專利名稱：一種具有治療心絞痛和/或心律失常雙向作用的中藥組合物的制作方法
技術領域：
本發明屬于中藥領域，主要提供一種由三七、燈盞花、回心草組成的具有明顯的抗心肌缺血、心律失常作用的中藥組合物，以及由三七、燈盞花、回心草經提取、濃縮、精制得到各藥物活性成分，即三七皂苷、黃酮類燈盞花素、回心草生物堿、氨基酸、豆甾醇等成分組成的組合物。具體涉及它們在治療各種原因引起的心絞痛、心律失常癥狀的應用及其制備抗心絞痛和/或心律失常產品的應用。
背景技術：
目前國內對傳統醫藥抗心肌缺血的研究較多集中在其抗高血脂、緩解動脈粥樣硬化等方面。事實上，由于基礎和臨床研究的進展，近年來心腦血管疾病在發達國家中的發病率和死亡率已明顯降低，死亡率由80年代前的20/106降至現在的12.2/106，但是我國的心、腦血管疾病發病率不僅未下降，反呈上升趨勢，北京地區自上世紀50年代到現在，心血管疾病死亡增長了3至4倍，目前僅心血管疾病死亡數即占總死亡的50％以上，成為北京地區的第一死亡原因。
當今，高血壓、高血脂、高凝狀態和AS已有相應的有效防治措施，其病死率顯著降低，但心肌梗塞及猝死至今尚無有效的防治方法。三七(Panax notoginseng)、燈盞花(Herbaerigeronis)和回心草(Rhodobryum roseum Limp)均為具有地方特色和豐富資源的天然藥物。我們的研究表明，由三七、燈盞花、回心草組成的復合物對各種原因所致的心肌缺血、心律失常具有較好的治療作用，而且資源豐富、價格合理、無任何毒副作用。由三七、燈盞花、回心草組成的中藥組合物“七花心益康”可增強機體的耐缺氧能力，有效減少心肌缺血大鼠心電圖S-T段的下移，降低血清中GOT、LDH、CK活性以及心肌組織中MDA含量，并提高SOD活性，延緩心律失常的出現時間，降低室顫發生率，具有明顯的抗心肌缺血和/或心律失常的雙向作用。是一種具有潛在優勢的、有特色的一類心血管系統新藥，具有較好的市場前景。
發明內容
本發明首次公開了三七、燈盞花、回心草的組合物及其活性成分以任何比例組合用于治療西醫范疇的以心絞痛和/或心律失常癥狀為主的心血管系統疾病。
可以按照常規的制劑工藝，將三七、燈盞花、回心草藥材粉碎后加入常規的賦性劑、調味劑、崩解劑、防腐劑、潤滑劑、濕潤劑、粘合劑、溶劑、增稠劑、增溶劑等藥物輔料，制成任何一種適合于臨床上使用的劑型，如片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液體制劑、注射劑等。
可以將三七、燈盞花、回心草經提取、濃縮、精制得到各藥物活性成分，即三七皂苷、黃酮類燈盞花素、回心草氨基酸、豆甾醇、生物堿等成分按任何比例組成組合物后制成上述任一種劑型。
下面將通過具體的實例對本發明作進一步說明實施例1“七花心益康”的抗心肌缺血作用及其作用機制研究1材料和試劑1.1動物 健康SD大鼠，體重(226±28)g，雌雄兼用，由解放軍總醫院實驗動物中心。各組大鼠均在相同條件下，自由飲水、攝食、保持自然光。
1.2藥品 三七、燈盞花、回心草，均產于云南省保山地區，分別經中國科學院昆明植物研究所鑒定為Panax notoginseng、Herbaerigeronis、Rhodobryum roseum Limp。分別以水，50％乙醇，95％乙醇回流提取，經旋轉蒸發制成浸膏，再用蒸餾水配制成高濃度含生藥0.225g/ml，低濃度含生藥0.056g/ml的溶液作為供試樣品液。異丙腎上腺素(上海禾豐制藥有限公司，批號030601)。10％水合氯醛由解放軍總醫院藥材處制劑室提供。
2實驗方法2.1實驗分組及給藥 實驗前在麻醉狀態下記錄大鼠正常心電圖一次，對心電圖異常者予以剔除。用于實驗的大鼠隨機分為7組，每組6只，雌雄各半。各組分別為①回心草水提液高劑量組(2.25g/kg)；②回心草水提液低劑量組(0.56g/kg)；③回心草50％乙醇提液高劑量組(2.25g/kg)；④回心草50％乙醇提液低劑量組(0.56g/kg)；⑤回心草95％乙醇提液高劑量組(2.25g/kg)；⑥回心草95％乙醇提液低劑量組(0.56g/kg)；⑦蒸餾水對照組。各組大鼠均給藥2ml/200g體重，每天一次，連續給藥9天。
2.2造模及指標檢測 各組大鼠分別于給藥第7、8、9天腹腔注射異丙腎上腺素2mg/kg。末次腹腔注射異丙腎上腺素前用10％水合氯醛3ml/kg對大鼠進行麻醉，并記錄肢體導聯心電圖一次，注射異丙腎上腺素后即刻記錄30s、1m、3m、4m、5m、8m和10m的肢體導聯心電圖，測量心率、S-T段(J點)偏移值。末次注射異丙后1小時，取血，低溫超速離心，以3000g離心5分鐘制備血清，比色法測定血清GOT、LDH，CK。取血后摘取大鼠心臟，沖洗，將心肌剪成碎片，在0～4℃下將心肌組織制成10％心肌勻漿(g/ml)，以12000g離心15分鐘，取上清液以TBA比色法測定心肌丙二醛(MDA)含量，黃嘌呤氧化酶法測定血漿中總SOD值。
2.3統計學處理 實驗數據用均數±標準差(X±S)或百分數表示，運用Stata軟件進行統計學處理，采用方差分析、x2檢驗及成組t檢驗判斷統計學意義。
3結果3.1“七花心益康”對心肌缺血大鼠心電圖S-T段的影響表1“七花心益康”對心肌缺血大鼠ECG中S-T段的影響(X±S)
注與蒸餾水對照組比較，*P＜0.053.2“七花心益康”對大鼠心肌缺血后血清中GOT，LDH，CK活性的影響各組大鼠末次注射異丙腎上腺素后1小時，取血測定血清中谷草轉氨酶(GOT)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性，見表2。
表2“七花心益康”對大鼠心肌缺血后血清中GOT，LDH，CK活性的影響(X±S)
注與蒸餾水對照組比較，*P＜0.053.3“七花心益康”對心肌缺血后大鼠心肌組織MDA含量和SOD活性的影響大鼠末次注射異丙腎上腺素后1小時，摘取心臟制備心肌勻漿，測定心肌組織中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性，見表3。
表3“七花心益康”對心肌缺血后大鼠心肌組織MDA含量和SOD活性的影響(X±S)
注與蒸餾水對照組比較，*P＜0.05實施例2“七花心益康”的抗心律失常作用研究1.1動物健康昆明種小鼠，體重34±4g，雌雄各半。由解放軍總醫院實驗動物中心。各組大鼠均在相同條件下，自由飲水、攝食、保持自然光。
1.2藥品 三七、燈盞花、回心草來源及鑒定同上。以95％乙醇、水回流提取，經旋轉蒸發制成相應浸膏，分別用蒸餾水配制成溶液(3.25g生藥/g小鼠體重)作為供試藥液。維拉帕米注射液心得安注射液由解放軍總醫院1.3儀器 RM6240C型多道生理信號采集處理系統，成都儀器廠產品。
2實驗方法2.1分組和給藥 將小鼠(共50只)隨機分為5組，每組10只，灌胃給藥對照組(給予NS)，維拉帕米組(給予維拉帕米0.02mg/20g小鼠)，心得安組(給予心得安0.01mg/20g小鼠)，水提液組(給予水提液3.25g生藥/g)，醇提液組(給予醇提液3.25g生藥/g)。共給藥3天。
2.2“七花心益康”對氯仿誘發室顫的影響 各組小鼠末次給藥后0.5h，肌注速眠新(1.5ml/kg)麻醉。逐一將小鼠的頭部放入含有3ml氯仿棉球(以后每換一只小鼠加入1ml氯仿)的150ml錐形瓶中，立即連接RM6240C型多道生理信號采集處理系統，記錄小鼠II導聯心電圖；至呼吸停止立即取出剖開胸腔，肉眼觀察室顫發生率。
2.3統計學處理 實驗數據用百分數或均數±標準差(X±S)，運用Stata軟件進行統計學處理，采用單因素方差分析、成組t檢驗及x2檢驗判斷統計學意義。
3結果表5“七花心益康”對氯仿誘發小鼠室顫的影響
與對照組比較，*P＜0.05。
實施例3“七花心益康”耐缺氧作用研究1材料和試劑1.1動物健康昆明種小鼠，體重18～22g，雌雄各半。由解放軍總醫院實驗動物中心。各組大鼠均在相同條件下，自由飲水、攝食、保持自然光。
1.2藥品 三七、燈盞花、回心草來源及鑒定同上。以95％、50％乙醇和水回流提取，經旋轉蒸發制成浸膏，各部分分別用蒸餾水配制成高濃度(13g生藥/g小鼠體重)、低濃度(3.25g生藥/g小鼠體重)溶液作為供試藥液。
2實驗方法2.1分組和給藥 將小鼠(共70只)隨機分為7組，每組10只對照組，水相低劑量組，水相高劑量組，95％低劑量組，95％高劑量組，50％低劑量組，50％高劑量組。灌胃給藥，每日1次，共3天。對照組給予NS 0.2ml/只，其他各組分別給予相應各萃取相。
2.2斷頭小鼠張口動作持續時間測定 于末次給藥后1h，用大剪刀在耳下部將小鼠逐只快速斷頭，立即用秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止時間。
2.3統計學處理 實驗數據用均數±標準差(X±S)，運用Stata軟件進行統計學處理，采用單因素方差分析及成組t檢驗判斷統計學意義。
3結果表4“七花心益康”對斷頭小鼠張口動作持續時間的影響
與對照組比較，*P＜0.014結論本研究利用給大鼠腹腔快速注射大劑量異丙腎上腺素的方法，造成大鼠急性心肌缺血，主要表現為ECG中S-T段明顯下移，血清中GOT、LDH、CK活性升高，心肌組織中MDA含量明顯升高，而SOD活性下降；而給予“七花心益康”各組均能減少異丙腎上腺素造成的大鼠心電圖S-T段的下移，以50％乙醇提液高劑量組為顯著。同時“七花心益康”各組也均能降低大鼠注射異丙腎上腺素后血清GOT、LDH、CK的活性水平，以50％乙醇提液高劑量組對LDH，CK的影響為顯著。這些結果提示“七花心益康”對實驗性心肌缺血有明顯的保護作用。
已知氧自由基在心肌缺血的病理過程中起重要的作用。自由基是心肌細胞發生脂質過氧化，使心肌損傷加劇的重要因素。MDA是自由基損傷作用的產物，SOD是機體防御新陳代謝及其他生命活動中氧自由基損傷和破壞的抗氧化酶。當心肌損傷時，心肌組織中MDA含量增高，SOD活性下降。本實驗中，“七花心益康”各組均能降低心肌缺血大鼠血漿中MDA含量，并使SOD活性增強。其中，50％乙醇提液高劑量組對減少MDA生成有顯著性，而95％乙醇提液高劑量組對提高SOD活性有顯著性。
氯仿的致室顫機制可能與植物神經及其釋放遞質或腎上腺髓質釋放去甲腎上腺素和腎上腺素增加有關，而氯仿本身對心肌的直接作用則是不規則地延長心室不應期，導致復極不均一性增加，上述兩者的相互作用導致室顫發生。本實驗同時采用Ca2+拮抗劑——維拉帕米、β-受體阻滯劑——心得安為陽性對照，觀察了“七花心益康”對氯仿誘發小鼠室顫的影響，結果表明，維拉帕米組、心得安組、“七花心益康”水提液組、“七花心益康”醇提液組均可顯著延長小鼠心律失常出現時間、降低室顫發生率，其中，“七花心益康”水提液作用優于其他各組。
腦對缺氧最敏感，心臟次之。因小鼠斷頭實驗操作簡單、快捷，目前常把它作為抗心肌缺血藥的一種初篩方法。本研究表明，“七花心益康”95％乙醇總提物和50％乙醇總提物部分可顯著延長斷頭小鼠張口動作持續時間，提示“七花心益康”可降低組織耗氧，提高物質代謝和能量代謝，增強機體的耐缺氧能力。
綜上所述，由三七、燈盞花、回心草組成的中藥組合物“七花心益康”可增強機體的耐缺氧能力，有效減少心肌缺血大鼠心電圖S-T段的下移，降低血清中GOT、LDH、CK活性以及心肌組織中MDA含量，并提高SOD活性，延緩心律失常的出現時間，降低室顫發生率，具有明顯的抗心肌缺血、心律失常的作用。
實施例2“七花心益康”治療冠心病心絞痛、心律失常的臨床印象觀察1、診斷標準與病例選擇西醫診斷標準依據國際心臟病學會和協會及WHO臨床命名標準化聯合專題組制定的“缺血性心臟病的命名及診斷標準”。
中醫辨證及心絞痛分度標準依據國家中醫藥管理醫政司協作組制定的“胸痹心痛急癥治療規范”。
病例選擇病例除按以上標準進行診斷、分型外，而且要求心絞痛發作時間5分鐘以上。除外合并有嚴重心律失常、心肺功能不全及其他心臟病疾患者。
2、一般資料全部病例58例均為門診病人，其中男性36例，女性22例，年齡21～68歲。心律失常32例(頻發房早18例，房顫7例，室上速7例)；心絞痛26例。按中醫辨證分型論治(氣滯血淤型20例，痰濁淤阻型17例，肝腎陰虛型10例，氣血兩虛型7例，心氣虛型4例)。治療前均檢查心電圖、血脂、肝腎功能協助診斷。
2、方法病人服用“七花心益康”水煎劑(三七、燈盞花、回心草，1∶1∶1)，湯藥日1劑服用2次，服藥4周后進行心電圖檢查。
3、治療結果58例患者中，“七花心益康”對于冠心病引起的房早、房顫效果較好；胸悶、胸痛等癥狀明顯改善，服藥3劑即有明顯好轉。
表6“七花心益康”對不同證型的療效觀察
表7“七花心益康”對心律失常及ST段改變的療效觀察
4、討論冠心病是指由于冠狀動脈所供應的血液和氧不能滿足心肌需要所引起的一組臨床癥候群，祖國醫學把本病歸屬于“胸痹”范疇，“心主身之血脈”、“心痹者、脈不通”，認為本病的病機主要責之于寒凝、痰濁、氣滯血淤、心脈淤阻、心失所養。三七、燈盞花、回心草均為云南省多民族共用的傳統草藥，其中三七具有活血化淤、抗心律失常的作用，燈盞花也具有擴張血管、降低外周血管阻力、減慢心率等作用，回心草則可擴冠、增加心肌血流量、改善心肌供血狀況。
本臨床實驗觀察了由三七、燈盞花、回心草組成的“七花心益康”對冠心病心絞痛、心律失常的治療作用，結果表明，“七花心益康”可明顯改善患者的胸悶、胸痛癥狀，對于冠心病引起的房早、房顫療效確切。在服藥過程中對患者進行血常規、尿常規、肝腎功能等檢查發現“七花心益康”對肝腎功能及末梢循環無毒副作用。
權利要求
1.一種對心絞痛和/或心律失常癥狀有顯著治療作用的中藥組合物“七花心益康”，其特征是由下列重量份數的原料制成三七、燈盞花、回心草(比例為任意組合)。
2.根據權利要求1所述的中藥組合物，包括三七總皂苷(包括各單體皂苷)、燈盞花素、回心草中生物堿、氨基酸、豆甾醇等化學成分以任何比例組成的組合物“七花心益康”。
3.根據權利要求1和權利要求2所述的中藥組合物，是指加入常規的賦性劑、調味劑、崩解劑、防腐劑、潤滑劑、濕潤劑、粘合劑、溶劑、增稠劑、增溶劑等藥物輔料，制成任何一種適合于臨床上使用的劑型，如片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液體制劑、注射劑等。
4.根據權利要求1所述的應用，其中所指的心絞痛和/或心律失常癥狀是指由于各種原因引起的心絞痛、心律失常癥狀。
全文摘要
本發明涉及一種對心絞痛和/或心律失常癥狀有顯著治療作用的中藥組合物“七花心益康”。該藥物制劑是由三七、燈盞花、回心草按一定比例混合，或經提取活性部位(三七皂苷、燈盞花素、回心草中氨基酸、豆甾醇、生物堿等脂溶性和/或水溶性成分等)后的組合物，可制備成各種劑型(如片劑、膠囊劑、顆粒劑、注射劑、凍干粉針劑等)。本品適用于各種原因導致的心絞痛和/或心律失常癥狀，其機理在于本品能使機體MDA含量降低，SOD活性增強，延緩心律失常出現時間，提高機體的耐缺氧能力。
文檔編號A61K9/48GK1733029SQ20041007054
公開日2006年2月15日 申請日期2004年8月9日 優先權日2004年8月9日
發明者劉屏, 王東曉, 汪進良, 王波, 戴暢, 王忠孝, 陳宜鴻, 周筱青 申請人:中國人民解放軍總醫院