專利名稱：腸三葉因子口服制劑及其臨床應用的制作方法
技術領域：
本發明屬於含蛋白質材料的醫藥配制品，特別涉及含有特異生長因子-腸三葉因子(簡稱ITF，以下同)的一種生物醫藥配制品。
背景技術：
胃腸消化道是食物和水通向體內的走廊，經常受到機械性和化學性(特別是強酸和強堿物質)的沖擊，并時常受到其它有害或有毒物質的攻擊，同其它器官相比受損機會更多。現代醫學研究表明，胃腸道對缺血缺氧性損傷非常敏感，在各種病理條件下胃腸道是機體最易受損害的器官之一。因此，如何減輕胃腸損傷，促進損傷修復就顯得格外重要。目前臨床上使用的胃腸保護藥物如硫糖鋁、甲氰咪瓜、雷尼替丁以及四君子湯等雖有一定療效，但大多缺乏特異性，屬于被動保護，其療效不理想。經過多年研究發現，生長激素、各類生長因子和胃腸肽等對腸粘膜具有保護作用，能促進受損腸粘膜修復。但它們大多無特異性，除了促進腸粘膜增殖、修復外，也影響其它細胞功能，如生長激素可干擾糖代謝，促進糖異生，這限制了它在糖尿病患者和嚴重創傷病人中的應用，又如成纖維生長因子、胰島素樣生長因子等具有促進細菌耐藥基因表達和促進腫瘤細胞生長的副作用。總之，目前用上述藥物前體制備的生物醫藥配制品在治療消化道疾病上存在諸多缺陷。
發明內容
本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種以新型的特異保護腸道的生長因子-腸三葉因子為藥效活性組分的口服制劑，使之在臨床上用于胃腸道缺血缺氧性損傷的治療，療效好，副作用小。
本發明所采用的技術方案如下一種腸三葉因子口服制劑，其特征在于所用原料及它們的重量百分配比為腸三葉因子0.0001～0.1，腸三葉因子激活劑0.1～1，腸三葉因子保護劑0.1～1，粘合劑5～10，潤滑劑0.2～1，矯味劑0.5～1，著色劑0.5～1，賦型劑平衡至100。
所說的腸三葉因子指的是鼠腸三葉因子(mITF)、牛腸三葉因子(cITF)、人腸三葉因子(hITF)或基因工程重組表達的上述三種腸三葉因子，任選其中一種。
所說的腸三葉因子激活劑指的是硫糖鋁或羥脯氨酰纖維素。
所說的腸三葉因子保護劑指的是復合氨基酸、維生素、多糖或金屬離子磷酸鹽，任選其中一種。
所說的粘合劑通常用阿拉伯膠或明膠；所說的潤滑劑通常用硬脂酸鎂或聚乙二醇(PEG)；所說的矯味劑通常用甜菊甙、薄荷腦或檸檬酸，任選其中一種；所說的著色劑通常用綠色不溶性食用色素；所說的賦型劑通常用乳糖或蔗糖。
本發明腸三葉因子口服制劑，指的是藥劑學上所說的顆粒劑、片劑、膠囊劑、糖漿劑、混懸劑、乳劑或散劑中的任何一種制劑品。
本發明的腸三葉因子口服制劑，其藥效活性組分是ITF。ITF是小分子蛋白，由59個氨基酸殘基構成，分子量約6～7kD；ITF包含一個特殊的保守序列，由38～39個氨基酸殘基組成，其中有6個半胱氨酸；第1、5，2、4，3、6個半胱氨酸形成3個二硫鍵，從而產生特異而穩定的三葉結構。這種穩定的結構確保其在腸道中發揮活性，不受消化酶和PH變化的影響。ITF為腸道環狀細胞分泌的特殊生長因子，體內其他組織中幾乎不存在ITF，因此它具體腸道專一性。ITF與其他生長因子比較，它不僅能促進腸上皮細胞增殖，還能同腸粘液中的粘蛋白結合，穩定腸粘液層，這是ITF有別于其他生長因子，在其治療消化道潰瘍上優于其他生長因子的藥理基礎。
下面就本發明腸三葉因子口服制劑的藥效活性組分ITF原料來源和動物試驗做進一步說明。
1.藥效活性組分ITF原料來源來源一從動物腸道提取ITF，主要可取材于小鼠、大鼠或小牛的腸道，經分離純化得鼠腸三葉因子(mITF)和牛腸三葉因子(cITF)。
來源二從人胎糞中提取純化人腸三葉因子(hITF)。
來源三基因工程重組表達的上述三類腸三葉因子。
上述來源已有文獻報道，純度在95％，不同來源的腸三葉因子對藥效沒有明顯差異。
2.動物試驗采用30％體表面積III度燒傷大鼠模型，觀察燒傷后大鼠腸道受損情況，及使用ITF和表皮生長因子(以下簡稱EGF)后對動物腸粘膜損傷程度和修復速率的影響。燒傷模型制作大鼠傷前禁食12小時，1％戊巴比妥鈉(40mg/kg)腹腔麻醉，背部電推剃毛，后置剃毛區于92℃水浴中18秒，造成30％TBSAIII度燒傷。傷后按40ml/kg腹腔注入乳酸林格氏液抗休克。ITF組大鼠每天使用重組表達的人腸三葉因子10μg/kg，EGF組使用同等劑量的重組人EGF，其他治療措施與燒傷對照組相同，觀察燒傷1、3、5、7天腸粘膜受損和修復情況。
(1)燒傷后大鼠腸粘膜損傷指數的變化在光鏡下腸粘膜損傷情況，采用Ogura記分法，分值越高表示損傷越重。燒傷后腸粘膜廣泛受損，損傷指數大幅上升，和燒傷對照組相比，ITF組和EGF組在燒傷后3～7天腸粘膜損傷程度明顯減輕(P＜0.01)，ITF和EGF兩組間未見顯著差異(P＞0.05)。
表1燒傷大鼠腸粘膜損傷指數的變化(n＝8)
注與正常對照組比較**p＜0.01；與燒傷對照組比較ΔΔp＜0.01(2)燒傷大鼠血漿二胺氧化酶(DAO)活性的改變DAO活性是反應腸粘膜損傷敏感的酶學指標，酶活性越高標明腸粘膜損傷越重。結果顯示，DAO在傷后第1天就達峰值，后有逐漸降低的趨勢，至傷后7天仍明顯高于傷前，同燒傷對照組相比，ITF組和EGF組大鼠血漿DAO活性在傷后1～7天均明顯降低(P＜0.05～0.01)，ITF和EGF兩組間未見顯著差異(P＞0.05)。
表2燒傷大鼠血漿二胺氧化酶(DAO)活性的改變(U/ml，n＝8)
注與正常對照組比較**p＜0.01；與燒傷對照組比較Δp＜0.05，ΔΔp＜0.01
(3)燒傷大鼠腸粘膜厚度的變化光鏡下觀察發現，燒傷后腸粘膜受損嚴重。隨著病程進展，腸粘膜有變薄的趨勢，從傷后第3天開始粘膜厚度明顯低于傷前，ITF組和EGF組大鼠腸粘膜變薄的程度低于燒傷對照組(P＜0.05～0.01)。ITF組腸粘膜較EGF組厚，但兩組無顯著差異(P＞0.05)。
表3燒傷大鼠腸粘膜厚度的變化(μm，n＝8)
注與正常對照組比較**p＜0.01；與燒傷對照組比較Δp＜0.05，ΔΔp＜0.01(4)腸粘液厚度的變化燒傷可導致腸道粘液層變薄，除傷后第1天粘液厚度一過性增高外，其余各時相均顯著降低。ITF組在傷后5～7天顯著高于燒傷對照組和EGF組(P＜0.01)。
表4燒傷大鼠腸粘液層厚度的變化(x±s，mg，n＝8)
注與ITF組比較##p＜0.01；與燒傷對照組比較ΔΔp＜0.01(5)燒傷大鼠腸粘液中粘蛋白含量的變化燒傷后腸粘液中粘蛋白含量呈下降趨勢，ITF組大鼠在傷后5～7天明顯高于燒傷對照組和EGF組(p＜0.01)。
表5燒傷大鼠腸粘液中粘蛋白含量的變化(x±s，mg/ml，n＝8)
注與ITF組比較##p＜0.01；與燒傷對照組比較ΔΔp＜0.01(6)燒傷大鼠腸粘膜增殖指數的變化燒傷后腸粘膜增殖能力下降，表現為增殖指數降低，ITF組和EGF組大鼠腸粘膜增殖受抑的程度較燒傷對照組輕(P＜0.05～0.01)，ITF促細胞增殖的作用較EGF快，在傷后3天就顯示出療效，而EGF在傷后5天才顯出療效。但兩組間的差異無統計學意義表6燒傷大鼠腸粘膜細胞增殖指數的變化(％，n＝8)
注與正常對照組比較**p＜0.01；與燒傷對照組比較Δp＜0.05，ΔΔp＜0.01動物試驗表明，燒傷可導致動物腸粘膜嚴重受損，使用ITF和EGF都能明顯減輕腸道受損程度，促進腸粘膜修復。但ITF的作用更明顯，特別是對腸粘液的維護其療效明顯優于EGF。
本發明的腸三葉因子口服制劑，臨床上用于胃腸道缺血缺氧性損傷的治療，例如用于治療各種原因造成的消化道潰瘍、放射性腸炎、慢性胃炎、腸炎等疾病，能快速促進胃腸上皮細胞增殖，穩定胃腸粘液層，不干擾糖代謝和促進糖異生，沒有促進細菌耐藥基因表達和促進腫瘤細胞生長的副作用。
五具體實施例方式
下面是本發明腸三葉因子口服制劑的幾種片劑實施例，但本發明的口服制劑不局限于片劑。
實施例1將乳糖5.3kg、舌菊甙6g以及著色劑50g混勻后加入阿拉伯膠0.48kg制成均勻的軟材，通過16目篩制粒。濕粒在45℃烘箱中干燥，干粒過14目篩整粒。另取95％乙醇50ml與10g薄荷油混溶，均勻噴在干顆粒上。均勻加入60g硬脂酸鎂，置敞口容器中放置1小時，再將腸三葉因子0.1g、硫糖鋁30g和10g甘氨酸、5g賴氨酸、15g維生素C、1gNa3PO4的混合物混勻后加入，壓10000片即可，每片含ITF10μg。
實施例2制取工藝同實施例1，配料如下腸三葉因子(上述ITF中的任意一種) 0.1g硫糖鋁10g幾丁質15g
維生素C 15gNa3PO41g乳糖5.4kg甜菊甙 10g檸檬酸 40g著色劑 40g阿拉伯膠0.35kg薄荷油 20g聚乙二醇12g壓10000片即得，每片含ITF10μg。
實施例3制取工藝同實施例1，配料如下腸三葉因子(上述ITF中的任意一種)0.1g羥脯氨酰纖維素 60g甘氨酸 20g賴氨酸 10g幾丁質 8g維生素C20gNa3PO40.5g
蔗糖 5.1g甜菊甙10g檸檬酸40g著色劑50g明膠 0.6kg薄荷油10g壓10000片即得，每片含ITF10μg。
權利要求
1.一種腸三葉因子口服制劑，其特征在于所用原料及它們的重量百分配比為腸三葉因子0.0001～0.1，腸三葉因子激活劑0.1～1，腸三葉因子保護劑0.1～1，粘合劑5～10，潤滑劑0.2～1，矯味劑0.5～1，著色劑0.5～1，賦型劑平衡至100。
2.根據權利要求1所述的腸三葉因子口服制劑，其特征在于所述的腸三葉因子是鼠腸三葉因子、牛腸三葉因子、人腸三葉因子或基因工程重組表達的上述三種腸三葉因子，任選其中一種。
3.根據權利要求1所述的腸三葉因子口服制劑，其特征在于腸三葉因子激活劑是硫糖鋁或羥脯氨酰纖維素。
4.根據權利要求1所述的腸三葉因子口服制劑，其特征在于腸三葉因子保護劑是復合氨基酸、維生素、多糖或金屬離子磷酸鹽，任選其中一種。
5.根據權利要求1所述的腸三葉因子口服制劑，其特征在于它是藥劑學上所說的顆粒劑、片劑、膠囊劑、糖漿劑、混懸劑、乳劑或散劑中的任何一種制劑。
全文摘要
本發明屬于含蛋白材料的醫藥配制品。它是一種腸三葉因子口服制劑，其特征在于它含有腸三葉因子作為藥效活性組分，還含有腸三葉因子激活劑和腸三葉因子保護劑。它在臨床上用于胃腸道缺血缺氧性損傷的治療，例如用于治療各種原因造成的消化道潰瘍、放射性腸炎、慢性胃炎、腸炎等疾病，能快速促進胃腸上皮細胞增殖，穩定胃腸粘液層，不干擾糖代謝和促進糖異生，沒有促進細菌耐藥基因表達和促進腫瘤細胞生長的副作用。
文檔編號A61K9/16GK1742996SQ20051005729
公開日2006年3月8日 申請日期2005年9月27日 優先權日2005年9月27日
發明者彭曦, 孫勇, 汪仕良, 黃躍生 申請人:中國人民解放軍第三軍醫大學第一附屬醫院