專利名稱：腺苷受體激動劑在治療中的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及腺苷受體激動劑作為治療化合物的用途。
腺苷是無處不在的局部激素/神經遞質，作用于四種已知的受體，腺苷A1，A2A，A2B，A3受體。腺苷通常起平衡組織中能量的供給與需求的作用。例如，在心臟中釋放的腺苷通過A1受體在結節和心房中的介導作用，減慢心臟(Belardinelli，L &Isenberg，GAm.J.Physiol.224，H734-H737)，同時地擴張冠狀動脈而增加能量(亦即葡萄糖，脂肪和氧)供給(Knabb等，Circ.Res.(1983)53，33-41)。相似地，在炎癥中腺苷起抑制炎癥活性的作用，而在過度的神經活性的狀況(例如癲癇)下，腺苷抑制神經發放(Klitgaard等，EurJ.Pharmacol.(1993)242，221-228)。這個系統，或其變體，存在于所有的組織中。
腺苷本身能用于診斷和治療室上性心動過速。已知腺苷A1受體激動劑用作強效鎮痛劑(Sawynok，J.Eur J Pharmacol.(1998)347，1-11)。已知腺苷A2A受體激動劑用作抗炎癥藥(例如，從US 5877180和WO 99/34804中已知)。在實驗動物中，已經顯示A2A受體激動劑有效對抗各種狀況包括敗血癥，關節炎，和由腎、冠狀或腦動脈閉塞引起的局部缺血/再灌注損傷。在這些情況中的共性因素是由這種受體對大多數的，如果不是所有的，炎癥細胞的抑制效應引起的炎癥反應的降低。
然而，無處不在的腺苷受體的分布意謂著給予腺苷受體激動劑將引起不利的副作用。這通常地妨礙以腺苷為基礎的治療的發展。選擇性A1受體激動劑引起心動過緩。第一個選擇性A2A受體激動劑(2-[4-(2-羧基乙基)苯乙胺]-5′-N-乙基甲酰胺腺苷，或CGS21680)，作為潛在的抗高血壓藥在2A期臨床試驗中被測試。然而給藥引起血壓大下降和隨之而來的心輸出量的增加。FR 2162128公開腺苷衍生物(包括2-烷氧基腺苷衍生物，其包含不少于兩個碳原子的低級烷基基團)具有降血壓和冠狀血管擴張活性。
Bartlett等(J.Med.Chem.1981，24，947-954)公開了1-甲基異鳥嘌呤核苷類似物的評價。這些類似物包括2-甲氧基腺苷(也被稱為海綿核苷)。這個和其它的化合物在嚙齒動物口服給藥后測試它們的骨骼肌松弛，低體溫，心血管和抗炎癥的效果(抗炎癥的活性由抑制角叉菜膠引起的大鼠爪水腫評定)。在大鼠中口服20mg/kg 2-甲氧基腺苷使角叉菜膠引起的炎癥受到25％的抑制。然而，以這個劑量給予這個化合物后也觀察到平均血壓(41％)和心率(25％)降低。
因此，存在一種提供可給予具有最少副作用的腺苷受體激動劑的需要。
依照本發明，在此提供下式化合物的用途 其中R是C1-4烷氧基和X是OH；用于制造用于預防、治療或改善癌，炎癥，自身免疫疾病，缺血-再灌注損傷，癲癇，敗血癥，敗血性休克，神經變性(包括阿爾茨海默氏病)，肌肉疲勞或肌肉痛性痙攣(尤其運動員的痛性痙攣)的藥物。
依照本發明，在此也提供下式化合物的用途 其中R是C1-4烷氧基和X是H；用于制造用于預防、治療或改善癌，炎癥，自身免疫疾病，缺血-再灌注損傷，癲癇，敗血癥，敗血性休克，神經變性(包括阿爾茨海默氏病)，肌肉疲勞或肌肉痛性痙攣(尤其運動員的痛性痙攣)的藥物。
特別地，依照本發明在此提供的式I或II化合物的用途，用于制造用于預防、治療或改善炎癥或自身免疫疾病，包括類風濕性關節炎，骨關節炎，類風濕性脊椎炎，痛風性關節炎，和其它關節炎狀況，銀屑病，哮喘，慢性阻塞性肺疾病，纖維化，多發性硬化癥，內毒素性休克，革蘭氏陰性休克，中毒性休克，出血性休克，成人呼吸窘迫綜合征，腦型瘧TNF-增強的HIV復制，AZT和DDI活性的TNF抑制，器官移植排斥，繼發于癌的惡病質，HIV，慢性肺炎疾病，矽肺，肺肉瘤病，骨吸收疾病，再灌注損傷(包括缺血性事件，例如心肌梗塞，中風后再灌注引起的對器官的損傷)，自身免疫損傷(包括多發性硬化癥，急性感染性多神經炎，重癥肌無力)移植物對宿主的排斥，同種異體移植排斥，歸咎于感染的發熱和肌痛，繼發于感染或惡性腫瘤的惡病質，繼發于獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的惡病質，AIDS有關的復征(ARC)，瘢痕疙瘩形成，瘢痕組織形成，局限性回腸炎病，潰瘍性結腸炎和熱病(pyresis)，過敏性腸綜合征，骨質疏松癥，腦型瘧，細菌性腦膜炎，兩性霉素B治療引起的不良反應，白細胞介素-2治療引起的不良反應，OKT3治療引起的不良反應和GM-CSF治療引起的不良反應的藥物。
特別優選式(I)或(II)的化合物是選擇性腺苷A2A和/或A3受體激動劑，因為據信這樣的化合物將有強的抗炎活性。選擇性腺苷A2A和/或A3受體激動劑意思是指以低于激活腺苷A1受體需要的濃度(優選千分之一至五分之一)激活腺苷A2A和/或A3受體的激動劑。此外，A1受體具有的前炎癥(pro-inflammatory)活性，所以關于對腺苷A2A和/或A3受體選擇性的化合物，這樣的作用被期望最小化。
式(I)的化合物包括2-甲氧基腺苷，2-乙氧基腺苷，2-丙氧基腺苷，2-異丙氧基腺苷，和2-丁甲氧基腺苷。式I的優選化合物是2-甲氧基腺苷，2-乙氧基腺苷，和2-丁甲氧基腺苷。
式(II)的化合物包括3′-脫氧-2-甲氧基腺苷，3′-脫氧-2-乙氧基腺苷，3′-脫氧-2-丙氧基腺苷，3′-脫氧-2-異丙氧基腺苷，和3′-脫氧-2-丁甲氧基腺苷。式II的優選化合物是3′-脫氧-2-丙氧基腺苷，3′-脫氧-2-異丙氧基腺苷，和3′-脫氧-2-丁甲氧基腺苷。
2-甲氧基腺苷被報道在腺苷A2A受體上具有EC50值3μM(Daly，J.W.等，(1993)Pharmacol.46，91-100)。然而，令人驚訝地，這個化合物在血漿濃度0.2μM或更小時具有顯著的抗炎活性。在這些低劑量時2-甲氧基腺苷已經減少了副作用的概率和嚴重性。2-甲氧基腺苷能以作為抗炎劑有效的濃度給藥，但這個濃度低于觀察到副作用的濃度。
同樣相信，式(I)的其它化合物和式(II)的化合物在低劑量時比其它腺苷受體激動劑更有效得多。因此預期式I的化合物和式II的化合物能以一種劑量有效地給藥，在此劑量它們減少了副作用概率和嚴重性，或在此劑量沒有觀察到副作用。這樣的化合物相對于大量的其它腺苷受體激動劑提供了顯著的優點，所述其它腺苷受體激動劑僅在觀察到嚴重副作用的相同濃度下才具有抗炎作用。
式(I)或式(II)的化合物與其它腺苷受體激動劑相比可以選擇地或附加地減少副作用的概率和嚴重性。
給予受治療者的式(I)或式(II)的化合物的量應該為引起的峰血漿濃度小于在pH 7.4時該化合物在腺苷受體上EC50值的量。
化合物的EC50值對不同的腺苷受體(亦即A1，A2A，A2B，A3腺苷受體)可能不同，這一點將被鑒別。給藥的化合物的量應該依照該化合物對不同的受體的最低的EC50值計算。
優選峰血漿濃度是EC50值的千分之一至五分之一，或五十分之一至三分之一(更優選千分之一至二十分之一，百分之一或五十分之一至五分之一，五十分之一至十分之一，或十分之一至五分之一)。優選給藥的量產生的血漿濃度被保持在pH 7.4時該化合物在腺苷受體上的EC50值的千分之一至五分之一之間，更優選在千分之一至二十分之一，或百分之一至五分之一，或五十分之一至五分之一之間，達1小時以上。
為了避免疑問，化合物的EC50值在此處被定義為化合物激發的受體響應為基線受體響應和最大受體響應之間的中間值(halfway)的濃度(當確定時，例如，使用劑量-響應曲線)。
EC50值應該在標準條件(被緩沖至pH 7.4的平衡鹽溶液)下確定。關于使用分離的膜，細胞和組織的EC50測定，這將是在pH 7.4的緩沖鹽溶液(例如，細胞培養基)中，例如如在Daly等的Pharmacol，(1993)46，91-100)，或優選Tilburg等的(J.Med.Chem，(2002)45，91-100)。EC50還可以通過在正常健康的動物中，或甚至在正常健康動物中在正常狀態(亦即氧合的血液，或氧合的等滲介質，也緩沖在pH 7.4)下灌注的組織中測量腺苷受體介導的響應進行體內測定。
選擇地，給予的式(I)或式(II)的化合物的量可以是導致的峰血漿濃度為在腺苷受體上的Kd值的千分之一至二十分之一，千分之一至三分之一，更優選百分之一至五分之一，或五十分之一至十分之一的量。
化合物的Kd值對不同的腺苷受體(亦即A1，A2A，A2B，A3腺苷受體)可能不同，這一點將被鑒別。給藥的化合物的量應該依照該化合物對不同的受體的最低的Kd值計算。
優選地，給予的化合物的量是導致的血漿濃度被保持在該化合物在腺苷受體上的Kd值的千分之一至五分之一之間，更優選在千分之一至二十分之一，或百分之一至五分之一，或五十分之一至五分之一之間，達至少1小時的量。
在每個受體上的化合物的Kd值應該在標準條件下使用來自內源性表達這些受體的組織或細胞的質膜，或來自轉染有編碼腺苷受體基因的DNA載體的細胞的質膜，作為腺苷受體的來源。選擇地，使用表達腺苷受體的細胞的全細胞制備物也可以被使用，對不同受體選擇性的標記配體(例如放射標記)應該在緩沖pH7.4鹽溶液中(例如，Tilburg等，J.Med.Chem，(2002)45，420-429)被使用，以確定化合物在各受體上的結合親和力和由此Kd值。
選擇地，給予的式(I)或式(II)的化合物的量可以是該化合物在與給予所述化合物的受治療者同種的動物中引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的最小劑量的千分之一至五分之一，或五十分之一至三分之一(優選千分之一至二十之一，或百分之一或五十分之一至五分之一)的量。優選地，所述量是引起副作用的最小劑量的十分之一至五分之一。優選地，給藥的量引起的血漿濃度被維持在引起所述副作用的最小劑量的千分之一至二十之一，或百分之一或五十分之一至五分之一之間達1小時以上。
選擇地，給予的式(I)或式(II)的化合物的量可以是產生的血漿濃度為該化合物在與給予所述化合物的受治療者同種的動物中引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的最小血漿濃度的千分之一至五分之一，或五十分之一至三分之一(優選千分之一至二十之一，或百分之一或五十分之一至五分之一)的量。優選地，所述量引起的血漿濃度是引起所述副作用的最小血漿濃度的十分之一至五分之一。優選地，給藥的量引起的血漿濃度被維持在引起所述副作用的最小血漿濃度的千分之一至二十之一，或百分之一或五十分之一至五分之一之間達1小時以上。
預期，給予的式(I)或式(II)的化合物的量應該是0.01至15mg/kg，例如，0.01至5或10mg/kg。所述量可以小于6mg/kg，例如0.01至2mg/kg。所述量可以是至少0.01或0.1mg/kg，例如0.1至2mg/kg，或0.2至1mg/kg。典型的量是0.2或0.6至1.2mg/kg。
對于70kg的人受治療者，優選的劑量小于420mg，優選至少0.7mg，更優選至少3.5mg，最優選至少7mg。更優選7至70mg，或14至70mg。
上述的劑量顯著低于(直到低約100倍)將預期式(I)化合物具有任何有益治療效果所需要的量(基于海綿核苷在腺苷A2A受體上的BC50值)。
式(I)或式(II)的化合物適當的劑量將隨著被治療的受治療者的年齡，性別，體重和狀況，化合物的效能，和給藥途徑等而改變。適當的劑量容易地被本領域技術人員確定。
式(I)的化合物和式(II)的化合物可能特別有效用于預防、治療或改善特殊類型的炎癥，包括關節炎(特別在關節囊的關節炎)，哮喘，銀屑病，和腸炎。
式(I)的化合物和式(II)的化合物可能特別有效用于預防、治療或改善類風濕性關節炎，過敏性腸綜合征或骨關節炎。
依照本發明，在此還提供一種預防、治療或改善癌，炎癥，缺血-再灌注損傷，癲癇，敗血癥，敗血性休克，神經變性(包括阿爾茨海默氏病)，肌肉疲勞或肌肉痛性痙攣(尤其運動員的痛性痙攣)的方法，該方法包括給予式(I)或式(II)的化合物給需要如此預防、治療或改善的受治療者。
涉及式(I)化合物(特別是用于炎癥的預防、治療或改善)的本發明實施方案可以排除2-甲氧基腺苷。
式(I)或式(II)的化合物可以同或不同其它的治療劑一起給予，例如止痛劑(例如阿片制劑，NSAIDs，大麻素類，速激肽調節劑，或緩激肽調節劑)或抗痛覺過敏劑(例如加巴噴丁，普加巴林，大麻素類，鈉或鈣通道調節劑，抗癲癇劑或抗抑郁藥)。
一般而言，式(I)或式(II)的化合物可以使用已知的方法，在任何合適的制劑中，通過任何合適的途徑給予。本發明的化合物優選口服地，腸胃外地，舌下地，透皮地，鞘內地，透粘膜地給予。其它的合適途徑包括靜脈內的，肌內的，皮下的，吸入的和局部的途徑。當口服給予時，給予的藥物的量將通常高于，比方說，靜脈內給予時的量。
合適的組合物，例如用于口服給藥的，包括固體單位劑量形式，和那些含液體的(例如用于注射的)，例如片劑，膠囊，小瓶和安瓿，其中活性劑，經已知的方式，同生理學上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體一起組成配制。適當的稀釋劑和載體是已知的，并包括，例如，乳糖和滑石粉，與適當的粘合劑等一起。
本發明化合物的單位劑量通常地包含5至500mg的活性劑。優選活性劑在藥物組合物的形式中，該組合物包含活性劑和生理學上可接受的載體，賦形劑，或稀釋劑。優選劑量是每千克(人)受治療者0.1至2，例如0.5至1，代表性地約0.2或0.6mg活性劑。在這些水平，能實質上實現有效的治療而沒有相隨的血壓下降(例如，不超過10％)。
預期本發明的化合物優選的給藥頻率是每天兩或三次。
本發明的化合物也用作鑒定更有效的藥物，或具有進一步減少的副作用的藥物的基礎。
涉及式(I)化合物的本發明實施方案可以排除2-丙氧基腺苷，和/或2-異丙氧基腺苷。
涉及式(II)化合物的本發明實施方案可以排除3′-脫氧-2-甲氧基腺苷和/或3′-脫氧-2-乙氧基腺苷。
參照附圖，在下面的實施例中描述本發明的實施方案，其中
圖1顯示2-甲氧基腺苷抑制角叉菜膠引起的炎癥，沒有影響血壓；圖2顯示2-甲氧基腺苷(0.6mg/kg p.o.)對血壓或心率沒有顯著的影響；和圖3顯示給予2-甲氧基腺苷后血漿濃度隨時間的變化。
實施例1圖1A.2-甲氧基腺苷(62.4和624μg/kg i.p.)抑制角叉菜膠(CGN)引起的炎癥，具有比得上吲哚美辛(3mg/kg，po)的效果，而沒有影響血壓；將角叉菜膠(2％，10微升)給予右后爪內，爪的體積由體積描記術(plethysomometry)評定。給予角叉菜膠的同時，給予2-甲氧基腺苷。2-甲氧基腺苷與吲哚美辛(Indo，3mg/kg，po)一樣有效。
實施例2圖2將可植入的無線電遙測術設備置于每組6只大鼠的腹腔內。將設備的壓力導管插在腹主動脈內并在導聯II位置(腹腔的左邊/右肩)將兩個電極埋于皮膚下。將單個鼠置于在輻射感受器(DSI)上它們自己的籠子內進行數據采集。然后評定0.6mg/kg 2-甲氧基腺苷或賦形劑(p.o.)對血壓的影響。A血壓；B心率。
實施例32-甲氧基腺苷在腺苷A2A受體上的EC50值是900ng/ml(3μM)。圖3顯示了給予大鼠0.6mg/kg的2-甲氧基腺苷后血漿濃度隨時間的變化。從中能看到血漿濃度維持在EC 50值的2％以上超過3小時。當峰和維持的血漿濃度為低至8ng/ml時(亦即在體外確定的EC50值的2％)時，觀察到抗炎效果(沒有血壓的變化)。如果峰血漿濃度達到900ng/ml水平(亦即EC50值)時，發生血壓明顯下降，它持續許多個小時。
權利要求
1.式(I)化合物的用途 其中R是C1-4烷氧基和X是OH；在一種劑量下，用于制造用于預防、治療或改善癌，炎癥，自身免疫疾病，缺血-再灌注損傷，癲癇，敗血癥，敗血性休克，神經變性(包括阿爾茨海默氏病)，肌肉疲勞或肌肉痛性痙攣的藥物，所述劑量給予受治療者后引起的峰血漿濃度小于所述化合物在pH7.4腺苷受體上的EC50值。
2.式(II)化合物的用途 其中R是C1-4烷氧基和X是H；在一種劑量下，用于制造用于預防、治療或改善癌，炎癥，自身免疫疾病，缺血-再灌注損傷，癲癇，敗血癥，敗血性休克，神經變性(包括阿爾茨海默氏病)，肌肉疲勞或肌肉痛性痙攣的藥物，所述劑量給予受治療者后引起的峰血漿濃度小于所述化合物在pH7.4在腺苷受體上的EC50值。
3.依照權利要求1的用途，其中所述化合物是2-甲氧基腺苷，2-乙氧基腺苷或2-丁氧基腺苷。
4.依照權利要求2的用途，其中所述化合物是3′-脫氧-2-丙氧基腺苷，3′-脫氧-2-異丙氧基腺苷或3′-脫氧-2-丁氧基腺苷。
5.依照任一上述權利要求的用途，用于預防、治療或改善關節炎，腸炎，類風濕性關節炎，骨關節炎，類風濕性脊椎炎，痛風性關節炎，和其它關節炎狀況，銀屑病，哮喘，慢性阻塞性肺疾病，纖維化，多發性硬化癥，內毒素性休克，革蘭氏陰性休克，中毒性休克，出血性休克，成人呼吸窘迫綜合征，腦型瘧TNF-增強的HIV復制，AZT和DDI活性的TNF抑制，器官移植排斥，繼發于癌的惡病質，HIV，慢性肺炎疾病，矽肺，肺肉瘤病，骨吸收疾病，再灌注損傷(包括缺血性事件，例如心肌梗塞，中風后再灌注引起的對器官的損傷)，自身免疫損傷(包括多發性硬化癥，急性感染性多神經炎，重癥肌無力)移植物對宿主的排斥，同種異體移植排斥，歸咎于感染的發熱和肌痛，繼發于感染或惡性腫瘤的惡病質，繼發于獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的惡病質，AIDS有關的復征(ARC)，瘢痕疙瘩形成，瘢痕組織形成，局限性回腸炎，潰瘍性結腸炎和熱病，過敏性腸綜合征，骨質疏松癥，腦型瘧，細菌性腦膜炎，兩性霉素B治療引起的不良反應，包括阿爾茨海默氏病的神經變性疾病，白細胞介素-2治療引起的不良反應，OKT3治療引起的不良反應和GM-CSF治療引起的不良反應。
6.依照任一上述權利要求的用途，劑量導致的血漿濃度被維持在所述化合物在pH7.4在腺苷受體上EC50值的千分之一和五分之一之間達1小時以上。
7.依照權利要求1至5任一項的用途，劑量導致的血漿濃度被維持在所述化合物在與給予所述化合物的受治療者同種的動物中引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的最小血漿濃度的千分之一和五分之一之間達1小時以上。
8.依照任一上述權利要求的用途，劑量是0.01至15mg/kg。
9.依照任一上述權利要求的用途，劑量是0.1至2mg/kg。
10.依照任一上述權利要求的用途，劑量是0.6至1.2mg/kg。
11.依照任一上述權利要求的用途，其中所述藥物呈包含1至500mg所述化合物的單位劑量形式。
12.一種呈單位劑量形式的藥物組合物，它包含直到500mg的權利要求1至4任一項所定義的化合物和生理學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
13.一種預防、治療或改善癌，炎癥，自身免疫疾病，缺血-再灌注損傷，癲癇，敗血癥，敗血性休克，神經變性(包括阿爾茨海默氏病)，肌肉疲勞或肌肉痛性痙攣的方法，該方法包括以一種劑量將權利要求1至4任一項所定義的化合物給予需要這樣預防、治療或改善的受治療者，所述劑量在所述受治療者中產生的峰血漿濃度小于所述化合物在pH7.4在腺苷受體上的EC50值。
14.一種依照權利要求13的方法，用于預防、治療或改善關節炎，腸炎，類風濕性關節炎，骨關節炎，類風濕性脊椎炎，痛風性關節炎和其它關節炎狀況，銀屑病，哮喘，慢性阻塞性肺疾病，纖維化，多發性硬化癥，內毒素性休克，革蘭氏陰性休克，中毒性休克，出血性休克，成人呼吸窘迫綜合征，腦型瘧TNF-增強的HIV復制，AZT和DDI活性的TNF抑制，器官移植排斥，繼發于癌的惡疾病，HIV，慢性肺炎疾病，矽肺，肺肉瘤病，骨吸收疾病，再灌注損傷(包括缺血性事件，例如心肌梗塞，中風后再灌注引起的對器官的損傷)，自身免疫損傷(包括多發性硬化癥，急性感染性多神經炎，重癥肌無力)移植物對宿主的排斥，同種異體移植排斥，歸咎于感染的發熱和肌痛，繼發于感染或惡性腫瘤的惡病質，繼發于獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的惡病質，AIDS有關的復征(ARC)，瘢痕疙瘩形成，瘢痕組織形成，局限性回腸炎，潰瘍性結腸炎和熱病，過敏性腸綜合征，骨質疏松癥，腦型瘧，細菌性腦膜炎，兩性霉素B治療引起的不良反應，白細胞介素-2治療引起的不良反應，OKT3治療引起的不良反應和GM-CSF治療引起的不良反應。
15.一種依照權利要求13或14的方法，其中所述化合物以一種劑量被給予受治療者，所述劑量導致該化合物在受治療者中的血漿濃度被維持在所述化合物在pH7.4在腺苷受體上的EC50值的千分之一和五分之一之間達1小時以上。
16.一種依照權利要求13至15任一項的方法，其中所述化合物以一種劑量被給予受治療者，所述劑量導致該化合物在受治療者中的血漿濃度被維持在所述化合物在與給予該化合物的受治療者同種的動物中引起心動過緩、血壓過低或心動過速副作用的最小血漿濃度的千分之一和五分之一之間達1小時以上。
17.一種依照權利要求13至16任一項的方法，其中所述化合物以劑量0.01至15mg/kg給藥。
18.一種依照權利要求13至17任一項的方法，其中所述化合物以劑量0.1至2mg/kg給藥。
19.一種依照權利要求13至18任一項的方法，其中所述化合物以劑量0.6至1.2mg/kg給藥。
20.權利要求1至4任一項所定義的化合物用于發現藥物的用途，所述藥物用于預防、治療或改善癌，炎癥，缺血-再灌注損傷，癲癇，敗血癥，敗血性休克，神經變性(包括阿爾茨海默氏病)，肌肉疲勞或肌肉痛性痙攣。
全文摘要
描述了式(I)化合物的用途其中R是C
文檔編號A61P21/02GK1809365SQ200480005723
公開日2006年7月26日 申請日期2004年3月5日 優先權日2003年3月7日
發明者P·理查森 申請人:劍橋生物工藝有限公司