具有抗腸道致病菌和抗氧化特性的雙歧桿菌及其用途的制作方法

            文檔序號:1082825閱讀:330來源:國知局
            專利名稱:具有抗腸道致病菌和抗氧化特性的雙歧桿菌及其用途的制作方法
            技術領域
            本發明涉及微生物學。更具體地涉及一種具有抗腸道致病菌和抗氧化特性的雙歧桿菌和含有該活菌株的食物組合物或藥物組合物。
            背景技術
            雙歧桿菌是人體腸道中最重要的生理菌之一,它粘附于腸道上皮細胞上,形成穩定的菌群,對于維持宿主腸道微生態平衡、增強免疫功能、抗腫瘤、抗感染、抗衰老等方面發揮了重要的作用。但是絕大多數雙歧桿菌嚴格厭氧,對營養要求比較嚴格,且耐胃酸、膽汁質特性差,人體食用后絕大部分被胃酸及膽汁質殺死,難以抵達腸道發揮功效。
            值得注意的是,即使是相同屬和種的雙歧桿菌,由于菌株間的差異,其特性和功能也存在明顯的差異。例如,A菌株較不耐酸耐膽汁;B菌株能有效抑制或殺滅腸道致病菌;C菌株對腸道細胞的粘附性能優良;D菌株則具有抑制腫瘤的作用;E菌株則對安全性存在一定隱患等等。
            然而,目前還沒有既具備安全性,又同時具有耐酸、耐膽汁、抑菌等多重優點的雙岐桿菌。因此,本領域迫切需要開發既具備安全性,又同時具有耐酸、耐膽汁、抑菌等多重優點的雙岐桿菌發明內容本發明的目的在于提供一種安全性能高、對酸和膽汁具有良好抗性,對腸道上皮細胞具有良好粘附能力、具有抗腸道致病菌特性和/或抗氧化特性等多重優點的雙歧桿菌株。
            在本發明的第一方面,提供了一種耐酸或耐膽汁的長雙歧桿菌。在另一優選例中,它是長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)BM358,保藏號是CCTCC NO
            在另一優選例中,所述的長雙岐桿菌對酸和膽汁具有抗性。
            在另一優選例中,所述的長雙岐桿菌對腸道上皮細胞具有粘附特性。
            在本發明的第二方面,提供了一種本發明所述的長雙歧桿菌的用途,它被用于制備組合物,所述的組合物用于殺死或抑制幽門螺旋桿菌和/或大腸桿菌。
            在另一優選例中,所述的組合物是食品組合物或藥物組合物。
            在另一優選例中,所述的組合物用于治療選自下組的疾病(a)幽門螺旋桿菌引起的胃炎、胃潰瘍、或十二指腸炎;或(b)由大腸桿菌引起的腸炎、急性腹瀉、或腸胃不適。
            在本發明的第三方面,提供了本發明所述的長雙歧桿菌的用途,它被用于制備組合物,所述的組合物用于提高哺乳動物血液中超氧化岐化酶的活力。
            在另一優選例中,所述的組合物是食品組合物或藥物組合物。
            在本發明的第四方面,提供了一種食品組合物,它含有作為有效成份本發明所述的長雙歧桿菌和食品學上可接受的載體。
            在另一優選例中,所述組合物中所述長雙歧桿菌的數量為組合物的0.001-99wt%,較佳地0.1-90wt%,或者絕對數量為1.0×103-1.0×107cfu,較佳地1.0×104-1.0×106cfu。
            在本發明的第五方面,提供了一種藥物組合物,它含有作為有效成份的權利要求1所述的長雙歧桿菌和藥學上可接受載體。
            在另一優選例中,所述組合物中所述長雙歧桿菌的數量為組合物的0.001-99wt%,較佳地0.1-90wt%,或者絕對數量為1.0×103-1.0×107cfu,較佳地1.0×104-1.0×106cfu。


            圖1顯示了長雙歧桿菌BM358在MRS培養基上的菌落形態。
            圖2顯示了長雙歧桿菌BM358的電子顯微鏡圖像。
            圖3顯示了長雙歧桿菌BM358對結腸腺癌系Caco-2細胞株粘附圖4顯示了長雙歧桿菌BM358對大腸桿菌O157H7的拮抗能力。
            圖5顯示了長雙歧桿菌BM358對幽門螺旋桿菌的拮抗能力。
            具體實施例方式
            本發明人經過廣泛而深入的研究,分離出了一種具有抗腸道致病菌和抗氧化特性的雙歧桿菌。該長雙歧桿菌株(Bifidobacterium longum)BM358是從世界五大長壽之鄉之一的廣西巴馬瑤族自治縣的一名健康長壽老人的糞便中分離出來。經動物試驗證實具有極高的安全性,此外具有突出的耐酸耐膽汁特性,對腸道上皮細胞具有粘附特性,以及優異的抗腸道致病菌和抗氧化特性。該菌株具有預防和治療由幽門螺旋桿菌引起的胃炎、胃潰瘍和十二指腸炎以及由大腸桿菌等其它腸道致病菌引起的腸炎、急性腹瀉等腸胃疾病,并具有抗氧化的特性。在此基礎上完成了本發明。
            長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)BM358株,于2004年7月18日保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC,中國,武漢),其保藏編號為CCTCC NOM204053。長雙歧桿菌BM358屬于雙歧桿菌屬。
            如本文所用,“本發明微生物”、“本發明的長雙歧桿菌”或“本發明細菌”指長雙歧桿菌BM358株CCTCC No.M204053。應理解,這些術語還包括衍生自長雙歧桿菌BM358菌株,尤其是具有耐酸性、耐膽汁性、對腸道上皮細胞具有粘附特性、對腸道致病菌(如幽門螺旋桿菌、大腸桿菌)生長的抑制性等特性的衍生菌株。
            如本文所用,“本發明的活性物質”指長雙歧桿菌BM358株或其提取物。
            如本文所用,“本發明的活性物質制劑”或“本發明的活性組合物”指含有長雙歧桿菌BM358或其提取物的藥物組合物和食品組合物(包括保健品組合物)。
            長雙歧桿菌BM358的基本生物學特性與已知的該種屬的典型微生物基本相同,不同點在于具有出色的耐酸性、耐膽汁性、對腸道上皮細胞具有粘附特性、對腸道致病菌(如幽門螺旋桿菌、大腸桿菌)生長的抑制性等特性。
            具體而言,動物試驗已證明,本發明的長雙歧桿菌BM358有很高的安全性。
            耐酸試驗已證明,本發明的長雙歧桿菌BM358具有突出地耐酸性能,在pH2.0-4.0下可存活很長時間。即使在pH值2.0條件下,在5小時后仍能檢測到大量BM358菌株活菌存在。
            耐膽鹽實驗已證明,本發明的長雙歧桿菌BM358具有突出地耐膽汁質性能,在2.0-5.0%膽鹽濃度下可存活很長時間。即使在膽鹽濃度5.0%條件下,在5小時后仍能檢測到大量BM358菌株活菌存在。
            粘附實驗已證明,本發明的長雙歧桿菌BM358對腸道上皮細胞具有良好粘附性能。對Caco-2細胞的平均粘附率在13.4。
            抑菌實驗已證明,本發明的長雙歧桿菌BM358能有效抑制或殺死大腸桿菌0157H7。長雙歧桿菌BM358產生的抑菌圈平均直徑達10.1mm。
            抑菌實驗還已證明,本發明的長雙歧桿菌BM358能有效抑制或殺死幽門螺旋桿菌。長雙歧桿菌BM358產生的抑菌圈平均直徑達10.2mm。
            抗氧化實驗已證明,本發明的長雙歧桿菌株BM358具有出色的抗氧化特性。實驗中測定了血中過氧化脂質降解產物丙二醛(MDA)含量和血中超氧化歧化酶(SOD)活力兩種生化指標,表明長雙歧桿菌BM358具有抗氧化特性。
            因此,本發明的長雙歧桿菌株BM358具有極高的安全性,突出的耐酸和耐膽汁質的性能,人類食用后,大部分的活性菌株可通過胃酸和膽汁質抵達腸道,并且可粘附在人體的腸道細胞,進而能殺死或抑制幽門螺旋桿菌和大腸桿菌等腸道致病菌,并且具有抗氧化的特性。可作為功能性添加物(或添加劑)廣泛的運用在食品和藥品等產品中。
            具體而言,本發明的長雙歧桿菌BM358可作為有效成份,用于預防和治療由幽門螺旋桿菌引起的胃炎、胃潰瘍和十二指腸炎以及由大腸桿菌等其它腸道致病菌引起的腸炎、急性腹瀉等腸胃疾病。
            在本發明的另一方面,還提供了一種含有本發明的長雙歧桿菌BM358作為有效成份的組合物(包括藥物組合物和食品組合物)。這些組合物可用于預防、治療或輔助治療由幽門螺旋桿菌引起的胃炎、胃潰瘍和十二指腸炎以及由大腸桿菌等其它腸道致病菌引起的腸炎、急性腹瀉、腸胃不適等疾病。還可作為腸道調理劑用于調理腸胃。
            在獲得長雙歧桿菌BM358后,可用常規方法將其與藥學上或食品學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑相混合,形成本發明的藥物組合物或食品組合物。這類載體包括(但并不限于)鹽水、緩沖液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其組合。
            本發明藥物組合物或食品組合物,可以為固態(如顆粒劑、片劑、凍干粉、栓劑、膠囊、舌下含片)或液態(如口服液)或其他合適的形狀。本發明的活性成分(長雙歧桿菌BM358或其提取物)的含量通常為組合物重量的1-99%,較佳地為2-95%,更佳地為5-90%,最佳地10-80%。
            可以為單劑或多劑形式。按施用劑量計,通常含有1-1000mg/劑,較佳地約2-500mg/劑,更佳地5-100mg/劑。
            本發明的藥物組合物可以通過常規途徑進行給藥,優選方式是口服。藥物制劑應與給藥方式相匹配。本發明藥物的施用量,按活性物質計算,通常為每天約0.01-500mg/kg體重,較佳地約0.1-50mg/kg體重。此外,本發明的制劑還可與其他治療劑一起使用,例如,其他治療劑包括各種現有的幽門螺旋桿菌抑制劑等。
            本發明的主要優點在于本發明的長雙歧桿菌株BM358具有極高的安全性,突出的耐酸和耐膽汁質性能,對腸道上皮細胞具有粘附特性、對腸道致病菌(如幽門螺旋桿菌、大腸桿菌)生長的抑制性等特性。因此人們食用后,大部分的活性菌株可通過胃酸和膽汁質抵達腸道,并且可粘附在人體的腸道細胞,進而能殺死或抑制幽門螺旋桿菌和大腸桿菌等腸道致病菌,并且具有抗氧化的特性。
            下面結合具體實施例,進一步闡述本發明。應理解,這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法,通常按照常規條件,或按照制造廠商所建議的條件。
            實施例1從世界五大長壽之鄉的健康長壽老人分離獲得長雙歧桿菌BM358廣西巴馬瑤族自治縣是我國長壽老人較為密集的地區之一,1991年被國際自然醫學會評為世界第五大長壽之鄉,該地工業較少,污染程度極低,且當地人無基本不服用抗生素。本發明人于1999年,自廣西巴馬瑤族自治縣挑選15名90歲以上的健康長壽老人,采集其糞便中后段,冷藏保存(0℃左右),直至試驗。
            然后,以無菌玻棒將糞便搗碎,沉靜片刻后,取出清液1mL,放入裝有9mL的稀釋液中,按照十倍稀釋法依次稀釋至10-7,10-8,10-9。取不同稀釋倍數的菌液各1mL于無菌培養皿中,分別倒入多種不同的選擇性培養基,充分混合均勻后,冷卻凝固。每個稀釋度二次重復,37℃厭氧培養三天。經分離篩選獲得一株性能優異的長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)BM358。
            長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)BM358于2004年7月18日保藏于中國典型培養物保藏中心(中國,武漢),其保藏編號為CCTCC NOM204053。
            長雙岐桿菌BM358的生理生化特征如下1、形態和染色革蘭氏陽性,不規則桿狀,頂端多膨大或分叉。
            2、培養特性接觸酶為陰性,發酵葡萄糖產酸但不產氣。氣相色譜測定葡萄糖發酵產物有乳酸和乙酸產生,厭氧培養生長良好,好氧培養生長不好,在石蕊牛奶中產酸、凝固。
            3、生化生化特征

            長雙歧桿菌BM358可以在MRS液體培養基或PTYG液體培養基中生長良好,在MRS固體培養基37℃厭氧培養72小時,形成直徑大致在1.0-2.5mm的菌落,形態為白色、光滑、中間隆起,菌落特征如圖1。
            長雙歧桿菌BM358個體形態呈細小桿菌,成對或成長鏈,其電子顯微鏡下形態如圖2。長雙歧桿菌遺傳性狀穩定,經數代培養,未發現性狀的變異。
            實施例2長雙歧桿菌株BM358對昆明種小鼠連續灌胃的安全性昆明種小鼠80只,雌雄各半,隨機分成4組,雙歧桿菌BM358接種至MRS培養基,置于36±1℃厭氧培養培養48小時,分別將培養物的原液和5倍濃縮液,經口以20mL/KgBW給小鼠連續灌胃3天,并觀察7天。
            結果如下表1所示。與對比組相比,未觀察到受試小鼠有毒性反應及引起死亡。
            表1長雙歧桿菌BM358活菌對小鼠毒性作用死亡表

            實施例3長雙歧桿菌株BM358對健康成年ICR小鼠腹腔注射的安全性健康成年ICR小鼠40只,雌雄各半,雌性小鼠體重范圍19.5-22.0g,雄性小鼠體重范圍20.0-22.2g。隨機分成4組,將長雙歧桿菌BM358菌種轉種到MRS固體培養基培養,36±1℃厭氧培養48h后,刮取平板上的菌苔,用MRS液體培養基制成菌懸液,將濃度調整為5×109cfu/mL,每天小鼠一次性腹腔注射0.3mL菌懸液,連續觀察反應7天。
            結果如下表2所示,未見受性小鼠有毒性反應或死亡。
            表2長雙歧桿菌BM358對小鼠毒性作用結果

            實施例4長雙歧桿菌BM358對酸的耐受性以滅菌的1%HCl溶液將滅菌MRS肉湯培養基的pH調至2.0、3.0、4.0,將長雙歧桿菌株BM358接種到MRS肉湯培養基內,37℃厭氧培養18h后,以無菌水調整活菌數至5×108cfu/mL左右。以2%的接種量接種于pH分別為2.0、3.0、4.0的MRS肉湯培養基中,分別測定0、1、2、3、4、5小時的BM358活菌數。
            結果如下表3所示,表明長雙歧桿菌BM358在pH2-4的酸性條件下有極其優異的耐酸性。一般雙岐桿菌(對照)在pH4下4.0小時后的活菌數就小于1.0×105。
            表3長雙歧桿菌株BM358在不同pH值條件下的活菌數變化狀況cfu/mL

            實施例5長雙歧桿菌BM358對膽汁質的耐受性將滅菌MRS肉湯培養基膽鹽濃度調至2.0%、3.0%、4.0%、5.0%。將長雙歧桿菌株BM358接種到MRS肉湯培養基內,37℃厭氧培養18h后,以無菌水調整活菌數至5×108cfu/mL左右。以2%的接種量接種于膽鹽濃度分別為2.0%、3.0%、4.0%、5.0%的MRS肉湯培養基中,分別測定0、1、2、3、4、5小時的BM358活菌數。
            結果如下表4所示,表明長雙歧桿菌BM358在2.0%-5.0%膽鹽濃度下有極其優異的耐受性。一般雙岐桿菌(對照)在2.0%膽鹽下4.0小時后的活菌數就小于1.0×105。
            表4長雙歧桿菌株BM358在不同膽鹽濃度條件下的活菌數變化狀況cfu/mL

            實施例6
            長雙歧桿菌對腸道細胞的粘附能力(a)試驗材料(1)人結腸腺癌細胞系Caco-2細胞購于中國科學院上海生化所(2)DMEM培養液由78%DMEM,20%滅活(30min,56℃)小牛血清,1%青霉素、鏈霉素雙抗溶液,1%谷氨酰胺組成。
            (3)PBS緩沖液由8g NaCl,0.20g KCl,1.14g Na2HPO4·7H2O,0.24g KH2PO4加水定容至1000mL配置而成。
            (b)實驗方法將長雙歧桿菌株BM358接種于MRS肉湯培養基中,37℃厭氧培養18小時生長至最適后,取菌液離心獲得耗盡培養上清,細菌濃度用耗盡培養上清稀釋,調OD600=0.5±0.05,此時活菌數約為5×108cfu/mL,制得細菌懸液。結腸腺癌系Caco-2細胞株。按常規傳代培養于DMEM培養液中,10%CO2和90%空氣中37℃培養,每2天換一次液。
            用于粘附實驗的細胞需是1小時前剛換過培養液的細胞。將培養好的細胞制成細胞懸液(5×104個/mL),向已放置蓋玻片的24孔板中加入2mL細胞懸液,10%CO2和90%空氣中37℃培養,待在蓋玻片上形成單層細胞后,吸出舊的細胞培養液,經pH7.4無菌PBS清洗2次后,每孔加入1mL細菌懸液和1mL細胞培養液。37℃培養2小時。經pH7.4無菌PBS漂洗3次,甲醇固定,再經pH7.4無菌PBS漂洗3次,革蘭氏染色,高倍鏡下選取Caco-2細胞的視野,計數50個細胞粘附的細菌數。
            結果表明,粘附率在13.4±2.8個/細胞。這說明長雙歧桿菌株BM358對腸道細胞的粘附能力非常強。
            實施例7長雙歧桿菌BM358對大腸桿菌O157H7的抑制作用(a)實驗材料(1)MRS培養基蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母提取物5.0g,葡萄糖20g,無水乙酸鈉5.0g,檸檬酸二銨2g,Tween-80 1mL,K2HPO42g,MnSO4.4H2O0.25g,MgSO4.7H2O 0.58g,蒸餾水1000mL,各組分加熱溶解,調pH6.2-6.4,于121℃下滅菌15min備用。
            (2)營養肉湯培養基牛肉膏2.5g,胰蛋白胨5.0g,NaCl 2.5g,K2HPO4.3H2O 1.3g,蒸餾水500mL,各組分于中加熱溶解,調pH7.4,于121℃下滅菌15min備用。
            (3)營養瓊脂培養基牛肉膏3.0g,蛋白胨5.0g,瓊脂15.0g,蒸餾水1000mL,將各組分加熱溶解,于121℃下滅菌15min備用。
            (4)大腸桿菌O157H7購自中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所(b)實驗方法將長雙歧桿菌株BM358接種到MRS液體培養基內,培養18h后,測其OD600值,以MRS液體作空白對照。當OD600在0.5±0.05時,其活菌數約為5×108cfu/mL。同時將大腸桿菌接種于營養肉湯中,37℃培養18h后,調整至活菌數至106cfu/mL。將營養瓊脂培養基冷卻到40℃左右時傾注到無菌培養皿中,待凝固后,吸取大腸桿菌菌液1mL在平板表面均勻涂開,37℃固定培養菌落30min,在平板上打直徑4mm的孔,孔深3mm,將菌液注至滿孔,于37℃培養24h,測定抑菌圈大小。
            結果所有的抑菌圈直徑都在9mm以上(表5),這證實長雙歧桿菌能有效抑制或殺死大腸桿菌O157H7。
            表5長雙歧桿菌BM358對大腸桿菌的抑菌能力的比較 單位mm

            實施例8長雙歧桿菌BM358對幽門螺旋桿菌的抑制作用(a)實驗材料(1)MRS培養基蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母提取物5.0g,葡萄糖20g,無水乙酸鈉5.0g,檸檬酸二銨2g,Tween-80 1mL,K2HPO42g,MnSO4.4H2O0.25g,MgSO4.7H2O 0.58g,蒸餾水1000mL,各組分加熱溶解,調pH6.2-6.4,于121℃下滅菌15分鐘備用。
            (2)Skirrow氏培養基蛋白胨15.0g,胰蛋白胨2.5g;酵母浸膏5.0g,氯化鈉5.0g,瓊脂15.0g,蒸餾水1000.0mL,甲氧芐氨嘧啶(trimethoprim,TMP)5.0mg,萬古霉素(vancomycin)10.0mg,多粘菌素B(polymyxin)2500.0國際單位,凍溶馬血70.0mL。除甲氧芐氨嘧啶、抗生素和凍溶馬血外,將其他成分混合溶解。校正pH7.4,裝瓶100mL。121℃高壓滅菌15min,備用。此即血瓊脂基礎培養基。臨用前,加熱溶解基礎培養基,冷至60℃。每100mL基礎培養基中,加入凍溶兩次的馬血7mL及TMP、抗生素混合液0.5mL,搖勻,傾注無菌平板。
            (3)幽門螺旋桿菌購自中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所(b)實驗方法將長雙歧桿菌株BM358接種到MRS液體培養基內,培養18h后,測其OD600值,以MRS液體作空白對照。當OD600在0.50.5±0.05時,其活菌數約為5×108cfu/mL。同時將幽門螺旋桿菌接種于Skirrow氏培養基上,微氧環境37℃培養72h后,調整至幽門螺旋桿菌活菌數至106cfu/mL。吸取幽門螺旋桿菌菌液0.5mL于Skirrow氏培養基平板上,均勻涂開固定后在平板的表面后打直徑為4mm的孔,孔深3mm。將調整好濃度的長雙歧桿菌BM358菌液注至滿孔,于37℃微需氧環境培養48h觀察結果。
            結果所有的抑菌圈直徑在9mm以上,平均10.2mm以上(表6),這證實長雙歧桿菌能有效地抑制或殺死幽門螺旋桿菌。
            表6長雙歧桿菌BM358對幽門螺旋桿菌的抑菌能力的比較 單位mm

            實施例9長雙歧桿菌BM358具有抗氧化作用采用SD大鼠,設老年動物和青年動物對照組,設置三個劑量組105cfu/Kg、106cfu/Kg、107cfu/Kg,對照組以蒸餾水灌胃連續30天,第31天,5組動物摘眼球取血,離心,取血清。測定如下生化指標;血中過氧化脂質降解產物丙二醛(MDA)含量和血中超氧化歧化酶(SOD)活力,實驗結果用Spss軟件進行統計。
            樣品對動物體重的影響如表7所示。由表7可見,樣品各劑量組與老年組對照相比,均無顯著差異。
            表7樣品對動物體重的影響

            血中過氧化脂質降解產物丙二醛(MDA)含量如表8所示。由表8可見,樣品107cfu/Kg劑量組與老年組對照相比,有顯著差異。
            表8血中過氧化脂質降解產物丙二醛(MDA)含量

            *P<0.05與老年對照組相比(經方差分析)血中超氧化歧化酶(SOD)活力如表8所示。由表8可見,樣品106cfu/Kg、107cfu/Kg劑量組與老年組對照相比,均有顯著差異。
            表9血中超氧化歧化酶(SOD)活力

            *P<0.05與老年對照組相比(經方差分析)本實施例的實驗結果提示,長雙歧桿菌BM358具有抗氧化作用。
            實施例10含長雙歧桿菌BM358的藥物組合物原料配比

            按上述原料配比制成均勻的液體混合物,滅菌冷卻至37℃,接入長雙歧桿菌BM358發酵到活菌數達109cfu/mL以上,離心,加入含1%甘油和20%脫脂奶粉混合物,冷凍干燥,磨粉,裝入膠囊,即制成活菌數達109cfu/mL的藥物膠囊。
            實施例11含長雙歧桿菌BM358的食物組合物原料配比

            按上述配比,將鮮奶加熱到50℃以上,加入白砂糖攪拌至完全溶解,預熱,均質,殺菌,冷卻,接種(接種數量嗜熱鏈球菌(1-100×106cfu/mL)、保加利亞乳桿菌(1-100×106cfu/mL)、雙歧桿菌(1-50×106cfu/mL)、40-42℃發酵至pH值為4.2-4.5,攪拌,充填,冷藏,即制成含活性長雙歧桿菌BM358的酸奶。
            菌種保藏長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)BM358于2004年7月18日保藏于中國典型培養物保藏中心(中國,武漢),其保藏編號為CCTCC NOM204053。
            在本發明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考,就如同每一篇文獻被單獨引用作為參考那樣。此外應理解,在閱讀了本發明的上述講授內容之后,本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改,這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。
            權利要求
            1.一種長雙歧桿菌,其特征在于,它是長雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)BM358,保藏號是CCTCC NOM204053。
            2.如權利要求1所述的長雙歧桿菌,其特征在于,所述的長雙岐桿菌對酸和膽汁具有抗性。
            3.如權利要求1所述的長雙歧桿菌,其特征在于,所述的長雙岐桿菌對腸道上皮細胞具有粘附特性。
            4.如權利要求1所述的長雙歧桿菌的用途,其特征在于,用于制備組合物,所述的組合物用于殺死或抑制幽門螺旋桿菌和/或大腸桿菌。
            5.如權利要求4所述的用途,其特征在于,所述的組合物是食品組合物或藥物組合物。
            6.如權利要求4所述的用途,其特征在于,所述的組合物用于治療選自下組的疾病(a)幽門螺旋桿菌引起的胃炎、胃潰瘍、或十二指腸炎;或(b)由大腸桿菌引起的腸炎、急性腹瀉、或腸胃不適。
            7.如權利要求1所述的長雙歧桿菌的用途,其特征在于,用于制備組合物,所述的組合物用于提高哺乳動物血液中超氧化岐化酶的活力。
            8.如權利要求7所述的用途,其特征在于,所述的組合物是食品組合物或藥物組合物。
            9.一種食品組合物,其特征在于,它含有作為有效成份的權利要求1所述的長雙歧桿菌和食品學上可接受的載體。
            10.一種藥物組合物,其特征在于,它含有作為有效成份的權利要求1所述的長雙歧桿菌和藥學上可接受載體。
            全文摘要
            本發明公開了一種具有抗腸道致病菌和抗氧化特性的雙歧桿菌,即長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)BM358。該長雙歧桿菌具有極高的安全性,具有突出的耐酸耐膽汁特性,對腸道上皮細胞具有粘附特性,具有優異的抗腸道致病菌,并且具有抗氧化特性。該長雙岐桿菌可用于預防和治療由幽門螺旋桿菌引起的胃炎、胃潰瘍和十二指腸炎以及由大腸桿菌等其它腸道致病菌引起的腸炎、急性腹瀉、腸胃不適等疾病。
            文檔編號A61P1/00GK1796540SQ200410099218
            公開日2006年7月5日 申請日期2004年12月29日 優先權日2004年12月29日
            發明者王敖喜, 任大寶 申請人:王敖喜, 任大寶
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