專利名稱：一種含三七二醇皂苷的藥物組合物及其制備方法
技術領域：
本發明屬于中藥制藥技術領域，具體涉及一種含三七二醇皂苷的藥物組合物及其制備方法。
背景技術：
風濕性關節炎和類風濕性關節炎，屬于中醫風濕病范疇，，在臨床上，風濕性關節炎和類風濕性關節炎所表現的癥狀均為腫和痛由于該病病程較長，且易復發，需要長期服藥加以控制，用西藥進行治療，往往導致藥害，給患者帶來巨大的痛苦；近幾年醫藥工作者，根據中醫學理論，開發出不少治療該病的系列產品，如寒濕痹沖劑、濕熱痹沖劑、寒熱痹沖劑、瘀血痹沖劑等，還有以中藥八角麻、祖師麻為原料制備的制劑，但在臨床應用中都存在著這樣或者那樣的缺點。
三七是一種名貴中藥，具有散瘀止血、消腫定痛的功效，用于止血、鎮痛和跌打損傷。三七有效成分為三七總皂苷，三七總皂苷分為三七二醇皂苷、三七三醇皂苷，根據文獻報道，三七二醇皂苷是一類具有廣泛生理活性的物質(人參皂苷的生物活性匯總材料)，對炎癥病理的三個過程，即炎癥第一期的血管通透性亢進，炎癥第二期白細胞游走和炎癥第三期的肉牙形成、組織增生，均有很好的抑制作用(朱惠蘭等《中藥材》1989.12(9)38)；三七二醇皂苷以人參皂苷Rb1為主，屬于中藥有效部位，可以開發成中藥創新藥；非極性大孔吸附樹脂對中藥皂苷類有效部位的純化具有非常好的效果，文獻報道和我們實驗研究，三七總皂苷的提取純化的洗脫液為55％-75％的乙醇，通過實驗，我們發現，先采用40％乙醇進行洗脫，高效液相色譜儀控制終點，除去三七三醇皂苷，再利用55％-75％的乙醇洗脫，得到三七二醇皂苷有效部位，運用該方法分離三七總皂苷中三七二醇皂苷、三七三醇皂苷，得率高、操作簡單、適用于工業化生產；傳統應用三七植物的根，經過我們實驗研究發現，三七莖葉中也含有大量的有效成分，為了充分利用現有資源，我們在選用原料藥材時，用三七根、莖葉進行提取分離，得到的有效部位相同。
查閱文獻和專利，多為利用三七粗提物或總皂苷并且都用于心腦血管疾病的治療，未有專利報道開發三七二醇皂苷進行治療風濕性關節炎和類風濕性關節炎。
發明內容
基于上述原因，本發明采用乙醇提取，大孔吸附樹脂純化的方法，得到三七二醇皂苷，與藥用輔料混合，制備成片劑、膠囊劑、水針劑、輸液劑、粉針劑，用于治療風濕性關節炎和類風濕性關節炎，藥理實驗表明，本發明的各組制劑具有更好的藥理作用。
本發明通過以下技術方案實現的。
一.工藝制法(1)取三七，粉碎，用4-8倍70％-80％乙醇提取3-5次，每次0.5-1小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液上大孔吸附樹脂柱，先用8-12倍柱體積水洗，洗脫液棄去，再用的40％乙醇進行洗脫，用高效液相儀控制終點，洗脫液棄去，再用3-5倍柱體積的55％-75％乙醇進行洗脫，保留洗脫液，回收乙醇至盡，濃縮，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本發明制劑的處方為片劑組成為三七二醇皂苷20-40重量份，藥用輔料60-80重量份，膠囊劑組成為三七二醇皂苷20-40重量份，藥用輔料60-80重量份，水針劑組成為三七二醇皂苷5-10重量份，輸液劑組成為三七二醇皂苷10-20重量份，藥用輔料30-40重量份，粉針劑組成為三七二醇皂苷5-10重量份，藥用輔料40-45重量份；(3)取三七有效部位三七二醇皂苷與藥用輔料，按照片劑、膠囊劑的常規方法制備成片劑、膠囊劑；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到水針劑；(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到輸液劑；(6))取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料賦形劑，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液干燥，得到粉針劑。片劑、膠囊劑的藥用輔料為淀粉、葡萄糖、硬脂酸鎂的一種或幾種的混合物。
輸液劑的藥用輔料為氯化鈉、葡萄糖的一種。
粉針制劑的制備中賦形劑為甘露醇、蔗糖、乳糖中的一種或幾種。
二.檢測分析有效部位三七二醇皂苷中人參皂苷Rb1的含量檢測照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填充劑；乙晴-水(20∶80)為流動相。
對照品溶液制備取經干燥24小時的人參皂苷Rb1對照品適量，精密稱定，加流動相稀釋成1ml中含人參皂苷Rb10.8mg的溶液，即得對照品溶液。
供試品溶液的制備取本品約100mg，精密稱定，置25ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，得到供試品溶液。
測定方法精密量取對照品溶液和供試品溶液10ul，分別注入高效液相色譜儀中，按照外標法以峰面積計算含量，即得。(實驗三次)實驗結果見表1。
表1 三七二醇皂苷中人參皂苷Rb1的含量實驗次數 人參皂苷Rb1的含量平均值(％) (％)1 78.32 80.6 80.03 81.2結論通過檢測分析實驗表明，本發明的三七二醇皂苷中人參皂苷Rb1含量超過60％，充分說明本發明工藝具有實際意義。
三.藥理實施例實施例1對小鼠棉球肉芽腫的影響實驗動物實驗用ICR小鼠，雌雄各半，體重20±2g。
實驗藥物本發明各組制劑(北京乾露春科技有限公司實驗室提供)風濕性關節炎片(山西德元堂藥業有限公司)骨肽注射液(哈爾濱圣泰制藥有限公司)蒸餾水(北京乾露春科技有限公司實驗室提供)；實驗方法用脫脂棉制作成形狀大致相同的棉球，滅菌后分別埋植小鼠關節下，于手術后次日口服藥灌胃給藥，注射藥尾靜脈給藥(將粉針劑加注射用水配制成水針劑濃度，輸液劑濃縮到水針劑濃度)，連續7日，處死，取出肉芽組織，干燥，電子天平稱重，計算埋植后棉球重量差值，結果見表2、表3表2 固體制劑對小鼠棉球肉芽腫的影響劑量 鼠數 肉芽腫重量組別(g/kg) (只) mg蒸餾水組-10 0.3381±0.0090風濕性關節炎片 25 10 0.3012±0.0051**本發明片劑 25 10 0.2745±0.0032**[*]本發明膠囊 25 10 0.2739±0.0029**[*]注與蒸餾水組比較**P＜0.01，與陽性對照組比較[*]＜0.05表3 注射制劑對小鼠棉球肉芽腫的影響組別劑量 鼠數 肉芽腫重量(ml/kg) (只) mg蒸餾水組-10 0.3396±0.0089骨肽注射液 50 10 0.2651±0.0021**本發明水針劑50 10 0.2436±0.0019**本發明輸液劑50 10 0.2459±0.0021**本發明粉針劑50 10 0.2421±0.0019**
注與蒸餾水組比較**P＜0.01實施例2扭體法鎮痛試驗實驗動物實驗用ICR小鼠，雌雄各半，體重20±2g。
實驗藥物本發明各組制劑(北京乾露春科技有限公司實驗室提供)風濕性關節炎片(山西德元堂藥業有限公司)骨肽注射液(哈爾濱圣泰制藥有限公司)蒸餾水(北京乾露春科技有限公司實驗室提供)；實驗方法各組分別給藥連續7天，口服藥灌胃給藥，注射藥尾靜脈給藥(將粉針劑加注射用水配制成水針劑濃度，輸液劑濃縮到水針劑濃度)，腹腔注射0.8％醋酸0.2ml/只，記錄5～20min內扭體次數。結果見表4、表5。
表5 固體制劑對小鼠扭體實驗組別鼠數(只) 扭體次數(n)抑制率(％)蒸餾水組1034.87±13.59 -風濕性關節炎片 1024.26±10.21* 30.43本發明片劑 1019.22±9.89** 44.88本發明膠囊 1018.97±9.64** 45.60注*P＜0.05，**P＜0.01表6 注射制劑對小鼠扭體實驗組別鼠數(只) 扭體次數(n)抑制率(％)蒸餾水組1034.57±12.98 -骨肽注射液 1015.22±9.12** 55.97本發明水針劑1013.21±8.91** 61.79本發明輸液劑1012.99±8.64** 62.42本發明粉針劑1012.96±8.51** 62.51注與蒸餾水組比較**P＜0.01結論通過以上藥理實驗表明本發明的各組制劑具有更好的藥理作用。
三.制備實施例實施例1(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用4倍70％乙醇提取3次，每次0.5小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液上D101型大孔吸附樹脂柱，先用8倍柱體積水洗，洗脫液棄去，再用6倍柱體積的40％乙醇進行洗脫，洗脫液棄去，再用3倍柱體積的55％乙醇進行洗脫，保留洗脫液，回收乙醇至盡，濃縮，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本發明制劑的處方為片劑組成為三七二醇皂苷20克，藥用輔料淀粉80克，膠囊劑組成為三七二醇皂苷20克，藥用輔料淀粉80克，水針劑組成為三七二醇皂苷5克，輸液劑組成為三七二醇皂苷10克，藥用輔料氯化鈉40克，粉針劑組成為三七二醇皂苷5克，藥用輔料甘露醇45克；(3)取三七有效部位三七二醇皂苷與藥用輔料，按照片劑、膠囊劑的常規方法制備成片劑1000片、膠囊劑1000粒；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到水針劑1000支；(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到輸液劑1000瓶；
(6))取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料賦形劑，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液干燥，得到粉針劑1000瓶。
實施例2(1)取干燥三七莖葉10000克，粉碎，用8倍80％乙醇提取5次，每次1小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液上AB-8型大孔吸附樹脂柱，先用12倍柱體積水洗，洗脫液棄去，再用的40％乙醇進行洗脫，用高效液相儀控制終點，洗脫液棄去，再用5倍柱體積的75％乙醇進行洗脫，保留洗脫液，回收乙醇至盡，濃縮，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本發明制劑的處方為片劑組成為三七二醇皂苷40克，藥用輔料淀粉、葡萄糖60克，膠囊劑組成為三七二醇皂苷40克，藥用輔料淀粉、葡萄糖60克，水針劑組成為三七二醇皂苷10克，輸液劑組成為三七二醇皂苷20克，藥用輔料葡萄糖30克，粉針劑組成為三七二醇皂苷10克，藥用輔料蔗糖40克；(3)取三七有效部位三七二醇皂苷與藥用輔料，按照片劑、膠囊劑的常規方法制備成片劑1000片、膠囊劑1000粒；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到水針劑1000支；(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到輸液劑1000瓶；(6)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料賦形劑，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液干燥，得到粉針劑1000瓶。
實施例3(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用5倍75％乙醇提取4次，每次0.6小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液上NKA型大孔吸附樹脂柱，先用9倍柱體積水洗，洗脫液棄去，再用的40％乙醇進行洗脫，用高效液相儀控制終點，洗脫液棄去，再用4倍柱體積的60％進行洗脫，保留洗脫液，回收乙醇至盡，濃縮，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本發明制劑的處方為片劑組成為三七二醇皂苷25克，藥用輔料淀粉、硬脂酸鎂75克，三七二醇皂苷25克，藥用輔料淀粉、硬脂酸鎂75克，水針劑組成為三七二醇皂苷6克，輸液劑組成為三七二醇皂苷12克，藥用輔料葡萄糖38克，粉針劑組成為三七二醇皂苷6克，藥用輔料乳糖44克；(3)取三七有效部位三七二醇皂苷與藥用輔料，按照片劑、膠囊劑的常規方法制備成片劑1000片、膠囊劑1000粒；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到水針劑1000支；(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到輸液劑1000瓶；(6)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料賦形劑，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液干燥，得到粉針劑1000瓶。
實施例4(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用6倍75％乙醇提取3次，每次0.7小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液上D101型大孔吸附樹脂柱，先用10倍柱體積水洗，洗脫液棄去，再用40％乙醇進行洗脫，用高效液相儀控制終點，洗脫液棄去，再用3倍柱體積的65％乙醇進行洗脫，保留洗脫液，回收乙醇至盡，濃縮，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本發明制劑的處方為片劑組成為三七二醇皂苷30克，藥用輔料葡萄糖、硬脂酸鎂70克，膠囊劑組成為三七二醇皂苷30克，藥用輔料葡萄糖、硬脂酸鎂70克，水針劑組成為三七二醇皂苷7克，輸液劑組成為三七二醇皂苷14克，藥用輔料氯化鈉36克，粉針劑組成為三七二醇皂苷7克，藥用輔料甘露醇、乳糖43克；(3)取三七有效部位三七二醇皂苷與藥用輔料，按照片劑、膠囊劑的常規方法制備成片劑1000片、膠囊劑1000粒；
(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到水針劑1000支；(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到輸液劑1000瓶；(6)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料賦形劑，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液干燥，得到粉針劑1000瓶。
實施例5(1)取干燥三七莖葉10000克，粉碎，用7倍80％乙醇提取4次，每次0.8小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液上AB-8型大孔吸附樹脂柱，先用11倍柱體積水洗，洗脫液棄去，再用40％乙醇進行洗脫，用高效液相儀控制終點，洗脫液棄去，再用5倍柱體積的65％乙醇進行洗脫，保留洗脫液，回收乙醇至盡，濃縮，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本發明制劑的處方為片劑組成為三七二醇皂苷35克，藥用輔料淀粉、葡萄糖、硬脂酸鎂65克，膠囊劑組成為三七二醇皂苷35克，藥用輔料淀粉、葡萄糖、硬脂酸鎂65克，水針劑組成為三七二醇皂苷8克，輸液劑組成為三七二醇皂苷16克，藥用輔料葡萄糖34克，粉針劑組成為三七二醇皂苷8克，藥用輔料甘露醇、蔗糖42克；
(3)取三七有效部位三七二醇皂苷與藥用輔料，按照片劑、膠囊劑的常規方法制備成片劑1000片、膠囊劑1000粒；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到水針劑1000支；(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到輸液劑1000瓶；(6)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料賦形劑，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液干燥，得到粉針劑1000瓶。
實施例6(1)取干燥三七根10000克，粉碎，用7倍75％乙醇提取5次，每次0.8小時，合并提取液，回收乙醇至盡，濃縮液上NKA型大孔吸附樹脂柱，先用10倍柱體積水洗，洗脫液棄去，再用40％乙醇進行洗脫，用高效液相儀控制終點，洗脫液棄去，再用4倍柱體積的70％乙醇進行洗脫，保留洗脫液，回收乙醇至盡，濃縮，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位。
(2)本發明制劑的處方為片劑組成為三七二醇皂苷35克，藥用輔料淀粉、葡萄糖、硬脂酸鎂65克，膠囊劑組成為三七二醇皂苷35克，藥用輔料淀粉、葡萄糖、硬脂酸鎂65克，水針劑組成為三七二醇皂苷9克，輸液劑組成為三七二醇皂苷18克，藥用輔料氯化鈉32克，粉針劑組成為三七二醇皂苷9克，藥用輔料甘露醇、蔗糖、乳糖41克；(3)取三七有效部位三七二醇皂苷與藥用輔料，按照片劑、膠囊劑的常規方法制備成片劑1000片、膠囊劑1000粒；(4)取三七有效部位，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到水針劑1000支；(5)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到輸液劑1000瓶；(6)取三七有效部位三七二醇皂苷、藥用輔料賦形劑，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液干燥，得到粉針劑1000瓶。
權利要求
1.一種含三七二醇皂苷的藥物組合物，其特征在于它是由下述方法制備而成的(1)取三七飲片，粉碎，用4-8倍70％80％乙醇提取3-5次，每次0.5-1小時，合并提取液，回收乙醇至盡；(2)濃縮液上大孔吸附樹脂柱，先用8-12倍柱體積水洗，洗脫液棄去，再用的40％乙醇進行洗脫，用高效液相儀控制終點，洗脫液棄去，再用3-5倍柱體積的55％-75％乙醇進行洗脫，保留洗脫液，回收乙醇至盡，濃縮，干燥，得到三七二醇皂苷有效部位，其中三七二醇皂苷中人參皂苷Rb1的含量不低于60％，即為該藥物組合物。
2.根據權利要求1所述的含三七二醇皂苷的藥物組合物，其中三七原料是指三七的莖葉和三七根。
3.根據權利要求1所述的大孔吸附樹脂為非極性或弱極性大孔吸附樹脂。
4.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征將上述三七二醇皂苷制成片劑、膠囊劑、水針劑、輸液劑或粉針劑(1)取三七有效部位三七二醇皂苷20-40重量份與藥用輔料60-80重量份，按照片劑、膠囊劑的常規方法制備成片劑、膠囊劑；(2)取三七二醇皂苷5-10重量份，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到水針劑；(3)取三七二醇皂苷10-20重量份，藥用輔料30-40重量份，加注射用水溶解完全，用葡甲胺調PH值為5-8，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液進行灌裝，檢驗，得到輸液劑；(4)取三七二醇皂苷5-10重量份，藥用輔料賦形劑40-45重量份，加注射用水溶解完全，用0.22um微孔濾膜過濾，濾液干燥，得到粉針劑。
5.根據權利要求1或4所述的藥物組合物在制備治療風濕性和類風濕性關節炎的藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種含三七二醇皂苷的藥物組合物及其制備方法，其特征在于從中藥三七中得到的有效部位三七二醇皂苷與藥用輔料混合，制備成固體制劑、注射制劑；其特征還在于三七二醇皂苷中人參皂苷Rb
文檔編號A61K9/08GK1628684SQ200410073880
公開日2005年6月22日 申請日期2004年9月7日 優先權日2004年9月7日
發明者張平 申請人:張平