專利名稱：一種復(fù)方烏雞軟膠囊及其制備方法質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑，特別是涉及復(fù)方烏雞軟膠囊，同時涉及該制劑的制備方法質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
由氣血兩虛或肝腎兩虛的月經(jīng)不調(diào)，脾虛或腎虛帶下等婦科病癥，是臨床上常見的多發(fā)病癥，中醫(yī)臨床上多采用補氣血，益肝腎等方法進行治療。發(fā)揚中醫(yī)藥傳統(tǒng)優(yōu)勢，開發(fā)制成穩(wěn)定、用藥安全、劑量準(zhǔn)確、質(zhì)量可控、療效可靠的中藥制劑具有重要意義。
“復(fù)方烏雞軟膠囊”處方源自部標(biāo)準(zhǔn)“復(fù)方烏雞口服液”[WS3-160(Z-54)-94(Z)]。原劑型為口服液，臨床應(yīng)用廣泛，收載于國家基本藥物(中成藥)中，為國家乙類非處方藥品。同類制劑還有國家藥品標(biāo)準(zhǔn)收載的顆粒劑。
現(xiàn)有技術(shù)存在的主要問題是(1)口服液不穩(wěn)定，久置易產(chǎn)生沉淀，且攜帶運輸不便；(2)顆粒劑服用不便，需開水沖服，輔料用量大；(3)現(xiàn)有劑型都存在含糖量高，不適于糖尿病人服用的不足；(4)現(xiàn)有劑型雖然加入了糖、蜂蜜等矯味劑進行矯味，但口感仍不是很理想(5)現(xiàn)有制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)較低。
軟膠囊劑型外型圓滑美觀、服用攜帶方便，并能夠掩蓋不良氣味，不含糖，適于糖尿病人服用。另外由于藥物被完全密封包藏于膠皮之內(nèi)，有利于藥物穩(wěn)定。由于其諸多優(yōu)點，軟膠囊劑是國際上流行的口服型劑型，而目前市場上中藥軟膠囊制劑還較少，遠不能滿足人們的用藥需求。所以將復(fù)方烏雞口服液劑改為軟膠囊，不僅能豐富用藥品種，而且能更好的發(fā)揮劑型優(yōu)勢，具有較廣大的市場潛力。
同時提供了一種復(fù)方烏雞軟膠囊的質(zhì)量控制方法，可以用薄層色譜法對復(fù)方烏雞軟膠囊中的白芍、牡丹皮、黨參、黃芪、當(dāng)歸與川芎進行薄層鑒別，可以用高效液相色譜法測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷的含量，可以對復(fù)方烏雞軟膠囊中的總氮量進行測定。復(fù)方烏雞軟膠囊若能完全或部分采用上述鑒別和含量測定項目來進行質(zhì)控，必能更好的控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證用藥的安全有效，提高產(chǎn)品的質(zhì)量。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種療效好、制劑穩(wěn)定、服用攜帶方便、不含糖、無藥物不良氣味的中藥抓復(fù)方烏雞軟膠囊。同時，提供復(fù)方烏雞軟膠囊的制備方法質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明復(fù)方烏雞軟膠囊由囊心物和囊殼兩部分組成。
一種復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物包括烏雞等十二味中藥提取物及適量輔料，囊殼主要由膠料和增塑劑組成，并可含有防腐劑、色素、矯味劑、遮蔽劑等附加劑。
一種復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物包括烏雞等十二味中藥提取物，烏雞等十二味中藥為烏雞、炙黃芪、山藥、黨參、白術(shù)、川芎、茯苓、當(dāng)歸、熟地黃、白芍(酒炒)、牡丹皮、五味子(酒制)。其配比(重量比)為烏雞750、炙黃芪280、山藥560、黨參280、白術(shù)280、川芎95、茯苓188、當(dāng)歸188、熟地黃375、白芍(酒炒)188、牡丹皮188、五味子(酒制)95。
一種復(fù)方烏雞軟膠囊其囊心物按重量百分比含有以下成份10～70％烏雞等十二味中藥提取物，藥用輔料包括0～3％的抗氧化劑、0～20％的穩(wěn)定劑和適量的稀釋劑。其囊殼按原料重量百分比含有20～50％的膠料、5～30％的增塑劑、0.01～0.3％的防腐劑、0～3％的遮蔽劑、0～10％的聚乙二醇、0～2％的色素、0～1％的矯味劑和適量的水。
上述稀釋劑可以是花生油、豆油、紅花油、沙棘油、茶油、色拉油、聚乙二醇400、玉米油等中的一種或一種以上或其它常規(guī)具稀釋作用的物質(zhì)。
上述穩(wěn)定劑可以是蜂蠟、羊脂、甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙二醇單硬脂酸脂、吐溫-80、聚乙二醇1000～6000、泊洛沙姆188～407、甘油中的一種或一種以上或其它常規(guī)具穩(wěn)定作用的物質(zhì)。
上述抗氧化劑可以是維生素E、茶多酚、特丁基對苯二酚(TBHQ)、甘草抗氧物、丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、沒食子酸丙酯(PG)中的一種或一種以上或其它常規(guī)具抗氧化作用的物質(zhì)。
上述膠料可以是明膠或其它常規(guī)材料。
上述增塑劑可以是甘油、山梨醇、蔗糖中的一種或一種以上或其它常規(guī)具增塑作用的物質(zhì)。
上述防腐劑可以是對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯中的一種或一種以上或其它具常規(guī)具防腐作用的物質(zhì)。
上述遮蔽劑可以是二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鐵、沉降碳酸鈣中的一種或一種以上或其它具遮蔽作用的物質(zhì)。
上述色素可以是食用色素或藥用色素中的任何一種。
上述矯味劑可以是乙基香蘭醛、香精油、薄荷腦中的一種或一種以上或其它常規(guī)具矯味作用的物質(zhì)。
本發(fā)明復(fù)方烏雞軟膠囊的制備方法按如下步驟1、囊心物制備(1)取烏雞750重量份、炙黃芪280重量份、山藥560重量份、黨參280重量份、白術(shù)280重量份、川芎95重量份、茯苓188重量份、當(dāng)歸188重量份、熟地黃375重量份、白芍(酒炒)188重量份、牡丹皮188重量份、五味子(酒制)95重量份。
(2)山藥、黃芪、黨參、茯苓的提取山藥、黃芪、黨參、茯苓切成碎塊，加7倍量的水，加熱煮沸30分鐘，濾過，收集濾液，藥渣再加5倍量的水，煮沸30分鐘，濾過，合并濾液，濃縮，加乙醇適量，靜置過夜，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏或干燥成干膏，粉碎成細粉，備用；(3)烏雞的提取烏雞宰殺后，除去毛、爪、腸等，洗凈，切成碎塊，加稀硫酸適量，加熱回流提取3小時，濾過，濾液調(diào)PH值5～6，冷藏過夜，脫脂，濾過，濾液濃縮成稠膏或干燥成干膏，粉碎成細粉，備用；(4)熟地黃等其余七味中藥的提取熟地黃、白術(shù)、白芍、牡丹皮、川芎、當(dāng)歸及五味子粉碎成粗粉，用70％的乙醇浸漬后進行滲漉，收集滲漉液，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮成稠膏或干燥成干膏，粉碎成細粉，備用；(5)將上述三組浸膏粉混合均勻或?qū)⑸鲜鋈M稠浸膏混合均勻或?qū)⑸鲜鋈M稠浸膏混合均勻，干燥成干膏，粉碎成細粉，即制得烏雞等十二味中藥提取物；在烏雞等十二味中藥提取物中，加入穩(wěn)定劑、稀釋劑、抗氧化劑，混合均勻，過膠體磨，備用；2、囊殼制備將所需量的水、增塑劑、聚乙二醇400(或不加)、防腐劑加入溶膠罐內(nèi)攪拌均勻，加入所需量的膠料，攪拌，待膠粒膨脹后，加熱至50～80℃使膠粒全部融溶，加入所需量的遮蔽劑、色素，攪拌，過濾，將濾液保溫靜置或減壓脫氣待用；3、軟膠囊的制備將囊心物包于囊殼中制成軟膠囊，可采用滴制法或壓制法；然后進行洗丸、干燥、包裝得到復(fù)方烏雞軟膠囊。
一種復(fù)方烏雞軟膠囊的質(zhì)量控制方法，含有如下鑒別和含量測定中的一種或幾種1.鑒別(1)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的當(dāng)歸和川芎(2)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷(3)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的牡丹皮(4)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的黨參
(5)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的黃芪2.含量測定(1)用高效液相色譜法測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷含量(2)測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的總氮量。
一種復(fù)方烏雞軟膠囊的質(zhì)量控制方法，含有如下鑒別和含量測定中的一種或幾種1.鑒別(1)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的當(dāng)歸和川芎取本品內(nèi)容物適量，脫脂后，加丙酮或其它適宜的溶劑提取，提取液作為供試品溶液，或提取液蒸/揮干，殘渣加適宜的溶劑使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材和川芎對照藥材各適量，提取后制成對照藥材溶液。吸取上述三種溶液各適量，分別點于同一硅膠G或硅膠H薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(3-30∶0.3-3)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷取本品內(nèi)容物適量，脫脂后，加水溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取，提取物上中性氧化鋁柱，以乙酸乙酯-甲醇液洗脫，洗脫液蒸干，殘渣加溶劑使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加溶劑適量制成對照品溶液。吸取上述供試品溶液、對照品溶液各適量，分別點于同一硅膠G或硅膠H薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(20-60∶2-8∶2-20∶0.05-0.5)為展開劑，，展開，取出，晾干，噴顯色劑使顯色，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的牡丹皮取本品內(nèi)容物適量，脫脂后，加丙酮或其它適宜的溶劑提取，提取液作為供試品溶液，或提取液蒸/揮干，殘渣加適宜的溶劑使溶解，作為供試品溶液。另取丹皮酚對照品，加溶劑適量制成對照品溶液。吸取上述供試品溶液、對照品溶液各適量，分別點于同一硅膠G或硅膠H薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(1-10∶0.3-3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴顯色劑使顯色，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的黨參取本品內(nèi)容物適量，脫脂后，加乙醇提取，提取液蒸干，殘渣加水溶解，加水飽和正丁醇提取，正丁醇提取液作為供試品溶液，或正丁醇提取液蒸/揮干，殘渣加適宜的溶劑使溶解，作為供試品溶液。另取黨參對照藥材適量，提取后制成黨參對照藥材溶液。吸取上述供試品溶液、對照藥材溶液各適量，分別點于同一硅膠G或硅膠H薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(2-15∶0.5-5∶0.1-1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴顯色劑，置紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(5)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的黃芪取本品內(nèi)容物適量，脫脂后，加乙醇或其它適宜的溶劑提取，提取液蒸干，殘渣加0.1-10％氫氧化鈉溶液溶解，濾過，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3～8，用乙酸乙酯或其它適宜的溶劑提取，提取液作為供試品溶液，或提取液蒸/揮干，殘渣加適宜的溶劑使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材適量，提取后制成黃芪對照藥材溶液。吸取上述二種溶液各適量，分別點于同一硅膠G或硅膠H薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(5-20∶0.5～2)為展開劑，展開，取出，晾干，顯色，置紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
2.含量測定(1)用高效液相色譜法測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷含量色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-磷酸二氫鉀溶液為流動相；紫外檢測器或二極管陣列檢測器；理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加水或其它適宜的溶劑制成確定濃度的溶液，作為對照品溶液。
供試品溶液的制備 精密稱取產(chǎn)品內(nèi)容物適量，脫脂后，加水或乙醇或其它適宜的溶劑提取，作為供試品溶液。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各適量，注入液相色譜儀，測定，即得。
(2)測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的總氮量。
精密稱取產(chǎn)品內(nèi)容物適量，脫脂后，照氮測定法中的半微量法測定總氮量。
所述的提取可采用超聲處理、回流提取、微波提取、振蕩提取等常規(guī)方法；當(dāng)歸與川芎的薄層色譜鑒別的展開劑還可以是石油醚-乙酸乙酯(5-25∶0.5-5)、環(huán)己烷-乙酸乙酯(5-25∶0.5-5)、石油醚-氯仿-甲醇(5-15∶1-5∶0.5-5)或其它適宜的展開劑；芍藥苷的薄層色譜鑒別的展開劑還可以是氯仿-甲醇-乙酸乙酯(5-15∶1-10∶0.5-5)或其它適宜的展開劑；
牡丹皮的薄層色譜鑒別的展開劑還可以是環(huán)己烷-氯仿-乙酸乙酯(5-15∶1-10∶0.1-1)或其它適宜的展開劑；黨參的薄層色譜鑒別的展開劑還可以是氯仿-甲醇-水(5-15∶1-10∶0.5-5)、正丁醇-乙酸乙酯-水(2-8∶0.5-2∶1-10)或其它適宜的展開劑；芍藥苷的含量測定的流動相還可以是乙腈-0.1％磷酸溶液(10-30∶90-70)或其它適宜的流動相。
一種復(fù)方烏雞軟膠囊的質(zhì)量控制方法，含有如下鑒別和含量測定中的一種或幾種1.鑒別(1)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的當(dāng)歸和川芎取本品內(nèi)容物適量，加硅藻土適量，研勻，加石油醚(30～60℃)20ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，加丙酮20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材和川芎對照藥材各0.5g，分別加丙酮10ml，時時振搖，冷浸1小時，濾過，濾液作為對照藥材溶液。吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一以0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷取本品內(nèi)容物適量，加硅藻土適量，研勻，加硅藻土5g，研勻，加石油醚(30～60℃)40ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，加水40ml，加熱使溶解，放冷，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次25ml，合并正丁醇液，用水洗2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液置水浴濃縮至1～2ml，加適量中性氧化鋁拌勻，在水浴上蒸去正丁醇，裝于中性氧化鋁小柱(200目，2g，內(nèi)徑1cm)上，以乙酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml中含2mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述供試品溶液10μl，對照品溶液5μl，分別點于同一以0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑，，展開，取出，晾干，噴以5％的香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的牡丹皮取本品內(nèi)容物適量，加硅藻土適量，研勻，加石油醚(30～60℃)20ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，加丙酮20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取丹皮酚對照品，加丙酮制成每1ml中含2mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述供試品溶液15μl，對照品溶液4μl，分別點于同一以0.3％的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(3∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以鹽酸酸性5％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的黨參取本品內(nèi)容物適量，加硅藻土適量，研勻，加石油醚(30～60℃)20ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，殘渣加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加水飽和正丁醇萃取2次，每次10ml，合并萃取液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取黨參對照藥材3g，照上述供試品制備方法，自“殘渣加乙醇30ml”起同法制成黨參對照藥材溶液。吸取上述供試品溶液6μl，對照藥材溶液2μl，分別點于同一以0.3％的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。
(5)用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的黃芪取本品內(nèi)容物適量，加硅藻土適量，研勻，加石油醚(30～60℃)40ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，殘渣加乙醇50ml，加熱回流20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加0.3％氫氧化鈉溶液15ml使溶解，濾過，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5～6，用乙酸乙酯萃取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材2g，照上述供試品溶液制備方法自“殘渣加乙醇50ml”起同法制成黃芪對照藥材溶液。吸取上述二種溶液各10μl，分別點于同一以0.3％的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏，后置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。
2.含量測定(1)用高效液相色譜法測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷含量色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.05mol/l磷酸二氫鉀溶液(14∶86)；檢測波長230nm；理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計算應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加水制成每1ml含25μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 精密稱定取本品內(nèi)容物適量，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)適量，加熱回流提取至提取液無色，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，置具塞錐形瓶中，精密加水50ml，密塞，稱定重量，超聲(功率250W，頻率50kHz)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
一次服用量中含白芍、牡丹皮以芍藥苷(C23H28O11)計，不得少于2.4mg。
(2)測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的總氮量。
精密稱取本品內(nèi)容物適量，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)適量，加熱回流提取至提取液無色，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，照氮測定法中的半微量法測定總氮量。
一次服用量中含氮(N)不得少于15mg。
所述的提取樣品或溶解提取物所用溶劑的量、超聲或回流提取的時間、定容或溶解后體積、點樣量或進樣量、對照品的濃度可以以所述具體值為基準(zhǔn)改變，或按比例改變。所述的超聲處理也可以采用回流提取、微波提取、振蕩提取等常規(guī)提取方法；所述的回流提取也可以采用超聲處理、微波提取、振蕩提取等常規(guī)提取方法。所述的鑒別方法Rf值合適，斑點清晰，缺味無干擾。所述的含量測定方法均進行了方法學(xué)驗證，缺味無干擾，線性關(guān)系、回收率等良好。所述的含量限度是根據(jù)所試制樣品的轉(zhuǎn)移率及有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中的含量限度確定，上述含量限度為最低含量限度，可以根據(jù)生產(chǎn)的具體情況提高含量限度。
具體實施例方式
以下通過實施例進一步說明本發(fā)明，但并不由此而限定本發(fā)明的應(yīng)用范圍。
實施例1山藥、黃芪、黨參、茯苓的提取山藥、黃芪、黨參、茯苓采用水提醇沉工藝進行提取，在提取有效成分的同時，可以有效地降低得膏率，減少淀粉等無效成分的提出。
影響水提效果的主要因素有藥材粉碎度、加水量、煎煮時間、煎煮次數(shù)以及浸泡時間等。煎煮前藥材浸透對煎煮效果有一定的影響，煎煮前的浸泡時間應(yīng)以藥材浸透為度，這四味藥中茯苓、山藥不易浸透，故以茯苓、山藥碎塊以無硬心為度，加水后浸泡0.5、1、2小時觀察，按時將茯苓、山藥碎塊取出打碎，可見0.5小時、1小時均有硬心，2小時無硬心，故加水后浸泡2小時，再加熱煎煮為宜。醇沉除雜的主要因素為醇濃度(達到除雜而活性成分損失少目的)，通常在濃縮液(1∶1)中，加入乙醇，使含醇量達60％、70％、80％。以浸膏得率和正丁醇提取物的量為考察指標(biāo)，對醇沉?xí)r乙醇濃度進行考察，結(jié)果見表1。從表1結(jié)果可知，醇沉?xí)r加2倍量乙醇較好。
表1醇沉工藝的比較
實施例2烏雞的提取烏雞蛋白經(jīng)酸水解可成為更易為人體吸收利用的多肽、氨基酸。影響酸水解的主要因素為酸種類，酸濃度及用量，加熱水解的濃度與時間。以烏雞水解粉氮含量為考察指標(biāo)，確定稀硫酸有用量。實驗及結(jié)果見表2。從表2可見，烏雞量與稀硫酸的比為1∶1.2較好。
表2稀硫酸用量的比較
實施例3其余熟地黃等七味藥的提取熟地黃、、白術(shù)、白芍、牡丹皮、川芎、當(dāng)歸及五味子七味用適當(dāng)當(dāng)濃度的乙醇進行滲漉，影響滲漉的主要因素為藥材的粉碎度，乙醇濃度及用量，漉速。漉速根據(jù)經(jīng)驗通?？晒潭?-5ml/kg·min。收集漉液量以滲漉至無色為終點，滲漉效果關(guān)健還是醇濃度，以浸膏得率和白術(shù)、白芍中的活性成分芍藥苷多少為考察指標(biāo)以確定乙醇的濃度。試驗及結(jié)果見表3。從表3結(jié)果可知，乙醇濃度70％較好。
表3乙醇濃度的比較
實施例4制成3000粒復(fù)方烏雞軟膠囊烏雞 750g炙黃芪280g 山藥 560g黨參 280g白術(shù) 280g 川芎 95g茯苓 188g當(dāng)歸 188g 熟地黃375g白芍(酒炒)188g牡丹皮188g 五味子(酒制) 95g以上十二味，山藥、黃芪、黨參、茯苓切成碎塊，加7倍量的水，加熱煮沸30分鐘，濾過，收集濾液，藥渣再加5倍量的水，煮沸30分鐘，濾過，合并濾液，濃縮，加2倍量乙醇，靜置過夜，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成相對密度為1.1(80℃)的清膏；另取烏雞宰殺后，除去毛、爪、腸等，洗凈，切成碎塊，加稀硫酸適量，加熱回流提取3小時，濾過，濾液調(diào)PH值5～6，冷藏過夜，脫脂，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.1(80℃)的清膏；其余熟地黃、白術(shù)、白芍、牡丹皮、川芎、當(dāng)歸及五味子粉碎成粗粉，用70％的乙醇浸漬后進行滲漉，收集滲漉液，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮成相對密度為1.1(80℃)的清膏；將三種清膏混合，減壓干燥，粉碎，加入茶油12429，蜂蠟103.5g，混勻，壓制成軟膠囊3000粒，即得。
實施例5復(fù)方烏雞軟膠囊的鑒別與含量測定(可包含下述的全部或部分，以所制軟膠囊一次服用量為三粒為例)1.鑒別(1)取本品6粒，剪開，傾出內(nèi)容物，加硅藻土3g，研勻，加石油醚(30～60℃)20ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，加丙酮20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材和川芎對照藥材各0.5g，分別加丙酮10ml，時時振搖，冷浸1小時，濾過，濾液作為對照藥材溶液。吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一以0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取本品12粒，剪開，傾出內(nèi)容物，加硅藻土5g，研勻，加石油醚(30～60℃)40ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，加水40ml，加熱使溶解，放冷，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次25ml，合并正丁醇液，用水洗2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液置水浴濃縮至1～2ml，加適量中性氧化鋁拌勻，在水浴上蒸去正丁醇，裝于中性氧化鋁小柱(200目，2g，內(nèi)徑1cm)上，以乙酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml中含2mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述供試品溶液10μl，對照品溶液5μl，分別點于同一以0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑，，展開，取出，晾干，噴以5％的香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取鑒別(1)項下的供試品溶液，作為供試品溶液。另取丹皮酚對照品，加丙酮制成每1ml中含2mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述供試品溶液15μl，對照品溶液4μl，分別點于同一以0.3％的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(3∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以鹽酸酸性5％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍褐色斑點。
(4)取本品10粒，剪開，傾出內(nèi)容物，加硅藻土3g，研勻，加石油醚(30～60℃)20ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，殘渣加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加水飽和正丁醇萃取2次，每次10ml，合并萃取液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取黨參對照藥材3g，照上述供試品制備方法，自“殘渣加乙醇30ml”起同法制成黨參對照藥材溶液。吸取上述供試品溶液6μl，對照藥材溶液2μl，分別點于同一以0.3％的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。
(5)取本品15粒，剪開，傾出內(nèi)容物，加硅藻土5g，研勻，加石油醚(30～60℃)40ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，殘渣加乙醇50ml，加熱回流20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加0.3％氫氧化鈉溶液15ml使溶解，濾過，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5～6，用乙酸乙酯萃取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材2g，照上述供試品溶液制備方法自“殘渣加乙醇50ml”起同法制成黃芪對照藥材溶液。吸取上述二種溶液各10μl，分別點于同一以0.3％的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏，后置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。
2.含量測定(1)用高效液相色譜法測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷含量色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.05mol/l磷酸二氫鉀溶液(14∶86)；檢測波長230nm；理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計算應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加水制成每lml含25μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物，混勻，取約0.6g，精密稱定，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)適量，加熱回流提取至提取液無色，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，置具塞錐形瓶中，精密加水50ml，密塞，稱定重量，超聲(功率250W，頻率50kHz)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每粒含白芍、牡丹皮以芍藥苷(C23H28O11)計，不得少于0.8mg。
(2)測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的總氮量。
取本品內(nèi)容物，混勻，取約0.2g，精密稱定，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)適量，加熱回流提取至提取液無色，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，照氮測定法中的半微量法測定，即得。
本品每粒含氮(N)不得少于5.3mg。
實施例6該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有35％的明膠，18％的甘油，0.08％的對羥基苯甲酸甲酯和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有10％的烏雞等十二味中藥提取物，5％的蜂蠟，2％的維生素E和余量的紅花油。
實施例7該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有36％的明膠，10％的甘油，10％的山梨醇，0.1％的對羥基苯甲酸乙酯和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有15％的烏雞等十二味中藥提取物，5％的羊脂，3％的聚乙二醇，3％的甘油，1.5％的茶多酚，33％的沙棘油和余量豆油。
實施例8該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有37％的明膠，22％的山梨醇，0.2％的對羥基苯甲酸甲酯，0.35％的檸檬黃，0.07％的乙基香蘭素，1％的二氧化鈦和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有20％的烏雞等十二味中藥提取物，15％的甲基纖維素，5％的聚乙二醇單硬脂酸脂，1％的丁基羥基茴香醚，6％的茶油和余量的色拉油。
實施例9該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有35％明膠、15％甘油、0.07％尼泊金乙醋、0.2％可可棕、0.1％二氧化鈦和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有35％的烏雞等十二味中藥提取物、61％茶油、4％蜂蠟。
實施例10該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有45％的明膠、18％甘油、0.2％胭脂紅和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有40％的烏雞等十二味中藥提取物，1％乙基纖維素，2％的吐溫-80，4％的泊洛沙姆和余量的玉米油。
實施例11該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有40％的明膠，20％的甘油，0.08％的對羥基苯甲酸甲酯，0.02％的對羥基苯甲酸丙酯，0.2％的葡萄紫，3％的碳酸鈣和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有30％的烏雞等十二味中藥提取物，5％的甘油和余量的聚乙二醇。
實施例12該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有42％的明膠，21％的甘油，0.08％的對羥基苯甲酸甲酯，0.02％的對羥基苯甲酸丙酯，0.28％的果綠，0.8％的二氧化鈦和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有45％的烏雞等十二味中藥提取物，3％的乙基纖維素，5％的聚乙二醇，2％的甘油，1％的維生素E，0.5％的沒食子酸丙酯，13.5％的豆油和余量的紅花油。
實施例13該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有43％的明膠，20％的甘油，0.1％的對羥基苯甲酸乙酯，0.2％的果綠，0.75％的硫酸鋇和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有50％的烏雞等十二味中藥提取物，5％的乙基纖維素，8％的聚乙二醇，1％的丁基羥基茴香醚，1％的沒食子酸丙酯和余量的豆油。
實施例14該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有44％的明膠，22％的甘油，0.08％的對羥基苯甲酸丁酯，0.18％的炭黑，0.65％的二氧化鈦和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有55％的烏雞等十二味中藥提取物，5％的聚乙二醇，4％的泊洛沙姆，1％的甘草抗氧化物和余量的豆油。
實施例15該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有45％的明膠，18％的甘油，0.1％的胭脂紅和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有60％的烏雞等十二味中藥提取物，2.5％的吐溫-80，5％的甘油和余量的聚乙二醇。
實施例16該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊殼按重量百分比含有41％的明膠，19％的甘油，0.1％的對羥基苯甲酸乙酯，0.24％的可可棕，0.04％的香精油，0.85％的二氧化鈦和余量的水；該復(fù)方烏雞軟膠囊的囊心物按重量百分比含有；65％的烏雞等十二味中藥提取物和余量的聚乙二醇。
實施例6-實施例16中的復(fù)方烏雞軟膠囊可通過以下生產(chǎn)方法得到1、囊心物制備(1)取烏雞750重量份、炙黃芪280重量份、山藥560重量份、黨參280重量份、白術(shù)280重量份、川芎95重量份、茯苓188重量份、當(dāng)歸188重量份、熟地黃375重量份、白芍(酒炒)188重量份、牡丹皮188重量份、五味子(酒制)95重量份。
(2)山藥、黃芪、黨參、茯苓的提取山藥、黃芪、黨參、茯苓切成碎塊，加7倍量的水，加熱煮沸30分鐘，濾過，收集濾液，藥渣再加5倍量的水，煮沸30分鐘，濾過，合并濾液，濃縮，加乙醇適量，靜置過夜，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏或干燥成干膏，粉碎成細粉，備用；(3)烏雞的提取烏雞宰殺后，除去毛、爪、腸等，洗凈，切成碎塊，加稀硫酸適量，加熱回流提取3小時，濾過，濾液調(diào)PH值5～6，冷藏過夜，脫脂，濾過，濾液濃縮成稠膏或干燥成干膏，粉碎成細粉，備用；(4)熟地黃等其余七味中藥的提取熟地黃、白術(shù)、白芍、牡丹皮、川芎、當(dāng)歸及五味子粉碎成粗粉，用70％的乙醇浸漬后進行滲漉，收集滲漉液，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮成稠膏或干燥成干膏，粉碎成細粉，備用；(5)將上述三組浸膏粉混合均勻或?qū)⑸鲜鋈M稠浸膏混合均勻或?qū)⑸鲜鋈M稠浸膏混合均勻，干燥成干膏，粉碎成細粉，即制得烏雞等十二味中藥提取物；在烏雞等十二味中藥提取物中，加入穩(wěn)定劑、稀釋劑、抗氧化劑，混合均勻，過膠體磨，備用；2、囊殼制備將所需量的水、增塑劑、聚乙二醇400(或不加)、防腐劑加入溶膠罐內(nèi)攪拌均勻，加入所需量的膠料，攪拌，待膠粒膨脹后，加熱至50～80℃使膠粒全部融溶，加入所需量的遮蔽劑、色素，攪拌，過濾，將濾液保溫靜置或減壓脫氣待用；
3、軟膠囊的制備將囊心物包于囊殼中制成軟膠囊，可采用滴制法或壓制法；然后進行洗丸、干燥、包裝得到復(fù)方烏雞軟膠囊。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方烏雞軟膠囊中藥制劑，由囊心物和囊殼兩部分組成，其特征在于，囊心物包括烏雞等十二味中藥提取物及適量輔料；烏雞等十二味中藥及其重量配比為烏雞750、炙黃芪280、山藥560、黨參280、白術(shù)280、川芎95、茯苓188、當(dāng)歸188、熟地黃375、白芍(酒炒)188、牡丹皮188、五味子(酒制)95，上述配比可按比例改變。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的復(fù)方烏雞軟膠囊，其特征在于，所述的輔料包括穩(wěn)定劑、抗氧化劑、稀釋劑等；穩(wěn)定劑可以是蜂蠟、羊脂、甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙二醇單硬脂酸脂、吐溫-80、聚乙二醇1000～6000、泊洛沙姆188～407、甘油中的一種或一種以上或其它常規(guī)具穩(wěn)定作用的物質(zhì)；抗氧化劑可以是維生素E、茶多酚、特丁基對苯二酚(TBHQ)、甘草抗氧物、丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、沒食子酸丙酯(PG)中的一種或一種以上或其它常規(guī)具有抗氧化作用的物質(zhì)；稀釋劑可以是花生油、豆油、紅花油、沙棘油、茶油、色拉油、聚乙二醇400、玉米油等中的一種或一種以上或其它常規(guī)具稀釋作用的物質(zhì)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的復(fù)方烏雞軟膠囊，其特征在于，所述的囊殼主要由膠料和增塑劑組成，并可含有防腐劑、色素、矯味劑、遮蔽劑等附加劑；膠料可以是明膠或其它常規(guī)材料；增塑劑可以是甘油、山梨醇、蔗糖中的一種或一種以上或其它常規(guī)具增塑作用的物質(zhì)；防腐荊可以是對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯中的一種或一種以上或其它常規(guī)具防腐作用的物質(zhì)；色素可以是食用色素或藥用色素中的任何一種；矯味劑可以是乙基香蘭醛、香精油、薄荷腦中的一種或一種以上或其它常規(guī)具有矯味作用的物質(zhì)；遮蔽劑可以是二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鐵、沉降碳酸鈣中的一種或一種以上或其它常規(guī)具遮蔽作用的物質(zhì)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的復(fù)方烏雞軟膠囊，其特征在于，囊心物組份的重量配比為組份 百分含量烏雞等十二味中藥提取物10～70％穩(wěn)定劑0～20％抗氧化劑 0～3％稀釋劑余量
5.根據(jù)權(quán)利要求1的復(fù)方烏雞軟膠囊，其特征在于囊殼組份的重量配比為組份 百分含量膠料 20～50％增塑劑5～30％防腐劑0.01～0.3％色素 0～2％矯味劑0～1％遮蔽劑0～3％聚乙二醇400 0～10％水余量
6.一種復(fù)方烏雞軟膠囊的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)山藥、黃芪、黨參、茯苓的提取山藥、黃芪、黨參、茯苓切成碎塊，加7倍量的水，加熱煮沸30分鐘，濾過，收集濾液，藥渣再加5倍量的水，煮沸30分鐘，濾過，合并濾液，濃縮，加乙醇適量，靜置過夜，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏或干燥成干膏，粉碎成細粉，備用；(2)烏雞的提取烏雞宰殺后，除去毛、爪、腸等，洗凈，切成碎塊，加稀硫酸適量，加熱回流提取3小時，濾過，濾液調(diào)PH值5～6，冷藏過夜，脫脂，濾過，濾液濃縮成稠膏或干燥成干膏，粉碎成細粉，備用；(3)熟地黃等其余七味中藥的提取熟地黃、白術(shù)、白芍、牡丹皮、川芎、當(dāng)歸及五味子粉碎成粗粉，用70％的乙醇浸漬后進行滲漉，收集滲漉液，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮成稠膏或干燥成干膏，粉碎成細粉，備用；(4)囊心物制備將上述三組浸膏粉混合均勻或?qū)⑸鲜鋈M稠浸膏混合均勻或?qū)⑸鲜鋈M稠浸膏混合均勻，干燥成干膏，粉碎成細粉，即制得烏雞等十二味中藥提取物；在烏雞等十二味中藥提取物中，加入穩(wěn)定劑、稀釋劑、抗氧化劑，混合均勻，過膠體磨，備用；(5)囊殼制備將所需量的水、增塑劑、聚乙二醇400(或不加)、防腐劑加入溶膠罐內(nèi)攪拌均勻，加入所需量的膠料，攪拌，待膠粒膨脹后，加熱至50～80℃使膠粒全部融溶，加入所需量的遮蔽劑、色素，攪拌，過濾，將濾液保溫靜置或減壓脫氣待用；(6)成品制備將囊心物包于囊殼中制成軟膠囊，可采用滴制法或壓制法；然后進行洗丸、干燥、包裝得到復(fù)方烏雞軟膠囊。
7.一種復(fù)方烏雞軟膠囊的制備方法，其特征在于，制成3000粒軟膠囊的制法如下烏雞 750g 炙黃芪 280g山藥560g黨參 280g 白術(shù)280g川芎95g茯苓 188g 當(dāng)歸188g熟地黃 375g白芍(酒炒)188g 牡丹皮 188g五味子(酒制)95g以上十二味，山藥、黃芪、黨參、茯苓切成碎塊，加7倍量的水，加熱煮沸30分鐘，濾過，收集濾液，藥渣再加5倍量的水，煮沸30分鐘，濾過，合并濾液，濃縮，加2倍量乙醇，靜置過夜，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成相對密度為1.1(80℃)的清膏；另取烏雞宰殺后，除去毛、爪、腸等，洗凈，切成碎塊，加稀硫酸適量，加熱回流提取3小時，濾過，濾液調(diào)PH值5～6，冷藏過夜，脫脂，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.1(80℃)的清膏；其余熟地黃、白術(shù)、白芍、牡丹皮、川芎、當(dāng)歸及五味子粉碎成粗粉，用70％的乙醇浸漬后進行滲漉，收集滲漉液，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮成相對密度為1.1(80℃)的清膏；將三種清膏混合，減壓干燥，粉碎，加入茶油1242g，蜂蠟103.5g，混勻，壓制成軟膠囊3000粒，即得。
8.一種復(fù)方烏雞軟膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于，含有如下鑒別和含量測定中的一種或幾種(1)鑒別a.用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的當(dāng)歸和川芎取本品內(nèi)容物適量，脫脂后，加丙酮或其它適宜的溶劑提取，提取液作為供試品溶液，或提取液蒸/揮干，殘渣加適宜的溶劑使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材和川芎對照藥材各適量，提取后制成對照藥材溶液。吸取上述三種溶液各適量，分別點于同一硅膠G或硅膠H薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(3-30∶0.3-3)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。b.用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷取本品內(nèi)容物適量，脫脂后，加水溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取，提取物上中性氧化鋁柱，以乙酸乙酯-甲醇液洗脫，洗脫液蒸干，殘渣加溶劑使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加溶劑適量制成對照品溶液。吸取上述供試品溶液、對照品溶液各適量，分別點于同一硅膠G或硅膠H薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(20-60∶2-8∶2-20∶0.05-0.5)為展開劑，，展開，取出，晾干，噴顯色劑使顯色，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。c.用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的牡丹皮取本品內(nèi)容物適量，脫脂后，加丙酮或其它適宜的溶劑提取，提取液作為供試品溶液，或提取液蒸/揮干，殘渣加適宜的溶劑使溶解，作為供試品溶液。另取丹皮酚對照品，加溶劑適量制成對照品溶液。吸取上述供試品溶液、對照品溶液各適量，分別點于同一硅膠G或硅膠H薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(1-10∶0.3-3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴顯色劑使顯色，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。d.用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的黨參取本品內(nèi)容物適量，脫脂后，加乙醇提取，提取液蒸干，殘渣加水溶解，加水飽和正丁醇提取，正丁醇提取液作為供試品溶液，或正丁醇提取液蒸/揮干，殘渣加適宜的溶劑使溶解，作為供試品溶液。另取黨參對照藥材適量，提取后制成黨參對照藥材溶液。吸取上述供試品溶液、對照藥材溶液各適量，分別點于同一硅膠G或硅膠H薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(2-15∶0.5-5∶0.1-1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴顯色劑，置紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。e.用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的黃芪取本品內(nèi)容物適量，脫脂后，加乙醇或其它適宜的溶劑提取，提取液蒸干，殘渣加0.1-10％氫氧化鈉溶液溶解，濾過，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3～8，用乙酸乙酯或其它適宜的溶劑提取，提取液作為供試品溶液，或提取液蒸/揮干，殘渣加適宜的溶劑使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材適量，提取后制成黃芪對照藥材溶液。吸取上述二種溶液各適量，分別點于同一硅膠G或硅膠H薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(5-20∶0.5-2)為展開劑，展開，取出，晾干，顯色，置紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(2)含量測定a.用高效液相色譜法測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷含量色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠或八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-磷酸二氫鉀溶液為流動相；紫外檢測器或二極管陣列檢測器；理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計算應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，加水或其它適宜的溶劑制成確定濃度的溶液，作為對照品溶液。供試品溶液的制備精密稱取產(chǎn)品內(nèi)容物適量，脫脂后，加水或乙醇或其它適宜的溶劑提取，作為供試品溶液。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各適量，注入液相色譜儀，測定，即得。b.測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的總氮量。精密稱取產(chǎn)品內(nèi)容物適量，脫脂后，照氮測定法中的半微量法測定總氮量。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的復(fù)方烏雞軟膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于(1)所述的提取可采用超聲處理、回流提取、微波提取、振蕩提取等常規(guī)方法；(2)當(dāng)歸與川芎的薄層色譜鑒別的展開劑還可以是石油醚-乙酸乙酯(5-25∶0.5-5)、環(huán)己烷-乙酸乙酯(5-25∶0.5-5)、石油醚-氯仿-甲醇(5-15∶1-5∶0.5-5)或其它適宜的展開劑；(3)芍藥苷的薄層色譜鑒別的展開劑還可以是氯仿-甲醇-乙酸乙酯(5-15∶1-10∶0.5-5)或其它適宜的展開劑；(4)牡丹皮的薄層色譜鑒別的展開劑還可以是環(huán)己烷-氯仿-乙酸乙酯(5-15∶1-10∶0.1-1)或其它適宜的展開劑；(5)黨參的薄層色譜鑒別的展開劑還可以是氯仿-甲醇-水(5-15∶1-10∶0.5-5)、正丁醇-乙酸乙酯-水(2-8∶0.5-2∶1-10)或其它適宜的展開劑；(6)芍藥苷的含量測定的流動相還可以是乙腈-0.1％磷酸溶液(10-30∶90-70)或其它適宜的流動相。
10.一種復(fù)方烏雞軟膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于，含有如下鑒別和含量測定中的一種或幾種，(1)鑒別a.用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的當(dāng)歸和川芎取本品內(nèi)容物適量，加硅藻土適量，研勻，加石油醚(30～60℃)20ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，加丙酮20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材和川芎對照藥材各0.5g，分別加丙酮10ml，時時振搖，冷浸1小時，濾過，濾液作為對照藥材溶液。吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一以0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。b.用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷取本品內(nèi)容物適量，加硅藻土適量，研勻，加硅藻土5g，研勻，加石油醚(30～60℃)40ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，加水40ml，加熱使溶解，放冷，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次25ml，合并正丁醇液，用水洗2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液置水浴濃縮至1～2ml，加適量中性氧化鋁拌勻，在水浴上蒸去正丁醇，裝于中性氧化鋁小柱(200目，2g，內(nèi)徑1cm)上，以乙酸乙酯-甲醇(1∶1)30ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml中含2mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述供試品溶液10μl，對照品溶液5μl，分別點于同一以0.3％羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑，，展開，取出，晾干，噴以5％的香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。c.用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的牡丹皮取本品內(nèi)容物適量，加硅藻土適量，研勻，加石油醚(30～60℃)20ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，加丙酮20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取丹皮酚對照品，加丙酮制成每1ml中含2mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述供試品溶液15μl，對照品溶液4μl，分別點于同一以0.3％的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(3∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以鹽酸酸性5％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。d.用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的黨參取本品內(nèi)容物適量，加硅藻土適量，研勻，加石油醚(30～60℃)20ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，殘渣加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加水飽和正丁醇萃取2次，每次10ml，合并萃取液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取黨參對照藥材3g，照上述供試品制備方法，自“殘渣加乙醇30ml”起同法制成黨參對照藥材溶液。吸取上述供試品溶液6μl，對照藥材溶液2μl，分別點于同一以0.3％的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱5分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。e.用薄層色譜法鑒別復(fù)方烏雞軟膠囊中的黃芪取本品內(nèi)容物適量，加硅藻土適量，研勻，加石油醚(30～60℃)40ml超聲處理15分鐘，過濾，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，殘渣加乙醇50ml，加熱回流20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加0.3％氫氧化鈉溶液15ml使溶解，濾過，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5～6，用乙酸乙酯萃取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材2g，照上述供試品溶液制備方法自“殘渣加乙醇50ml”起同法制成黃芪對照藥材溶液。吸取上述二種溶液各10μl，分別點于同一以0.3％的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏，后置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。(2)含量測定a.用高效液相色譜法測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的芍藥苷含量色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.05mol/1磷酸二氫鉀溶液(14∶86)；檢測波長230nm；理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加水制成每1ml含25μg的溶液，即得。供試品溶液的制備 精密稱定取本品內(nèi)容物適量，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)適量，加熱回流提取至提取液無色，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，置具塞錐形瓶中，精密加水50ml，密塞，稱定重量，超聲(功率250W，頻率50kHz)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。一次服用量中含白芍、牡丹皮以芍藥苷(C23H28O11)計，不得少于2.4mg。b.測定復(fù)方烏雞軟膠囊中的總氮量。精密稱取本品內(nèi)容物適量，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)適量，加熱回流提取至提取液無色，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，照氮測定法中的半微量法測定總氮量。一次服用量中含氮(N)不得少于15mg。所述的提取樣品或溶解提取物所用溶劑的量、超聲或回流提取的時間、定容或溶解后體積、點樣量或進樣量、對照品的濃度可以以所述具體值為基準(zhǔn)改變，或按比例改變；所述的超聲處理也可以采用回流提取、微波提取、振蕩提取等常規(guī)提取方法，所述的回流提取也可以采用超聲處理、微波提取、振蕩提取等常規(guī)提取方法；所述的含量限度為最低含量限度，可以根據(jù)生產(chǎn)的具體情況提高含量限度。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有補氣血，益肝腎作用的中藥復(fù)方烏雞軟膠囊，同時涉及該制劑的制備方法質(zhì)量控制方法。該制劑克服現(xiàn)有制劑的不足，具有制劑穩(wěn)定、服用攜帶方便、不含糖、無藥物不良氣味等諸多優(yōu)點。同時提供了該制劑的制備方法質(zhì)量控制方法，所提供的質(zhì)量控制方法包含對復(fù)方烏雞軟膠囊中的白芍、牡丹皮、黃芪、黨參、當(dāng)歸與川芎進行鑒別，對復(fù)方烏雞軟膠囊中白芍和牡丹皮的活性物質(zhì)芍藥苷進行含量測定，對復(fù)方烏雞軟膠囊中總氮量進行控制。
文檔編號A61P15/00GK1814126SQ200510200738
公開日2006年8月9日 申請日期2005年11月25日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月25日
發(fā)明者毛曉敏 申請人:毛曉敏