專利名稱：廣藿香烷型倍半萜類化合物作為植物性雌激素的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及廣藿香烷型倍半萜類化合物的新用途，具體涉及此類化合物在制備用于預防和治療由雌激素缺乏或性激素代謝、特別是雌激素代謝調節障礙所導致的病癥的藥物以及化妝品中的用途。
背景技術：
婦女在40歲左右出現不規律的月經周期，這標志著絕經期的開始。這種內分泌系統變化的時期稱為更年期，它可能持續十年或更長。它是卵泡生長衰竭和對促性腺激素反應降低的結果。卵泡缺乏的結果是雌激素的生產降低并最終完全停止。伴隨它可能會產生多種癥狀，如潮熱、抑郁、焦慮、精神錯亂、失眠等。除此之外，雌激素生產的降低還可能引起嚴重的健康問題，如骨質疏松、心功能不全、腦梗塞(中風)和癌癥。另外，雌激素生產的降低對皮膚和毛發的影響更為明顯。例如出現表皮變薄，皮膚彈性減弱，皮脂腺和汗腺的分泌、排泄功能的不同程度降低，皮膚漸漸出現皺紋，毛發漸漸失去光澤，頭發變稀，變白或脫落以及肌肉群減少、脂肪在腹腔或臀部堆積、骨質疏松等各種衰老現象。雌激素的缺乏不僅可以通過生物合成膠原蛋白和透明質酸的減少導致生理性衰老，而且可以加速紫外線對人體的傷害從而加速光老化的過程。因此，雌激素對于防止皮膚衰老起重要作用。
雖然采用雌激素的激素替代療法對于緩解與更年期有關的不適是非常有效的，但許多研究表明乳腺癌和子宮癌、心血管疾病和肝代謝改變的風險增加可能和這種治療有關。通過施用孕激素可以降低癌癥的風險。但是，孕激素的保護作用似乎隨著長期使用而削弱，并且認為激素替代療法(HRT)與35～40％的乳腺癌風險增加有關。由于存在這些副作用以及對這種類型治療可靠性的明顯懷疑，已趨于拒絕在40歲以上的絕經后婦女中使用HRT藥物。據估計僅大約20％的絕經后美國婦女接受HRT，其中僅有40％持續治療1年以上。
已在許多植物中發現了在人或動物中具有雌激素-激動作用或可與雌激素相互作用的物質。已發現了至少20類不同的具有雌激素/抗雌激素性能的物質，它們來自于16個科的植物中的300種以上的植物。大部分已知的植物性雌激素屬于異黃酮、木脂素或香豆素家族。僅在最近，又發現了一種高效的植物性雌激素——8-異戊烯基柚配基(S.R.Milligan等人；Journal of Clin.Endocrinol.Metab.(臨床內分泌代謝雜志)84，2249-2252 )。通過刺激Ishikawa-Var-I細胞內的堿性磷酸酯酶測試了8-異戊烯基柚配基的體內雌激素效力。結果發現8-異戊烯基柚配基比長期以來為人們所熟悉的植物雌激素如香豆雌酚、染料木黃酮或黃豆苷明顯具有更大活性，且產生的作用僅微弱于17β雌二醇。
對美國、歐洲、中國和日本人群的流行病控制研究已表明在隨食物一起攝入植物性雌激素與多種腫瘤，特別是乳腺癌和前列腺癌的出現之間存在密切的負相關關系。還在動物試驗中證明了植物性雌激素對乳腺和前列腺腫瘤細胞生長的抑制作用。植物性雌激素的保護性能顯然是基于大量不同的生物學特征，而這些生物學特征在這些合成和天然雌激素的組合之間是有區別的。依賴于劑量和內源激素的狀況，植物性雌激素還具有雌激素作用或者甚至抗雌激素作用。其它的生物學作用包括，例如抑制酪氨酸激酶、DNA拓撲異構酶、核糖體s6激酶、鳥氨酸脫羧酶、芳香酶或5α還原酶。此外植物性雌激素通常還具有抗氧化性能，而且顯然所有這些不同作用的總和在抑制腫瘤的出現和生長中起作用(Tham等人，Journal of Clin.Endocrin.Metab.(臨床內分泌代謝雜志)83，2223-2235 )。植物性雌激素還能促進皮膚膠原蛋白的合成、抑制皮膚膠原蛋白的降解、抑制皮脂腺分泌、抗皮膚蜂窩織炎等作用。顯然這些在抗皮膚衰老等方面起作用。(Kawai n.Cosmetics and Toiletries(化妝品和盥洗用品)118(5)，73-80， )。
在文獻《植物雌激素與雌激素相關性疾病》中記載了更年期婦女使用植物性雌激素可以改善因內源性雌激素不足所致激素相關性疾病，如更年期綜合癥、骨質疏松癥、冠心病、高血脂及部分腫瘤的發病情況，從而發揮潛在的預防保健作用(國外醫學內分泌學分冊2000年7月第20卷第4期，P208～P210)。文獻《植物性雌激素的研究進展》中記載了植物性雌激素的雌激素樣作用的構效關系、雌激素活性檢測方法以及其應用前景，其中敘述了植物性雌激素對激素依賴性腫瘤、心臟病、骨質疏松癥、絕經期綜合癥以及老年性癡呆等病癥的作用(中成藥Chinese TraditionalPatent Medicine 1999，21[1]，P42～45)。文獻《植物雌激素研究概況(II)——生理功能進展》中記載了植物性雌激素的作用機制以及其對人體健康的潛在效果(中國食品添加劑，China Food Additives，2002 No.4)。
本發明的目的在于提供一種新的植物性雌激素劑廣藿香烷型倍半萜類化合物，其可用于制備用于預防和治療由雌激素缺乏或性激素代謝、特別是雌激素代謝調節障礙所導致的病癥的藥物中以及化妝品制備中。
發明內容
本發明提供如下式(I)所示的廣藿香烷型倍半萜類化合物及其對映異構體、平衡異構體、鹽、水合物在制備用于預防和治療由雌激素缺乏或性激素代謝、特別是雌激素代謝調節障礙所導致的病癥的藥物中以及化妝品制備中的用途 式中R1、R2、R3為氫、羥基、甲氧基、乙酰基；當R1為羥基時，R2、R3為乙酰基。
經藥效學試驗證明，式(I)所示的廣藿香烷型倍半萜類化合物具有顯著的雌激素活性。其對雌激素敏感的細胞株-人乳腺癌細胞MCF-7具有明顯的增殖作用。
小鼠急性毒性試驗證明，本發明所述的廣藿香烷型倍半萜類化合物基本安全無毒。
因此，本發明的化合物可以用于預防和治療由雌激素缺乏或性激素代謝、特別是雌激素代謝調節障礙所導致的病癥，包括更年期不適、性激素依賴性癌癥、良性前列腺增生、骨質疏松、阿耳茨海默氏病、心血管疾病和皮膚老化等。
當R1為羥基時，R2、R3為乙酰基，為化合物香附子烯-6，9-二乙酰氧基-3-醇(Sugetriol 6，9-diacetate)。經多次雌激素活性實驗研究表明，該化合物具有刺激雌激素敏感細胞-MCF-7細胞生長的顯著活性。
式(I)所示的廣藿香烷型倍半萜類化合物來源豐富，價廉，制備提取工藝簡單，并可制成片劑、口服液、膠囊、顆粒劑等多種口服劑型，以及膏、霜、乳液等外用劑型，使用方便。
本發明為植物性雌激素的選擇開拓了一個新的應用領域，本發明的化合物具有很好的開發和藥用前景。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明作進一步闡述，但這些實施例不對本發明構成任何限制。
實施例1化合物香附子烯-6，9-二乙酰氧基-3-醇的分離與純化將干燥粉碎的香附(Cyperus rotundus)根莖(1kg)用甲醇室溫浸泡提取完全(3天/次，8L/次×3)。減壓濃縮提取液得甲醇浸膏(132g)，浸膏用水-乙酸乙酯分配，乙酸乙酯層濃縮后得浸膏65g，乙酸乙酯提取物中含多種倍半萜成分。乙酸乙酯提取物上硅膠柱，以石油醚-乙酸乙酯(100∶1～0∶100)梯度洗脫后，取石油醚-乙酸乙酯(8∶2)洗脫部位，用Sephadex LH-20去雜，再經硅膠柱層析，分離得無色油狀物，C11H6O3，易溶于氯仿。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ0.73(3H，s)，0.94(3H，d，J＝7Hz)，1.04(3H，s)，1.73(3H，s)，1.95(3H，s)，2.21(1H，d，J＝8Hz)，4.68(1H，m，J1＝J2＝10Hz，J3＝7Hz)，5.25(1H，d，J＝6)。
其中1H-NMR用Bruker AMX 400 MHz型核磁共振儀記錄，化學位移以δ(ppm)表示。
實施例2采用對雌激素敏感的細胞株-人乳腺癌細胞MCF-7測定化合物的雌激素活性。取無酚紅DMEM(含10％CDT-FBS)培養4天的MCF-7細胞接種于96孔培養板(4×l03個/孔)培養24小時，待細胞貼壁后棄去陳舊培養液，分別加入不同濃度的試樣(總體積200μl/孔)，每一劑量組在37℃，5％CO2，相對飽和濕度下孵育5天后，用MTT比色法在570nm波長測定各孔吸光值(A)，計算平均值和增殖率。
結果
**p＜0.01.
從表中結果可以看到，化合物香附子烯-6，9-二乙酰氧基-3-醇顯著刺激MCF-7細胞的增殖，具有雌激素活性。
實施例3 小鼠毒性試驗按常規方法，將小鼠隨機分兩組，各組分別灌服一定濃度的香附子烯-6，9-二乙酰氧基-3-醇，觀察7天，測得香附子烯-6，9-二乙酰氧基-3-醇的LD50分別為4.9和3.6g/kg。
實施例4-5舉例說明了本發明可用于化妝品組合物。可以以常規方式制備這些組合物。它們適宜于皮膚抗衰老用途。
實施例4
實施例5
以上顯示和描述了本發明的基本原理和主要特征和本發明的優點。本行業的技術人員應該了解，本發明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發明的原理，在不脫離本發明精神和范圍的前提下本發明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發明范圍內。本發明要求保護范圍由所附的權利要求書及其等效物界定。
權利要求
1.如下式(I)所示的廣藿香烷型倍半萜類化合物及其對映異構體、平衡異構體、鹽、水合物在制備用于預防和治療由雌激素缺乏或性激素代謝、特別是雌激素代謝調節障礙所導致的病癥的藥物中以及化妝品制備中的用途 式中R1、R2、R3為氫、羥基、甲氧基、乙酰基；當R1為羥基時，R2、R3為乙酰基。
2.如權利要求1所述的用途，其中的病癥選自更年期不適、性激素依賴性癌癥、良性前列腺增生、骨質疏松、阿耳茨海默氏病和心血管疾病。
全文摘要
本發明提供如式(I)所示的廣藿香烷型倍半萜類化合物及其對映異構體、平衡異構體、鹽、水合物在制備用于預防和治療由雌激素缺乏或性激素代謝、特別是雌激素代謝調節障礙所導致的病癥的藥物以及化妝品中的用途。式中R1、R2、R3為氫、羥基、甲氧基、乙酰基。當R1為羥基時，R2、R3為乙酰基。
文檔編號A61P19/10GK1935128SQ20051002978
公開日2007年3月28日 申請日期2005年9月20日 優先權日2005年9月20日
發明者趙亞, 魏少敏, 胡昌奇 申請人:上海家化聯合股份有限公司