專利名稱：補血當歸制劑的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種補血當歸制劑的質量控制方法，屬于藥品技術的領域。
背景技術：
婦女月經不調、產后血虛體弱、貧血是我們日常生活中的常見病，補血當歸制劑由當歸、熟地黃、白芍、川芎、黨參、甘草和黃芪共七味藥組成；具有滋補氣血的功效，對頭暈、貧血、身體衰弱、婦女月經不調，產后血虛體弱等疾病有確切的療效。其中“補血當歸精”刊登在中華人民共和國衛生部藥品標準第十冊，該藥物在臨床上應用多年，在治療頭暈、貧血、身體衰弱方面取得比較滿意的治療效果，但經我們研究發現，現有補血當歸制劑存在質量控制方法落后，產品質量不易控制的缺點。由于當歸具有補血活血、調經止痛、潤腸通便等功效，是本發明制劑中主要有效成分，另外，白芍、黃芪和甘草也是本發明制劑中發揮主要藥效的物質，而現有質量控制方法中中并沒有對當歸進行鑒別，或對當歸中有效成分進行含量測定。也沒有對其他藥物進行鑒別，故現有質量控制方法不能有效控制補血當歸制劑的質量，從而將影響產品的生產和保證質量。
發明內容
本發明的目的在于提供一種補血當歸制劑的質量控制方法，該制劑為口服固體制劑，包括膠囊劑、片劑和顆粒劑。
本發明所述補血當歸制劑是這樣構成的按照重量組份計算它主要由當歸300-500g、熟地黃(酒蒸制)10-50g、白芍(酒炒)10-50g、川芎(酒炒)5-20g、黃芪(蜜制)10-50g、黨參10-50g、甘草5-20g制備而成。
優選的處方組成是按照重量組份計算它主要由當歸400g、熟地黃(酒蒸制)24g、白芍(酒炒)24g、川芎(酒炒)12g、黃芪(蜜制)24g、黨參24g、甘草12g制備而成。
本發明所述制劑這樣制備以上七味，分別粉碎成粗粉，當歸、白芍、川芎、黃芪分別用20-85％乙醇作溶劑，照中國藥典流浸膏與浸膏劑項下的滲漉法進行滲漉提取，分別收集8-15倍量滲漉液，漉液減壓回收乙醇；熟地黃、甘草、黨參加水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液濃縮，加乙醇1-10倍量，攪勻，靜置，濾過，濾液回收乙醇，與上述藥液合并，再按照常規方法，加入不同輔料，制成膠囊劑、片劑或顆粒劑。
處方中當歸具有補血活血、調經止痛、潤腸通便等功效，是本發明制劑中主要有效成分，故補血當歸制劑中應對當歸中主要有效成分建立含量測定方法，方能很好地控制該制劑的質量，但是如何選擇色譜條件及如果制備供試品溶液成為本發明的難點。經過大量實驗，本發明選擇色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙晴∶0.05-0.5％磷酸溶液＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm，理論板數以阿魏酸峰計算不得低于4000的高效液相色譜法測定當歸中阿魏酸的含量。結果，藥品中有效成分提取完全，且在該條件下，待測組分與其他組分分離完全(分離度＞1.5)，精密度、穩定性等均能符合要求。另外，本發明還對當歸、白芍、黃芪和甘草四個藥材進行薄層鑒別研究，并選擇以當歸對照藥材為對照，以正己烷∶乙酸乙酯＝1-9∶9-1為展開劑鑒別方中當歸；以芍藥對照品為對照，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑鑒別方中白芍；以黃芪甲苷對照品為對照，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝5-30∶3-15∶1-10的下層溶液為展開劑鑒別方中黃芪；以甘草對照藥材為對照，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑鑒別方中甘草；結果其分離度好，斑點顯色清晰，陰性對照無干擾，方法重現性好。故采用本發明質量控制方法可有效控制補血當歸制劑的質量，從而保證該制劑的臨床療效。
本發明所述質量控制方法包括以下步驟對性狀進行觀察，對內容物進行鑒別，根據藥典的方法對內容物進行檢查，對含有的阿魏酸進行含量測定。
其中對性狀進行觀察包括對于膠囊劑，性狀為產品內容物為棕黃色的細粉或顆粒，味辛，微苦；對于片劑性狀為藥物顯棕黃色的細粉或顆粒；味辛，微苦；對于顆粒劑性狀為產品為棕黃色的的顆粒；對內容物進行鑒別，包括以下步驟(1)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，加石油醚，超聲處理，提取液濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇溶解，作為供試品溶液；另取當歸對照藥材，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝1-9∶9-1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，加乙酸乙酯，超聲提取，提取液濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇，超聲提取，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗1-8次，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的大孔樹脂柱，用水洗脫，棄水液，再用20-85％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液，分別點于同一以0.5-5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，加甲醇，回流提取，提取液濾過，濾液蒸干，殘渣加水使溶解，用水飽和過的正丁醇提取1-8次，合并正丁醇液，用氨試液洗滌1-8次，棄氨水洗液，正丁醇液再用正丁醇飽和過的水洗滌1-5次，棄水洗液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇溶解，過中性氧化鋁柱，用20-85％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，置水浴蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝5-30∶3-15∶1-10的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈下顯相同的橙黃色熒光斑點。
(4)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，加乙酸乙酯，超聲提取，提取液濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇，超聲提取，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗1-8次，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱，用水洗脫，棄水液，再用20-85％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材，加乙醚，回流提取，濾過，棄濾液，藥渣加甲醇，水浴回流提取，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解，并轉移至分液漏斗中，用水飽和過的正丁醇提取1-8次，合并正丁醇液，再用正丁醇飽和過的水洗1-5次，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液，分別點于同一以0.5-5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，于日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
根據藥典的方法對內容物進行檢查包括本發明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應符合中國藥典關于膠囊劑、片劑或顆粒劑項下的有關規定。
對含有的阿魏酸進行含量測定包括以下步驟阿魏酸 采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙晴∶0.05-0.5％磷酸溶液＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；精密稱取阿魏酸對照品，用甲醇溶解，即得對照品溶液；分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，精密加入甲醇溶液水浴回流提取，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，用0.65μm及小于0.65μm的微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、片劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、顆粒劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.005mg/g。
具體的質量控制方法包括對性狀進行觀察包括對于膠囊劑性狀為產品內容物為棕黃色的細粉或顆粒，味辛，微苦；對于片劑性狀為藥物顯棕黃色的細粉或顆粒；味辛，微苦；對于顆粒劑性狀為產品為棕黃色的的顆粒；對內容物進行鑒別，包括(1)分別取膠囊劑、片劑各1g，或取顆粒劑5g，加石油醚20-150ml，超聲處理10-60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取當歸對照藥材0.1-0.5g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5-25μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝1-9∶9-1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加乙酸乙酯20-200ml，超聲提取10-60分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇20-100ml，超聲提取0.5-3小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗1-8次，每次10-50ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用20-100ml水洗脫，棄水液，再用20-85％乙醇20-100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥對照品，加甲醇制成每1ml含0.2-1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5-25μl，分別點于同一以0.5-5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5-20％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加甲醇20-200ml，回流提取10-100分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10-100ml使溶解，用水飽和過的正丁醇提取1-8次，每次10-100ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌1-8次，每次10-100ml，棄氨水洗液，正丁醇液再用正丁醇飽和過的水10-100ml洗滌1-5次，棄水洗液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇2-10ml使溶解，過中性氧化鋁柱(1.5×20cm，5g)，用20-85％甲醇溶液50-200ml洗脫，收集洗脫液，置水浴蒸干，殘渣加甲醇0.2-1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.2-1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5-25μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝5-30∶3-15∶1-10的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5-20％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈200-500nm下顯相同的橙黃色熒光斑點。
(4)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加乙酸乙酯20-200ml，超聲提取10-60分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇20-100ml，超聲提取0.5-3小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗1-8次，每次10-50ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用20-100ml水洗脫，棄水液，再用20-85％乙醇20-100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.5g，加乙醚10-100ml，回流提取0.5-5小時后，濾過，棄濾液，藥渣加甲醇10-100ml，水浴回流提取0.5-5小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10-50ml使溶解，并轉移至分液漏斗中，用水飽和過的正丁醇提取1-8次，每次10-100ml，合并正丁醇液，再用正丁醇飽和過的水洗1-5次，每次10-50ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5-25μl，分別點于同一以0.5-5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，于日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
根據藥典的方法對內容物進行檢查為本發明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應符合中國藥典關于膠囊劑、片劑或顆粒劑項下的有關規定。
對所含進行含量測定，包括以下步驟阿魏酸 采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙晴∶0.05-0.5％磷酸溶液＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm，理論板數以阿魏酸峰計算不得低于4000；精密稱取阿魏酸對照品，用甲醇溶解并制成每1ml含阿魏酸5-20μg，即得對照品溶液；取膠囊劑、片劑各1.0g或顆粒劑5g，精密稱定，置回流瓶中，精密加入甲醇10-100ml，稱定重量，水浴回流20-80分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，用0.65μm及小于0.65μm的微孔濾膜濾過，取濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、片劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、顆粒劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.005mg/g。
更具體的質量控制方法包括對性狀進行觀察包括對于膠囊劑，性狀為產品內容物為棕黃色的細粉或顆粒，味辛，微苦；對于片劑性狀為藥物顯棕黃色的細粉或顆粒；味辛，微苦；對于顆粒劑性狀為產品為棕黃色的的顆粒；對內容物進行鑒別，包括以下步驟(1)分別取膠囊劑、片劑各1g，或取顆粒劑5g，加石油醚30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取當歸對照藥材0.3g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加乙酸乙酯40ml，超聲提取30分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇60ml，超聲提取1小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗3次，每次20ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用50ml水洗脫，棄水液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一以1％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝15∶1∶1∶2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加甲醇50ml，回流提取40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和過的正丁醇提取2次，每次25ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次25ml，棄氨水洗液，正丁醇液再用正丁醇飽和過的水30ml洗滌1次，棄水洗液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，過中性氧化鋁柱(1.5×20cm，5g)，用40％甲醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，置水浴蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈365nm下顯相同的橙黃色熒光斑點。
(4)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加乙酸乙酯40ml，超聲提取30分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇60ml，超聲提取1小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗3次，每次20ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用50ml水洗脫，棄水液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.5g，加乙醚20ml，回流提取1小時后，濾過，棄濾液，藥渣加甲醇30ml，水浴回流提取1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，并轉移至分液漏斗中，用水飽和過的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，再用正丁醇飽和過的水洗3次，每次30ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一以1％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝15∶1∶1∶2為展開劑，展開，取出，晾干，于日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
根據藥典的方法對內容物進行檢查包括本發明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應符合中國藥典關于膠囊劑、片劑或顆粒劑項下的有關規定。
對含有的阿魏酸進行含量測定包括以下步驟阿魏酸采用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇或乙晴∶0.085％磷酸溶液＝1.6∶8.4為流動相；檢測波長為324nm，理論板數以阿魏酸峰計算不得低于5000；精密稱取阿魏酸對照品，用甲醇溶解并制成每1ml含阿魏酸10μg，即得對照品溶液；取膠囊劑、片劑各1.0g或顆粒劑5g，精密稱定，置回流瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，水浴回流45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，用0.45μm的微孔濾膜濾過，取濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、片劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、顆粒劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.005mg/g。
與現有技術比較，本發明針對原有制劑補血當歸精質量控制標準簡單，產品質量不易控制等缺點，對本制劑的質量控制方法進行了研究，提高了補血當歸制劑的質量標準，保證了本制劑的臨床療效，達到了發明的目的。
本發明的質量控制方法是經過大量的篩選得到的最佳方案，以下實驗研究為本發明的優選過程。
一、阿魏酸含量測定方法研究1、流動相的選擇流動相1以甲醇或乙晴、磷酸溶液的混合溶液為流動相；流動相2以甲醇、水和冰醋酸的混合溶液為流動相；流動相3以甲醇和冰醋酸的混合溶液為流動相。
結果以甲醇或乙晴∶0.05-0.5％磷酸溶液＝1-9∶9-1為流動相，陰性樣品色譜圖在阿魏酸位置處無假陽性峰，阿魏酸和相近的雜質峰分離完全(分離度＞1.5)，即在該條件下阿魏酸與其他組分分離完全。最佳流動相為乙晴∶0.085％磷酸溶液＝16∶84。
2、供試品溶液制備方法研究2.1提取方法的選擇取制劑1.0g，分別以浸泡、水浴回流提取、超聲波提取等方法各加甲醇50ml，稱定重量，分別提取1小時后，放冷，甲醇補足減失的重量，濾過，測定其含量，結果見下表
試驗結果表明，回流提取更能將制劑中的阿魏酸提取完全，故選擇提取方法為水浴回流提取。
2.2提取溶劑的選擇取制劑1.0g，分別加甲醇、50％乙醇、乙醇50ml，稱定重量，分別水浴回流提取1小時后，放冷，補足減失的重量，濾過，測定其含量，結果見下表
試驗結果表明，甲醇作為提取溶劑更能將制劑中的阿魏酸浸出，故選擇提取溶劑為甲醇。
3、重復性試驗取制劑，按上述供試液的制備方法，分別制備5份供試液，進樣，測定峰面積，阿魏酸平均含量為0.2407mg/g，RSD為1.88％。表明重復性良好。結果見下表
4、供試品溶液中阿魏酸穩定性試驗取制劑，按上述供試液的制備方法，分別于0、2、4、6、8小時測定其阿魏酸峰面積，平均峰面積為404106，RSD為1.19％。表明供試品溶液中阿魏酸在8小時內穩定性良好，結果見下表
二、當歸薄層鑒別研究以當歸對照藥材為對照。
供試品溶液制備方法一取制劑1g，加乙醚，回流提取30min，放冷，濾過，低溫蒸干，殘渣加無水乙醇溶解，作為供試品溶液；同法制備缺當歸陰性對照液。
供試品溶液制備方法二取制劑1g，加石油醚，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇溶解，作為供試品溶液；同法制備缺當歸陰性對照液。
展開劑選擇分別正己烷和乙酸乙酯各種比例的混合溶液為展開劑。
結果采用方法二制備供試品溶液，以正己烷∶乙酸乙酯＝1-9∶9-1為展開劑，其分離度好，斑點顯色清晰，陰性對照無干擾，方法重現性好。最佳展開劑為正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1。
三、白芍鑒別研究以芍藥對照品為對照。
供試品溶液制備方法一分別取制劑5g，加乙酸乙酯，超聲提取30分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇50ml，超聲提取1小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗3次，每次20ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用50ml水洗脫，棄水液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液；同法制備缺芍藥陰性對照液。
供試品溶液制備方法二取制劑5g，加甲醇3，超聲處理30min，放冷，濾過，蒸干，殘渣加水10mL，溶解，加水飽和正丁醇提取2次，每次20mL，合并，水浴蒸干，殘渣加乙醇20mL，置已處理好的中性氧化鋁柱(＜115cm，中性氧化鋁5g)上，水浴蒸干，殘渣加甲醇1mL溶解，作為供試品溶液；同法制備缺芍藥陰性對照液。
展開劑選擇分別以乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸和水各種比例的混合溶液；氯仿、醋酸乙酯和甲醇各種比例的混合溶液為展開劑。
結果采用方法一制備供試品溶液，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，其分離度好，斑點顯色清晰，陰性對照無干擾，方法重現性好。最佳展開劑為乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝15∶2∶2∶1.5。
四、黃芪鑒別研究以黃芪甲苷對照品為對照。
供試品溶液制備方法一取制劑5g，加甲醇50ml，回流提取40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和過的正丁醇提取2次，每次25ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次25ml，棄氨水洗液，正丁醇液再用正丁醇飽和過的水30ml洗滌1次，棄水洗液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，過中性氧化鋁柱(1.5×20cm，5g)，用40％甲醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，置水浴蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；同法制備缺黃芪陰性對照液。
供試品溶液制備方法二取制劑5g，研細，加甲醇50mL超聲處理20min，濾過，蒸干，殘渣加水20mL溶解，轉移至分液漏斗中，加乙醚20mL萃取2次，棄去乙醚液，加水飽和正丁醇20mL，萃取2次，合并正丁醇液，水浴蒸干，殘渣加甲醇2mL溶解作為供試液；同法制備缺黃芪陰性對照液。
展開劑選擇分別以三氯甲烷、甲醇和水各種比例的混合溶液為展開劑。
結果采用方法一制備供試品溶液，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝5-30∶3-15∶1-10的下層溶液為展開劑，其分離度好，斑點顯色清晰，陰性對照無干擾，方法重現性好。最佳展開劑為三氯甲烷∶甲醇∶水＝15∶10∶4的下層溶液。
五、甘草鑒別研究以甘草對照藥材為對照。
供試品溶液制備方法一取制劑5g，加稀鹽酸1ml，水40ml搖勻，加水飽和正丁醇提取5次，每次30ml，合并正丁醇液，水浴蒸干，殘渣用甲醇5ml分次溶解，轉移至100ml圓底燒瓶中，揮發去甲醇液，殘渣加鹽酸5ml，氯仿50ml，加熱回流3h。放冷，分取氯仿層，濾過，用10ml氯仿分次洗滌濾紙，合并濾液，水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解定容至2ml，作為供試品液；同法制備缺甘草陰性對照液。
供試品溶液制備方法二分別取制劑5g，加乙酸乙酯，超聲提取30分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇50ml，超聲提取1小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗3次，每次20ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用50ml水洗脫，棄水液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液；同法制備缺甘草陰性對照液。
供試品溶液制備方法三取制劑2g，研細，加鹽酸1ml與氯仿20ml，加熱回流1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇或甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；展開劑選擇分別以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸和水各種比例的混合溶液；石油醚(30～60℃)、氯仿和冰醋酸各種比例的混合溶液；石油醚(60～90℃)、苯、醋酸乙酯和冰醋酸各種比例的混合溶液；環己烷、醋酸乙酯和冰醋酸各種比例的混合溶液；環己烷、醋酸乙酯、苯和甲酸各種比例的混合溶液為展開劑。
結果采用方法二制備供試品溶液，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑其分離度好，斑點顯色清晰，陰性對照無干擾，方法重現性好。最佳展開劑為乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝20∶3∶2∶1。
本發明的優點在于本發明的質量控制方法是在原法定標準基礎上，增加高效液相色譜法測定阿魏酸的含量；利用薄層色譜法鑒別該復方制劑中各藥味，形成了新的質量控制方法(標準)。該方法保證了本發明的制劑的質量檢測標準能夠較全面有效控制制劑的質量特征，具有準確性和先進性，可作為質量控制和考察工藝的穩定性的有效技術手段。對提高產品質量有重大意義。
具體實施例方式以下通過實施例進一步說明本發明，但不作為對本發明的限制。
實施例1膠囊劑的質量控制對于膠囊劑性狀為產品內容物為棕黃色的細粉或顆粒，味辛，微苦；對內容物進行鑒別，包括(1)取膠囊劑1g，加石油醚20ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取當歸對照藥材0.1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝1∶9為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取膠囊劑5g，加乙酸乙酯20ml，超聲提取10分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇20ml，超聲提取0.5小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗1次，每次10ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用20ml水洗脫，棄水液，再用20％乙醇20ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一以0.5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5∶0.5∶5∶5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取膠囊劑5g，加甲醇20ml，回流提取10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，用水飽和過的正丁醇提取1次，每次10ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌1次，每次10ml，棄氨水洗液，正丁醇液再用正丁醇飽和過的水10ml洗滌1次，棄水洗液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，過中性氧化鋁柱(1.5×20cm，5g)，用20％甲醇溶液50ml洗脫，收集洗脫液，置水浴蒸干，殘渣加甲醇0.2ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝5∶15∶1的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈200nm下顯相同的橙黃色熒光斑點。
(4)取膠囊劑5g，加乙酸乙酯20ml，超聲提取10分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇20ml，超聲提取0.5小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗1次，每次10ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用20ml水洗脫，棄水液，再用20％乙醇20ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.5g，加乙醚10ml，回流提取0.5小時后，濾過，棄濾液，藥渣加甲醇10ml，水浴回流提取0.5小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，并轉移至分液漏斗中，用水飽和過的正丁醇提取1次，每次10ml，合并正丁醇液，再用正丁醇飽和過的水洗1次，每次10ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一以0.5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5∶5∶0.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，于日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
根據藥典的方法對內容物進行檢查為本發明的膠囊劑應符合中國藥典關于膠囊劑項下的有關規定。
對所含阿魏酸進行含量測定，包括以下步驟阿魏酸 采用高效液相色譜法，色譜柱為C4，以甲醇∶0.05％磷酸溶液＝1∶9為流動相；檢測波長為200nm，理論板數以阿魏酸峰計算不得低于4000；精密稱取阿魏酸對照品，用甲醇溶解并制成每1ml含阿魏酸5μg，即得對照品溶液；取膠囊劑1.0g，精密稱定，置回流瓶中，精密加入甲醇10ml，稱定重量，水浴回流20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，用0.65μm及小于0.65μm的微孔濾膜濾過，取濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g。
實施例2片劑的質量控制對于片劑性狀為藥物顯棕黃色的細粉或顆粒；味辛，微苦；對內容物進行鑒別，包括(1)取片劑1g，加石油醚150ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取當歸對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各25μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝9∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈500nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取片劑5g，加乙酸乙酯200ml，超聲提取60分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇100ml，超聲提取3小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗8次，每次50ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用100ml水洗脫，棄水液，再用85％乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各25μl，分別點于同一以5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝30∶5∶0.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以20％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取片劑5g，加甲醇200ml，回流提取100分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水100ml使溶解，用水飽和過的正丁醇提取8次，每次100ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌8次，每次100ml，棄氨水洗液，正丁醇液再用正丁醇飽和過的水100ml洗滌5次，棄水洗液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇10ml使溶解，過中性氧化鋁柱(1.5×20cm，5g)，用85％甲醇溶液200ml洗脫，收集洗脫液，置水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各25μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝30∶3∶10的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以20％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈500nm下顯相同的橙黃色熒光斑點。
(4)取片劑5g，加乙酸乙酯200ml，超聲提取60分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇100ml，超聲提取3小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗8次，每次50ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用100ml水洗脫，棄水液，再用85％乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.5g，加乙醚100ml，回流提取5小時后，濾過，棄濾液，藥渣加甲醇100ml，水浴回流提取5小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，并轉移至分液漏斗中，用水飽和過的正丁醇提取8次，每次100ml，合并正丁醇液，再用正丁醇飽和過的水洗5次，每次50ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各25μl，分別點于同一以5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝30∶0.5∶5∶5為展開劑，展開，取出，晾干，于日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
根據藥典的方法對內容物進行檢查為本發明的片劑應符合中國藥典關于片劑項下的有關規定。
對所含阿魏酸進行含量測定，包括以下步驟阿魏酸采用高效液相色譜法，色譜柱為C8柱，以乙晴0.5％磷酸溶液＝9∶1為流動相；檢測波長為500nm，理論板數以阿魏酸峰計算不得低于4000；精密稱取阿魏酸對照品，用甲醇溶解并制成每1ml含阿魏酸20μg，即得對照品溶液；取片劑1.0g精密稱定，置回流瓶中，精密加入甲醇100ml，稱定重量，水浴回流80分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，用0.65μm及小于0.65μm的微孔濾膜濾過，取濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各25μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，片劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g。
實施例3顆粒劑的質量控制對于顆粒劑性狀為產品為棕黃色的的顆粒；對顆粒劑的鑒別，包括(1)取顆粒劑5g，加石油醚30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取當歸對照藥材0.3g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取顆粒劑20g，加乙酸乙酯40ml，超聲提取30分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇60ml，超聲提取1小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗3次，每次20ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用50ml水洗脫，棄水液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一以1％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝15∶1∶1∶2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取顆粒劑20g，加甲醇50ml，回流提取40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和過的正丁醇提取2次，每次25ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次25ml，棄氨水洗液，正丁醇液再用正丁醇飽和過的水30ml洗滌1次，棄水洗液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，過中性氧化鋁柱(1.5×20cm，5g)，用40％甲醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，置水浴蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈365nm下顯相同的橙黃色熒光斑點。
(4)取顆粒劑20g，加乙酸乙酯40ml，超聲提取30分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇60ml，超聲提取1小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗3次，每次20ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用50ml水洗脫，棄水液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.5g，加乙醚20ml，回流提取1小時后，濾過，棄濾液，藥渣加甲醇30ml，水浴回流提取1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，并轉移至分液漏斗中，用水飽和過的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，再用正丁醇飽和過的水洗3次，每次30ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一以1％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝15∶1∶1∶2為展開劑，展開，取出，晾干，于日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
根據藥典的方法對內容物進行檢查為本發明的顆粒劑應符合中國藥典關于顆粒劑項下的有關規定。
對所含進行含量測定，包括以下步驟阿魏酸 采用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇或乙晴∶0.085％磷酸溶液＝1.6∶8.4為流動相；檢測波長為324nm，理論板數以阿魏酸峰計算不得低于5000；精密稱取阿魏酸對照品，用甲醇溶解并制成每1ml含阿魏酸10μg，即得對照品溶液；取顆粒劑5g，精密稱定，置回流瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，水浴回流45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，用0.45μm的微孔濾膜濾過，取濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測定含量；顆粒劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.005mg/g。
權利要求
1.一種補血當歸制劑的質量控制方法，其特征在于，包括對性狀進行觀察，對內容物進行鑒別，根據藥典的方法對內容物進行檢查，對含有的阿魏酸進行含量測定的步驟。
2.權利要求1的方法，其特征在于，所述補血當歸制劑是口服固體制劑。
3.權利要求2的方法，其特征在于，所述口服固體制劑是顆粒劑、片劑或膠囊劑。
4.權利要求1的方法，其特征在于，所述鑒別方法選自以下方法中的一種或幾種(1)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，加石油醚，超聲處理，提取液濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇溶解，作為供試品溶液；另取當歸對照藥材，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝1-9∶9-1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(2)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，加乙酸乙酯，超聲提取，提取液濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇，超聲提取，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗1-8次，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的大孔樹脂柱，用水洗脫，棄水液，再用20-85％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液，分別點于同一以0.5-5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(3)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，加甲醇，回流提取，提取液濾過，濾液蒸干，殘渣加水使溶解，用水飽和過的正丁醇提取1-8次，合并正丁醇液，用氨試液洗滌1-8次，棄氨水洗液，正丁醇液再用正丁醇飽和過的水洗滌1-5次，棄水洗液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇溶解，過中性氧化鋁柱，用20-85％甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，置水浴蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝5-30∶3-15∶1-10的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈下顯相同的橙黃色熒光斑點。(4)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，加乙酸乙酯，超聲提取，提取液濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇，超聲提取，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗1-8次，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱，用水洗脫，棄水液，再用20-85％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材，加乙醚，回流提取，濾過，棄濾液，藥渣加甲醇，水浴回流提取，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解，并轉移至分液漏斗中，用水飽和過的正丁醇提取1-8次，合并正丁醇液，再用正丁醇飽和過的水洗1-5次，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液，分別點于同一以0.5-5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，于日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。所述含量測定的步驟包括阿魏酸采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙晴∶0.05-0.5％磷酸溶液＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；精密稱取阿魏酸對照品，用甲醇溶解，即得對照品溶液；分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，精密加入甲醇溶液水浴回流提取，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，用0.65μm及小于0.65μm的微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、片劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、顆粒劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.005mg/g。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述鑒別方法選自以下方法中的一種或幾種(1)分別取膠囊劑、片劑各1g，或取顆粒劑5g，加石油醚20-150ml，超聲處理10-60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取當歸對照藥材0.1-0.5g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5-25μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝1-9∶9-1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(2)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加乙酸乙酯20-200ml，超聲提取10-60分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇20-100ml，超聲提取0.5-3小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗1-8次，每次10-50ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用20-100ml水洗脫，棄水液，再用20-85％乙醇20-100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥對照品，加甲醇制成每1ml含0.2-1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5-25μl，分別點于同一以0.5-5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5-20％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(3)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加甲醇20-200ml，回流提取10-100分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10-100ml使溶解，用水飽和過的正丁醇提取1-8次，每次10-100ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌1-8次，每次10-100ml，棄氨水洗液，正丁醇液再用正丁醇飽和過的水10-100ml洗滌1-5次，棄水洗液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇2-10ml使溶解，過中性氧化鋁柱(1.5×20cm，5g)，用20-85％甲醇溶液50-200ml洗脫，收集洗脫液，置水浴蒸干，殘渣加甲醇0.2-1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.2-1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5-25μl，分別點于同-硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝5-30∶3-15∶1-10的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5-20％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈200-500nm下顯相同的橙黃色熒光斑點。(4)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加乙酸乙酯20-200ml，超聲提取10-60分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇20-100ml，超聲提取0.5-3小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗1-8次，每次10-50ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用20-100ml水洗脫，棄水液，再用20-85％乙醇20-100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.5g，加乙醚10-100ml，回流提取0.5-5小時后，濾過，棄濾液，藥渣加甲醇10-100ml，水浴回流提取0.5-5小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10-50ml使溶解，并轉移至分液漏斗中，用水飽和過的正丁醇提取1-8次，每次10-100ml，合并正丁醇液，再用正丁醇飽和過的水洗1-5次，每次10-50ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5-25μl，分別點于同一以0.5-5％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝5-30∶0.5-5∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，于日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述含量測定的步驟包括阿魏酸 采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙晴∶0.05-0.5％磷酸溶液＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm，理論板數以阿魏酸峰計算不得低于4000；精密稱取阿魏酸對照品，用甲醇溶解并制成每1ml含阿魏酸5-20μg，即得對照品溶液；取膠囊劑、片劑各1.0g或顆粒劑5g，精密稱定，置回流瓶中，精密加入甲醇10-100ml，稱定重量，水浴回流20-80分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，用0.65μm及小于0.65μm的微孔濾膜濾過，取濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、片劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、顆粒劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.005mg/g。
7.根據權利要求1的方法，其特征在于，所述的補血當歸制劑是由如下重量配比的中藥原料制成的當歸300-500g、熟地黃(酒蒸制)10-50g、白芍(酒炒)10-50g、川芎(酒炒)5-20g、黃芪(蜜制)10-50g、黨參10-50g、甘草5-20g。
8.根據權利要求1的方法，其特征在于，其中對性狀進行觀察包括對于膠囊劑，性狀為產品內容物為棕黃色的細粉或顆粒，味辛，微苦；對于片劑性狀為藥物顯棕黃色的細粉或顆粒；味辛，微苦；對于顆粒劑性狀為產品為棕黃色的的顆粒。
9.根據權利要求1的方法，其特征在于，根據藥典的方法對內容物進行檢查包括膠囊劑、片劑或顆粒劑應符合中國藥典關于膠囊劑、片劑或顆粒劑項下的有關規定。
10.根據權利要求1的方法，其特征在于對性狀進行觀察包括對于膠囊劑，性狀為產品內容物為棕黃色的細粉或顆粒，味辛，微苦；對于片劑性狀為藥物顯棕黃色的細粉或顆粒；味辛，微苦；對于顆粒劑性狀為產品為棕黃色的的顆粒；對內容物進行鑒別，包括以下步驟(1)分別取膠囊劑、片劑各1g，或取顆粒劑5g，加石油醚30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取當歸對照藥材0.3g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯＝4∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(2)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加乙酸乙酯40ml，超聲提取30分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇60ml，超聲提取1小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗3次，每次20ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用50ml水洗脫，棄水液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一以1％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝15∶1∶1∶2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(3)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加甲醇50ml，回流提取40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和過的正丁醇提取2次，每次25ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次25ml，棄氨水洗液，正丁醇液再用正丁醇飽和過的水30ml洗滌1次，棄水洗液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，過中性氧化鋁柱(1.5×20cm，5g)，用40％甲醇溶液100ml洗脫，收集洗脫液，置水浴蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈365nm下顯相同的橙黃色熒光斑點。(4)分別取膠囊劑、片劑各5g，或取顆粒劑20g，加乙酸乙酯40ml，超聲提取30分鐘，濾過，棄乙酸乙酯液，殘渣再加水飽和過的正丁醇60ml，超聲提取1小時，濾過，濾液用正丁醇飽和過的水洗3次，每次20ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣用水溶解，轉移至已處理好的D101型大孔樹脂柱(1.5×15cm)，用50ml水洗脫，棄水液，再用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.5g，加乙醚20ml，回流提取1小時后，濾過，棄濾液，藥渣加甲醇30ml，水浴回流提取1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，并轉移至分液漏斗中，用水飽和過的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，再用正丁醇飽和過的水洗3次，每次30ml，棄水洗液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一以1％的氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水＝15∶1∶1∶2為展開劑，展開，取出，晾干，于日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。根據藥典的方法對內容物進行檢查包括本發明的膠囊劑、片劑或顆粒劑應符合中國藥典關于膠囊劑、片劑或顆粒劑項下的有關規定。對含有的阿魏酸進行含量測定包括以下步驟阿魏酸采用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇或乙晴∶0.085％磷酸溶液＝1.6∶8.4為流動相；檢測波長為324nm，理論板數以阿魏酸峰計算不得低于5000；精密稱取阿魏酸對照品，用甲醇溶解并制成每1ml含阿魏酸10μg，即得對照品溶液；取膠囊劑、片劑各1.0g或顆粒劑5g，精密稱定，置回流瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，水浴回流45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，用0.45μm的微孔濾膜濾過，取濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、片劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.05mg/g、顆粒劑中含當歸以阿魏酸計，不得少于0.005mg/g。
全文摘要
本發明涉及一種補血當歸制劑的質量控制方法，與現有技術比較，本發明針對原有制劑補血當歸精質量控制標準簡單，產品質量不易控制等缺點，對本制劑的質量控制方法進行了研究，提高了補血當歸制劑的質量標準，保證了本制劑的臨床療效。
文檔編號A61P7/06GK1785220SQ20051000331
公開日2006年6月14日 申請日期2005年12月9日 優先權日2005年12月9日
發明者葉湘武, 張梅 申請人:貴州益佰制藥股份有限公司