滇白珠在治療梅尼埃病及各型眩暈病上的應用及制法的制作方法

專利名稱：：滇白珠在治療梅尼埃病及各型眩暈病上的應用及制法的制作方法
技術領域：
：本發明涉及中藥滇白珠在治療梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病上的應用及其制備方法，屬于藥品的
技術領域：
。
背景技術：
：眩暈病及眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥屬常見病、多發病；誘發眩暈的疾病涉及臨床各科，而對該病的治療至今國內尚無理想的藥物，“眩暈停”片為國內常用的抗眩暈藥，對前庭神經系統有特異性抗眩暈作用，但臨床效果不理想，復發率高，還可能產生嚴重副反應，故限制于住院患者或嚴密監視的門診患者；我國傳統中醫用中藥方劑“半夏白術天麻湯”、“苓桂術甘湯”、“柴胡加龍骨牡蠣”治療眩暈，其方藥較復雜，服藥時間長，使用極為不便，且未見治愈率和遠期追蹤觀察的報導。滇白珠，又名透骨香，為杜鵑花科植物滇白珠Gaultheriayunnanensis(Franch)Rchd的干燥根。在《貴州省中藥材質量標準》、《中國民族藥志》、《新編中草藥大辭典》、《滇南本草》、《云南中草藥》、《文本藥用植物目錄》、《云南藥用植物目錄》、《貴州草藥》等書均有收載，科研資料證明滇白珠根含有揮發油，其含量為0.24％，鑒定揮發油中主要成分為水楊酸甲酯。主要分布于云南、貴州、四川、江西、福建、臺灣、湖北、廣東、西藏等省。該藥材具有清熱解毒、活血化瘀、消炎鎮痛、祛風除濕等功能。主要用于治療風濕性關節炎、跌打損傷、胃痛、慢性支氣管炎、急慢性前列腺炎、風寒感冒、哮喘、皮膚濕疹、水腫等癥；但未見用于治療由眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的報道。
發明內容本發明的目的在于提供中藥滇白珠的新的用途，即在制藥中的新應用。實際中，本發明涉及中藥滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥的藥上的應用。中藥滇白珠在制備治療各型眩暈病藥的藥上的應用。本發明也涉及如何制備這些治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥物制劑。本發明是這樣的中藥滇白珠在制備治療用于眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥的藥上的應用；中藥滇白珠在制備治療各型眩暈病藥的藥上的應用。中藥滇白珠在制備治療用于眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥的制備方法將滇白珠采用現有技術提取有效成分加上適當的輔料后制備成口服制劑或注射制劑，如糖漿劑、軟膠囊劑、注射液、滴丸劑、粉針劑、口服液等以及所有藥劑學上允許的制劑。具體的說取滇白珠30～100g，分別加入3～7倍量原藥材的30～70％濃度的乙醇回流提取2～5次，每次1～3小時，合并提取液，回收乙醇，即得滇白珠的有效成分，將得到的滇白珠的有效成分加入輔料、制備成所需的藥物制劑。取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量原藥材的30～70％濃度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，第一次1.5小時，第二次2小時，第三次1.5小時，合并3次提取液，回收乙醇至20℃時測相對密度為1.04～1.08，過濾，取濾液，加入蔗糖30～65g煮沸溶解，過濾，冷卻至室溫，取濾液，加入0.05g的防腐劑尼泊金乙酯和0.5ml的桔子香精，攪拌均勻，用純化水調至100ml，灌裝，即制成糖漿劑。取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，第一次1小時，第二次2小時，第三次1.5小時，合并3次提取液，回收乙醇至20℃時測相對密度為1.04～1.08的清膏，濃縮，干燥后壓丸，即制成軟膠囊制劑。取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，第一次1小時，第二次1.5小時，第三次2小時，合并3次提取液，回收乙醇至20℃時測相對密度為1.04～1.08，過濾，濾液，加2g活性炭，100℃加熱5分鐘，濾過，用氫氧化鈉試液調節PH值至7，過濾至澄清。灌封，100℃滅菌45分鐘，即制成注射劑。取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次2小時，合并3次提取液，回收乙醇至50～60℃時測相對密度為1.20～1.30，過濾，濃縮、干燥、粉碎，加入PEG6000和硬脂酸等混合基質，制丸，即制成滴丸劑。取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，每次1.5小時，合并3次提取液，回收乙醇至50～60℃時測相對密度為1.3～1.35，過濾，取濾液，無菌過濾，真空冷凍干燥、粉碎、分裝，密封即制成粉針劑。取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，每次1小時，合并3次提取液，回收乙醇至20℃時測相對密度為1.04～1.08的清膏，過濾，加入溶劑和適量蜂蜜及山梨酸，用純化水稀釋至100ml，即制成口服液制劑。將滇白珠還可以用其它方法進行有效成分的提取并制備成更多的劑型供患者選用。眩暈既是中醫病名，也是本病的主要癥狀，眩即眼花，暈是頭暈，二者常同時并見。其輕者閉目可止，重者如坐車船，旋轉不定，不能站立，或伴有惡心、嘔吐、汗出，面色蒼白等癥狀。中醫學認為，其發病多由于風、火、痰、虛、瘀引起清竅失養所致。痰不僅可阻滯清陽不升，亦可導致血瘀，以致痰瘀互結，氣血不暢，而眩暈亦重。在眩暈的發病過程中，各種病因病機，可以相互影響，相互轉化，形成虛實夾雜。一般急者多偏實，緩者多偏虛，實證多見于眩暈發作期，虛證多見于眩暈發作的緩解期。眩暈的治療原則，主要是虛補實瀉。實證以痰火為多，痰濕中阻者宜除濕化痰；肝火偏盛者則當清肝瀉火；肝陽上亢，化炎生風者應熄風潛陽。虛證以精氣虛居多，精虛者填精生髓，滋補腎陰；氣血虛者宜益氣養血，調補脾腎。即實證眩暈以清火化痰、熄風潛陽法以治其標為主；虛證眩暈當補養氣血、益腎、養肝、健脾等法以其本為主。根據《滇南本草》、《貴州草藥》等記載，滇白珠，性溫(平)，味甘辛，微苦，功能祛除風濕、活血通絡。針對眩暈病實證發病的病因病機為痰濕中阻、瘀血阻滯，治療應除濕化瘀的原則，本發明將滇白珠應用在制備治療眩暈病及用于眩暈痰瘀交阻證引發的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥的制劑上，癥見頭暈、胸悶、腹脹、舌暗苔膩，脈弦膩等，以奏祛濕化痰，活血化瘀，泄熱定眩之功。以滇白珠提取物制備成的藥物制劑經臨床使用證明，對用于眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥、頸性眩暈、前庭神經元炎、局限性迷路炎等眩暈癥具有獨特的療效，有效率達91.6％，其中治愈率占58.3％，顯效率占33.3％，安全、無毒。本發明的藥效學試驗鑒于眩暈的病因復雜，眩暈的發作與全身很多系統和器官的功能異常有關，通常分為周圍性及中樞性眩暈兩大類。周圍性者在內耳或前庭神經，包括梅尼埃病、迷路炎、前庭神經元炎、藥物性眩暈(氨基糖甙類等)、良性陣發性位置性眩暈等。中樞性者病變在腦干、小腦或大腦顳葉中樞、例如椎枛基底動脈供血不足，小腦腦干的血管疾患(栓塞或出血)或腫瘤疾患等均可出現眩暈癥狀和平衡障礙。因此，本試驗在衛生部尚無眩暈癥主要藥效學研究指南的情況，參考全國高等醫學院校中、西醫《耳、鼻、喉科學》統編教材，結合現代醫學論述的導致眩暈的主要常見病及臨床用藥情況。在主要藥效學試驗研究中觀察了滇白珠對中樞鎮靜、解痙、抗眼震、對椎枛基底動脈血流量、腦微循環障礙、抗炎、免疫、止吐等方面的影響。其結果如下實驗材料1、受試藥物與試劑本發明滇白珠流浸膏，由本申請人提供；戴芬逸多(眩暈停)，湖北湘江制藥廠，注射用氫化可的松，黑龍江佳木斯醫學院制藥廠，批號830409；維腦路通，張家口市制藥廠，批號870905；腎上腺素注射液，西南制藥三廠，批號860603；磷酸組織胺，中國藥品生物制品檢定所，批號850303；氯化乙酰膽堿，上海新亞藥廠，批號850520；凍干皮內注射卡介苗，蘭州生物制品研究所，批號870103；印度墨汁北京化工廠，批號670414；EVANS蘭，上海生化制藥廠，批號780806；硫酸銅(化學試劑)。2、動物昆明種小鼠，20±2g；Wistar大鼠190±30g；豚鼠200±50g；家鴿300±50g；日本大耳兔、犬(市售)10±0.5kg(以上動物雌雄兼用，試驗時，按體重性別隨機分組)。由貴州省藥品檢驗所動物房提供。3、儀器rm-6000型四導生理記錄儀(日本產)UV-72型分光光度計，北京分析儀器廠；JL-光電計數儀，天津醫療器械修配廠。文中計量資料，組間比較與給藥前后比較，統計學處理用t檢驗。實驗方法與結果1、鎮靜作用眩暈發作期常施以鎮靜藥物如安定、利眠寧等，以控制癥狀。本試驗擬證明本發明的滇白洙糖漿劑有否中樞鎮靜作用。1.1對小鼠自主活動的影響動物分組。ig給藥，每天一次，連續4天。陽性對照組于第4天ig安定一次(7.5mg/kg)。各組動物于末次給藥后1h，用光電記數儀分別記錄10和30min內小鼠活動情況，結果，滇白珠流浸膏可明顯減少小鼠的自主活動。見表1。表1滇白珠流浸膏對小鼠自主活動的影響與空白組比較，*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001(下列各表均同)。1.2對小鼠戊巴比妥納睡眠時間的影響除安定劑量為5mg/kg外，其余分組與給藥均同1.1項，于末次給藥后1h，ig戊巴比納40mg/kg，以翻正反射消失為指標，觀察記錄小鼠入睡時間和睡眠時間。結果，滇白珠流浸膏大劑量組能延長小鼠戊巴比妥鈉的睡眠時間，顯示與戊巴比妥鈉有協同作用。見表2。表2滇白珠流浸對戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠時間的影響X±SD(min)以上試驗證明，滇白珠流浸膏具有中樞鎮靜作用。2、抗眼震顫作用眩暈常伴有眼震，尤以前庭周圍性疾病引起的眩暈伴有的眼震與其程度相稱。本試驗目的為證明滇白洙糖漿劑有否抗眩暈的作用。豚鼠分組，ig給藥，每天一次。連續6天，于末次給藥后1h，于豚鼠右外耳道滴注0.02ml氯仿誘發迷路積水性眩暈眼震，以滴注氯仿至出現眼震的時間為眼震潛伏時間，出現眼震停止時間為眼震持續時間，分別觀察記錄各組動物的眼震潛伏時間和持續時間。結果，滇白珠流浸膏和陽性對照戴芬逸多均能縮短眼震的持續時間，對眼震潛伏時間均沒有影響。顯示滇白珠流浸膏有抗眩暈的作用。見表3、表4。表3滇白珠流浸膏對氯仿誘發豚鼠眼顫潛伏時間的影響表4滇白珠流浸膏對氯仿誘發豚鼠眼震持續時間的影響注與空白比較，*P＜0.01，**P＜0.001，與戴芬逸多組比較△P＞0.05。3、解痙作用動脈痙攣性缺血(如內耳血管痙攣椎動脈痙孿性缺血)，可引起眩暈，本試驗觀察滇白洙糖漿對動脈平滑肌有否解痙作用。取兔耳主動脈條，按常規離體平滑肌實驗方法，在通氯的克氏液中，待動脈條縮平穩后，以腎上腺素(3.1×10-6M/L)引起血管痙攣性收縮，收縮達高峰后，換液沖洗2次，使恢復到基線，以此作為對照。然后分別給以不同劑量的滇白珠流浸膏，并與離體血管接觸30min后，再加入同劑量的腎上腺素，記錄收縮曲線，測量振幅，并與對照比較，計算張力抑制率。結果，滇白珠流浸膏對腎上腺素性血管痙攣，具有解痙作用。見表5。表5滇白珠流浸膏對抗腎上腺素血管痙攣的作用4、對犬椎枛基底動脈血流量的影響椎枛基底動脈供血不足引起眩暈較為常見，本試驗觀察滇白珠流浸膏有否增加椎動脈血流量的作用。取犬分組，ip戊巴比妥麻醉，剝離頸動脈與椎動脈，分別連接TP-200T壓力換能器及MPV-1200電磁流量計，用四導生理記錄儀分別測取頸動脈平均血壓(KAP)及椎動脈血流量(VAP)，并同時描記心律與心電。十二指腸給藥，服后每10min測量記錄一次，連續觀察2h，以其平均值與給藥前正常值比較，同時用磷酸組織胺作對照，分別計算增加的百分率。結果，給N.S后，上述各項指標與正常比較均無明顯改變。而分別給滇白珠流浸膏和磷酸組織胺，均使椎動脈血流量增加，對頸動脈平均血壓、心律、心電圖均無明顯影響，表明滇白珠流浸膏有增加椎動脈血流量的作用。5、對腦微循環障礙的影響腦微循環障礙可導致眩暈，大鼠分組，ip戊巴比妥麻醉，暴露大腦半球的額項部給5mm×5mm，在冷光源45o角照射下，用XTB-01型顯微鏡放大40倍，觀察軟腦膜微循環，分離一側頸動脈并注入10％葡聚糖(3ml/kg)，以形成軟腦膜微循環障礙，20min后，ip等物，分別于藥前藥后20min在相同視野下觀察毛細管網交叉點數、血流速度(分5級)、血液流態(分5級)變化。結果，滇白珠流浸膏大劑量對腦內血液循環障礙有一定改善作用，可使血流速度加快，但作用較為緩和對毛細血管網交叉點數及血液流態未見明顯影響。見表6、表7、表8、表9。表6滇白珠流浸膏對麻醉犬椎動脈血流量、頸動脈平均血壓的影響X±D表7滇白珠提取液對毛細血管網交叉點數的影響表8滇白珠提取液對血流速度的影響表9滇白珠提取液對血液流態的影響6、抗炎消腫作用內耳炎癥如迷路炎、神經元炎等常導致眩暈，為此觀察滇白珠流浸膏的抗炎消腫作用。6.1對二甲苯所致小鼠耳殼腫脹的影響動物分組ig給藥，每天一次，連續5天，陽性對照組于試驗前一次ip氫化考的松(25mg/kg)，各組動物于末次給藥后30min，于每鼠右耳殼上滴注0.5ml二甲苯致炎，以左耳為對照組，15min后用直徑8mm打孔器切取耳片，稱重以左右耳重量之差為腫脹值，并計算抑制率。結果，滇白珠流浸膏能抑制二甲苯致小鼠耳殼腫脹，具有抗炎消腫作用，見表10。表10滇白珠流浸膏對二甲苯所致小鼠耳殼腫脹的影響6.2對大鼠角叉菜膠性足腫脹的影響動物分組，ip給藥，每天一次，連續8天，陽性對照組ip氫化考的松(12.5mg/kg)，每天一次，連續3天，各組動物于末次給藥后1h足跖部皮下注入1％角叉菜膠0.1ml致炎，然后分別測定致炎后1/2、2、3、4、5、6h的左右足跖容積(毫米水柱)，以給藥前后之差值為炎癥腫脹指標，分別計算各組腫脹度平均值并與空白組對應時間的腫脹值比較。結果滇白珠流浸膏和氫化考的松均有抑制角叉菜膠足腫脹的作用。作用持續時間在6h以上。見表11。表11滇白珠流浸膏對大鼠角叉菜膠性足脹的影響6.3對大鼠佐劑性關節炎的影響動物分組，ip給藥，每天一次，連續24天，陽性對照組間日ip氫化考的松(12.5mg/kg)，每天2次Freunds，各組動物的第一次給藥后的第三天，于每鼠右足前后跖部皮內注射Freund’s完全佐劑(內含卡介苗3.6mg/ml)0.05ml致炎，測量致炎后18h、14h、17d、19d、21d足腫脹值，以觀察佐劑性關節炎原發性病變，致炎后第14天，各組動物均有不同程序繼發性病灶出現，其空白組發病率達100％，根據耳、尾、前足、左后足腫脹的發生，評定級數，凡具備4種病灶，同時出現者評4級，具備3種者評3級，以此類推。同時測量左右足跖腫脹值，與致炎前測量值比較，計算左右足跖腫脹值，記錄繼發病變發生率和致炎第21天體重情況。從而判定佐劑性關節炎繼發性病變程度，結果，滇白珠流浸膏能抑制Freund’s完全佐劑性關節炎的原發性和繼發性病變。見表12、表13、表14、表15。表12滇白珠流浸膏對大鼠佐劑性關節炎(致炎對側后足腫脹)的影響表13滇白珠流浸膏對大鼠佐劑性關節炎(致炎側足腫脹)的影響表14滇白珠流浸膏對佐劑性關節炎(其他部位炎癥)的影響表15滇白珠流浸膏對大鼠佐劑性關節炎(繼發病變發生率)的影響與氫化考的松組比較△△P＜0.01。6.4對組織胺致大鼠毛細血管通透性的影響動物分組，ig給藥(陽性對照組ig氫化考的松12.5mg/kg)每天一次連續8天，末次給藥后30min，于鼠腹中線側ic組織胺(0.05mg/0.05ml)，并立即iV1％EVans藍(1ml/kg)，30min后，剖取腹部皮膚，測量皮膚內側的藍色染色區域直徑(以橫縱二半徑的平均值r計算)按r2計算著色面積；剪下著色皮斑切碎，提取。提取液用比色法，測定其吸收度(OD)，作為染色程度，并計算抑制率。結果，滇白珠流浸膏有抑制組織胺所致大鼠毛細管通透性增加的作用。見表16。表16滇白珠流浸膏對組織胺所致大鼠毛細血管通透性的影響以上4個實驗證明，本發明滇白珠流浸膏，有明顯抗炎作用。7.對免疫功能影響中醫認為眩暈之病因，以內傷為主。然各家說法不一，陳修園在《醫學從眾錄》里結合各家之見指出“本病的病根屬虛，病象如實，本癥以腎脾之虛居多”。而腎、肝虛患者免疫功能常低下，故進行本項試驗。7.1對小鼠單核巨噬細胞吞噬功能的影響動物分組，ig給藥，每天一次，連續6天。以1∶1黃芪黨參水煎液為陽性對照，于末次給藥后1h，按炭廊清率測定方法，測定計算廊清指數。結果，滇白珠流浸膏可使吞噬指數升高，有增強機體特異性免疫功能的作用。見表17。表17滇白珠流浸膏對小鼠單核巨噬細胞吞噬功能的影響7.2對小鼠外周血中T細胞的影響動物分組，ig給藥，每天一次，連續5天，于末次給藥后1h，鼠尾取血涂片，按T淋巴細胞酯酶活性檢測法，孵育、染色、鏡檢，每張血片均查200個淋巴細胞，計算T和B細胞的百分率。結果，滇白珠流浸膏能提高小鼠外周血T細胞百分比，有增強細胞免疫功能的作用，見表18。表18滇白珠流浸膏對正常小鼠外周血中T細胞的影響7.3對小鼠同種被動皮膚過敏反應(PCA)的影響動物分組，ig給藥(陽性對照im氫化考的松25mg/kg)，每天一次，連續5天，各組小鼠于末次給藥的前二天，用天花粉為抗原制備的抗血清致敏，48h后iV含天花粉2.5mg/ml的1％EVans蘭生理鹽水0.2ml/只攻擊，30min后處死動物，翻轉皮膚用6.4項方法測定藍斑直徑，計算藍斑面積，并前下藍斑皮膚，進行比色測定。結果，滇白珠流浸膏能抑制天花粉引起的PCA反應，表示本品具有抗I型變態反應的作用。見表19。8.止吐試驗取家鴿分組，ig給藥，每天一次，連續4天，陽性對照組第四天時，ig氯丙嗪0.06g/kg一次。各組動物于末次給藥后1h，ig硫酸銅0.2g/kg致吐，觀察各組動物的嘔吐潛伏期和持續時間，并記錄嘔吐次數。結果，滇白珠流浸膏對鴿硫酸銅性嘔吐未見影響。見表20。表19滇白珠流浸膏對小鼠同種被動皮膚過敏反應的影響表20滇白珠流浸膏對鴿硫酸銅性嘔吐的影響X±D小結從上述滇白珠流浸膏的主要藥效學試驗結果歸納有如下作用1、減少小鼠自主活動，延長小鼠戊巴比妥鈉的睡眠時間，顯示有中樞鎮靜作用；2、能縮短氯仿誘發豚鼠眼震顫的持續時間，顯示有抗眩暈的作用；3、對腎上腺素所致的離體兔主動脈痙攣，顯示有解痙作用；4、能使椎枛基底動脈血流量增加，顯示有改善腦供血不足的作用；5、對葡聚糖所致的大鼠腦循環障礙，顯示有改善作用；6、對二甲苯、角叉菜膠，福氏完全佐劑和組織胺所致大鼠毛細血管通透性增高，顯示有明顯的抗炎、消腫和抑制作用；7、能增強小鼠巨噬細胞吞噬活性，提高小鼠外周血中的T細胞百分比和抑制小鼠同種被動皮膚過敏反應，顯示有增強機體免疫功能和抗I型變態反應的作用；8、對鴿硫酸銅性嘔吐，無止吐作用。分析這些作用，可認為，以滇白珠提取物配制的本發明滇白珠糖漿，對由于內耳疾患(膜迷路積水、迷路前庭神經元炎等)椎枛基底動脈供血不足，腦內微循環障礙，植物神經功能紊亂等引起的眩暈癥有治療作用。滇白珠提取液對大鼠腦膜微循環障礙的影響滇白珠臨床用于眩暈癥，具有明顯療效，實驗觀察到滇白珠可明顯減弱小鼠自主活動，與戊巴比妥鈉有明顯協同催眠作用，并可縮短氯仿誘發的豚鼠眼震顫持續時間，本實驗進一步觀察了滇白珠對大鼠腦膜微循環障礙的保護作用。材料與方法一、藥物本發明滇白珠提取液2.0g生藥/ml，由本申請人提供。葡聚糖(DextranT500)瑞士生產，批號17-0320-01維腦路通張家口市制藥廠生產，批號870905。生理鹽水石家莊市第四制藥廠生產，89013005。戊巴比妥鈉上海化學試劑分裝廠生產，批號84-06-12。二、動物Westar種雄性大白鼠31只，體重250-300克。三、方法將動物隨機分為五組，用0.6％戊巴比妥鈉(0.75ml/100g)腹腔給藥麻醉，打開顱骨，暴露大腦半球的額頂部約5mm×5mm，在冷光源45o角照射下，用XTB-01型顯微鏡放大40倍觀察軟腦膜微循環。分離一例股靜脈并注入10％葡聚糖(3ml/kg)，以形成軟腦膜微循環障礙。20分鐘后腹腔注入實驗藥物，于藥前及藥后20分鐘在相同視野觀察下列指標1.毛細血管網義點計數觀察固定區域內固定面積毛細血管與周邊界的交叉點數目。2.血流速度共分5級。0級微血管可見，但無血液細胞通過；I級微血管內可見血細胞，有時出現血細胞聚集成團，數量較少，逐漸向前推進，時停時進；II級微血管內血細胞充滿管腔，慢慢向前流動；III級血細胞充滿管腔，流動呈線型，但腹下可分出流動中的血細胞；IV級微血管中血細胞分辨不出，流動速度極快。3.血液流態共分為5級。0級(-)，無血細胞聚集；I級(+)，2-3個血細胞聚集成微細的顆粒狀，不影響血流速度；II級(++)，4-6個血細胞聚集成粗顆粒狀；III級(+++)，血細胞聚集成團塊狀而影響血流速度；IV級(++++)，血流停止或形成微血栓。結果一、對毛細血管網義叉點計數的影響對照級及各給藥組給藥前后，毛細血管網交叉點數未見明顯變化和差異。見表21。表21滇白珠提液對毛細血管網交叉點數的影響二、對血流速度的影響對照組給藥前后血流速度未發生明顯變化；維腦路通組血流速度有改善趨勢，但與對照組差異不明顯；滇白珠提取液大劑量組作用與維腦路通組相似，對血流速度亦有改善趨勢，但與對照組沒有顯著性差異。表22滇白珠提取液對血流速度的影響三、對血流流態的影響對照組給藥前后血細胞聚集程度沒有明顯改變；而維腦路通組藥后血細胞聚集程度明顯改善，與給藥前比較具有顯著性差異(P＜0.05)滇白珠提取液各劑量對血液流態均沒有明顯變化。表23滇白珠提取液對血液流態的影響<tablesid="table23"num="023"><tablewidth="594">分組劑量(g/kg)動物數血液流態(X±SD)給藥前給藥后對照組維腦路通組滇白珠大量組滇白珠中量組滇白珠小量組0.0210.05.01.0557772.42±1.102.95±0.212.29±0.492.30±0.402.29±0.492.67±0.702.00±0.92*2.29±0.492.20±0.442.43±0.53</table></tables>*與給藥前比較，P＜0.05本實驗利用葡聚糖形成大鼠腦微循環障礙模型，并觀察了滇白珠提取液對大鼠腦微循環障礙的改善作用。實驗中觀察到，靜脈給予葡聚糖后，循環血流速度減慢，血細胞發生聚集，個別動物在藥后20分鐘左右死亡。對照組給予生理鹽水后，血流速度減慢，血液流態惡化；而維腦路通明顯改善微循環狀態，使血流速度加快，血液流態改善；滇白珠提取液大劑量作用與維腦路通相似，對腦內血液循環障礙亦有一定改善作用，可使血流速度加快，但作用較為緩和。工藝研究滇白珠為杜鵑花科植物滇白珠GanutterlaYunnanensis(Franch)Rehd的根，根據文獻報道及成分預試，表明原生藥中含有糖類、有機酸、黃酮、鞣質、香豆素、內酯類等成分，其中黃酮含量較大。為了確定最佳提取工藝，申請人用正交試驗方法，以黃酮含量為判斷標準，找出了影響提取效果的主要因素，得出了提取的最佳工藝。(一)實驗方法1.制定因素水平表，選浸泡時間，乙醇濃度，回流時間(三次總和)為三項因素，每個因素取3個水平，見表24。表24影響滇白珠總黃酮含量的因素水平表2.列出工藝試驗方案并進行試驗，根據因素水平表，列出L9(33)正交試驗表，見表25。表25滇白珠總黃酮含量正交試驗方案設計表3.根據正交試驗表進行試驗，實驗中，稱取藥材50g粉碎，按規定加入溶劑浸泡一段時間，再回流提取三次，合并提取液，深縮成100ml濃縮液。按照滇白珠藥材質量標準(含量測定)項下方法用乙酸乙酯200ml萃取三次，合并萃取液，置水浴上蒸干后，殘渣以甲醇適量溶解，移入50ml量瓶中，用少量甲醇洗滌后并入量瓶中，加甲醇至刻度。精密量取溶液5ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，再精密吸取5ml置25ml量瓶中，加水1ml，加5％亞硝酸鈉溶液1ml使混勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15分鐘，按照分光光度法(《中國藥典》1995年版一部附錄30頁)，在500nm的波長處測定吸收度，并計算總黃酮量(以蘆丁計)。(二)試驗結果與分析以上試驗的藥材，都是同一產地、同一時間采挖藥材，其處理，提取工藝，總黃酮含量測定方法都相同，試驗結果見表26。表26試驗結果從表26可知乙醇的濃度因素極差最大，是影響滇白珠總黃酮含量的主要因素，浸泡時間，回流提取時間對總黃酮含量影響較小，據該試驗最優工藝應為A2B2C3。即提取深媒的濃度就為40％乙醇；但是用30％的乙醇濃度提取總黃酮平均含量為0.56％，而用40％及50％的乙醇濃度時，平均含量為0.87％、0.76％，含量提高不多，乙醇濃度卻增加10％、20％。權衡生產成本，選擇最優條件為A2B1C2。即提取溶劑采30％乙醇。用30％的乙醇提取制成的樣品進行藥效學試驗，結果表明本品具有鎮靜、解痙、抗眼震，增加椎枛基底動脈血流量，改善腦循環障礙，抗炎消腫，增強機體免疫功能等作用。于是得出A2B1C2為最佳工藝。本工藝制成的樣品經臨床試驗得以肯定。(三)確定30％乙醇的加入量和回流次數1.制定因素水平表，選30％乙醇的加入倍量，回流次數為二項因素，每個因素取3個水平，見表27。表272.列出工藝試驗方案并進行試驗，根據因素水平表，L9(34)正交試驗表，實驗中，稱取藥材50g粉碎，按規定量的30％乙醇加入浸泡24小時，再按規定的回流次數提取，合并提取液，濃縮成100ml濃縮液，其余步驟均同實驗(一)，所得結果如表28所示。表283.試驗結果分析從表28所得結果看出回流次數極差較大，根據實驗結果最優工藝應為A2B3，即采用4倍量的30％乙醇，回流提取4次，但回流3次所提取總黃酮平均為0.89％，而回流次數為4次時，平均含量為0.95％，含量提高不多，但乙醇卻提1.3倍，權衡生產成本及實際生產條件，實際選擇條件為A2B2。即采用4倍量的30％乙醇回流提取3次。(四)三批產品中試1.中試生產本申請人進行了980502、980511、980604三個批次的產品中試，所得中試生產數據如表29所示。表29中試生產數據2.三批中試按滇白珠糖漿質量標準及中國藥典95年版一部附錄微生物限度檢查項下進行檢測，所得檢測數如表30所示。表30三批中試產品質量檢測表(五)結論根據實驗結果，申請人制定了藥材提取的最佳工藝藥材浸泡24小時后，分別用4倍量30～70％的乙醇回流提取三次，第1次1.5小時，第2次2小時，第3次1.5小時。成品濃度《貴州省中藥材質量標準》1998年版“用法與用量”項下為5～15g，一日劑量為15～45g。本專利申請的一次服用量相當于藥材6～20g，一日劑量相當于藥材18～60g。從以上的各項實驗結果，可以看出與現有技術相比，本發明優點在于(1)對已知的藥材滇白珠發掘了新的醫療用途，開拓了新的應用領域；(2)滇白珠能祛濕化痰、活血化淤。用于眩暈痰瘀交阻證引發的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥，癥見頭暈、胸悶、腹脹、舌暗苔膩，脈弦滑等。治療效果比較理想且沒有毒副作用；(3)原料的來源廣泛、價格便宜、制備工藝簡單、可以制備成口服制劑、注射制劑等供醫患雙方選擇；(4)治療效果顯著，中藥滇白珠對各型眩暈均有明顯療效，其中對痰瘀交阻證的梅尼埃病的療效尤為顯著。具體實施例方式下面描述本發明的幾個實施例，但本發明的內容完全不局限于此本發明的實施例1取滇白珠30g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量原藥材的70％濃度的乙醇，在90℃回流提取3次，第一次1.5小時，第二次2小時，第三次1.5小時，合并3次提取液，回收乙醇至20℃時測相對密度為1.04～1.08，過濾，取濾液，加入蔗糖30～65g煮沸溶解，過濾，冷卻至室溫，取濾液，加入0.05g的防腐劑尼泊金乙酯和0.5ml的桔子香精，攪拌均勻，用純化水調至100ml，灌裝，即制成糖漿劑。本發明的實施例2取滇白珠100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30％濃度的乙醇，在70℃回流提取3次，第一次1小時，第二次2小時，第三次1.5小時，合并3次提取液，回收乙醇至20℃時測相對密度為1.04～1.08的清膏，濃縮，干燥后壓丸，即制成軟膠囊制劑。本發明的實施例3取滇白珠60g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的60％濃度的乙醇，在80℃回流提取3次，第一次1小時，第二次1.5小時，第三次2小時，合并3次提取液，回收乙醇至20℃時測相對密度為1.04～1.08，過濾，濾液，加2g活性炭，100℃加熱5分鐘，濾過，用氫氧化鈉試液調節PH值至7，過濾至澄清。灌封，100℃滅菌45分鐘，即制成注射劑。本發明的實施例4取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次2小時，合并3次提取液，回收乙醇至50～60℃時測相對密度為1.20～1.30，過濾，濃縮、干燥、粉碎，加入PEG6000和硬脂酸等混合基質，制丸，即制成滴丸劑。本發明的實施例5取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，每次1.5小時，合并3次提取液，回收乙醇至50～60℃時測相對密度為1.3～1.35，過濾，取濾液，無菌過濾，真空冷凍干燥、粉碎、分裝，密封即制成粉針劑。本發明的實施例6取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～90℃回流提取3次，每次1小時，合并3次提取液，回收乙醇至20℃時測相對密度為1.04～1.08的清膏，過濾，加入溶劑和適量蜂蜜及山梨酸，用純化水稀釋至100ml，即制成口服液制劑。口服制劑一次的服用量相當于藥材6～20g，一日劑量相當于藥材18～60g。權利要求1.中藥滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥的藥中的應用。2.中藥滇白珠在制備治療各型眩暈病藥的藥中的應用。3.如權利要求1或2所述滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥的制備方法，其特征在于將滇白珠采用現有技術提取有效成分加上適當的輔料后制備成糖漿劑、軟膠囊劑、注射液、滴丸劑、粉針劑、口服液以及所有藥劑學上允許的制劑。4.按照權利要求3所述滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥的制備方法，其特征在于取滇白珠30～100g，分別加入3～7倍量原藥材的30～70％濃度的乙醇回流提取2～5次，每次1～3小時，合并提取液，回收乙醇，即得滇白珠的有效成分，將得到的滇白珠的有效成分加入輔料、制備成糖漿劑、軟膠囊劑、滴丸劑、口服液這些口服制劑或注射液、粉針劑類的注射制劑。5.按照權利要求3或4所述滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥的制備方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量原藥材的30～70％濃度的乙醇，在70～900C回流提取3次，第一次1.5小時，第二次2小時，第三次1.5小時，合并3次提取液，回收乙醇至200C時測相對密度為1.04～1.08，過濾，取濾液，加入蔗糖30～65g煮沸溶解，過濾，冷卻至室溫，取濾液，加入0.05g的防腐劑尼泊金乙酯和0.5ml的桔子香精，攪拌均勻，用純化水調至100ml，灌裝，即制成糖漿劑。6.按照權利要求3或4所述滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥的制備方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～900C回流提取3次，第一次1小時，第二次2小時，第三次1.5小時，合并3次提取液，回收乙醇至200C時測相對密度為1.04～1.08的清膏，濃縮，干燥后壓丸，即制成軟膠囊制劑。7.按照權利要求3或4所述滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥的制備方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～900C回流提取3次，第一次1小時，第二次1.5小時，第三次2小時，合并3次提取液，回收乙醇至200C時測相對密度為1.04～1.08，過濾，濾液，加2g活性炭，100℃加熱5分鐘，濾過，用氫氧化鈉試液調節PH值至7，過濾至澄清，灌封，100℃滅菌45分鐘，即制成注射劑。8.按照權利要求3或4所述滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥的制備方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～900C回流提取3次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次2小時，合并3次提取液，回收乙醇至50～600C時測相對密度為1.20～1.30，過濾，濃縮、干燥、粉碎，加入PEG6000和硬脂酸等混合基質，制丸，即制成滴丸劑。9.按照權利要求3或4所述滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥的制備方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～900C回流提取3次，每次1.5小時，合并3次提取液，回收乙醇至50～600C時測相對密度為1.3～1.35，過濾，取濾液，無菌過濾，真空冷凍干燥、粉碎、分裝，密封即制成粉針劑。10.按照權利要求3或4所述滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥的制備方法，其特征在于取滇白珠30～100g，洗凈、切成1cm長的小段，分別加入4倍量的30～70％濃度的乙醇，在70～900C回流提取3次，每次1小時，合并3次提取液，回收乙醇至200C時測相對密度為1.04～1.08的清膏，過濾，加入溶劑和適量蜂蜜及山梨酸，用純化水稀釋至100ml，即制成口服液制劑。全文摘要本發明公開了滇白珠在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的藥上的應用及其制備方法，將中藥滇白珠應用在制備治療眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥及各型眩暈病的制劑上，采用糖漿劑、膠囊劑、口服液、注射液、滴丸劑、粉針劑等所有藥劑學上允許的制劑給藥，本發明的原料來源廣泛、價格便宜、制備工藝簡單且治療效果顯著、安全無毒，對各型眩暈病有明顯的療效，特別是對眩暈痰瘀交阻證的梅尼埃病、梅尼埃綜合癥的療效尤為顯著。文檔編號A61P1/00GK1817353SQ20051020070公開日2006年8月16日申請日期2005年11月14日優先權日2004年11月17日發明者王曉春申請人:貴州同濟堂制藥有限公司