專利名稱：注射用鹿瓜多肽藥物組合物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及注射用鹿瓜多肽藥物組合物及其制備方法。更具體地，本發明涉及含有鹿骨多肽和甜瓜子多肽的注射用鹿瓜多肽藥物組合物。本發明還涉及注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備方法。
背景技術：
鹿瓜多肽是用鹿骨和甜瓜子的提取物配制而成，祖國醫學認為，鹿骨味甘、微熱，具有補虛贏、強筋骨，治風濕四肢疼痛及筋骨冷痹的作用，而甜瓜子有散結，消痛等作用，兩者配制用于散寒、祛風濕、鎮痛，因而對風濕性關節炎或類風濕性關節炎有治療作用。
現有技術中已公開了一些有關鹿瓜多肽提取物或其制備工藝。例如，CN1470256A公開了促進骨折愈合和骨關節損傷修復的藥物組合物及其制備方法和應用。該專利申請公開的組合物由鹿骨提取物和甜瓜子提取物與一種或多種醫藥上接受的載體或賦形劑組成的藥物組合物；鹿骨提取物和甜瓜子提取物分別是鹿骨和甜瓜子生藥原料經過提取得到，鹿骨和甜瓜子生藥原料的重量比為1∶4至4∶1。
該專利申請還公開了藥物組合物的制備方法，其包括(1)將新鮮鹿骨經預處理后，在鹿骨(400-100Kg)中加等重量的水，于121℃的溫度下加熱提取3次；合并所得的水提溶液，用2M鹽酸調節PH值調到3.2得到酸沉淀后的提取液；加熱煮沸酸沉淀后的提取液，過濾除去雜質并離心除去酸沉淀；收集濾液和離心上清后，加入氫氧化鈉溶液將PH調到8.5，從而得到所需的鹿骨提取液；(2)在不銹鋼容器內，向清洗后甜瓜子(100-400Kg)中加等重量的水，于121℃的溫度下加熱提取3次；合并水提溶液，用2M鹽酸調節PH值調到3.2；加熱煮沸酸沉淀后的提取液，離心除去酸沉淀物；收集離心上清后，加入氫氧化鈉液PH調到8.3，從而得到所需的甜瓜子提取液；(3)混合步驟(1)和(2)得到的鹿骨提取液和甜瓜子提取液，加熱濃縮至原體積的1/3。將該濃縮液的PH調到7.2后，依次使用截流分子量為10,000和8,000的中空纖維柱進行超濾處理，得到的混合液與一種或多種醫藥上接受的載體或賦形劑制成藥物組合物。
此外，CN1579542A公開了一種注射用鹿瓜多肽及其制備工藝。該鹿瓜多肽包括多肽類物質和賦形劑，其中多肽類物質是從鹿科動物骨骼和葫蘆科植物甜瓜種子中提取而成，其重量份數為多肽類物質5-100，賦形劑20-90，多肽類物質分子量為3000-10000道爾頓，PH值為3.5-9.0。
該專利申請還公開了鹿瓜多肽的制備工藝，包括(1)按重量分數取鹿骨17500-63000，加3-8倍量的注射用水，熱壓(80-120℃)提取2-4次。合并提取液，調PH值至3.5-4.5，去沉渣，上清液調堿性PH值至8.5-9.0，去沉渣，上清液調中性PH后，用超濾膜超濾，相對截留分子量為3000-10000道爾頓，從制成鹿骨提取液；(2)按重量分數取甜瓜子3000-10000，加3-8倍量的注射用水，熱壓(80-120℃)提取2-4次，合并提取液，去沉渣，超濾，相對截留分子量為3000-10000道爾頓，制成甜瓜子提取液；(3)將步驟(1)和(2)的鹿骨和甜瓜子提取液按1-10∶1比例混合，得到鹿瓜多肽溶液；(4)取鹿瓜多肽溶液，加入賦型劑(甘露醇、聚乙二醇、葡聚糖、乳糖、甘氨酸及膠體物質)水溶液，冷凍干燥得到類白色塊狀物或無定形粉末。
上述技術是以生藥原料重量比為配方組成的提取物及其制備方法，由于生藥原料鹿骨和甜瓜子存在產地和采集期上的差異，所含有的有效成份差異較大，以生藥原料重量比作配方，很難保證生產的每批鹿瓜多肽提取液的有效成份含量一致，從而無法保證所生產的藥物質量。
同時，由于很難做到每批提取條件的完全一致，因此即使同一產地、采集期的生藥所提有效成份也存在差異，以生藥原料重量比為配方組成，很難保證鹿瓜多肽每批制劑的多肽含量一致。
上述技術分別采用8,000的中空纖維柱進行超濾技術或采用10,000超濾膜超濾技術，不能有效去除提取液中的高分子量物質(在藥品生產中，分子量大于5800的物質稱為高分子量物質)，極易引起變態反應。
鹿骨和甜瓜子提取物含有多種游離氨基酸，其為骨細胞合成BMPs、TGF-β、FGF等骨源性生物因子提供原料，促進骨源性生物因子的合成。但大多數氨基酸在堿性溶液中易析出，而上述技術在提取過程中均采用堿性的pH值，均與國家藥品標準不符。
因此，現有技術中迫切需要提供一種有效成份保持穩定的注射用鹿瓜多肽以及相應簡化的生產工藝，注射用鹿瓜多肽可以由不同產地和不同采集期的鹿骨和甜瓜子為原料，并且產品質量不受提取工藝條件影響，安全有效，符合國家有關藥品生產標準。
發明內容
本發明經過多年努力研究和探索，解決了上述需求，完成了本發明。
本發明提供一種注射用鹿瓜多肽藥物組合物，它含有鹿骨提取物、甜瓜子提取物和一種或多種賦形劑，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至6∶1。
本發明還提供一種注射用鹿瓜多肽藥物組合物，它由如下制備方法制備，該方法包括如下步驟A)鹿骨提取物溶液的制備(1)鹿骨預處理；(2)將預處理后的凈鹿骨粉碎；(3)在碎鹿骨中加2倍重量以上的注射用水，121℃熱壓提取濾出獲得一次鹿骨提取液；(4)在一次提取后的鹿骨渣中加入2倍以上重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取，濾出獲得二次鹿骨提取液，與步驟(3)獲得的一次鹿骨提取液合并制成鹿骨提取液；(5)將鹿骨提取液離心，收集上清離心液；(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至總體積的10％，收取濃縮液，制得鹿骨提取物溶液；B)甜瓜子提取物溶液的制備
(1)將干燥成熟甜瓜子漂洗干凈；(2)在凈甜瓜子中加入2倍以上重量的注射用水，用膠體磨研磨成甜瓜子勻漿；(3)將甜瓜子勻漿在121℃熱壓提取，濾出一次甜瓜子提取液；(4)在一次提取后的甜瓜子渣中加入2倍以上重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取，濾出二次甜瓜子提取液，與步驟(3)獲得的一次甜瓜子提取液合并制成甜瓜子提取液；(5)將甜瓜子提取液離心，收集上清離心液(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至原體積的10％，收取濃縮液，制得甜瓜子提取物溶液；C)注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備混合步驟A)制備的鹿骨提取物溶液和步驟B)制備的甜瓜子提取物溶液和一種或多種賦形劑制備藥物組合物，通過冷凍干燥技術制成凍干粉針，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至6∶1。
本發明還提供一種注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備方法，其包括如下步驟A)鹿骨提取物溶液的制備(1)鹿骨預處理；(2)將預處理后的凈鹿骨粉碎；(3)在碎鹿骨中加2倍以上重量的注射用水，121℃熱壓提取濾出獲得一次鹿骨提取液；(4)在一次提取后的鹿骨渣中加入2倍以上重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取，濾出獲得二次鹿骨提取液，與步驟(3)獲得的一次鹿骨提取液合并制成鹿骨提取液；(5)將鹿骨提取液離心，收集上清離心液；(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至總體積的10％，收取濃縮液，制得鹿骨提取物溶液；B)甜瓜子提取物溶液的制備
(1)將干燥成熟甜瓜子漂洗干凈；(2)在凈甜瓜子中加入2倍以上重量的注射用水，用膠體磨研磨成甜瓜子勻漿；(3)將甜瓜子勻漿在121℃熱壓提取，濾出一次甜瓜子提取液；(4)在一次提取后的甜瓜子渣中加入2倍以上重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取，濾出二次甜瓜子提取液，與步驟(3)獲得的一次甜瓜子提取液合并制成甜瓜子提取液；(5)將甜瓜子提取液離心，收集上清離心液；(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至原體積的10％，收取濃縮液，制得甜瓜子提取物溶液；C)注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備混合步驟A)制備的鹿骨提取物溶液和步驟B)制備的甜瓜子提取物溶液和一種或多種賦形劑制備藥物組合物，通過冷凍干燥技術制成凍干粉針，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至6∶1。
作為用于本發明的藥物組合物中鹿骨提取物和甜瓜子提取物的原料，使用鹿科動物，尤其是梅花鹿(Cervus nippon Temmick)的骨骼和葫蘆科植物甜瓜(Cucumis melo L.)的干燥成熟種子，經分別提取后混合，并與一種或多種賦形劑混合制成本發明的藥物組合物。
根據本發明的優選實施方案，在注射用鹿瓜多肽藥物組合物中，鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至4∶1。
用作本發明的藥物組合物的賦形劑可以是右旋糖酐40、葡萄糖、乳糖、聚乙二醇、葡聚糖、甘氨酸等，考慮到對最終產品中多肽含量檢測的影響，其中優選的賦形劑為右旋糖酐40、葡萄糖或乳糖。多肽總量與賦型劑重量比應為1∶5～30。
本發明的注射用鹿瓜多肽藥物組合物可用于治療風濕、類風濕性關節炎、強直性脊柱炎、各種類型骨折、創傷修復及腰腿疼痛等疾病或癥狀。
雖然不打算受此限制，但我們認為，本發明的藥物組合物中的鹿骨多肽是由鹿骨提取的，其中的骨誘導多肽類生物因子可有效促進機體內影響骨形成和吸收的骨源性生長因子的合成，包括骨形態發生蛋白(BMPs)，β-轉化生長因子(TGF-β)，成纖維細胞生長因子(FGF)等，從而具有多種生物活性。其主要藥理作用有促進細胞有絲分裂、分化作用、趨化作用和溶骨活性。其中BMPs是一組酸性低分子量糖蛋白，作為一種高效骨誘導物質，BMPs是間充質細胞向骨系細胞分化的最初信號因子，能誘導血管周圍游動的間充質細胞轉化為不可逆性的骨系細胞，即軟骨細胞和成骨細胞，從而促進骨痂形成，誘導新骨形成，促進骨折修復；此外，BMPs還可調節細胞外基質成份的改變，并通過與TGF-β和FGF相互之間的協調作用更好地誘導新骨形成，使骨組織更成熟。TGF-β則是一族具有多種功能的蛋白多肽，對成骨細胞及成軟骨細胞有促進分化或降低分化的雙重調節作用，與多種因子如細胞外基質和其他分化調節生長因子一起協同參與對細胞分化的調節；TGF-β可促進細胞外基質合成，可以直接刺激成纖維細胞外基質的合成，并對其新合成的基質降解有顯著抑制作用；對于成骨細胞，TGF-β可促進其合成I型膠原、骨粘連素和骨橋蛋白；同時，TGF-β對淋巴細胞和巨噬細胞的作用表明，它既能緩解炎性反應的破壞性，又能協助巨噬細胞來源的某些細胞因子在細胞組織修復中發揮作用。FGF是一組肝素黏合多肽，可刺激細胞的趨向移動，增值和分化，增加合成膠原細胞的數量，促進骨膠原蛋白及非膠原蛋白的合成，增加骨鈣素的合成。
本發明的藥物組合物中的甜瓜子多肽提取物是從葫蘆科植物甜瓜的成熟干燥的種子提取的，能降低骨折局部毛細血管通透性，減少炎性滲出，促進局部血運障礙的恢復；同時還能降低全血黏度及紅細胞聚集程度，改善骨痂局部的血液循環，為骨細胞提供一個良好的供血環境；另外還能抑制前列腺素的釋放，達到止痛效果；在促進骨折早期愈合中，甜瓜子提取物與補充的骨誘導多肽生物因子具有協同作用，促進骨源性生長因子的合成。
此外，本發明的注射用鹿骨多肽藥物組合物富含多種游離氨基酸，為骨細胞合成BMPs、TGF-β、FGF等骨源性生物因子提供原料，促進骨源性生物因子的合成，有機鈣、磷離子可參與鈣磷代謝、維持骨容量。因而可有效治療風濕、類風濕性關節炎、強直性脊柱炎、各種類型骨折、創傷修復及腰腿疼痛等疾病或癥狀。
本發明的注射用鹿瓜多肽藥物組合物的劑量為在用于肌肉注射時，一次4-8mg，日劑量為8-16mg，用適量注射用水溶解稀釋后肌肉注射；在用于靜脈注射時，每日16-24mg，用5％葡萄糖注射液或0.9％氯化鈉注射液250-500ml溶解稀釋后靜脈滴注。準確劑量將由臨床醫生根據患者的年齡、體重、所治療的癥狀、患者身體狀況等因素確定，一般10-15日為一療程。本發明的鹿瓜多肽藥物組合物的包裝規格有4mg、8mg、16mg、24mg。
在本發明更具體的實施方案中，其提供一種注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備方法，其包括如下步驟A)鹿骨提取物溶液的制備(1)鹿骨在沸水中煮沸30分鐘后，除去筋膜及殘肉，完成預處理；(2)將預處理后的凈鹿骨粉碎至1cm以下的碎骨；(3)在碎鹿骨中加2倍重量的注射用水，121℃熱壓提取2小時，濾出獲得一次鹿骨提取液；(4)在一次提取后的鹿骨渣中加入2倍重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取2小時，濾出獲得二次鹿骨提取液，與步驟(3)獲得的一次鹿骨提取液合并制成鹿骨提取液，放置過夜；(5)將鹿骨提取液以4000轉/分鐘離心15分鐘，收集上清離心液；(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至總體積的10％，收取濃縮液，用0.22μm濾膜過濾，制得鹿骨提取物溶液；B)甜瓜子提取物溶液的制備(1)將干燥成熟甜瓜子用注射用水漂洗3-4次；(2)在凈甜瓜子中加入2倍重量的注射用水，用膠體磨研磨成甜瓜子勻漿；(3)將甜瓜子勻漿在121℃熱壓提取2小時，濾出一次甜瓜子提取液；(4)在一次提取后的甜瓜子渣中加入2倍重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取2小時，濾出二次甜瓜子提取液，與步驟(3)獲得的一次甜瓜子提取液合并制成甜瓜子提取液；(5)將甜瓜子提取液以4000轉/分鐘離心15分鐘，收集上清離心液；
(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至原體積的10％，收取濃縮液，用0.22μm濾膜過濾，制得甜瓜子提取物溶液；C)注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備混合步驟A)制備的鹿骨提取物溶液和步驟B)制備的甜瓜子提取物溶液和一種或多種賦形劑制備藥物組合物，通過冷凍干燥技術制成凍干粉針，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至4∶1，賦形劑選自右旋糖酐40、葡萄糖或乳糖，多肽總量與賦型劑重量比為1∶5-30。
步驟C)的制備藥物組合物的方法是制藥技術領域中已知的方法，本領域技術人員將根據所制備的劑型和選擇的賦形劑選取準確的具體工藝方法和條件。
如上所述，本發明提供的注射用鹿瓜多肽藥物組合物及其制備方法具有如下優點(1)以鹿骨多肽和甜瓜子多肽為計算單位，可以保證每批制劑多肽含量一致，批次差異可降至最低，保證產品質量；(2)以鹿骨多肽和甜瓜子多肽為計算單位，避免了產地、采集期、提取條件差異所出現的最終產品含量差異；(3)預先粉碎鹿骨和制備甜瓜子勻漿，提高熱壓提取鹿骨多肽和甜瓜子多肽的提取率；(4)采用純粹的熱壓提取方法，避免酸或堿處理，提高有效成份的提取率；(5)采用分級超濾的方法，可有效去除提取物中存在的分子量超過5800的高分子量物質，將變態反應的可能性降至最低，提高了產品質量穩定性；(6)采用右旋糖酐40、葡萄糖或乳糖為賦型劑，能夠避免對多肽含量檢測所帶來的影響。
附圖簡要說明附
圖1是本發明制備鹿瓜多肽藥物組合物的工藝流程示意圖。
具體實施例方式
本發明將借助如下實施例具體說明本發明的技術方案，應理解的是，在說明書上下文中的具體說明并不構成對本發明的限制。本發明的保護范圍由權利要求說明。
實施例實施例1鹿骨提取物溶液的制備將鹿骨置于沸水中煮沸30min，取出，剔除筋膜及殘肉，得凈鹿骨。取凈鹿骨，粉碎至小于1cm的碎骨備用。取碎骨30kg，加入60kg注射用水，在121℃熱壓提取2h，濾出一次提取液；再加入60kg注射用水，121℃熱壓提取2h，濾出二次提取液，合并濾液，放置過夜。取鹿骨提取液，離心(4000轉/分鐘、15分鐘)，取上清，棄沉淀。取上清液，進行分級超濾，100KD、10KD、6KD，每次取濾過液，棄濃縮液。取濾過液，減壓濃縮至總體積的10％，收取濃縮液，調節PH值6.0-6.5，0.22μm濾膜除菌過濾，得鹿骨提取物溶液10L。
經高效液相色譜法、福林酚法測定，存在鹿骨多肽，其含量為6.1mg/ml。
實施例2甜瓜子提取物溶液的制備取甜瓜子，置注射用水中，反復漂洗3-4次，空干水份，挑出雜物，得凈甜瓜子備用。取凈甜瓜子15kg，加30kg注射用水，用膠體磨研磨成甜瓜子勻漿。取甜瓜子勻漿，121℃熱壓提取2h，濾出一次提取液；再加入30kg注射用水，121℃℃熱壓繼續提取2h，濾出二次提取液，合并濾液，放置過夜。取甜瓜子提取液，離心(4000轉/分鐘、15分鐘)，取上清，棄沉淀。取上清液，進行分級超濾100KD、10KD、6KD，每次取濾過液，棄濃縮液。取最終濾過液，減壓濃縮至總體積的10％，收取濃縮液，調節PH值6.0-6.5，0.22μm濾膜除菌過濾，得甜瓜子提取物溶液約5L。
經分光光度法、福林酚法測定，存在甜瓜子多肽，其含量為4.2mg/ml。
實施例3藥物組合物1
制劑處方實施例1的鹿骨提取物溶液26.7g(按鹿骨多肽計)實施例2的甜瓜子提取物溶液 13.3g(按甜瓜子多肽計)20％賦型劑溶液 5000ml5％NaOH(或5％HCl) 適量注射用水 加至20000ml將實施例1制備的鹿骨提取物溶液和實施例2制備的甜瓜子提取物溶液按鹿骨多肽與甜瓜子多肽重量比2∶1比例混合，加入5000ml賦形劑(右旋糖酐40、葡萄糖或乳糖)溶液，用適量5％NaOH或5％HCl調測溶液PH值至5.5-7.0后，補加注射用水至全量，通過罐裝、凍干、軋蓋等步驟，制成每支4mg的制劑。
實施例4藥物組合物2制劑處方實施例1的鹿骨提取物溶液 30g(按鹿骨多肽計)實施例2的甜瓜子提取物溶液 10g(按甜瓜子多肽計)20％賦型劑溶液 5000ml5％NaOH(或5％HCl) 適量注射用水加至20000ml除鹿骨提取物和甜瓜子提取物的用量不同外，藥物組合物如實施例3中所述制備，通過罐裝、凍干、軋蓋等步驟，制成每支4mg的制劑。
實施例5藥物組合物3制劑處方實施例1的鹿骨提取物溶液 53.4g(按鹿骨多肽計)實施例2的甜瓜子提取物溶液 26.6g(按甜瓜子多肽計)20％右旋糖酐40溶液 10000ml5％NaOH(或5％HCl) 適量注射用水加至40000ml除鹿骨提取物和甜瓜子提取物的用量不同外，藥物組合物如實施例3中所述制備，通過罐裝、凍干、軋蓋等步驟，制成每支8mg的制劑。
實施例 6藥物組合物4制劑處方實施例1的鹿骨提取物溶液64g(按鹿骨多肽計)實施例2的甜瓜子提取物溶液 16g(按甜瓜子多肽計)20％右旋糖酐40溶液 10000ml5％NaOH(或5％HCl) 適量注射用水 加至40000ml除鹿骨提取物和甜瓜子提取物的用量不同外，藥物組合物如實施例3中所述制備，通過罐裝、凍干、軋蓋等步驟，制成每支8mg制劑。
實施例7制劑有效成份測定1、多肽有效成份確定(1)取樣實施例3的制劑，加水制成每1ml中含多肽類物質2mg的溶液，取2ml，加茚三銅試液1ml，加熱，應顯藍紫色。
(2)根據《中國藥典2000年版二部附錄IVA》中所述的方法，用實施例3的制劑加水制成每1ml中含多肽類物質2mg的溶液，取2ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，照分光光度法測定，在258nm的波長處有最大吸收。
如上結果說明，實施例3制劑的最大吸收鑒別項成立。
2、高分子量物質含量測定按照《中國藥典2000年版二部附錄VD》中規定的高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適用性試驗用凝膠色譜柱(TSKgelG2000SW 7.8mm×300mm，5μm)；流動相為三氟醋酸-乙腈-水(0.05∶10∶90)；檢測波長為214nm。理論板數按胰島素峰計算不得低于3000。
對照品溶液的制備取胰島素對照品(分子量5800)適量，加流動相制成每1ml中含1mg的溶液，作為對照品溶液。
測試溶液的制備在實施例3的制劑中加流動相制成每1ml中含多肽1mg的溶液，作為測試溶液。
測定法取對照品溶液和測試溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，將先于胰島素峰保留時間的峰視為高分子量物質，按面積歸一化法計算，結果顯示，測試溶液的高分子物質含量低于2.0％。
3、氨基酸含量測定用高效液相色譜分別鑒別并定量實施例5制劑中所含游離氨基酸，結果見表A。
表A注射用鹿瓜多肽游離氨基酸檢查結果
如上結果顯示，注射用鹿瓜多肽制劑含有18種游離氨基酸。
實施例8生產注射用鹿瓜多肽中各批之間多肽總量的差異本實施例說明在每批投入相同的生藥原料，以相同的工藝方法制備多肽提取物時，每批提取物中多肽總量的差異。
用實施例1的方法，投入相同重量的鹿骨，制備鹿骨提取物，其鹿骨多肽總量顯示于如下表格B中。
表B鹿骨提取物溶液成份分析
用實施例2的方法，投入相同重量的甜瓜子，制備甜瓜子提取物，其甜瓜子多肽總量顯示于如下表格C中。
表C甜瓜子提取物溶液成份分析
由表B結果可知，每批投入150Kg鹿骨，鹿骨多肽最大提取量與最小量差異達131g；由表C結果可知，每批投入50Kg甜瓜子，甜瓜子多肽最大提取量與最小量差異達29.2g。
此實施例說明，若按照背景技術用生藥重量比進行生產，不僅批間含量很大，而且最終注射用鹿瓜多肽產品中鹿骨多肽與甜瓜子多肽也無確切比例。這就說明，唯有用各自提取物中的鹿骨多肽和甜瓜子多肽有效成份的重量比控制生產注射用鹿瓜多肽藥物組合物，才能夠保證最終制劑的含量差異最小。如下表D說明用實施例5的方法制備的規格為8mg/支的不同批制劑間有效成份含量說明。
表D注射用鹿瓜多肽
如上表數據可以看出，本發明的方法可制備有效成份穩定的制劑，保證了產品質量，符合國家藥品標準。
實施例9本發明的制劑治療風濕、類風濕性關節炎的效果從住院病人中隨機選擇風濕性關節炎21例、類風濕性關節炎8例；臨床檢查血沉、抗“0”、血中白細胞數、類風濕性因子。
治療方法用實施例6的制劑，劑量為每天用注射用鹿瓜多肽16-24mg，用0.9％氯化鈉注射液250-500ml溶解稀釋后靜脈滴注，15日為一療程，共治療2個療程，治療期間停用其它療法和藥物。
療效判斷標準1.顯效關節疼痛及腫脹消失，運動自如無不適感，各項檢查均恢復正常者。
2.有效關節疼痛及腫脹基本消失，但運動尚感不適，或有1～2項檢查未恢復正常者。
3.無效臨床癥狀與治療前無明顯改善者。
治療效果顯示于如下表E中。
表E本品治療風濕、類風濕性關節炎臨床療效
表E的結果顯示，本發明的制劑對治療風濕、類風濕性關節炎具有顯著的治療作用。
實施例10本發明制劑對促進骨折愈合的結果隨機選擇四肢閉合性骨折57例，隨機分成治療組42例，對照組15例。
患者入院后均采用牽引、復位、固定等常規方法，并給予抗生素3天以預防感染。同時對照組給予常規用藥，治療組給予實施例5的注射用鹿瓜多肽16-24mg，用0.9％氯化鈉注射液250-500ml溶解稀釋后靜脈滴注，15日為一療程。
觀察用藥后兩組患者腫脹消退時間、疼痛減弱時間、骨痂形成時間、骨折愈合時間。結果顯示于表F中。
療效統計表F本發明制劑對消腫、減痛、促進骨折愈合的臨床效果
表F表明，注射用鹿瓜多肽制劑具有顯著的減緩疼痛、消除腫脹、促進骨折愈合的作用。
權利要求
1.一種注射用鹿瓜多肽藥物組合物，它含有鹿骨提取物、甜瓜子提取物和一種或多種賦形劑組成，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至6∶1。
2.權利要求1所述的注射用鹿瓜多肽藥物組合物，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至4∶1。
3.權利要求1或2所述的注射用鹿瓜多肽藥物組合物，其中所述賦形劑選自右旋糖酐40、葡萄糖或乳糖。
4.一種注射用鹿瓜多肽藥物組合物，它由如下制備方法制備，該方法包括如下步驟A)鹿骨提取物溶液的制備(1)鹿骨預處理；(2)將預處理后的凈鹿骨粉碎；(3)在碎鹿骨中加2倍重量以上的注射用水，121℃熱壓提取濾出獲得一次鹿骨提取液；(4)在一次提取后的鹿骨渣中加入2倍以上重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取，濾出獲得二次鹿骨提取液，與步驟(3)獲得的一次鹿骨提取液合并制成鹿骨提取液；(5)將鹿骨提取液離心，收集上清離心液；(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至總體積的10％，收取濃縮液，制得鹿骨提取物溶液；B)甜瓜子提取物溶液的制備(1)將干燥成熟甜瓜子漂洗干凈；(2)在凈甜瓜子中加入2倍以上重量的注射用水，用膠體磨研磨成甜瓜子勻漿；(3)將甜瓜子勻漿在121℃熱壓提取，濾出一次甜瓜子提取液；(4)在一次提取后的甜瓜子渣中加入2倍以上重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取，濾出二次甜瓜子提取液，與步驟(3)獲得的一次甜瓜子提取液合并制成甜瓜子提取液；(5)將甜瓜子提取液離心，收集上清離心液(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至原體積的10％，收取濃縮液，制得甜瓜子提取物溶液；C)注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備混合步驟A)制備的鹿骨提取物溶液和步驟B)制備的甜瓜子提取物溶液和一種或多種賦形劑制備藥物組合物，通過冷凍干燥技術制成凍干粉針，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至6∶1。
5.權利要求4所述的注射用鹿瓜多肽藥物組合物，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至4∶1。
6.權利要求4或5所述的注射用鹿瓜多肽藥物組合物，其中所述賦形劑選自右旋糖酐40、葡萄糖或乳糖。
7.一種注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備方法，其包括如下步驟A)鹿骨提取物溶液的制備(1)鹿骨預處理；(2)將預處理后的凈鹿骨粉碎；(3)在碎鹿骨中加2倍以上重量的注射用水，121℃熱壓提取濾出獲得一次鹿骨提取液；(4)在一次提取后的鹿骨渣中加入2倍以上重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取，濾出獲得二次鹿骨提取液，與步驟(3)獲得的一次鹿骨提取液合并制成鹿骨提取液；(5)將鹿骨提取液離心，收集上清離心液；(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至總體積的10％，收取濃縮液，制得鹿骨提取物溶液；B)甜瓜子提取物溶液的制備(1)將干燥成熟甜瓜子漂洗干凈；(2)在凈甜瓜子中加入2倍以上重量的注射用水，用膠體磨研磨成甜瓜子勻漿；(3)將甜瓜子勻漿在121℃熱壓提取，濾出一次甜瓜子提取液；(4)在一次提取后的甜瓜子渣中加入2倍以上重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取，濾出二次甜瓜子提取液，與步驟(3)獲得的一次甜瓜子提取液合并制成甜瓜子提取液；(5)將甜瓜子提取液離心，收集上清離心液；(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至原體積的10％，收取濃縮液，制得甜瓜子提取物溶液；C)注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備混合步驟A)制備的鹿骨提取物溶液和步驟B)制備的甜瓜子提取物溶液和一種或多種賦形劑制備藥物組合物，通過冷凍干燥技術制成凍干粉針，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至6∶1。
8.權利要求7所述的制備方法，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至4∶1。
9.權利要求7或8所述的制備方法，其中賦形劑選自右旋糖酐40、葡萄糖或乳糖。
10.一種注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備方法，其包括如下步驟A)鹿骨提取物溶液的制備(1)鹿骨在沸水中煮沸30分鐘后，除去筋膜及殘肉，完成預處理；(2)將預處理后的凈鹿骨粉碎至1cm以下的碎骨；(3)在碎鹿骨中加2倍重量的注射用水，121℃熱壓提取2小時，濾出獲得一次鹿骨提取液；(4)在一次提取后的鹿骨渣中加入2倍重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取2小時，濾出獲得二次鹿骨提取液，與步驟(3)獲得的一次鹿骨提取液合并制成鹿骨提取液，放置過夜；(5)將鹿骨提取液以4000轉/分鐘離心15分鐘，收集上清離心液；(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至總體積的10％，收取濃縮液，用0.22μm濾膜過濾，制得鹿骨提取物溶液；B)甜瓜子提取物溶液的制備(1)將干燥成熟甜瓜子用注射用水漂洗3-4次；(2)在凈甜瓜子中加入2倍重量的注射用水，用膠體磨研磨成甜瓜子勻漿；(3)將甜瓜子勻漿在121℃熱壓提取2小時，濾出一次甜瓜子提取液；(4)在一次提取后的甜瓜子渣中加入2倍重量注射用水，繼續在121℃-123℃熱壓提取2小時，濾出二次甜瓜子提取液，與步驟(3)獲得的一次甜瓜子提取液合并制成甜瓜子提取液；(5)將甜瓜子提取液以4000轉/分鐘離心15分鐘，收集上清離心液；(6)將離心液分別進行100KD、10KD、6KD超濾，收集濾出液，減壓濃縮至原體積的10％，收取濃縮液，用0.22μm濾膜過濾，制得甜瓜子提取物溶液；C)注射用鹿瓜多肽藥物組合物的制備混合步驟A)制備的鹿骨提取物溶液和步驟B)制備的甜瓜子提取物溶液和一種或多種賦形劑制備藥物組合物，通過冷凍干燥技術制成凍干粉針，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至4∶1，賦形劑選自右旋糖酐40、葡萄糖或乳糖，多肽總量與賦形劑的重量比為1∶5-30。
全文摘要
本發明公開了一種注射用鹿瓜多肽藥物組合物，它含有鹿骨提取物、甜瓜子提取物和一種或多種賦形劑組成，其中鹿骨多肽與甜瓜子多肽的重量比為2∶1至6∶1。本發明還公開了用本發明的方法制備的注射用鹿瓜多肽藥物組合物，以及制備注射用鹿瓜多肽藥物組合物的方法。本發明的制劑可以用不同產地和不同采集期的鹿骨和甜瓜子為原料，產品質量不受提取工藝條件影響，安全有效，符合國家有關藥品標準。
文檔編號A61K38/16GK1742778SQ20051010815
公開日2006年3月8日 申請日期2005年10月9日 優先權日2005年10月9日
發明者王金富 申請人:黑龍江迪龍制藥有限公司