抗皰疹藥物組合物、生產基于其的劑型的方法及其使用方法

專利名稱：抗皰疹藥物組合物、生產基于其的劑型的方法及其使用方法
技術領域：
本發(fā)明涉及免疫學領域，尤其涉及提供新的抗皰疹藥物組合物，生產基于其的劑型，以及其使用方法。
背景技術：
現(xiàn)在，下面的化學制劑通常用于對抗皰疹病毒無環(huán)鳥苷、利巴韋林、磷甲酸、阿糖腺苷等[1]。相應的疫苗具有關于皰疹病毒特定的活性。在俄羅斯和其它國家，已經開發(fā)了許多抗皰疹疫苗，包括基于滅活的病毒體的那些。它們在，例如俄聯(lián)邦專利No.2014084，1994，No.2085582，1997，No.2085583，1997，美國專利No.4816250，1989，No.5215745，1993，No.5602023，1997中進行了描述。
在最近幾年，已開發(fā)了抗皰疹疫苗制劑，其中考慮到了皰疹病毒的基因結構，并且它包含DNA片段和一些其它成分。
這樣的疫苗是，例如包含DNA片段以及其編碼的肽的重組皰疹病毒疫苗(2002年5月14日的美國專利No.6387376)。該疫苗可以用于腹膜感染。包含單純皰疹病毒以及糖蛋白(gp)D和脫酰脂質A-單磷酸的復合皰疹病毒疫苗(塞浦路斯申請，引自相同的2002年10月10日的美國申請No.2002147167)。
包含滅活皰疹病毒的疫苗主要定位于動脈粥樣硬化斑。這是一種多價疫苗，它包含與藥學上可接受的載體或稀釋劑結合的HSV-1，HSV-2，HSV-6，人巨細胞病毒，EB病毒(2002年10月29日的美國專利6471965)，編碼皰疹病毒糖蛋白gp50，gpII，gpIII，gpI，HSV gD，牛皰疹病毒gI，HV gB，EB VgB，gH，人巨細胞病毒gB的重組DNA(2003年10月1日的荷蘭專利9900034)。
一種包含糖蛋白D2t，對抗單純皰疹病毒的疫苗，該疫苗還包含佐劑TH-1，3-DMPL或鋁鹽(已公開的2003年4月29日的申請EP1109574)。同樣已知的是一種對抗單純皰疹病毒的疫苗，它包含HSV的肽表位特征(已公開的2003年11月27日的申請WO03099860)。最近的進展之一是基于突變皰疹病毒的活疫苗，它在38.5℃或更高溫度下在機體中起作用。它適于在動物中使用(2004年4月22日的美國專利2004076642)。
從上面所述中可知，如在我們以前的創(chuàng)造性開發(fā)中所推薦的，在綜合治療中包括免疫活性物質，例如干擾素和抗氧化劑是有利的(見，例如俄聯(lián)邦專利No.2142816，1999)，其中也顯示了便于患者的劑型之一(以栓劑的形式)。我們把此創(chuàng)造性的開發(fā)當作與本發(fā)明接近的類似物。
化學治療劑不總是十分有效，因為它們不僅僅對皰疹病毒具有特異作用，原則上是多活性的并且可以用于其它病毒疾病中。
上面引用的疫苗制劑，雖然是特異的并且已在經滅活和減毒的皰疹病毒株的基礎上被制備，但不全部適于治療人。為了成功地抗擊在高度組織的機體，特別是在人類機體中的病毒，必需考慮體液和細胞因素、免疫系統(tǒng)狀態(tài)、病毒感染的嚴重程度、疾病的階段(潛在性感染，病情惡化等等)。
在早先的時候，用α-皰疹病毒亞科HSV-1的實驗已經揭示了其免疫抑制活性。T細胞增殖的抑制可以與對異種抗原的體液應答的缺陷結合。宿主對柯薩奇B病毒感染的敏感性、對保存的綿羊紅細胞正常應答增強的這一事實證明了血清2型單純皰疹病毒(HSV-2)與小鼠免疫系統(tǒng)相互作用的復雜特征。肺泡或腹膜巨噬細胞的感染導致它們執(zhí)行抗體依賴的細胞毒性效應物功能的能力的抑制。在施用后不同時間段，病毒抑制了小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬活性。在感染早期，檢測到肺泡巨噬細胞中的吞噬活性暫時增強，接著該功能被抑制。病毒的免疫抑制活性是通過在人血的外周單核細胞培養(yǎng)物中模擬該作用進行研究的。在感染及適當孵育后，分離自然殺傷細胞(NK)并評價它們的細胞毒性。在與描述的系統(tǒng)作用的過程中，確定了只有當單核細胞存在于外周血單核細胞培養(yǎng)物中時，病毒才抑制NK的細胞毒功能。單核細胞從系統(tǒng)中去除取消了病毒誘導的抑制的發(fā)生；在引入單核細胞后，免疫缺陷重新形成。也確定了通過皰疹病毒調節(jié)的一種類型抑制的發(fā)生是通過單核細胞來實現(xiàn)的。也有關于皰疹病毒對調節(jié)T細胞的直接作用的數(shù)據(jù)，它導致合成以及與白細胞介素-2相互作用能力的損害[2]。
因此，所描述的皰疹病毒對免疫活性細胞和免疫狀態(tài)作為一個整體的作用機制提示，將抗病毒化合物包含到那些藥物中是必需的，所述藥物特異地影響免疫系統(tǒng)以及在由單純皰疹病毒引起的機體病變時，使細胞代謝正常，特別是在遲緩的、復發(fā)的及對藥物治療很不敏感的疾病的情況下，該疾病傾向于變?yōu)槁约膊?，慢性病毒感染也屬于這一類別。
雖然上面引用的疫苗制劑有相當大的優(yōu)勢，但在所述制劑中沒有考慮被皰疹病毒感染的患者機體狀態(tài)的某些重要方面。在患有皰疹(特別是以其慢性形式)的患者中，觀察到細胞及體液免疫異常，出現(xiàn)糖皮質激素分泌增強，以及觀察到病毒感染的細胞和組織的代謝的急性損傷。
研究顯示，在患者中免疫調節(jié)藥物及其使用方案的選擇是由免疫學家根據(jù)主要疾病的嚴重程度和類型、伴發(fā)的病理學以及顯示的(有時是隱藏的)免疫缺陷而確定的。
在單核細胞-巨噬細胞系統(tǒng)的細胞病變時，使用Polyoxidonium，Licopid。在單核細胞-巨噬細胞系統(tǒng)中最嚴重形式的病變情況下，使用粒細胞-巨噬細胞集落-刺激因子的制劑，莫拉司亭(生白能)、非格司亭(優(yōu)保津)。
在細胞介導的免疫的缺陷情況下，使用下列藥物之一Polyoxidonium，Tactivinum，Thymoptinum，Thymogenum，胸腺素(Thymalinum)。在由B淋巴細胞引起的抗體合成障礙中，使用Myelopidum，Polyoxidonium。
在具有免疫調節(jié)特性的制劑中，可以辨別三個主要的組，它們用于實際衛(wèi)生保健微生物來源的制劑(Pyrogernalum、Proidigiosanum、Ribomunyl、核酸鈉(Sodium nucleate)及其它)，內源性制劑胸腺制劑(Tactivinum、胸腺素、Thymoptinum、Thymactidum、胸腺刺激素及其它)，骨髓來源的制劑(Myelopidum)、細胞因子(莫拉司亭)、Reaferonum及其它)，化學純合成的制劑具有顯示的免疫調節(jié)特性的治療制劑(例如Diuciphonum及其它)、內源性來源的物質的類似物(Licopid、Thymogenum及其它)、真正合成的制劑(Polyoxidonium及其它)[3]。
已知在高等動物中，對于對抗感染性疾病，即最簡單的活病原體細菌、微生物、真菌、病毒等等，免疫系統(tǒng)是必需的。在無脊椎動物，例如在昆蟲中存在免疫力嗎？尋找對該問題的答案導致了一類新的獨特物質的發(fā)現(xiàn)。
昆蟲不擁有與哺乳動物具有的類似的免疫系統(tǒng)。在昆蟲中，產生的物質能阻斷進入它們機體的外來蛋白質。然而，很久就知道昆蟲能抗擊致病微生物。在1980年，以斯德哥爾摩大學(瑞典)的Hans Boman為首的一組研究人員成功地確定了以下內容將細菌感染的溶液注入到惜古比天蠶(Hyalophora cecropia)蛾的幼蟲中，然后收集由感染的幼蟲分泌的物質并進行分析。結果，科學家們獲得了兩個新的化合物—由35到39個氨基酸組成的肽分子。它們被命名為殺菌肽。殺菌肽的抗微生物活性證明是非常高的[4]。
原則上，很久就已經知道包含由24到40個氨基酸組成的短分子的抗微生物物質。半個多世紀以前，分離了抗微生物肽類短桿菌肽和乳鏈菌肽，它們被廣泛地用于制藥及食品工業(yè)。植物抗菌肽類和來自蜜蜂毒液的肽類在很久以前就被描述過。然而，Boman的發(fā)現(xiàn)還是激起了興趣。一方面，分離的肽類初看起來與包含于蜜蜂毒液中熟悉的物質峰毒肽非常類似，但有一個小的區(qū)別與峰毒肽不同的是，殺菌肽僅殺死大腸桿菌類型的細菌(所謂的革蘭氏陰性細菌)細胞，并不作用于其它微生物或高等生物的細胞。
研究者中占主要的意見是，抗微生物肽是由沒有發(fā)育的免疫系統(tǒng)的低等動物的分泌器官產生的。據(jù)顯示，哺乳動物—兔、母牛以及甚至人類—也能分泌類似的物質。這主要發(fā)生于腸、呼吸道和輸尿管的區(qū)域。持續(xù)不斷地產生肽，甚至在機體的靜止狀態(tài)，而當器官感染或損傷時，這些肽的合成發(fā)生突然發(fā)作。
抗微生物肽類，雖然它們在效能上稍微差于抗生素，但起作用快得多，并且，這是最重要的，消滅對已知抗生素耐受的細菌。然而，只有那些不引起哺乳動物細胞溶血作用的肽，可以作為抗生素和抗真菌劑用于臨床[5]。
上述肽類可以不同的方式“去除”病毒。首先，它們中的一些只是直接與病毒相互作用，阻斷其活性。以這種方式，它們滅活病毒，例如，口炎病毒和甚至HIV。其次，在感染的機體中肽類可以阻斷HIV病毒體的增殖。殺菌肽和蜂毒肽以這種方式作用。

發(fā)明內容
本發(fā)明的技術問題是提供一種新的、更加有效的和進步的復合制劑，其不僅特異地直接作用于單純皰疹病毒，并且也確保對作為一個整體的機體的加強的免疫調節(jié)作用，動員所有機體潛能在細胞和體液水平來抗擊病毒。
所提出的問題通過以下方案得以解決一種抗皰疹的病毒體制劑，該制劑包含經福爾馬林或γ-輻射滅活的血清1型或2型的單純皰疹病毒，并進一步含有高技術免疫調節(jié)劑Polyoxidonium，氨基酸纈氨酸和賴氨酸，以及至少2種氨基酸的組合，該氨基酸選自組苯丙氨酸、亮氨酸、蘇氨酸、組氨酸、精氨酸、蛋氨酸中。藥物組合物具有下列成分的比例抗皰疹制劑-106到107噬斑-形成單位/毫升懸液Polyoxidonium 0.03-0.06克纈氨酸0.18-0.25克賴氨酸0.15-0.30克2種代謝性氨基酸的組合 0.12-0.27克生理液體介質 到100毫升因為使用的生理介質可以用，例如Eagle’s培養(yǎng)基來制造，用于疫苗制劑。
該組合物可以進一步包含數(shù)量為每100毫升0.22到0.24克的人白蛋白作為穩(wěn)定劑，以及在組合物的制劑中總量為0.05到3.5％的2-3種水溶性和脂溶性維生素的組合，該維生素選自組硫胺素、核黃素、煙酰胺、吡哆醇、抗壞血酸、視黃醇、生育酚或它們的混合物。
在將異亮氨酸摻入到組合物中時，治療皰疹感染的有效性增加到相當?shù)某潭?，與對照比較增加了10-28％。異亮氨酸可以每100毫升組合物0.11-0.22克的量包含于制劑的劑型中。
這樣的制劑適于治療1和2型單純皰疹感染。為了這個目的，選擇對應于每一類型皰疹的氨基酸與維生素的組合，根據(jù)患者的狀況選擇劑量和給藥方案。
本發(fā)明的主題是包含下列成分的抗皰疹組合物病毒體疫苗抗皰疹制劑-106-107噬斑-形成單位/毫升懸液，通過福爾馬林或γ-輻射滅活，Polyoxidonium、還有氨基酸纈氨酸和賴氨酸，以及至少2種氨基酸的組合，該氨基酸選自下列組苯丙氨酸、亮氨酸、蘇氨酸、組氨酸、精氨酸、蛋氨酸。新成分的詳細描述和它們對于我們組合物的重要性在下文中介紹。
最新一代國內的免疫調節(jié)劑-Polyoxidonium(PO)-是一種非常有效的免疫活性劑。PO是1，4-亞乙基-哌嗪N-氧化物和(N-羧乙基)-1，4-亞乙基-piperasinium溴化物的共聚物。它是一種冷凍干燥的多孔物質，帶淺黃色、易溶于水、分子量為60000到100000。除了免疫刺激作用，PO還產生顯著的解毒、抗氧化和膜穩(wěn)定作用。
最近，我們使用PO進行了許多實驗，同時使用抗皰疹疫苗，它們通過胃腸外施用聯(lián)合應用。在實驗動物的感染(兔角膜炎、豚鼠生殖器皰疹、小鼠腦膜腦炎)模型上，這些實驗得出了陽性結果。這些實驗的結果顯示于表1中。
表1

注在接種疫苗的動物中，沒有使用Polyoxidonium與使用其的病毒中和抗體濃度的差異顯著性**P≤0.01；*P≤0.05。
我們的研究顯示，對于帶有不同形式皰疹病毒的試驗個體的最佳作用是由高技術合成藥物Polyoxidonium(PO)產生的。
在體內，PO對免疫系統(tǒng)產生更復雜和多方面作用。因為任何免疫反應的發(fā)生開始于單核細胞-巨噬細胞系統(tǒng)的細胞，并且因為由單核細胞/巨噬細胞產生的細胞因子具有多效性作用，在PO作用下它們功能活性的增強導致細胞及體液免疫性二者的激活。所以，特別地，在引入PO連同低劑量的抗原時，相對于對照針對該抗原的抗體合成發(fā)生了5到10倍的增強。重要的是注意到，這種增強可以在對所給定抗原有遺傳決定的弱反應的動物中觀察到。因此，PO具有調動機體的所有因素來保護機體免受抗原特性外部因子破壞的能力，并且只要它發(fā)生于機體免疫反應的發(fā)生中，該調動就以自然方式延長。這些觀察使我們能夠在過多的現(xiàn)代免疫刺激劑之中僅選擇Polyoxidonium，因為其成功用于復合抗皰疹藥物組合物的制劑中。
我們成功地根據(jù)經驗確定，必需氨基酸纈氨酸和賴氨酸，以及還有由我們從許多已知氨基酸中選擇的一些其它氨基酸是組合物制劑中非常有效的成分。
我們使用的氨基酸除了通常已知的特性之外，還具有以下特性組氨酸是肌肽和鵝肌肽的一部分，在血紅蛋白形成中起重要作用，對紅細胞的生成是必需的。它有助于控制血液中糖水平并產生能量。
亮氨酸對骨、肌肉的生長和愈合是必需的。在亮氨酸代謝中，釋放能量，它有助于穩(wěn)定血液中糖水平。研究發(fā)現(xiàn)在某些情況下，亮氨酸缺乏可引起低血糖、生長遲緩、體重減輕、腎和甲狀腺變化。
賴氨酸增強免疫系統(tǒng)，有助于骨的生長和膠原的形成，改善注意力，具有直接的抗皰疹活性。膳食中缺乏賴氨酸導致血液循環(huán)障礙(紅細胞數(shù)量減少，紅細胞中血紅蛋白含量減少)。缺乏可以導致肌肉消瘦、骨鈣化障礙、肝臟和肺臟中的變化、特別是在衰老及老年患者中。
蛋氨酸用于膽堿合成，因為它減少作為一個整體肝臟和機體中的脂肪貯存，并降低膽固醇的量，所以被稱為“抗脂肪肝劑”。建造新的骨組織、抑制onchypathies、保護腎臟并且是重金屬的天然螯合劑。蛋氨酸對于腎上腺功能和腎上腺素的合成非常重要，它對于病毒感染細胞中的代謝控制至關重要。
苯丙氨酸與甲狀腺和腎上腺的功能有關，參與甲狀腺的主要激素甲狀腺素合成的核心的形成，參與腎上腺素的形成。在機體中，苯丙氨酸可以轉化為thyrosine，其用于合成兩個主要的神經遞質，多巴胺和腎上腺素，在神經體液水平控制細胞代謝。苯丙氨酸在控制痛和癢感覺方面是有效的。此外，由于縮膽囊素的分泌，苯丙氨酸具有抑制食欲作用。
纈氨酸纈氨酸缺乏可能導致神經纖維的髓磷脂包被的損傷并導致機體的負氫平衡的產生，這對病毒感染的患者是非常危險的。
丙氨酸增強免疫系統(tǒng)，參與葡糖糖代謝。
精氨酸精氨酸缺乏可引起毛發(fā)脫落、便秘、hepathopathies、并減緩傷口愈合，包括由病毒毒素損傷引起的那些。
異亮氨酸具有獨特的性質，其首次用于配制抗病毒疫苗—僅從外面(食物)中接受的該氨基酸在人機體中(主要在腸部位)刺激產生抗微生物肽，該肽與能消滅皰疹病毒的殺菌肽相似。
這樣的組合物(特別是補充有增強對施用藥劑免疫反應的微量元素)，也允許使用其來更有效地抗擊由血清1或2型皰疹病毒引起的病毒損傷以及該病的一些慢性形式。
通過對受皰疹病毒侵襲的生物施用抗皰疹藥物組合物，來使用該抗皰疹藥物組合物的方法是本發(fā)明的另一個主題，其中上面表征的組合物以有效劑量，以適當?shù)膭┬?，以選自組經口、舌下、鼻內、直腸、陰道、胃腸外、結膜下的適當方式或以可咀嚼形式對生物施用。
在皰疹病例中微量元素在免疫系統(tǒng)中的作用，通過使用含有我們組合物的栓劑進行了詳細研究。
下列微量元素(MEs)的作用機理存在于免疫系統(tǒng)中1.對特定受體的作用對定位于細胞質膜上的受體HLA-系統(tǒng)、MHC-系統(tǒng)(Ni，Cr，Hg)。
粘附素選擇蛋白和整聯(lián)蛋白(Mn，Hg)。
轉鐵蛋白的受體(Al，Ga)參與NK-介導的細胞溶解的受體(Zn)。
細胞因子受體(Zn)。
T細胞受體(Zn，Hg)。
鈣和鎂離子的受體(Zn，Mn，Be，Cd，Hg及其它)。
免疫球蛋白受體(Zn)。
定位于細胞內區(qū)室的受體線粒體(Fe，Zn)、細胞骨架LIM-蛋白質(Zn，Se，Li)。
線粒體、內質網上的鈣的細胞內受體(Cd，Zn)。
2.對酶活性的作用許多必需的MEs是許多酶的催化位點的成分。例如，Mn是免疫細胞過氧化物歧化酶(SOD)的必需部分，Se形成谷胱甘肽過氧化物酶(同工酶VI)催化位點的部分，Zn是控制其它細胞內蛋白質轉錄水平的眾多Zn-指蛋白的最重要部分。MEs對酶活性的作用途徑同樣存在，它存在于金屬酶的競爭性抑制作用或變構激活作用中。例如，Zn是Ca+2+，Mg2+-依賴的核酸內切酶的競爭性抑制劑。Zn的這種作用決定了其在免疫系統(tǒng)中作為抗-細胞程序死亡因子的主導作用。
3.對激素活性的作用-MEs作為激素的組成部分。
Zn是胸腺素的關鍵成分，胸腺素是一種實現(xiàn)胸腺對免疫系統(tǒng)T-細胞分支的作用的激素。
MEs和激素的儲存Zn，Cr參與胰島素分子的儲存和穩(wěn)定，胰島素對機體所有胰島素依賴性細胞產生多種調節(jié)作用，免疫細胞也屬此類。鋅提供神經垂體激素的細胞內儲存和穩(wěn)定。
參與激素降解和消除已知血管緊張素轉化酶是Zn依賴性的。
參與激素作用的機理。
4.對載體蛋白質的作用白蛋白。
金屬硫蛋白，其在機體的網狀內皮系統(tǒng)的單核細胞內合成。
應激蛋白，作為普通的蛋白質在細胞內合成，對應激作用(熱休克、饑餓、UV照射、重金屬作用、慢性感染)有反應。
5.MEs對免疫細胞膜的物理化學作用已發(fā)現(xiàn)，例如，硒能產生抗氧化作用，起谷胱甘肽過氧化物酶的輔因子的作用，其提供游離氧物種的失活，其在免疫系統(tǒng)中的產生確保了既毀滅或消除外來因子(寄生蟲或細菌)，又在過多產生單線態(tài)O2。、H2O2、。OH的情況下，引起免疫細胞本身的膜裝置的損傷。O2。、H2O2、。OH的產生與在過渡金屬(Cu，Zn，Mn，F(xiàn)e)的影響下，誘導Haber-Weiss和Fenton反應有關。
因此，MEs能通過脂質過氧化作用(LPO)的酶和非酶機制的作用，以及通過抗氧化機制的激活，控制細胞膜的物理-化學特性，包括關于不同生物學底物(抗原、感染因子等)的半滲透性的特性。
6.對抗原的呈現(xiàn)、細胞內加工和降解的作用(見第1項)。
7.對免疫記憶的形成的作用，以及還可能，在長期存在記憶細胞中，涉及抗-細胞程序死亡MEs(Zn、Se及其它)。
8.對免疫球蛋白的產生的作用(Zn、Be)。
9.對趨化性、粘附和吞噬作用過程的作用[6，7]。
對實驗動物的許多試驗使得選擇最有效的微量元素成為可能，將微量元素摻入我們開發(fā)的劑型制劑(栓劑)中從組鋅、鉻、硒和鎳中選擇的2-3種微量元素。所述微量元素在劑型制劑中的存在增強了我們選擇的免疫調節(jié)劑的作用，相對于對照(沒有MEs)增強了25-30％。
下面顯示的是表2，它顯示了在補充組合物的制劑之前和之后，在被皰疹病毒感染的實驗動物中免疫指數(shù)的水平，所述組合物含有氨基酸(包括異亮氨酸)和Polyoxidonium。
表2


從表中看到PO對免疫指數(shù)的作用，其中細胞免疫性和免疫活性蛋白質的水平顯著增加。應該注意到，在我們提出的所有組合中，根據(jù)病毒的類型，將氨基酸(纈氨酸和賴氨酸、還有異亮氨酸和另外由選自組苯丙氨酸、亮氨酸、丙氨酸、蘇氨酸、組氨酸、精氨酸、蛋氨酸的至少2種氨基酸組成的組合)摻入組合物中，加速了損傷組織的上皮再形成(相對于原型為15％到36％，見上面)。將Polyoxidonium與氨基酸共同摻入組合物中不僅活化了免疫性，其使得顯著延長緩解期，加速皮膚的上皮再形成和愈合過程，并且在一些情況下基本上成功地治愈個體動物中的一些慢性形式的疾病(12％的所有試驗個體)成為可能。
上面表征的組合物可以具體化為其中可以將固體、軟的或液體物質用作載體的劑型。
使用固體載體的組合物的最終形式包含片劑、糖錠劑、顆粒劑、小藥囊或放于膠囊中的粉末。
使用液體載體由所述組合物制備的最終產物包含溶液、凝膠劑、乳劑、混懸劑、合劑、糖漿劑或搽劑。
使用軟載體的組合物包含軟膏、霜劑、糊劑、栓劑、植入物或咀嚼片或軟錠劑。
上述藥物形式使用常規(guī)步驟和在這種情況下通常采用的輔助物質生產。
使用常規(guī)栓劑制造技術制備基于上述藥物組合物的栓劑的方法是本發(fā)明的另一個主題，其中將上面描述的藥物組合物的活性成分和選自組鋅、鉻、硒和鎳中的2-3種微量元素，通過下面常規(guī)技術進一步引入基于可可油的栓劑物質中。將可溶性螯合物形式的一組微量元素引入栓劑制劑，其量為基于總重量的0.01到0.08％。
因此產生于一組76只實驗動物的檢測栓劑的結果顯示，使用新制劑不僅激活免疫性，并且使相當?shù)匮娱L緩解期、加速皮膚和粘膜組織的上皮再形成和愈合、并且在一些情況下在特別個體中基本上成功地治愈疾病(患有慢性形式疾病的所有檢測受試者的12％)成為可能。
我們認為，向栓劑制劑中摻入在所有水平上控制，也就是PO、纈氨酸和賴氨酸、異亮氨酸的代謝過程、刺激腸道細胞產生病毒阻斷性肽(殺菌肽類型的)的非常重要的成分，所有組的維生素，以及MEs鋅、鉻、硒和鎳，在該結果中起重要的作用。
本發(fā)明得到了特別的動物試驗支持。
主要的性能標準(相對于接近的類似物)達到表面恢復(完全的上皮再形成)的時間減少15-36％，緩解的持續(xù)時間平均增加到6-7個月，在98.7％的病例中，涂片中沒有病毒(PCR診斷)的情況下，抗病毒免疫性的激活，12％的跟蹤動物基本上完全治愈。
在試驗的動物中(兔的皰疹性角膜炎、豚鼠的生殖器皰疹)，52個個體感染有急性形式的血清1型和2型單純皰疹病毒，并且24個個體感染有慢性形式的單純皰疹。將患有急性形式單純皰疹的動物分為三組在第一組中，用以原型描述的皰疹疫苗進行治療；在第二組中，用新的藥物組合物；在對照組中，動物接受含有已知抗皰疹制劑的軟膏和溶液形式的化學療法?；加新孕问絾渭儼捳畹膭游锝M接受有一組完整的氨基酸、維生素和微量元素的新栓劑。
結果在第一組中，完全上皮再形成平均發(fā)生于治療的第6天，并且注意到在第二組中完全上皮再形成平均發(fā)生在治療的第4-5天。在對照組中，平均從治療開始的第7-10天顯示了完全表面恢復。在對照的涂片中，在95.2％的第一組、在97.8％的第二組和在92.5％的對照組中沒有檢測到病毒。觀察到在第一組在92％的病例中緩解持續(xù)時間直到4個月，在第二組在85％的病例中直到6-7個月。同時，在對照組中，僅在28％的病例中觀察到緩解持續(xù)時間直到4個月。在第一組中在92.1％的病例中記錄到高度增強的免疫反應，而在第二組中在98.6％的病例中記錄到該反應，具有明顯的顯著性(p＜0.01)。因此，在治療后注意到在兩組試驗動物的血清中自然殺傷細胞、CD8+表型的T-淋巴細胞的百分比及絕對計數(shù)增加的趨勢(在第二組更高11-18％)，以及揭示了病毒誘導的干擾素-α和促分裂原誘導的干擾素-γ產生的增加。
將獲得的以20毫升的量服用的藥物懸液與0.01-0.03毫升的2-3種MEs鹽的每種溶液和可可油混合，得到總重量100克，通過常規(guī)方法由所得到的物質制備栓劑，每個栓劑重0.15-0.20克。這種栓劑包含≤400微克/克蛋白質，具有≤2.2％的殘余濕度和生理學pH值7.3±0.2，是無毒的并能誘導大鼠中病毒中和性抗體的合成，關于HSV-1中和指數(shù)等于3.0lg TCD50/毫升，關于HSV-2中和指數(shù)等于2.0lg TCD50/毫升，其中TCD50表示在50％的被病毒感染的細胞單層的試管中產生細胞病作用的劑量。
由于新的高度免疫原性組合物的開發(fā)，保持了所述制劑特異活性的抗原性和穩(wěn)定性，增強了細胞水平的個體器官的抗皰疹特性，不但在急性皰疹感染中而且在慢性皰疹感染中提高并且延長了機體抵抗力。
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權利要求
1.抗皰疹藥物組合物，它包含抗皰疹病毒體疫苗制劑，該制劑含有通過福爾馬林或γ-輻射滅活的血清1型或2型單純皰疹病毒和免疫活性物質，其特征在于它包含Polyoxidonium、纈氨酸、賴氨酸和由選自組苯丙氨酸、亮氨酸、丙氨酸、蘇氨酸、組氨酸、精氨酸、蛋氨酸的至少兩種代謝性氨基酸組成的組合，具有下列成分的比例抗皰疹制劑-106到107噬斑形成單位/毫升懸液Polyoxidonium 0.03-0.06克纈氨酸0.18-0.25克賴氨酸0.15-0.30克代謝性氨基酸的組合0.12-0.27克生理液體介質 到100毫升
2.根據(jù)權利要求1的組合物，特征在于它以每100毫升組合物0.11-0.22克的量進一步包含氨基酸異亮氨酸。
3.根據(jù)權利要求2的組合物，特征在于它以每100毫升0.22-0.24克的量進一步包含人白蛋白。
4.根據(jù)權利要求3的組合物，特征在于在組合物的制劑中以0.05到3.5％的總量進一步包含選自組硫胺素、核黃素、煙酰胺、吡哆醇、抗壞血酸、視黃醇、生育酚或它們的混合物的一種或多種水溶性維生素和脂溶性維生素。
5.根據(jù)權利要求4的組合物，特征在于它可以被配制為其中使用固體、軟的或液體物質作為載體的劑型。
6.根據(jù)權利要求5的組合物，特征在于使用固體載體的最終形式是片劑、糖錠劑、顆粒劑、小藥袋或置于膠囊中的粉末。
7.根據(jù)權利要求5的組合物，特征在于使用液體載體的終產物是溶液、凝膠劑、乳劑、混懸劑、合劑、糖漿劑或搽劑。
8.根據(jù)權利要求5的組合物，特征在于使用軟載體的終產物為軟膏劑、霜劑、糊劑、栓劑、植入物或咀嚼片或軟錠劑。
9.制備基于權利要求1-4中表征的藥物組合物的栓劑的方法，該方法包括通過按照常規(guī)技術，將活性成分和作為載體的可可油混合，特征在于引入權利要求1-4中表征的組合物和一種或多種選自組鋅、鉻、硒和鎳的微量元素(MEs)作為活性成分。
10.根據(jù)權利要求9的方法，特征在于以基于組合物總重量的0.01-0.08％的量引入可溶性螯合物形式的MEs。
11.通過對被皰疹病毒侵襲的生物給予抗皰疹藥物組合物而使用該抗皰疹藥物組合物的方法，特征在于以有效劑量、適合的劑型、適合的途徑對所述生物給予權利要求1-8中表征的組合物，所述途徑選自組經口、舌下、鼻內、直腸、陰道、胃腸外、結膜下或以可咀嚼形式。
全文摘要
本發(fā)明的抗皰疹組合物包含病毒體藥物，該藥物含有通過福爾馬林或γ－輻射滅活的血清1型和2型單純皰疹病毒。所述組合物還包含高技術免疫調節(jié)劑Polyoxidone、纈氨酸和賴氨酸氨基酸，以及包含選自組苯丙氨酸、亮氨酸、丙氨酸、蘇氨酸、組氨酸、精氨酸、蛋氨酸的至少兩種氨基酸的組合，并且可以包含能在細胞水平刺激抗皰疹肽形成的異亮氨酸。該組合物可以被包含在不同的藥物制劑中，并且其特性使得使用所述組合物用于急性和慢性皰疹病變成為可能。
文檔編號A61K31/74GK1889976SQ200480036345
公開日2007年1月3日 申請日期2004年10月20日 優(yōu)先權日2003年10月30日
發(fā)明者A·R·K·穆薩薇, I·F·巴林斯基, A·A·拉扎連科, R·V·彼得羅夫, R·M·海托夫, M·R·海托夫 申請人:盧斯根有限責任公司