專利名稱：一種穩定的香菇多糖等滲輸液的處方及制備方法
技術領域：
本發明涉及一種醫藥用香菇多糖等滲輸液的處方及其制備方法。
背景技術：
香菇多糖(Taxotere)是從香菇(Lentinus edodes)的子實體中提取純化的多糖。基本結構為每5個β-(1→3)結合的葡萄糖直鏈上有2個β-(1→3)結合側鏈的高分子葡聚糖，重復結構單位一般含有7個氯化鈉殘基，其中兩個在側鏈上，具有一定的分子量范圍(40～80萬左右)。研究發現香菇多糖具有生物免疫調節作用，能增強NK細胞、T細胞功能，誘導干擾素血中濃度升高。同時香菇多糖在多種動物腫瘤(包括MM-102、MM-46、結腸-26、Lewis肺癌、L-517gY等)中，能使腫瘤縮小及延長動物的生存時間，其作用機制不是直接針對腫瘤細胞，而是激活宿主的防病機制，其中包括殺傷T細胞和活化巨噬細胞、自然殺傷細胞(NK)和抗體依賴性巨噬細胞的細胞毒作用(ADMC)。香菇多糖是國內外正式用于臨床的多糖類免疫藥物之一，臨床上主要用于對惡性腫瘤的輔助治療及肝炎的治療，另外對小兒呼吸道感染、尋常銀屑病、硬皮病等也有良好治療效果，具有療效好、劑量低、副作用小等優點。目前國內已有香菇多糖凍干粉針劑和注射液生產，但由于這兩種劑型在使用時必須加入氯化鈉或葡萄糖注射液中靜脈滴注，需要臨時配制，容易造成交叉污染，使用也不方便；同時由于香菇多糖制劑含量極低，每支含量只有1～2mg，稀釋配制時凍干粉針劑和注射液包裝瓶中的殘留會造成大比例有效成分的損失。然而由于多糖類物質在水溶中長期存在不穩定，所以國內至今沒有香菇多糖等滲輸液的生產，本發明提出一種可用于大生產的穩定的香菇多糖等滲輸液的處方及制備方法，填補了該項技術的空白，具有推廣的價值。
發明內容
本發明旨在克服香菇多糖凍干粉針劑和注射液使用不方便、容易造成交叉污染、有效成分損失大的缺陷，發明了一種可用于大生產的穩定的香菇多糖等滲輸液的處方及制備方法，處方與制備方法如下處方內容1、處方本發明涉及的香菇多糖等滲輸液，以香菇多糖與0.9％氯化鈉或5％～10％葡萄糖作為等滲調節劑制備成的滅菌水溶液，每瓶含香菇多糖1～2mg；含香茹多糖應為標示量的90.0％～115.0％，含氯化鈉或葡萄糖應為標示量的95.0～105.0％。本品為無色澄明液體。
2、制備工藝
2.1原料溶解經試驗，香菇多糖1mg可溶于2ml注射用水中。由于多糖在熱水中溶解較快，因此用熱水溶解。
2.2pH值范圍的確定香菇多糖為分子量40-80萬的多糖，在中性溶液中比較穩定，在酸、堿條件下容易水解。其原料和凍干粉針的酸堿度為6.0-8.0，中藥香菇多糖注射液的pH范圍為4.5-7.0。
為了確定本品pH的最適宜范圍，保證生產和使用過程中藥品質量，我們考察了pH值對本品的影響，按處方配制藥液，調節成不同的pH值，在105℃條件下用濕熱蒸汽滅菌30分鐘，觀察滅菌前后外觀色澤、澄明度、pH值的變化，按原料中分子量分布的檢查方法經減壓濃縮后檢查分子量分布，按香菇多糖原料的含量測定方法測定香菇多糖含量，以酪酸鉀指示液為指示劑用滴定法測定氯化鈉的含量，并對滅菌后注射液進行無菌檢測。結果見表1表1 pH值影響試驗(以0.9％氯化鈉為例說明)
根據表1結果，本品pH值在4.5-7.0之間穩定，滅菌前后各項檢測指標均無明顯變化，因此，本品pH值范圍定為4.5-7.0。
2.3活性炭用量的考察本品主藥含量低，如果與氯化鈉一起用活性炭脫熱原吸附嚴重，不加活性炭吸附則熱原不能保證，因此采用與氯化鈉分別用活性炭脫熱原的方法，以保證產品的熱原符合要求。為了確定吸附熱原的活性炭的用量，參照香菇多糖原料的含量測定方法測定香菇多糖含量，用滴定法測定氯化鈉的含量、熱原測定采用每只家兔注射本品0.1mg進行檢測。活性炭用量0.3％對氯化鈉含量無影響，因此，氯化鈉溶液用0.3％活性炭吸附熱原。不同活性炭用量對香菇多糖含量和熱原的影響，結果見表2，含量以活性炭用量為0時的含量為對100％。
表2 活性炭用量試驗結果
根據表2結果，活性炭用量0.05％以上時對香菇多糖含量沒有明顯影響，活性炭用量為0.025％熱原合格，因此香菇多糖溶液活性炭用量選擇0.025％；活性炭用量0.3％對氯化鈉含量沒有明顯影響，也可去除原料中的熱原，因此氯化鈉溶液活性炭用量選擇0.3％；2.4滅菌條件試驗按處方和工藝制備樣品，采用兩種滅菌溫度105℃、115℃分別滅菌30分鐘，結果見表3表3 滅菌條件試驗(以0.9％氯化鈉為例說明)
根據表3結果，本品115℃滅菌30分鐘后分子量降低，105℃滅菌30分鐘各項檢測指標均合格，樣品無菌檢查合格，因此，滅菌條件定為105℃滅菌30分鐘。
注本品按處方配制，pH即在4.5-7.0之間，不必調節pH值，必要時可用0.1mol/L鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調節pH值。
2.5含量測定本發明涉及產品含量低，常規方法無法檢測，如何在等滲輸液中科學準確地測定其含量，是本發明的關鍵技術之一。通過大量實踐，制定以下測定方法2.5.1對照品溶液的制備 取經五氧化二磷減壓干燥至恒重的香菇多糖對照品20mg，精密稱定，加0.5mol/L氫氧化鈉溶液10ml，研磨，使溶解，加生理鹽水分次轉移至500ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻。
2.5.2測定法精密量取對照品溶液及樣品溶液各2.0ml，分別沿管壁緩緩加至已精密加入0.2％蒽酮硫酸溶液5ml的試管中(以上操作均在冰浴中進行)，劇烈振搖勻后，立即置沸水浴中加熱，自振搖起計時，準確反應6分鐘，將試管移至冰浴中冷卻后，放置室溫。自振搖起，在20分鐘～40分鐘內，以生理鹽水制備試劑空白，照分光光度法(中國藥典2000年版二部附錄IV B)，分別在625nm的波長處測定吸收度，計算。
成品制備按照以上工藝研究結果，稱取處方量的香菇多糖，加入熱注射用水，攪拌使溶解，加入0.025％的活性攪拌吸附30分鐘，過濾為溶液A；取氯化鈉或葡萄糖，加注射用水，攪拌溶解，加入0.05％的活性炭攪拌吸附30分鐘，過濾，濾液為溶液B；取溶液A加入溶液B中，加注射用水至近全量，測定含量和PH值，合格后用0.22μm微孔慮膜過濾，分裝，105℃濕熱蒸汽滅菌30分鐘，檢驗，包裝，即得成品。
具體實施例方式
本發明可用下面的實施例加以說明實施例1香菇多糖氯化鈉注射液，50ml/瓶，其中含香菇多糖2mg，共制備1000瓶。
香菇多糖 2.0g氯化鈉450g注射用水加至 50000ml制成1000瓶制備方法精密稱取處方量的香菇多糖2.0g，加入熱注射用水，攪拌使溶解，加入0.025％的活性攪拌吸附30分鐘，過濾為溶液A；精密稱取處方量的氯化鈉，加注射用水，攪拌溶解，加入0.05％的活性炭攪拌吸附30分鐘，過濾，濾液為溶液B；取溶液A加入溶液B中，加注射用水至近全量，測定含量，調節PH值至4.5-7.0，合格后用0.22μm微孔慮膜過濾，分裝，105℃濕熱蒸汽滅菌30分鐘，檢驗，包裝，即得50ml香菇多糖氯化鈉注射液成品1000瓶。
實施例2香菇多糖葡萄糖注射液，100ml/瓶，其中含香菇多糖2mg，共制備1000瓶。
香菇多糖 2.0g葡萄糖 10000g注射用水加至 100000ml制成 1000瓶制備方法精密稱取處方量的香菇多糖2.0g，加入熱注射用水，攪拌使溶解，加入0.025％的活性攪拌吸附30分鐘，過濾為溶液A；精密稱取處方量的取葡萄糖，加注射用水，攪拌溶解，加入0.05％的活性炭攪拌吸附30分鐘，過濾，濾液為溶液B；取溶液A加入溶液B中，加注射用水至近全量，測定含量，調節PH值至4.5-7.0，合格后用0.22μm微孔慮膜過濾，分裝，105℃濕熱蒸汽滅菌30分鐘，檢驗，包裝，即得100ml香菇多糖葡萄糖注射液成品1000瓶。
本發明制備方法不限于以上實例。
權利要求
1.本發明涉及一種穩定的香菇多糖等滲輸液的處方及制備方法。
2.權利要求1所述的香菇多糖等滲輸液，以香菇多糖與0.9％氯化鈉或5％～10％葡萄糖作為等滲調節劑制備成的滅菌水溶液。
3.權利要求1所述的香菇多糖等滲輸液每瓶應含香菇多糖1～4mg，但最佳值為每瓶2mg；含香茹多糖應為標示量的90.0％～115.0％，含氯化鈉或葡萄糖應為標示量的95.0～105.0％。
4.權利要求1所述的香菇多糖等滲輸液的性狀應為無色澄明液體。
5.權利要求1所述的香菇多糖等滲輸液中香菇多糖含量測定方法為。a.對照品溶液的制備取經五氧化二磷減壓干燥至恒重的香菇多糖對照品20mg，精密稱定，加0.5mol/L氫氧化鈉溶液10ml，研磨，使溶解，加生理鹽水分次轉移至500ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻。b.測定法精密量取對照品溶液及樣品溶液各2.0ml，分別沿管壁緩緩加至已精密加入0.2％蒽酮硫酸溶液5ml的試管中(以上操作均在冰浴中進行)，劇烈振搖勻后，立即置沸水浴中加熱，自振搖起計時，準確反應6分鐘，將試管移至冰浴中冷卻后，放置室溫。自振搖起，在20分鐘～40分鐘內，以生理鹽水制備試劑空白，照分光光度法(中國藥典2000年版二部附錄IV B)，分別在625nm的波長處測定吸收度，計算。
全文摘要
本發明旨在克服香菇多糖凍干粉針劑和注射液使用不方便、容易造成交叉污染、有效成分損失大的缺陷，發明了一種可用于大生產的穩定的香菇多糖等滲輸液的處方及制備方法，特點是使用方便，使用更安全，產品性質穩定，質量可控，可用于大生產，具有很好的推廣價值，而且填補了香菇多糖等滲輸液的市場空白。
文檔編號A61P1/00GK1823812SQ200510135568
公開日2006年8月30日 申請日期2005年12月30日 優先權日2005年12月30日
發明者李海 申請人:李海