一種補氣與活血化淤藥物及其制備方法

專利名稱：一種補氣與活血化淤藥物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種補氣與活血化瘀藥物，以及該藥物的制備方法。
背景技術：
中國專利95104818.X，報道了一種《養心茶》，它是以龍眼肉、酸棗仁和獲苓等六種中藥為原料，配以紅茶精制而成。中國專利95100960.5，題為《蘭槐養心茶》，報導了以絞股藍、槐花為主等五位中藥配制，具有行血活血、養血養心益壽保健功能的袋泡普茶。現有的補氣與活血化瘀藥物的狀況，詳見表1。
表1 與本發明補氣與活血化瘀藥物療效類似的中藥方劑

現在產品存在的問題是配方不全面和制備工藝技術落后
(1)配方不全面現有產品的配方偏重于活血化瘀，或者偏重補氣(如生脈沖劑)，不能起到對冠心病、冠狀血管供血不足、心絞痛等病進行補氣和活血化瘀平衡治療的作用。
(2)制備工藝落后現有同類產品均采用傳統的中藥制備方法制成，制備工藝技術落后，無效雜質去除率低，總浸膏收得率高達10％以上；有效成份含量低，浸膏吸潮性強，制劑穩定性差；每次服用量大。

發明內容
本發明的目的是針對現有技術的不足而提供一種補氣與活血化瘀藥物。本發明的產品采用補氣藥物與活血化瘀藥物配伍的方法，組成對冠心病、冠狀血管供血不足、心絞痛具有保健和治療作用的新處方。該處方比現有同類處方的配伍更全面、更合理，臨床療效更好。
本發明的目的是通過以下方式實現的，本發明的補氣與活血化瘀藥物的處方份數除特殊說明外，均為重量份數。
本發明的補氣與活血化瘀藥物主要由下列重量份的原料藥制成丹參 2～30份 甘草 0.5～10份西洋參 0.5～10份五味子0.5～10份麥冬 1～20份 牛膝 2～30份本發明所述的補氣與活血化瘀藥物的制備方法如下(1)將西洋參0.5～10份粉碎成細粒，用水或與水任意比例的醇為溶劑，于回流溫度下提取5次，每次0.1～3小時(優選回流提取時間為每次2小時)，用薄層層析法控制提取終點，合并提取液、冷藏、過濾、濾液濃縮至膏狀，加入純水、攪勻、冷藏、過濾、備用；(2)將丹參2～30份、甘草0.5～10份、牛膝2～30份切成片，與麥冬1～20份、五味子0.5～10份混合，加水煎煮3次，水量為藥材體積的4～10倍，每次煎煮0.1～3小時(優選第一次煎煮2小時，第二、三次各煎煮1小時)，合并煎液，過濾、濾液調節pH＝5～8，與上述西洋參備用液合并，通過處理好的大孔樹脂吸附柱，用純水洗脫至流出液近無色，繼以乙醇洗脫至流出液近無色，收集醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，并濃縮至稠膏狀，真空干燥、粉碎就制成了本發明藥物的活性組分。
本發明藥物的活性組分可制備成任何一種口服劑型的藥物或保健品，如膠囊劑，片劑，顆粒劑等。
本發明具有如下優點1、本發明處方中丹參、牛膝活血化瘀，西洋參大補元氣、養陰生津；麥冬、五味子益津安神；甘草補中益氣、調和諸藥，全面配伍可起到益氣養陰、活血化瘀之功效。對氣陰兩虛夾血瘀的冠心病、心絞痛、高血壓等具有非常顯著的保健和綜合治療作用。
2、制劑工藝采用了Debulk先進技術，最大限度地除去了無效組分，精提出有效組分，總浸膏量在2％以下，大大提高了制劑穩定性，減少了每次服用量。Debulk技術系指通過消除中藥復方中無效物質而實現快速精制其活性組分的方法。該方法按照現代藥理學與中醫臨床理論建立中藥復方的療效評價標準，應用現代提取、分離及分析方法消除無效物質、高度富集活性組分，從而精制出符合中醫理論的多組分、多靶點協同作用的高度濃縮物，利用該濃縮物可制成各種質量可控的現代中藥制劑，以充分體現現代中藥“三小、三效、五方便”的特征。


圖1為本發明補氣與活血化瘀藥物的制備工藝流程圖。
下面通過實施例對本發明進行具體描述，有必要在此指出的是本實施例只用于對本發明進行進一步說明，不能理解為對本發明保護范圍的限制，該領域的技術熟練人員可以根據上述本發明的內容作出一些非本質的改進和調整。
具體實施例方式
實施例1～3是本發明藥物的制備實施例，這三個實施例是以每日處方配伍量計，配方組分詳見表2。
表2為實施例1～3配方組分丹參g 西洋參g 麥冬g 甘草g 五味子g 牛膝g編號1 3 55 1 1252 20 0.5 2.51 673 5 212 5.53.5 2實施例1(1)將西洋參5份粉碎成細粒，用水或與水任意比例的醇為溶劑，于回流溫度下提取5次，每次2小時，用薄層層析法控制提取終點，合并提取液、冷藏、過濾、濾液濃縮至膏狀，加入純水、攪勻、冷藏、過濾、備用；(2)將丹參3份、甘草1份、牛膝25份切成片，與麥冬5份、五味子1份混合，加水煎煮3次，水量為藥材體積的4倍，第一次煎煮3小時，第二、三次各煎煮0.5小時，合并煎液，過濾、濾液調節pH＝5，與上述西洋參備用液合并，通過處理好的D101型大孔吸附樹脂柱(D101型大孔吸附樹脂由天津市光復精細化工研究所提供)，用純水洗脫至流出液近無色，繼以乙醇洗脫至流出液近無色，收集醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，并濃縮至稠膏狀，真空干燥、粉碎、制粒、裝成膠囊。
實施例2(1)將西洋參0.5份粉碎成細粒，用水或與水任意比例的醇為溶劑，于回流溫度下提取5次，第一次3小時，第二次1小時，第三次0.5小時，用薄層層析法控制提取終點，合并提取液、冷藏、過濾、濾液濃縮至膏狀，加入純水、攪勻、冷藏、過濾、備用；(2)將丹參20份、甘草1份、牛膝7份切成片，與麥冬2.5份、五味子6份混合，加水煎煮3次，水量為藥材體積的9倍，第一次煎煮2小時，第二、三次各煎煮1小時，合并煎液，過濾、濾液調節pH＝8，與上述西洋參備用液合并，通過處理好的大孔吸附樹脂柱，用純水洗脫至流出液近無色，繼以乙醇洗脫至流出液近無色，收集醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，并濃縮至稠膏狀，真空干燥、粉碎，加入填充劑制成顆粒劑。
實施例3(1)將西洋參2份粉碎成細粒，用水或與水任意比例的醇為溶劑，于回流溫度下提取5次，每次2小時，用薄層層析法控制提取終點，合并提取液、冷藏、過濾、濾液濃縮至膏狀，加入純水、攪勻、冷藏、過濾、備用；(2)將丹參5份、甘草5.5份、牛膝2份切成片，與麥冬12份、五味子3.5份混合，加水煎煮3次，水量為藥材體積的6倍，第一次煎煮2小時，第二次煎煮2小時、第三次煎煮0.3小時，合并煎液，過濾、濾液調節pH＝7，與上述西洋參備用液合并，通過處理好的大孔吸附樹脂柱，用純水洗脫至流出液近無色，繼以乙醇洗脫至流出液近無色，收集醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，并濃縮至稠膏狀，真空干燥、粉碎，加入輔料，壓制成片。
實施例4中試生產(1)實驗材料丹參、西洋參、麥門冬、甘草、五味子、牛膝，購于重慶市中藥材公司。
(2)實驗方法取1000倍每日處方量的藥材，共30kg，將西洋參2kg粉碎成細粒，過40目篩；用80L 70％乙醇在50L多功能回流提取器(成都永泰制藥機械廠生產)中常壓80℃提取5次，每次2小時，合并提取液，于冷庫中4℃條件下冷藏12h；用布氏濾斗減壓抽濾，壓力0.05Mpa，常溫，濾過，濾液于V2多功能提取罐(常熟制藥機械廠生產)中減壓濃縮至相對密度1.20g/ml(20℃)；壓力0.01Mpa，溫度60℃，于5L不銹鋼桶內，加入純水至2000ml，以每分鐘30轉的速度攪拌10分鐘，4℃條件下冷藏12h，用布氏濾斗減壓抽濾，備用。
丹參10kg、甘草2kg、牛膝10kg切成薄片，與麥冬4kg、五味子2kg混合，以9倍量的水在500L V2多功能提取罐(常熟制藥機械廠生產)中浸泡1小時后，100℃煎煮三次，第一次2小時，后每次1小時；過濾，合并濾液，濾液用布氏濾斗減壓抽濾，壓力0.05Mpa，常溫；濾液以10％NaOH調節pH至5.0，滴加10％NaOH時以每分鐘30轉的速度攪拌，與上述西洋參備用液合并。以上合并的提取液通過處理好的Dl0l型吸附柱，Φ600mm，長2000mm，樹脂裝柱高度160mm，先用120L純水洗脫至流出液顏色淺，繼以160L 80％乙醇洗脫至流出液顏色淺，收集乙醇洗脫液120L，于V2多功能提取罐中減壓濃縮至相對密度1.20g/ml(20℃)，壓力0.01Mpa，溫度60℃，再于50L夾層鍋(成都永泰制藥機械廠生產)中常壓蒸發濃縮至稠膏狀，相對密度1.30g/ml(20℃)。將濃縮稠膏均勻灘涂于不銹鋼減壓盤中，放入上海實驗儀器廠生產的真空干燥器，60℃，0.01Mpa，48h，干燥，取出，用多功能粉碎機粉碎，過80目篩，裝1號膠囊，每粒重0.2g。
實驗結果30kg藥材照以上制備工藝進行中試，浸膏收率約2％，有效成分人參皂苷(Re+Rg)含量不低于0.6％，裝成3000粒1號膠囊，膠囊成品有效期2年。其中Rg和Re均為人參皂苷類別的名稱。
實施例5按照實施例3的配伍擴大3批，進行中試，方法同實施例4。其結果詳見表3。
表3 為實施例3的中試結果

實施例6-10為本發明藥物的藥理研究試驗實施例實驗材料采用本發明實施例1的中藥配方(以下實施例稱為藥物粉末)。藥物粉末為棕色，每克藥物粉末相當于原藥材50克。臨用前以蒸餾水配制所需溶液使用。
實施例6藥物粉末對大鼠急性心肌缺血保護作用實驗動物健康雄性SD大鼠(四川大學華西實驗動物中心，動物合格證號川醫動管第70號，)200±40g。
實驗方法大鼠禁食12小時稱重，隨機分為5組，藥物粉末高、中、低劑量組及空白溶媒組分別ig(灌胃給藥)4.5％、1.5％、0.5％(w/v)的藥物粉末溶液或蒸餾水，給藥體積均為10ml/kg，每日一次，連續給藥7天。陽性組動物ip(腹腔注射)硝酸甘油5mg/kg，給藥體積2.5ml/kg。陽性組藥后30分鐘，其余各組動物于末次ig給藥后1小時，ip烏拉坦(1.0g/kg)麻醉后，仰臥固定，將針狀電極插入皮下，調節ECG靈敏度1mv＝10mm，紙速50mm/s，記錄動物正常II導聯ECG，再尾iv(靜脈內注射)垂體后葉素0.5U/kg，注射速度為5秒。重復記錄垂體后葉素注射后立即、10秒、20秒、30秒、1分、2分、3分、4分、5分的II導聯ECG。
心肌缺血判斷標準(1)注射垂體后葉素后即刻到30秒S點、ST段抬高(超過0.1mv)；或(2)注射垂體后葉素后30秒至5分鐘T波低平、雙向、倒置為心肌缺血陽性標準。未出現上述缺血性變化者為陰性，計算心肌缺血陽性率。以x2檢驗進行組間差異的顯著性比較。結果見表4。
表4藥物粉末對大鼠心肌缺血的防治作用動物數 劑量 給藥心肌缺血心肌缺血組別(只)(g/kg/天) 途經動物數(只) 發生率(％)空白溶媒15 - ig 14 93藥物粉末10 0.05×7天 ig 7 70藥物粉末10 0.15×7天 ig 6 60*藥物粉末10 0.45×7天 ig 6 60*硝酸甘油10 5mg/kg ip 3 30***P＜0.05，**P＜0.01，與空白溶媒組比較結果顯示0.05、0.15與0.45g/kg藥物粉末連續給藥7天，可降低垂體后葉素誘發的麻醉大鼠ST段及T波的缺血性改變，減少心肌缺血發生率，并具有一定的劑量效應，其中高、中劑量組與空白溶媒組比較有顯著性差異(P＜0.05)，且其作用強度與單次ip硝酸甘油5mg/kg無明顯差異(P＞0.05)。本實驗表明藥物粉末對冠脈痙攣所致的大鼠急性心肌缺血有積極的防治作用。
實施例7藥物粉末對小鼠冠脈營養血流量的影響實驗動物健康雄性KM種小白鼠(四川大學華西實驗動物中心，動物合格證號川醫動管第67號)21～24g。
實驗方法禁食12小時后稱重，隨機分為5組，藥物粉末高、中、低劑量組及空白溶媒組分別ig2.25％、0.75％、0.25％藥物粉末溶液或蒸餾水，給藥體積均為20ml/kg；陽性組動物ip硝酸甘油20mg/kg，給藥體積10ml/kg。陽性組給藥后30分鐘、其余各組動物給藥后1小時，尾iv86RbCl溶液0.1ml，注射速度為5秒。86RbCl注射后30秒，斷頭處死動物，立即打開胸腔，取出心臟縱橫剪成“井”形，將血液沖洗干凈，放入測定管，直接于γ自動記數儀上測定小鼠心肌cpm。以t檢驗進行組間差異的顯著性比較。結果見表5。
表5 藥物粉末對小鼠心肌營養血流量的影響動物數劑量給藥小鼠心肌組別 (只) (g/kg/d)途徑cpm(x±s)空白溶媒 10 - ig 1619±192藥物粉末 10 0.05×7dig 1760±179##藥物粉末 10 0.15×7dig 1843±222*##藥物粉末 90.45×7dig 1923±299*硝酸甘油 10 20mg/kg ip 2141±182**P＜0.05，**P＜0.01，與空白溶媒對照組比較#P＜0.05，##P＜0.01，與硝酸甘油組比較結果顯示0.05、0.15、0.45g/kg藥物粉末單次ig給藥可增加小鼠心肌對86銣的攝取，其中高、中劑量組與空白溶媒組比較有顯著性差異(P＜0.05)，而高劑量組作用與單次ip硝酸甘油20mg/kg無統計學差異(P＞0.05)。本實驗表明藥物粉末可增加小鼠冠脈營養血流量。
結論藥物粉末可能通過擴張冠狀動脈、增加心肌營養血流量而防治心肌缺血。
實施例8藥物粉末對免疫功能的影響實驗動物健康雄性BALB/C小鼠(衛生部成都生物制品研究所實驗動物中心，動物合格證號川實動管第20-6號)18～22g。
實驗方法禁食12小時后稱重，隨機分為5組，每組48只，藥物粉末高、中、低劑量組及空白溶媒組分別ig2.25％、0.75％、0.25％藥物粉末溶液或蒸餾水，給藥體積均為20ml/kg，陽性組動物ig黃芪精口服液20ml/kg，每日一次，連續給藥7天。每組24只動物于給藥的第1、3天sc環磷酰胺100mg/kg，分別進行以下三個實驗(1)藥物粉末對正常及免疫低下小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響末次給藥24h后，小鼠ip5％雞紅細胞生理鹽水懸液0.5ml，8h后脫頸椎處死上述動物，ip Hank’s液2ml，輕揉腹部1min，吸出腹腔洗液1ml，分別滴于2片載玻片上，放入濕盒，于37℃孵30min，NS漂洗、晾干，以1∶1的丙酮-甲醛溶液固定5min，Giemsa染色15min，于油鏡下計數MΦ，每片200個MΦ中含吞噬雞紅細胞的MΦ數。取2片的平均值。計算吞噬的百分率及吞噬指數。以t檢驗進行組間差異的顯著性比較。結果見表6、7。
表6藥物粉末對正常小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響組別 動物數 劑量吞噬指數 吞噬百分率(只)(g/kg/d)(x±s) (x±s，％)空白溶媒 12 - 0.47±0.11 46±7藥物粉末 12 0.05×7d0.68±0.18**53±9*藥物粉末 12 0.15×7d0.88±0.23**58±7**藥物粉末 12 0.45×7d0.75±0.18**56±9**黃芪精11 20ml/kg×7d 0.87±0.18**58±8**
*P＜0.05，**P＜0.01，與空白溶媒對照組比較.
表7藥物粉末對免疫低下小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響組別動物數 劑量 吞噬指數吞噬百分率(只)(g/kg/d) (％)空白溶媒11 -0.42±0.10 26±6藥物粉末12 0.05×7d 0.59±0.13 28±6藥物粉末12 0.15×7d 0.94±0.32**36±8**藥物粉末12 0.45×7d 0.95±0.51**35±13*黃芪精 11 20ml/kg×7d 0.92±0.51**32±11**P＜0.05，**P＜0.01，與空白溶媒對照組比較.
藥物粉末0.05、0.15與0.45g/kg/d連續灌胃給藥7天，均可明顯激活正常小鼠巨噬細胞吞噬功能(P＜0.05或P＜0.01)，)，其作用強度與20ml/kg黃芪精口服液相似；中、高劑量藥物粉末可明顯激活免疫低下小鼠巨噬細胞吞噬功能，其作用強度與20ml/kg黃芪精口服液相似(P＞0.05)。
(2)藥物粉末對正常及免疫低下小鼠NK細胞活性的影響末次給藥24h后，小鼠脫頸椎處死，無菌取出脾臟制備脾細胞懸液，以YAC-1為靶細胞，脾細胞為效應細胞，用LDH法檢測脾細胞NK細胞活性(效靶比為50∶1)。每個樣本做3個復孔。以t檢驗進行組間差異的顯著性比較。結果見表8、9。
表8藥物粉末對正常小鼠NK細胞活性的影響組別動物數劑量 NK細胞活性(只) (g/kg/d) (％)空白溶媒12- 13.82±4.28藥物粉末120.05×7d 15.12±5.42##藥物粉末120.15×7d 19.16±5.18*##藥物粉末120.45×7d 18.49±5.28*##黃芪精 1120ml/kg×7d34.13±8.18***P＜0.05，**P＜0.01，與空白溶媒對照組比較；##P＜0.01，與黃芪精組比較表9藥物粉末對免疫低下小鼠NK細胞活性的影響組別動物數劑量 NK細胞活性(只) (g/kg/d) (％)空白溶媒11- 8.75±4.38藥物粉末120.05×7d 12.16±5.28##藥物粉末120.15×7d 15.64±4.54**##藥物粉末130.45×7d 14.65±4.35**##黃芪精 1120ml/kg×7d 37.24±3.65****P＜0.01，與空白溶媒對照組比較；##P＜0.01，與黃芪精組比較藥物粉末0.05、0.15與0.45g/kg連續灌胃給藥7天，中、高劑量可明顯增加正常與免疫低下小鼠脾臟NK細胞活性(P＜0.05)，但作用強度弱于20ml/kg黃芪精口服液(P＜0.01)。
(3)藥物粉末對正常及免疫低下小鼠遲發型變態反應的影響給藥第2天，將半抗原二硝基氟苯(DNFB)涂抹于小鼠腹部皮膚致敏，并于次日強化一次。致敏后5日，以DNFB攻擊小鼠右耳，24小時后，脫頸椎處死小鼠，于同一部位取直徑8mm的左右耳片，以其重量之差為耳腫脹度，以此為遲發型變態反應強度。以t檢驗進行組間差異的顯著性比較。結果見表10、11。
表10藥物粉末對正常小鼠遲發型變態反應的影響組別動物數劑量 耳腫脹度(只) (g/kg/d) (x±s，mg)空白溶媒11- 6.7±3.2藥物粉末120.05×7d 9.0±2.4藥物粉末120.15×7d 9.4±4.4藥物粉末120.45×7d 10.4±2.9*黃芪精 1220ml/kg×7d 12.1±5.2**P＜0.05，與空白溶媒對照組比較表11 藥物粉末對免疫低下小鼠遲發型變態反應的影響組別動物數 劑量 耳腫脹度(只)(g/kg/d) (x±s，mg)空白溶媒13 - 3.0±2.4藥物粉末12 0.05×7d 3.7±3.4藥物粉末12 0.15×7d 4.0±2.3藥物粉末12 0.45×7d 5.6±4.2*黃芪精 12 20ml/kg×7d 7.7±3.7***P＜0.05，**P＜0.01，與空白溶媒對照組比較藥物粉末0.05、0.15與0.45g/kg連續灌胃給藥7天，高劑量可明顯激活正常與免疫低下小鼠遲發型超敏反應強度(P＜0.05)，增強特異性細胞免疫功能，作用強度與20ml/kg黃芪精口服液沒有統計學差異(P＞0.05)。
結論本實驗結果顯示藥物粉末可非常顯著地增強非特異性免疫功能，明顯增強特異性細胞免疫功能。
實施例9 藥物粉末對提高耐缺氧能力和體力(1)藥物粉末對常壓耐缺氧能力的影響健康KM種小鼠(四川大學華西實驗動物中心，動物合格證號川醫動管第67號)18～20g，♀♂各半，禁食12小時后稱重，隨機分為5組，藥物粉末高、中、低劑量組及空白溶媒組分別ig2.25％、0.75％、0.25％藥物粉末溶液或蒸餾水，給藥體積均為20ml/kg，每日一次，連續給藥3天。陽性組動物ig紅景天口服液20ml/kg，每日一次，連續給藥3天。末次給藥后1h，在常壓缺氧條件下，以呼吸停止為指標，記錄小鼠在密閉廣口瓶內存活時間。以t檢驗進行組間差異的顯著性比較。結果見表12。
表12.藥物粉末對小鼠常壓耐缺氧能力的影響動物數劑量 存活時間存活時間延長率(％)組別(只) (g/kg)(x±s，min)溶媒對照10 - 30.9±3.0 -
藥物粉末 100.05 38.4±6.4**24.2藥物粉末 100.15 38.4±6.7**24.1藥物粉末 100.45 37.0±3.6**19.5紅景天1020ml/kg 38.7±10.5*25.1*P＜0.05，**P＜0.01與空白溶媒對照組比較結果顯示藥物粉末0.05、0.15、0.45g/kg和紅景天口服液20ml/kg均可顯著延長小鼠在常壓缺氧條件下的存活時間(P＜0.05或P＜0.01)，說明藥物粉末有增強小鼠耐常壓缺氧能力的功效。
(2)藥物粉末對減壓耐缺氧能力的影響健康KM種小鼠(四川大學華西實驗動物中心，動物合格證號川醫動管第67號)18～20g，♀♂各半，禁食12小時后稱重，隨機分為5組，藥物粉末高、中、低劑量組及空白溶媒組分別ig2.25％、0.75％、0.25％藥物粉末溶液或蒸餾水，給藥體積均為20ml/kg，陽性組動物ig紅景天口服液20ml/kg，每日一次，連續給藥3天。末次給藥后1h，在減壓缺氧條件下，以觀察到40％小鼠呼吸停止為指標，記錄各組小鼠存活情況，計算各組小鼠存活率。以X2檢驗進行組間差異的顯著性比較。結果見表13。
表13.藥物粉末對小鼠減壓耐缺氧能力的影響劑量動物數存活動物數 動物存活百分率組別 (g/kg) (只) (只)(％)空白溶媒 - 155 33藥物粉末 0.051512 80**藥物粉末 0.15158 53藥物粉末 0.45158 53紅景天20ml/kg 1512 80****P＜0.01與空白溶媒對照組比較結果顯示在減壓缺氧條件下，0.05g/kg藥物粉末和20ml/kg紅景天口服液可顯著提高小鼠的存活率(P＜0.01)，0.15、0.45g/kg藥物粉末使小鼠在減壓缺氧條件下的存活率有所增加，但無統計學意義(P＞0.05)，說明藥物粉末對機體耐減壓缺氧能力的影響有最適的劑量范圍。
(3)藥物粉末的抗疲勞作用健康KM種小鼠(四川大學華西實驗動物中心，動物合格證號川醫動管第67號)18～20g，♀♂各半，禁食12小時后稱重，隨機分為5組，藥物粉末高、中、低劑量組及空白溶媒組分別ig2.25％、0.75％、0.25％藥物粉末溶液或蒸餾水，給藥體積均為20ml/kg，陽性組動物ig紅景天口服液20ml/kg，每日一次，連續給藥5天。末次給藥后1h，小鼠在負重條件(體重的6％)下游泳，記錄小鼠游泳時間(以小鼠頭部沉入水中10秒不能浮出水面為體力耗竭指標)，以t檢驗進行組間差異顯著性比較。結果見表14。
表14.藥物粉末對小鼠游泳耐力的影響動物數劑量 游泳時間 游泳時間延長率組別(只) (g/kg) (x±s，min)(％)空白溶媒10 - 9.3±4.9 -藥物粉末10 0.0517.3±14.7 86藥物粉末10 0.1511.6±7.1 24藥物粉末10 0.4513.5±8.5 45紅景天 10 20ml/kg 21.0±17.0 125結果顯示0.05、0.15、0.45g/kg和20ml/kg紅景天口服液均可延長小鼠的負重游泳時間，具有一定的抗疲勞作用，但因動物個體差異大，與空白對照組比較無統計學意義(P＞0.05)。
結論藥物粉末可明顯增強小鼠在常壓及減壓條件下的耐缺氧能力、增加體力，具有一定的抗疲勞功效。
實施例10藥物粉末的調血脂作用(1)藥物粉末對家兔高脂血的影響健康雄性家兔喂飼普通飼料一周后，耳緣靜脈取血，分離血清，分別測定各家兔血脂的TG、TC、HDL-C、LDL-C等4項指標作為造模前的正常值。根據血脂TC水平，隨機分為6個組。從第二周起，按照體重灌胃給藥，每日一次；高脂血癥各組喂飼高脂飼料(100g飼料量/天/只)，正常對照組喂等量普通飼料，各組動物每日喂兩次青飼料。家兔每周稱重一次，并按照體重調整給藥劑量。喂飼高脂飼料3周、6周時自耳緣靜脈取血，分離血清，分別用GPO-POD法、CE-COD-POD法、PTA-Mg2+法、PVS法測定TG、TC、HDL-C、LDL-C血脂含量，以t檢驗進行組間均數差異的顯著性比較。結果見表15。
洛伐他汀主要通過抑制三羥基-三甲基-戊二酰輔酶A還原酶、減少內源性TC的合成而發揮調脂作用。對喂養法建立的兔高脂血癥模型，4mg/kg/d洛伐他汀連續給藥3、6周時，均有輕度降低TC、LDL的作用。
0.05、0.15與0.45g/kg/d藥物粉末連續給藥3周時，對血脂各指標無影響；給藥6周后，藥物粉末可明顯降低TG水平，其中高劑量可明顯增加“抗動脈粥樣硬化指數”HDL/TC。
表15.藥物粉末對高血脂癥家兔血脂水平的影響組劑量觀察時 動物數 TC TG HDL-C LDL-C HDL-C/TC別(g/kg) 間(周) (只) (mmol L-1) (mmol L-1) (mmol L-1) (mmol L-1)(比值)正常 0 10 2.09±0.83 0.86±0.34 0.97±0.20 0.75±0.45對照 - 3 10 1.91±0.64 0.70±0.33 0.67±0.05 0.76±0.36 -0 10 2.41±1.19 1.02±0.58 0.87±0.28 0.96±0.58高脂- 3 10 27.51±8.03 1.75±1.06 1.05±0.42 17.54±5.59對照 6 10 26.64±2.82 5.56±4.13 0.39±0.26 21.50±5.040.0147±0.00950 10 2.41±0.65 1.19±0.61 0.89±0.10 0.88±0.30藥物0.103 8 26.85±12.74 1.88±0.95 1.05±0.40 16.44±8.15粉末 6 8 23.72±6.96 2.13±0.98*0.54±0.19 19.90±7.62 0.0325±0.03560 10 2.31±0.68 0.93±0.45 0.96±0.21 0.88±0.33藥物0.153 10 27.22±5.63 2.43±1.55 0.97±0.31 16.71±3.64粉末 6 8 23.52±3.72 2.20±1.79*0.59±0.44 18.04±5.91 0.0284±0.02470 10 2.59±1.39 1.03±0.60.89±0.23 0.85±0.54藥物0.453 9 28.48±7.48 2.29±1.80 1.09±0.34 16.88±4.750.0326±粉末 6 9 23.55±4.56 2.16±1.25*0.75±0.34*18.04±5.580.0106**0 10 2.70±1.69 1.04±0.77 0.71±0.24 1.15±0.77洛伐 43 10 25.85±5.44 2.12±1.28 1.00±0.20 15.15±4.78他汀 mg/kg6 9 24.98±4.40 3.84±2.80 0.47±0.30 19.72±6.670.0185±0.0122
(2)藥物粉末對大鼠高血脂的影響健康雄性SD大鼠，喂普通飼料觀察一周后，尾部取血，分離血清，分別測定各鼠血脂的TG、TC、HDL-C、LDL-C等4項指標作為造模前的正常值。根據血脂TC水平，隨機分為6組。從第二周起，按照體重灌胃給藥，每日一次；高脂血癥動物喂飼高脂飼料(20g飼料量/天/只)，正常對照組喂等量普通飼料。大鼠每周稱重一次，并按照體重調整給藥劑量。喂飼高脂飼料2周、4周時尾部取血，分離血清，分別用GPO-POD法、CE-COD-POD法、PTA-Mg2+法、PVS法測定各鼠血脂的TG、TC、HDL-C、LDL-C血脂含量，以t檢驗進行組間均數差異的顯著性比較。結果見表16。
由紅曲、山楂、白術等中藥提取制成的脂必妥片主要通過抑制三羥基-三甲基-戊二酰輔酶A還原酶、減少內源性TC的合成而發揮調脂作用。對喂養法建立的大鼠高脂血癥模型，0.6g/kg/d脂必妥片連續給藥4周后，HDL明顯升高(P＜0.01)，其余血脂指標未有明顯變化；藥物粉末連續給藥4周后，TC明顯降低(P＜0.05)，LDL有降低趨勢，其中高劑量明顯升高HDL水平(P＜0.01)。
結論喂養法建立的動物高脂血癥模型主要是通過增加動物對外源性膽固醇的吸收來實現的，因此在研究藥物的調脂作用時，喂養法所采用的高脂飼料配方對結果影響很大。在本試驗條件下，藥物粉末對喂養法建立的家兔高脂血癥有一定的防治作用，對大鼠高脂血癥有明顯的防治作用。
表16藥物粉末對高脂血癥大鼠血脂水平的影響 (x±s)組劑量觀察時 動物數 TC TG HDL-C LDL-C HDL/TC別(g/kg) 間(周) (只) (mmol L-1) (mmol L-1) (mmol L-1) (mmol L-1) 比值正常 0 12 1.29±0.56 0.49±0.22 0.61±0.320.47±0.17 -對照 - 2 12 1.51±0.35 0.61±0.08 0.98±0.150.44±0.210 12 1.47±0.32 0.59±0.10 0.65±0.170.57±0.12高脂- 2 12 3.19±1.40 0.82±0.29 0.91±0.211.49±0.86對照 4 12 3.81±1.15 0.50±0.18 0.77±0.171.47±0.48 0.231±0.1270 12 1.50±0.41 0.48±0.16 0.65±0.150.56±0.17藥物0.052 12 2.13±0.56*0.68±0.11 0.80±0.140.98±0.34粉末 4 12 3.32±1.19 0.54±0.20 0.99±0.121.27±1.12 0.327±0.1010 12 1.53±0.35 0.56±0.16 0.63±0.220.58±0.10藥物0.102 12 4.25±1.55 0.67±0.12 1.00±0.122.17±0.98粉末 4 11 2.70±0.94*0.37±0.12 0.99±0.240.98±0.61 0.389±0.096*0 12 1.59±0.29 0.53±0.13 0.66±0.170.62±0.12藥物0.302 11 2.54±0.77 0.72±0.10 0.84±0.141.23±0.56粉末4 11 2.39±0.89*0.56±0.22 1.05±0.24**0.92±0.43 0.499±0.216*脂必 0 12 1.45±0.34 0.54±0.08 0.63±0.180.56±0.170.602 12 3.59±1.55 0.64±0.09 1.03±0.181.85±1.18妥4 11 3.43±1.16 0.52±0.13 1.04±0.21**1.33±0.74 0.324±0.10權利要求
1.一種補氣與活血化瘀藥物，其特征在于該藥物主要是由下列重量份的原料藥制成丹參2～30份甘草 0.5～10份西洋參 0.5～10份 五味子0.5～10份麥冬1～20份牛膝 2～30份
2.權利要求1所述的藥物，其特征在于，該藥物是口服劑型。
3.權利要求1所述藥物的制備方法，其特征在于(1)將西洋參0.5～10重量份粉碎成細粒，用水或與水任意比例的醇為溶劑，于回流溫度下提取5次，每次0.1～3小時，用薄層層析法控制提取終點，合并提取液、冷藏、過濾、濾液濃縮至稠膏狀，加入純水、攪勻、冷藏、過濾、備用；(2)將丹參2～30份、甘草0.5～10份、牛膝2～30份切成片，與麥冬1～20份、五味子0.5～10份混合，加水煎煮3次，水量為藥材體積的4～10倍，每次0.1～3小時，合并煎液，過濾、濾液調節pH＝5～8，與上述西洋參備用液合并，通過處理好的大孔樹脂吸附柱，用純水洗脫至流出液近無色，繼以乙醇洗脫至流出液近無色，收集醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，并濃縮至稠膏狀，真空干燥、粉碎就制成了本發明藥物的活性組分。
全文摘要
本發明涉及一種補氣與活血化淤藥物及其制備方法。其特點是將西洋參0.5～10份粉碎成細粒，用水或與水任意比例的醇為溶劑，于回流溫度下提取5次，再用薄層層析法控制提取終點，合并提取液、冷藏、過濾、濾液濃縮至稠膏狀，加入純水、攪勻、冷藏、過濾、備用；將丹參2～30份、甘草0.5～10份、牛膝2～30份切成片，與麥冬1～20份、五味子0.5～10份混合，加水煎煮3次，合并煎液，過濾、濾液調節pH＝5～8，與上述西洋參備用液合并，通過處理好的大孔樹脂吸附柱，用純水洗脫至流出液近無色，繼以乙醇洗脫至流出液近無色，收集醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，并濃縮至稠膏狀，真空干燥、粉碎就制成了本發明藥物的活性組分。
文檔編號A61P9/10GK1660157SQ200410006660
公開日2005年8月31日 申請日期2004年2月25日 優先權日2004年2月25日
發明者曾慶忠, 錢忠明 申請人:香港理工大學