDY短肽(甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-酪氨酸序列，Gly-Arg-Gly-Asp-Tyr)進行聚合反應，使GRGDY短肽中的RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列，Arg-Gly-Asp)接枝到聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)中的L-賴氨酸的側氨基上，生成RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)；2)然后將所生成的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶于有機溶劑中，并將β-磷酸三鈣顆粒加入到RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)的有機溶液中，充分混合均勻；3)再采用真空干燥的方式，使上述有機溶劑揮發掉，最后獲得RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料。
5.根據權利要求4所述的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料的制備方法，其特征在于所說的步驟1)中，將10克聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶于300毫升二氯甲烷中，同時加入450毫升二甲亞砜，再加入0.03～1.6克GRGDY短肽和0.1～0.5克N，N′-羰基二咪唑，在溫度為0～5℃的條件下反應3～5小時，真空回收二氯甲烷，殘留液變渾濁后，再加入水，析出聚合物，經過濾和高真空干燥，得到分子量為3～30萬的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)，RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)中L-賴氨酸的摩爾含量為0.1％～5％。
6.根據權利要求4所述的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料的制備方法，其特征在于所說的步驟2)中，有機溶劑為氯仿或乙酸乙酯中的一種。
7.根據權利要求4所述的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料的制備方法，其特征在于所說的步驟2)中，β-磷酸三鈣顆粒的粒徑在0.05～2μm之間。
8.根據權利要求4所述的RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)/β-磷酸三鈣復合材料的制備方法，其特征在于所說的步驟2)中，采用超聲波分散RGD多肽接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-L-乳酸)溶液中的β-磷酸三鈣顆粒。
全文摘要
一種RGD多肽接枝聚(羥基乙酸－L－賴氨酸－L－乳酸)/β－磷酸三鈣復合材料，由β－磷酸三鈣顆粒和RGD多肽接枝聚(羥基乙酸－L－賴氨酸－L－乳酸)兩相組成，β－磷酸三鈣顆粒均勻分散在RGD多肽接枝聚(羥基乙酸－L－賴氨酸－L－乳酸)基體中，兩者重量比為1∶10～1∶100。其制備方法是先將聚(羥基乙酸－L－賴氨酸－L－乳酸)與GRGDY短肽(甘氨酸－精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸－酪氨酸序列)進行聚合反應，生成RGD多肽接枝聚(羥基乙酸－L－賴氨酸－L－乳酸)，再將RGD多肽接枝聚(羥基乙酸－L－賴氨酸－L－乳酸)與β－磷酸三鈣顆粒復合即可。該復合材料既具有良好的生物相容性和細胞親和性，又具有良好的生物降解性和力學性能，還可以避免組織無菌性壞死，可作為神經導管或多孔骨支架材料，用于神經組織及骨組織缺損修復。
文檔編號A61L27/44GK1872355SQ20061001949
公開日2006年12月6日 申請日期2006年6月29日 優先權日2006年6月29日
發明者李世普, 韓穎超, 閆玉華, 萬濤, 王欣宇, 袁琳, 戴紅蓮, 嚴瓊姣 申請人:武漢理工大學