專利名稱：治療胰島素耐受性、成人發作型糖尿病以及代謝綜合癥x的方法
技術領域：
本發明涉及一種用主要包含磷脂類的治療性脂質體混懸液治療哺乳動物胰島素耐受性、成人發作型糖尿病和代謝綜合癥X以及其相關并發癥的方法。
背景技術：
對于體內平衡的維持而言，關鍵是保持葡萄糖向細胞的恒定供應以避免發生血糖代謝障礙以及與其相關代謝失調。如果忽視或不進行治療，代謝性血糖代謝障礙將導致許多代謝疾病，包括肥胖、心臟病、高血壓、糖尿病、慢性疲勞、加速老化、變性疾病、以及許多精神和情感問題。為此，在出現可破壞生命質量并縮短生命質量的費用大的和使殘廢的變性病癥前確定這種病癥并同時對其及早進行治療是很重要的。
血糖代謝障礙和糖尿病十分緩慢、靜靜地并危險地顯露出來。如American Diabetes Association所公開的那樣，三分之一以上患有糖尿病的美國成人(五百萬以上的人口)一點也沒有意識到其有病。許多人只是在其出現嚴重的使人虛弱的病癥如心臟病、中風、視力受損、腎疾病、神經損傷或陽萎以后才對他們的疾病情況有所了解。AmericanDiabetes Association事實和數字，2000，于www.diabetes.Org/info/facts/facts_natl.jsp。
糖尿病(Diabetes或diabetes mellitus)是一種當機體不用能血液中的葡萄糖作為能量時發生的疾病，其是因為胰腺不能制造足夠的胰島素或可獲得的胰島素不能被有效利用所產生的。糖尿病的早期跡象是葡萄糖耐受不良和胰島素耐受性。主要有兩種類型的糖尿病胰島素依賴型(1型)和非胰島素依賴型(2型或成人發作型糖尿病)。
第三種類型的糖尿病是僅在之前沒有糖尿病史的孕婦中發生的妊娠糖尿病。每年幾乎有135,000名美國婦女產生妊娠糖尿病，妊娠糖尿病一般在婦女在生下她們的寶寶之后自動消失。但是研究表明約40％患有妊娠糖尿病的婦女接下來在15年內形成2型糖尿病(NIH出版號02-3873，2002年5月)。
在胰島素依賴型糖尿病(IDDM；I型糖尿病)中，因為制造胰島素的β-細胞已經被破壞，所以胰腺幾乎不制造或不制造胰島素。其通常出現在任何年齡，但是通常發生于幼年期和30歲以后，最典型地發生于兒童期或青春期。治療包括每日注射胰島素或使用胰島素泵、有計劃的飲食和定期鍛煉、以及每日對血糖的自我監控。如果胰島素的水平長期太低，則機體開始分解其儲藏的脂肪以獲得能量。這使得機體釋放脂肪酸，其然后轉化成在高水平時有毒的酮體或酮酸。該結果是所謂的酮酸中毒——一種如果不立刻治療則可能使人昏迷的嚴重情況。
在非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM；II型糖尿病或成人發作型糖尿病(AOD))中，胰腺不能制造足夠的胰島素或機體組織變得對胰島素有耐受性。因為胰島素不能被利用或被不正確地使用，所以血糖水平升高至安全水平以上。患者的血糖水平常常逐漸升高，經過幾年才達到不安全的水平并產生癥狀。因此，對一些人而言，在還沒有形成糖尿病情況的情況中，胰島素的正常或過高水平補償了該類耐受性。但是，隨著時間的流逝，胰島素的產生常常下降并且耐受性加重。在所有糖尿人群當中約90-95％的人有AOD。其在40歲以上的人中更常見。
AOD是由基因、環境、胰島素異常(β-細胞中胰島素分泌減少和在肌細胞中產生胰島素耐受性)、肝中葡萄糖產生增加、脂肪分解增加、以及可能的腸中有缺陷的激素分泌的復雜的相互作用引起的。最近這種疾病顯著增加表明生活方式因素如肥胖和久坐的生活方式在釋放引起該疾病的遺傳成分中可能是有巨大貢獻的因素。
胰島素刺激的葡萄糖吸收的個體間差異很大(Stern，M.P.和Mitchell，B.D.胰島素耐受性遺傳性(Genetics of InsulinResistance).在G.M.Reaven和A.Laws(eds).胰島素耐受性，代謝綜合征X，3-18頁，Humana Press Inc.，Totowa，NJ，1999)。在正常個體中觀察到的胰島素耐受性的程度可能與在糖尿病個體中看到的程度相等。因此，現在普遍認為在形成成人發作型糖尿病前優先出現該胰島素耐受性。其同樣也必需承認在從來沒有形成過糖尿病的個體中可能也會發現輕度或甚至嚴重的胰島素耐受性。基因因素有助于胰島素耐受性的這種正常變動。胰島素耐受性的常見形式包括骨骼肌胰島素耐受性、肝胰島素耐受性和脂肪組織胰島素耐受性。G.M.Reaven和A.Laws，(eds)，胰島素耐受性，代謝綜合征X，3-18頁，HumanaPressInc.，Totowa，NJ，1999的全部內容在這里被全部引入本文作為參考。
細胞對胰島素的響應是由質膜中一種特殊的胰島素受體介導的。當胰島素激活該受體時，β-亞基在近膜區域、激酶領域和C-末端領域上被自動磷酰化。完全的受體自磷酸化隨后活化了該蛋白酪氨酸激酶受體活性，其都是細胞對胰島素產生響應所必需的(Kahn，C.R.等人，J.Clin.Invest.828622-8626，1988)。
胰島素耐受性是一種對細胞、組織、肝臟或整個機體中外源性或內源性胰島素正常水平的一種損害響應。其可以由一些因素引起，即(1)肥胖因素(如游離脂肪酸水平升高以及胰島素耐受性和細胞因子如抵抗素和來普汀的聯合作用(Mooradian A.D.，Growth Horm.IGF Res.11增刊AS79-83，2001；Ravussin，E.和Smith，S.R.，Ann.N.Y.Acad.Sci.967363-78，2002))；(2)蛋白如鈣蛋白酶(Baier，L.J.等人，J.Clin.Invest.106819-21，2000)；(3)影響循環系統和神經系統的糊精和降鈣素基因相關肽(CGRP)的異常調節(Leighton，B.和Cooper，G.J.，Nature 335632-5，1988；Haynes，J.M.等人Diabetologia 40256-61，1997)；(4)作為炎癥和損害標記的白介素-6(IL-6)和C-反應性蛋白(CRP)水平升高(Hak，A.E.等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.864398-405，2001；Pickup，J.C.等人，Diabetologia 401286-92，1997)；和(5)青春期過程中生長激素水平增加(Dunger，D.B.和Cheetham，T.D.，Horm.Res.462-6，1996；Halldin，M.U.等人，Clin.Endocrinol.(Oxf)48785-94，1998)。
不考慮性別或年齡，患有AOD的人死亡的主要原因是心臟病。與糖尿病有關的其它并發癥包括神經損傷(神經病)和小血管和大血管中的血管異常。心臟病發作占所有糖尿病患者死亡的60％，中風占25％。糖尿病患者有出現心臟風險情況的風險，所說的心臟風險情況包括高血壓、甘油三酯水平高和高密度脂蛋白下降、血液凝固問題、神經病、以及無癥狀局部缺血。為了避免這些并發癥中的一些，用它汀類物質(statins)對糖尿病患者進行治療以改善他們的膽固醇和脂質水平，所說的它汀類物質例如，普伐它汀(普拉固)、辛伐它汀(舒降之)、氟伐它汀(來適可)、阿伐它汀(立普妥)、以及羅蘇伐它汀(Crestor)。還可以使用煙酸來改善該膽固醇水平，但是其也增加了血糖水平。
藥物療法是治療成年發作型糖尿病的一種常見方法。目前在進行或不進行胰島素替代治療的情況下可以單獨或聯合使用口服物質如磺酰脲類(例如，格列本脲、格列吡嗪、格列美脲)、氯茴苯酸類、雙胍類、噻唑啉二酮類物質、以及α-糖苷酶抑制劑。
一些形式的胰島素類似物可用于患有成年發作型糖尿病的患者。但是，胰島素對重量增加以及心臟的可能的不利影響是令人討厭的。事實上，與胰島素治療(28％)相比，用藥物處理進行治療可以降低死亡率(二甲雙胍(8％)、磺酰脲類(16％)以及噻唑啉二酮類(14％)。
代謝綜合征X(MS-X)是一種通綜合獨立和相關的并發癥或病癥而促進動脈粥樣硬化并增加心血管事件風險的病癥。這種病癥本身有多種不同的稱呼，包括被稱為“綜合征X”、“胰島素耐受性綜合征”(Li，C.等人，Diabetes Care 242035-2042，2001)、“Reaven′s綜合征”(Home，P.，Diabet.Med.6559-560，1989)和“代謝性心血管風險綜合征”(Hjermann，I.，J.Cardiovasc.Pharmacol.20S5-S10，1992)。MS-X相關的并發癥或病癥包括血脂障礙(高甘油三酯血癥和低高密度脂蛋白(HDL)-膽固醇)、血栓形成前的狀態、2型糖尿病(成人發作型糖尿病)、胰島素耐受性/高胰島素血癥、高血壓、和腹部肥胖。Grundy，S.M.Am J Cardiol.8118B-25B，1998。
雖然患者可能沒有任何MS-X癥狀，但主治醫生可以將下面的情況確定為病癥的跡象(1)由于胰島素耐受性而導致的胰島素水平升高；(2)II型糖尿病；(3)向心性肥胖(腹部區域的機體脂肪數量不成比例)；(4)高脂血癥(血液中脂肪(脂質)水平高，其誘導了LDL(“不良的(bad)”)膽固醇和甘油三酯。此外，LDL的程度可能低于正常，其更有可能促進動脈粥樣硬化)；(5)低HDL(“良好的(good)”)膽固醇水平；(6)高血壓；(7)促進血液凝固的血液因素如纖溶酶原活化劑抑制劑-1(PAI-1)和纖維蛋白原的水平升高；(8)高尿酸血癥(血中尿酸的水平高)；和(9)微白蛋白尿(在對尿進行分析時發現少量蛋白白蛋白)。Grundy S.M.，Am.J.Cardiol.8325F-29F，1999。
這些并發癥或病癥各自獨立地促進了動脈粥樣硬化。然而，當組合到-起時，其致動脈粥樣化性增加并增加了任何低密度脂蛋白膽固醇水平下心血管疾病(CVD)的風險。除增加患者的CVD風險外，MS-X可能會增加中風、2型糖尿病的發展(Lebovitz，H.E.，Exp.Clin.Endocrinol.Diabetes 109S135-S148，2001)、糖尿病腎病、視網膜病、和末梢神經病(Isomaa，B.等人，Diabetologia 441148-1154，2001)的形成。
使用上述特征，一份評估表明在美國到2010年時五千萬至七千五百萬人可能會表現出顯著的MS-X跡象。Hansen，B.C.，Ann.N Y Acad.Sci.8921-24，1999。
根據世界衛生組織(WHO)的指導準則，如果存在下面的特征，則個體將被診斷為患有MS-Xa)高血壓(收縮壓＞140mm Hg或舒張壓＞90mm Hg)；(b)被定義為血漿甘油三酯升高(150mg/dL)和/或低高密度脂蛋白(HDL)膽固醇(男性＜35mg/dL，女性＜39mg/dL)濃度的血脂障礙；3)被定義為高體重指數(BMI)(30kg/m2)和/或高腰臀比(男性＞0.90，女性＞0.85)的肥胖；和4)微白蛋白尿(尿白蛋白分泌速率≥20μg/min)。見WHO-International Society of Htypertension Guidelinesfor the Management of Hypertension。Guidelines Subcommittee.JHypertens.17151-183，1999。根據這種標準，患有2型糖尿病的個體必需僅符合2個條件以被診斷為MS-X。
根據National Cholesterol Education Program(NCEP ATP IIIstudy)確定的相似指導方針，如果存在3個或多個下面的風險因素，則確定一個人將患MS-X(1)腰圍＞102cm(40英寸(in)(對男性而言)或＞88cm(37英寸)(對于女性而言)；(2)甘油三酯水平≥150mg/dL；(3)HDL膽固醇水平＜40mg/dL(對于男性而言)或＜50mg/dL(對于女性而言)；(4)血壓≥130/≥85mm Hg；或(5)禁食≥110mg/dL。見JAMA 2852486-2497，2001。
這些指導方針宣稱腹部肥胖與MS-X的相關性比BMI升高更高并且表明應當對所有具有腹部肥胖情況的患者出現這種綜合征的可能性進行評估。此外，就某些特征(即，HDL膽固醇和高血壓)而言，方針中的ATP III比WHO中的診斷閾值水平更低。因此，對于MS-X的診斷而言，符合ATP III標準的人口比例更高。
MS-X的重要特征都高度相關，需要大量生理學系統，并且顯示出復雜的多因子病因學。在也被稱為脂質三聯體的血脂障礙中，包括其它脂質異常，如甘油三酯中度升高(常常高于正常)、密集的LDL小顆粒增加占多數、和低水平HDL膽固醇。Grundy，S.M.Circulation 951-4，1997。血脂障礙和胰島素耐受性與代謝情況有關。Haffner，S.M.Am.J.Cardiol.8317F-21F，1999以及Ginsberg，H.N.和Huang，L.S.，J.Cardiovasc.Risk 7325-331，2000。
就血栓形成前的狀態而言，對胰島素有耐受性的患者常常經歷可促進動脈血栓形成和炎癥的凝結因子的改變。Grundy，S.M.等人，Circulation 1001134-1146，1999。促凝血狀態可增加動脈粥樣硬化斑塊形成和斑塊破裂后血栓的大小。在MS中通常被確定為與血栓形成前的狀態有關的情況包括內皮細胞的活化、LDL氧化被促進、血小板聚集增加、因子VII活化、因子IX、因子X、以及凝血酶原水平增加、和PAI-1濃度增加。過氧化物酶體增殖蛋白活化受體-α(PPAR-α)——一種細胞內和細胞外脂質代謝的主要調節劑—一可能在致動脈粥樣硬化性血脂障礙和炎癥中起著一定作用。Gervois，P.等人，Clin.Chem.Lab.Med.383-11，2000。PPAR-α配體-結合區域的活化通過促進某些靶基因如脂肪酸結合蛋白的轉錄而可能有助于肝臟中的脂肪酸代謝。此外，PPARs還可能在調節HDL膽固醇和包含載脂蛋白(apo)B-的脂蛋白之間的相互作用中起著重要作用。Pineda，T.I.，等人，Curr.Opin.Lipidol.10151-159，1999。
胰島素生產過剩會導致高血壓。WHO指導方針表明接受抗高血壓治療和/或血壓升高(收縮壓＞140mm Hg或舒張壓＞90mm Hg)的患者有患MS的風險。J.Hypertens.17151-183，1999。已經明確將高血壓確定為一種代謝病癥并且其是胰島素耐受性的前兆。Lind，L.and Lithell，H.Am.Heart J.1251494-1497，1993。50％的抗高血壓患者同時具有(comorbid)胰島素耐受性和高胰島素血癥。McLaughlin，T.和Reaven，G.，Geriatrics 5528-35，2000。用適宜的藥理學物質降低血壓可減輕表現出所說的兩種情況的患者的胰島素耐受性跡象。降低升高的血壓還可以改善患者的脂質情況。Weidmann，P.等人，Am.Heart J.1251498-1513，1993。
血壓增加獨立地增加了動脈粥樣硬化的風險，推測其是通過促進LDL進入到皮下空間而造成的，并且其可加劇其它代謝異常。Hornstra，G.等人，Br.J.Nutr.80S 113-S 146，1998。
對于MS-X的診斷而言，用許多血液試驗來測量葡萄糖、胰島素、甘油三酯、膽固醇、尿酸、纖維蛋白原和PAI-1的水平。此外，還應當測量血壓和體重并對其進行評估。
目前，試圖對MS-X的所有因素進行治療的唯一已知的治療策略是減輕體重和鍛煉。可以使用藥物但是醫生通常會鼓勵MS-X患者改變其生活方式如減少其飲食中脂肪和油類的數量、避免將注意力放到甜食上、戒煙并避免過量飲酒。
除上述策略外，一些研究小組已經公開了使用特定的藥物來治療MS-X以及其相關的并發癥。下面是對其公開內容的簡要概括。
US專利No.6,166,049公開了一種通過使用有效、無毒可藥學有效量的過氧化物酶體增殖蛋白活化受體-γ和-α(PPAR-γ和PPAR-α)的激動劑來治療或預防人或非人的哺乳動物的綜合征X的方法。由于增強了低血脂的作用，在PPAR-γ抗高血糖藥中包含PPAR-α將在綜合征X的病因學中產生一種增強的治療可能的試劑。在所說化合物對遺傳性糖尿病小鼠血糖和血漿脂質的效力方面，該發明提供了一個預示性實例。
US專利No.6,197,765公開了一種對MS-X以及其包括糖尿病并發癥在內的相關并發癥進行的治療，其是通過給藥一定劑量的二氮嗪(diazoxide)以抑制胰島素和胰島素原的釋放、降低體重、減少循環中膽固醇和甘油三酯的水平、降低血壓并防止和逆轉糖尿病并發癥來進行的。
US專利No.6,410,339公開了具有糖皮質激素和/或鹽皮質激素作用的合成皮質甾醇激動劑例如地塞米松用于制備診斷MS以及其相關并發癥如腹部肥胖、包括形成老年糖尿病即II型糖尿病風險在內的胰島素耐受性、高血脂和高血壓的系統的應用。在與正常值相比，對患有MS的個體自體產生的皮質甾醇的抑制作用中得到一種差異的情況中，皮質甾醇激動劑的給藥是間歇進行的。
Fryburg等人的US申請序號20020165237的教導了選擇性環尿苷單磷酸(cGMP)特異性5型磷酸二酯酶抑制劑如昔多芬用于治療胰島素耐受性綜合征(IRS)的應用。已經表明昔多芬在雄性勃起機能障礙的治療中有效。昔多芬增加了一氧化氮(NO)衍生的cGMP的細胞內濃度。這種積聚將放大可獲得的一氧化氮和胰島素的血管舒張(vasodilatory)、代謝、以及抗-致動脈粥樣硬化作用。根據該發明的發明人，該類治療可在血壓和/或血糖和/或脂質和/或尿酸、和/或促凝血因子方面產生臨床相關的改善。這種治療可以單獨進行或者可以與能改善IRS(其應當又能降低一些患者形成心血管疾病的風險)以及個體病癥的其它并發癥(非限制性地包括糖尿病性神經病、腎病、和視網膜病)的其它治療劑聯用。
Plata-Salaman等人的US申請序列號20020037861 A1公開了抗驚厥劑衍生物在預防形成II型糖尿病和綜合征X中的應用。已經在人癲癇病的臨床試驗中證明了所說抗驚厥劑衍生物中的一種，2，34，5-二-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-吡喃果糖氨基磺酸酯(被稱為托吡酯)可有效作為簡單和復雜的癲癇部分發作和其次的全身發作治療中的附加療法或單一療法。使用一種純合的糖尿病小鼠模型(ob/ob)，與沒有給予托吡酯的對照ob/ob小鼠相比，用托吡酯進行的治療顯著降低了血糖、甘油三酯、以及胰島素和糖基化血紅蛋白的水平。根據該發明的發明人，這些發現證明托吡酯可降低或阻止與綜合征X有關的病理生理學跡象。此外，托吡酯對糖尿病情況的改善不依賴于體重的降低。
雖然已經證明藥物療法可有效降低和治療胰島素耐受性、成人發作型糖尿病、以及MS-X及其相關并發癥，但是其產生了一些副作用，如體重增加、水潴留、輕微的心臟事件和低血糖風險、包括惡心、腸胃脹氣、以及腹瀉在內的胃腸道問題、乳酸性酸中毒、維生素B12和葉酸吸收減少、以及鐵吸收減少。
因此，需要提供一種改良的避免了這些副作用或將這些副作用最小化了的治療上述情況的方法。仍然需要提供用于治療這些病癥的早期方法以避免出現上述高成本和使殘廢的變性病癥。
發明概述本發明是以通過靜脈內給予本文所述類型的脂質體對哺乳動物個體進行治療在具有可以忽略的副作用或沒有副作用的情況下導致降低了胰島素耐受性并改善了成人發作型糖尿病、和代謝綜合征X以及其相關并發癥的癥狀的發現為基礎的。
在一個常規的實施方案中，用該方法來對患有上述病癥的哺乳動物個體進行治療，這是通過其降低了哺乳動物個體血糖、胰島素、總膽固醇、LDL膽固醇、甘油三酯、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶-MB(CK-MB)、Hb-A1c、脂蛋白(a)、SGOT和SGPT中一種或多種的水平所證實的。在一個優選的實施方案中，該方法包括給哺乳動物個體靜脈內給藥治療有效量的主要包含磷脂類的脂蛋白小單室脂質體(small unilamellarvesicles)(SUVs)的脂質體混懸液。
在一方面，該脂蛋白SUVs的脂質體混懸液包含選自磷脂酰膽堿、磷脂酰甘油和磷脂酰絲氨酸的磷脂類。另一方面，所說的磷脂酰膽堿是1-棕櫚酰，2-油酰磷脂酰膽堿和1-棕櫚酰，2-亞油酰(linoleoyl)磷脂酰膽堿并且可以衍生自蛋類。
在另一個實施方案中，該脂蛋白SUVs主要包含轉變溫度低于約37℃，優選約-10至24℃的磷脂酰膽堿。該脂蛋白SUVs脂質體混懸液進一步以小于約40摩爾百分比的數量包含鞘磷脂、膽固醇或其它甾醇。在另一個實施方案中，該脂蛋白SUVs是空白的。
在一個實施方案中，將該脂質體混懸液以約50mg-1g總脂質/kg體重，優選約200-450mg總脂質/kg體重的劑量每周一至三次地給藥于患有上述病癥的哺乳動物個體。可以通過靜脈內注射或靜脈內輸注來完成所說的給藥。
根據下面本發明的詳細描述，本發明的特征和細節對本領域技術人員而言將變得更明見并且更易于被本領域技術人員所領會。
本發明的詳細描述I.定義在下面的描述中廣泛使用了許多術語。提供下面的定義以幫助理解本發明。
除非另外說明，否則一個(“a”或“an”)表示“一個或多個”。
“哺乳動物個體”指的是獸醫動物或人。
“糖基化或糖化血紅蛋白(Hb-A1c)”指的是葡萄糖分子以一種非酶的方式附加到其上的正常的血紅蛋白。糖化血紅蛋白的百分比與血紅細胞和葡萄糖的接觸時間以及葡萄糖濃度直接成比例。糖化血紅蛋白份數的測量給出了一種在最后60天中細胞半衰期過程中平均血糖濃度的綜合描述。Hb-A1c通常是以總血紅蛋白百分比的形式被給出的。對葡萄糖具有正常耐受性的個體中的Hb-A1c水平具有4.3％至6.3％的正常范圍(Peters，A.L.等人J.Am.Med.Assoc.2761246-52，1996)。
“血清谷氨酸-草酸乙酰轉氨酶”(“SGOT”)或天冬氨酸氨基轉移酶”(“AST”)是一種主要在肝、心、腎、胰腺、和肌肉中發現的酶。其在患有肌肉疾病，心肌損傷和腎梗死的患者中升高。在維生素B不足和懷孕時可以發現其水平降低。其正常值范圍為0-50U/l。最理想的成人讀數為21U/l。
“血清谷氨酸-丙酮酸轉氨酶”(“SGPT”)或丙氨酸氨基轉移酶”(“ALT”)是一種主要在肝中發現的酶，但是在心和其它組織中也可以找到這種酶。在充血性肝情況中看到SGPT降低同時膽固醇水平升高。在單核細胞增多癥、酒精中毒、肝損害、腎感染、化學污染或心肌梗死中看到其水平升高。正常值范圍為0-41U/l。最理想的成人讀數為24U/l。
“C-反應性蛋白”(“CRP”)是一種存在于許多急性炎性情況中的蛋白并且在心血管疾病中是一種重要的風險因子。更高的CRP水平可能在腹部肥胖和II刑糖尿病或AOD的發作中起一定作用。CRP的正常范圍為0-0.5mg/dl。
“肌酸激酶”(“CK”)是一種在心、腦、和骨骼肌中發現的酶。當肌肉或心細胞受損時血液CK水平升高。CK主要以三種被稱為同工酶的形式存在，即(1)CK-MB(主要存在于心肌中)；(2)CK-BB(主要存在于腦中)；和(3)CK-MM(存在于心臟和其它肌肉中)。對患有胸痛的人的CK-MB水平和總CK水平進行測試以確定其是否具有心臟病發作。因為總CK水平將表明對心臟或其它肌肉的損害，所以高CK-MB表明該損害是對心肌的損害。CK和CK-MB的正常范圍分別為0-195U/l和0-24U/l。
“葡萄糖耐受不良”指的是機體不能利用血液循環中的葡萄糖。在糖尿病和內分泌病癥如多囊性卵巢綜合征中葡萄糖耐受不良增加。
“胰島素”指的是有助于葡萄糖從血液向細胞往返運送的激素。被稱為胰島的胰腺區域中的β細胞通常制造胰島素。
“胰島素敏感性”(或“胰島素感受性”)是正常和優選狀態，其中機體細胞保持對胰島素作用的敏感性(或感受性)并且對胰島素作用有響應。
“胰島素耐受性”指的是一種其中異常高的葡萄糖水平使得胰島素增加以從血流中除去這種糖的狀態。機體細胞常常開始忽視高胰島素水平并且因此變得對該激素的作用有抵抗力。胰島素耐受性使得葡萄糖水平升高并且保留在高水平。但是，其不總是導致糖尿病。
高血壓被定義為血壓升高。
血脂障礙被定義為血漿甘油三酯升高和/或低高密度脂蛋白(HDL)膽固醇濃度。
肥胖被定義為高體重指數(BMI)和/或高腰臀比。
“脂質替代療法”指的是其中該治療改變了組織培養物以及整個生物體中的細胞膜組成的治療，所說的生物體特別是非限制性地是血紅細胞、血管、心細胞和腎細胞，其改變方式為使得膽固醇與磷脂摩爾比以及鞘磷脂與磷脂酰膽堿(phosphotidylcholine)摩爾比降低并將其恢復至在年輕細胞或年輕生物體組織中發現的值的該類方式。
“空白”脂質體指的是不包含所捕獲或包封的藥物的脂質體。
“小單室脂質體(SUVs)”指的是主要具有20至120nm粒度的小單-雙層脂質體。本發明的SUVs可以是空白的。其包含磷脂類，優選選自磷脂酰膽堿、磷脂酰甘油、和磷脂酰絲氨酸的磷脂類。該磷脂酰膽堿可以是卵磷脂酰膽堿。
短語“毫克或克總脂質/kg體重”指的是每公斤體重以毫克或克為單位包含脂蛋白SUVa的總脂質數量。總脂質可以包括磷脂酰膽堿、鞘磷脂、膽固醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油或本發明中描述的其它脂質。
對疾病狀態的“顯著改善”是在疾病狀態中通過臨床或生物化學指示器表現出來的可測量的改善程度。一般而言，疾病狀態的顯著改善是一種可以使得已知與所說疾病狀態相關的參數改善至少五個百分比的狀態。
這里所用的術語“血糖、胰島素、總膽固醇、LDL膽固醇、和甘油三酯升高”指的是當在一周內的各種時間進行測量時平均高于正常平均濃度的血糖、胰島素、總膽固醇、LDL膽固醇、和甘油三酯的濃度。葡萄糖的正常范圍一般為55-115mg/dl；甘油三酯為0-200mg/dl；總膽固醇為00-200mg/dl；和LDL膽固醇為0-155mg/dl。
“口服葡萄糖耐受性試驗(OGTT)”指的是在2-3小時的時期內測量四至五次葡萄糖水平的兩至三小時葡萄糖耐受性測試。給患者使用口服劑量的葡萄糖溶液(75至100克極甜的飲料)，其應在第一個小時中使葡萄糖水平升高，然后，隨著機體產生用于將葡萄糖水平正常化的胰島素而在兩至三個小時內回落至正常水平。用這種試驗來確診糖尿病或妊娠糖尿病(和診斷其它代謝疾病)。
OGTT是一種比禁食血漿葡萄糖試驗更敏感的試驗，并且涉及多次取血以對胰島素的產生進行監測，其常常可發現禁食試驗可能不能發現的輕度糖尿病情況。最常用的試驗方案包括Wilkerson點系統；Fajans-Conn系統、或the National Institutes of Health(NIH)系統。平均而言，正常葡萄糖水平一般在給藥口服劑量葡萄糖后30分鐘至1小時達到160-180mg/dl的峰值，然后，應在2至3小時內回復至140mg/dl或更低的禁食水平。諸如年齡、體重和種族之類的因素可影響這些結果，正如最近的疾病和進行某些藥物治療可以影響結果一樣。例如，年齡高于50歲的老年個體每年將葡萄糖耐受性的上限將增加1mg/dl。迅速升高到正常水平之上(即，200mg/dl或更高)并需要更長的時間來被正常化的葡萄糖水平通常表明患有糖尿病。
胰島素耐受性是通過單獨測量胰島素水平-禁食時的水平，或用葡萄糖耐受試驗加胰島素(有時被稱為IGTT)被診斷出來的。可以僅基于血糖水平診斷出糖尿病。
口服葡萄糖耐受性試驗-葡萄糖和胰島素值
雖然不希望受到特定理論的束縛，但本發明的發明人發現已知一種可有效量治療與年齡有關的情況如心臟病的脂質體混懸液也能用于治療胰島素耐受性、成人發作型糖尿病和代謝綜合征-X以及其相關并發癥。該治療使用與現有技術中已知方案相似的方案。但是，正如對普通醫師而言是明顯的那樣，必需對這種治療進行調整以使其適于治療胰島素耐受性、成人發作型糖尿病和代謝綜合征X以及其相關并發癥。
II.脂質體組合物的制備本發明涉及將治療性脂質體混懸液靜脈內給藥于患有胰島素耐受性、成人發作型糖尿病、和代謝綜合征X以及其相關并發癥的個體。該脂質體混懸液包含脂蛋白小單室脂質體(SUVs)，所說的小單室脂質體主要包含選自磷脂酰膽堿、磷脂酰甘油、和磷脂酰絲氨酸的磷脂類。該磷脂酰膽堿可以是卵磷脂酰膽堿。在實施例和下面的部分中對本發明脂蛋白SUVs的制備進行了說明。
A.脂質體的制備組成脂蛋白是主要負責脂質在血漿中的轉運，即甘油三酯和膽固醇酯形式的膽固醇在血漿中轉運的高分子量的微粒。已知主要有五類天然存在的脂蛋白在血漿中循環，其各自在脂質組成、載脂蛋白組成、密度、大小、以及電泳移動性方面有所不同。
各脂蛋白顆粒是由非極性的核區域、包含少量膽固醇的周圍的磷脂表面包衣組成并在表面暴露出來。脂蛋白顆粒在體內可以變得與負責與細胞膜上的受體結合并將該脂蛋白載體定位到其所需的代謝部位的載脂蛋白例如載脂蛋白A和C相締合。
在一個優選的實施方案中，所描述和在下面實施例中所用的該脂蛋白SUVs主要包含(高于50摩爾百分比，優選高于80-90摩爾百分比)相轉化溫度低于約37℃，優選約-10至24℃，例如約5℃的磷脂酰膽堿(PC)。
PC磷脂包括這些具有膽堿部分并且其中該磷脂的脂肪酸鏈部分的長度和不飽和度可以發生變化的磷脂。此外，PC磷脂還包括在體溫下不是結晶狀的合成PCs(例如，這些包含至少一個雙鍵的物質)還有可以抵抗氧化的物質(例如，這些不具有雙鍵的物質，如1-棕櫚酰，2-油酰PC(POPC))。PC磷脂還可包括天然或合成磷脂，其可以單獨是磷脂或者可以是具有所補加或替換的仍然可以維持脂質體或膠束結構的疏水性或兩親性材料的混合物。
一種優選的囊泡組合物包括卵PC，其具有-5℃的轉變溫度，主要包含1-棕櫚酰，2-油酰PC和1-棕櫚酰，2-亞油酰PC。或者，可以從大鼠肝臟中分離出磷脂酰膽堿(Newman，H.A.I.等人，J.LipidRes.(1961)2403-11)，然后用氧化鋁對其進行純化(Shinitzky，M.等人，J.Biol.Chem.(1974)2492652)。
該脂蛋白SUVs可以完全由卵PC組成，或者可以包含其它脂質組分，所說的其它脂質組分(i)不是致免疫性的，(ii)不會組成具有高相轉化溫度脂質的主要部分，即.高于25-50摩爾百分比。另外的組分可以包括負電荷的脂質，如磷脂酰甘油(PG)或磷脂酰絲氨酸(PS)。加入PG將使得該SUVs荷負電或使該脂蛋白SUVs的其它組分荷電以防止在儲存期間發生聚集。如果該脂蛋白SUVs完全是由PC組成的，則對于PC而言，PG和PS的摩爾百分比低于1％。但是，如果PC不是該脂蛋白SUVs的主要組分，則對于PC而言，PG和PS的摩爾百分比將高于1％。該脂蛋白SUVs還可以以優選低于約40摩爾百分比的數量包含鞘磷脂(SM)、膽固醇或其它甾醇類物質。其它組分還可以包括二酰基甘油、磷脂酰肌醇、被氧化的脂質、溶血磷脂酰膽堿、以及蛋白類物質，如磷脂轉移蛋白(PLTP；見生物膜的結構和功能(BiomembranesStructural and Functional Aspects)，M.Shinitzky(主編)，1994，第40頁)和氨基磷脂質(amniophospholipid)移位酶(也被稱為116-kdMg2+ATPase(Morot，G.等人，Biochemistry 283456，1989；Morot，G.等人，FEBS Lett.26629，1990)或被稱為32-kd蛋白(Schroit，A.J.等人，Biochim.Biophys.Acta 1071313，1991))。
在形成所說脂蛋白SUVs的脂質中還可以包含脂質保護劑，如α-生育酚、α-生育酚醋酸鹽、或α-生育酚琥珀酸鹽以保護該脂質組分不受自由基的傷害。該類物質的摩爾百分比含量一般為約0.5％至2％。可有利地向所說的脂蛋白SUVs中加入α-生育酚以維持該脂蛋白SUVs中維生素E和多不飽和脂質間的平衡。或者，可以制備該脂蛋白SUVs并將其儲存在一種惰性氣氛例如氮氣、氬氣等等中。
B.未進行篩選的脂質體的制備可以用許多方法來制備脂蛋白SUVs，并且已經對這些方法進行了廣泛的評論(Szoka，F.等人，Ann.Rev.Biophys.Bioeng.(1980)9467)。一般而言，這些方法制備了大小為約0.02至10微米或更大的大小不均勻的脂蛋白SUVs。正如下面所討論的那樣，本發明優選使用相對較小并且在粒度上定義明確的脂蛋白SUVs，因此，通常需要進行用于降低脂質體混懸液的大小和大小不均勻性的第二步加工步驟。
在形成實施例1所述的初始脂質體混懸液的一種優選方法中，將成囊的脂質吸收到適宜的有機溶劑系統中，所說的溶劑系統優選地位于硅化玻璃容器中，然后將其在真空下或惰性氣體下干燥從而形成一種脂質膜。向該膜中加入一種水性混懸介質，如無菌的鹽水溶液，然后攪動該容器(例如，在一種震動器上或使用一種超聲波儀)直至該脂質水合完全，一般其在約1-2小時內水合完全。所加入的水性介質的數量足以產生一種優選每100ml介質包含約5至30g總脂質，優選每100ml介質包含10g總脂質的最終的脂質體混懸液。
在水合階段中，脂質水合形成大小為約0.5微米至約10微米或更大的多層脂質體(MLVs)。一般而言，通過在更劇烈的攪動條件下對脂質進行水合可以使MLVs的大小分布略微朝向粒度更小的方向移動。
形成脂蛋白SUVs時所用的該水性介質可以包含能增強儲存時脂質穩定性的水溶性物質。優選的穩定劑是鐵-特異性三羥胺螯合劑，如去鐵敏。在US 4,797,285中已經報道了用這種化合物來降低包含藥物的脂質體中的脂質過氧化和自由基損害。簡單地說，表明親脂性自由基淬滅劑，如α-生育酚和水溶性螯合劑的組合對脂質過氧化損害的保護比單獨使用這些保護劑中的任何一種時的保護作用都好得多。水性介質中所包含螯合劑的摩爾數高于介質中游離鐵的數量。一般而言，約10-200微摩爾的螯合劑濃度足以降低脂質過氧化和自由基損害。
C.脂質體篩選SUV制備優選地進一步對如上所述那樣制備的脂蛋白SUVs混懸液進行處理以制備具有所需大小和大小均勻度的脂質體。
通常將該脂質體混合物篩選至獲得所選擇的小于約1.2微米并且優選地小于約0.8微米的大小范圍的囊泡大小分布。這種大小范圍中的脂質體可以容易地通過用深度過濾器過濾來滅菌。較小的囊泡還表現出在儲存時較不易聚集的趨勢，從而降低了在將本發明最后的脂質體組合物靜脈內給藥時嚴重血管阻塞問題的可能性。最后，具有低至亞微米范圍粒度的脂蛋白SUVs具有更均勻的生物分布和藥物清除特性。
優選的脂蛋白SUVs，即，單-雙層脂質體具有約0.02至0.12微米的大小。如于1994年6月10日提交的US 6,235,308中所述的那樣，已經表明當靜脈內給藥時，SUVs具有相對長的血循環半衰期。簡單地說，如其中所述的那樣，在IV注射后測量最高至1,000分鐘血流中的脂質體潴留圖表明即使在1,000分鐘時在血液中仍然有相當數量的脂質體。
可以用一些技術以適于制備本發明脂蛋白SUVs的方式來降低脂質體的大小和大小不均勻性。通過浴或探針超聲對脂質體混懸液進行超聲輻射產生了低至SUVs的漸進性粒度降低。
勻化是另一種依賴于剪切能量來將大脂質體破碎成小脂質體的方法。在典型的勻化操作中，使MLVs循環通過一種標準的乳勻器直至觀察到所選擇的脂質體大小，一般小于0.1微米。
通過小孔聚碳酸酯膜將脂質體擠出是一種將脂質體大小降低至具有相對明確定義的粒度分布的有效方法。如實施例2中所述的那樣，根據該膜的孔大小，平均范圍為約0.03至1微米。一般而言，使該混懸液循環通過該膜幾次直至獲得所需的脂質體大小分布。可以使該脂蛋白SUVs通過連續更小孔的膜被擠出，從而獲得脂質體大小的逐漸降低。
可以用許多技術來測定脂質體粒度，包括電子顯微鏡檢查、比較色譜(Bisgaier，C.L.等人，J.Biol.Chem.(1989)264(2)862-866)和半-彈性光散射。
進行了大小處理的脂質體混懸液可容易地通過用具有約0.2μ顆粒分辯大小的滅菌膜如常規的0.22μ深度濾器過濾來進行滅菌。如果需要的話，可以將該脂質體混懸液冷凍干燥以便儲存并在使用前不久重組。
III.治療胰島素耐受性、成人發作型糖尿病、和代謝綜合征X以及其相關并發癥的方法這一部分描述了涉及上述脂質體混懸液的靜脈內給藥的治療方法。在所有這些方法中，該混懸液是以可以有效在所治療情況中產生所需改善的劑量和給藥頻率被靜脈內給藥的。
優選的給藥頻率為每周一次、兩次或三次。這些給藥周期例如兩周可以被一種洗脫(wash-out)期間斷開，所說的洗脫期一般為1-4周。該治療，例如，涉及重復給藥和洗脫期的該治療可以繼續長期進行，可以持續進行幾個月或更長時間。
在一個優選的實施方案中，以約50mg-1g總脂質/kg體重/劑量，優選約200-450mg總脂質/kg體重/劑量的劑量將該脂質體混懸液每周給藥一至三次。可以通過i.v.(靜脈內)注射或i.v.滴注(輸注)來進行給藥。可以將該脂蛋白SUVs混懸于無菌的鹽水或營養的或包含藥物的緩沖劑或介質如葡萄糖/鹽介質中來將脂質體治療與其它胃腸外治療相結合。
將該脂質體混懸液的給藥持續進行至觀察到出現該疾病顯著和可測量的改善并且其中血糖、胰島素、總膽固醇、LDL膽固醇、甘油三酯、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶-MB(CK-MB)、Hb-A1c、脂蛋白(a)、SGOT和SGPT中一種或多種的水平回落到正常范圍內并且被顯著降低。
如果被給藥的數量是生理學上有顯著意義的數量，則認為脂質體混懸液被以“治療有效量”給藥。如果其存在在接受個體的生理學中產生了可察覺的改變，則其是生理學上有顯著意義的。具體地講，如果其降低了血糖、胰島素、總膽固醇、LDL膽固醇、甘油三酯、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶-MB(CK-MB)、Hb-A1c、脂蛋白(a)、SGOT和SGPT中一種或多種的水平，則本發明脂質體混懸液的給藥量是生理學上有顯著意義的。
具體實施例方式
實施例用下面的實施例對制備脂質體組合物和在本發明的治療方法中使用該組合物的各種方法進行了舉例說明。用這些實施例對本發明進行說明，而決不是以任何方式用其對本發明的范圍進行限制。
材料卵磷脂酰膽堿(卵PC)可購自Avanti Polar Lpids(Alabaster，AL)或Lipoid KG(Ludwigshafen，Germany)。測得該卵PC的純度高于99％。該卵PC脂肪酸組成與所報道的組成相似(Hertz，R.等人，Chem.Phys.Lipid(1975)15138)。該制劑的主要PCs包括1-棕櫚酰，2-油酰PC和1-棕櫚酰，2-亞油酰PC。
實施例1.通過聲處理進行的小單室脂質體的制備將溶解于氯仿中的卵PC放置到一個100ml容器中并將其在氮氣的惰性氣氛下干燥成一種薄膜。向該脂質膜種加入無菌鹽水至約100mg/ml的終濃度，并且在攪拌的情況下對該脂質膜進行水合。然后，用Heat System Sonicator，Model 375W在全值的40-50％的功率設定下將所得的多層脂質體(MLV)混懸液在聲浴上處理1小時。在進行聲處理期間，將該混懸液的溫度維持在約4℃下。通過在100,000g下超速離心1小時將大囊泡或MLVs從該進行了聲處理的混懸液中分離出來(Barenholz，Y.等人，Biochemistry(1977)162806)。然后，將剩余的濃度為約100mg/ml的SUVs混懸液過濾滅菌。
實施例2通過擠出進行的小單室脂質體的制備在GH 76-400壓力室(Nucleopore)中通過使其通過聚碳酸酯濾器連續過濾擠出來制備位于0.15M NaCl中的平均直徑為65nm±10nm的人用卵PC的均勻的小單室脂質體(SUVs)(Anselem，S.，等人，Gregoriadis，G.(主編).脂質體技術(LIPOSOME TECHNOLOGY)，第501-524頁，CRC Press，Boca Raton，佛羅里達州.(1993))。這些囊泡是空白SUVs。
用Nicomp亞微米激光粒度分選機，通過Quasielectric光散射或與之相當的方法來測量脂質體粒度。還可以用配有大小分布處理分析器的Coulter model N4亞微米顆粒分析器對其進行測定(Barenholz等人In Gregoriadis，G.(主編)，脂質體技術(LIPOSOME TECHNOLOGY)，第524-607頁，CRC Press，Boca Raton，佛羅里達州.(1993))。最后的擠出步驟是通過0.05微米孔的聚碳酸酯濾器來進行的。卵PC SUVs應當是無菌和無熱源的并且通過用無菌的0.22微米微孔過濾器過濾來對其進行滅菌。將其包裝于100ml透明的模塑成型的I類水解瓶中，用氮氣(N)排除空氣，用聚四氟乙烯包覆的標準塞子(20mm)塞上，并且用具有PE-盤的Alu-帽密封。
該終產物具有高于99％的純度。在用HPLC、GC/FID或與之相當的方法進行測量時，總雜質值為NMT 1％。沒有高于0.3％的單一雜質。在用UV/VIS光譜測定法在234、268和278nm下測量時，總氧化值為NMT 1％。
下面是一些與最終的SUV脂質體產品有關的其它信息脂質濃度5-20％，優選10％。
化學穩定性水解和過氧化＜1％。
無菌通過了FDA要求的無菌溶液標準。每份試驗樣品NMT 100CFU。符合USP標準。
存儲條件
劑量方案50mg-1g總脂質/kg體重。
劑型用于靜脈內輸注的白色-淡黃色半透明分散體。
禁忌癥對蛋類有變態反應；具有溶血性紅細胞。
不利作用沒有發現不利作用。
脂質體濃度100mg/ml卵PC的脂肪酸組成(重量)棕櫚酸35.6％硬脂酸12.6％油酸 27.8％亞油酸17.9％花生四烯酸9.5％鯡油酸0.7％二十二碳六烯酸2.0％完全的脂質體混懸液10g 磷脂，其中9.9g 卵PC，0.2-0.50g 膽固醇和0.05-2.0g 鞘磷脂0.012g Desferal0.9g 氯化鈉無菌無熱源的注射用水加至100ml。
實施例3 另一種通過擠出進行的小單室脂質體的制備通過用具有SuporCapTM和SuporDCFTM系列的用完即可丟棄的系列層濾器(220nm，180nm和80nm)的Aviston EmulsiFlex-C50勻化器用聚碳酸酯膜濾器過濾擠出來制備平均直徑為60nm±5nm的人用卵PC的均勻小單室脂質體s(SUVs)。這些囊泡是空白的SUVs。
用Solvias AG，Basel，Switzerland亞微米激光粒度分選機，通過Quasielectric光散射或可與之相提并論的方法來對脂質體粒度進行測量。其還可以用配有大小分布處理分析器的Coulter model N4亞微米粒度分析器(Barenholz等人，Gregoriadis，G.(ed)，脂質體技術(LIPOSOME TECHNOLOGY)，第524-607頁，CRC Press，Boca Raton，佛羅里達州.(1993))來測量。最后的擠出步驟是通過一種0.08μm孔聚碳酸酯膜濾器來進行的。卵PC SUVs應是無菌、無內毒素(LAL)和無熱源的并且通過用無菌的0.22μm孔聚碳酸酯膜濾器過濾來對其進行滅菌。將其包裝于100ml透明的模塑成型的II類水解瓶中，用氮氣(N)排除空氣，用聚四氟乙烯包覆的標準塞子(20mm)塞上，并且用具有PE-盤的Alu-帽密封。
該終產物具有高于99％的純度。在用HPLC、GC/FID或與之相當的方法進行測量時，總雜質值為NMT 1％。沒有高于0.3％的單一雜質。在用UV/VIS光譜測定法在215、233和279nm下測量時，總氧化值為NMT 1％。
下面是一些與最終的SUV脂質體產品有關的其它信息脂質濃度5-30％。
化學穩定性水解和過氧化＜1％。
劑型用于靜脈內輸注的白色-淡黃色半透明分散體。
無菌通過了FDA要求的無菌溶液標準。每份試驗樣品NMT 100CFU。符合USP標準。
存儲條件
劑量方案50mg-1g總脂質/kg體重。
禁忌癥對蛋類有變態反應；具有溶血性紅細胞。
不利作用沒有發現不利作用。
該卵PC的脂肪酸組成(重量)棕櫚酸35.6％硬脂酸12.6％油酸 27.8％亞油酸17.9％花生四烯酸9.5％鯡油酸0.7％二十二碳六烯酸2.0％完全的脂質體混懸液10g 磷脂，其中9.0g 卵PC(脂類(Lipoid))0.2-0.5g 膽固醇和0.05-2.0g 鞘磷脂0.018g Desferal0.765g 氯化鈉(Merck)0.279g L-組氨酸(Fluka)用1M氫氧化鈉或1M鹽酸將pH調至6.588.9945g無菌無熱源的水(終體積100ml)，和氮氣適量。
實施例4 脂質體治療對胰島素耐受性和成人發作型糖尿病患者的作用患者1是身高為160cm和體重為45kg的62歲的老年女性。其具有預先知道的脂質代謝失調并且被確診為具有17年病史的胰島素-耐受性代謝患者。為了進行治療，給其靜脈內輸注根據本發明實施例3中所述方法制備的完全的脂質體混懸液(20-50滴/分鐘)，每次輸注兩個90-ml體積(400mg總脂質/kg體重)，在30天內進行六次治療。
患者1對該脂質體療法具有十分良好的耐受性。其沒有表現出任何不希望出現的副作用的跡象或癥狀。既使在治療幾周后，其也沒有出現任何主觀的或臨床上的不利癥狀。其實驗室結果表明總膽固醇升高，但是其LDL和膽固醇水平降低，同時其脂蛋白(a)水平仍然維持在正常限度內。
在治療前，其糖化血紅蛋白(Hb-A1c)水平表明葡萄糖代謝障礙輕微增加或者可能表現出來。在治療后，這種水平回落在正常范圍內。
表1.在治療前和治療后患者1的實驗室結果
在用該脂質體治療幾周后，通過使用適宜劑量的葡萄糖來進行一種口服葡萄糖耐受性試驗，在使用葡萄糖兩小時后，對血清葡萄糖水平和胰島素分泌進行測量。結果表明葡萄糖水平和胰島素分泌都增加并在使用葡萄糖兩小時后達到正常水平。作為對照，在進行該脂質體治療之前三年所獲得的結果表明在使用葡萄糖兩小時后葡萄糖水平和胰島素分泌都不能降落到正常水平。
下面表明了治療前和治療后口服葡萄糖耐受性的比較
因此，治療改善了該患者的胰島素耐受性。
實施例5 脂質體治療對一名代謝綜合征-X患者的作用第2名患者是一名患有高血壓和已知的脂質代謝病癥的51歲的老年男性。其過重，身高為175cm，體重為90kg。其總膽固醇和甘油三酯的初始值十分高。但是，其LDL-膽固醇和HDL-膽固醇在正常限度內。此外，肝酶——SGPT升高。
為了進行治療，給第2名患者靜脈內輸注(20-50滴/分鐘)根據實施例3所述的方法所制備的完全脂質體混懸液，每次輸注三個90-ml體積(300mg總脂質/kg體重)，在19天內治療六次。
在治療期間，該患者的血壓、脈搏頻率和氧負載表現正常。沒有不希望出現的作用的主觀或臨床癥狀。
治療后的實驗室值表明，除SGOT部分正常化外，總膽固醇和甘油三酯也降低(見表3)，其中治療開始于2002年5月10日。
表3.治療前和治療后第2名患者的實驗室結果
就像各公開物特定和各自表明被引入本文作為參考那樣，在本文所提及或引用的文章、專利、和專利申請、以及所有其它文件和可電子獲得的信息在這里都在相同程度上被全部引入作為參考。申請人保留向本申請中實際引入得自任何該類文章、專利、專利申請、或其它文件的任何和所有材料和信息的權力。
本文所舉例描述的本發明可以適宜地在不存在任何這里未特定公開的元素、限制的情況下實施。因此，例如，術語“包含”、“包括”、“含有”等等應被擴大和沒有任何限制地理解。因此，本文所用的術語和表達被用作描述性而非限制性術語，并且不是要用該類術語和表達排除任何所示和所述特征的等同物或其一些部分，要意識到在本發明所要保護的范圍內可進行各種修改。因此，應當清楚的是，雖然用優選的實施方案和任選的特征對本發明進行了特定公開，但是，本領域技術人員可以采用這里所公開的本發明中所包含的修改和變化，認為該類修改和變化也在本發明的范圍之內。
在這里已經對本發明進行了廣泛的和一般性的描述。落在該一般公開范圍內的各更窄的種類和亞屬組也形成了本發明的一部分。不管被排除的物質是不是這里所特定列舉的，其包括本發明具有從該屬中除去任何主題的附帶或否定性限制的一般性描述。
此外，在根據馬庫什(Markush)基團對本發明的特征或方面進行描述的情況中，本領域技術人員將意識到本發明因此還可以該馬庫什基團的任何個別成員或成員的亞組的措詞來進行描述。
權利要求
1.一種治療哺乳動物個體的胰島素耐受性、成人發作型糖尿病和代謝綜合征X以及其相關并發癥的方法，其包括給所說的哺乳動物個體靜脈內給藥治療有效量的主要包含磷脂類的脂蛋白小單室脂質體(SUVs)的脂質體混懸液。
2.如權利要求1所述的方法，其中所說的磷脂類選自磷脂酰膽堿、磷脂酰甘油和磷脂酰絲氨酸。
3.如權利要求2所述的方法，其中所說的磷脂酰膽堿是卵磷脂酰膽堿。
4.如權利要求2所述的方法，其中所說的磷脂酰膽堿是1-棕櫚酰，2-油酰磷脂酰膽堿、1-棕櫚酰，2-亞油酰磷脂酰膽堿或其混合物。
5.如權利要求2-4中任意一項所述的方法，其中所說的磷脂酰膽堿具有低于約37℃的轉變溫度。
6.如權利要求5所述的方法，其中所說的轉變溫度為約-10至24℃的范圍。
7.如權利要求1-6中任意一項所述的方法，其中所說的脂蛋白SUVs以小于約40摩爾百分比的數量進一步包含鞘磷脂、膽固醇或其它甾醇。
8.如權利要求1-7中任意一項所述的方法，其中所說的脂蛋白SUVs是空白的。
9.如權利要求1-8中任意一項所述的方法，其中以每次給藥約50mg-1g總脂質/kg體重的劑量將所說的脂質體混懸液每周一至三次地給藥于所說的哺乳動物個體。
10.如權利要求9所述的方法，其中所說的劑量為約200-450mg總脂質/kg體重。
11.如權利要求1-10中任意一項所述的方法，其中所說的脂質體混懸液是通過靜脈內注射或靜脈內輸注給藥的。
12.主要包含磷脂類的脂蛋白小單室脂質體(SUVs)的脂質體混懸液在制備用于治療哺乳動物個體胰島素耐受性、成人發作型糖尿病和代謝綜合征X以及其相關并發癥的藥物中的應用。
13.如權利要求12所述的應用，其中所說的磷脂類選自磷脂酰膽堿、磷脂酰甘油和磷脂酰絲氨酸。
14.如權利要求13所述的應用，其中所說的磷脂酰膽堿是卵磷脂酰膽堿。
15.如權利要求13所述的應用.其中所說的磷脂酰膽堿是1-棕櫚酰，2-油酰磷脂酰膽堿、1-棕櫚酰，2-亞油酰磷脂酰膽堿或其混合物。
16.如權利要求13所述的應用，其中所說的磷脂酰膽堿具有低于約37℃的轉變溫度。
17.如權利要求16所述的應用，其中所說的轉變溫度為約-10至24℃的范圍。
18.如權利要求12-17中任意一項所述的應用，其中所說的脂蛋白SUVs進一步以低于約40摩爾百分比的數量包含鞘磷脂、膽固醇或其它甾醇。
19.如權利要求12-18中任意一項所述的應用，其中所說的脂蛋白SUVs是空白的。
20.如權利要求12-19中任意一項所述的應用，其中所說的藥物適于以每次給藥約50mg-1g總脂質/kg體重的劑量每周一至三次地給藥于所說的哺乳動物個體。
21.如權利要求20所述的應用，其中所說的劑量為約200-450mg總脂質/kg體重。
22.如權利要求12-21中任意一項所述的應用，其中所說的藥物適于通過靜脈內注射或靜脈內輸注給藥。
全文摘要
一種通過給哺乳動物個體靜脈內給藥治療有效量的主要包含磷脂類的脂蛋白小單室脂質體(SUVs)的脂質體混懸液來治療哺乳動物個體的胰島素耐受性、成人發作型糖尿病、代謝綜合征X以及其相關并發癥的方法。將該脂質體混懸液給藥一定的時期從而使得血糖、胰島素、總膽固醇、LDL膽固醇、甘油三酯、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶－MB(CK－MB)、Hb－Alc、脂蛋白(a)、SGOT和SGPT中一些或全部的水平都回落到正常范圍內或顯著降低。
文檔編號A61K9/00GK1731982SQ200380107543
公開日2006年2月8日 申請日期2003年10月23日 優先權日2002年10月25日
發明者西摩·J·庫爾茨 申請人:西摩·J·庫爾茨