專利名稱：應用膜分離技術對夏桑菊提取液精制的新工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種植物提取液的精制分離和濃縮方法，具體涉及制備清肝明目藥物夏桑菊制劑藥材提取液的分離濃縮方法的改進。
背景技術：
中華人民共和國衛生部藥品標準中藥成方制劑第十五冊收載的清肝明目藥物夏桑菊顆粒劑是由夏枯草、野菊花、桑葉三味中藥材提取制備而成的中成藥制劑，具有清肝明目、疏風散熱、除濕痹、解瘡毒的功能，用于風熱感冒、目赤頭痛、高血壓、頭暈耳鳴、咽喉腫痛、疔瘡腫毒等癥，是較常用的中成藥，現已有用同樣的處方藥材開發制成夏桑菊顆粒。
已公開的夏桑菊顆粒劑的制備方法是以夏枯草、桑葉和野菊花為原料，加10倍量水，100℃下煎煮1.5hr，共煎煮2次，濾過，合并濾液，濾液濃縮成浸膏，浸膏加入95％乙醇溶液至乙醇濃度為67％，醇沉24hr，濾過，濾液回收乙醇，減壓濃縮成清膏，然后添加藥用輔料制成顆粒劑。這種方法簡稱水提醇沉法，該精制方法存在的缺點是(1)生產周期長；(2)需耗用大量的乙醇，生產成本高；(3)乙醇是易燃的有機溶劑，大量使用乙醇安全風險大，為了保證安全生產，需采取多方面的措施，增加了工廠的生產成本。
作為常用中成藥的夏桑菊顆粒，目前該產品的國內市場銷售規模已經達到幾億元人民幣，在全國范圍內的生產量較大。鑒于夏桑菊的傳統醇沉和濃縮工藝存在醇沉時間長、濃縮溫度高、能耗高等缺點，有必要通過探索采用新型精制分離和濃縮技術進行工藝改進，以提高產品的質量，降低生產成本。
發明內容
本發明的目的是改進夏桑菊制劑制備工藝中醇沉的精制方法和濃縮方法，去除雜質成分，提高產品的質量，縮短生產周期長，降低生產成本和安全風險。
本發明所采用的技術方案是取中藥材夏枯草、桑葉、野菊花三味中藥按照夏桑菊的處方比例用水提取得到的提取液，經800～15000轉/分離心0.5～2hr后，取離心液在室溫下通過無機陶瓷膜或/和有機復合膜進行精制分離，透過液通過采用納濾或反滲透濃縮成相對密度為1.05～1.2的浸膏。
這里所說的提取液可以是采用常規的水煎煮或超聲強化提取方法得到的水提取液。
本發明的夏桑菊提取液精制新方法中所說的無機陶瓷膜可以采用0.05～1μm孔徑的氧化鋁膜、氧化鋯膜或氧化銻無機陶瓷膜，截留0.05μm以上的粒子，濾過時的操作壓力為0.1～2MPa；本發明的夏桑菊提取液精制新方法中所說的有機復合膜可以采用聚砜、醋酸纖維、聚四氟乙烯膜或聚丙烯，以采用0.05～1μm孔徑，截留0.05μm以上的粒子，濾過時的操作壓力為0.1～2MPa為佳。藥材的提取液在具體精制時可以只經過無機陶瓷膜濾過進行膜分離，或只經過有機復合膜濾過進行膜分離，或先經過無機陶瓷膜濾過進行膜分離再只經過有機復合膜濾過進行膜分離的方法達到精制的目的。
本發明工藝中所說的濾液濃縮方法是納濾可以采用芳香聚酰胺、聚哌嗪酰胺膜或聚醚砜有機膜，截留分子量150～1000，操作壓力2～4MPa，流量為1～3m3/hr；反滲透膜濾可以采用聚砜膜或聚酰胺膜或醋酸纖維仿生膜，反滲透壓力2～5MPa，流量1～3m3/hr。
采用本發明工藝方法所得到的膜濾前夏桑菊提取液與膜濾后夏桑菊提取液，經過《中華人們共和國藥典》2005版一部高效液相色譜法測定，以中國藥品生物制品檢定所提供的綠原酸和熊果酸為對照品進行外標法定量，得夏桑菊中所含主要有效成分綠原酸和熊果酸的含量。結果表明，采用本發明的工藝方法，從夏桑菊處方藥材中提取得到的有效成分綠原酸和熊果酸比傳統的提取工藝轉移率有了很大的提高，而干膏收率普遍比傳統的醇沉工藝有了一定程度的降低，說明夏桑菊提取的有效成分得到了富集，進一步說明了發明本工藝的可行性和先進性。
本發明的優越性在于(1)提高有效成分保留率，去除大部分無效成分，有效成分得到相對富集；(2)替代醇沉工藝，避免大量乙醇的耗用，生產成本和安全風險低；(3)無機陶瓷膜分離效率好，抗污染性強，易于再生清洗。
(4)采用納濾或反滲透膜濃縮為低溫無相變濃縮過程，縮短了濃縮時間，操作方便，能耗低。
下面結合實施例對本發明做進一步的說明。
具體實施例實施例1按夏桑菊處方量(500g∶175g∶80g)，取夏枯草、桑葉和野菊花藥材混合后粉碎過20目篩，加入10倍量水，在100℃下加熱提取2次，每次1.5hr。提取液經3000rpm離心，離心液用截留孔徑0.05μm的氧化鋁陶瓷膜微濾，濾過壓力0.1MPa，收集濾液，經真空減壓濃縮和真空減壓干燥得干膏。膜濾前后干膏得率分別為17.7％和5.2％。
實施例2將與實施例1相同處方比例的藥材混合后粉碎過20目篩，加15倍量的水，在100℃下加熱進行2次提取，每次1.5hr。提取液經900rpm離心，離心液用截留孔徑0.3μm的氧化鋯陶瓷膜微濾，濾過壓力0.5MPa。收集濾液，經過聚砜類復合膜納濾，截留分子量范圍為150～180，濾過壓力2MPa，去除部分水后，濃縮到相對密度為1.05，再經真空減壓干燥得干膏。膜濾前后干膏得率分別為16.6％和5.7％。
實施例3將與實施例1相同處方比例的藥材混合后粉碎過20目篩，加15倍量水后進行2次提取，經1500rpm離心，離心液用0.8μm氧化銻陶瓷膜微濾，濾過壓力1.8MPa，收集濾液，經過聚砜類復合膜納濾，截留分子量范圍為150～180，濾過壓力2.5MPa，流量1m3/hr，去除部分水，濃縮到相對密度1.1，再經真空減壓干燥后得干膏。膜濾前后干膏得率分別為17.3％和5.4％。
實施例4將與實施例1相同處方比例的藥材混合后粉碎過20目篩，加10倍量水，加熱到50℃，在20KHz頻率下超聲強化提取1.5hr。提取液經5000rpm離心，用0.05μm醋酸纖維有機膜微濾，濾過壓力0.2MPa，收集透過液，經過聚醚砜類復合膜納濾，截留分子量范圍為200～400，濾過壓力2.5MPa，流量2m3/hr，濃縮成相對密度為1.1的浸膏，再經真空減壓干燥后得干膏。膜濾前后干膏得率分別為19.5％和6.6％。
實施例5
取與實施例4相同處方比例的藥材和在相同條件進行超聲強化提取，提取液經8000rpm離心，用0.2μm聚四氟乙烯有機膜微濾，濾過壓力0.8MPa，收集透過液，經過聚酰胺復合膜納濾，截留分子量范圍為300～600，濾過壓力3MPa，流量1.5m3/hr，濃縮成相對密度為1.15的浸膏，再經真空減壓干燥后得干膏。膜濾前后干膏得率分別為17.6％和6.5％。
實施例6取與實施例4相同處方比例的藥材和在相同條件進行超聲強化提取，提取液經12000rpm離心，用1μm聚丙烯有機膜微濾，濾過壓力1.2MPa，收集透過液，經過聚酰胺復合膜納濾，截留分子量范圍為500～1000，濾過壓力3.5MPa，流量2.8m3/hr，濃縮成相對密度為1.15的浸膏，再經真空減壓干燥后得干膏。膜濾前后干膏得率分別為18.2％和6.2％。
實施例7取與實施例1相同處方比例的藥材和在相同條件進行加水提取，提取液經15000rpm離心，用0.6μm氧化鋁無機膜微濾，濾過壓力0.5MPa，收集透過液，經過聚哌嗪酰胺復合有機膜納濾，截留分子量范圍為500～1000，濾過壓力4MPa，流量2m3/hr，濃縮成相對密度為1.20的浸膏，再經真空減壓干燥后得干膏。膜濾前后干膏得率分別為18.6％和5.9％。
實施例8取與實施例4相同處方比例的藥材和在相同條件進行超聲強化提取，提取液經4500rpm離心，用0.2μm聚四氟乙烯有機膜微濾，濾過壓力1.5MPa，收集透過液，經過聚砜復合膜反滲透，壓力2.0～2.5MPa，流量1m3/hr，濃縮成相對密度為1.1的浸膏，再經真空減壓干燥后得干膏。膜濾前后干膏得率分別為18.7％和6.7％。
實施例9取與實施例4相同處方比例的藥材和在相同條件進行超聲強化提取，提取液經4500rpm離心，用0.1μm聚四氟乙烯有機膜微濾，濾過壓力0.5MPa，收集透過液，經過醋酸纖維仿生膜反滲透，壓力2.5～3.5MPa，流量2m3/hr，濃縮成相對密度為1.15的浸膏，再經真空減壓干燥后得干膏。膜濾前后干膏得率分別為18.5％和6.6％。
實施例10
取與實施例4相同處方比例的藥材和在相同條件進行超聲強化提取，提取液經3000rpm離心，用0.5μm聚四氟乙烯有機膜微濾，濾過壓力0.2MPa，收集透過液，經過聚酰胺類復合膜反滲透，壓力3.5～4.5MPa，流量2.8m3/hr，濃縮成相對密度為1.20的浸膏，再經真空減壓干燥后得干膏。膜濾前后干膏得率分別為17.9％和6.5％。
實施例11即傳統的醇沉工藝。按夏桑菊處方量(500g∶175g∶80g)，取夏枯草、桑葉和野菊花藥材混合后粉碎過20目篩，加10倍量水溶液，100℃下煎煮1.5小時，煎煮2次，200目篩濾過。合并濾液，濾液濃縮成浸膏，浸膏加入95％乙醇溶液至乙醇濃度為67％，醇沉過夜，濾過，濾液濃縮成浸膏，再經真空減壓干燥后得干膏。醇沉前后干膏得率分別為17.6％和7.8％。
下面通過試驗例說明本發明的有益效果。
試驗例1膜前或膜后干膏處理方法如下取100ml膜前或膜后的提取液，在100℃水浴蒸發到原來體積的1/10，再真空減壓干燥到恒重。分別稱重后，按如下公式計算干膏的得率干膏得率(％)＝干膏重量(g)/藥材重量(g)×100％試驗例2膜過濾工藝的轉移率測定按如下方法進行取干膏適量，甲醇溶解并定容于容量瓶中，取上述膜濾工藝前后得到的夏桑菊提取液和干膏甲醇溶液，用微孔濾膜(0.45μm)過濾后，注入高效液相色譜儀中，以中國藥品生物制品檢定所提供的綠原酸對照品、蘆丁對照品和熊果酸對照品進行外標法定量。膜濾工藝綠原酸、蘆丁和熊果酸的轉移率和其在干膏中含量結果詳見表1和表2。
(1)綠原酸的檢測方法色譜條件Agilent1100高效液相色譜儀(帶自動進樣器、真空脫氣機、四元泵、柱溫箱、二極管陣列檢測器等)，色譜柱Diolisic ODS柱(5μm，4.0×250mm)，流動相乙腈-水-冰乙酸(10∶90∶4)，檢測波長328nm，柱溫30℃，流速1ml/min，進樣量10μl。
(2)熊果酸的檢測方法色譜條件Agilent1100高效液相色譜儀(帶自動進樣器、真空脫氣機、四元泵、柱溫箱、二極管陣列檢測器等)，色譜柱Diolisic ODS柱(5μm，4.0×250mm)，流動相為乙腈-水-冰乙酸(88∶12∶4)，檢測波長215nm，柱溫30℃，流速1ml/min，進樣量10μl。
表1膜濾工藝有效成分轉移率的測試結果
表2膜濾工藝與傳統醇沉干膏得率和含量的測試結果
從表1和表2結果看出，夏桑菊提取液膜工藝有效成分綠原酸和熊果酸的轉移率平均為96.61％和84.39％，普遍比醇沉法的轉移率高，有效成分綠原酸和熊果酸的損失小。而總干膏收率平均為6.13％，比傳統醇沉工藝的干膏收率(7.8％)有所下降，表明膜工藝在去除夏桑菊雜質成分，使有效成分得到一定程度的富集。綜上所述，說明本發明的夏桑菊制劑的膜濾分離工藝，能有效地防止夏桑菊藥材提取液中有效成分在雜質分離過程中損失，有效成分的轉移率較高，雜質去除效果良好，且工藝簡單可行，生產周期短，生產成本和安全風險低，具有產業化推廣實施的價值。
權利要求
1.一種夏桑菊制劑藥材提取液精制的新工藝，所說的夏桑菊制劑藥材提取液是采用夏枯草、桑葉、野菊花三味藥材，用水提取得到的提取液，其特征在于藥材的水提取液經轉速為800～15000轉/分離心0.5～2小時后，取離心清液，通過無機陶瓷膜或/和有機復合膜進行精制分離，所得的濾液通過納濾或反滲透膜濾濃縮成相對密度為1.05～1.2的浸膏。
2.根據權利要求1所述的藥材提取液精制的新工藝，所說的無機陶瓷膜為0.05～1μm孔徑的氧化鋁膜或氧化鋯膜或氧化銻無機陶瓷膜，截留0.05μm以上的粒子，濾過壓力為0.1～2MPa。
3.根據權利要求1所述的藥材提取液精制的新工藝，所說的有機復合膜為0.05～1μm孔徑的聚砜膜或醋酸纖維膜或聚四氟乙烯膜或聚丙烯膜，截留0.05μm以上的粒子，濾過壓力為0.1～2MPa。
4.根據權利要求1所述的藥材提取液精制的新工藝，所說的納濾是采用芳香聚酰胺或聚哌嗪酰胺膜或聚醚砜有機膜，截留分子量150～1000，操作壓力2～4MPa，流量為1～3m3/hr；所說的反滲透膜濾為聚砜膜或聚酰胺膜或聚醋酸纖維仿生膜，反滲透壓力2～5MPa，流量1～3m3/hr。
全文摘要
應用膜分離技術對夏桑菊提取液精制的新工藝。涉及植物提取液的精制分離和濃縮方法，具體涉及制備清肝明目藥物夏桑菊制劑藥材提取液的分離濃縮方法的改進。其方案是取夏枯草、桑葉、野菊花三味中藥按照夏桑菊的處方比例用水提取得到的提取液，經800～15000轉/分離心0.5～2hr后，取離心液在室溫下通過無機陶瓷膜或/和有機復合膜進行精制分離，透過液通過采用納濾或反滲透濃縮成相對密度為1.05～1.2的浸膏。采用本發明的工藝方法，使夏桑菊處方藥材的有效成分綠原酸和熊果酸比傳統的提取工藝轉移率有了很大的提高，提取的有效成分得到了富集。
文檔編號A61P11/04GK1823908SQ20051012131
公開日2006年8月30日 申請日期2005年12月29日 優先權日2005年12月29日
發明者孫維廣, 方鐵錚, 何國熙 申請人:廣州星群(藥業)股份有限公司