專利名稱：治療類風濕性關節炎和免疫性疾病的含青蒿提取物藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種用于治療類風濕性關節類和自身免疫性疾病伴關節炎癥狀的藥物，特別是用于治療類風濕性關節炎和自身免疫性疾病伴關節炎癥狀的含有青蒿素或青蒿素衍生物(雙氫青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚，蒿甲醚等)的藥物組合物。
背景技術：
類風濕性關節炎(以下簡稱RA)是自身免疫性疾病的一種，是一種世界范圍內的原因不明的全身性自身免疫性疾病，其發病率0.4～1％，其主要特征是以慢性，對稱性及末梢關節彌漫性滑膜炎、末期出現各種程度的進行性關節破壞，變性及關節功能喪失，嚴重地影響著患者的勞動及生活能力，給社會造成巨大的負擔。而其他的自身免疫性疾病也通常伴有相類似的關節癥狀，對該類疾病的治療尚沒有特效藥物，多采用非甾類消炎鎮痛劑及免疫抑制劑治療，不但不能完全控制病情，且有較大的毒付作用。
近年來中醫藥對類風濕性關節炎及自身免疫性疾病研究受到國內外專家及患者的重視，開發了一些治療RA的藥物，例如中國專利申請02137816公開了一種RA的治療藥物組合物，其中含有中藥成份赤茯苓12％，當歸12％，地膚子12％，五加皮10％，枇杷葉10％，海桐皮9％，白薇9％，黃芩8％，川黃連7％，廣藿香6％，木通5％。再如中國專利申請01117709公開了一種治療類風濕性關節炎的藥物，它是以何首烏、黨參、當歸、黃芪、黃精、白術、狗脊、全蝎、烏梢蛇、地龍、螞蟻、丹參、桑枝、桂枝、蒼術、羌活、獨活、防風、秦艽、桑寄生、杜仲、川牛膝、黃柏、千年健、鉆地楓、乳香、沒藥、青風藤、天南星、雞血藤、桑葚子、元胡、川芎、棗仁、知母、茯苓、草烏、川烏、仙靈脾、紅花、續斷、丹皮、忍冬藤、赤芍、薏苡仁、海桐皮、絡石藤、甘草為原料，根據每味中藥的不同特性，針對類風濕性關節炎的不同癥狀，按比例配制成基本藥劑、寒甚或熱甚者相適應的藥劑。
上述這些中藥組合物一般都是中藥的常規用藥，使用時醫生還必須根據中醫辨證論治的原則按照患者的情況進行組方；也有一些中成藥成分較多，制備復雜，實際應用還不能完全滿足臨床醫生及患者的需要。
青蒿素是我國學者自主開發且被國際公認的中藥提取物，青蒿素及其衍生物是一類有效的抗瘧藥和抗瘧藥物組合物。系從我國中藥黃花蒿中提取的有效單體成分，已被世界衛生組織推薦為抗瘧疾新藥。近年來隨著國家及各研究單位對青蒿素研究的繼續深入，開發了一些以青蒿素為主要成分的新的復方制劑的抗瘧劑，如中國專利申請00113134公開了一種治療瘧疾的復方制劑；同時還不斷發現了在其他新領域中的應用，如中國專利申請99103346公開了一種治療紅斑狼瘡和光敏性疾病的含雙氫青蒿素的藥物組合物等。現有文獻報道可以將青蒿油搽劑應用于癬病的治療，通過對青蒿素的體外抗真菌作用的研究，證實青蒿素的抗菌普及作用與目前常用的廣譜抗真菌藥酮康唑相似，且對某些真菌的作用強于酮康唑，即其抗真菌作用效果良好。
發明內容
本發明的目的，是提供一種安全有效的治療類風濕性關節類和免疫性疾病的含青蒿提取物藥物組合物。
本發明的技術方案如下。
一種治療類風濕性關節炎和免疫性疾病的含青蒿提取物藥物組合物，為含有有效劑量的青蒿素或青蒿素衍生物的藥物組合物。
所述的蒿素衍生物包括雙氫青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚和蒿甲醚。
該組合物中青蒿素或青蒿素衍生物的含量為1～99％。
所述的藥物組合物含有青蒿素或青蒿素衍生物的有效劑量為20～200mg/日。
該藥物組合物可以單獨使用，也可以與現有治療RA和自身免疫性疾病的其他藥物聯合使用。
所述的藥物組合物為可以是任何常用的藥物形式，如固體制劑，流體，或膏狀等。
本發明是基于這樣的事實完成的。本案發明人在長期的臨床治療RA和自身免疫性疾病及各種關節炎的過程中發現中藥青蒿具有較好的清熱解毒，消腫，止痛功效。而青蒿素又是我國自70年代開始研究的中藥一類新藥，為此我們在免疫和自身免疫性疾病方面對青蒿素或其衍生物以及含青蒿素的藥物組合物進行了研究，表明青蒿素在具有免疫調節的基礎上，從藥效學及臨床研究均證明青蒿素或青蒿素衍生物對RA和自身免疫性疾病伴關節癥狀的具有較好的療效，具有消炎、鎮痛、免疫調節的療效。且具有見效快，無明顯的毒副作用的優勢。
本發明的藥物組合物適用于風濕性關節炎和自身免疫性疾病伴關節表現的病癥。
本發明的藥物組合物可以是任何常用的藥物形式，可以為固體制劑，如片劑、膠劑、栓劑、粉劑、顆粒劑、霜劑等；也可以為流體制劑，如口服液、注射液；或膏狀等。
本發明的制備方法，為本領域普通技術人員所公知的常用制備方法。
按照本發明的藥物組合物，優先是將其制成片劑或膠囊，每一片劑或膠囊含有10-100mg的青蒿素或青蒿素衍生物。
圖1為藥物組合物對大鼠佐劑性關節炎的影響(右后足)圖2藥物組合物對大鼠(左后足)佐劑性關節炎的影響
具體實施例方式本發明的藥物組合物一般為口服給藥，也可以其他途徑給藥，如治療RA和自身免疫性疾病伴關節癥狀的可以使用外用制劑。用量一般為1-10mg/Kg體重/天，成年患者的用量優選為每人每天20-200mg。
本發明使用的青蒿素或青蒿素衍生物(雙氫青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚，蒿乙醚)的制備工藝是已知的，有關其制備方法可見于諸文獻報道。
通過以下試驗可以對本發明進行更進一步的說明。但應該說明的是本發明的實驗內容只用于說明本發明，而不是限制本發明。
本發明的藥物組合物對試驗性一般關節炎及免疫性關節炎的影響實驗材料動物①健康Wistar大白鼠，體重130±20g、180±20g和150±20g，雌雄均有。合格證編號依次為SCXK(京)2002-0003、SCXK(京)2002-0003和SCK(京)2002-0006；②健康昆明種小白鼠，體重20±20g和13g±2g，雌雄均有。合格證編號均為SCXK(京)2002-001。均由我所動物室供給。
主要藥物①含有青蒿提取物包括青蒿素及青蒿素衍生物(雙氫青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚，蒿甲醚等)的藥物組合物。以下簡稱[藥物組合物]。
②強的松(5mg/片)，東北制藥總廠生產，批號20031113；③角叉菜膠，美國Sigma公司產品，批號87F-0463；④Freund’s完全佐劑，用衛生部北京生物制品研究所提供的卡介苗(批號20030115)制備，內含結核桿菌0.7mg/0.07ml。
儀器鼠足容積測定儀，自制。
方法與結果一、對大鼠角叉菜膠性足腫脹的影響參照大鼠足趾浮腫毛細血管放大測量法，取大鼠72只，體重130±20g，雌雄各半，隨機均分為五組，即空白對照組和模型組(給與給藥大劑量組相當量的蒸餾水)，藥物組合物大劑量組(54.0mg/Kg)、中劑量組(27.0mg/Kg)和小劑量組(5.4mg/Kg)及陽性對照組(強的松5.0mg/Kg)。均為口服灌胃給藥，每日一次，連續14天。于末次給藥后1小時測定鼠足容積(ml)，即將1％角叉菜膠生理鹽水0.1ml注入大鼠左后肢足跖皮下致炎，分別于注入后1小時、2小時、4小時、及6及小時，用鼠足容積測定儀測定鼠足容積，計算出腫脹值，用T檢驗比較各時間給藥組與對照組的差異情況。結果見表1。
表1.藥物組合物對大鼠角叉菜膠性足腫脹的影響(X±SD)劑量 動物數 腫脹值(ml)組別 (mg/Kg) (只)正常1小時 2小時 4小時 6小時對照組 1229.00±1.88 30.00±1.90**30.17±2.16**30.17±2.17**30.17±2.17**模型組 1228.33±2.49 34.25±2.8638.67±3.6338.67±3.6338.67±3.63強的松組5 1229.08±2.47 33.75±2.8636.08±4.1036.08±4.1036.08±4.10大劑量組54 1228.33±3.22 33.91±3.6234.64±2.87**34.64±2.87**34.64±2.87**中劑量組27 1228.00±2.34 33.42±2.4736.58±3.0636.58±3.0636.58±3.06小劑量組5.41228.67±2.54 34.58±2.3536.33±3.5336.33±3.5336.33±3.53與模型組比較**P＜0.01由表1可見，藥物組合物給藥各組足腫脹值均低于模型組，其中大劑量組作用明顯，以致炎后2、4、6小時足腫脹值與模型組比較P值均小于0.01，中、小劑量組足腫脹值雖無顯著差異，但與強的松作用一致。說明藥物組合物能抑制致炎劑角叉菜膠所致的足腫脹，即對致炎劑角叉菜膠引起的實驗性關節炎腫脹具有抑制作用，且藥物作用與藥物劑量有關。
二、藥物組合物對大鼠肉芽腫形成的影響取大鼠72只，體重180±20克，雌雄各半。實驗前所有動物腹腔注射戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉，采用手術方法分別于每只動物背部皮下植入已消毒和稱重的紐扣，縫合皮膚后，外部消毒。術后第二天，將成活動物均勻分為五組，即空白對照組(給與給藥大劑量組相當量的蒸餾水)，藥物組合物大劑量組(54.0mg/kg)、中劑量組(27.0mg/kg)和小劑量組(5.4mg/kg)以及陽性對照組(強的松5.0mg/kg)。各組動物均采用灌胃給藥，每天給藥一次，連續給藥14天。于末次給藥后第二天處死動物，取出植入的紐扣，仔細剝離附著組織，稱重，減去紐扣重，即為肉芽腫組織重量，用T檢驗進行統計學處理。結果見表2。
表2藥物組合物對大鼠肉芽腫形成的影響與空白對照組比較**P＜0.01由表2可見，藥物組合物給藥各組肉芽腫重量均明顯低于空白對照組劑量動物數肉芽腫重量組別(mg/Kg)(只) (mg)對照組 11259.73±44.58強的松組5 12173.75±43.10**大劑量組54 12176.42±37.98**中劑量組27 12177.17±32.25**小劑量組5.4 12180.50±34.63**(P＜0.01)。說明該藥物組合物對肉芽腫的形成有明顯的抑制作用，提示該藥具有很好的抗結締組織增生炎癥的作用。
三、對小鼠熱板法疼痛反應的影響參照小鼠熱板法加以改良，取小鼠80，體重20g±2g，雌雄各半，均分為五組，即空白對照組(給與給藥大劑量組相當量的蒸餾水)，給藥大劑量組(78.0mg/Kg)、中劑量組(39.0mg/Kg)和小劑量組(7.8mg/Kg)以及陽性對照組(阿斯匹林100.0mg/Kg)。均為口服灌胃給藥，每天一次，連續14天。于末次給藥后1小時，將各組小鼠分放在預先加熱到55℃的鋁盒內，以添后足作為疼痛反應的指標，記錄小鼠自投入熱板至出現舔后足反應的時間，用T檢驗進行統計學處理。結果見表3。
表3.藥物組合物對小鼠熱板法疼痛反映的影響(X±SD)劑量 動物數出現疼痛反應時間組別 (mg/kg) (n) (s)對照組 21 23.05±6.39阿司匹林組 100 19 36.74±11.79**大計量組 7820 38.15±8.82**中劑量組 3919 31.68±8.39**小計量組 7.8 21 29.29±6.63*與對空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01由表3可見，與空白對照組比較，藥物組合物給藥各組疼痛反應出現時間均延長，具有顯著性差異(P＜0.05-0.01)，與阿斯匹林作用一致，其中大劑量組作用最明顯，中劑量組次之，小劑量組再次之。說明藥物組合物對熱刺激法引起的小鼠疼痛反應有明顯的抑制作用，且藥物作用與藥物劑量有一定的關系。
四、對小鼠化學刺激法疼痛反應的影響按常規方法，取小鼠70只，體重13g±2g，雌雄各半，隨機分為五組，即空白對照組(給與給藥大劑量組相當量的蒸餾水)、給藥大劑量組(78.0mg/Kg)、中劑量組(39.0mg/Kg)和小劑量組(7.8mg/Kg)以及陽性對照組(阿斯匹林100.0mg/Kg)。均為口服灌胃給藥，每天一次，連續14 。于末次給藥后1小時將0.6％的醋酸溶液注射于小鼠腹腔內，以引起深部的、大面積而持久的疼痛刺激，致使小鼠產生扭體反應，觀察并記錄各組小鼠出現扭體反應的時間(潛伏期)及20分鐘內產生扭體反應的次數，用T檢驗進行統計學處理。結果見表4。
表4.藥物組合物對小鼠化學刺激法疼痛反應的影響(X±SD)動物數劑量 扭體次數組別 (n) (mg/Kg)(次數/20min)對照組 15 38.87±8.48阿司匹林組 1210023.67±10.77**大劑量組 1378 28.85±14.09*中劑量組 9 39 26.89±16.68*小劑量組 117.837.82±10.88與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01注因小鼠體重過小，在實驗過程中可能由于灌胃不當而死了部分，致每組數量參差不齊。
由表4可見，與空白對照組比較，藥物組合物大、中劑量組疼痛反應出現時間稍延長；20分鐘內扭體次數則明顯減少(P＜0.05)，與阿斯匹林作用相似。說明該藥物組合物對熱刺激法引起的小鼠疼痛反應有明顯的抑制作用，且與藥物劑量有一定的關系。
五、對大鼠佐劑性關節炎的影響參照藤村一及WAX等法，取大鼠72只，體重150±20g，雌雄各半，隨機均分為5組，其中一組為模型組(給與給藥大劑量組相當量的蒸餾水)；三組為陽性對照組(強的松5.0mg/Kg)；三組為腫立消給藥組，劑量分別為54.0mg/Kg、27.0mg/Kg和5.4mg/Kg。均為口服灌胃，每天一次，于注射Frdund’s完全佐劑當天開始給藥，直至實驗結束。將Freund’s完全佐劑0.05ml(內含死結核桿菌0.5mg)皮內注射于大鼠右后足墊內。注射佐劑前及后26天內隔日用鼠足容積測量儀測定大鼠右、左后足容積(ml)，用T檢驗進行統計學處理。結果見表5、表6和圖1藥物組合物對大鼠佐劑性關節炎的影響(右后足)和圖2藥物組合物對大鼠(左后足)佐劑性關節炎的影響。
表5.藥物組合物對大鼠佐劑性關節炎的影響(右后足)(X±SD)劑量 動物數 腫脹值(ml)組別 (mg/Kg)(只)注射前注射后第2天 第4天第6天第8天第10天模型組 12 29.17±1.27 39.92±2.64 43.00±3.69 41.00±5.3438.17±3.8139.33±2.49強的松組 512 28.75±1.66 39.00±3.13 39.42±2.54*36.92±2.91*35.66±2.9436.25±3.59*大劑量組 54 12 29.08±1.31 40.58±3.15 39.92±2.99*37.83±3.6135.67±3.8234.42±3.78**中劑量組 27 11 29.00±1.79 40.09±3.83 39.82±3.95 37.64±4.2135.55±2.8434.55±2.84**小劑量組 5.4 12 28.67±1.56 39.25±3.08 40.00±2.34*37.75±2.4534.42±2.23**34.92±2.50**表6藥物組合物對大鼠佐劑性關節炎的影響(左后足)(X±SD)組別 劑量 動物數腫脹值(ml)(mg/Kg) (只)注射前 注射后第2天 第4天第6天 第8天 第10天模型組1226.17±1.75 29.08±0.99 29.17±1.12 28.83±0.94 28.58±1.08 30.50±1.93陽性藥組 5 1226.25±2.05 28.58±1.73 29.25±1.87 28.42±1.73 28.50±1.51 30.08±1.73大劑量組 54 1226.00±1.65 28.75±1.66 28.83±2.21 28.75±1.55 28.42±1.88 29.33±2.06中劑量組 27 1125.91±1.45 29.45±1.92 28.18±1.47 28.18±1.40 28.46±1.75 29.18±1.60小劑量組 5.4 1226.50±2.07 29.17±1.47 29.25±1.77 28.58±1.83 28.08.±1.97 29.50±2.78腫脹值(ml)第12天 第14天 第16天 第18天第20天第22天第24天第26天29.92？.02 31.83？.99 31.42？.11 31.00？.95 30.58？.3531.25？.18 31.42？.73 31.00？.8629.17？.17 30.83？.21 29.58？.11*29.83？.82 29.25？.6029.92？.88 30.33？.78 30.33？.1528.25？.18 29.58？.64*28.83？.33**29.08？.64*29.00？.45*28.92？.35*29.17？.25*29.00？.49*29.09？.43 29.82？.23*28.82？.94**29.36？.91*28.55？.21*29.17？.25*29.27？.00*29.09？.17*29.17？.76 30.58？.08 29.17？.43 29.58？.0328.92？.68*29.17？.44*29.08？.19**29.33？.15與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01由表可見，大鼠右后足注射Freund’s佐劑后即早期炎癥反應，于注射后次日即呈明顯腫脹，逐漸加重，至第4天，足腫脹達高峰，然后逐漸減輕；于注射后第10天再度腫脹，至第18天發展成十分嚴重的腫脹狀態，持續到觀察期結束；因遲發性超敏反應，未注射佐劑的左后足于第10天開始腫大，且紅腫明顯，持續到觀察期結束。
藥物組合物給藥各組注射佐劑的右后足腫脹趨勢與強的松組基本一致，與模型組比較P＜0.05-0.01；未注射佐劑的左后足腫脹趨勢也與強的松組基本一致，與模型組比較，P值也＜0.05-0.01，且其作用的顯著性還優于強的松，但藥物組合物給藥各組作用差異不明顯。以上說明藥物組合物對Freund’s佐劑所致的原發性非特異性炎癥和續發性炎癥損害均有明顯的抑制作用，即對Frdund’s佐劑所致對大鼠佐劑性關節炎有明顯的抑制作用。
上述試驗結果表明藥物組合物對對致炎劑角叉菜膠所致大鼠足腫脹即實驗性關節腫脹具有明顯的抑制作用；對大鼠實驗性肉芽腫形成即對結締組織增生性炎癥有明顯的抑制作用。
同時，該藥物組合物對熱刺激及化學刺激所引起的小鼠疼痛反應均有明顯的抑制作用。
在上述實驗的基礎上，我們進一步進行并完成了佐劑性關節炎實驗，結果說明，藥物組合物對Freund’s完全佐劑所致大鼠佐劑性關節炎(系免疫性炎癥模型)有明顯抑制作用。且作用與強的松一致，甚至在還某些階段還優于強的松。
大鼠佐劑性關節炎常作為類風濕性關節炎及免疫性關節炎的一種實驗模型，上述實驗結果說明并肯定該藥物組合物對大鼠佐劑性關節炎的防治作用，為該藥物組合物防治類風濕性關節及自身免疫性疾病伴關節炎提供了一定的基礎和依據。
以上部分實驗資料只在于對本發明進行了說明。但應該理解的事，對于本發明的實驗技術人員來說，可以在不偏離本發明的精神實質的前提下，對本發明進行的修正和改進，都屬于本發明的保護范圍。
下面舉數個配方例對本發明作進一步詳細說明。
配方例一用20％的青蒿素或青蒿素衍生物的藥物組合物，80％中藥提取物組成配方。
配方例二用60％的青蒿素或青蒿素衍生物的藥物組合物，40％中藥或天然藥提取物組成配方。
配方例三用90％的青蒿素或青蒿素衍生物的藥物組合物，10％其他合成制劑組成配方。
需要說明的是中藥提取物的原材料是一般技術人員或臨床上可以使用的中藥或天然藥。該中藥或天然藥的提取物可以是單品種，也可以是多品種。其他合成制劑可以是化學合成藥物，也可以是藥物的載體。
本發明所述的制劑是將上述藥物與多種藥學上可以接受的賦形劑結合，采用混合，溶解，粒化，成片，糖包衣或膜包衣等已知方法制備成固態或液態形式的制劑，如片劑，膠囊，栓劑，顆粒劑及注射劑等。
權利要求
1.一種治療類風濕性關節炎和免疫性疾病的含青蒿提取物的藥物組合物，其特征在于為含有有效劑量的青蒿提取物如青蒿素或青蒿素衍生物的藥物組合物。
2.如權利要求1所述的治療類風濕性關節炎和免疫性疾病的含青蒿提取物的藥物組合物，其特征在于所述的蒿素衍生物包括雙氫青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚和蒿甲醚。
3.如權利要求1所述的治療類風濕性關節炎和免疫性疾病的含青蒿提取物的藥物組合物，其特征在于該組合物中青蒿素或青蒿素衍生物的含量為1~99％。
4.如權利要求1所述的治療類風濕性關節炎和免疫性疾病的含青蒿提取物的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物含有青蒿素或青蒿素衍生物的有效劑量為20~200mg/日。
5.如權利要求1所述的治療類風濕性關節炎和免疫性疾病的含青蒿提取物的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物可以單獨使用，也可以與現有治療RA和自身免疫性疾病的其他藥物聯合使用。
全文摘要
本發明涉及一種用于治療類風濕性關節類和自身免疫性疾病伴關節炎癥狀的藥物，治療類風濕性關節類和免疫性疾病的含青蒿提取物(雙氫青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚，蒿甲醚等)的藥物組合物。該組合物中青蒿素或青蒿素衍生物的含量為1~99％。該藥物組合物含有青蒿素或青蒿素衍生物的有效劑量為20~200mg/日。可以為任何常用的藥物形式，如固體制劑，流體，或膏狀等。
文檔編號A61P19/00GK1561994SQ20041003073
公開日2005年1月12日 申請日期2004年4月2日 優先權日2004年4月2日
發明者齊巖, 宋靖鋼 申請人:齊巖, 宋靖鋼