專利名稱：復合植物藥生物發酵工藝及治療腎炎的植物發酵藥物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種復合植物藥生物發酵工藝及治療腎炎的植物發酵藥物。
背景技術：
我國人民早在4000多年前就會利用微生物發酵技術來釀酒，以后生產醬、醋、豆鼓、醬油、臭豆腐等食品。在中藥炮制領域中，未見有將復方藥與輔料相混，控制在一定的溫度、濕度下進行發酵，再制成藥劑的技術。利用復合植物藥生物發酵生產工藝制備藥劑是我國中藥現代化的一個分支，其深入研究將為中藥現代化與國際接軌作出貢獻。
發明內容
本發明的目的是提供一種復合植物藥生物發酵工藝，采用該工藝制成的藥物可提高藥效，改變藥性，擴大臨床適應癥，降低毒副作用。
本發明的另一個目的是制備一種治療腎炎的植物發酵藥物，該藥物選擇復合植物為培養基，在特定的時間，濕度，溫度下培養，發酵過程中產生真菌類微生物，而提高療效。
為實現本發明的第一個目的，其技術方案是復合植物藥生物發酵工藝的步驟如下(1)預處理按配方選取植物藥，除去所粘附的泥污、蟲卵、雜物等，清洗，瀝水，65℃±5℃干燥；(2)粉碎將全部干燥后的植物藥粉碎至40目；(3)滅菌常規紫外滅菌；(4)按原料配方，與無菌水在不銹鋼配料桶內加入經步驟(2)、(3)處理的植物藥粉中，拌勻；(5)發酵培養將步驟(4)所得混合物，在無菌條件下移至發酵罐內，以80r/min邊加邊攪拌，在溫度36.5℃±0.5℃，相對濕度75％-85％，通氣1m3/m3，的條件下進行發酵，發酵時間34-36小時；(6)干燥將發酵藥于60℃±5℃干燥；(7)粉碎干燥后的發酵藥粉碎至100目；(8)按常規的方法制成任何一種藥劑學上所說的劑型。
為實現本發明的另一個目的，其技術方案是該治療腎炎的植物發酵藥物是由下述重量配比的原料制成的藥劑掌葉大黃8-12 甘草3-7 梔子2-6膽汁4-6 無菌水8-12。
制備該藥物的工藝為(1)預處理按上述原料的重量配比選取植物藥， 除去所粘附的泥污、蟲卵、雜物等，清洗，瀝水，65℃±5℃干燥；(2)粉碎將全部干燥后的植物藥粉碎至40目；(3)滅菌常規紫外滅菌；(4)無菌條件下取出膽汁，與無菌水在不銹鋼配料桶內混合，再加入經步驟(2)、(3)處理的植物藥粉，拌勻；(5)發酵培養將步驟(4)所得混合物，在無菌條件下移至發酵罐內，以80r/min邊加邊攪拌，在溫度36.5℃±0.5℃，相對濕度75％-85％，通氣1m3/m3，的條件下進行發酵，發酵時間34-36小時；(6)干燥將發酵藥于60℃±5℃干燥；(7)粉碎干燥后的發酵藥粉碎至100目；(8)按常規的方法制成任何一種藥劑學上所說的劑型。
所述各原料的重量配比是掌葉大黃9-11 甘草4-6 梔子3-5膽汁3-5 無菌水9-11。
所述各原料的重量配比是掌葉大黃10甘草5梔子4膽汁4無菌水10。
所膽汁是牛膽汁、豬膽汁或雞膽汁。
所述藥劑是任何一種藥劑學上所說的劑型。
所述藥劑是膠囊劑。
本發明的復合植物藥生物發酵工藝，采用復方藥與無菌水相混，控制在一定的溫度、濕度下進行發酵處理。因此可提高藥效，改變藥性，擴大臨床適應癥，降低毒副作用。其生產工藝簡單，技術先進，操作簡單。
復合植物藥生物發酵過程中，微生物的生長會產生各種活性物質，如多種酶、抗生素等，使植物藥發生化學反應，分解原有成分，產生新的有效成分；發酵過程中的微生物有著強大分解轉化能力，能產生豐富的次級代謝產物，此代謝產物又是功能良好的藥物，能與植物藥中某些有效成分發生協同作用，以增加藥效；微生物在復合植物藥生物發酵的特殊環境中，產生新的代謝反應，使復合植物藥某此成分對微生物生長或代謝有促進或抑制作用，改變微生物的代謝途徑，形成新的有效成分或改變其中各成分比例；發酵過程中微生物的分解可將植物藥中的有毒物質分解而降低毒性。由于發酵過程中微生物的生長需要動、植物蛋白、糖等其它營養物質而起到對植物藥濃縮的作用。
微生物的生物多樣性為我們發現不同種植物藥組合，產生不同的藥理、藥效作用，在人體內產生不同種生理活性物質而發揮抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、降血脂、增加免疫力等作用。
治療SD大鼠腎炎動物模型實驗結果1、本實驗采用被動型Heymann腎炎大鼠模型，發病迅速，實用性強。主要特征為腎小球基底膜上皮側免疫復合物沉積、尿蛋白為主，其病理改變類似人類膜性腎病，是目前國內外公認的腎炎模型。
2、用本發明藥物對SD大鼠被動型Heymann腎炎模型治療作用被動型Heymann腎炎模型(采用SD大鼠腎刷狀緣糖蛋白免疫兔血清1.5ml/只)組，48只SD大鼠分為6組，陰性對照(正常SD大鼠)、陽性對照(地塞米松3×10-4g.kg-1)、本發明藥物高、中、低(0.1、0.2、0.4g.kg-1)劑量、模型組。
以上各組大鼠除陰性對照和模型對照外，全部灌胃給藥，每日兩次。連續給藥28天。每周秤量體重，置于代謝籠中，收集24小時尿液。實驗結束后，按30mg.kg-1腹腔注射2％戊比妥鈉麻醉，暴露胸腔，心臟采血，分離血清；取左腎置3％戊二醛中固定，4℃保存；觀察指標及統計學方法體重、尿量每周一次；血清檢測血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、甘油三脂(TG)、總膽固醇(T-CHO)含量。尿液檢測蛋白含量、尿量體積。腎臟掃描電鏡觀察腎臟透視電鏡檢查。統計學方法采用SPSS11.0進行方差分析。
實驗結果(1)、本發明藥物對被動型Heymann腎炎大鼠尿蛋白含量的影響Heymann腎炎大鼠經受試藥物及陽性對照組灌胃14d，與模型對照組比較，尿蛋白含量降低，有顯著性差異，高劑量具有高度顯著性差異。陰性對照與模型對照比較，造模后，給藥7、14d有高度顯著性差異，21d、28d有顯著性差異。高、中、低劑量組給藥21d、28d與陰性對照組比較無明顯差異。結果見表1。
表1本藥對被動型Heymann腎炎大鼠尿蛋白含量的影響(n＝9，x±s)組別 劑量 造模后 給藥7d 14d21d 28d(g.Kg-1) mg.24h-1mg.24h-1mg.24h-1mg.24h-1mg.24h-1陰性對照 3.853±1.749 3.656±1.292 3.557±1.991* 3.595±2.327*5.454±2.926*模型對照 15.392±3.535##17.805±1.882##14.402±4.369##9.618±4.941#9.554±2.133#高劑量 0.40 15.111±2.473 18.394±3.836 6.414±2.635** 4.758±1.668 4.560±1.820中劑量 0.20 13.367±4.020 17.104±2.979 7.468±2.818* 5.742±3.026 5.234±0.954低劑量 0.10 13.757±1.100 16.069±5.230 8.908±1.986* 3.933±2.247*5.085±2.209陽性對照 3×10-314.683±3.432 15.628±3.395 12.722±2.709* 9.323±3.863 7.768±2.536注與模型對照比較，*P＜0.05、**P＜0.01與陰性對照比較，#P＜0.05、##P＜0.01(2)、本發明藥物對被動型Heymann腎炎大鼠尿量的影響Heymann腎炎大鼠經受試藥物高、中、低劑量及陽性對照藥給藥14d，與陰性對照比較，高、中、低劑量組24h尿量減少，有顯著性差異，中劑量與模型對照比較有顯著性差異。陰性對照與模型對照比較，14d有顯著性差異，高劑量給藥21d、28d與陰性對照組比較無明顯差異，說明高劑量有利尿作用，結果見表2。
表2.復方甘黃膠囊對被動型Heymann腎炎大鼠尿量的影響(n＝9，x±s)組別 劑量 造模后 給藥7d 14d 21d28d(g.Kg-1) ml ml ml ml ml陰性對照 25.111±7.785 31.113±9.252 36.778±9.361* 19.713±4.619 30.367±8.097模型對照 15.910±3.764 25.300±1.889 15.400±3.380# 25.540±8.598 12.20±4.461#高劑量 0.40 14.375±4.749 25.083±3.541 17.083±5.766# 22.167±3.532 30.017±9.673中劑量 0.20 14.313±6.524 17.125±3.613 30.083±9.140* 20.333±5.716 11.083±4.737#低劑量 0.10 13.563±3.977 12.625±2.200* 18.333±3.077# 12.500±6.052* 13.700±1.342##陽性對照 3×10-3 11.125±4.650 26.938±7.048 15.967±3.262# 15.341±5.432# 14.912±6.135#注與模型對照比較，*P＜0.05**P＜0.01；與陰性對照比較#P＜0.05##P＜0.01(3)、本發明藥物對被動型Heymann腎炎大鼠體重的影響Heymann腎炎大鼠低劑量組給藥7d和陽性對照組與陰性對照比較，體重降低，有顯著性差異，其它各組均無顯著性差異。結果見表3。
表3.本藥對被動型Heymann腎炎大鼠體重的影響(n＝9±s)組別 劑量 造模后 給藥7d 14d21d28d(g.Kg-1) gg g g g陰性對照 - 248.44±12.69311.13±20.57 334.22±26.75 326.44±33.34 342.33±34.35模型對照 - 231.40±9.73 314.20±16.75 336.80±24.47 351.80±34.11 345.83±20.92高劑量0.40 235.00±15.33272.00±30.98 309.00±18.94 274.33±119.92 343.67±29.12中劑量0.20 226.38±7.64 285.85±38.26 314.67±33.88 321.17±27.30 351.67±27.43低劑量0.10 227.69±4.70 267.71±28.03# 284.83±29.61 294.80±13.37 300.00±20.92陽性對照 3×10-3 232.56±11.67232.50±11.81# 207.83±27.97# 190.91±31.21# 185.94±47.14#注#P＜0.05(與陰性對照比較)(4)、本發明藥物對被動型Heymann腎炎大鼠血清肌酐、尿素氮、甘油三脂、總膽固醇的影響Heymann腎炎大鼠血清肌酐高、中、低劑量與模型對照比較，明顯降低，有顯著性差異，低劑量與模型對照比較，有高度顯著性差異；血清尿素氮低劑量與模型對照比較，明顯降低，有顯著性差異；血清甘油三脂高、中劑量與模型對照比較，有顯著性差異，低劑量與模型對照比較，有高度顯著性差異；結果見表4。
表4.本藥對被動型Heymann腎炎大鼠血清肌酐、尿素氮、甘油三脂、總膽固醇含量的影響(n＝9，x±s)組別 劑量 肌酐尿素氮 總膽固醇甘油三脂(g.Kg-1) μmol/L mmol/L mmol/L mmol/L陰性對照 42.903±7.894* 3.654±0.796*1.939±0.9510.303±0.109模型對照 57.528±6.826 7.935±1.064 4.552±0.4420.650±0.281高劑量0.40 39.353±6.146* 6.458±1.437 1.714±0.4870.418±0.164*中劑量0.20 40.635±4.578* 5.761±1.489 1.913±0.4670.341±0.095*低劑量0.10 35.229±9.357** 4.950±1.064*2.786±0.3900.496±0.279**注與模型對照比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與陰性對照比較，#P＜0.0具體實施方式
實施例一治療腎炎的植物發酵藥物的工藝原料配方按重量比為掌葉大黃10、甘草5、梔子4、膽汁4、無菌水10；(1)預處理按原料配方選取植物藥，除去植物藥所粘附的泥污、蟲卵、雜物等，清洗，瀝水，65℃±5℃干燥；(2)粉碎將全部干燥手的植物藥粉碎至40目；(3)滅菌常規紫外滅菌；(4)無菌條件下取牛膽汁，與無菌水在不銹鋼配料桶內混合，再加入經步驟(2)、(3)處理的植物藥粉中，拌勻；(5)發酵培養將步驟(4)所得混合物，在無菌條件下移至發酵罐內，以80r/min邊加邊攪拌，在溫度36.5℃±0.5℃，相對濕度75％-85％，通氣1m3/m3，的條件下進行發酵，發酵時間34-36小時；(6)干燥將發酵藥于60℃±5℃干燥；(7)粉碎干燥后的發酵藥粉碎至100目；(8)膠囊機分裝1號膠囊，每瓶60粒，貼簽、包裝，每盒10瓶。
用法用量；根據病人病情不同確定用法用量，每日口服2--3次，每次4--6粒。該藥劑療效顯著，服用方便，安全有效，適于長期服用。
實施例二用于治療大葉性肺炎、肺感染。使金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、肺炎雙球菌轉陰。
本發明藥物是由下列組分制成(用量為得量份)金銀花10 野菊花10 無菌水10 蒲公英5 紫花地丁41、預處理將上述各種植物藥除去所粘附的泥污、蟲卵、雜物等，清洗、瀝水，65℃±5℃干燥；2、粉碎將全部干燥后的植物藥粉碎至40目；3、滅菌常規紫外滅菌；4、按原料配方，在不銹鋼配料桶內加入上述藥粉，用無菌水拌勻；5、發酵培養將步驟4所得混合物在無菌條下移至發酵罐內，邊加邊攪拌(80r/min)，在溫度36.5℃±0.5℃，相對濕度75％-85％，通氣1m3/m3，的條件下進行發酵，發酵時間34-36小時；6、干燥將發酵藥于60℃±5℃干燥；7、粉碎干燥后的發酵藥粉碎至100目；8、包裝發酵藥粉分裝于膠囊中。
實施例三用于治療冠心病，心律不齊，心力衰竭。
本發明藥物是由下列組分制成(用量為重量份)陳皮6 茯苓4.5 熟地3 五味子1.5 甘草1.5 無菌水61、預處理將上述各種植物藥除去所粘附的泥污、蟲卵、雜物等，清洗、瀝水，65℃±5℃干燥；2、粉碎將全部干燥后的植物藥粉碎至40目；3、滅菌常規紫外滅菌；4、按原料配方，在不銹鋼配料桶內加入上述藥粉，用無菌水拌勻；5、發酵培養將步驟4所得混合物在無菌條下移至發酵罐內，邊加邊攪拌(80r/min)，在溫度36.5℃±0.5℃，相對濕度75％-85％，通氣1m3/m3，的條件下進行發酵，發酵時間34-36小時；6、干燥將發酵藥于60℃±5℃干燥；7、粉碎干燥后的發酵藥粉碎至100目；8、包裝發酵藥粉分裝于膠囊中。
權利要求
1.一種復合植物藥生物發酵工藝，其工藝步驟如下(1)預處理按配方選取植物藥，除去所粘附的泥污、蟲卵、雜物等，清洗，瀝水，65℃±5℃干燥；(2)粉碎將全部干燥后的植物藥粉碎至40目；(3)滅菌常規紫外滅菌；(4)按原料配方，以無菌水在不銹鋼配料桶內加入經步驟(2)、(3)處理的植物藥粉中，拌勻；(5)發酵培養將步驟(4)所得混合物，在無菌條件下移至發酵罐內，以80r/min邊加邊攪拌，在溫度36.5℃±0.5℃，相對濕度75％--85％，通氣1m3/m3，的條件下進行發酵，發酵時間34-36小時；(6)干燥將發酵藥于60℃±5℃干燥；(7)粉碎干燥后的發酵藥粉碎至100目；(8)按常規的方法制成任何一種藥劑學上所說的劑型。
2.一種治療腎炎的植物發酵藥物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制成的藥劑掌葉大黃8-12 甘草3-7 梔子2-6膽汁4-6無菌水8-12；制備該藥物的工藝為(1)預處理按上述原料的重量配比選取植物藥，除去所粘附的泥污、蟲卵、雜物等，清洗，瀝水，65℃±5℃干燥；(2)粉碎將全部干燥后的植物藥粉碎至40目；(3)滅菌常規紫外滅菌；(4)在無菌條件下取出膽汁，與無菌水倍在不銹鋼配料桶內混合，再加入經步驟(2)、(3)處理的植物藥粉，拌勻；(5)發酵培養將步驟(4)所得混合物，在無菌條件下移至發酵罐內，以80r/min邊加邊攪拌，在溫度36.5℃±0.5℃，相對濕度75％-85％，通氣1m3/m3，的條件下進行發酵，發酵時間34-36小時；(6)干燥將發酵藥于60℃±5℃干燥；(7)粉碎干燥后的發酵藥粉碎至100目；(8)按常規的方法制成任何一種藥劑學上所說的劑型。
3.據權利要求2所述的治療腎炎的植物發酵藥物，其特征在于所述各原料的重量配比是掌葉大黃9-11甘草4-6 梔子3-5膽汁3-5 無菌水9-11。
4.據權利要求2所述的治療腎炎的植物發酵藥物，其特征在于所述各原料的重量配比是掌葉大黃10甘草5梔子4膽汁4無菌水10。
5.據權利要求2、3或4所述的治療腎炎的植物發酵藥物，其特征在于所膽汁是牛膽汁、豬膽汁或雞膽汁。
6.據權利要求2、3或4所述的治療腎炎的植物發酵藥物，其特征在于所述藥劑是任何一種藥劑學上所說的劑型。
7.據權利要求6所述的治療腎炎的植物發酵藥物，其特征在于所述藥劑是膠囊劑。
全文摘要
本發明涉及一種復合植物藥生物發酵工藝及治療腎炎的植物發酵藥物。本發明的復合植物藥生物發酵工藝，采用復方藥與無菌水相混，以復合植物為培養基，在特定的時間、溫度和濕度下進行發酵處理，發酵過程中產生真菌類微生物，因此可提高藥效，改變藥性，擴大臨床適應，降低毒副作用。其生產工藝簡單，技術先進，操作方便。
文檔編號A61P13/12GK1634297SQ20041005171
公開日2005年7月6日 申請日期2004年9月27日 優先權日2004年9月27日
發明者李延平, 吳科鋒 申請人:廣東醫學院