專利名稱：用于通過葡糖異生作用加速酒精代謝或從疲勞恢復的組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及用于通過葡糖異生作用加速酒精代謝或減輕疲勞的組合物，其包含咖啡因和絲氨酸、色氨酸或富含絲氨酸和/或色氨酸的肽作為活性成分。本發明的組合物特別適用于加速酒精代謝和/或減輕疲勞。
背景領域含酒精的飲料例如酒精飲料在放松人的心情，從而增進交流上是有效的。因此，其長期以來用于各種場合，例如宗教招待、典禮和聚會等。此外，酒精飲料不僅自身具有良好的味道，而且在改善膳食的味道、釋放壓力和保持健康上也具有有效的作用，因此許多人在其日常生活中喜好酒精飲料。
酒精飲料中包含的乙醇主要在肝臟中通過醇脫氫酶(ALD)的作用代謝成乙醛，乙醛進一步被醛脫氫酶(ALDH)代謝為乙酸。這兩種酶(ADH和ALDH)在各自的酶反應過程中需要氧化形式的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(在下文中稱為“NAD+”)。反應中所用的NAD+被還原成煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的還原形式(在下文中稱為“NADH”)(
圖1)。因此，當過量攝入乙醇時，NADH/NAD+的比率隨著乙醇的代謝而增加。結果，細胞內環境傾向于還原狀態，從而抑制了乙醇代謝的繼續進行。為了從過度還原狀態恢復過來，在細胞內進行了從丙酮酸至乳酸的反應，該反應伴隨著NADH至NAD+的氧化。從而體內乳酸對丙酮酸的比率增加，且對身體產生了負擔。特別是當攝入極其過量的乙醇時，血液乳酸水平大大增加，從而誘導了高乳酸血癥，已知該病癥很可能會導致酸中毒(學術界(academia))和高尿酸血癥。此外，當丙酮酸減少時，葡糖異生作用被阻止，其結果是不僅發生了酒精中毒性低血糖癥(alcoholic hypoglycermia)而且還降低了產生能量的三羧酸循環的循環。
已知和西方人相比，在黃種人包括日本人中，酒量小的人(lightdrinker)的比率高。這是因為具有不完全ALDH2功能的人的比率高，所述ALDH2是兩種ALDH類型中的一種，且其對乙醛具有更高的親和力。被稱為“酒量小的人”的人具有ALDH2*1/2(ND)(ALDH2等位基因中的一個喪失了其功能)的基因型，且其占了整個人口的大約30至40％。“不能耐受酒精的”人具有基因型ALDH2*1/1(DD)(ALDH2等位基因的兩個都喪失了其功能)，且其占了整個人口的大約10％。ND和DD基因型的人具有對酒精低耐受性的原因在于，盡管從酒精飲料中攝取的乙醇可被代謝直至乙醛，但乙醛(其是有毒性的并且導致不舒服的感覺例如“醉酒不適(drunken sickness)”和“宿醉”)在體內不容易被代謝。
從上述的背景可以看出，多年來強烈地想要開發出這樣的有用的組合物，該組合物使人能夠舒適地喝醉而不具有大的身體負擔和使人在攝入酒精飲料時適當地保持冷靜。為了滿足該愿望，許多研究者已開發了乙醇吸收抑制劑和乙醇代謝加速劑。例如，如下面所示，迄今已公開了氨基酸和肽對酒精代謝有效的發現。加速酒精代謝的氨基酸和肽的實例包括甘氨酸(日本專利公開(Kokai)號2003-116504)、D-半胱氨酸和/或其鹽(日本專利公開(Kokai)號3-74327)、賴氨酸(日本專利公開(Kokai)號6-116144)、通過玉米蛋白的酶解獲得的具有200至4000分子量的肽(日本專利公開(Kokai)號7-285881)和通過用蛋白酶處理豬肉獲得的經加工的豬肉產品(日本專利公開(Kokai)號11-276116)。抑制乙醛毒性的氨基酸和肽的實例包括L-半胱氨酸(Sprine H等人，Agents Actions(1975)第5卷164-173)、L-丙氨酸(日本專利公開(Kokai)號61-134313)、含有L-丙氨酸的二肽(日本專利公開(Kokai)號4-21635)和L-茶氨酸(日本專利公開(Kokai)號6-40901)。此外，抑制乙醛產生的氨基酸和肽的實例包括脯氨酸(日本專利公開(Kokai)號6-116144)。此外，具有抗酒精中毒(anti-alcoholism)作用的氨基酸和肽的實例包括丙氨酸和谷氨酰胺(日本專利公開(Kokoku)號4-20409)。然而，這些氨基酸和肽的作用主要是基于大量給動物施用的結果和基于不滿足科學、定量或統計學要求的人研究的結果來確認的。仍只有少數其作用通過劑量的方式確認的氨基酸或肽，人可在其日常生活中容易地攝入該劑量。
另一方面，也公開了包含從茶中提取的兒茶素和/或咖啡因作為主要成分的組分具有加速乙醇代謝的作用(日本專利公開(Kokai)號6-263648和8-169831)。從給小鼠施用的研究來看，證明必須以相對大的、達到300mg/kg體重的量施用從茶中提取的活性成分(主要是咖啡因)來顯著降低血液乙醇水平(Kakuda T等人Biosci.Biotech.Biochem.(1996)第60卷1450-1454)。此后進一步進行的研究顯示在以300mg/kg體重的量給小鼠施用咖啡因時胃中乙醇吸收抑制作用對觀察到的血液乙醇水平的降低有極大貢獻(日本專利公開(Kokai)號8-277221)。通過咖啡因降低血液乙醇的水平是個有趣的發現。然而，咖啡因的藥物可接受劑量和在小鼠中提供明顯變化的劑量有很大的不同。為了更明確地解釋，由成人吸收的想要的咖啡因的量是大約100至300mg/劑，且每天的咖啡因總量想要地是500mg或更低。給具有大約50kg平均體重的成年女性施用的咖啡因的安全劑量經計算為每天2至6mg/kg體重。此外，還未完全闡明咖啡因如何降低血液乙醇水平的機制。因此基于小鼠中的實驗結果計算人中咖啡因的有效量并不總是很容易的。關于安全劑量的咖啡因是否真正有效的問題仍未得到解決。
已知絲氨酸具有皮膚保濕作用和大腦的抗衰老作用。已知色氨酸在大腦中充當神經遞質的前體，從而其具有減輕抑郁癥的作用，以及安定藥、安眠藥、鎮靜劑和止痛劑的作用。已知天然存在的氨基酸(除了亮氨酸和賴氨酸以外)是已知參與葡糖異生作用的氨基酸(即，可轉化為葡萄糖的氨基酸)。然而，絲氨酸和色氨酸與咖啡因協同作用以在葡糖異生中選擇性地充當有效的底物，從而增進乙醇代謝的加速仍未知道。
發明內容
當將黃種人包括日本人和西方人比較時，酒量小的人的比率較高。因此，多年來強烈地想要開發出這樣的有用的組合物，該組合物使人在攝入酒精飲料時能夠舒適地喝醉而不會具有大的身體負擔。依賴于身體狀況和酒精飲料的量，甚至對于酒量大的人(harddrinkers)而言產生身體負擔和不舒適的感覺也不是罕見的事例。然而，迄今公開的幾乎所有組合物都有問題。其中一些必需大量施用而另一些在人中的實施效果上有問題。
本發明考慮到上述情況而實施并且涉及提供了這樣的具有安全劑量的活性成分的組合物，該組合物用于加速酒精代謝、當攝入酒精(即，乙醇)時減輕身體負擔或從疲勞恢復。
我們研究了當以3mg/kg體重的劑量攝入咖啡因時其的加速乙醇代謝的效果，該劑量在人的可接受攝入范圍之內。然而，沒有觀察到顯著的效果。因此，我們通過使用大鼠，研究了咖啡因的攝入對肝臟的作用，肝臟是參與乙醇代謝的主要器官。結果，基于在施用咖啡因的情況下基因表達的變化，我們發現特定的氨基酸例如絲氨酸和色氨酸的分解代謝加速。我們實際上測量了血液葡萄糖水平。基于該測量，估計從氨基酸至葡萄糖的葡糖異生作用和所述代謝系統(圖1)被加速。此外，證明了所述系列代謝系統(因為其伴隨著NADH至NAD+的轉化)在攝入乙醇時抑制NADH/NAD+的比率增加，從而平穩地代謝乙醇的可能性。基于這些發現，他們產生這樣的想法，即可通過將咖啡因和氨基酸(絲氨酸或色氨酸)組合來顯著地產生乙醇代謝加速的作用，且通過對人的研究證實了該想法，所述氨基酸在對于人是安全的劑量內沒有表現出明顯的乙醇代謝加速的作用。
因此，對人的研究顯示，即使分別地攝入安全劑量的咖啡因或氨基酸(絲氨酸)也沒有觀察到明顯的乙醇代謝加速的作用。然而，在同時攝入咖啡因和氨基酸的情況下，第一次觀察到血液乙醇水平的顯著降低的作用。此外，觀察到血液乙醛水平下降的趨勢。由此得出如下結論，因為加速了乙醇至乙酸的代謝，所以降低了血液乙醇的水平。此外，血液中的葡萄糖水平顯著增加，且NADH/NAD+的比率具有下降的趨勢。根據這些事實，推斷出葡糖異生作用的加速涉及乙醇代謝的加速。在相伴進行的主觀評估中，在乙醇攝入時具有“舒適感覺”的人數顯著增加。綜合考慮所有結果，組合包含安全劑量的咖啡因和有效量的絲氨酸或色氨酸的組合物是極其有利的，因為其一舉實現了在酒精攝入時“舒適的感覺”和身體負擔減輕的感覺的增加。此外，還認為加速乙醇代謝的作用導致預防“宿醉”和認為乙醛減少作用導致預防“醉酒不適”。要指出的是，進行徹底的研究以發現和咖啡因組合產生作用的氨基酸類型。結果，絲氨酸或色氨酸顯著有效(圖12)。
基于上述發現，我們現在已經發現酒精攝入時身體負擔的減輕和疲勞時低血糖癥的好轉可通過將咖啡因和氨基酸(絲氨酸或色氨酸)組合而獲得，所述咖啡因和氨基酸在對于人是安全的劑量(即，可接受范圍)內沒有表現出明顯的加速乙醇代謝的作用。
因此，本發明包括下列方面。
根據本發明的第一方面，提供了用于協同地加速體內酒精代謝和葡糖異生作用的組合物，其特征在于包含有效量的咖啡因和有效量的氨基酸和/或肽作為活性成分，所述氨基酸和/或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。
在一個實施方案中，本發明的組合物用于減輕由于酒精攝入產生的身體負擔和/或加速酒精代謝。
在另一個實施方案中，本發明的組合物包含咖啡因和絲氨酸作為活性成分。
在另一個實施方案中，本發明的組合物包含咖啡因和色氨酸作為活性成分。
在另一個實施方案中，本發明的組合物包含咖啡因以及絲氨酸和色氨酸的混合物作為活性成分。
在另一個實施方案中，富含絲氨酸的肽以50至100％的構成該肽的氨基酸的量包含絲氨酸殘基。
在另一個實施方案中，富含絲氨酸的肽是絲氨酰絲氨酸。
在另一個實施方案中，富含色氨酸的肽以50至100％的構成該肽的氨基酸的量包含色氨酸殘基。
在另一個實施方案中，富含絲氨酸的肽是色氨酰色氨酸。
在另一個實施方案中，富含絲氨酸/色氨酸的肽的絲氨酸殘基和色氨酸殘基的總數對應于50％至100％的構成該肽的氨基酸。
在另一個實施方案中，富含絲氨酸/色氨酸的肽是絲氨酰色氨酸或色氨酰絲氨酸。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是10mg或更多。
更具體地，咖啡因含量的實例包括，但不限于，每個組合物10mg或更多、20mg或更多、30mg或更多、40mg或更多、50mg或更多、60mg或更多、70mg或更多、80mg或更多、90mg或更多、100mg或更多、110mg或更多、120mg或更多、130mg或更多、140mg或更多、150mg或更多、170mg或更多、200mg或更多、230mg或更多、250mg或更多、270mg或更多、300mg或更多、330mg或更多、350mg或更多、400mg或更多、或450mg或更多。
在另一個實施方案中，每個組合物中咖啡因的含量在人的可接受攝入范圍之內。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是每個組合物500mg或更少。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是每個組合物50mg至500mg。
在另一個實施方案中，氨基酸的含量是每個組合物100mg或更多。
在另一個實施方案中，氨基酸的含量是每個組合物100mg至20g。
在另一個實施方案中，肽的含量是每個組合物100mg或更多。
在另一個實施方案中，按游離的絲氨酸計算，本發明的組合物的絲氨酸的含量是每個組合物500mg或更多。
在另一個實施方案中，按游離的絲氨酸計算，本發明的組合物的絲氨酸的含量是每個組合物1g或更多。
在另一個實施方案中，本發明的組合物是飲料或食物或藥物。
在另一個實施方案中，所述飲料或食物是如上所述含有咖啡因和絲氨酸的氨基酸飲料。
根據本發明的第二方面，提供了包含500mg或更少的咖啡因和100mg或更多的由至少2種組分組成的組合的組合物，所述組分選自絲氨酸或富含絲氨酸的肽、色氨酸或富含色氨酸的肽和富含絲氨酸/色氨酸的肽。
在一個實施方案中，按游離的絲氨酸計算，組合中的絲氨酸的含量是每個組合物100mg或更多。
在另一個實施方案中，按游離的絲氨酸計算，組合中的絲氨酸的含量是每個組合物500mg或更多。
在另一個實施方案中，按游離的絲氨酸計算，組合中的絲氨酸的含量是每個組合物1g或更多。
在另一個實施方案中，本發明的組合物是飲料或食物或藥物。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是10至500mg。
更具體地，咖啡因含量的實例包括，但不限于，每個組合物10mg或更多、20mg或更多、30mg或更多、40mg或更多、50mg或更多、60mg或更多、70mg或更多、80mg或更多、90mg或更多、100mg或更多、110mg或更多、120mg或更多、130mg或更多、140mg或更多、150mg或更多、170mg或更多、200mg或更多、230mg或更多、250mg或更多、270mg或更多、300mg或更多、330mg或更多、350mg或更多、400mg或更多、或450mg至500mg(包括兩者)。
在另一個實施方案中，將根據第一方面的關于活性成分的含量和類型的所有實施方案都應用于本發明。
根據本發明的第三方面，提供了包含500mg或更少的咖啡因和100mg或更多的富含絲氨酸/色氨酸的肽的組合物。
在一個方面，本發明的組合物是飲料或食物或藥物。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是10至500mg。
更具體地，咖啡因含量的實例包括，但不限于，每個組合物10mg或更多、20mg或更多、30mg或更多、40mg或更多、50mg或更多、60mg或更多、70mg或更多、80mg或更多、90mg或更多、100mg或更多、110mg或更多、120mg或更多、130mg或更多、140mg或更多、150mg或更多、170mg或更多、200mg或更多、230mg或更多、250mg或更多、270mg或更多、300mg或更多、330mg或更多、350mg或更多、400mg或更多、或450mg至500mg(包括兩者)。
在另一個實施方案中，將根據第一方面的關于活性成分的含量和類型的所有實施方案都應用于本發明。
根據本發明的第四方面，提供了用于減輕疲勞的組合物，其特征在于包含有效量的咖啡因和有效量的氨基酸和/或肽作為活性成分，所述氨基酸和/或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。
在一個實施方案中，本發明的組合物用于減輕由于酒精攝入發生的身體負擔。
在另一個實施方案中，本發明的組合物用于減輕由于低血糖癥發生的疲勞。
在另一個實施方案中，本發明的組合物包含咖啡因和絲氨酸作為活性成分。
在另一個實施方案中，本發明的組合物是飲料或食物或藥物。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是10mg或更多。
更具體地，咖啡因含量的實例包括，但不限于，每個組合物10mg或更多、20mg或更多、30mg或更多、40mg或更多、50mg或更多、60mg或更多、70mg或更多、80mg或更多、90mg或更多、100mg或更多、110mg或更多、120mg或更多、130mg或更多、140mg或更多、150mg或更多、170mg或更多、200mg或更多、230mg或更多、250mg或更多、270mg或更多、300mg或更多、330mg或更多、350mg或更多、400mg或更多、或450mg或更多。
在另一個實施方案中，將根據第一方面的關于活性成分的含量和類型的所有實施方案都應用于本發明。
根據本發明的第5個實施方案，提供了用于加速酒精代謝的組合物，其特征在于包含有效量的咖啡因和有效量的氨基酸和/或肽作為活性成分，所述氨基酸和/或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。
在一個實施方案中，本發明的組合物包含咖啡因和絲氨酸、色氨酸或其混合物作為活性成分。
在另一個實施方案中，按游離的絲氨酸計算，本發明的組合物的絲氨酸的含量是每個組合物500mg或更多。
在另一個實施方案中，按游離的絲氨酸計算，本發明的組合物的絲氨酸的含量是每個組合物1g或更多。
在另一個實施方案中，本發明的組合物是飲料或食物或藥物。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是10mg或更多。
更具體地，咖啡因含量的實例包括，但不限于，每個組合物10mg或更多、20mg或更多、30mg或更多、40mg或更多、50mg或更多、60mg或更多、70mg或更多、80mg或更多、90mg或更多、100mg或更多、110mg或更多、120mg或更多、130mg或更多、140mg或更多、150mg或更多、170mg或更多、200mg或更多、230mg或更多、250mg或更多、270mg或更多、300mg或更多、330mg或更多、350mg或更多、400mg或更多、或450mg或更多。
在另一個實施方案中，將根據第一方面的關于活性成分的含量和類型的所有實施方案都應用于本發明。
根據本發明的第6方面，提供了以離散的包裝組合包含第一組合物和第二組合物的組合物組，所述第一組合物包含500mg或更少的咖啡因，且所述第二組合物包含100mg或更多的絲氨酸、色氨酸或其混合物。
在一個實施方案中，第二組合物的絲氨酸含量是500mg或更多。
在另一個實施方案中，第二組合物中的絲氨酸的含量是1g或更多。
在另一個實施方案中，本發明的組合物是飲料或食物或藥物。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是10至500mg。
更具體地，咖啡因含量的實例包括，但不限于，每個組合物10mg或更多、20mg或更多、30mg或更多、40mg或更多、50mg或更多、60mg或更多、70mg或更多、80mg或更多、90mg或更多、100mg或更多、110mg或更多、120mg或更多、130mg或更多、140mg或更多、150mg或更多、170mg或更多、200mg或更多、230mg或更多、250mg或更多、270mg或更多、300mg或更多、330mg或更多、350mg或更多、400mg或更多、或450mg至500mg(包括兩者)。
在另一個實施方案中，將根據第一方面的關于活性成分的含量和類型的所有實施方案都應用于本發明。
根據本發明的第7方面，提供了包含咖啡因的飲料，其特征在于，按游離的絲氨酸和/或游離的色氨酸計算，其以每份飲料500mg或更多的有效量包含選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物的氨基酸和/或肽。
在一個實施方案中，所述飲料選自綠茶、紅茶、咖啡、可樂和可飲用的制劑。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是10mg或更多。
更具體地，咖啡因含量的實例包括，但不限于，每份飲料10mg或更多、20mg或更多、30mg或更多、40mg或更多、50mg或更多、60mg或更多、70mg或更多、80mg或更多、90mg或更多、100mg或更多、110mg或更多、120mg或更多、130mg或更多、140mg或更多、150mg或更多、170mg或更多、200mg或更多、230mg或更多、250mg或更多、270mg或更多、300mg或更多、330mg或更多、350mg或更多、400mg或更多、或450mg或更多。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是10mg至500mg，包括兩者。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是50mg至500mg，包括兩者。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是100mg至500mg，包括兩者。
在另一個實施方案中，咖啡因的含量是150mg至500mg，包括兩者。
在另一個實施方案中，富含絲氨酸的肽和富含色氨酸的肽分別以50％至100％的構成所述肽的氨基酸的量包含絲氨酸殘基和色氨酸殘基。
在另一個實施方案中，富含絲氨酸/色氨酸的肽的絲氨酸殘基和色氨酸殘基的總數對應于50％至100％的構成所述肽的氨基酸。
在另一個實施方案中，按游離的絲氨酸和/或游離的色氨酸計算，本發明的組合物中的氨基酸和/或肽的含量是每個組合物1g或更多。
在另一個實施方案中，按游離的絲氨酸和/或游離的色氨酸計算，本發明的組合物中的氨基酸或肽或其混合物的含量是每個組合物500mg至20g。
根據本發明的第8方面，還提供了用于加速酒精代謝或減輕疲勞的和含有咖啡因的飲料混合的組合物，其特征在于，按游離的絲氨酸和/或游離的色氨酸計算，以每劑100mg或更多、優選地500mg或更多的量加入選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物的氨基酸和/或肽(作為補充物)。
在一個實施方案中，所述組合物是以上述量含有絲氨酸和/或富含絲氨酸的肽的糖、乳或檸檬汁。
在另一個實施方案中，富含絲氨酸的肽和富含色氨酸的肽分別以50％至100％的構成所述肽的氨基酸的量包含絲氨酸殘基和色氨酸殘基。
在另一個實施方案中，富含絲氨酸/色氨酸的肽的絲氨酸殘基和色氨酸殘基的總數對應于50％至100％的構成該肽的氨基酸。
在另一個實施方案中，按游離的絲氨酸和/或游離的色氨酸的計算，本發明的組合物中的氨基酸和/或肽的含量是每個組合物1g或更多。
在另一個實施方案中，按游離的絲氨酸和/或游離的色氨酸的計算，本發明的組合物中的氨基酸或肽或其混合物的含量是每個組合物500mg至20g。
在另一個實施方案中，含有咖啡因的飲料以大約10mg或更多的量包含咖啡因。
更具體地，含咖啡因的飲料中咖啡因含量的實例包括，但不限于，每個組合物10mg或更多、20mg或更多、30mg或更多、40mg或更多、50mg或更多、60mg或更多、70mg或更多、80mg或更多、90mg或更多、100mg或更多、110mg或更多、120mg或更多、130mg或更多、140mg或更多、150mg或更多、170mg或更多、200mg或更多、230mg或更多、250mg或更多、270mg或更多、300mg或更多、330mg或更多、350mg或更多、400mg或更多、或450mg或更多。
本發明的有利方面本發明的組合物組合包含咖啡因(以人的可接受的攝入范圍內的量)和有效量的絲氨酸、色氨酸和富含絲氨酸/色氨酸的肽。基于此，所述組合物在酒精攝入時不停地產生加速從乙醇至乙酸的反應的有利作用；同時，加速葡糖異生作用，從而提高酒精代謝，且在酒精攝入時減輕身體負擔(例如，不舒適的感覺、虛脫(collapse)等)，以及增加“舒適的醉酒(drunkenness)”或“舒適的感覺”。這些有利的效果歸因于在加速乙醇代謝的葡糖異生作用代謝系統中發生的NADH至NAD+的轉化的貢獻。
本發明的組合物加速葡糖異生作用，從而其有效地恢復低血糖癥和減輕疲勞。
本說明書整合了日本專利申請號2004-123427的說明書和/或附圖中描述的內容，基于所述內容本申請要求優先權。
附圖簡述圖1顯示酒精代謝和葡糖異生作用相互之間協同作用中的代謝關系；圖2A顯示大鼠中施用咖啡因后血液葡萄糖水平的增加；圖2B顯示咖啡因產生的基因表達的改變，其中TDO表示色氨酸2，3-雙加氧酶基因，SDS表示絲氨酸脫水酶基因，且ALT表示丙氨酸轉氨酶基因(數據表示為平均值±SD)；圖3顯示大鼠中通過施用咖啡因+絲氨酸產生的血液乙醇水平的降低(數據表示為平均值±SE)；圖4顯示在對人的研究中絲氨酸(A)、咖啡因(B)和咖啡因+絲氨酸(C)對血液乙醇水平的作用(數據表示為平均值±SE)；圖5顯示在對人的研究中絲氨酸(A)、咖啡因(B)和咖啡因+絲氨酸(C)對血液乙醛水平的作用(數據表示為平均值±SE)；圖6顯示在對人的研究中絲氨酸(A)、咖啡因(B)和咖啡因+絲氨酸(C)對血液乙酸水平的作用(數據表示為平均值±SE)；圖7顯示在對人的研究中通過施用咖啡因+絲氨酸產生的血液乳酸/丙酮酸比率的降低(數據表示為平均值±SE)；圖8顯示在對人的研究中絲氨酸(A)、咖啡因(B)和咖啡因+絲氨酸(C)對血液葡萄糖水平的作用(數據表示為平均值±SE)；圖9顯示在對人的研究中通過施用咖啡因+絲氨酸對飲酒后醉酒(drunkenness)的主觀評估的結果(數據表示為平均值±SE)；圖10顯示在對人的研究中通過施用咖啡因+絲氨酸對飲酒后舒適和不舒適的感覺的主觀評估的結果(數據表示為平均值±SE)；圖11顯示通過在大鼠中施用咖啡因+色氨酸產生的血液乙醇水平的降低(數據表示為平均值±SE)；圖12顯示通過在大鼠中施用咖啡因和各種類型氨基酸中的每一個產生的血液乙醇水平的變化(數據表示為平均值±SD)；圖13顯示在對人(NN)的研究中咖啡因+絲氨酸的乙醇代謝加速作用，其中圖13A顯示血液乙醇水平隨時間推移的變化；圖13B顯示血液乙醛水平隨時間推移的變化；圖13C顯示血液乙酸水平隨時間推移的變化；和圖13D顯示乳酸/丙酮酸比率隨時間推移的變化(數據表示為平均值±SE)；圖14顯示當經口施用咖啡因+絲氨酸時相對的血液乙醇水平(數據表示為平均值±SD)；
圖15顯示在人(ND)中在乙醇攝入后施用的咖啡因+絲氨酸的乙醇代謝加速使用，其中圖15A顯示血液乙醇水平隨時間推移的變化；圖15B顯示血液乙醛水平隨時間推移的變化；圖15C顯示血液乙酸水平隨時間推移的變化；和圖15D顯示乳酸/丙酮酸的比率隨時間推移的變化(數據表示為平均值±SE)；圖16顯示在人(NN)中在乙醇攝入后施用的咖啡因+絲氨酸的乙醇代謝加速作用，其中圖15A顯示血液乙醇水平隨時間推移的變化；圖15B顯示血液乙醛水平隨時間推移的變化；圖15C顯示血液乙酸水平隨時間推移的變化；和圖15D顯示乳酸/丙酮酸的比率隨時間推移的變化(數據表示為平均值±SE)；圖17顯示在人中在飲酒前服用咖啡因+絲氨酸時，宿醉的減輕作用，其中圖17A顯示總的評分；圖17B顯示覺醒(awakening)的調查結果；圖17C頭痛，圖17D喪失食欲，圖17E胃部不適(upsetstomach)，和圖17F口渴；圖18顯示在人中在飲酒后服用咖啡因+絲氨酸時，宿醉的減輕作用，其中圖18A顯示總的評分；圖18B顯示覺醒的調查結果；圖18C頭痛，圖18D喪失食欲，圖18E胃部不適，和圖18F口渴；和圖19顯示在小鼠中通過施用咖啡因+絲氨酸從在疲勞時的低血糖癥恢復的效果。
實施本發明的最佳模式根據本發明的一個方面，提供了通過體內葡糖異生作用加速酒精代謝或減輕疲勞的組合物，其特征在于包含有效量的咖啡因和有效量的氨基酸或肽作為活性成分，所述氨基酸或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。
用于本發明的咖啡因包括3，7-二氫-1，3，7-三甲基-1H-嘌呤-2，6-二酮、其酸式鹽和其水合物。在本說明書中，其統稱為咖啡因。所述酸式鹽是指藥物可接受的酸(包括無機酸例如鹽酸、硫酸和檸檬酸，和有機酸)的鹽。所述水合物通常稱為咖啡因水合物。此處可使用可商購獲得的咖啡因。本發明的組合物、組合物組和飲料中包含的咖啡因的量的實例包括10mg或更多、20mg或更多、30mg或更多、40mg或更多、50mg或更多、60mg或更多、70mg或更多、80mg或更多、90mg或更多、100mg或更多、110mg或更多、120mg或更多、130mg或更多、140mg或更多、150mg或更多、170mg或更多、200mg或更多、230mg或更多、250mg或更多、270mg或更多、300mg或更多、330mg或更多、350mg或更多、400mg或更多、450mg或更多和500mg或更多。優選的咖啡因的量在人的可接受攝入范圍之內，更具體地，按無水咖啡因的重量計算大約500mg或更少，例如，大約10至500mg、大約20至500mg、大約30至500mg、大約40至500mg，優選地大約50至500mg、大約100至500mg、大約150至500mg或大約200至500mg，更優選地，大約50至300mg，且最優選地大約100至300mg(日本藥典(the Japanese Pharmacopoeia)，第13修定版(1996)，由Hirokawa Shoten出版；RemingtonThe Science andPractice of Pharmacy，第19版(1995)，Mack Publishing Company，美國)。咖啡因用作藥物，例如中樞神經系統刺激劑、利尿劑、止痛劑(偏頭痛)、用于治療高血壓性頭痛(hypertensive headaches)的藥物，且被列為危險毒品。成人中咖啡因的半致死劑量是5至10g，且兒童中為3g。然而，據認為一次攝入1g或更多的咖啡因導致神經系統和心血管系統的急性中毒癥狀，例如虛脫、頭暈和心律不齊。因此，優選地以不超過日本藥典等批準的上限的劑量使用咖啡因。
此處所用的短語“人的可接受的攝入范圍內的量”是指不超過由各個國家的國立衛生研究院(National Institute of Health)批準的最大咖啡因劑量的量。更具體地，最大咖啡因劑量是，例如，500mg(RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy，第19版(1995)，Mack Publishing Company，美國)。
此處所用的術語“有效量”是指通過體內葡糖異生作用加速酒精代謝或減輕疲勞的量。術語“酒精代謝”可和術語“乙醇代謝”互換使用。
當以可接受的攝入范圍內的量單獨服用咖啡因時，沒有觀察到酒精代謝的加速(參見圖4B)。然而，當除了以可接受的攝入范圍內的量服用咖啡因外還服用有效量的絲氨酸或色氨酸時，在酒量大的人(基因型ALDH2*2/2(NN))中或在酒量小的人(基因型ALDH2*1/2(ND))中，酒精代謝加速且血液乙醇水平降低(參見，圖4C、13A、15A和16A)。同時，血液葡萄糖水平增加，且乳酸/丙酮酸比率降低。因此，由飲酒造成的低血糖癥得到好轉，并且可產生對疲勞的減輕作用(參見圖7、8、13D、15D和16D)。結果，攝入酒精時，舒適的感覺顯著增加。換句話說，由飲酒導致的身體負擔為零或得到減輕(參見圖17和18)。如圖1中所示，假定酒精代謝和葡糖異生作用相互之間協同加速并且NADH和NAD+的轉化有效地進行，結果是酒精代謝加速。此處所用的術語“相互之間協同”是指這樣的狀態，即在該狀態下，酒精代謝途徑和葡糖異生作用途徑由于偶聯而協同加速酒精代謝系統。
因此，本發明的組合物可用于在酒精攝入(或飲酒)時加速酒精代謝或減輕身體負擔，或減輕疲勞。即使在攝入酒精之前、期間和之后的任一時間點上服用本發明的組合物，其也可產生上述作用。此外，可將本發明的組合物配制成飲料或食品或藥物。
本發明中所用的“加速酒精代謝的”是指不停地加速乙醇至乙酸的代謝。由于酒精代謝的加速，可明顯地減輕身體負擔，例如在飲酒期間和之后引起的不舒適的感覺和虛脫，從而顯著地增加舒適感覺的程度。“減輕由飲酒引起的疲勞”是指血液乳糖水平的降低或減輕低血糖癥，從而減輕身體負擔，如顯示血液中乳糖/丙酮酸的比率降低(參見圖7、13D、15D和16D)和顯示血液葡萄糖水平的增加(參見圖8和19)的圖中所示的。
本發明的組合物包含有效量的咖啡因和有效量的的氨基酸或肽，所述氨基酸或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。
絲氨酸和色氨酸各自是這樣類型的氨基酸，且可能用作導向產生葡萄糖的代謝系統(即，葡糖異生)的底物。在該代謝系統中，因為所述系統伴隨著NADH至NAD+的轉化，所以其不停地加速了酒精代謝。在本發明的實施方案中，本發明的組合物可包含選自咖啡因和絲氨酸、咖啡因和色氨酸以及咖啡因和絲氨酸和色氨酸的混合物的組合中的任一組合。色氨酸可以是游離的色氨酸或色氨酸的鹽和藥物可接受的酸(例如，色氨酸·HCl)。氨基酸或其混合物的含量并不受到具體的限定，只要其適合用于顯著地和協同地加速酒精代謝和葡糖異生作用；然而，其是，例如，大約100mg或更多、大約200mg或更多、大約300mg或更多、大約400mg或更多、大約500mg或更多、大約600mg或更多、大約700mg或更多、大約800mg或更多、大約900mg或更多、大約1g或更多、大約100mg至20g、大約300mg至20g、大約500mg至20g、大約1g至20g、大約1.5g至20g、大約2g至20g、大約3g至20g、大約4g至20g、大約5g至20g、大約6g至20g、大約7g至20g、大約8g至20g、大約9g至20g、大約10g至20g、大約12g至20g、大約14g至20g、大約16g至20g和大約18g至20g。然而，絲氨酸和色氨酸，其是構成飲料或食品中包含的蛋白的氨基酸并且是極其安全的，因此可以每次以超過20g的量服用。絲氨酸和色氨酸的混合比率不受到特定的限定，且任何比率都可接受。絲氨酸和色氨酸可商購獲得，并且可以以其在本發明的組合物中存在的形式使用。
在本發明中，可使用以高比率(例如，大約10％至100％、大約20％至100％、大約25％至100％、大約30％至100％、大約40％至100％、大約50％至100％、大約70％至100％、大約80％至100％或大約90％至100％)包含絲氨酸殘基和/或色氨酸殘基的肽，例如富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽和富含絲氨酸/色氨酸的肽。這樣的肽的實例包括以高比率包含絲氨酸和/或色氨酸殘基的寡肽、多肽、蛋白和蛋白的水解產物或蛋白酶消化產物。這樣的肽和蛋白的水解產物或蛋白酶消化產物可在消化道內或在吸收入身體中(具體是在血液中)后通過酶促作用分解直至氨基酸。用于本發明的肽的實例包括，但不限于，二肽、寡肽例如三肽和四肽、多肽、蛋白和蛋白水解的產物，優選地寡肽，和更優選地二肽。二肽的實例包括絲氨酰絲氨酸(Ser-Ser)、色氨酰色氨酸(Trp-Trp)、絲氨酰色氨酸(Ser-Trp)和色氨酰絲氨酸(Trp-Ser)。富含絲氨酸的蛋白的實例包括絲膠蛋白(來源于蠶)。作為用于本發明的肽，可使用商購獲得的肽。可選擇地，可通過單獨地使用常規肽合成方法、從天然存在的產物中提取/純化的方法、基因工程的方法和酶促蛋白水解的方法(例如，新生物化學實驗課程1，第I、V和VI卷，和新生物化學實驗課程2，第III卷，由日本生物化學協會(Japanese biochemical society)編著)或通過其合適的組合來制備用于本發明的肽。本發明的組合物中的肽的含量不受具體的限制，然而，其是，例如，大約100mg或更多、大約200mg或更多、大約300mg或更多、大約400mg或更多、大約500mg或更多、大約600mg或更多、大約700mg或更多、大約800mg或更多、大約900mg或更多、大約1g或更多、大約100mg至20g、大約300mg至20g、大約500mg至20g、大約1g至20g、大約1.5g至20g、大約2g至20g、大約3g至20g、大約4g至20g、大約5g至20g、大約6g至20g、大約7g至20g、大約8g至20g、大約9g至20g、大約10g至20g、大約12g至20g、大約14g至20g、大約16g至20g、大約18g至20g或大約20g或更多。按游離的絲氨酸和/或游離的色氨酸的總重量計算，肽的含量是大約100mg或更多、大約200mg或更多、大約300mg或更多、大約400mg或更多、大約500mg或更多、大約600mg或更多、大約700mg或更多、大約800mg或更多、大約900mg或更多或大約1g或更多。
根據本發明的優選的實施方案，按游離的絲氨酸計算，本發明的組合物中的絲氨酸的含量是每個組合物500mg或更多。
根據本發明的另一個優選的實施方案，按游離的絲氨酸計算，本發明的組合物中的絲氨酸的含量是每個組合物1g或更多。
根據本發明的另一個方面，提供了減輕疲勞的組合物，其特征在于包含有效量的咖啡因和有效量的氨基酸或肽作為活性成分，所述氨基酸或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。
根據本發明的一個實施方案，提供了減輕疲勞的組合物，該組合物包含有效量的咖啡因和有效量的絲氨酸作為活性成分。用作活性成分的氨基酸和咖啡因的含量和類型和上面描述的相同。因為本發明的組合物包含氨基酸或肽和咖啡因作為活性成分，所以其可用于改善如上所述的低血糖癥。本發明的組合物優選地是飲料或食物或藥物。疲勞是由身體活動、體育運動、壓力、缺乏睡眠和疾病(例如，變應性病癥、傳染病、癌癥等)導致的在身體中發生的生物學反應。本發明的組合物可用于使身體從疲勞恢復和減輕日常生活中發生的疲勞或減輕由于酒精攝入引起的身體負擔(虛脫)。
本發明還提供了這樣的組合物，該組合物包含大約500mg或更少的有效量的咖啡因和大約100mg或更多的有效量的由至少2種這樣的成分組成的組合，所述成分選自絲氨酸或富含絲氨酸的肽、色氨酸或富含色氨酸的肽以及富含絲氨酸/色氨酸的肽。組合物的用途不受具體的限制，然而，組合物可用作飲料或食物或藥物。用作活性成分的氨基酸和咖啡因的含量和類型和上面描述的相同。組合物的實例包括含有咖啡因以及絲氨酸和色氨酸的混合物的組合物、包含咖啡因以及絲氨酸和富含色氨酸的肽(例如，Trp-Trp二肽)的混合物的組合物、包含咖啡因以及色氨酸和富含絲氨酸的肽(例如，Ser-Ser二肽)的混合物的組合物、包含咖啡因以及絲氨酸和富含絲氨酸/色氨酸的肽(例如，Ser-Trp或Trp-Ser二肽)的混合物或色氨酸和富含絲氨酸/色氨酸的肽(例如，Ser-Trp或Trp-Ser二肽)的混合物的組合物。按游離的絲氨酸和/或游離的色氨酸的總重量計算，每個組合物中上述氨基酸和肽的總量是大約100mg或更多、大約200mg或更多、大約300mg或更多、大約400mg或更多、大約500mg或更多、大約600mg或更多、大約700mg或更多、大約800mg或更多、大約900mg或更多和大約1g或更多，更具體地為大約100mg至20g、大約300mg至20g、大約500mg至20g、大約1g至20g、大約1.5g至20g、大約2g至20g、大約3g至20g、大約4g至20g、大約5g至20g、大約6g至20g、大約7g至20g、大約8g至20g、大約9g至20g、大約10g至20g、大約12g至20g、大約14g至20g、大約16g至20g、大約18g至20g或大約20g或更多。此外，每個組合物的咖啡因的量優選地在人的可接受攝入范圍之內，更具體地，大約500mg或更少，例如，大約10至500mg、大約20至500mg、大約30至500mg、大約40至500mg，優選地，大約50至500mg，更優選地，大約50至300mg，且最優選地，大約100至300mg。
根據本發明的優選的實施方案，按游離的絲氨酸計算，上述組合中包含的絲氨酸的含量是每個組合物100mg或更多。
根據本發明的另一個優選的實施方案，按游離的絲氨酸計算，上述組合中包含的絲氨酸的含量是每個組合物500mg或更多。
根據本發明的另一個優選的實施方案，按游離的絲氨酸計算，上述組合中包含的絲氨酸的含量是每個組合物1g或更多。
本發明還提供了包含咖啡因(500mg或更少)和富含絲氨酸/色氨酸的肽(大約100mg或更多)的組合物。所述咖啡因和富含絲氨酸/色氨酸的肽和上面定義的一樣。其類型和含量和上面提到的類型和含量相同。具體地，富含絲氨酸/色氨酸的肽以大約10％或更多至大約100％的肽的氨基酸組成的比率包含絲氨酸和色氨酸殘基，且包括寡肽、多肽、蛋白和蛋白的水解產物或蛋白酶消化產物。按游離的絲氨酸和/或游離色氨酸的總重量計算，每個組合物中富含絲氨酸/色氨酸的肽的總量是大約100mg或更多、大約200mg或更多、大約300mg或更多、大約400mg或更多、大約500mg或更多、大約600mg或更多、大約700mg或更多、大約800mg或更多、大約900mg或更多、大約1g或更多，更具體地，大約100mg至20g、大約300mg至20g、大約500mg至20g、大約1g至20g、大約1.5g至20g、大約2g至20g、大約3g至20g、大約4g至20g、大約5g至20g、大約6g至20g、大約7g至20g、大約8g至20g、大約9g至20g、大約10g至20g、大約12g至20g、大約14g至20g、大約16g至20g、大約18g至20g或大約20g或更多。此外，優選地每個組合物中咖啡因的量在人的可接受的攝入范圍之內，更優選地，大約500mg或更少，例如，大約10至500mg、大約20至500mg、大約30至500mg、大約40至500mg，優選地，大約50至500mg，更優選地，大約50至300mg，且最優選地，大約100至300mg。也可將組合物配制成飲料或食物或藥物。
本發明提供了加速酒精代謝的組合物，其特征在于包含有效量的咖啡因和有效量的氨基酸或肽作為活性成分，所述氨基酸或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。在其實施方案中，本發明的組合物可包含咖啡因、絲氨酸和色氨酸或其混合物作為活性成分。此外，所述組合物是飲料或食物或藥物。
根據本發明的優選的實施方案，按游離的絲氨酸計算，本發明的組合物中包含的絲氨酸的含量是每個組合物500mg或更多。
根據本發明的另一個優選的實施方案，按游離的絲氨酸計算，本發明的組合物中包含的絲氨酸的含量是每個組合物1g或更多。
本發明還提供了以離散的包裝組合包含第一組合物和第二組合物的組合物組，所述第一組合物以大約500mg或更少的有效量包含咖啡因，且所述第二組合物以大約100mg或更多的有效量包含絲氨酸、色氨酸或其混合物。本發明的組合物組的實例包括組合具有包含咖啡因的咖啡或茶(包括其飲料)和包含絲氨酸或色氨酸的糖的飲料或食物組，以及組合具有包含咖啡因的制劑和包含絲氨酸或色氨酸的制劑的藥物組。
根據本發明的優選的實施方案，上述第二組合物中包含的絲氨酸的含量是500mg或更多。
根據本發明的另一個優選的實施方案，上述第二組合物中包含的絲氨酸的含量是1g或更多。
本發明還提供了包含咖啡因的飲料，其特征在于每份飲料包含500mg或更多的絲氨酸。
本發明的飲料不受具體的限制，只要其包含咖啡因；然而，其可選自綠茶、紅茶、咖啡、可樂和可飲用的制劑。
根據本發明的優選的實施方案，咖啡因的含量是50mg至500mg(包括兩者)、100mg至500mg(包括兩者)或150mg至500mg(包括兩者)。
本發明的組合物可采用，但不限于，飲料或食物和藥物的形式。
飲料或食物的實例包括常規的或新的飲料或食物，例如經加工的谷類產品(例如，面包和年糕)、糖食(例如，巧克力、口香糖、糖果、西式糖食、日本糖食、小吃、大米糖食(rice confectionery))、飲料(例如，可飲用的制劑、酒精飲料包括蒸餾烈性高杯酒(distilledspirit highball)和雞尾酒等)、非酒精飲料例如咖啡、紅茶、綠茶、烏龍茶、可樂、瓜拉納飲料(guarana beverage)、運動飲料、汁、氨基酸飲料、蘇打飲料、姜黃茶(turmeric tea))、乳制品(例如，干酪、黃油、乳和冰淇淋等)、肉產品(例如，火腿、香腸)、魚產品(例如，蒸魚醬(steamed fish paste)、魚香腸(fish sausage))、補充物和健康食品，但不限于這些。優選的飲料或食物的實例包括飲用制劑(drinking preparations)、非酒精飲料和補充物。
當在補充物和健康食品中使用時，本發明的組合物可進一步包含至少一種選自除了絲氨酸和色氨酸以外的氨基酸(例如丙氨酸、甘氨酸、賴氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、脯氨酸和L-茶氨酸)、姜黃、芝麻素、牛奶薊(milk-thistle)、Densiti carrot(高麗參(Chinesegingseng))和牡蠣提取物等的成分。
在各飲料或食物的生產步驟中，在其中活性成分不發生變化的條件下，將上述劑量范圍內的咖啡因和絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽或其混合物和已知的用于人體的物質組合和飲料或食物混合或加入其中。
本發明的組合物和飲料還可包含載體、稀釋、賦形劑、增充劑、膠凝化劑、分散劑、懸浮劑和助溶劑，所述物質一般包含在飲料或食物中，且此外還包含，維生素、有機酸、增甜劑、pH調節劑、調味劑(flavor agent)、著色劑、穩定劑、礦質、調味品、防腐劑、濕潤劑、果汁、乳和增甜劑。
本發明的組合物和飲料中包含的活性成分的含量和上述的含量一樣。例如，具有體積例如每瓶30ml、50ml和100ml的可飲用的制劑在稀釋劑和添加劑的混合物中包含大約500mg或更少的有效量的咖啡因和大約100mg或更多的有劑量的氨基酸或肽。
此外，可通過將本發明的組合物裝入容器并將其密封來將飲料制備為所謂的“容器中的產品”。可通過包括制備本發明的組合物的步驟、對獲得的組合物進行滅菌的步驟和將滅菌的組合物裝入容器，然后進行密封的步驟的方法來生產這樣的飲料。容器的材料可包括，但不限于，金屬例如鋼和鋁、聚合物例如PET，和玻璃。容器的形狀可以是瓶子或罐等。密封材料的實例包括螺紋蓋(screwed cap)和罩蓋(cover cap)等。可通過一般用于飲料工業的滅菌方法例如加熱滅菌、過濾滅菌和UV滅菌中的任一種方法進行滅菌。
要指出的是，飲料的類型、形式和生產方法描述于由Kohrin，October 2003(Tokyo，日本)出版，現代軟飲料編輯委員會(update softdrinks editor committee)編著的“Soft drinks update”。對于本發明，其是可獲得的。用作補充物的片劑和顆粒的類型、形式和生產方法描述于例如由Hirokawa Shoten(July，1990)(Tokyo，日本)出版，ShunichNaito編著的“Tablets”；和由Ohmsha(March 1991)(Tokyo，日本)出版，粉末加工工業和工程學會(Association of Powder ProcessIndustry and Engineering)編著的“Granulation Landbook”。其對于本發明是可以獲得的。
藥物的實例包括酒精代謝加速劑或身體負擔減輕劑或用于減輕疲勞的藥物(或疲勞飲料(refresher))。制劑的實例包括片劑、丸劑、膠囊、粉末、顆粒、乳劑、溶液、懸浮液和糖漿。此外，這些制劑可包含藥物可接受的添加劑，例如載體、賦形劑、稀釋劑、防腐劑、濕潤劑、乳化劑、分散劑、穩定劑、崩解劑、著色劑、凋味劑和調味品。用作疲勞飲料的本發明的藥物可包含已知的試劑，例如維生素(例如，維生素B1)、中藥(例如，高麗參(Korean ginseng))、礦質(例如，Ca、Mg、Zn、Fe)、蜂王漿(royal jelly)、肉堿、輔酶Q10和牛磺酸等。具體地，為了在飲酒后減輕身體負擔，藥物可包含至少一種選自除了絲氨酸和色氨酸外的氨基酸(例如丙氨酸、甘氨酸、賴氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、脯氨酸和L-茶氨酸)、姜黃、芝麻素、牛奶薊、Densiti carrot(高麗參)和牡蠣提取物等的成分。優選的藥物形式的實例包括裝入小體積的瓶容器中的液體，即所謂的可飲用的制劑。作為施用方法，可提及經口施用法或腸胃外施用；然而，優選地使用經口施用法。每份制劑的活性成分的有效量如上所述。具體地，根據日本藥典(第13修定版，1996，Hirokawa Shoten)，咖啡因的有效量為每個成人每次大約100至300mg，且每天的總劑量需要為500mg或更少。
通過實施例在下面更詳細地描述本發明，所述實施例不應當解釋為限定本發明。
實施例實施例1通過施用咖啡因產生的大鼠的代謝變化給6周齡的雄性Wistar大鼠(Charles River Laboratories Japan，Inc.，Yokohama，日本)經口施用100mg/kg體重的咖啡因(無水咖啡因，Wako Pure Chemical Industries，Ltd.Osaka，日本)或水(作為對照)。兩小時后，用乙醚麻醉大鼠。從腹主動脈采集血液并切取肝臟。立即從血液制備血漿并使用glucose CII Test Wako(Wako PureChemical Industries Ltd.)測量葡萄糖水平。另一方面，在切取后，立即用液氮冷凍肝臟。用TRIzol(Invitrogen)從大約50mg肝臟組織中制備總RNA并用RNeasy Mini(Quiagen)和RNase-Free DNase Set(Quiagen)純化總RNA。使用Thermo Script RT-PCR系統(Invitrogen)從所純化的總RNA(5μg)合成cDNA，并使用FastStartDNA Master SYBR Green I(Roche)和lightCycler(Roche)確定各種基因的mRNA表達水平。基于管家基因P0的表達水平改正各基因的表達水平以計算相對表達水平。用于基因表達分析的DNA引物是5’-acgctgccgtcaaggaaggaaagc-3’“SEQ ID NO1”和5’-gcgggctccaccaggatcttctcat-3’“SEQ ID NO2”，作為絲氨酸脫水酶(SDS)的有義和反義引物；5’-gctgctgaaatcggagcaggagca-3’“SEQ ID NO3”和5’-ctgcttccggaactctgccatctg-3’“SEQ ID NO4”，作為色氨酸2，3-雙加氧酶(TDO)的有義和反義引物；5’-tcgaggccgtaatccgctttgc-3’“SEQ ID NO5”和5’-gaaacccgcactcgcccatgta-3’“SEQ ID NO6”，作為丙氨酸轉氨酶(ALT1)的有義和反義引物；和5’-ggggaacgtgggctttgtgttca-3’“SEQ IDNO7”和5’-tggtgatgcccaaagcttggaaga-3’“SEQ ID NO8”，作為管家基因酸性核糖體磷蛋白P0的有義和反義引物。這些引物都由Invitrogen合成。
如圖2A中所示，發現咖啡因具有增加血液葡萄糖水平的作用，換句話說，具有加速葡糖異生的作用。據認為哺乳動物葡糖異生在肝臟中發生，在肝臟中通過復雜的代謝途徑從氨基酸生物合成葡萄糖(Biochemistry，Zubay，由Hirokawa Shoten出版)。然后，分析SDS和TDO的基因表達的變化。結果表明絲氨酸和色氨酸的代謝被加強(圖2B)。另一方面，丙氨酸代謝途徑(ALT1)(一般認為其在肝臟中發生的葡糖異生作用中發揮主要作用)沒有增強。該事實表明通過咖啡因加速的葡糖異生作用主要涉及和一般葡糖異生作用不同的絲氨酸和色氨酸的代謝。
實施例2通過給大鼠施用咖啡因+絲氨酸產生的血液乙醇水平的降低在非麻醉的情況下通過手術將插管插入體重為250g至300g的雄性Wistar大鼠(Japan SLC，Hamamatsu，日本)的頸靜脈(cervical vein)中以隨時間推移采集血液。如下總共制備4組。通過經口施用水制備大鼠的對照組(n＝6)。通過施用20mg/kg體重的咖啡因制備大鼠組(n＝7)。通過施用0.1g/kg體重的絲氨酸制備大鼠組(n＝5)。通過施用20mg/kg體重的咖啡因和0.1g/kg體重的絲氨酸制備大鼠組(n＝5)。因為已認為當一次攝入1g或更多的咖啡因時，會引起神經系統和心血管系統的急性中毒癥狀，例如虛脫、頭暈和心律不齊。因此，將咖啡因的劑量設定在其上限是20mg/kg體重的范圍之內，在所述劑量上可能會在體重為50kg的一般成年雌性中出現急性中毒癥狀。另一方面，將絲氨酸設定在0.1g/kg體重，在大鼠中，該劑量充分低于急性半致死劑量(14g/kg體重)。在用單一樣品施用后一小時，經口施用乙醇(2g/kg體重)。在施用后1、2、3和5小時從頸靜脈采集血液。采集后，立即將血液和含有0.6N高氯酸鹽和0.9％NaCl的溶液充分混合，并在3000rpm下離心分離20分鐘以除去蛋白。用由Shimazu Corporation生產的氣相色譜儀測量上清液的乙醇濃度(Eriksson CJP等人，Anal.Biochem.第125卷，259-263(1982))。
圖3顯示血液乙醇的變化。發現，和對照組相比，絲氨酸施用組的血液乙醇水平稍稍降低；然而，在所有測量時間點上觀察到的該變化不顯著。在咖啡因施用組中，觀察到血液乙醇水平稍微降低，而在乙醇施用后2小時顯著降低；然而，在其他時間點上沒有觀察到顯著的作用。相反地，在同時施用咖啡因和絲氨酸的組中，觀察到血液乙醇水平的顯著降低。更具體地，在施用乙醇后2小時時和2小時后的所有測量時間點上都觀察到顯著的作用。基于這些結果，推斷即使在服用0.1g/kg體重的絲氨酸和即使以高濃度(在該濃度上可發生急性中毒)服用咖啡因的情況下，也不會充分地加速乙醇代謝，可預期不會發生充分的乙醇代謝的加速。另一方面，當同時攝入咖啡因和絲氨酸兩者時，血液乙醇水平顯著降低，從而證明乙醇代謝明顯地加速。
實施例3在人中通過攝入咖啡因+絲氨酸產生的乙醇代謝的加速選擇八個健康成年人作為該試驗的受試者，考慮到倫理因素，該八個成年人在所述試驗開始前已同意參加該試驗，且其具有乙醛脫氫酶(ALDH2)ALDH2*1/2(ND)的基因型。要求受試者從醒來時至參加試驗時不進食物和水。由8個人(作為志愿者)進行對照試驗。在參加對照試驗的8個人中，選擇5個進行樣品施用試驗。作為樣品，單獨地經口施用3mg/kg體重的咖啡因(由SHIRATORIPharmaceutical Co.，Ltd.，Chiba日本生產的)，單獨地經口施用30mg/kg體重的絲氨酸(由KYOWA HAKKO KOGYO Co.，Ltd.Tokyo，日本生產的)，或經口施用3mg/kg體重的咖啡因和30mg/kg體重的絲氨酸。根據體重為50kg的人從一杯咖啡攝入的量(約150mg)設定咖啡的量，該量可能不導致急性中毒。根據體重為50kg的一般人每天攝入平均人攝入量(3.71g)的40％的假設來設定絲氨酸的量，該量顯著低于大鼠中的急性半致死劑量(14g/kg體重)。在樣品攝入后1小時，將5％的乙醇溶液(用水稀釋的白烈性酒(whiteliquor))分成6份并以4分鐘的間隔分6次經口攝入，從而使每體重(kg)攝入0.4g乙醇。在飲酒前、飲酒后30、60、90、120和180分鐘后立即采集血液。在采集血液后立即將血液和含有0.6N高氯酸鹽和0.9％NaCl的溶液混合，并在3000rpm下離心分離20分鐘以除去蛋白。通過Perkin Elmer Corporation或Shimazu Corporation生產的氣相色譜測量上清液中的乙醇、乙醛和乙酸濃度(Eriksson CJP等人，Anal.Biochem.Vol.125，259-263(1982))。此外，在采集血液后立即從部分血液中制備血漿，并使用glucose CIITestWako(Wako Pure Chemical Industries Ltd.)測量血液葡萄糖水平。此外，使用相同的血漿，分別使用determiner LA(Kyowa Medics，Tokyo，日本)和determiner PA(Kyowa Medics)測量血液乳酸和丙酮酸水平。基于乳酸/丙酮酸的比率，計算NADH/NAD+的比率。另一方面，在采集血液的同時，就“醉酒的感覺(feeling of drunk))”(根據評分0至8)和舒適的感覺(不舒適(評分-4)至舒適(評分4))對受試者進行9個級別的主觀評估。
如圖4中所示，當單獨地攝入絲氨酸或咖啡因時極少改變血液乙醇的水平；然而，在攝入咖啡因+絲氨酸后60分鐘時和之后顯著降低所述水平。另一方面，在單獨地攝入絲氨酸、單獨地攝入咖啡因和攝入咖啡因+絲氨酸的樣本中的任一樣本中，血液乙醛水平未顯著改變。然而，和其他兩種情況不同，在咖啡因+絲氨酸攝入的情況下的血液乙醛水平總是在比對照低的水平。由此，可想到咖啡因+絲氨酸具有降低乙醛水平的趨向(圖5)。從上述結果可看出，當以考慮到飲食經驗和安全性確定的攝入水平單獨地攝入絲氨酸或咖啡因時，充分降低血液乙醇水平和乙醛水平是很困難的。因此，第一次發現，通過組合攝入咖啡因和絲氨酸可產生顯著的作用。
當組合攝入絲氨酸+咖啡因時，血液乙醇水平的最大值和在攝入乙醇后30分鐘對照中的水平相同，且在60分鐘時和之后觀察到血液乙醇水平的降低。由此推斷血液乙醇水平的降低不是由于乙醇吸收的抑制產生的而是由于乙醇代謝的加速產生的。如上所述，乙醇通過ADH被代謝成乙醛，然后乙醛再被ALDH代謝成乙酸。因為咖啡因+絲氨酸的攝入減少了血液乙醇水平，所以可想象通過ADH的從乙醇至乙醛的反應被加速。然而，如果只有ADH反應進行，則乙醛的產量將等于或大于對照的量。然而，血液乙醛水平又顯示下降的趨勢。根據該事實，認為從乙醛至乙酸的代謝可能被提高。因此，測量乙醛代謝產物即乙酸的血液水平。和對照相比，在咖啡因+絲氨酸攝入的情況下的血液乙酸水平顯示上升的趨勢(圖6)。表明從乙醇至乙酸的反應被不停地提高。
ADH和ALDH反應在需要NAD+方面相同。因此，已知當NADH/NAD+的比率增加時乙醇代謝減慢。可基于血液中乳酸/丙酮酸的比率計算體內NADH/NAD+的比率。因此，測量在攝入咖啡因+絲氨酸的情況下的血液中的乳酸/丙酮酸的比率。結果，發現在攝入乙醇的情況下增加的程度低于對照(圖7)。當攝入咖啡因+絲氨酸時，血液葡萄糖水平達到比對照更高的值(圖8)。估計葡糖異生代謝系統中的NADH至NAD+的轉化對乙醇代謝的加速有貢獻。
主觀評估結果顯示于圖9和10中。由此清楚地證明當攝入咖啡因+絲氨酸時，對“感覺醉酒(feeling drunk)”沒有產生顯著的變化，但“舒適的感覺”顯著增加。由此認為咖啡因+絲氨酸的攝入在減輕酒量小的人在飲酒時具有的不舒適感覺上可以是有效的。
實施例4通過施用咖啡因+色氨酸在大鼠中產生的血液乙醇水平的降低使用體重為250g至300g的雄性Wistar大鼠(Japan SLC)，總共分為4組通過經口施用水制備的大鼠對照組(n＝4)；通過施用20mg/kg體重的咖啡因(Wako Pure Chemical Industries，Ltd)制備的大鼠組(n＝9)，通過施用0.1g/kg體重的色氨酸(Wako PureChemical Industries，Ltd)制備的大鼠組(n＝6)和通過攝入20mg/kg體重的咖啡因和0.1g/kg體重的色氨酸制備的大鼠組(n＝7)。1小時后，施用乙醇。再過2小時后，在用戊巴比妥(Sigma)麻醉的情況下，從腹主動脈采集血液。以和實施例2中的方式相同的方式測量血液乙醇水平。
血液乙醇水平的結果顯示于圖11中。在單獨施用色氨酸的組中沒有觀察到變化。在施用咖啡因的組中觀察到輕微的下降趨勢，但不是顯著的變化。相反地，在施用咖啡因+色氨酸的組中觀察到血液乙醇水平的顯著降低。
實施例5通過施用咖啡因+各種氨基酸中的每一種氨基酸在大鼠中產生的血液乙醇的變化使用體重為250g至300g的雄性Wistar大鼠(Japan SLC)，總共分為22組通過經口施用水制備的大鼠對照組(n＝4)；通過單獨施用20mg/kg體重的咖啡因(Wako Pure Chemical Industries，Ltd)制備的大鼠的無氨基酸組(n＝4)，和通過攝入20mg/kg體重的咖啡因和0.1g/kg體重的20種氨基酸類型中的每一種氨基酸制備的20個大鼠組(每組n＝2)。施用各樣品1小時后，經口施用乙醇(2g/kg體重)。再過2小時后，在用戊巴比妥(Sigma)麻醉的情況下，從腹主動脈采集血液。以和實施例2中的方式相同的方式使用ShimazuCorporation生產的氣相色譜測量血液乙醇水平。
圖12顯示和只施用咖啡因的組(即，無氨基酸組)(該組的血液乙醇水平被當作1)相比，氨基酸施用組的相對血液乙醇水平。和無氨基酸組相比，在絲氨酸施用組和色氨酸施用組中觀察到血液乙醇減少的作用；然而，在其他氨基酸添加組中未觀察到血液乙醇減少的作用。所述結果證明絲氨酸或色氨酸作為這樣的氨基酸是優選的，所述氨基酸用于通過將其和咖啡因一起攝入來產生作用。
實施例6在人(NN)中通過攝入咖啡因+絲氨酸產生的乙醇代謝的加速繼續實施例3中進行的針對相對地酒量小的人(具有ND的乙醛脫氫酶(ALDH2)基因型)的試驗，檢查對酒量大的人(ALDH2*2/2(NN))的乙醇代謝加速的作用。在獲得知情同意書后，選擇5個具有NN基因型的健康成人作為所述試驗的受試者。當在早晨進行試驗時，要求他們從醒來時至參加試驗時不進食物和水。當試驗在下午進行時，要求受試者在吃完早餐后不進食物和水。作為樣本，經口攝入3mg/kg體重的咖啡因(由SHIRATORI Pharmaceutical Co.，Ltd.生產)和30mg/kg體重的絲氨酸(KYOWA HAKKO KOGYO Co.，Ltd.)。攝入后1小時，再經口給予5％的乙醇溶液從而使達到0.4g/kg體重的乙醇。以和實施例3中的方式相同的方式，在即將攝入酒精前、攝入酒精后30、60、90、120和180分鐘采集血液。通過氣相色譜測量乙醇、乙醛和乙酸水平。此外，將部分血液接受乳酸水平和丙酮酸水平的測量。從乳酸/丙酮酸的比率計算NADH/NAD+的比率。
如圖13A中所示，通過攝入咖啡因+絲氨酸，從攝入乙醇后60分鐘開始，血液乙醇水平顯示下降的趨勢。在攝入后90、120和180分鐘處觀察到顯著的降低。在乙醇攝入后30分鐘和對照相比，血液乙醇水平沒有降低。根據該事實可想象上面觀察到的血液乙醇水平的降低不是由于乙醇吸收的抑制造成的而是由于乙醇代謝的加速導致的。此外，通過攝入咖啡因+絲氨酸在60分鐘時和之后觀察到血液乙醛水平的下降趨勢。由此認為不僅由ADH催化的從乙醇至乙醛的代謝被加速，而且由ALDH催化的從乙醛至乙酸的代謝被加速(圖13B)。在受試者(NN)中，血液乙酸水平沒有增加超過對照中的水平。由此證明由乙醇攝入引起的血液乙酸水平的暫時增加因乙醇代謝的加速而更早終止(圖13C)。此外，通過攝入咖啡因+絲氨酸，反映NADH/NAD+的比率的血液中的乳酸/丙酮酸的比率比對照中的低。從而推斷由葡糖異生系統的加速導致的NADH至NAD+的轉化對乙醇代謝的加速有貢獻(圖13D)。
根據上面獲得的結果，可想象在飲酒時，咖啡因+絲氨酸的攝入不僅在ND的人中而且在NN的人中在減輕身體負擔上是有效的。
實施例7通過在施用乙醇后攝入咖啡因+絲氨酸產生的大鼠中血液乙醇的變化通過經口給體重為250g至300g的雄性Wistar大鼠(JapanSLC)施用2g/kg體重的乙醇。1小時后，給對照組(n＝4)經口施用水；給組(n＝5)經口施用10mg/kg體重的咖啡因(Wako Pure ChemicalIndustries，Ltd)；給組(n＝5)經口施用100mg/kg體重的絲氨酸(WakoPure Chemical Industries，Ltd)；和給組(n＝5)經口施用10mg/kg體重的咖啡因(Wako Pure Chemical Industries，Ltd)+100mg/kg體重的絲氨酸(Wako Pure Chemical Industries，Ltd)。乙醇攝入后5小時，在用乙醚麻醉的情況下從腹主動脈采集血液，并以和實施例2中的方式相同的方式測量血液乙醇水平。
相對血液乙醇濃度的結果顯示于圖14。和對照組相比，在單獨施用絲氨酸的組中觀察到輕微的下降趨勢，但其不是顯著的變化。相反地，在咖啡因施用組中觀察到顯著的降低，且在咖啡因+絲氨酸施用組中觀察到更明顯和顯著的降低。
這些結果提示咖啡因+絲氨酸的攝入不僅在乙醇攝入前而且在乙醇攝入后都是有效的。
實施例8通過在乙醇攝入后攝入咖啡因+絲氨酸產生的人(ND)中乙醇代謝的加速針對相對地酒量小的人(具有ND的ALDH2基因型)檢查當在乙醇攝入后攝入咖啡因+絲氨酸時的乙醇代謝的變化。在獲得知情況同意書后，選擇6個健康的ND成人和8個健康的NN成人作為該試驗的受試者。當在早晨進行試驗時，要求他們從醒來時至參加試驗時不進食物和水。當在下午進行試驗時，以和實施例5中的方式相同的方式要求受試者在吃完早餐后不進食物和水。首先，經口施用5％的乙醇溶液從而使達到0.4g/kg體重的乙醇。在即將進行30分鐘后進行的血液取樣前，經口施用3mg/kg體重的咖啡因(SHIRATORIPharmaceutical Co.，Ltd.)和30mg/kg體重的絲氨酸(KYOWAHAKKO KOGYO Co.，Ltd.)。在即將攝入酒精前、在攝入酒精后30、60、90、120和180分鐘時采集血液。以和實施例3中的方式相同的方式通過氣相色譜測量乙醇、乙醛和乙酸水平。此外，將部分血液接受血液中的乳酸水平和丙酮酸水平的測量。根據乳酸/丙酮酸的比率計算NADH/NAD+的比率。
通過攝入咖啡因+絲氨酸，血液乙醇水平通常顯示下降的趨勢(圖15A)，且在120分鐘時和之后乙醛水平顯示下降趨勢(圖15B)。此外，由乙醇的攝入導致的血液乙酸水平的暫時增加在150分鐘時和之后大大降低(圖15C)，從而表明乙醇代謝可能更早地終止。此外，通過攝入咖啡因+絲氨酸，反映NADH/NAD+的比率的血液中的乳酸/丙酮酸的比率低于對照的乳酸/丙酮酸的比率。因此，推斷由于葡糖異生系統的加速造成的從NADH至NAD+的轉化已對乙醇代謝具有貢獻(圖15D)。
根據上面獲得的結果，咖啡因+絲氨酸的攝入也在當飲酒后攝入其時對減輕ND的人中的身體負擔有效。
實施例9通過在飲酒后在攝入咖啡因+絲氨酸產生的人(NN)中乙醇代謝的加速以和實施例8中的方式相同的方式，針對相對酒量大的人(具有NN的ALDH2基因型)檢查在乙醇攝入后攝入咖啡因+絲氨酸時乙醇代謝的變化。
由于攝入咖啡因+絲氨酸的原因，血液乙醇水平一般趨向輕微下降(圖16A)，且乙醛濃度顯示出更明顯的下降(圖16B)。此外，在90分鐘時和之后由于乙醇的原因導致血液乙酸水平大大地降低(圖16C)，從而表明乙醇代謝更早地終止。此外，通過攝入咖啡因+絲氨酸，反映NADH/NAD+的比率的血液中乳酸/丙酮酸的比率比對照中的低。因此推斷由葡糖異生系統的加速造成的從NADH至NAD+的轉化對乙醇代謝有貢獻(圖16D)。
根據上面獲得的結果可看出，當在飲酒后攝入咖啡因+絲氨酸時，咖啡因+絲氨酸的攝入不僅在ND的人中而且在NN的人中都在減輕身體負擔上是有效的。
實施例10當在飲酒之前和之后攝入咖啡因+絲氨酸時，其對宿醉的作用在獲得知情同意書后使用20個健康成人作為受試者。在飲酒之前和之后攝入咖啡因+絲氨酸時，在第二天早晨進行關于宿醉癥狀的問卷調查。為進行該試驗，制備成袋的顆粒，每袋顆粒包含100mg咖啡因(由SHIRATORI Pharmaceutical Co.，Ltd.生產)和1500mg絲氨酸(由KYOWA HAKKO KOGYO Co.，Ltd.生產)。從安全的角度考慮，將攝入劑量限制在1至2袋。試驗周期設定在大約一個半月。在天天飲酒的場合，要求受試者嘗試1)不服用樣品，2)在飲酒前服用樣品，和3)在飲酒后服用樣品，并然后以問卷的形式要求受試者在第二天早晨回答身體狀況。在問卷調查中，要求受試者對宿醉病癥(包括覺醒、頭痛、喪失食欲、惡心、胃部不適、口渴、虛弱、戰栗(shivering)、腹瀉和頭暈的各項進行9個級別的評估(Wise J等人，Arch.Intern.Med.第164卷，1334-1340(2004))。
圖17顯示當在飲酒前攝入樣品時的結果。通過對單項評分求和獲得的宿醉評分表明3/4的完整宿醉癥狀得到改善(圖17A)。對于宿醉癥狀例如覺醒(圖17B)、頭痛(圖17C)和口渴(圖17F)，大約一半的受試者回答“好轉”。對于喪失食欲(圖17D)和胃部不適(圖17E)，大約1/4至1/3的受試者回答“好轉”。
如圖18A中所示，同樣當在飲酒后攝入樣品時，在大約一半的所有受試者中確認了宿醉評分的提高。對于宿醉癥狀例如覺醒(圖18B)和頭痛(圖17C)，大約一半的受試者回答“好轉”。對于喪失食欲(圖18D)，大約2/5的受試者和對于口渴(圖17E)大約1/4的受試者回答“好轉”。
根據上面的結果，可想象在飲酒前和飲酒后攝入咖啡因+絲氨酸在第二天早晨對減輕各種宿醉癥狀是有效的。
要指出的是，部分受試者被要求攝入50mg咖啡因+1000mg絲氨酸或50mg咖啡因+500mg絲氨酸。在該情況下，觀察到宿醉癥狀好轉。
實施例11通過施用咖啡因+絲氨酸產生的小鼠從疲勞時的低血糖癥的恢復通過使用流動水容器(flowing-water vessel)(由Matsumoto inKyoto University開發的)在流動水的情況下進行雄性Balb/c小鼠(Japan SLC)的游泳實驗。讓小鼠(4周齡)在不同的兩天內在大約4.5L/分鐘(大約16cm/秒)的流速下游泳一次，進行15至20分鐘，以使小鼠習慣游泳環境。在第二周，將這些小鼠(5周齡)禁食3小時。之后，從尾部采集血液并用GLUTESTACE(Sanwa KagakuKenkyusho Co.，Ltd.)測量血液葡萄糖水平。之后立即讓小鼠在大約5.5L/分鐘(大約19cm/秒)的流速下以間歇的方式游泳。通過重復由10分鐘游泳和10分鐘休息構成的循環兩次，然后重復由5分鐘游泳和10分鐘休息構成的循環直至小鼠筋疲力盡以致于不能游泳為止來進行間歇式游泳。在讓筋疲力盡以致于不能游泳的小鼠獨自逗留15分鐘后，檢查血液葡萄糖水平。在確認降低的血液葡萄糖水平后，給對照組(n＝9)經口施用水，給n＝6的組經口施用80mg/kg體重的咖啡因(Wako Pure Chemical Industries，Ltd)，給n＝4的組經口施用200mg/kg體重的絲氨酸(Wako Pure Chemical Industries，Ltd)，且給n＝5的組經口施用80mg/kg體重的咖啡因+200mg/kg體重的絲氨酸。隨時間推移測量血液葡萄糖水平。
如圖19中所示，和對照相比，通過施用咖啡因+絲氨酸，血液葡萄糖水平很快地從疲勞時的低血糖癥恢復。和對照相比，在施用后的15、45、60和90分鐘上血液葡萄糖水平的提高具有顯著性(p＜0.05)。當單獨地施用咖啡因和絲氨酸時，小鼠從低血糖癥恢復；然而，在攝入咖啡因+絲氨酸的情況下恢復的程度更佳。
實施例12各種類型的商購可獲得的飲料中包含的咖啡因和絲氨酸的量使用HPLC方法測量可商購獲得的飲料的咖啡因和絲氨酸量，所述飲料即一般已知包含咖啡因的飲料，包括綠茶、烏龍茶、紅茶、咖啡、可樂和飲用制劑。如表中所示，綠茶、烏龍茶和紅茶的咖啡因的濃度在10-21mg/100mg(表1)的范圍內，且這些飲料的絲氨酸濃度低于0.5mg/100ml，極其低(表2)。咖啡和飲用制劑的咖啡因濃度相對較高，在50-100mg/100ml的范圍內；然而，絲氨酸濃度卻在檢測極限內或更少，被認為是極其低。可樂的咖啡因濃度是11mg/100ml，和茶的咖啡因濃度相同，但沒有檢測到絲氨酸。
所述結果提示包含100mg/100ml或更多的絲氨酸的含有咖啡因的飲料是新的。
表1
表2
實施例13補充以絲氨酸的飲料的制備通過以100、500、1000、1500和2000mg的量向100ml商購獲得的無糖咖啡加入絲氨酸(KYOWA HAKKO KOGYO Co.，Ltd.)來制備飲料。已知絲氨酸是高溶解性的氨基酸，且其在室溫下以30g或更多的量溶解在100g水中，甚至在0℃也以20g的量溶解在100g水中。因此，可將上述量的絲氨酸容易地溶解在無糖咖啡中而無任何外觀問題，例如沉淀和混濁。此外，已知絲氨酸是甜的氨基酸。當加入上述范圍內的絲氨酸時，咖啡的甜味增加至和含有少量糖的咖啡的甜味相同的程度。咖啡的味道變得和加糖的咖啡一樣不苦。盡管個體之間味道的評價不同，但大多數人在500至100mg(絲氨酸的量)的量上感覺到甜味。
本說明書中引用的所有出版物、專利和專利申請都在此以其全文引用作為參考。
序列表的自由文字SEQ ID NO1人工序列的描述SDS的有義引物；SEQ ID NO2人工序列的描述SDS的反義引物；SEQ ID NO3人工序列的描述TDO的有義引物；SEQ ID NO4人工序列的描述TDO的反義引物；SEQ ID NO5人工序列的描述ALT1的有義引物；SEQ ID NO6人工序列的描述ALT1的反義引物；SEQ ID NO7人工序列的描述P0的有義引物；SEQ ID NO8人工序列的描述P0的反義引物。
序列表<110>Kirin Beer Kabushiki Kaisha<120>用于通過葡糖異生作用加速酒精代謝或從疲勞恢復的組合物<130>PH-2451-PCT<140>
<141>
<150>JP 2004-123427<151>2004-04-19<160>8<170>PatentIn Ver.2.1<210>1<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列描述SDS的有義引物<400>1acgctgccgt caaggaagga aagc 24<210>2<211>25<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列描述SDS的反義引物<400>2gcgggctcca ccaggatctt ctcat25<210>3<211>24
<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列描述TDO的有義引物<400>3gctgctgaaa tcggagcagg agca 24<210>4<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列描述TDO的反義引物<400>4ctgcttccgg aactctgcca tctg 24<210>5<211>22<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列描述ALT1的有義引物<400>5tcgaggccgt aatccgcttt gc 22<210>6<211>22<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列描述ALT1的反義引物<400>6gaaacccgca ctcgcccatg ta 22
<210>7<211>23<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列描述PO的有義引物<400>7ggggaacgtg ggctttgtgt tca 23<210>8<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列描述PO的反義引物<400>8tggtgatgcc caaagcttgg aaga 2權利要求
1.用于協同加速體內酒精代謝和葡糖異生作用的組合物，其特征在于包含有效量的咖啡因和有效量的氨基酸和/或肽作為活性成分，所述氨基酸和/或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。
2.權利要求1的組合物，其用于減輕由于酒精攝入引起的身體負擔和/或加速酒精代謝。
3.權利要求1的組合物，其包含咖啡因和絲氨酸作為活性成分。
4.權利要求1的組合物，其包含咖啡因和色氨酸作為活性成分。
5.權利要求1的組合物，其包含咖啡因以及絲氨酸和色氨酸的混合物作為活性成分。
6.權利要求1的組合物，其中所述富含絲氨酸的肽以50至100％的構成該肽的氨基酸的量包含絲氨酸殘基。
7.權利要求6的組合物，其中所述富含絲氨酸的肽是絲氨酰絲氨酸。
8.權利要求1的組合物，其中所述富含色氨酸的肽以50至100％的構成該肽的氨基酸的量包含色氨酸殘基。
9.權利要求8的組合物，其中所述富含色氨酸的肽是色氨酰色氨酸。
10.權利要求1的組合物，其中所述富含絲氨酸/色氨酸的肽的絲氨酸殘基和色氨酸殘基的總數占了構成該肽的氨基酸的50％至100％。
11.權利要求10的組合物，其中所述富含絲氨酸/色氨酸的肽是絲氨酰色氨酸或色氨酰絲氨酸。
12.權利要求1的組合物，其中每個組合物的咖啡因的含量在人的可接受的攝入范圍之內。
13.權利要求12的組合物，其中所述咖啡因的含量是每個組合物500mg或更少。
14.權利要求13的組合物，其中所述咖啡因的含量是每個組合物50mg至500mg。
15.權利要求1的組合物，其中所述氨基酸的含量是每個組合物100mg或更多。
16.權利要求15的組合物，其中所述氨基酸的含量是每個組合物100mg至20g。
17.權利要求1的組合物，其中所述肽的含量是每個組合物100mg或更多。
18.權利要求1的組合物，其中按游離的絲氨酸計算，所述絲氨酸的含量是每個組合物500mg或更多。
19.權利要求1的組合物，其中按游離的絲氨酸計算，所述絲氨酸的含量是每個組合物1g或更多。
20.權利要求1的組合物，其是飲料或食物或藥物。
21.包含500mg或更少的咖啡因和總共100mg或更多的至少2種成分的組合的組合物，所述成分選自絲氨酸或富含絲氨酸的肽、色氨酸或富含色氨酸的肽以及富含絲氨酸/色氨酸的肽。
22.權利要求21的組合物，其中按游離的絲氨酸計算，所述組合中絲氨酸的含量是每個組合物100mg或更多。
23.權利要求21的組合物，其中按游離的絲氨酸計算，所述組合中絲氨酸的含量是每個組合物500mg或更多。
24.權利要求21的組合物，其中按游離的絲氨酸計算，所述組合中絲氨酸的含量是每個組合物1g或更多。
25.權利要求21的組合物，其是飲料或食物或藥物。
26.包含500mg或更少的咖啡因和100mg或更多的富含絲氨酸/色氨酸的肽的組合物。
27.權利要求26的組合物，其是飲料或食物或藥物。
28.用于減輕疲勞的組合物，其特征在于包含有效量的咖啡因和有效量的氨基酸和/或肽作為活性成分，所述氨基酸和/或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。
29.權利要求28的組合物，其用于減輕由于乙醇攝入引起的身體負擔。
30.權利要求28的組合物，其用于減輕由于低血糖癥引起的疲勞。
31.權利要求28的組合物，其包含咖啡因和絲氨酸作為活性成分。
32.權利要求28的組合物，其是飲料或食物或藥物。
33.用于加速酒精代謝的組合物，其特征在于包含有效量的咖啡因和有效量的氨基酸和/或肽作為活性成分，所述氨基酸和/或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。
34.權利要求33的組合物，其包含咖啡因、和絲氨酸、色氨酸或其混合物作為活性成分。
35.權利要求33的組合物，其中按游離的絲氨酸計算，所述絲氨酸的含量是每個組合物500mg或更多。
36.權利要求33的組合物，其中按游離的絲氨酸計算，所述絲氨酸的含量是每個組合物1g或更多。
37.權利要求33的組合物，其是飲料或食物或藥物。
38.以離散的包裝組合包含第一組合物和第二組合物的組合物組，所述第一組合物包含500mg或更少的咖啡因，且所述第二組合物包含100mg或更多的絲氨酸、色氨酸或其混合物。
39.權利要求38的組合物，其中所述第二組合物中的絲氨酸的含量是500mg或更多。
40.權利要求38的組合物，其中所述第二組合物中的絲氨酸的含量是1g或更多。
41.權利要求38的組合物，其是飲料或食物或藥物。
42.包含咖啡因的飲料，其特征在于每份飲料包含500mg或更多的絲氨酸。
43.權利要求42的飲料，其選自綠茶、紅茶、咖啡、可樂和可飲用的制劑。
44.權利要求42的飲料，其中所述咖啡因的含量是10mg至500mg，包括兩者。
45.權利要求42的飲料，其中所述咖啡因的含量是50mg至500mg，包括兩者。
46.權利要求42的飲料，其中所述咖啡因的含量是100mg至500mg，包括兩者。
47.權利要求42的飲料，其中所述咖啡因的含量是150mg至500mg，包括兩者。
48.被在混合中摻合入包含咖啡因的飲料、用于加速酒精代謝或減輕疲勞的組合物，其特征在于每劑補充加入了100mg或更多的絲氨酸。
49.權利要求48的組合物，其中所述絲氨酸的含量是500mg或更多。
50.權利要求48的組合物，其中所述組合物選自糖、乳和檸檬汁。
全文摘要
一種通過活性成分的安全攝入用于在酒精攝入時降低身體負擔和從疲勞恢復的組合物。提供了通過體內的葡糖異生作用加速酒精代謝和從疲勞恢復的組合物，其特征在于包含有效量的咖啡因和有效量的氨基酸或肽作為活性成分，所述氨基酸或肽選自絲氨酸、色氨酸、富含絲氨酸的肽、富含色氨酸的肽、富含絲氨酸/色氨酸的肽及其混合物。
文檔編號A61K31/197GK1968691SQ200580020228
公開日2007年5月23日 申請日期2005年4月19日 優先權日2004年4月19日
發明者片山由美子, 吉田有人 申請人:麒麟麥酒株式會社