治療耐藥性或頑固性腫瘤的方法

專利名稱：治療耐藥性或頑固性腫瘤的方法
背景技術：
對于大部分癌瘤病人來說，臨床藥物的耐藥性是在化學治療能發(fā)揮作用之前要克服的一個主要障礙。在超過50％的常規(guī)化學治療的情況下，在很多常見癌瘤中(例如非小細胞肺的、睪丸的及卵巢癌)，大量腫瘤可期望被縮小。在其他情況下，應答率會低些；只有10-20％的腎細胞癌、胰臟的及食管癌患者對治療有響應。但在幾乎全部的情況下，最終耐藥性在不久形成且常常是致命的。如果能夠治療、預防或克服耐藥性，那么其影響將是重大的。
對于化學治療的臨床腫瘤耐藥性可以是內在的或獲得性的。腫瘤的內在性耐藥在診斷時出現(xiàn)，并對一線化學治療不響應。腫瘤的獲得性耐藥通常對初治高度響應，但在治療或腫瘤復發(fā)時形成耐藥性，表現(xiàn)出一種完全不同的表型。它們可能對先前使用過的藥物，以及具有不同結構和作用機理的新藥劑都變得耐受。
鉑化合物在治療包括睪丸癌和卵巢癌的多種惡性腫瘤的可用的化學治療藥物中是屬于最有效之列的。某些這類化合物(如順鉑)的使用是受到毒理學和耐藥性因素的雙重限制的。為了克服這些問題，已開始了發(fā)現(xiàn)新穎的不具備順鉑的這些性質的鉑化合物的努力。一個化合物被確定為賽特鉑(satraplatin，JM216)，是一種鉑(Pt)IV絡合物。賽特鉑與順鉑相比具有一些優(yōu)點，這是由于其口服利用度和良好的安全特性，例如沒有腎毒性和神經毒性。在前列腺癌、卵巢癌及SCL癌患者中，賽特鉑已表現(xiàn)出活性。在激素難治性前列腺癌(HRPC)患者的II-III期臨床實驗中，賽特鉑和強的松的聯(lián)合使用比僅使用強的松更有效(ASCO，2003)。當前HRPC的標準治療主要是緩解性的，包括一線化學治療的用藥法，如雌莫司汀、米托蒽醌和紫杉烷類、包括多西紫杉醇正在日益作為一線化學治療藥物被使用。
鑒于臨床癌瘤的普遍耐藥性和其對于癌瘤患者的可怕的后果，人們期望有治療對一線治療藥物有耐藥性的腫瘤的方法。這些方法被在此提供。

發(fā)明內容
本發(fā)明提供了治療對非鉑基治療藥物耐藥的或頑固性腫瘤的方法、藥物組合物及封裝(packaged)藥物?？偟膩碚f，這些方法包括向對非鉑基治療藥物耐藥的或頑固的癌或腫瘤的患者進行有效量的鉑基化合物的給藥。該鉑基化合物可以是下列之一(通稱為“受試(subject)鉑基化合物”)(a)可口服的鉑基化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物 其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基；(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)中任何一種的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
在一些優(yōu)選的實施方案中，該鉑基化合物是賽特鉑(JM216)、JM118或JM383，或其藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
在一些實施方案中，對于非鉑基治療藥物耐藥性的腫瘤包括那些耐藥性是通過多藥耐藥性介導的腫瘤。這種多藥耐藥可以通過ATP結合盒(ABC)轉運蛋白例如P-糖蛋白(P-gp)介導。耐藥性通過P-gp介導的非鉑基治療藥物包括長春花生物堿類(長春堿)、蒽環(huán)霉素類(阿霉素)、表鬼臼毒素類(依托泊苷)、紫杉烷類(紫杉醇、多西紫杉醇)、抗生素類(放線菌素D和短桿菌肽D)、抗微管劑類(秋水仙堿)、蛋白質合成抑制劑類(嘌羅霉素)、毒肽類(纈氨霉素)、拓撲異構酶I抑制劑類(托泊替康)、DNA嵌入劑類(溴化乙錠)及抗有絲分裂劑類。
在其他實施方案中，對于非鉑基治療藥物耐藥性的腫瘤包括那些耐藥性是通過微管蛋白介導的。耐藥性通過微管蛋白介導的非鉑基治療藥物包括紫杉烷類(紫杉醇、多西紫杉醇及其衍生物)、長春花生物堿類(長春堿、長春新堿、長春地辛及長春瑞濱)、大環(huán)內酯類抗腫瘤藥(埃博霉素A(epothilone A)、埃博霉素B(epothilone B)和discodermolide)、諾考達唑、秋水仙堿、秋水仙堿衍生物、別秋水仙堿(allocolchicine)、軟海綿素B(Halichondrin B)、dolstatin 10、美登素、根霉素、硫代秋水仙堿、三苯甲基cysterin、雌莫司汀及諾考達唑。
在其他實施方案中，對于非鉑基治療藥物耐藥性的腫瘤包括那些耐藥性是通過拓撲異構酶I介導的。耐藥性通過拓撲異構酶I介導的非鉑基治療藥物包括喜樹堿、9-硝基喜樹堿(Orethecin，盧比替康)、9-氨基喜樹堿(IDEC-13’)、依沙替康(DX-8951f)、勒托替康(GI-147211C)、BAY 38-3441、高喜樹堿類如diflomotecan(BN-80915)和BN-80927、托泊替康(Hycamptin)、NB-506、J107088、吡唑[1，5-a]吲哚衍生物，例如GS-5、片螺素D及伊立替康(鹽酸伊立替康，CPT-11)。
在另一些其他實施方案中，對于非鉑基治療藥物頑固的或先前采用其治療的腫瘤適于采用本發(fā)明的方法或藥物組合物。
本發(fā)明另一方面提供了使用所述受試鉑基化合物對包括上述的非鉑基治療藥物有耐藥性或頑固的腫瘤細胞進行殺滅或抑制其生長的方法。
本發(fā)明的又一方面提供了封裝藥物，其包括以適用于人類患者的形式的受試鉑基化合物，和該受試鉑基化合物在治療耐非鉑基治療藥物的腫瘤時指示恰當使用及其副作用的使用說明和/或指導標簽。
本發(fā)明的再一方面提供了藥物組合物及封裝藥物，其用于治療對非鉑基治療藥物耐藥的腫瘤。該藥物組合物和封裝藥物包括受試鉑基化合物。
附圖簡述

圖1根據Rayaud等人1996年的賽特鉑(JM216)及其某些代謝產物。
發(fā)明詳述I.綜述本發(fā)明的特征在于治療耐受非鉑基治療藥物的腫瘤的新穎的方法和藥物組合物。本發(fā)明是基于，至少部分基于，申請人的發(fā)現(xiàn)即實施典型受試含鉑的化合物對于耐受各種化學治療藥物的增生細胞例如腫瘤細胞是有效的。重要的是，申請人已經證明這些典型受試的鉑基化合物能克服通過多種不同機理介導的耐藥性。每種耐藥機理賦予腫瘤對于許多藥物的耐藥性。根據申請人的發(fā)現(xiàn)，對于大批非鉑基治療藥物和/或化學治療藥物，包括抗癌藥物耐受的腫瘤患者可以從使用本發(fā)明的方法和藥物組合物的治療中獲益。
相應地，本發(fā)明提供了治療具有對于非鉑基治療藥物耐藥的或頑固的癌癥或腫瘤的個體的方法，包括進行有效量的鉑基化合物的給藥。在優(yōu)選的實施方案中，該鉑基化合物選自(a)可口服的鉑基化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的鉑基化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物 其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基；
(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
本發(fā)明還提供了對于耐受非鉑基治療藥物的腫瘤細胞的殺滅或抑制其生長的方法，包括將所述細胞暴露于有效量的鉑基化合物。在優(yōu)選的實施方案中，該鉑基化合物選自(a)可口服的鉑基化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的鉑基化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物 其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基；(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
在某些實施方案中，R1和R2是相同的，并且是羥基或乙酸基。優(yōu)選地，R3和R4是相同的并都是羥基或優(yōu)選地為鹵素，例如氯。在某些優(yōu)選的實施方案中，R5是環(huán)己基。
II.定義術語“被給藥的”、“給藥”、“進行給藥”一化合物將理解為意指向需要治療的個體提供本發(fā)明的方法的任何化合物。
術語“烷基”指的是任意取代的直鏈或支鏈的飽和的具有1至約20個碳原子的烴基基團，優(yōu)選從1至約7個的碳原子。烷基的例子包括，但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基。此外，該術語意指包括未取代與取代的烷基基團，后者指烷基部分的一或多個氫被取代，但不限于取代物鹵素、羥基、羰基、烷氧基、酯、醚、氰基、磷酰基、氨基、亞氨基、酰氨基、巰基、烷硫代(alkythio)、硫代酸酯、磺?；?、硝基、雜環(huán)、芳基或雜芳基。也將被本領域技術人員理解的是這些取代部分在適當時其本身也可被取代。
術語“環(huán)烷基”指的是任意取代的飽和環(huán)狀烴環(huán)系統(tǒng)，優(yōu)選每環(huán)含有3至7個的碳。典型的基團包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)癸基、環(huán)十二烷基和金剛烷基。典型的取代基包括一或多個上述烷基基團，或一或多個上述作為烷基取代基的基團。
術語“有效量”意思是受試化合物的將引出細胞、組織、系統(tǒng)、身體、動物的、個體的、病人或人類的生物學的、生理學的、藥理學的、治療學的或醫(yī)學的效應的量，這些是通過研究人員、藥理學家、藥劑師、獸醫(yī)、醫(yī)學博士或其他臨床醫(yī)生觀察到的，例如減輕細胞增生紊亂如癌癥或腫瘤的影響/癥狀、或殺滅增生細胞如腫瘤細胞或抑制其生長。
術語“進一步治療”、“進一步給藥”或“進一步被給藥”，意思是不同治療藥物可以同時、有選擇的或間歇的給藥。這樣的進一步給藥可在時間上或空間上被隔開，例如在不同的時間，在不同的日子或經過不同的給藥模式或途徑。
術語“鹵素”或“鹵”指的是氟、氯、溴和碘。
術語“IC50”，如用于此處的，指可測量的表型或響應的濃度，如細胞例如腫瘤細胞的生長被抑制50％的濃度。IC50值可從合適的劑量-響應曲線估計出，例如通過目視擬合或使用合適的曲線擬合或統(tǒng)計軟件。更精確地，IC50值可以通過使用非線性回歸分析確定。
如用于此處的，“個體”指的是多細胞的生物體，例如動物如哺乳動物，優(yōu)選靈長類動物。除了靈長類例如人類之外，其他許多種哺乳動物也可以依照本發(fā)明的方法進行治療。例如，可使用的哺乳動物包括但不限于牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、豚鼠、大鼠或其他牛科、羊科、馬科、犬科、貓科、嚙齒類或鼠科動物。
術語“代謝物”，如用于此處的，指由新陳代謝或代謝過程產生的任何物質。新陳代謝，如用于此處的，是指與存在于細胞、組織、系統(tǒng)、身體、動物的、個體的、病人或人類的分子或化合物的轉化有關的各種物理的/化學的/生化的/藥理學的反應。
術語“前藥”，如用于此處的，指在體內轉化為藥理學上的活性母體藥物的試劑。前藥通常是有用的，因為，在一些情況下，它們比母體藥物易于給藥。例如，它們可通過口服給藥被生物利用而有時母體藥物不能。在藥物組合物中，前藥還可以比母體藥物改善溶解度。前藥可以通過各種機理轉化為母體藥物，包括酶促過程和代謝水解。見Gangwar等人的“Prodrug，molecular structure and percutaneous delivery(前藥，分子結構與經皮傳遞)”，Des.Biopharm.Prop.Prodrugs Analogs，[會議論文集]會議日期1976，409-21.(1977)；Nathwani和Wood，″Penicillinsa current reviewof their clinical pharmacology and therapeutic use(青霉素其臨床藥理學和治療用途的當前回顧)″，Drugs 45(6)866-94(1993)；Sinhababu和Thakker，″Prodrugs of anticancer agents(抗癌劑的前藥)″，Adv.Drug DeliveryRev.19(2)241-273(1996)；Stella等人，″Prodrugs.Do they have advantagesin clinical practice？(前藥。它們在臨床實踐中有優(yōu)勢嗎？)″，Drugs 29(5)455-73(1985)；Tan等人″Development and optimization of anti-HIVnucleoside analogs and prodrugsA review of their cellular pharmacology，structure-activity relationships and pharmacokinetics(抗HIV核苷類似物及前藥的開發(fā)與優(yōu)化它們的細胞藥理學、構效關系及藥代動力學的回顧)″，Adv.Drug Delivery Rev.39(1-3)117-151(1999)。
如用于此處的，“增生紊亂”包括影響細胞生長、分化或增生過程的疾病或紊亂。如用于此處的，“細胞生長、分化或增生過程”是使細胞在數(shù)量、尺寸或內容上增長的過程，是使細胞顯現(xiàn)一組特殊的不同于其他細胞特征的過程，是使細胞靠近或遠離特定位置或刺激物的過程。細胞生長、分化或增生過程包括氨基酸轉運和降解及其他細胞代謝過程。細胞增生紊亂可以以異常調節(jié)的細胞生長、增生、分化或遷移為特征。細胞增生紊亂包括致癌的疾病或紊亂。如用于此處的，“致癌的疾病或紊亂”包括以異常調節(jié)的細胞生長、增生、分化或遷移為特征的疾病或紊亂，它們可導致產生或傾向于產生腫瘤。如用于此處的，“腫瘤”包括組織的良性的或惡性的塊。細胞生長或增生紊亂的例子包括，但不限于癌瘤，例如癌、肉瘤、或白血病，它們的例子包括但不限于結腸癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、子宮內膜癌、子宮癌、肝癌、胃腸癌、前列腺癌和腦癌；腫瘤發(fā)生和轉移；骨骼發(fā)育異常；及造血的和/或骨髓增生的疾病。
II.鉑基化合物在本發(fā)明的一個實施方案中，受試的鉑基化合物是可口服的鉑化學治療藥物。短語“可口服的”，如用于此處的，意思是該藥物或試劑在口服給藥時，具有生物學的、生理學的、藥理學的、治療學的、醫(yī)學的或臨床上的顯著活性。合適的可口服的鉑基治療藥物包括賽特鉑(JM216)、JM118和JM383或其藥學上可接受的鹽、異構體或前藥，及其他描述于EP 0147926和US 5,072,011的。然而，應該承認的是盡管鉑基化學治療藥物可口服，這樣的藥物也可通過其他合適的途徑，例如直腸給藥、皮下注射、靜脈注射、腹腔注射或肌肉注射，這些給藥將被認為是遵循本發(fā)明所教導的。同樣地，其他典型的通過非口服途徑給藥的鉑化合物可通過合適的劑型或化學修飾而成為可口服的。
在另一實施方案中，該鉑基化合物是鉑(IV)配位化合物，其中鉑的氧化態(tài)是+4。例子是賽特鉑(JM216)、JM518、JM559、JM383、異丙鉑、四鉑(奧馬鉑)、LA-12((OC-6-43)-雙(乙酸離子)(1-金剛烷胺)氨合二氯鉑(IV))、JM149、JM221、JM335、ZD0473(AMD473)及在US 6,413,953、US 5,072,011、US 5,519,155、US 5,547,982、US 6,518,428、WO01/76569和WO02/28871，以及Coordination Chemistry Reviews(配位化學綜述)(2002)232，49-67中公開的鉑(Pt)IV價化合物，它們被全部合并在此。
在一個進一步的實施方案中，該鉑基化合物的結構是下列通式(式I)所表示的鉑化合物
R1-R4可以是相同的或不同的并各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基。R5是環(huán)烷基，優(yōu)選的是環(huán)己基。在某些實施方案中，R1和R2不存在。在其他實施方案中，R1和R2是相同的，并且是羥基或乙酸基。在某些實施方案中，R3和R4是相同的并都是羥基或優(yōu)選地為鹵素，例如氯。
在本發(fā)明的又一方面，該鉑基的化學治療藥物是賽特鉑，或賽特鉑的代謝產物。賽特鉑(JM216)具有結構 賽特鉑可根據美國專利第5,072,011和5,244,919號中公開的方法進行合成或通過對US 6,518,428中公開的方法進行適當修飾來合成。
當賽特鉑對細胞、動物或人類患者給藥時，可能形成許多相關的含鉑的代謝物。術語“代謝物”，如用于此處的，也包括在給藥后，在體內或細胞中通過物理的、化學的、生物的或生化的過程從該藥物衍生得到的物質。圖1(取自Raynaud等人，1996 Cancer Chemother Phamacol 38155-162)顯示了賽特鉑(JM216)的典型代謝，并描述了JM118、JM383、JM518、JM559和JM149。如將被本領域技術人員理解的是，在向細胞、動物或人類患者給藥后，另外的含鉑的分子可能通過賽特鉑的代謝而形成，這樣的賽特鉑的代謝物也包括在本發(fā)明的范圍內。合適的代謝物可通過在受治療的細胞、動物或人類中通過生物的或生化的生物轉化而形成?？蛇x擇地，這樣的代謝物可首先在受治療的細胞外形成(例如在胃腸道中)，或可以通過從合適的起始原料的合成反應來形成，并且這樣的代謝物可被直接向細胞、動物或人類患者給藥。例如JM118可以根據EP 147926、GB2,060,615和U.S.4,329,299中公開的方法合成，或可以單獨發(fā)酵步驟從JM216通過生物轉化而形成。
由于賽特鉑的口服利用度及良好的安全性，例如沒有腎的和神經毒性，其明顯不同于順鉑。此外，在賽特鉑和順鉑之間沒有交叉耐藥(CancerRes，53，2581；Br J Cancer 68，240 Cancer Res，53，2581；Br J Cancer68,240)。事實上，我們在此證明，賽特鉑及其代謝物的效能在耐受順鉑的腫瘤細胞中得以保持(實施例4)。
在一個優(yōu)選的實施方案中，鉑基化合物選自賽特鉑(JM216)、JM118和JM383或其前藥。術語“前藥”，如用于此處的，還包括可以得到藥理學的活性代謝物的物質。前藥本身可以有或沒有活性；例如它可以是失活前體。
典型的受試鉑基化學治療藥物可被直接向細胞、動物或人類患者給藥。然而，如從對于代謝物的討論中顯而易見的，可向細胞進行第一個鉑基化合物的給藥，接著，可以通過這樣給藥的第一個鉑基化合物的代謝形成典型的鉑基化學治療藥物。這種這樣給藥的第一個鉑基化合物可被當作典型的受試化學治療藥物的“前藥”。例如JM518可被當作JM118的前藥，因為JM118(用于本發(fā)明的方法的典型的化合物)是由JM518代謝形成的。類似地，JM216也可當作JM118的前藥。其他化合物，當向細胞、動物、個體、患者或人類給藥后，轉化(代謝)成用于本發(fā)明的方法的如JM118的典型化合物的，將被認為是在本發(fā)明的范圍之內。這種其他的化合物可以包括用于本發(fā)明的方法的典型受試化合物的鹽、酯或磷酸鹽，并且在本發(fā)明被公開之后，本領域技術人員將能夠預想許多合適的這種前藥化合物。
在另一實施方案中，該鉑基化合物是合成賽特鉑(JM216)、JM118及JM383的中間體。典型的中間體包括IP-118(美國專利第4,687,780號)、JM-118(合成賽特鉑的中間體，EP 147926)及JM149(EP 333351)。
在又一實施方案中，該鉑基化合物由下列通式之一表示(A)US 5,072,011中公開的那些，由下面的通式表示1.一種Pt(IV)抗腫瘤絡合物的分子式 其中A和A1各自選自NH3和1至10個碳原子的氨基基團，前提是A和A1都是氨基基團時，至少一個是1至3個碳原子的氨基基團；兩個X基團是相同的，并為Cl或Br；R和R1各自選自C1-C10的烷基、環(huán)烷基、芳基、3至7個碳原子的芳烷基、烷氧基、鏈烯基、1至6個碳原子的烷氨基(其中在烷氧基和烷氨基中，該基團通過雜原子與羰基連接)、以及H；這樣X基團是彼此順式的，且CO2R和CO2R1基團是彼此反式的。
(B)US 5,244,919中公開的那些，由下面的通式表示 其中A和A1選自NH3和一氨基基團；R和R1是氫、C1-C10的烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、烷氨基或烷氧基；X是鹵素或烷基單羧酸酯或二羧酸酯。
(C)US 5,519,155中公開的那些，由下面的通式表示1.一種Pt(IV)絡合物的分子式I，
其中X是鹵素原子、擬鹵化物或羥基基團，R1和R2是氫、C1到C6的直或支鏈的烷基或環(huán)烷基、芳基或R1NH2是一種雜環(huán)N供體，且R1和R2可以彼此相同或不同，R3和R4是氫、C1到C5的直或支鏈的烷基或環(huán)烷基或芳基，且R3和R4可以彼此相同或不同，以及R5是氫、甲基或乙基，并具有順式、反式、順式結構。
(D)EP 0 147 926 Al中公開的那些，由下面的通式表示其中A和B是相同或不同的，并各選自氨合物及烷基胺或共同代表二氨基環(huán)鏈烷，X和Y是相同或不同的，并選自鹵化物和擬鹵化物或共同代表環(huán)烷基二羧酸酯，前提是當以X和Y共同代表環(huán)烷基二羧酸酯時，A和B不代表氨合物和/或烷基胺，當A和B共同代表二氨基環(huán)己烷時，X和Y不代表鹵化物和/或擬鹵化物，當A代表氨合物時，B不代表乙胺、異丙胺或環(huán)戊胺，且Z部分是可選的并選自鹵化物和羥基，在(E)US 5,547,982中公開的那些，由下面的通式表示
其中R是H、上至8個碳的低級烷基、上至8個碳的鏈烯基或炔基、或芳基；X是Cl、丙二酸酯、甘醇酸酯或草酸酯；Y是OH、Cl、COOR1、或不存在；Q是烯烴基、鏈烯基、炔基或芳基連接基團；R1是H、低級烷基或芳基；R1是H、脂肪族的、芳香族的或環(huán)狀脂肪族的基團以及R2是一環(huán)狀的脂肪族的酮、縮酮、半縮醛或縮醛。
(F)EB 0 727 430B1中公開的那些，由下面的通式表示 其中每個A是一個離去基團并可以是相同或不同的，或共同形成一個二齒羧酸酯或硫酸酯，每個B，其可以是相同或不同的，為鹵素、羥基、羧酸酯、氨基甲酸酯或碳酸酯，Z是取代的胺，其中該取代基在空間上阻礙了該Pt原子接近腫瘤細胞的DNA鏈，其中Z是不飽和的環(huán)狀胺，通過胺的氮原子與鉑配位，該環(huán)狀胺可含有一或多個其他雜原子并且所述的Z在靠近胺的氮原子的原子上有一個取代基以及X是NH3。
(G)US 4,329,299中公開的那些，由下面的通式表示 其中A是具有式R-NH2的胺，R是支鏈的烷基，以及X和Y是相同或不同的鹵素。
上述鉑基化合物將被共同引用如此處的“受試鉑基化合物”。該受試鉑基化合物也包括任何這些化合物在藥學上可接受的鹽的形式。本發(fā)明的受試鉑基化合物可含有一或多個不對稱中心，優(yōu)選碳或鉑，并因而存在幾何異構體或立體異構體。本發(fā)明包括所有這些異構體及其混合物，也包括藥學上可接受的鹽和前藥或該受試鉑基化合物。
IV.非鉑基治療藥物對許多治療藥物的治療具有耐藥性或頑固的癌癥或腫瘤可從運用本發(fā)明的方法的治療中受益。優(yōu)選的腫瘤是那些對非鉑基的化學治療藥物耐受或頑固的腫瘤。在本發(fā)明的某些備選實施方案中，該受試鉑基化合物可用于治療對其他鉑基化學治療藥物(包括順鉑、奧沙利鉑、卡鉑)頑固的腫瘤。例如實施例4證明了某些受試鉑基化合物的效果，如賽特鉑(JM216)在治療對順鉑耐藥的細胞中的效果。對這些鉑基化合物的耐藥性可使用下述實施例中描述的方法試驗和證實。
在優(yōu)選的實施方案中，所述非鉑基治療藥物不是基于激素的藥物。在某些實施方案中，所述非鉑基治療藥物不是腦垂體負調節(jié)物。在其他實施方案中，所述非鉑基治療藥物不是抗雄性激素物質。
術語“基于激素的藥物”是指被用于激素治療中的化合物。這樣的化合物可以是激素或激素的衍生物或變體?；诩に氐乃幬镞€包括既不是激素，也不是激素的衍生物或變體，但影響激素的產生或作用的分子。用基于激素的藥物的治療是指作為“激素除去療法(hormone ablationtherapy)”。激素除去療法通過限制提供癌癥或腫瘤生長所需的激素而實現(xiàn)限制這類型的癌癥或腫瘤的生長。
某些類型的癌瘤，例如前列腺癌的生長依賴于激素，例如睪酮。如果睪酮的量減少了，通?？赡苁鼓[瘤生長減慢或腫瘤縮小。這種治療通常在有限的一段時間里有效，一般持續(xù)18至24個月。過了這段時間，腫瘤可能停止對這種治療的響應并恢復生長，即激素抵抗型前列腺癌(HRPC)形成了。
睪酮水平可被降低，例如通過手術(如除去睪丸)或通過基于藥物的治療，包括基于激素的藥物治療。有兩種基于激素的藥物的主要類型。第一種是，腦垂體負調節(jié)物阻滯促黃體激素釋放激素(LHRH)，其由腦垂體釋放。LHRH，如果不被阻滯，它是使睪丸產生睪酮的刺激物。這樣的腦垂體負調節(jié)物的例子包括亮丙端林(Prostap)、曲普端林(De-capaptyl)、布舍端林(Suprefact)及戈舍端林(Zoladex)。第二種是，抗雄激素類阻滯睪酮在睪丸的作用。這樣的抗雄激素類包括醋酸環(huán)丙孕酮(Cyprostat)、氟他胺(Eulexin，Drogenil)、尼魯米特(Nilandrone)和比卡魯胺(Casodex)。將被理解的是其他類型的癌瘤也可用基于激素的藥物進行治療。這包括，但不限于乳腺癌、子宮癌、甲狀腺癌和結腸癌。
與受試的鉑基化合物沒有交叉耐藥的合適的非鉑基藥物被在下面描述，其可作為“抗癌瘤治療藥物”的非限定的例子。
1.紫杉烷類對于紫杉烷類如紫杉醇和多西紫杉醇的耐藥性是使用這類藥物的所有化學治療方法中的一個主要問題。紫杉烷類通過與微管蛋白結合，發(fā)揮它們的細胞毒作用，從而導致形成反常的穩(wěn)定的微管。確保有絲分裂的停止觸發(fā)了有絲分裂紡錘體檢查點并導致細胞凋亡。其他通過不依賴于微管功能異常途徑介導細胞凋亡的機理也已被描述，包括通過活化細胞分裂調控(cdc-2)激酶、磷酸化BCL-2和誘導白介素1β(IL-1β)與腫瘤壞死因子-α(TNF-α)所觸發(fā)的分子事件。此外，紫杉烷類已顯示出也通過直接活化細胞凋亡級聯(lián)以外的其他機理發(fā)揮抗腫瘤活性。這些機理包括減少金屬蛋白酶的產生及抑制上皮細胞的增殖與活力，并隨之抑制血管發(fā)生。
如實施例所述的，申請人已證明了典型的受試鉑基化合物，包括賽特鉑(JM216)，在對紫杉烷類耐藥的腫瘤細胞系中保持它們的治療效果。換句話說，對紫杉烷治療耐受的腫瘤細胞系不顯示出對本發(fā)明的典型的受試鉑基化合物的耐藥性。因此，本發(fā)明的一個實施方案涉及通過進行本發(fā)明的受試鉑基化合物的給藥(優(yōu)選賽特鉑(JM216))以治療對紫杉烷類耐藥的腫瘤患者的方法。
對于術語“紫杉烷”，它意指包括萜類家族中的任何成員，包括，但不限于紫杉醇(Taxol)和多西紫杉醇(Taxotere)，它們主要從太平洋紫杉樹，短葉紫杉屬(Taxus brevifolia)中得到，并具有抗某些腫瘤的活性，尤其是對于乳腺腫瘤、肺部腫瘤和卵巢腫瘤(見，例如Pazdur等人，CancerTreat Res.1993.19351；Bissery等人，Cancer Res.1991 514845)。在本發(fā)明的方法和封裝藥物中，優(yōu)選的紫杉烷類是紫杉醇、多西紫杉醇、脫氧紫杉醇、TL-139及其衍生物。見Annu.Rev.Med.48353-374(1997)。
術語“紫杉烷”，如用于此處的，既包括天然得到的及相關形式，也包括化學合成的萜類及其衍生物，包括脫氧紫杉醇化合物，如那些描述于美國專利第5,440,056號和第4,942,184號的，它們在此引作參考，以及由Bristol-Myers Oncology作為TAXOL出售的。在美國，紫杉醇已被證實其在治療頑固的卵巢癌中的臨床用途(Markman等人，Yale Journal ofBiology and Medicine，64583，1991；McGuire等人，Ann.Intern.Med.，111273，1989)。其對于幾種類型的腫瘤的化學療法被認為是有效的，包括乳腺腫瘤(Holmes等人，J.Nat.Cancer Inst.，831797,1991)，且也被批準治療乳腺癌。它是一個治療皮膚腫瘤(Einzig等人，Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.，2046)及頭頸癌(Forastire等人，Sem.Oncol.，2056,1990)的有潛力的候選藥物。該化合物也顯示出治療多囊性腎病(Woo等人，Nature，368750，1994)、肺癌和瘧疾的潛力。多西紫杉醇(N-脫苯甲酰基-N-叔丁氧羰基-10-脫乙?；仙即?由Rhone-Poulenc Rorer S.A.以商標TAXOTERE生產。此外，其他紫杉烷類被描述于″紫杉醇其他衍生物的合成與抗癌活性(Synthesis and Anticancer Activity of Taxol other Derivatives)″D.G.1.Kingston等人，Studies in Organic Chemistry(有機化學研究)，第26卷，題為″天然產物化學的新趨勢(New Trends in Natural Products Chemistry)″(1986)，Atta-urRabman，P.W.le Quesne，Eds.(Elvesier，Amsterdam 1986)，第219-235頁被合并在此。各種紫杉烷類也被描述于美國專利第6,380,405號，其全部內容被合并在此。
本發(fā)明的方法及封裝藥物適用于治療對任何紫杉烷的治療具有耐藥性的腫瘤，不管其耐藥機理是什么。已知的產生對紫杉烷的耐藥性的機理包括，例如在靶分子中的分子變化，即α-微管蛋白和/或β-微管蛋白，P-糖蛋白(多藥耐藥基因MDR-1)的增量調節(jié)，細胞凋亡調控和有絲分裂檢查點蛋白質的變化，細胞膜的變化，白介素6的過表達(IL-6；ClinCancer Res(1999)5，3445-3453；Cytokine(2002)17，234-242)，白介素8的過表達(IL-8；Clin Cancer Res(1999)5,3445-3453；Cancer Res(1996)56，1303-1308)或單核細胞趨化蛋白-1的過表達(MCP-1；Clin Cancer Res(1999)5，3445-3453)，酸性和堿性成纖維細胞生長因子、跨膜因子，例如p185(HER2；Oncogene(1996)13，1359-1365)或EGFR(Oncogene(2000)19，6550-6565；Bioessays(2000)22，673-680)水平的變化，粘附分子的變化，例如β1整聯(lián)蛋白(Oncogene(2001)20，4995-5004)，持家分子的變化，例如谷胱甘肽-S-轉移酶和/或谷胱甘肽過氧化物酶(Jpn J Clin Oncol(1996)26，1-5)，與細胞信號轉導有關的分子的變化，如干擾素響應因子9，與NF-κB信號轉導有關的分子，與PI-3激酶/AKT存活途徑有關的分子，RAF-1激酶活性，PKC α/β或PKC β/β2以及經由核內蛋白，例如核膜聯(lián)蛋白IV，蛋白質的DNA J家族的甲基化控制的J蛋白質，胸腺嘧啶脫氧核苷酸合成酶或c-jun。
其他已知的產生對紫杉烷的耐藥性的機理是，例如細胞凋亡調控和有絲分裂檢查點蛋白質的變化。這樣的細胞凋亡調控和有絲分裂檢查點蛋白質的變化包括Bcl-2的過表達(Cancer Chemother Pharmacol(2000)46，329-337；Leukemia(1997)11，253-257)，及Bcl-xL的過表達(Cancer Res(1997)57，1109-1115；Leukemia(1997)11，253-257)。Bcl-2的過表達可能由雌二醇引起(Breast Cancer Res Treat(1997)42，73-81)。
紫杉烷的耐藥性也可能經由細胞膜的變化而產生。這樣的變化包括脂肪酸亞甲基甲基的比率變化(CancerRes(1996)56，3461-3467)，膽堿甲基的比率變化(CancerRes(1996)56，3461-3467)及細胞膜的通透性的變化(JCell Biol(1986)102，1522-1531)。
此外已知的產生對紫杉烷的耐藥性的機理是酸性的和堿性的成纖維細胞生長因子的變化(Proc Natl Acad Sci USA(2000)97，8658-8663)，與細胞信號轉導有關的分子，例如干擾素響應因子9(Cancer Res(2001)61，6540-6547)，與NF-κB信號轉導有關的分子(Surgery(2991)130，143-150)，與PI-3激酶/AKT存活途徑有關的分子(Oncogene(2001)20，4995-5004)，，RAF-1激酶活性(Anticancer Drugs(2000)11，439-443；Chemotherapy(2000)46，327-334)，PKC α/β(Int J Cancer(1993)54，302-308)或PKC β/β2(Int J Cancer(2001)93，179-184，Anticancer Drugs(1997)8，189-198)。
紫杉烷的耐藥性也可經由核內蛋白的變化產生，例如核膜聯(lián)蛋白IV(Br J Cancer(2000)83，83-88)，蛋白質的DNA J家族的甲基化控制的J蛋白質(Cancer Res(2001)61，4258-4265)，胸腺嘧啶脫氧核苷酸合成酶(Anticancer Drugs(1997)8，189-198)或c-jun(Anticancer Drugs(1997)8，189-198)，經由旁分泌因子，例如LPS(J Leukoc Biol(1996)59，280-286)，HIF-1(Mech Dev(1998)73，117-123)，VEGF(Mech Dev(1998)73，117-123)及bcl-XL在球形細胞培養(yǎng)物中不下降(Cancer Res(1997)57，2388-2393)。
2.吲哚生物堿類如實施例所述的，申請人已證明了典型的受試鉑基化合物，在對喜樹堿，一種吲哚生物堿耐藥的腫瘤中保持其治療效能。換句話說，對喜樹堿治療耐受的腫瘤不顯示出對本發(fā)明的典型的受試鉑基化合物的耐藥性。因此，本發(fā)明的一個實施方案涉及通過進行本發(fā)明的受試鉑基化合物的給藥以治療對吲哚生物堿耐藥的腫瘤患者的方法。
典型的吲哚生物堿類包括雙吲哚類生物堿，例如長春新堿、長春堿和5’-去甲脫水長春堿(在下文中5’-去甲長春堿)。眾所周知，雙吲哚類化合物(生物堿類)，且尤其是天然來源的長春新堿和長春堿以及近來合成制備的5’-去甲長春堿在抗腫瘤治療中扮演了重要角色。這些化合物是商品化的或作為鹽類被分別描述于許多藥典中(分別主要作為硫酸鹽類或富馬酸氫鹽類)。
優(yōu)選的吲哚類生物堿是喜樹堿及其衍生物和類似物。喜樹堿是一種植物堿，存在于亞洲樹木喜樹(Camptotheca acuminata)的木材、樹皮和果實中。喜樹堿衍生物目前在治療一些惡性腫瘤中是標準成分。見Pizzolato andSaltz，2003。研究已確定了喜樹堿抑制DNA和RNA合成。最近的研究已證明喜樹堿及其類似物干擾細胞酶拓撲異構酶I的作用機理，其在許多細胞過程中是重要的(例如DNA復制及重組、RNA轉錄、染色體解聚等)。不束縛于理論，認為喜樹堿是通過可逆的誘導單鏈斷裂，從而影響細胞復制能力。喜樹堿在拓撲異構酶I和DNA間穩(wěn)定了所謂的可裂解絡合物(cleavable complex)。這些穩(wěn)定的斷裂是完全可逆和非致命的。然而，當一DNA復制叉與可裂解絡合物碰撞，單鏈斷裂被轉化為不可逆的雙鏈斷裂。凋亡細胞死亡是接著由半胱天冬酶的活化所介導的。半胱天冬酶活化的抑制使細胞從凋亡轉向短暫的G1休止，接著細胞壞死。因而，細胞死亡的機理需要發(fā)生活化DNA的復制，導致來自喜樹堿的細胞毒性效應，那是S-相特異性的。實際上，體外S-相中的細胞已顯示出是比G1或G2中的細胞對喜樹堿更敏感100-1000倍。
喜樹堿類似物及衍生物包括，例如伊立替康(鹽酸伊立替康，CPT-11)、托泊替康(和美新)、BAY38-3441、9-硝基喜樹堿(Orethecin，盧比替康)、依沙替康(DX-8951)、勒托替康(GI-147211C)、gimatecan、高喜樹堿類diflomotecan(BN-80915)和9-氨基喜樹堿(IDEC-13′)。見Pizzolatoand Saltz，The Lancet，3612235-42(2003)；及Ulukan and Swaan，Drug 622039-57(2002)。另外的喜樹堿類似物和衍生物包括SN-38(前藥伊立替康的活性化合物；轉化是通過細胞羧酸酯酶催化)、STl481、karanitecin(BNP 1350)、吲哚卡比馬唑(indolocarbazoles)，例如NB-506、雙異喹啉類、茚托利辛、ideno異喹諾酮類(idenoisoquinolones)、苯并奮乃靜類及NB-506。
本發(fā)明的方法和藥物組合物用于治療對任何一或多種以上列出的藥物耐受的腫瘤的治療。更多的喜樹堿衍生物被描述于WO03/101998、美國專利第6100273號及美國專利第5587673號。
3.其他非鉑基治療藥物申請人已證明了受試鉑基藥物對于治療具有耐藥性的腫瘤是有效的，其中耐藥性至少通過下述三種機理之一介導多藥耐藥、微管蛋白類和拓撲異構酶I。這一部分將描述這三種耐藥機理及對于通過這些機理中的至少一種產生耐藥性的治療藥物。本領域的技術人員將明白腫瘤細胞可以通過超過一種的機理產生對化學治療藥物的耐藥性。例如腫瘤細胞對紫杉醇的耐藥性可經由多藥耐藥，或可選擇地或另外地，經由微管蛋白突變產生。
在一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的方法和藥物組合物治療對非鉑基化學治療藥物耐藥的腫瘤是有用的。
在又一實施方案中，本發(fā)明的方法、封裝藥物和藥物組合物治療對鉑基化學治療藥物耐藥的腫瘤是有用的。
a.通過微管蛋白介導的耐藥性微管是存在于所有真核細胞內的胞內絲狀結構。作為不同細胞器的成分，例如有絲分裂紡錘體、中心粒、基粒、纖毛、鞭毛、軸足及細胞骨架，微管與許多細胞功能有關，包括在有絲分裂期間的染色體運動、細胞活力、細胞器轉運、胞質分裂、形成細胞板、細胞形狀的維持以及在形成植物細胞壁中細胞微原纖維沉積的定向。微管的主要成分是微管蛋白，一個蛋白質由兩個亞基組成，叫作α和β。在細胞中，微管蛋白的一個重要特性是能在合適的條件下經歷聚合形成微管或解聚。也可使用分離的微管蛋白在體外發(fā)生此過程。
微管在細胞分裂中扮演了關鍵角色，其作為有絲分裂紡錘體的成分，有絲分裂紡錘體是與在分裂細胞中在兩個子核間精確地分配染色體有關的細胞器。許多藥物通過與微管蛋白或微管結合以阻止細胞分裂。通過這一機理見效的抗癌藥物包括生物堿類的長春新堿和長春堿，以及基于紫杉烷的化合物紫杉醇和多西紫杉醇{例見E.K.Rowinsky和R.C.Donehower，Pharmacology and Therapeutics(藥理學與治療學)，52，35-84(1991)}。其他有效抑制哺乳動物細胞的抗微管蛋白化合物包括苯并咪唑類，例如諾考達唑以及天然產物例如秋水仙堿、鬼臼毒素、環(huán)硫酮類(epithilones)，以及考布他汀類。
非鉑基治療藥物可以發(fā)揮它們的活性通過，例如與α-微管蛋白、β-微管蛋白或兩者結合，和/或通過阻止它們解聚來穩(wěn)定微管。其他活化的模式可以包括下調這些微管蛋白質的表達，或結合并修飾與控制微管蛋白的表達、活性或功能有關的其他蛋白質的活性。
在一個實施方案中，腫瘤細胞對非鉑基治療藥物的耐藥性是通過微管蛋白介導的。對于“通過微管蛋白介導”，意指包括微管蛋白的直接或間接關聯(lián)。例如耐藥性可能由于微管蛋白突變，一種在耐藥性中與微管蛋白的直接關聯(lián)而產生?？蛇x地，耐藥性的產生可能由于在細胞中其他地方的變更而影響微管蛋白和/或微管。這些變更可以是影響微管蛋白表達水平和模式的基因突變，或在總體上影響微管組裝的基因突變。哺乳動物表達6α-和6β-微管蛋白基因，它們都可以介導耐藥性。
特別地，微管蛋白介導的腫瘤對非鉑基治療藥物的耐藥性可經由微管蛋白分子中的分子變化產生。例如分子變化包括突變，例如點突變、缺失或插入，剪接變體或其他基因、信息或蛋白質水平的變化。在特定的實施方案中，這樣的分子變化可存在于β-微管蛋白的氨基酸250-300，或者可影響β-微管蛋白基因的核苷酸810和/或1092。例如，且不希望作為限制紫杉醇耐藥的人類卵巢癌細胞系1A9-PTX10是在β-微管蛋白的氨基酸殘基β270和β364發(fā)生突變(見Giannakakou等人，1997)。另一個例子，兩種對大環(huán)內酯類抗腫瘤藥耐藥的人類癌細胞系分別在氨基酸殘基β274和β282具有獲得性β-微管蛋白突變(見Giannakakou等人，2000)。這些突變被認為影響藥物與微管蛋白的結合?？蛇x地，致使耐藥性的微管蛋白突變也可以是影響微管組裝的變更。在微管組裝中的這種變化與野生型對照相比被證明為通過具有減少微管組裝補償藥物的效果(Minotti，A.M.，Barlow，S.B.，和Cabral，F(xiàn).(1991)J Biol Chem 266，3987-3994)。也將被本領域技術人員理解的是α-微管蛋白中的分子變化也可能致使某些化合物的耐藥性。WO 00/71752描述了寬量程的對微管蛋白分子的分子變化以及對某些化學治療化合物的耐藥性，這樣的分子變化可以發(fā)生在細胞上。WO 00/71752，及其所有參考文獻，被全部合并在此。
也可經由α-微管蛋白或β-微管蛋白或兩者的表達模式的變更致使對非鉑基治療藥物的微管蛋白介導的腫瘤的耐藥性。例如一些實驗室已經提供了特異性β-微管蛋白基因表達中的變化與培養(yǎng)的腫瘤細胞系對于紫杉醇的耐藥性有關聯(lián)的證據(Haber，M.，Burkhart，C.A.，Regl，D.L.，Madafiglio，J.，Norris，M.D.，和Horwitz，S.B.(1995)J BioL Chem.270，31269-75；Jaffrezou，J.P.，Durnontet，C.，Deny，W.B.，Duran，G.，Chen，G.，Tsuchiya，E.，Wilson，L.，Jordan，M.A.，和Sikic，B.1.(I 995)OncologyRes.7，517-27；Kavallaris，M.，Kuo，D.Y.S.，Burkhart，C.A.，RegI，D.L.，Norris，M.D.，Haber，M.，和Horwitz，S.B.(I 997)J Clin.Invest.100，1282-93；和Ranganathan，S.，Dexter，D.W.，Benetatos，C.A.，和Hudes，G.R.(1998)Biochi，.Biophys.Acta 1395，237-245)。
也可經由細胞的總的微管蛋白含量的增加、α-微管蛋白含量的增加或α-微管蛋白的不同電泳變體的表達而致使對非鉑基治療藥物的微管蛋白介導的腫瘤的耐藥性。此外，可經由在β-微管蛋白亞基的電泳運動的變更、Hβ2微管蛋白基因的過表達、Hβ3微管蛋白基因的過表達、Hβ4微管蛋白基因的過表達、Hβ4a微管蛋白基因的過表達或Hβ5微管蛋白基因的過表達而致使耐藥性。
也可經由微管蛋白的翻譯后修飾，例如α-微管蛋白的乙?；脑黾?Jpn J Cancer Res(85)290-297)，經由蛋白質通過相互影響微管蛋白二聚體(dimmers)或聚合的微管來調節(jié)微管動力學，而致使對非鉑基治療藥物的微管蛋白介導的腫瘤的耐藥性。這樣的蛋白質包括，但不限于驛蛋白(Mol Cell Biol(1999)19，2242-2250)和MAP4(Biochem Pharmacol(2001)62，1469-1480)。
其耐藥性至少是部分地通過微管蛋白介導的典型的化學治療藥物包括紫杉烷類(紫杉醇、多西紫杉醇及其衍生物)、長春花生物堿類(長春堿、長春新堿、長春地辛及長春瑞濱)、大環(huán)內酯類抗腫瘤藥(埃博霉素A(epothilone A)、埃博霉素B(epothilone B)和discodermolide)、諾考達唑、秋水仙堿、秋水仙堿衍生物、別秋水仙堿(allocolchicine)、軟海綿素B(Halichondrin B)、dolstatin 10、美登素、根霉素、硫代秋水仙堿、三苯甲基cysterin、雌莫司汀及諾考達唑。見WO 03/099210和Giannakakou等人，2000。另外的耐藥性至少是部分地通過微管蛋白介導的典型的化學治療藥物包括秋水仙堿、氯琥珀膽堿、考布他汀、cryptophycins(縮酚酸肽類抗腫瘤藥)、多拉司他汀、auristatin PHE、symplostatin 1、eleutherobin、軟海綿素B、氯化月芐三甲銨、hemiasterlins、laulimalide、maytansinoids、PC-SPES、peloruside A、白藜蘆醇、S-烯丙半胱氨酸(SAMC)、spongistatins(海綿毒素)、紫杉烷類、vitilevuamide、2-甲氧雌二醇(2-ME2)、A-289099、A-293620/A-318315、ABT-751/E7010、ANG600系列、脫水長春堿(AVLB)、AVE806、比伐單抗雙異煙肼、BMS-247550、BMS-310705、cantuzumab雙異煙肼、考布他汀、考布他汀A-4前藥(CA4P)、CP248/CP461、D-24851/D-64131、多拉司他汀10、E7389、EP0906、FR182877、HMN-214、huN901-DM1/BB-10901TAP、ILX-651、KOS-862、LY355703、甲苯噠唑、MLN591DM1、My9-6-DM1、NPI-2352和NPI-2358、Oxi-4503、R440、SB-715992、SDX-103、T67/T607、曲妥單抗-DM1、TZT-1027、長春氟寧、ZD6126、ZK-EPO。
對于這些和其他化合物的耐藥性可用本發(fā)明的方法在實施例中被試驗或證實。本發(fā)明的方法和藥物組合物對以上列出的一種或多種藥物耐藥的腫瘤的治療是有用的。
其耐藥性至少是部分地通過微管蛋白介導的優(yōu)選的化學治療藥物是紫杉烷類，包括但不限于紫杉醇或多西紫杉醇(泰索帝)，其主要從太平洋紫杉樹，短葉紫杉屬中得到，并具有抗某些腫瘤的活性，尤其是對于乳腺腫瘤和卵巢腫瘤(見，例如Pazdur等人，Cancer Treat Res.1993.19351；Bissery等人，Cancer Res.1991514845)。
b.通過多藥耐藥介導的耐藥性在另一實施方案中，腫瘤細胞對非鉑基治療藥物的耐藥性是通過多藥耐藥介導的。對于“多藥耐藥性(MDR)”，如用于此處的，指的是一種特殊機理，其限制一大類疏水的、弱陽離子化合物在細胞中聚集的能力。這些化合物具有不同的結構和作用機理，然而都受這一機理影響。
實驗模型說明多藥耐藥能通過提高ATP結合盒轉運蛋白(ABC)的表達而引起，ABC作為ATP依賴的流出泵發(fā)揮作用。這些泵主動地轉運大量抗癌的和細胞毒藥物到細胞外，特別是天然的疏水藥物。在哺乳動物中，ABC轉運蛋白的超家族包括P-糖蛋白(P-gp，ABCB1)轉運蛋白(在人類的MDR1和MDR3基因中)，MRP亞家族(已有六個成員組成，如MRP1(ABCC1))，和膽汁鹽輸出蛋白(ABCB11；Cancer Res(1998)58，4160-4167)，MDR-3(Nature Rev Cancer(2002)2，48-58)，肺耐藥蛋白(LRP)及乳腺癌耐藥蛋白(BCRP，ABCG2)。見Kondratov等人，2001及其中的參考資料；Cancer Res(1993)53，747-754；J Biol Chem(1995)270，31269-31275；Leukemia(1994)8，465-475；Biochem Pharmacol(1997)53，461-470)。這些蛋白質能夠識別和流出具有不同(diverged)化學結構的大量底物，包括許多抗癌藥物。P-gp的過表達是MDR最常見的原因。MDR的其他原因歸于拓撲異構酶II、蛋白激酶C和特異的谷胱甘肽轉移酶的變化。見Endicott and Ling，1989。
本發(fā)明的方法用于治療對非鉑基治療藥物耐藥的腫瘤，其耐藥性至少是部分的由于MDR。在一個優(yōu)選的實施方案中，腫瘤的藥物耐藥性是通過ABC轉運蛋白的過表達介導的。在進一步優(yōu)選的實施方案中，腫瘤的藥物耐藥性是通過P-gp的過表達介導的。許多機理可以導致P-gp的過表達，包括MDR-1基因的擴增(Anticancer Res(2002)22，2199-2203)，MDR-1基因轉錄的增加(J Clin Invest(1995)95，2205-2214；Cancer Lett(1999)146，195-199；Clin Cancer Res (1999)5，3445-3453；Anticancer Res(2002)22，2199-2203)，其可通過轉錄因子例如RGP8.5介導(Nat Genet 2001(27)，23-29)，涉及MDR-1翻譯效率變化的機理(Anticancer Res(2002)22，2199-2203)，MDR-1基因的突變(Cell(1988)53，519-529；Proc Natl Acad Sci USA(1991)88，7289-7293；Proc Natl Acad Sci USA(1992)89，4564-4568)，以及涉及MDR-1基因的染色體重排和導致形成雜合基因(J Clin Invest(1997)99，1947-1957)。
在其他實施方案中，本發(fā)明的方法用于治療對非鉑基治療藥物耐藥的腫瘤，其耐藥性是由于其他原因導致的MDR，包括，例如拓撲異構酶II、蛋白激酶C和特異的谷胱甘肽轉移酶的變化。
通過P-gp的作用產生耐藥性的治療藥物包括，但不限于長春花生物堿類(如長春堿)、蒽環(huán)霉素類(如阿霉素、多柔比星)、表鬼臼毒素類(如依托泊苷)、紫杉烷類(如紫杉醇、多西紫杉醇)、抗生素類(如放線菌素D和短桿菌肽D)、抗微管劑類(如秋水仙堿)、蛋白質合成抑制劑類(如嘌羅霉素)、毒肽類(如纈氨霉素)、拓撲異構酶抑制劑類(如托泊替康)、DNA嵌入劑類(如溴化乙錠)及抗有絲分裂劑類。見WO 99/20791。本發(fā)明的方法和藥物組合物用于治療對于上述列出的任何一種或多種藥物耐藥的腫瘤。
c.通過拓撲異構酶I介導的耐藥性在進一步的實施方案中，腫瘤細胞對于非鉑基治療藥物的耐藥性是通過拓撲異構酶介導的。屬于這一類別的典型的治療藥物包括那些直接的或間接地靶定(target)拓撲異構酶的。
DNA正常情況下作為一種超螺旋的雙螺旋存在。在復制中，它解旋，以單鏈為模板合成新鏈。為了減輕在復制叉前面形成的扭轉應力，需要暫時斷裂DNA的單或雙鏈。不希望束縛于任何機理，拓撲異構酶被認為是促成了如下的過程拓撲異構酶II引起暫時的雙鏈斷裂，而拓撲異構酶I引起單鏈斷裂。這個作用使得斷裂的鏈圍繞著完好的鏈旋轉。接著，拓撲異構酶I再次連接斷裂的鏈以恢復雙鏈DNA的完整。
在一個實施方案中，腫瘤細胞對于非鉑基治療藥物的耐藥性是通過拓撲異構酶介導的。對于“通過拓撲異構酶介導”，它意指包括與拓撲異構酶直接和間接有關的。例如耐藥性可能由于拓撲異構酶突變，一種在耐藥性中與拓撲異構酶的直接關聯(lián)而產生的?？蛇x地，耐藥性的產生可能由于在細胞中其他地方的變更而影響拓撲異構酶。這些變更可以是影響拓撲異構酶的表達水平和模式的基因突變，或在總體上影響拓撲異構酶的功能或活性的基因突變。在優(yōu)選的實施方案中，所述的拓撲異構酶是拓撲異構酶I。在其他實施方案中，所述的拓撲異構酶是拓撲異構酶II。
不束縛于理論，作用于拓撲異構酶I的化合物以某種方式結合到拓撲異構酶I-DNA絡合物上，阻礙了DNA的再連接。拓撲異構酶I最初與DNA有共價相互作用。拓撲異構酶I接著斷裂DNA的一單鏈，并經由在拓撲異構酶I的酪氨酸-273和DNA斷裂的鏈的3-磷酸基之間的磷酸二酯鍵形成一共價中間物。接著，DNA的未受損的鏈穿過斷裂，然后拓撲異構酶I再連接該DNA并釋放該絡合物。與共價復合物結合的藥物例如喜樹堿類以某種方式阻礙DNA的再連接。永久的DNA斷裂可能經由這些斷裂和或復制或轉錄復合物之間的沖突誘導細胞凋亡。
其耐藥性是通過拓撲異構酶I介導的治療藥物優(yōu)選地包括喜樹堿及其衍生物和類似物，例如9-硝基喜樹堿(IDEC-132)、依沙替康(DX-8951f)、盧比替康(9-硝基喜樹堿)、勒托替康(GI-147211C)、高喜樹堿類如diflomotecan(BN-80915)和BN-80927、托泊替康、NB-506、J107088、吡唑[1，5-a]吲哚衍生物，例如GS-5、片螺素D、SN-38、9-氨基喜樹堿、ST1481和karanitecin(BNP 1350)及伊立替康(CPT-11)。其他可用于實踐本發(fā)明的喜樹堿類能在The Camptothecins Unfolding Their AnticancerPotential《喜樹堿類顯露它們的抗癌潛力》，Annals of the New YorkAcademy of Science(紐約科學院年報)，第922卷(ISBN 1-57331-291-6)中找到。
不希望束縛于任何特定理論，喜樹堿被認為是通過阻滯拓撲異構酶I的裂解/再連接反應的再結合步驟抑制拓撲異構酶I，導致共價反應中間體，一種可裂解復合物的蓄積。特別地，可經由拓撲異構酶I分子的分子變化致使拓撲異構酶I介導的對非鉑基治療藥物的耐藥性。例如，分子變化包括突變，例如點突變、缺失或插入，剪接變體或其他基因、信息或蛋白質水平的變化。
在特定的實施方案中，這樣的分子變化位于靠近第723位氨基酸的催化的酪氨酸殘基。這樣的分子變化的殘基可存在于包括但不限于第717、722、723、725、726、727、729、736和737位氨基酸(見Oncogene(2003)22，7296-7304，作為綜述)。
在同樣優(yōu)選的實施方案中，這樣的分子變化位于第361位和364位氨基酸之間。這樣的分子變化的殘基可存在于包括但不限于第361、363和364位氨基酸。
在其他同樣優(yōu)選的實施方案中，這樣的分子變化位于第533位氨基酸附近。這樣的分子變化的殘基可存在于包括但不限于第503和533位氨基酸。
在其他同樣優(yōu)選的實施方案中，這樣的分子變化也可位于拓撲異構酶I蛋白的其他氨基酸中。這樣的分子變化的殘基可存在于包括但不限于第418和503位氨基酸。
在其他實施方案中，這樣的分子變化也可是一種重復。在一個實施方案中，這樣的重復可存在于與拓撲異構酶I蛋白的氨基酸20-609相應的核苷酸中。
在其他實施方案中，也可經由與拓撲異構酶I相互作用的細胞蛋白致使拓撲異構酶I介導的腫瘤耐藥性。能夠這樣做的蛋白質包括但不限于核仁素。
在特定的實施方案中，這樣的分子變化可位于第370和/或723號氨基酸。例如，但不想作為限制，對喜樹堿耐藥的人類白血病細胞系CEM/C2(ATCC No.CRL-2264)在第370(Met→Thr)和722(Asn→Ser)位攜帶兩個氨基酸置換(Cancer Res(1995)55，1339-1346)。對喜樹堿耐藥的CEM/C2細胞是通過體外在喜樹堿的存在下從T類成淋巴細胞的白血病細胞系CCRF/CEM中選擇得到的(Kapoor等人，1995.Oncology Research 7；83-95，ATCC)。CEM/C2耐藥細胞顯示了非典型的多藥耐藥性并表達一種形式的拓撲異構酶，其與從相對于親代細胞的降低水平的CCRF/CEM細胞相比對于喜樹堿的抑制活性較低敏感。除了對喜樹堿的耐藥性，CEM/C2細胞表現(xiàn)出對依托泊苷、放線菌素D、博來霉素、米托蒽醌、柔紅霉素、多柔比星和4’-(9-吖啶氨基)甲磺酸-m-茴香胺化物的交叉耐藥。
在其他實施方案中，也可經由拓撲異構酶I基因的表達模式的變化致使拓撲異構酶I介導的腫瘤對非鉑基治療藥物的耐藥性(Oncol Res(1995)7，83-95)。在進一步的實施方案中，經由藥物代謝的變化也可致使拓撲異構酶I介導的腫瘤耐藥性。仍在進一步的實施方案中，經由不充分的和/或降低的藥物在腫瘤中的蓄積、拓撲異構酶I的結構或位置的變化、對拓撲異構酶I-藥物相互作用的細胞響應的變化或對藥物-DNA-三元復合物形成的細胞響應中的變化也可致使拓撲異構酶I介導的腫瘤耐藥性(Oncogene(2003)22，7296-7304；Ann N Y Acad Sci(2000)922，46-55)。
拓撲異構酶I被認為是在細胞暴露于喜樹堿類后，從核仁向細胞核或甚至向細胞質快速移動。
在一個實施方案中，拓撲異構酶I介導的腫瘤耐藥性是通過與拓撲異構酶I從核仁向細胞核和/或細胞質的重置有關的因子，例如與泛肽/26S蛋白酶體途徑或SUMO有關的因子介導的。
在其他實施方案中，拓撲異構酶I介導的腫瘤耐藥性是通過與DNA復制、DNA檢查點控制和DNA修復有關的因子介導的。
DNA檢查點控制的因子包括S-檢查點控制的蛋白質，例如Chkl、ATR、ATM、及DNA-PK多聚體。
在其他實施方案中，拓撲異構酶I介導的腫瘤耐藥性是通過凋亡途徑或其他細胞死亡途徑的因子介導的。這包括，但不限于bcl-2的過表達和p21Wafl/Cipl的過表達。
在其他實施方案中，拓撲異構酶I介導的腫瘤耐藥性是通過拓撲異構酶I的翻譯后修飾介導的。這樣的翻譯后修飾是遍在蛋白化和蘇素化。此外，這樣的翻譯后修飾可包含其他細胞蛋白質，例如Ubp11、DOA4和topor。
其耐藥性是通過拓撲異構酶II介導的治療藥物包括表鬼臼毒素類，例如VP16和VM26、[1，5-a]、吡唑[1，5-a]吲哚衍生物類，例如GS-2、GS-3、GS-4和GS-5。
V.治療效果分析在一個實施方案中，本發(fā)明的鉑基化合物殺滅對非鉑基治療藥物耐藥的腫瘤細胞。腫瘤細胞的生存力可通過本領域已知的任何方法確定。例如可以使用在Shekan等人，J.Natl.Cancer.Inst.821107-12(1990)中用于抗癌藥物篩選的所描述的比色細胞毒性分析。另一個例子，可通過將細胞與染料接觸并在顯微鏡下觀察以確定腫瘤細胞的生存力。觀察到存活細胞具有完整的膜，并且未被染色，而瀕于死亡或已死亡的細胞具有“有漏洞的”膜且被染色了。細胞對染料的結合表明了細胞的死亡。用于這一目的的染料是錐蟲藍。
本發(fā)明的典型的含鉑組合物可在耐藥腫瘤細胞中誘導細胞凋亡——一種細胞死亡的模式。細胞凋亡識別為形態(tài)學、生化學和分子變化的特征模式。經歷凋亡的細胞出現(xiàn)萎縮和圓形。它們也被觀察到從保持它們的培養(yǎng)皿中分離。形態(tài)學變化包括染色質和細胞質的凝聚的特征模式，其易于通過顯微鏡識別。當被DNA結合染料，例如H33258染色，凋亡細胞表現(xiàn)出標準的凝聚的和間斷的(punctuate)細胞核而不是同質圓形的細胞核。
細胞凋亡的典型特征是核內溶解，是一種分子變化，其中核DNA最初在核小體的連接部分降解并得到等于單個和多重核小體的片段。當這些DNA片段被置于凝膠電泳，它們表現(xiàn)出在凝膠上彼此大約等距定位的一系列DNA帶。相鄰兩個帶間的尺寸差異大約是一個核小體的長度，即120對堿基。顯示這一特征的DNA帶被叫作DNA梯，它表明了細胞的凋亡。凋亡的細胞也可通過基于測量細胞DNA含量的流式細胞計數(shù)法、DNA敏感性增加到變性，或改變的光線散射特性來識別。這些方法在本領域內是熟知的。然而，也該被認識到的是，程序性細胞死亡的模式，包括細胞凋亡，可遵循許多機理或表現(xiàn)出不同于上述那些的其他表型/特性。在這樣的情況下，這些機理也可被鑒別、分類或認為“細胞凋亡”。
細胞毒性也可通過根據Shekan等人(J Natl Cancer Inst(1990)82，1107-112)中，使用SRB分析進行測量，如實施例中所描述的。
其他關于細胞生存力的分析被描述于Handbook of Fluorescent Probesand Research Products(熒光探針及研究成果手冊)(Molecular ProbesHandbook，分子探針手冊)中的第15章，其全部內容被引用在此。
在另一實施方案中，本發(fā)明的鉑基化合物抑制對非鉑基治療藥物耐藥的腫瘤細胞的生長。由鉑基化合物引起的對耐藥腫瘤細胞的生長抑制可以是部分的(減慢細胞生長)或完全抑制(即將細胞停止在細胞周期的某點)。細胞生長可通過本領域已知的任何技術進行測量。這樣的技術包括，例如MTT分析(基于3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-聯(lián)苯四唑溴化物的四唑鹽的還原)、和使用DNA結合染料PicoGreen的PicoGreen分析，它們都被描述于Torrance等人的Nat.Biotech.19940-945(2001)，其被完整地在此引用。關于細胞增殖/生長的其他分析被描述于Handbook ofFluorescent Probes and Research Products(熒光探針及研究成果手冊)(Molecular Probes Handbook，分子探針手冊)中的第15章。
疾病、癌癥或腫瘤的發(fā)展對于使用受試鉑基化合物的治療的響應可通過使用本領域已知的任何標準技術進行監(jiān)測。例如腫瘤尺寸可監(jiān)測和評估以判斷腫瘤尺寸減小是否作為治療的一個結果。監(jiān)測和評估可輔以許多方法，包括活組織檢查、手工檢查、顯微鏡檢查法、全部或部分體像和掃描，及各種基于分子的診斷和預測方法包括那些研究腫瘤特異的標記或突變的。
VI.腫瘤或其他增殖紊亂受試鉑基化合物用于治療對非鉑基治療藥物耐藥的增殖紊亂。術語“增殖紊亂”也是本領域公知的，并進一步包括以某種方式影響動物的紊亂，其特征為異常的，或不期望的動物細胞的亞型的增殖。癌癥和腫瘤是增殖紊亂。包括腫瘤或從腫瘤中得到的細胞將通常被理解為是多育的細胞——典型的高度多育的細胞，并且在其他情況下，腫瘤細胞可能是發(fā)育異常的并可能是多育的。
在閱讀本發(fā)明所公開的內容后，含有受試鉑基化合物的方法、藥物組合物和封裝藥物將用于治療其他增殖紊亂，或殺滅或抑制包括腫瘤細胞在內的多育細胞，這對本領域技術人員來說是顯而易見的。
對使用許多化學治療藥物的治療具有耐藥性或頑固的腫瘤可從使用本發(fā)明的方法和藥物組合物中受益。適合的腫瘤可為實體瘤，除了血液、骨髓或淋巴系統(tǒng)的癌瘤外，它是身體組織的癌瘤。優(yōu)選的腫瘤是那些對非鉑基化學治療藥物耐藥的腫瘤。適合的腫瘤也可以是血液的腫瘤，例如白血病和淋巴瘤。白血病是用于惡性變化的白血球增殖為特征的惡性疾病的共同術語。從淋巴組織產生的疾病被稱作淋巴瘤。
實體瘤可選自肝癌、胃癌、結腸癌、乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌、皮膚癌、腎臟癌、骨癌、皮膚癌、子宮頸癌、卵巢癌、肺癌、支氣管癌、小細胞肺癌和非小細胞肺癌、胃的、前列腺的、胰腺的和頭頸癌。
血液的腫瘤可以是白血病，例如急性骨髓性白血病(AML)、急性成淋巴細胞性白血病(ALL)、急性白血病、急性早幼粒細胞性白血病、慢性粒細胞性白血病(CGL)、慢性白血病、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、慢性髓細胞性白血病(CML)、慢性骨髓單核細胞性白血病、普通型急性成淋巴細胞性白血病、嗜酸粒細胞性白血病、紅白血病、結外淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、毛細胞性白血病、單核細胞性白血病、及幼淋巴細胞性白血病。
血液腫瘤可以是淋巴瘤，例如B細胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、高分化度淋巴瘤、霍奇金病淋巴瘤、非霍奇金病淋巴瘤、低分化度淋巴瘤、淋巴母細胞性淋巴瘤、外套細胞淋巴瘤、邊緣區(qū)淋巴瘤、粘膜相關淋巴樣組織(MALT)淋巴瘤、T細胞淋巴瘤、外周T細胞淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、特發(fā)性血小板增多癥、髓外的骨髓瘤、及粒細胞惡性毒瘤。
在某些實施方案中，本發(fā)明的方法和組合物可被用于治療對紫杉烷類耐藥或頑固的腫瘤。這樣的腫瘤包括，例如乳腺癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、腹膜癌、卵巢癌、支氣管癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、胃癌、前列腺癌和頭頸癌，包括復發(fā)的扁平細胞癌。
在其他實施方案中，本發(fā)明的方法和組合物被用于治療對喜樹堿及其類似物耐藥或頑固的腫瘤。這樣的腫瘤包括喜樹堿及其類似物對其顯示出活性的任何腫瘤。這樣的腫瘤的例子包括卵巢癌和小細胞肺癌，對于它們，托泊替康和伊立替康都顯示出活性，結腸直腸癌、上消化道惡性腫瘤、非小細胞肺癌、間皮瘤、和頭頸癌，對于它們，伊立替康顯示出活性，小細胞肺癌、子宮頸癌、乳腺癌、前列腺癌、直腸癌、白血病、淋巴癌瘤及惡性黑素瘤。見Pizzolato和Saltz，The Lancet(柳葉刀)3612235-42(2003)。
頑固的癌癥或腫瘤包括那些單獨使用化學治療藥物、單獨使用放射療法或它們的組合進行治療無效或具有耐藥性的癌癥或腫瘤。根據本說明書的目的，頑固的癌癥或腫瘤也包括那些好像被化學治療藥物和/或放射療法抑制了的，但在中斷治療后五年、有時十年或更長時間后復發(fā)的。
術語“耐藥的”，如用于此處的，包括部分耐藥和完全耐藥。因此，雖然對非鉑基治療藥物只部分耐藥的腫瘤也將從受試鉑基化合物中受益。事實上，在某些實施方案中，如果僅僅是懷疑這樣的耐藥性，或者甚至在這樣的耐藥性發(fā)生前可能都不知道的腫瘤的治療也將受益。在這樣的情況下，可以擬想通過受試鉑基化合物與合適的非鉑基化合物的共同的合適的使用來進行合并給藥、聯(lián)合治療或治療體制。在本發(fā)明各方面的可選的實施方案中，受試鉑基化合物將用于治療先前已采用任何非鉑基治療藥物治療的患有癌癥或腫瘤的個體。在這樣的實施方案中，其可能被隨后確定，或一點也不，該癌癥或腫瘤是對非鉑基治療藥物耐藥的或頑固的。
根據本發(fā)明的細胞系，其可用于評價是否本發(fā)明的化合物具有對耐藥細胞系的細胞毒的活性，包括但不限于對紫杉烷耐藥的微管蛋白突變的細胞系1A9-PTX10和1A9-PTX22及它們的親代細胞系1A9(J Biol Chem(1997)272，17118-17124)、對阿霉素耐藥的P-gp過表達細胞系耐藥NCI-Adr(Vickers等人，1989.Mol Endocrinology 3(1)157-164)、對喜樹堿耐藥的細胞系CEM/C1 and CEM/C2及它們的親代細胞系CEM(Kapoor等人，1995.Oncology Research 7；83-95)、TWIST過表達細胞系HNE1-T3及其親代細胞系(Oncogene(2004)23，474-482)、對紫杉醇耐藥的亞克隆的人卵巢癌細胞系SKOV-3和SKOV-3(Clin Cancer Res(2003)9，2778-2785)、對米托蒽醌耐藥的結腸癌細胞系HT29/MIT及其親代細胞系HT29(Cancer Res(2001)61，6034-6037)、以及對依托泊苷耐藥的乳腺癌細胞系MCF-7/VP及其親代細胞系MCF-7(Cancer Res(1994)54，152-158；Int J Cancer(1997)71，35-41)。
受試鉑基化合物也被認為有用于治療其他類型的增殖紊亂，包括以良性適應癥為特征的增殖紊亂。這樣的紊亂可被稱為“細胞增殖的”或“高增殖的(hyperproliferative)”，其中通過身體以非典型的提高率得到細胞。這樣的紊亂包括，但不限于，下列新生兒中的多發(fā)性血管瘤、繼發(fā)進展型多發(fā)性硬化、慢性進展型骨髓退行性疾病、神經纖維瘤病、多發(fā)性神經節(jié)瘤、瘢痕瘤形成、變形性骨炎(Paget′s disease of the bone)、乳腺纖維囊腫病、Peronies and Duputren′s纖維化、再狹窄與硬變。
VII.聯(lián)合治療受試藥物組合物可，如與許多種其他藥物以相同或不同的劑型，被共同給藥。例如受試藥物組合物可被用作治療方案的一部分，其中，它們與其他化學治療藥物結合，包括抑制癌瘤生長的抗癌藥物、抗血管發(fā)生藥物和抗轉移藥物。受試藥物組合物也可與免疫調節(jié)劑結合。
在優(yōu)選的實施方案中，受試藥物組合物與解決和/或克服了特異性藥物耐藥機理的藥物共同用藥。在本文中，“特異性藥物耐藥機理”指的是任何生理的或細胞的機理，其引起癌瘤、腫瘤、癌瘤細胞或腫瘤細胞對抗癌治療藥物耐藥，但這種耐藥機理是可被克服的，即通過進行合適的化合物、藥物或藥學試劑的給藥，防止耐藥性的發(fā)生。例如當一種腫瘤藥物的耐藥性是由于ATP依賴泵例如P-糖蛋白的過表達帶來的藥物流出的增加引起的，那么逆轉通過P-糖蛋白流出過多藥物的藥理學試劑可在治療耐藥腫瘤時與該受試藥物組合物合并使用。因此，在一個實施方案中，該藥物組合物與克服特異性藥物耐藥機理的藥物共同給藥。更優(yōu)選地，所述特異性藥物耐藥機理是由ATP結合盒轉運蛋白引起的藥物流出的增加。這樣的合適的藥理學試劑包括，其中例如酚噻嗪類、維拉帕米、他莫昔芬、奎尼丁、酚噻嗪類、環(huán)孢素A、亞甲基二氧基甲苯丙胺、亞甲基二氧基乙基苯丙胺、對甲氧基苯丙胺、長春胺F、PSC 833和LY335979。作為P-糖蛋白抑制劑的臨床應用的藥理學含義的綜合討論，見Lum等人，DrugResist.Clin.Onc.Hemat.，9319-336(1995)；Schinkel等人，Eur.J.Cancer，31A1295-1298(1995)。
一種可與受試藥物組合物合用的特定藥物是PSC-833(伐司樸達)——環(huán)胞菌素的類似物。PSC-833已發(fā)現(xiàn)是比環(huán)胞菌素有效10倍的P-gp抑制劑，并且沒有環(huán)胞菌素的腎毒性和免疫抑制的副作用。盡管在不同腫瘤類型中I相和II相的結合研究顯示PSC-833在合并給藥化學治療的藥動學上具有意義深遠的效果，但這種效果可通過降低給出的化學治療的劑量進行調節(jié)。見Baird and Kaye，2003.
在另一實施方案中，當腫瘤藥物耐藥性是通過β-微管蛋白的突變引起的，那除了微管外，具有其他細胞靶的癌瘤治療藥物可與受試鉑基組合物合用。
在進一步的實施方案中，受試鉑基化合物向也進行鎮(zhèn)吐藥給藥的患者進行給藥。根據本發(fā)明，鎮(zhèn)吐藥包括本領域技術人員已知的任何鎮(zhèn)吐藥，包括，但不限于血清素-3受體拮抗劑，如格拉司瓊、昂丹司瓊和托烷司瓊，NK1受體拮抗劑，抗組胺類例如桂利嗪、賽克力嗪和異丙嗪、組胺H2受體拮抗劑，例如雷尼替丁(善得胃)，酚噻嗪類，例如氯丙嗪、氟哌利多、氟哌啶醇、左美丙嗪、奮乃靜、三氟拉嗪及丙氯拉嗪、多潘立酮、以及甲氧氯普胺。
在其他實施方案中，受試鉑基化合物向也使用止瀉藥如洛哌丁胺，皮質甾類(corticosteroide)例如可的松，生長激素或生長因子例如GCSF或紅細胞生成素，利尿劑例如呋塞米(furosemid)，甾體或非甾體鎮(zhèn)痛劑例如鴉片劑如嗎啡，或對乙酰氨基酚或抗血尿酸過多劑如別嘌醇進行治療的患者給藥。
在其他實施方案中，該受試鉑基化合物向也使用血小板、紅細胞或全血進行治療的患者給藥。
在其他實施方案中，該受試鉑基化合物向也使用骨髓干細胞進行治療的患者給藥。
在其他實施方案中，本發(fā)明也涉及受治療的病人保健的方法。在該方法中，被進行受試鉑基化合物給藥的病人經腸外接收食物。
術語“共同給藥”或“被共同給藥的”，如用于此處的，在本發(fā)明的方法的各個不同方面包括同時地、連續(xù)地或間歇地進行兩種或多種不同治療藥物的給藥。因此，該受試鉑基化合物的給藥可在向需要的個體進行其他一或多種其他治療藥物的給藥之前、之后或同時進行。在一個實施方案中，兩種或多種治療藥物與受試鉑基化合物共同配制在一個藥丸中。
本發(fā)明的方法也可與癌瘤治療的其他方法結合，如放射療法、手術治療、免疫療法。
VIII.封裝藥物及其他方法本發(fā)明也提供了封裝藥物，包括受試鉑基化合物的藥物組合物和向癌瘤患者進行有效量的該藥物組合物的給藥的說明，癌瘤患者先前使用非鉑基化學治療藥物進行治療，對其耐藥或頑固則更好。
在特定的實施方案中，該封裝藥物進一步包括另一藥物成分和/或進一步進行另一藥物成分的有效量的給藥的說明。在某些實施方案中，所述其他藥物成分是鎮(zhèn)吐或止瀉的藥物組合物。在其他實施方案中，所述其他藥物成分是能夠克服特異性藥物耐藥機理的藥物，例如由ATP結合盒轉運蛋白引起的藥物流出的增加。
本發(fā)明進一步提供了管理藥物事務的方法，其包括a)搜集整理數(shù)據，包括i.與市售的初始化合物相比，選自JM216、JM118、JM383及其代謝產物的鉑的化學治療化合物的生物等效性數(shù)據；或ii.說明所述鉑的化學治療化合物在先前使用非鉑基的化學治療藥物進行治療的癌瘤患者中的效果的臨床數(shù)據；b)將上述搜集整理的數(shù)據交給藥品監(jiān)管權威機構以獲得所述鉑的化學治療化合物用于治療先前使用非鉑基化學治療藥物治療過的癌瘤患者的監(jiān)管或市場認可，這些癌瘤患者優(yōu)選對非鉑基化學治療藥物耐藥或頑固的；及，c)準備或進行生產、進口、包裝/再包裝、貼標簽/再貼標簽或上市所述鉑的化學治療化合物，或許可所述認可對先前使用非鉑基化學治療藥物治療的癌瘤患者進行治療的權利。
在特定的實施方案中，管理藥物事務的方法進一步包括銷售、分配或出售所述鉑基化合物用于對先前使用了非鉑基化學治療藥物治療的癌瘤患者進行治療。
這樣的方法可通過，例如想在市場上引入一般的先前認可的治療化合物的一般制藥公司來進行。
VIII.藥物制劑本發(fā)明的組合物可配制并向具有對非鉑基治療藥物耐藥的癌瘤的個體進行給藥治療，可通過任何產生有效成分與所述個體，例如哺乳動物，的身體上的藥物作用部位相接觸的方式。它們可通過任何常規(guī)可用的與藥物結合使用的方式進行給藥，如或者單獨給予治療有效成分，或與治療有效成分相結合，如通過進一步給予其他不同的治療藥物。它們可被單獨給藥，但通常是與在給藥途徑和標準藥物實踐的基礎上選擇的藥物載體一起給藥。
用于本發(fā)明的藥物組合物可以常規(guī)方式使用一或多種生理學上可接受的載體或輔料進行配制。本發(fā)明的藥物組合物可被配制成用于多種給藥途徑，包括全身的和局部的或局限的給藥。技術和配方一般可在Remmington′s Pharmaceutical Sciences，Meade Publishing Co.，Easton，PA中找到。對于全身用藥，注射是優(yōu)選的，包括肌內的、靜脈的、腹膜內的及皮下的注射(分別表示為i.m.，i.v.，i.p.，及i.c.)。針對注射，本發(fā)明的藥物組合物可被配制成液體溶液，優(yōu)選生理上相容的緩沖溶液，例如Hank′s溶液或林格溶液(Ringer′s solution)。此外，該藥物組合物可被配制成固體形式，并在使用前被即刻溶解或混懸。也包括凍干劑型。
最優(yōu)選的給藥途徑是口服的。在口服給藥中，藥物組合物可采取的形式，例如單位劑量形式如按常規(guī)方法使用藥學上可接受的輔料例如粘合劑(如預膠化的玉米淀粉、聚乙烯吡咯酮或羥丙基甲基纖維素)；填充劑(如乳糖、微晶纖維素或磷酸氫鈣)；潤滑劑(如硬脂酸鎂、滑石或二氧化硅)；崩解劑(如土豆淀粉或羧甲基淀粉鈉)；或潤濕劑(如十二烷基硫酸鈉)制備片劑或膠囊。片劑可采用本領域公知的方法進行包衣。用于口服給藥的液體制劑可采用的形式，例如溶液、糖漿劑或混懸劑，或它們可以干的產品存在并在使用前與水或其他合適的載體進行配制。這樣的液體制劑可按通常的方法進行制備，并配以藥學上可接受的添加劑，例如懸浮劑(如山梨醇糖漿、纖維素衍生物或氫化食用脂)；乳化劑(如卵磷脂或阿拉伯膠)；非水載體(如杏仁油、油酯類(oily esters)、乙醇或分餾(fractionated)的植物油)；及防腐劑(如對羥基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸)。這些制劑也可適當?shù)睾芯彌_鹽、香料、色素和甜味劑。
口服給藥的制劑可被合適地配制以產生有效成分的控制釋放。對于口腔含化給藥，該治療組合物可按常規(guī)方法配制，采用片劑或錠劑的形式。對于吸入給藥，用于本發(fā)明的藥物組合物被方便的以噴霧劑劑型的形式從加壓包或霧化劑產生，并使用適合的推進劑，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟甲烷、二氧化碳或其他合適的氣體。在加壓氣霧劑的情況下，該劑量單位的確定可通過提供一個閥被按計量的傳遞。例如在吸入器或吹入器中的明膠的膠囊和藥筒可被配制成含有治療藥物和合適的粉末基質例如乳糖或淀粉的粉末混合物。
該藥物組合物可被配制成通過注射的腸外給藥，例如通過彈丸注射或連續(xù)輸注。用于注射的劑型可按單元劑量的形式存在，例如與已加入的保護劑在安瓿中或在多劑量容器中。該組合物可采取許多形式如在油或水的載體中的混懸液類、溶液類或乳劑類，并可含有制藥試劑如懸浮的、穩(wěn)定的和/或分散劑?？蛇x的，有效成分可以粉末形式，在使用前與合適的載體例如滅菌無熱原組合。
除了前面描述的劑型外，該藥物組合物還可被配制成長效制劑。這樣的長效制劑可以通過植入給藥(如皮下或肌內植入)或肌內注射。因此，例如該治療組合物可與合適的聚合材料或疏水材料(例如在可接受的油中的乳劑)或離子交換樹脂，或微溶的衍生物，如微溶的鹽相配制。
全身用藥也可采用透過粘膜或經皮的方式。對于透過粘膜或經皮給藥，要在劑型中使用對于將要透過的屏障的合適的穿透劑。這樣的穿透劑是本領域公知的，包括，例如用于透過粘膜給藥的膽汁鹽類和夫西地酸衍生物。此外，去污劑可被用于促進穿透。穿透粘膜的給藥也可經過鼻腔噴霧或使用栓劑。對于局部用藥，本發(fā)明的組合物被配制成本領域公知的軟膏劑、軟膏、凝膠或霜劑。洗液可局部使用以治療損傷或炎癥從而加速愈合。供口服給藥的藥物組合物被配制成常規(guī)口服給藥的形式，如膠囊、片劑和補藥。
如果期望的話，該藥物組合物可以是在小包或分散裝置中，其可含有一或多種含有活性成分的單位劑型。該小包可包括例如金屬的或塑料箔片，例如一個水泡狀的小包。該小包或分散裝置可附有給藥說明。在其他實施方案中，該小包或分散裝置可被進一步包裝在一外部紙盒中。
本發(fā)明的藥物組合物也可被配制成持續(xù)的和/或定時釋放的劑型。這樣的持續(xù)的和/或定時釋放的劑型可通過本領域普通技術人員公知的持續(xù)釋放的方式或轉運裝置制得，那些描述于美國專利第3,845,770、3,916,899、3,536,809、3,598,123、4,008,719、4,710,384、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556及5,733,566號中的，其公開的內容被各自在此引作參考。本發(fā)明的藥物組合物可用于提供緩慢或持續(xù)釋放一種或多種有效成分，通過使用例如羥丙基甲基纖維素、其他聚合物基質、凝膠劑、可滲透性膜、滲透系統(tǒng)、多層包衣、微粒、脂質體、微球等，或它們的組合以提供按不同比例的理想的釋放特性。本領域普通技術人員公知的合適的持續(xù)釋放的劑型，包括那些描述于此處的，可被容易地選擇以用于本發(fā)明的藥物組合物。因此，適于口服給藥的單個單位劑型，例如，但不限于片劑、膠囊、軟膠囊、錠劑、散劑等那些適于持續(xù)釋放的被包括在本發(fā)明里。
本發(fā)明的藥物組合物可配制成中性的或鹽的形式。藥學上可接受的鹽類包括酸加成的鹽類和與無機酸例如鹽酸或磷酸，或與有機酸例如乙酸、草酸、酒石酸、扁桃酸等所形成的。與游離羧基基團形成的鹽類也可從無機堿例如鈉、鉀、銨、鈣或鐵的氫氧化物，以及有機堿例如異丙胺、三甲胺、組氨酸、普魯卡因等得到。
本發(fā)明還提供了用于治療選自對非鉑基治療藥物耐藥或頑固的癌癥或腫瘤的疾病的藥物組合物的配制方法，包括與藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑及鉑基化合物相配制，鉑基化合物選自(a)可口服的鉑基的化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的鉑基化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物 其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基；(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
在一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明打算使用的鉑基化學治療藥物選自(a)可口服的鉑基的化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的鉑基化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物
其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基；以及(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥，其用于制備治療對非鉑基治療藥物耐藥的或頑固的癌癥或腫瘤的藥物組合物。
本發(fā)明還提供了用于治療患有對非鉑基治療藥物耐藥或之前使用其治療的癌癥或腫瘤的個體的藥物組合物的制備方法。該方法包括a)搜集整理數(shù)據，包括i.與市售的初始化合物相比，選自JM216、JM118、JM383及其藥學上可接受的鹽、異構體或前藥的鉑的化學治療化合物的生物等效性數(shù)據；或ii.說明所述鉑的化學治療化合物在先前使用非鉑基化學治療藥物進行治療的癌瘤患者中的效果的臨床數(shù)據；b)將上述搜集整理的數(shù)據交給藥品監(jiān)管權威機構以獲得所述鉑的化學治療化合物用于治療先前使用非鉑基化學治療藥物治療過的癌瘤患者的監(jiān)管或市場認可；及，c)生產、進口、包裝/再包裝、貼標簽/再貼標簽或上市所述鉑的化學治療化合物，或許可所述認可的許可對先前使用非鉑基化學治療藥物治療的癌瘤患者進行治療的權利。
用量給藥的用量將是足以導致癌癥或腫瘤癥狀改善的治療有效量的化合物，并將必然的取決于已知因素而變化，例如特定有效成分的藥效學特征及其給藥方式和途徑；受體的年齡、性別、健康及體重；癥狀的性質及程度；并行治療的種類、治療的頻率及期望的效果。
本發(fā)明的藥物組合物的毒性和治療效能可通過在細胞培養(yǎng)或實驗動物中的標準的藥學步驟來確定，例如確定LD50(半數(shù)致死量)和ED50(半數(shù)有效量)。在毒性和治療效果之間的劑量比例為治療指數(shù)，并可用LD50/ED50的比值來表示。表現(xiàn)出高治療指數(shù)的治療藥物是優(yōu)選的。而表現(xiàn)出毒副作用的治療組合物可被使用，但應注意設計遞藥系統(tǒng)，將這樣的治療藥物帶到受影響的組織靶位，以使對未感染的細胞的潛在損傷最小化，從而降低副作用。
從細胞培養(yǎng)分析和動物研究得到的數(shù)據可用于闡述用于人類的劑量范圍。該劑量優(yōu)選地位于具有低毒性或無毒性的包括ED50的循環(huán)濃度(circulating concentrations)范圍內。劑量可根據使用的劑型和應用的給藥途徑在這一范圍內變化。對于任何使用本發(fā)明的方法的藥物，其治療有效劑量可最初從細胞培養(yǎng)分析中估出。如細胞培養(yǎng)所確定的，劑量可在動物模型中得到包括IC50(即測試的治療藥物對癥狀或生化活動的抑制達到最大抑制的一半時的濃度)的循環(huán)血漿濃度范圍中形成。這些信息可用于更精確的確定用于人類的劑量?？梢詫ρ獫{水平進行測量，例如通過高效液相色譜。
被理解的是治療藥物的合適劑量取決于本領域普通技術人員，如醫(yī)生，所知曉的許多因素。小分子的劑量將取決于例如受試者或進行治療的樣品的身份、尺寸和條件，進一步取決于該組合物的給藥途徑，如果可應用，那么醫(yī)生期望該治療(藥物)通過靶(例如本發(fā)明的核酸或多肽)介導疾病起因、癥狀或效應對治療靶具有作用。
典型的劑量包括每千克受試或樣品重量中小分子的毫克或微克量，例如約1微克每千克至約500毫克每千克，約100微克每千克至約50毫克每千克，或約1毫克每千克至約5毫克每千克。本領域技術人員將理解也可在體表面積的基礎上測量劑量。一個70千克的人具有約1.8平方米的體表面積，劑量包括患者或樣本的每體表面積中小分子的毫克或微克的量，如約50微克每平方米至約15克每平方米，約5毫克每平方米至約1.5克每平方米，或約50毫克每平方米至約150毫克每平方米。
此處描述的這些方法不是全都包括了的，且更多的適合本特定申請的方法將對本領域普通技術人員是顯而易見的。此外，組合物的有效量可進一步與已知化合物的進行近似類比以發(fā)揮期望的效果。
本發(fā)明的應用方面可通過細胞生物學、細胞培養(yǎng)、分子生物學、轉基因生物學、微生物學、重組DNA和免疫學的常規(guī)技術進行運用，它們是在本領域的技術內，另有說明的除外。這些技術在文獻中被充分解釋。例見Molecular Cloning A Laboratory Manual(分子克隆實驗室手冊)，第二版，Sambrook，F(xiàn)ritsch和Maniatis編(Cold Spring Harbor LaboratoryPress1989)；DNA Cloning(DNA克隆)，卷I及卷II(D.N.Glover ed.，1985)；Oligonucleotide Synthesis(寡核苷酸合成)(M.J.Gait ed.，1984)；Mullis等人，美國專利第4,683,195號；Nucleic Acid Hybridization(核酸雜交)(B.D.Hames & S.J.Higgins eds.1984)；Transcription And Translation(轉錄與翻譯)(B.D.Hames & S.J.Higgins eds.1984)；Culture Of Animal Cells(動物細胞的培養(yǎng))(R.I.Freshney，Alan R Liss，Inc.，1987)；Immobilized CellsAnd Enzymes(固定化細胞及酶類)(IRL Press，1986)；B.Perbal，A PracticalGuide To Molecular Cloning(分子克隆的實踐指南)(1984)；the treatise，Methods In Enzymology(論文，酶學的方法)(Academic Press，Inc.，N.Y.)；Gene Transfer Vectors For Mammalian Cells(對于哺乳動物細胞的基因轉移載體)(J.H.Miller and M.P.Calos eds.，1987，Cold Spring HarborLaboratory)；Methods In Enzymology(酶學的方法)，第154和155卷(Wu等人編)，Immunochemical Methods In Cell And Molecular Biology(細胞與分子生物學中的免疫化學方法)(Mayer and Walker，eds.，Academic Press，London，1987)，Handbook Of Experimental Immunology(實驗免疫學手冊)，第I-IV卷(D.M.Weir and C.C.Blackwell，eds.，1986)；Manipulating theMouse Embryo(小鼠胚胎的處理)，(Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，N.Y.，1986)。此處引用的所有專利、專利申請和參考資料的全部內容被引作參考。
本發(fā)明已被足夠詳細的描述和舉例說明，使得本領域的技術人員能夠得到并使用它，在不偏離本發(fā)明的主旨和范圍的情況下，許多變化、修飾和改進都應是顯而易見的。
本領域的技術人員易于理解的是，本發(fā)明是適于實現(xiàn)其目標并得到所述的，以及那些固有的結果和利益的。此處描述的方法和試劑代表了優(yōu)選的實施方案，是可仿效的，但不用作限制本發(fā)明的范圍。本領域技術人員將想到其中的修飾和其他用途。這些修飾也包括在本發(fā)明的主旨中并被權利要求的范圍所限定。
對本領域技術人員顯而易見的是，可對此處公開的本發(fā)明進行改變取代和修飾，這是不背離本發(fā)明的范圍和主旨的。
應該理解的是，盡管本發(fā)明已通過優(yōu)選的實施方案及可選的特征被具體公開了，而本領域技術人員可進行此處公開的概念的修飾和變化，并且這樣的修飾和變化被認為是在本發(fā)明的范圍內，本發(fā)明的范圍以所附的權利要求進行限定。
本領域的技術人員易于理解的是，本發(fā)明是適于實現(xiàn)其目標并得到所述的，以及那些固有的結果和利益的。此處描述的方法和試劑代表了優(yōu)選的實施方案，是可仿效的，但不用作限制本發(fā)明的范圍。本領域技術人員將想到其中的修飾和其他用途。這些修飾也包括在本發(fā)明的主旨中并被權利要求的范圍所限定。
本領域技術人員將承認，或能夠確定只進行例行試驗，而得到此處描述的本發(fā)明的具體實施方案的許多等效方案。這樣的等效方案將被包括在下面的權利要求中。本領域技術人員也將承認此處描述的實施方案的全部組合、權利要求的方面或特征的組合也在本發(fā)明的范圍內。
實施例實施例1.賽特鉑及其代謝產物在對紫杉烷耐藥的腫瘤細胞中的效能A.耐藥性通過P-糖蛋白介導的對紫杉烷耐藥的腫瘤細胞我們觀察到令人驚訝的發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的受試鉑基化合物對抑制或殺滅對其他化學治療藥物耐藥的腫瘤細胞是有用的，其中這樣的耐藥性是通過P-糖蛋白介導的。
表達P-糖蛋白的細胞(NCI-阿霉素耐藥亞系)在缺少維拉帕米時對阿霉素是高度耐藥的，但在維拉帕米，一種P-糖蛋白抑制劑(相對耐藥性是115倍)的存在下是保持敏感的。在使用JM216和JM118治療時，沒有觀察到相對耐藥性的變化(在個體實驗中的相對耐藥性在1.0到1.5倍的范圍間)。
使用了表達P-糖蛋白的NCI-阿霉素耐藥亞系(Vickers等人，1989.MolEndocrinology 3(1)157-164)。在12.5μg/ml維拉帕米存在或不存在時，將3,000-15,000細胞/孔暴露于不同濃度的試驗化合物48小時以計算表1所示的IC50值，以及使用根據Shekan等人(J Natl Cancer Inst(1990)82，1107-112)的SRB分析來測量細胞毒性。簡言之，在加入化合物前，細胞置于96孔板中24小時。注意到，在化合物加入前4小時以及接著的整個治療期(48小時)它們暴露于維拉帕米。該分析以冷的TCA的加入而終止，最終濃度為10％，并在4℃培養(yǎng)這些板一小時。這些板接著用水洗5遍，并在每個孔中加入100μl的Sulforhodamine B溶液(4％)。該板接著在室溫培養(yǎng)10分鐘，然后通過用1％的乙酸洗滌除去未結合的染料。結合的染料用10mM的Trizma(氨基丁三醇)基質溶解，并在OD570讀吸光度。
B.耐藥性通過微管蛋白介導的對紫杉烷耐藥的腫瘤細胞我們觀察到令人驚訝的發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的受試鉑基化合物對抑制或殺滅對其他化學治療藥物耐藥的腫瘤細胞是有用的，其中這樣的耐藥性是通過微管蛋白介導的。
微管蛋白突變的細胞(1A9-PTX10)對紫杉醇和多西紫杉醇是高度耐藥的——在個體實驗中的相對耐藥性在37至142倍的范圍間，然而在用JM216、JM118及JM383治療時保持敏感——在個體實驗中的相對耐藥性在0.9至3.9倍的范圍間。其親代非突變型細胞系1A9，用作對照。
微管蛋白突變的，對紫杉醇耐藥的人類卵巢癌細胞系1A9-PTX10及其親代紫杉醇敏感細胞系1A9是從A2780人類卵巢癌細胞系得到的(JBiol Chem(1997)272，17118-17124)。將1,000-4,000細胞/孔暴露于不同濃度的試驗化合物中48小時，以計算表1所示的IC50值，同上，使用根據Shekan等人(J Natl Cancer Inst(1990)82，1107-112)的SRB分析來測量細胞毒性(見實施例1A)。
表1.在對紫杉醇耐藥的細胞中賽特鉑及代謝產物的細胞IC50值

圖例說明表1顯示了描述于實施例1中的實驗所確定的IC50值。括號中的數(shù)字表示進行了幾次實驗。在每個單獨的實驗中，每種藥物濃度和細胞系最少使用3個相同的孔。如在個體實驗中所確定的，表中顯示的是這些IC50的平均值和標準差。RR代表相對耐藥性，即通過各自的耐藥機理表示的藥物所致使的耐藥性水平，并用耐藥細胞的平均數(shù)與敏感細胞相比的比率計算。
實施例2.賽特鉑及其代謝產物在對喜樹堿耐藥的腫瘤細胞中的效能我們觀察到令人驚訝的發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的受試鉑基化合物對抑制或殺滅對其他化學治療藥物耐藥的腫瘤細胞是有用的，其中這樣的耐藥性是通過拓撲異構酶I介導的。
拓撲異構酶I突變的細胞(CEM/C2)對喜樹堿是高度耐藥的——在個體實驗中的相對耐藥性在1,280至1,775倍的范圍間，然而在用JM216、JM118及JM383治療時保持敏感——在個體實驗中的相對耐藥性在0.48至0.82倍的范圍間。其親代非突變型細胞系CEM，用作對照。
對喜樹堿耐藥的CEM/C2細胞是通過體外在喜樹堿的存在下從T成淋巴細胞樣的白血病細胞系CCRF/CEM中經選擇得到的(Kapoor等人，1995.Oncology Research 7；83-95，ATCC)。
賽特鉑及代謝產物的效果通過在CCRF/CEM和CEM/C2細胞中使用適于流式細胞術的Calcein AM生存力分析(Molecular Probes(分子探針))評價出。在有或沒有化合物存在時，這些細胞被鋪在(plate)T-25燒瓶中，并在培養(yǎng)48小時后，終止分析。用PBS將細胞洗滌兩次，并在37℃在200μl的Calcein AM(0.3nM)/PBS溶液中培養(yǎng)90分鐘。在用FACScan流式細胞儀確定熒光單位之前，用PBS洗滌這些細胞一次。
表2.在對喜樹堿耐藥的細胞中賽特鉑及代謝產物的細胞IC50值

圖例說明表2顯示了描述于實施例2中的實驗所確定的IC50值。括號中的數(shù)字表示進行了幾次實驗。在每個單獨的實驗中，每種藥物濃度和細胞系最少使用3個相同的孔。如在個體實驗中所確定的，表中顯示的是這些IC50的平均值和標準差。RR代表相對耐藥性，即通過非典型的多藥耐藥和突變型拓撲異構酶I表示的藥物所致使的耐藥性水平。
實施例3.賽特鉑及其代謝產物在對耐藥性是通過ATP結合盒(ABC)轉運蛋白介導的腫瘤細胞中的效能我們觀察到令人驚訝的發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的受試鉑基化合物對抑制或殺滅對其他化學治療藥物耐藥的腫瘤細胞是有用的，其中這樣的耐藥性是通過ATP結合盒(ABC)轉運蛋白介導的。
A.通過BCRP(ABCG2)介導的耐藥性使用了對米托蒽醌耐藥的結腸癌細胞系HT29/MIT(Perego等人，Cancer Res 61，6034)。在該細胞系中耐藥性的發(fā)生是與乳腺癌耐藥蛋白(BCRP；ABCG2)的上調有關的。其親代非突變型細胞系HT29，用作對照。
將2,000細胞/孔暴露于不同濃度的試驗化合物48小時以計算表3所示的IC50值，同上，使用根據Shekan等人(J Natl Cancer Inst(1990)82，1107-112)的SRB分析來測量細胞毒性(見實施例1A)。HT29/MIT細胞對米托蒽醌是高度耐藥的——在個體實驗中的相對耐藥性在105至239倍的范圍間，然而在用賽特鉑和JM118治療時保持敏感——在個體實驗中的相對耐藥性在1.2至2.0倍的范圍間。
B.通過MRP1(ABCC1)介導的耐藥性使用了對依托泊苷耐藥的乳腺癌細胞系MCF-7/VP(Schneider等人，Cancer Res，54，152)。在該細胞系中耐藥性的發(fā)生是與多藥耐藥蛋白1(MRP1；ABCC 1；Schneider等人，Cancer Res，54，152；Perez-Soler等人，IntJ Cancer，71，35)的上調有關的。其親代非突變型細胞系MCF-7，用作對照。
將2,000細胞/孔暴露于不同濃度的試驗化合物48小時以計算表3所示的IC50值，同上，使用根據Shekan等人(J Natl Cancer Inst(1990)82，1107-112)的SRB分析來測量細胞毒性(見實施例1A)。MCF-7/VP細胞對依托泊苷是高度耐藥的——在個體實驗中的相對耐藥性確定為＞20倍，然而在用賽特鉑、順鉑和JM118治療時保持敏感——在個體實驗中的相對耐藥性在1.0至1.8倍的范圍間。
表3.在對米托蒽醌和依托泊苷耐藥的細胞中賽特鉑及代謝產物的細胞IC50值

表3顯示了描述于實施例3中的實驗所確定的IC50值。括號中的數(shù)字表示進行了幾次實驗。在每個單獨的實驗中，每種藥物濃度和細胞系最少使用3個相同的孔。如在個體實驗中所確定的，表中顯示的是這些IC50的平均值和標準差。RR代表相對耐藥性，即通過各自的耐藥機理表示的藥物所致使的耐藥性的相對水平。
實施例4.賽特鉑及其代謝產物在對順鉑耐藥的腫瘤細胞中的效能我們觀察到令人驚訝的發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的受試鉑基化合物對抑制或殺滅對其他鉑化合物，例如順鉑，耐藥的腫瘤細胞是有用的。
從卵巢癌A2780得到的A129cp80細胞系(收自Tito Fojo，NIH；Biochem Pharmacol 52，1855)，對順鉑是高度耐藥的——在個體實驗中的相對耐藥性在80至106倍的范圍間，然而在用JM216、JM118及JM383治療時保持敏感——在個體實驗中的相對耐藥性在0.19至2.59倍間(表1)。其親代非突變型細胞系A129用作對照。
將1,000-5,000細胞/孔暴露于不同濃度的試驗化合物48小時以計算表3所示的IC50值。使用根據在上面實施例1A中所描述的Shekan等人的SRB分析來測量細胞毒性。
表4.在對順鉑耐藥的細胞中賽特鉑及代謝產物的細胞IC50值

圖例說明表4顯示了描述于實施例4中的實驗所確定的IC50值。括號中的數(shù)字表示進行了幾次實驗。在每個單獨的實驗中，每種藥物濃度和細胞系最少使用3個相同的孔。如在個體實驗中所確定的，表中顯示的是這些IC50的平均值和標準差。RR代表相對耐藥性，即經由致使順鉑耐藥的機理所表示的藥物所致使的耐藥性的相對水平。
參考文獻R.D.Baird與S.B.Kaye，Drug resistance reversal-are we getting closer？(我們正在更接近逆轉藥物耐藥性嗎？)，European Journal of Cancer，392450-61(2003)。
P.Giannokakou等人，J.Biol.Chem.27217118-125(1997)。
P.Giannokakou等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.972904-2909(2000)。
Kelland L R.An update on satraplatinthe first orally available platinumanticancer drug(首個可口服的鉑抗癌藥賽特鉑的升級)。Expert OpinInvestig Drugs 9(6)1373-1382，2000。
權利要求
1.一種殺滅或抑制對非鉑基治療藥物耐藥的腫瘤細胞生長的方法，其包括將所述細胞暴露于選自下列的有效量的鉑基化學治療藥物(a)可口服的鉑基的化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的鉑基化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物 其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基；(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
2.一種用于治療患有對非鉑基治療藥物耐藥的或頑固的腫瘤的個體的方法，其包括向所述個體進行選自下列鉑基化學治療藥物的有效量的給藥(a)可口服的鉑基的化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的鉑基化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物 其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基；(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)中任何的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其中R5是環(huán)己基。
4.根據權利要求1或2所述的方法，其中所述鉑基化合物選自JM216、JM118和JM383，或其藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
5.根據權利要求1-4中的任一項所述的方法，其中所述腫瘤細胞或所述腫瘤對非鉑基治療藥物的耐藥性是通過多藥耐藥介導的。
6.根據權利要求5所述的方法，其中所述腫瘤細胞或所述腫瘤對非鉑基治療藥物的耐藥性是通過ATP結合盒(ABC)轉運蛋白介導的。
7.根據權利要求6所述的方法，其中所述ATP結合盒轉運蛋白是P-糖蛋白(ABCB1)、乳腺癌耐藥蛋白(ABCG2)或多藥耐藥蛋白1(ABCC1)。
8.根據權利要求7所述的方法，其中所述非鉑基治療藥物選自長春花生物堿類(長春堿)、蒽環(huán)霉素類(阿霉素)、表鬼臼毒素類(依托泊苷)、紫杉烷類(紫杉醇、多西紫杉醇)、抗生素類(放線菌素D和短桿菌肽D)、抗微管劑類(秋水仙堿)、蛋白質合成抑制劑類(嘌羅霉素)、毒肽類(纈氨霉素)、拓撲異構酶I抑制劑類(托泊替康)、DNA嵌入劑類(溴化乙錠)及抗有絲分裂劑類。
9.根據權利要求1-4中的任一項所述的方法，其中所述腫瘤細胞或所述腫瘤對于非鉑基治療藥物的耐藥性是通過微管蛋白介導的。
10.根據權利要求9所述的方法，其中所述非鉑基治療藥物選自紫杉烷類(紫杉醇、多西紫杉醇及紫杉醇衍生物)、長春花生物堿類(長春堿、長春新堿、長春地辛及長春瑞濱)、大環(huán)內酯類抗腫瘤藥(埃博霉素A(epothilone A)、埃博霉素B(epothilone B)和discodermolide)、諾考達唑、秋水仙堿、秋水仙堿衍生物、別秋水仙堿(allocolchicine)、軟海綿素B(Halichondrin B)、dolstatin 10、美登素、根霉素、硫代秋水仙堿、三苯甲基cysterin、雌莫司汀及諾考達唑。
11.根據權利要求1-4中的任一項所述的方法，其中所述腫瘤細胞或所述腫瘤對非鉑基治療藥物的耐藥性是通過拓撲異構酶I介導的。
12.根據權利要求11所述的方法，其中所述非鉑基治療藥物選自喜樹堿、9-硝基喜樹堿(Orethecin，盧比替康)、9-氨基喜樹堿(IDEC-13’)、依沙替康(DX-8951f)、勒托替康(GI-147211C)、BAY 38-3441、高喜樹堿類如diflomotecan(BN-80915)和BN-80927、托泊替康(Hycamptin)、NB-506、J107088、吡唑[1，5-a]吲哚衍生物，例如GS-5、片螺素D及伊立替康(鹽酸伊立替康，CPT-11)。
13.根據權利要求1-4中的任一項所述的方法，其中所述腫瘤細胞或所述腫瘤是對選自下列的非鉑基治療藥物耐藥的紫杉醇、多西紫杉醇、阿霉素、米托蒽醌、依托泊苷和喜樹堿。
14.根據權利要求1-4中的任一項所述的方法，其中所述腫瘤包括實體瘤或所述腫瘤細胞是被包括在實體瘤中的。
15.根據權利要求14所述的方法，其中所述實體瘤選自乳腺癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、腹膜癌、卵巢癌、支氣管癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、胃癌、前列腺癌和頭頸癌，或其轉移。
16.根據權利要求1-4中的任一項所述的方法，其中所述腫瘤包括血液腫瘤或所述腫瘤細胞是被包括在血液腫瘤中的。
17.根據權利要求1-4中的任一項所述的方法，其中所述鉑基化合物是向被診斷為具有對非鉑基治療藥物頑固的癌癥和腫瘤，或先前用非鉑基治療藥物治療過的個體進行給藥。
18.根據權利要求17所述的方法，其中所述個體被進一步進行一或多種鎮(zhèn)吐藥或止瀉藥的給藥。
19.根據權利要求17所述的方法，其中所述個體被進一步進行一或多種其他抗癌治療藥物的給藥。
20.根據權利要求19所述的方法，其中所述其他抗癌治療藥物是克服特異性藥物耐藥機理的藥物。
21.根據權利要求20所述的方法，其中所述特異性藥物耐藥機理是通過ATP結合盒轉運蛋白引起的藥物流出增加。
22.根據權利要求1-4中的任一項所述的方法，其中所述非鉑基治療藥物不是基于激素的藥物。
23.一種治療患有對紫杉醇、多西紫杉醇、阿霉素、米托蒽醌、依托泊苷或喜樹堿耐藥或頑固的腫瘤的個體的方法，其包括向所述個體進行有效量的賽特鉑的給藥。
24.選自以下的鉑基化學治療藥物用于制備治療對非鉑基治療藥物耐藥的或頑固的癌癥或腫瘤的藥物組合物的用途(a)可口服的鉑基的化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的鉑基化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物 其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基；以及(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
25.賽特鉑在用于制備治療對紫杉醇、多西紫杉醇、阿霉素、米托蒽醌、依托泊苷或喜樹堿耐藥的或頑固的癌癥或腫瘤的藥物組合物的用途。
26.一種封裝藥物，其包括選自下列的鉑基化學治療藥物的藥物組合物(a)可口服的鉑基的化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的鉑基化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物 其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基；(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)中任何的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥，以及其中所述封裝藥物進一步包括向患有對于非鉑基治療藥物耐藥或頑固的癌癥或腫瘤的個體進行有效量的藥物組合物的給藥的指導說明。
27.根據權利要求26所述的封裝藥物，其中R5是環(huán)己基。
28.根據權利要求26或27所述的封裝藥物，其進一步包括其他藥物成分和/或進一步進行有效量的其他藥物成分的給藥的指導說明。
29.根據權利要求28所述的封裝藥物，其中所述其他藥物成分是鎮(zhèn)吐或止瀉治療組合物。
30.根據權利要求28所述的封裝藥物，其中所述其他藥物成分是克服特異性藥物耐藥機理的藥物。
31.一種包括賽特鉑的藥物組合物的封裝藥物，其中所述封裝藥物進一步包括向患有對紫杉醇、多西紫杉醇、阿霉素、米托蒽醌、依托泊苷或喜樹堿耐藥或頑固的癌癥或腫瘤的個體進行有效量的所述藥物組合物的給藥的指導說明。
32.一種用于治療選自對非鉑基治療藥物耐藥或頑固的癌癥或腫瘤的疾病的藥物組合物，其包括鉑基化合物與藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑，其中所述鉑基化學治療藥物選自(a)可口服的鉑基的化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的鉑基化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物 其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基；(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
33.根據權利要求32所述的藥物組合物，其中R5是環(huán)己基。
34.一種治療患有對基于紫杉烷的治療藥物耐藥或頑固的癌癥或腫瘤的個體的方法，其包括向所述個體進行有效量的JM216、JM118和JM383，或其在藥學上可接受的鹽、異構體或前藥的給藥。
35.一種治療患有對基于喜樹堿的治療藥物耐藥或頑固的癌癥或腫瘤的個體的方法，其包括向所述個體進行有效量的JM216、JM118和JM383，或其在藥學上可接受的鹽、異構體或前藥的給藥。
36.一種包含藥物組合物和標簽的制備的制品，其中所述標簽指示了所述藥物組合物可用于治療患有對非鉑基化學治療藥物耐藥或頑固的癌癥或腫瘤的個體，其中所述藥物組合物包括鉑基化合物與藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑，其中所述鉑基化合物選自(a)可口服的鉑基的化學治療藥物；(b)包含鉑(IV)配位絡合物的鉑基化學治療藥物；(c)以下列通式表示的鉑基化學治療藥物 其中R1和R2可以存在或不存在，R1-R4各自獨立地選自鹵素、羥基和乙酸基，且R5是環(huán)烷基，任選地為環(huán)己基；(d)賽特鉑或賽特鉑的代謝產物；或(a)至(d)的藥學上可接受的鹽、異構體或前藥。
37.根據權利要求36所述的制品，其進一步包括包裝材料，其中所述藥物組合物被包含在所述包裝中，或其中所述標簽被包含在所述包裝中或通過所述包裝包含。
38.根據權利要求36所述的制品，其進一步包括鎮(zhèn)吐或止瀉藥，或其中所述標簽進一步指示了鎮(zhèn)吐或止瀉藥將與所述藥物組合物一起進行進一步給藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過進行鉑基化合物的給藥來治療耐藥的或頑固性腫瘤的方法、藥物組合物及封裝(packaged)藥物。
文檔編號A61K33/24GK1933829SQ200580009374
公開日2007年3月21日 申請日期2005年2月18日 優(yōu)先權日2004年2月18日
發(fā)明者莫林·卡利吉瑞, 卡杰·沃席高斯基-巴特斯, 安尼·瑪利亞·卡薩扎 申請人:Gpc生物科技股份公司