用于治療異常細胞生長的4－苯胺基喹唑啉衍生物的制作方法

專利名稱：：用于治療異常細胞生長的4－苯胺基喹唑啉衍生物的制作方法
背景技術：
：本發明涉及用于治療哺乳動物異常細胞生長，諸如癌癥的新雙環衍生物。本發明還涉及使用這類化合物治療哺乳動物，尤其人異常細胞生長的方法，并涉及含有這類化合物的藥物組合物。已知細胞可通過其部分DNA轉化成癌基因(即在活化時導致惡性腫瘤細胞形成的基因)而變成癌性。許多癌基因編碼能夠導致細胞轉化的異常酪氨酸激酶的蛋白質。另一方面，正常原致癌酪氨酸激酶的超表達也可以導致增生性疾病，有時產生惡性表型。受體酪氨酸激酶是跨越細胞膜并具有諸如表皮生長因子這類生長因子的胞外結合結構域、跨膜結構域和起使蛋白質上的特異性酪氨酸殘基磷酸化且由此影響細胞增生的激酶作用的胞內部分的酶。受體酪氨酸激酶的實例包括c-erbB-2(HER2)、c-met、tie-2、PDGFr、FGFr和VEGFR。已知這類激酶通常在常見人癌癥中得到異常表達，所述癌癥諸如乳腺癌；胃腸癌，諸如結腸癌、直腸癌或胃癌；白血病；和卵巢癌、支氣管癌或胰腺癌。眾所周知ERBB2(蛋白質酪氨酸激酶erbB2前體(也稱作c-erbB-2蛋白前體或與激酶相關的轉化蛋白erbB2)為編碼上皮生長因子受體(EGFR)族的膜結合受體酪氨酸激酶的原癌基因。它在幾種類型的癌癥，諸如乳腺癌、卵巢癌、胃癌、胰腺癌(pancreus)和結腸直腸癌中超表達。ErbB2在腫瘤細胞增生、腫瘤侵入和腫瘤轉移和藥物抗性中具有潛在的作用。因此，認為受體酪氨酸激酶抑制劑用作哺乳動物癌細胞生長的選擇性抑制劑。例如，癌基因抑活藥，一種酪氨酸激酶抑制劑制選擇性減弱植入表達表皮生長因子受體酪氨酸激酶(EGFR)的人乳腺癌的無胸腺裸鼠的生長，但對不表達EGF受體的另一種癌的生長沒有作用。因此，本發明的化合物屬于某些受體酪氨酸激酶的選擇性抑制劑，用于治療哺乳動物異常細胞生長，特別是癌癥。除受體酪氨酸激酶外，本發明的化合物還表現出對各種其它非-受體酪氨酸激酶(例如Ick、src、abl)或絲氨酸/蘇氨酸激酶(例如依賴于細胞周期蛋白的激酶)的抑制活性。還證實諸如苯乙烯衍生物類各種其它化合物具有酪氨酸激酶抑制活性。近來五篇歐洲專利公開文獻涉及某些具有由酪氨酸激酶抑制活性導致的抗癌特性的雙環衍生物，特別是喹唑啉衍生物，所述的公開文獻即EP0566226A1(1993年10月20日公開)、EP0602851A1(1994年6月22日公開)、EP0635507A1(1995年1月25日公開)、EP0635498A1(1995年1月25日公開)和EP0520722A1(1992年12月30日公開)。此外，國際專利申請″WO92/20642(1992年11月26日公開)涉及作為用于抑制異常細胞增生的酪氨酸激酶抑制劑的某些雙-一和二環芳基和雜芳基化合物。國際專利申請WO96/16960(1996年6月6日公開)、WO96/09294(1996年3月6日公開)、WO97/30034(1997年8月21日公開)、WO98/02434(1998年1月22日公開)、WO98/02437(1998年1月22日公開)和WO98/02438(1998年1月22日公開)還涉及作為用于相同目的的酪氨酸激酶抑制的取代的雙環雜芳族衍生物。涉及抗癌化合物的其它專利申請為國際專利申請WO00/44728(2000年8月3日公開)、EP1029853A1(2000年8月23日公開)和WO01/98277(2001年12月12日公開)，將所有這些文獻的全部內容引入本文作為參考。發明概述本發明涉及通式1的化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物其中R1選自H和C1-C6烷基組成的組；R2選自H、C1-C10烷基、C1-C6烷氧基和C1-C6羥基烷基組成的組；R3選自H、C1-C6烷基、C1-C6羥基烷基和C(O)OR4，其中R4選自H和C1-C6烷基組成的組；R5選自-C(O)OH和-(CR6R7)m-NR1R8組成的組，其中m為0-3的整數；R6和R7各自獨立地選自H和C1-C6烷基組成的組且其中R8選自C1-C6烷基和-C(O)-(CR6R7)m-O(C1-C6烷基)組成的組；且其中通式1的化合物進一步任選被羥基或O-葡糖醛酸取代基取代。本發明還涉及制備通式1化合物的方法，通過微生物的生物轉化來進行，所述的微生物生物轉化包括使微生物培養物在適合于所述微生物的營養培養基中接觸E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺或其鹽，并分離該化合物。本發明還涉及制備通式1化合物的方法，包括在體內制備該化合物的步驟。本發明還涉及制備通式1化合物的方法，包括通過合成方法制備該化合物的步驟。本發明還涉及制備E-N-(3-{4-[3-羥甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺的方法，包括使微生物小白鏈霉菌的培養物在適合于所述微生物的營養培養基中與E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺的甲磺酸鹽接觸并分離E-N-(3-{4-[3-羥甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺。本發明還涉及制備E-N-(3-{4-[4-(6-羥甲基-吡啶-3-基氧基)-3-甲基-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺的方法，包括使微生物龜裂鏈霉菌的培養物在適合于所述微生物的營養培養基中與E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺的甲磺酸鹽接觸并分離E-N-(3-{4-[4-(6-羥甲基-吡啶-3-基氧基)-3-甲基-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺。本發明還涉及治療哺乳動物異常細胞生長(諸如癌癥)的方法，包括對所述的哺乳動物給藥治療異常細胞生長有效量的通式1化合物。本發明還涉及治療哺乳動物異常細胞生長的方法，包括對所述的哺乳動物給藥治療異常細胞生長有效量的通式1化合物與抗癌藥，所述的抗癌藥選自有絲分裂抑制劑、烷基化劑、抗代謝物、嵌入抗生素、生長因子抑制劑、放療、細胞周期抑制劑、酶、拓撲異構酶抑制劑、生物反應調節劑、抗體、細胞毒性劑、抗激素和抗雄激素藥組成的組。本發明進一步涉及用于治療哺乳動物異常細胞生長的藥物組合物，包括治療異常細胞生長有效量的通式1的化合物和藥物上可接受的載體。本發明進一步涉及測定患者是否已被給藥了E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺的方法，該方法包括測定獲自患者的血漿、尿、膽汁或糞便樣品是否顯示存在權利要求1的化合物的步驟。本發明還涉及用于治療異常細胞生長的試劑盒，包括a)含有通式1的化合物和藥物上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物；和b)描述使用該藥物組合物治療異常細胞生長的方法的說明書。發明詳述本發明涉及通式1的化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物其中R1選自H和C1-C6烷基組成的組；R2選自H、C1-C10烷基、C1-C6烷氧基和C1-C6羥基烷基組成的組；R3選自H、C1-C6烷基、C1-C6羥基烷基和C(O)OR4，其中R4選自H和C1-C6烷基組成的組；R5選自-C(O)OH和-(CR6R7)m-NR1R8組成的組，其中m為0-3的整數；R6和R7各自獨立地選自H和C1-C6烷基組成的組，且其中R8選自C1-C6烷基和-C(O)-(CR6R7)m-O(C1-C6烷基)組成的組；且其中通式1的化合物進一步任選被羥基或O-葡糖醛酸取代基取代。在一個優選的實施方案中，通式1的化合物基本上是純的。例如，可以通過如下具體描述的體內化學合成或生物轉化獲得基本上純形式的通式1的化合物。在通式1化合物的一個具體的實施方案中，R1為H，R2為羥甲基，R3為甲基，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。在另一個具體的實施方案中，R1為H，R2為甲基，R3為羥甲基，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。在另一個具體的實施方案中，R1為H，R2為甲基，R3為甲基，且R5為-C(O)OH。在另一個具體的實施方案中，R1為H，R2為甲基，R3為-COOH，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。在另一個具體的實施方案中，其中，通式1的化合物進一步含有羥基取代基，R1為H，R2為甲基，R3為甲基，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。在一個實施方案中，羥基部分為如下所示分子的方括號部分內的取代基在另一個具體的實施方案中，其中通式1的化合物進一步含有羥基取代基，R1為H，R2為甲基，R3為羥甲基，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。在一個實施方案中，羥基部分為如下所示分子的方括號部分內的取代基在另一個具體的實施方案中，R1為H，R2為羥甲基，R3為甲基，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。在另一個具體的實施方案中，通式1的化合物進一步含有-O-葡糖醛酸取代基。在一個實施方案中，-O-葡糖醛酸取代基位于喹唑啉環上；在一個實施方案中，它位于苯基氨基的″苯基″部分上；在一個實施方案中，它位于吡啶環上；且在一個實施方案中，它位于與喹唑啉環苯基連接的無環鏈上。本發明具體優選的化合物包括那些選自下列化合物組成的組的化合物N-(3-{4-[3-羥甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺；N-(3-{4-[4-(6-羥甲基-吡啶-3-基氧基)-3-甲基-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺；3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酸；5-(4-{6-[3-(2-甲氧基-乙酰氨基-丙烯基)-喹唑啉-4-基氨基]-2-甲基-苯氧基}-吡啶-2-甲酸；2-羥基-N-(3-{4-[3-羥甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺；和上述化合物的藥物上可接受的鹽、前體藥物、水合物和溶劑合物。通式1的化合物可以以順式(Z)或反式(E)幾何異構體形式存在。在本發明的一個優選實施方案中，通式1的化合物為E式幾何異構體。本發明的化合物可以用作體外或體內代謝研究的分析標準物或用作新化學個體的化學合成或生物合成的中間體。可以將代謝物以固體或溶液形式分離。還可以將本發明化合物用于鑒定已給藥了E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺或其藥物上可接受的鹽或前體藥物或前體藥物的鹽的患者。為了鑒定已給藥了E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺或其藥物上可接受的鹽或前體藥物或前體藥物的鹽的患者，從患者中取血清、尿、糞便或膽汁樣品并分析樣品中存在的一種或多種本發明的化合物。分析本發明化合物的一種方法是使用色譜法和質譜法。其它分析方法是本領域技術人員眾所周知的。血清、尿、糞便或膽汁樣品中存在一種或多種本發明的化合物表明患者已被給藥了E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺或其藥物上可接受的鹽或前體藥物或前體藥物的鹽。在本發明的治療方法中，可以諸如以片劑形式對患者直接給藥本發明的化合物或可以給藥通過經代謝在患者體內產生的化合物。此外，如果需要，可以改變通過代謝產生本發明化合物的化合物的給藥途徑和劑量，以獲得所需的體內濃度和本發明化合物的產率。本發明還涉及通過微生物生物轉化制備通式1化合物的方法，包括使微生物培養物在適合于所述微生物的營養培養基中接觸E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺或其鹽并分離該化合物的步驟。在一個實施方案中，所述的微生物為放線菌，且在一個實施方案中，所述的微生物為真菌。本發明還涉及制備E-N-(3-{4-[3-羥甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺的方法，該方法包括使微生物小白鏈霉菌的培養物在適合于所述微生物的營養培養基中與E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺的甲磺酸鹽接觸并分E-N-(3-{4-[3-羥甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺。在一個優選的實施方案中，適合于小白鏈霉菌(streptomycesalbulus)的營養培養基為IOWA培養基。本發明還涉及制備E-N-(3-{4-[4-(6-羥甲基-吡啶-3-基氧基)-3-甲基-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺的方法，包括使微生物龜裂鏈霉菌的培養物在適合于所述微生物的營養培養基中接觸E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺的甲磺酸鹽并分離E-N-(3-{4-[4-(6-羥甲基-吡啶-3-基氧基)-3-甲基-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺。在一個優選的實施方案中，適合于龜裂鏈霉菌(streptomycesrimosus)的營養培養基為IOWA培養基。本發明還涉及制備通式1化合物的方法，包括在體內制備該化合物的步驟(即該化合物在體內產生)。本發明還涉及制備通式1化合物的方法，包括通過合成方法制備該化合物的步驟。本發明還涉及治療哺乳動物、包括人異常細胞生長的方法，包括對所述的哺乳動物給藥如上所述的治療異常細胞生長有效量的通式1化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或前體藥物。在該方法的一個實施方案中，所述的異常細胞生長為癌癥，包括、但不限于肺癌、骨癌、胰腺癌、皮膚癌、頭或頸癌、皮膚或眼內黑素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門區癌、胃癌、結腸癌、乳腺癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、宮頸癌、陰道癌、外陰癌、何杰金病、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌癥、甲狀腺癌癥、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞性淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性CNS淋巴瘤(lymphom)、脊椎瘤、腦干膠質瘤、垂體腺瘤或上述癌癥中的一種或多種的組合。在所述方法的另一實施方案中，所述異常細胞生長是良性增生疾病，包括但不限于牛皮癬、良性前列腺肥大或再狹窄。本發明還涉及治療哺乳動物異常細胞生長的方法，包括對所述的哺乳動物給藥治療異常細胞生長有效量的通式1化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑合物、水合物或前體藥物與抗癌藥，所述的抗癌藥選自有絲分裂抑制劑、烷基化劑、抗代謝物、嵌入抗生素、生長因子抑制劑、細胞周期抑制劑、酶、拓撲異構酶抑制劑、生物反應調節劑、抗體、細胞毒性劑、抗激素和抗雄激素藥組成的組。本發明還涉及治療哺乳動物、包括人異常細胞生長的藥物組合物，包括如上所述的治療異常細胞生長有效量的通式1化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物和藥物上可接受的載體。在所述組合物的一個實施方案中，所述的異常細胞生長為癌癥，包括、但不限于肺癌、骨癌、胰腺癌、皮膚癌、頭或頸癌、皮膚或眼內黑素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門區癌、胃癌、結腸癌、乳腺癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、宮頸癌、陰道癌、外陰癌、何杰金病、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌癥、甲狀腺癌癥、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞性淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性CNS淋巴瘤(lymphom)、脊椎瘤、腦干膠質瘤、垂體腺瘤或上述癌癥中的一種或多種的組合。在所述藥物組合物的另一個實施方案中，所述的異常細胞生長為良性增生疾病，包括、但不限于牛皮癬、良性前列腺肥大或再狹窄(restinosis)。本發明還涉及治療哺乳動物、包括人異常細胞生長的藥物組合物，包括如上所述的治療異常細胞生長有效量的通式1化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物與藥物上可接受的載體和抗癌藥，所述的抗癌藥選自有絲分裂抑制劑、烷基化劑、抗代謝物、嵌入抗生素、生長因子抑制劑、細胞周期抑制劑、酶、拓撲異構酶抑制劑、生物反應調節劑、抗體、細胞毒性劑、抗激素和抗雄激素藥組成的組。本發明還涉及治療哺乳動物、包括人與血管生成相關的疾病的方法，包括對所述的哺乳動物給藥如上所述的治療所述疾病有效量的通式1化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物。所述疾病包括癌性腫瘤，諸如黑素瘤；眼病，諸如與年齡相關的黃斑變性、眼假組織胞漿菌病綜合征和因增生型糖尿病性視網膜病導致的視網膜新血管形成；類風濕性關節炎；骨丟失病，諸如，骨質疏松癥、佩吉特病、惡性腫瘤體液高鈣血征、因腫瘤轉移至骨導致的高鈣血征和糖皮質激素治療誘發的骨質疏松癥；冠狀動脈再狹窄；和某些微生物感染，包括那些與微生物病原體相關的感染，所述的微生物病原體選自腺病毒、漢坦病毒屬、布氏螺旋疏體、耶爾森氏菌屬種類、百日咳博德特氏菌和A族鏈球菌。本發明還涉及治療哺乳動物異常細胞生長的方法(并涉及用于治療哺乳動物異常細胞生長的藥物組合物)，包括一定用量的通式1化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物和一定用量的一種或多種選自抗血管形成劑、信號轉導抑制劑和抗增生藥的藥物，它們的用量的組合可有效治療所述的異常細胞生長。諸如MMP-2(基質金屬蛋白酶2)抑制劑、MMP-9(基質金屬蛋白酶9)抑制劑和COX-II(環加氧酶II)抑制劑的抗血管形成劑可以與本文所述的方法和藥物組合物中的通式1化合物聯用。有用的COX-II抑制劑的實例包括CELEBREXTM(alecoxib)、伐地考昔和羅非考昔。有用的基質金屬蛋白酶抑制劑的實例描述在下列文獻中WO96/33172(1996年10月24日公開)；WO96/27583(1996年3月7日公開)；歐洲專利申請EP97304971.1號(1997年7月8日提交)；歐洲專利申請EP99308617.2號(1999年10月29日提交)；WO98/07697(1998年1月26日公開)；WO98/03516(1998年1月29日公開)；WO98/34918(1998年8月13日公開)；WO98/34915(1998年8月13日公開)；WO98/33768(1998年8月6日公開)；WO98/30566(1998年7月16日公開)；歐洲專利公開EP606,046(1994年7月13日公開)；歐洲專利公開EP931,788(1999年7月28日公開)；WO90/05719(1990年5月31日公開)；WO99/52910(1999年10月21日公開)；WO99/52889(1999年10月21日公開)；WO99/29667(1999年6月17日公開)；PCT國際申請PCT/IB98/01113號(1998年7月21日提交)；歐洲專利申請EP99302232.1號(1999年3月25日提交)；英國專利申請GB9912961.1號(1999年6月3日提交)；美國臨時申請US60/148,464(1999年8月12日提交)；美國專利US5,863,949(1999年1月26日授權)；美國專利US5,861,510(1999年1月19日授權)；和歐洲專利公開EP780,386號(1997年6月25日公開)，將所有這些公開文獻的全部內容引入本文作為參考。優選的MMP-2和MMP-9抑制劑為那些幾乎沒有或沒有抑制MMP-1的活性的抑制劑。更優選相當于其它基質金屬蛋白酶(即MMP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12和MMP-13)而言選擇性抑制MMP-2和/或MMP-9的那些抑制劑。與本發明化合物聯用的MMP抑制劑的某些具體實例為AG-3340、RO32-3555、RS13-0830和下列所述的化合物3-[[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰基]-(1-羥基氨基甲酰基-環戊基)-氨基]-丙酸；3-外-3-[4-(4-氯-苯氧基)-苯磺酰氨基]-8-氧雜-雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸羥基酰胺；(2R，3R)1-[4-(2-氯-4-氟-芐氧基)-苯磺酰基]-3-羥基-3-甲基-哌啶-2-甲酸羥基酰胺；4-[[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰氨基]-四氫-吡喃-4-甲酸羥基酰胺；3-[[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰基]-(1-羥基氨基甲酰基-環丁基)-氨基]-丙酸；4-[[4-(4-氯-苯氧基)-苯磺酰氨基]-四氫-吡喃-4-甲酸羥基酰胺；3-[[4-(4-氯-苯氧基)-苯磺酰氨基]-四氫-吡喃-3-甲酸羥基酰胺；(2R，3R)1-[4-(4-氟-2-甲基-芐氧基)-苯磺酰基]-3-羥基-3-甲基-哌啶-2-甲酸羥基酰胺；3-[[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰基]-(1-羥基氨基甲酰基-1-甲基-乙基)-氨基]-丙酸；3-[[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰基]-(4-羥基氨基甲酰基-四氫-吡喃-4-基)-氨基]-丙酸；3-外-3-[4-(4-氯-苯氧基)-苯磺酰基氨基]-8-氧雜-雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸羥基酰胺；3-內-3-[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰氨基]-8-氧雜-雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸羥基酰胺；和3-[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰基氨基]-四氫-呋喃-3-甲酸羥基酰胺；和所述化合物的藥物上可接受的鹽、溶劑合物和前體藥物。通式1化合物及其藥物上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物還可以與下列抑制劑聯用信號轉導抑制劑，諸如可以抑制EGFR(表皮生長因子受體)反應的活性劑，諸如EGFR抗體、EGF抗體和屬于EGFR抑制劑的分子；VEGF(血管內皮生長因子)抑制劑；和erbB2受體抑制劑，諸如結合erbB2受體的有機分子或抗體，例如HERCEPTINTM(Genentech，Inc.ofSouthSanFranciscoCalifornia，USA)。EGFR抑制劑描述在例如WO95/19970(1995年7月27日公開)、WO98/14451(1998年4月9日公開)、WO98/02434(1998年1月22日公開)和美國專利US5,747,498(1999年5月5日授權)中。EGFR抑制劑包括、但不限于單克隆抗體C225和抗-EGFR22Mab(NewYork的ImCloneSystemsIncorporated，NewYork，USA)、化合物ZD-1839(AstraZeneca)、BIBX-1382(BoehringerIngelheim)、MDX-447(MedarexInc.ofAnnandale，NewJersey，USA)和OLX-103(Merck&Co.ofWhitehouseStation，NewJersey，USA)、VRCTC-310(VentechResearch)和EGF融合毒素(SeragenInc.ofHopkinton，Massachusettes)。VEGF抑制劑、例如SU-5416和SU-6668(SugenInc.ofSouthSanFrancisco，Calfiornia，USA)也可以與通式1的化合物聯用。VEGF抑制劑描述在例如下列文獻中WO99/24440(1999年5月20日公開)、PCT國際申請PCT/IB99/00797(1999年5月3日提交)、WO95/21613(1995年8月17日公開)、WO99/61422(1999年12月2日公開)、美國專利US5,834,504(1998年11月10日授權)、WO98/50356(1998年11月12日公開)、美國專利US5,883,113(1999年3月16日授權)、美國專利US5,886,020(1999年3月23日授權)、美國專利US5,792,783(1998年8月11日授權)、WO99/10349(1999年3月4日公開)、WO97/32856(1997年9月12日公開)、WO97/22596(1997年6月26日公開)、WO98/54093(1998年12月3日公開)、WO98/02438(1998年1月22日公開)、WO99/16755(1999年4月8日公開)和WO98/02437(1998年1月22日公開)，將所有這些文獻的全部內容引入本文作為參考。某些具體的VEGF抑制劑的其它實例為IM862(CytranInc.ofKirkland，Washington，USA)、抗-VEGF單克隆抗體(Genentech，Inc.ofSouthSanFrancisco，California)和angiozyme、即合成核酶(來自Ribozyme(Boulder，Colorado))和Chiron(Emeryville，California)。可以將ErbB2受體抑制劑，諸如GW-282974(GlaxoWelcomepic)和單克隆抗體AR-209(AronexPharmaceuticalsInc.ofTheWoodlands，Texas，USA)和2B-1(Chiron)可與通式1的化合物聯合給藥。這類erbB2抑制劑包括描述在下列文獻中的那些抑制劑WO98/02434(1998年1月22日公開)、WO99/35146(1999年7月15日公開)、WO99/35132(1999年7月15日公開)、WO98/02437(1998年1月22日公開)、WO97/13760(1997年4月17日公開)、WO95/19970(1995年7月27日公開)、美國專利US5,587,458(1996年12月24日授權)和美國專利US5,877,305(1999年3月2日授權)，將這些文獻各自的全部內容引入本文作為參考。用于本發明的ErbB2受體抑制劑還描述在1999年1月27日提交的美國臨時申請US60/117,341和1999年1月27日提交的美國臨時申請US60/117,346中，將這兩篇文獻的全部內容引入本文作為參考。可以與本發明化合物聯用的其它抗增生藥包括法尼基蛋白轉移酶抑制劑和受體酪氨酸激酶PDGFr抑制劑，包括下列美國專利申請中公開和要求保護的化合物US09/221946(1998年12月28日提交)；US09/454058(1999年12月2日提交)；US09/501163(2000年2月9日提交)；US09/539930(2000年3月31日提交)；US09/202796(1997年5月22日提交)；US09/384339(1999年8月26日提交)；和US09/383755(1999年8月26日提交)；和下列美國臨時專利申請中公開和要求保護的化合物US60/168207(1999年11月30日提交)；US60/170119(1999年12月10日提交)；US60/177718(2000年1月21日提交)；US60/168217(1999年11月30日提交)；和US60/200834(2000年5月1日提交)。將上述專利申請和臨時專利申請各自的全部內容引入本文作為參考。通式1的化合物還可以與其它用于治療異常細胞生長或癌癥的活性劑聯用，包括、但不限于能夠促進抗腫瘤免疫反應的活性劑，諸如CTLA4(細胞毒性淋巴細胞抗原4)抗體；和其它能夠阻斷CTLA4的活性劑；和抗增生藥，諸如其它法尼基蛋白轉移抑制劑，例如描述在上文″
背景技術：
″部分中引述的參考文獻中描述的法尼基蛋白轉移酶抑制劑。可以用于本發明的具體CTLA4抗體包括描述在美國臨時申請US60/113,647(1998年12月23日提交)中的那些抗體，將該文獻的全部內容引入本文作為參考。除非另有說明，這里使用的“異常細胞生長”指的是與正常調節機制無關的細胞生長(例如接觸抑制喪失)。它包括下列情況的異常生長(1)通過表達突變的酪氨酸激酶或超表達受體酪氨酸激酶增生的腫瘤細胞(腫瘤)；(2)發生異常酪氨酸激酶活化的其它增生性疾病的良性和惡性細胞；(4)通過受體酪氨酸激酶活化增生的任意腫瘤；(5)通過異常絲氨酸/蘇氨酸激酶活化增生的任意腫瘤；和(6)發生異常絲氨酸/蘇氨酸激酶活化的其它增生性疾病的良性和惡性細胞。除非另有說明，本文所用的術語″治療″指的是逆轉、緩解、抑制這類術語所針對的疾病或疾患或所述疾病或疾患的一種或多種癥狀的發展或預防。除非另有說明，本文所用的術語″治療″指的是如上述″治療″的治療作用。除非另有說明，本文所用的術語″鹵素″包括氟、氯、溴或碘。優選的鹵素基團為氟和氯。除非另有說明，本文所用的術語″烷基″包括帶有直鏈、環狀部分(包括單-或多-環部分)或支鏈部分的一價烴基。可以理解所述的烷基包括必須含至少三個碳原子的環狀部分。除非另有說明，本文所用的術語環烷基包括含有環(包括單環或多環)部分的飽和一價烴基。除非另有說明，本文所用的術語″鏈烯基″包括如上所定義的含有至少一個碳-碳雙鍵的烷基。除非另有說明，本文所用的術語″炔基″包括如上所定義的含有至少一個碳-碳三鍵的烷基。除非另有說明，本文所用的術語″芳基″包括通過從芳香烴中除去一個氫衍生的有機基團，諸如苯基或萘基。除非另有說明，本文所用的術語″烷氧基″包括-O-烷基，其中烷基如上所定義。術語″Me″指的是甲基，″Et″指的是乙基，且″Ac″指的是乙酰基。除非另有說明，本文所用的術語″藥物上可接受的鹽″包括可以存在于本發明化合物中的酸基或堿基團的鹽。實際上為堿性的本發明化合物能夠與各種無機酸和有機酸成許多種鹽。可以用來制備這些堿性化合物的藥物可接受的酸加成鹽的酸是形成無毒酸加成鹽，即形成含有藥物可接受陰離子的鹽的酸，諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽，硝酸鹽、硫酸鹽、酸式硫酸鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異煙酸酯、醋酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、檸檬酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、泛酸酯、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、龍膽酸鹽、延胡索酸鹽、葡萄糖酸鹽、葡萄糖醛酸酯、糖質酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸酯、乙基磺酸鹽、苯磺酸鹽、對-甲苯磺酸鹽和雙羥萘酸鹽[即1，1′-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸)]鹽。本發明包括堿性部分-諸如氨基-的化合物除可以與上述酸外，還可以與各種氨基酸形成藥物可接受的鹽。本文使用短語″基本純″，除另有說明外，指在所述化合物中化合物的純度，其中所述化合物純度至少為90％，在一個具體實施方案中至少為95％，在一個具體實施方案中至少為99％。本發明的酸性化合物能與各種藥物可接受的陽離子形成堿鹽。這些鹽的例子包括本發明化合物的堿金屬或堿土金屬鹽，和特別是鈣、鎂、鈉和鉀鹽。本發明化合物中的某些功能基團可以代替生物等排基團，即對母基團有相似的空間或電子需求的基團，但顯示不同的或改善的物理化學或其他方面的性質。適宜的例子對本領域的技術人員是熟知的，包括但不局限于Patini等，Chem.Rev，1996，96，3147-3176中所述的，在此引用作為參考。本發明化合物可以有不對稱中心，并因而可以以不同的對映體和非對映體形式存在。本發明涉及本發明化合物的所有旋光異構體和立體異構體及其混合物的用途，并涉及含有它們的所有藥物組合物和可以使用它們的治療方法。式1化合物也可以以互變異構體存在。本發明涉及所有互變異構體及其混合物的用途。本發明還包括同位素標記的化合物，及其藥物可接受的鹽、溶劑化物及其前體藥物，與式1所描述的等同，但1或多個原子被具有的原子量或質量數不同于自然界通常發現的原子量或質量數的所替代。可以結合在本發明的化合物中的同位素的例子分別包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯，諸如2H，3H，13C，14C，15N，18O，17O，35S，18F，和36Cl。含有上述同位素和/或其他原子的其他同位素的本發明的化合物、其前體藥物及其藥物可接受的鹽均在本發明的范圍之內。某些同位素標記的本發明的化合物，例如結合放射性同位素，諸如3H和14C的化合物，能用于藥物和/或基質組織分布測試中。氚，即3H和碳-14，即14C同位素由于其易于制備并檢測而是優選的。另外，用較重的同位素，如氘，即2H代替，可以產生某些由于更好的代謝穩定性而導致的治療優點，如增加體內半衰期或降低所需劑量，因而在某些環境可以是優選的。通常按下述圖解和/或實施例及制備方法公開的方法，通過用易于獲得的同位素標記試劑代替非同位素標記的試劑，制備本發明式1同位素標記化合物及其前體藥物。本發明還包括含有式1化合物的前體藥物的藥物組合物和通過將本發明化合物的前體藥物給藥治療細菌感染的方法。具有游離氨基、酰氨基、羥基或羧基的式1化合物可以轉化成前體藥物。前體藥物包括這樣的化合物，其中氨基酸殘基或2個或多個(例如，2、3或4)氨基酸殘基的多肽鏈通過酰胺或酯鍵共價結合到式1化合物的游離氨基、羥基或羧酸基上。氨基酸殘基包括但不限于通常以三個字母符號表示的20種天然氨基酸，還包括4-羥基脯氨酸、羥基賴氨酸、鎖鏈賴氨素(demosine)、異鎖鏈賴氨素、3-甲基組氨酸、戊氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸高半胱氨酸(citrullinehomocysteine)、高絲氨酸、鳥氨酸和蛋氨酸砜。還包括其他前體藥物類型。例如游離羧基可以衍生為酰胺或烷基酯。游離羥基可以用包括以下但不局限于此的基團進行衍生半琥珀酸鹽、磷酸酯、二甲基氨基醋酸酯和磷酰氧基甲氧基羰基，如在AdvancedDrugDeliveryReviews，1996，19，115中記載的。也包括羥基和氨基的氨基甲酸酯前體藥物，如羥基的碳酸酯前體藥物、磺酸酯和硫酸酯前體藥物。也包括羥基衍生為(酰氧基)甲基醚和(酰氧基)乙基醚，其中酰基可以是烷基酯，任選地用包括但不局限于醚、胺和羧酸官能團取代，或酰基是上述氨基酸酯。J.Med.Chem.1996，39，10中記載了此類前體藥物。游離胺也可以衍生成酰胺、磺酰胺或膦酰胺。所有這些前體藥物部分可以結合包括但不局限于醚、胺和羧酸官能團。圖解1以下文獻提供了制備本發明化合物的一般的合成方法美國專利US5,747,498(公開日1998年5月5日)、美國專利申請序列號為08/953078(申請日1997年10月17日)、WO98/02434(公開日1998年1月22日)、WO98/02438(公開日1998年1月22日)、WO96/40142(公開日1996年12月19日)、WO96/09294(公開日1996年3月6日)、WO97/03069(公開日1997年1月30日)，WO95/19774(公開日1995年7月27日)和WO97/13771(公開日1997年4月17日)。其他方法參考WO00/44728(公開日2000年8月3日)、EP1029853A1(公開日2000年8月23日)和WO01/98277(公開日2001年12月12日)。前述專利和專利申請全部引入于此作為參考。可以按照本領域技術人員熟知的方法制備某些原料，可以按照本領域技術人員熟知的方法進行某些合成改進。制備6-碘喹唑啉酮的標準方法見Stevenson，T.M.，Kazmierczak，F.，Leonard，N.J.，J.Org.Chem.1986，51，5，p.616。鈀催化Heck偶合記載于Heck等，OrganicReactions，1982，27，345或Cabri等，Acc.Chem.Res.1995，28，2中。原料合成在以上沒有具體說明，市場上可以得到，或可以用本領域技術人員熟知的方法制備。在上述圖解中討論或例舉的每個反應中，除非另有指明，壓力不是關鍵的。壓力從約0.5大氣壓至約5大氣壓通常是可接受的，并且，環境壓力即1大氣壓，為了方便起見是優選的。參考上述圖解1，可以在無水溶劑中，通過將其中R5定義如上的式D的化合物與其中R1、R2和R3定義如上的式E的胺偶合，可制備式1化合物，溫度在50-150℃范圍內，時間為1-48小時，溶劑特別選擇DMF(N，N-二甲基甲酰胺)、DME(乙二醇二甲醚)、DCE(二氯乙烷)和叔丁醇和苯酚，或上述溶劑的混合物。可以用本領域技術人員已知的方法制備式E的異芳氧基苯胺，例如相應的硝基中間體的還原反應。通過如上所述的Brown，R.K.，Nelson，N.A.J.Org.Chem.1954，p.5149；Yuste，R.，Saldana，M，Walls，F.，Tet.Lett.1982，23，2，p.147；或WO96/09294概述的方法將芳香硝基還原。可以將鹵代硝基苯前體，通過用適宜的醇將鹵化物進行親核置換，制備適當的雜芳氧基硝基苯衍生物，如在Dinsmore，C.J.等，Bioorg.Med.Chem.Lett.，7，10，1997，1345；Loupy，A.等，Synth.Commun.，20，18，1990，2855；或Brunelle，D.J.，Tet.Lett.，25，32，1984，3383中說明的。可以通過將有R1CH(O)的母體苯胺還原胺化制備R1是C1-C6烷基的式E化合物。可以用偶合劑(acouplingpartner)，例如端基炔、端基烯烴、鹵乙烯、乙烯基錫烷、乙烯基硼烷、烷基硼烷，或烷基鋅試劑或烯基鋅試劑，處理其中Z1是活性基團，諸如溴、碘、-N2或-OTf(即-OSO2CF3)，或活性基團前體，例如NO2、NH2或OH的式C化合物制備式D化合物。可以用氯化試劑，如POCl3、SOCl2或ClC(O)C(O)Cl/DMF，在溫度約60℃-150℃的鹵代溶劑中處理式B化合物約2-24小時，然后在25℃-90℃的如芳香酚等溶劑中用芳醇鈉處理，制備化合物式C。在式C和D中，Y是-Cl或-OAr，其中Ar是芳香基，諸如苯基。可以通過對R5基團的標準處理將任何式1化合物轉化成另一式1化合物。這些方法是本領域技術人員已知的，包括a)通過T.W.Greene和P.G.M.Wuts，″ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis″，第二版，JohnWiley和Sons，NewYork，1991概述的方法除去保護基團；和b)用伯或仲胺、硫醇或醇替換離去基團(鹵化物、甲磺酰酯、甲苯磺酸酯等)，分別形成仲或叔胺、硫醚或醚。堿性的式1化合物能與各種有機或無機酸形成多種不同的鹽。盡管這些鹽必須對動物給藥而言是藥物可接受的，實際上經常期望最初從反應混合物中分離的式1化合物為藥物不能接受的鹽的形式，然后通過用堿性試劑處理簡單地將后者轉化成游離堿化合物，隨后將后來的游離堿轉化成藥物可接受的酸加成鹽。易于通過用基本等當量的選擇的無機酸或有機酸，在水性溶劑介質或合適有機溶劑，例如甲醇或乙醇中處理本發明的堿性化合物，制備其酸加成鹽。小心地蒸發溶劑，能迅速得到所需的固體鹽。也可以向游離堿在有機溶劑中的溶液中加入適當的無機或有機酸，沉淀得到所需的酸加成鹽。酸性的式1化合物能與各種藥物可接受陽離子形成堿鹽。這些鹽的例子包括堿金屬或堿土金屬鹽，特別是鈉和鉀鹽。用常規方法制備這些鹽。能作為制備本發明的藥物可接受的堿鹽的試劑的堿，是與式1酸性化合物形成無毒堿性鹽的堿。這些無毒堿鹽包括從藥物可接受陽離子如鈉、鉀、鈣和鎂等衍生的鹽。通過用含有所需的藥物可接受陽離子的水溶液處理相應的酸性化合物，然后蒸發所得溶液至干，優選在減壓蒸發，易于制備這些鹽。或者，也可以將酸性化合物的低級脂肪醇溶液與所需的堿金屬醇鹽混和，然后以前述方式將所得溶液蒸發至干，制備堿鹽。在此兩種情況下，優選使用化學計算量的試劑以保證反應完全和所需終產物的最大的產率。因為本發明的單個化合物可以包括多于1的酸性或堿性部分，本發明化合物可以在單一化合物中包括單、二或三鹽。本發明化合物是erbB族致癌基因和原致癌基因蛋白質酪氨酸激酶，特別是erbB2的有效抑制劑，因此適于在治療上用作哺乳動物，特別是人的抗增生劑(抗癌)。特別地，本發明化合物用于預防或治療各種人類過度增生性疾病，例如肝、腎、膀胱、乳房、胃、卵巢、結腸和直腸、前列腺、胰、肺、外陰、甲狀腺的良性或惡性腫瘤、肝癌、肉瘤、惡性膠質瘤、頭和頸部的腫瘤，和其他過度增生性疾病，諸如皮膚良性增生(如牛皮癬)和前列腺的過度增生(如BPH)。另外，期望本發明的化合物可以具有抗白血病和淋巴惡性腫瘤的活性。本發明的化合物可以用于治療另外的疾病，其中包括異常表達的配體/受體交互作用或活化或有關各種蛋白質酪氨酸激酶的信號事件。這些疾病可以包括神經原、神經膠質、星形細胞(astrocytal)、下丘腦和其他腺體、巨噬細胞、上皮細胞、間質和囊胚腔的疾病，其中包括erbB酪氨酸激酶的異常的功能、表達、活化或信號傳導。另外，本發明化合物對于炎癥、血管生成性疾病和免疫失調可以有治療用途，包括治療被本發明化合物抑制的識別和尚未識別的酪氨酸激酶引起的疾病。本發明化合物也可以作為E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺代謝的生物標記物，還可以進一步用于測定它在哺乳動物，諸如人體內吸收和代謝破壞的速率。可以通過以下方法測定式1化合物的體外活性。c-erbB2激酶測定法類似于以前在Schrang等，Anal.Biochem.211，1993，p233-239中所述的方法。NuncMaxiSorp96-孔平皿在37℃保溫過夜，用每孔中有100ml0.25mg/mL聚(Glu，Tyr)4∶1(PGT)(SigmaChemicalCo.，St.Louis，MO)在PBS(磷酸鹽緩沖液)中的溶液覆膜。吸除過量的PGT，然后用洗滌緩沖液(0.1％吐溫20的PBS溶液)將平皿洗3次。在50mL的50mMHEPES(pH7.5)中進行激酶反應，HEPES含有125mM氯化鈉、10mM氯化鎂、0.1mM原釩酸鈉、1mMATP、0.48mg/mL(24ng/孔)c-erbB2細胞內結構域(intracellulardomain)。erbB2酪氨酸激酶的細胞內結構域(氨基酸674-1255)表達為在Baculovirus中的GST融和蛋白，通過與谷胱甘肽包覆的珠粒結合并洗脫，將其純化。將DMSO(二甲基亞砜)中的化合物加入形成最終的濃度約2.5％的DMSO濃縮液。加入ATP(三磷酸腺苷)啟動磷酰化，在室溫進行6分鐘，持續搖動。吸除反應混合物而終止激酶反應，然后用洗滌緩沖液(見上)洗滌。如下測定磷酰化PGT每孔用50mlHRP-偶合PY54(OncogeneScienceInc.Uniondale，NY)抗磷酸酪氨酸抗體，在阻滯緩沖液(blockingbuffer)(3％BSA和0.05％吐溫20的PBS溶液)中稀釋到0.2mg/mL保溫25分鐘。吸除抗體，然后用洗滌緩沖液洗滌平皿4次。每孔加入TMB微孔過氧化酶底物(KirkegaardandPerry，Gaithersburg，MD)50ml，形成比色信號，然后每孔中加入50mL的0.09M硫酸終止反應。在450nm測定吸收度計算磷酸酪氨酸的量。對比信號通常為0.6-1.2吸收度單位，孔中基本沒有背景信號，也沒有PGT底物，與10分鐘內的保溫時間成正比。通過相對于沒有抑制劑的皿的信號的降低確定抑制劑，并測定IC50值，即對應于達到50％抑制所需的化合物濃度。本文舉例說明的與式1對應的化合物具有抗erbB2激酶的IC50值小于10μM。通過測定試驗化合物相對于對照物使腫瘤生長的抑制量確定式1化合物的體內活性。按照以下文獻記載的方法，并稍加改進，測定各種化合物對腫瘤生長的抑制作用CorbettT.H.等，“TumorInductionRelationshipsinDevelopmentofTransplantableCancersoftheColoninMiceforChemotherapyAssays，withaNoteonCarcinogenStructure”，CancerRes.，35，2434-2439(1975)和CorbettT.H.等，“AMouseColon-tumorModelforExperimentalTherapy”，CancerChemother.Rep.(Part2)”，5，169-186(1975)。左腹皮下注射1-5百萬懸浮于0.1mlRPMI1640介質中的對數期的培養腫瘤細胞(小鼠FRE-ErbB2細胞或人SK-OV3卵巢癌細胞)誘發腫瘤。充足時間后，腫瘤變得可觸及(體積100-150mm3/直徑5-6mm)，用試驗化合物(在5Gelucire中配制成濃度10-15mg/ml)，通過腹腔注射(ip)或口服(po)途徑處理實驗動物(去胸腺的雌性小鼠)，每日1或2次，連續7-10天。為測定抗腫瘤效果，用游標卡尺在2個直徑方向以毫米為單位測定腫瘤，然后按照Geran，R.I.，等“ProtocolsforScreeningChemicalAgentsandNaturalProductsAgainstAnimalTumorsandOtherBiologicalSystems”，第三版，CancerChemother.Rep.，3，1-104(1972)的方法，用以下公式計算腫瘤體積腫瘤體積(mm3)＝(長×寬2)/2。按以下公式計算，將結果表示為抑制百分率抑制率(％)＝(TuW對照-TuW試驗)/TuW對照×100％。腫瘤植入的側腹位置為各種化學治療劑提供了可重復的劑量/反應效應，(腫瘤直徑)測定方法是確定腫瘤生長率的可靠方法。可以通過任何方法將化合物輸送到作用部位，完成本發明化合物(以下稱活性化合物)的給藥。這些方法包括口服途徑、十二指腸內途徑、胃腸外注射途徑(包括靜脈內、皮下、肌內、血管內注射或輸注)、局部給藥和直腸給藥。活性化合物的給藥量取決于所治療的對象、疾病或病癥的嚴重程度、給藥頻率、化合物的分布和主治醫生的判斷。然而，有效量在約0.001-約100mg/kg體重/天的范圍內，優選約1-約35mg/kg/天，單劑量或分劑量給藥。對于70kg的人，將為約0.05-7g/天，優選約0.2-約2.5g/天。在某些情況下，低于上述范圍低限的劑量水平也是足夠的，在另一些情況下，可以采用更高的劑量水平而不會引起任何有害的副作用，只是將此更高劑量先分為一些小劑量在一天內給藥。本發明還有益地提供了消費者治療疾病使用的試劑盒。試劑盒包括a)含有本發明化合物和藥物可接受載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物；和b)描述使用所述藥物組合物治療特定疾病的方法的說明書。本申請使用試劑盒包括含有獨立的單位劑量的容器，如分離的瓶或分離的箔壓包裝。該容器可以是本領域已知的任何常規的用藥物可接受的材料制成的形狀或形式，例如紙或薄紙板的盒、玻璃或塑料瓶或罐，或可重復密封的袋子(例如，將片劑再裝入到不同的容器中)，或根據治療程序將單劑量擠出包裝的泡狀包裝。采用的容器取決于其中包含的具體的劑型，例如常規的薄紙板盒通常不用于儲存液體懸浮劑。可行的是使用在一個包裝中多個容器，以銷售單劑量劑型。例如，片劑可以包裝在瓶中，然后再包裝在盒中。此試劑盒的例子是所謂的泡狀包裝。泡狀包裝在包裝工業中是公知的，廣泛用于包裝藥物單位劑量劑型(片劑、膠囊等)。泡狀包裝通常由較硬材料的薄片構成薄片上覆蓋優選透明塑料材料的箔。在包裝過程中，在塑料箔上形成凹穴。此凹穴有所包裝的單個片劑或膠囊的形狀和體積，或可以有能適應多個要包裝的片劑和/或膠囊的體積和形狀。然后，將片劑或膠囊置于凹穴中，將較硬材料的薄片在與凹穴形成的方向相反的箔的開口一面密封在塑料箔上。結果，根據需要將片劑或膠囊獨立密封或集群密封在塑料箔與薄片之間形成的凹穴中。優選薄片的強度為可以用手向凹穴施壓，在薄片上凹穴的位置形成開口，將片劑或膠囊從泡狀包裝中擠出。然后通過此開口將片劑或膠囊取出。理想地是提供一個文字的備忘錄，它包括對醫生、藥師或病人的信息和/或指導，例如，以這種形式片劑或膠囊旁邊是數量，此數量對應用藥法的某天應攝取此指定片劑或膠囊的量，或包括同類信息的卡片。此備忘錄的另一個實例是印在卡片上的日歷，例如，如下所述的“第一周，星期一，星期二”...等...“第二周，星期一，星期二......”等。其他類型的備忘錄也容易明白。“每日劑量”可以是在指定的一天攝取一片或一個膠囊，或多片或多個膠囊。試劑盒另一具體實施方案是分藥器，設計成每次分發一個每日劑量。優選地，分藥器安裝有記憶輔助裝置，以進一步便于依從用藥法。此記憶輔助裝置的一個實例是機械計數器，它指示已分發的每日劑量的數量。此記憶輔助裝置的另一個實例是與液晶讀出裝置或聲音提示信號連接的電池驅動的記憶微芯片，例如，讀出最后每日劑量已攝取的日期，和/或提醒病人下一劑量攝取的時間。在試劑盒的另一實例中，藥物組合物也可以包括可以與本發明化合物聯用的其他化合物，或此試劑盒可以包括2種藥物組合物一種含有本發明的化合物，另一種含有可以與本發明化合物聯用的其他化合物。可以以單獨治療的方式使用活性化合物，或可以包括一種或多種其他抗腫瘤藥物，例如選自以下藥物有絲分裂抑制劑，如長春花堿；烷基化劑，如順鉑、碳鉑和環磷酰胺；抗代謝物，如5-氟尿嘧啶、胞嘧啶阿拉伯糖苷和羥基脲，或，例如，歐洲專利申請239362號公開的優選抗代謝物中的一種，例如N-(5-[N-(3，4-二氫-2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-基甲基)-N-甲基氨基)-2-噻酚甲酰)-L-谷氨酸；生長因子抑制劑；細胞周期抑制劑；嵌入抗生素，例如，阿霉素和博萊霉素；酶，例如干擾素；和抗激素劑，例如抗雌激素劑，諸如NolvadexTM(他莫昔芬)或，例如抗雄激素藥，諸如CasodexTM(4′-氰基-3-(4-氟苯基磺酰基)-2-羥基-2-甲基-3′-(三氟甲基)-N-丙酰苯胺)。可以采用同時、順序或分別給藥獨立的治療組分的方式實現聯合治療。藥物組合物可以，例如為適于口服給藥的片劑、膠囊、丸劑、粉劑、持續釋放劑型、溶液、懸浮液，適于胃腸外注射的無菌溶液、懸浮液或乳劑，適于局部給藥的軟膏劑或霜劑或直腸給藥的栓劑的劑型。藥物組合物可以為適于精確劑量單次給藥的單位劑量劑型。藥物組合物將包括通常的藥物載體或賦形劑，以及活性成分本發明的化合物。另外，也可以包括其他治療劑、載體、輔劑等。本發明化合物與其他化合物的聯合給藥意味著這些化合物可以作為組合物或同一單元劑型部分，或以獨立劑型的方式，在同時間或在不同時間給藥。示例性的胃腸外給藥劑型包括活性化合物在無菌水溶液，例如，丙二醇或葡萄糖水溶液中形成的溶液或懸浮液。在需要時，可以適當地將這些劑型緩沖。適宜的藥物載體包括惰性稀釋液或充填劑、水和各種有機溶劑。需要時，藥物組合物可以含有附加的組分，諸如調味劑、粘結劑、賦形劑等。因此，對于口服給藥，含有各種賦形劑諸如檸檬酸的片劑，還可以含有各種崩解劑，諸如淀粉、海藻酸，和某些復合硅酸鹽和粘結劑，諸如蔗糖、明膠和阿拉伯膠。此外，潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、月桂基磺酸鈉和滑石通常用于壓片。軟和硬填充膠囊中也可以使用相同類型的固體組合物。因此，優選的原料包括乳糖和高分子量的聚乙二醇。當需要采用含水懸浮液或酏劑口服給藥時，其中的活性化合物可以與各種甜味劑或調味劑、著色物質或染料合用，需要時，還可以加入乳化劑或懸浮劑及稀釋劑，諸如水、乙醇、丙二醇、丙三醇或其組合。制備含有特定量的活性化合物的藥物組合物的方法是本領域技術人員已知的，或是顯而易見的。例如參見Remington′sPharmaceuticalSciences，MackPublishingCompany，Easter，Pa.，15thEdition(1975)。以下提供的實施例和制備方法進一步說明和解釋本發明的化合物和制備這些化合物的方法。應理解的是本發明的范圍不以任何方式局限于以下實施例和制備方法的范圍。在以下實施例中，有單一手性中心的分子，除非另有說明，以外消旋混合物的形式存在。有兩個或多個手性中心的分子，除非另有說明，以非對映體外消旋混合物的形式存在。可以用本領域技術人員已知的方法獲得單一對映體/非對映體。在以下的制備方法和實施例中涉及HPLC時，采用WatersAllianceHPLC系統(2690+996光電二極管陣列)進行HPLC。用Waters717自動進樣器、996PDA、600控制器進行制備HPLC。在以下實施例中提供色譜操作的其他細節。本發明化合物可以按照上述圖解1用合成方法制備，或可以用本領域技術人員已知的或下述的生物轉化方法制備。實施例實施例1生物轉化的一般方法本領域技術人員可以使將被轉化的物質及其他必需的反應物與各種活的微生物或其衍生的酶，在適于發生化學作用的條件下接觸而完成生物轉化。然后分離反應產物，將所需物質純化，用于闡明其化學結構及物理和生物學性質。酶可以以下述方式存在純試劑、粗提取物或溶菌產物、完整的細胞、溶液、混懸液，共價結合到載體表面，或嵌入可滲透性的基質(例如，瓊脂糖或藻酸鹽顆粒)中。按化學規格提供底物和其他必需的反應物(例如，水、空氣、輔因子)。通常，在有一種或多種液相-水相和/或有機相-存在的條件下進行反應，促進反應物和產物的質量傳遞。反應可以或不可以無菌地進行。將根據反應系統的物理性質及反應物和產物的化學性質改變控制反應進行和反應產物分離的條件，并且這些改變將能夠被本領域技術人員所理解。以下是進行需氧生物轉化的實驗室規模方法的兩個例子，本領域技術人員可以采用以制備所需化合物將營養培養基(例如，IOWA培養基葡萄糖、酵母提取物、磷酸氫二鉀、氯化鈉、大豆粉、水；調至中性pH)加入一或多個培養容器(例如，發酵管或燒瓶)中，然后蒸汽滅菌。每個容器無菌接種從瓊脂培養物得到的生長物、洗滌過的細胞或芽胞的懸浮液，或接種從生物轉化的微生物的液體營養培養基的培養物得到的肉湯。將容器固定在為發酵設計的震蕩器上，并在適宜溫度(例如，20-40℃)震蕩(例如，以100-300rpm的速率旋轉操作)足夠長的時間，以促使微生物生長到適宜的種群大小(例如，1-3天)。將被轉化的母體化合物(即底物)溶解在水或適宜的與水混溶的溶劑(例如，二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、乙醇、甲醇)中。向每個生物轉化容器中，無菌地加入得到的溶液，達到需要的底物濃度(例如，0.1-0.2mg/mL)。加入反應物的容器安裝在震蕩器上，如前震蕩，直到底物經微生物的代謝(例如，1-10天)轉化成產物。生物轉化容器中的內容可以經過物理處理(如過濾或離心)以從水相中分離不溶的固體和細胞，或在提取目的化合物的最佳pH條件下提取(與水不相混溶的有機溶劑包括但不限于二氯甲烷或乙酸乙酯)。在分離時，可以用適宜的可與水混溶的有機溶劑(例如，甲醇)提取固體。回收從容器中得到的固體的溶劑提取物和液相內容物，合并，并用適宜的方法，例如，固相提取和減壓干燥濃縮。干燥的粗產物再溶解在適合于純化方法相容的溶劑(例如，乙腈、甲醇、水或HPLC流動相)中。通過但不局限于固相提取(SPE)，隨之以反向高效液相色譜(HPLC)，實現生物轉化產物的分離和純化。在色譜分離中可以例如用UV-吸收和光電二極管陣列光譜圖(photodiodearrayspectralprofile)檢測生物轉化產物。保留含有所需產物的HPLC流動相的餾分，用適宜的方法將產物從流動相中提取出來，例如，真空干燥，然后在對所需化合物的提取最佳的pH條件下，用SPE或與水不相混溶的有機溶劑提取。回收從SPE提取得到的溶劑洗脫物，過濾除去固體，并減壓濃縮，得到干燥的純生物轉化產物。用質譜法(MS)和核磁共振法(NMR)測定分離出的產物的結構。實施例2通過微生物轉化制備E-N-(3-{4-[3-羥甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺。在29個有泡沫塞的250mL錐形瓶中分別加入50毫升(50mL)IOWA培養基(無水葡萄糖20g；酵母提取物5g；磷酸氫二鉀5g；氯化鈉5g；大豆粉5g；蒸餾水1L；用1N鹽酸調節至pH7.2)，在15psig和121℃蒸汽滅菌20分鐘。在3個燒瓶中無菌接種0.5mL低溫儲藏的(-80℃)小白鏈霉菌(streptomycesalbulus)(ATCC12757)菌絲體。將接種的燒瓶垂直固定在旋轉震蕩器上(行程2英寸)，并以210rpm在29℃震蕩2天(接種物階段)。然后，將5mL接種物階段的培養物無菌轉移到剩余的26個燒瓶中(生物轉化階段)。接種的生物轉化燒瓶垂直固定在旋轉震蕩器上(行程2英寸)，并以210rpm在29℃震蕩2天。2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺的甲磺酸鹽(即底物)溶解在二甲基亞砜(10mg/mL)中。分別向26個生物轉化燒瓶中，無菌加入0.5mL所得溶液，得到初始底物濃度0.1mg/mL(在26個燒瓶中總量為130mg)。將加入反應物的燒瓶重新垂直固定在旋轉震蕩器上，以210rpm在29℃另外震蕩3天。在3天的生物轉化周期結束時，將生物轉化燒瓶的內容物合并。用1N氫氧化鈉將全部肉湯的pH調節到8.5。用等體積的乙酸乙酯將得到的肉湯提取2次。用旋轉蒸發器(40℃水浴)濃縮有機相，然后減壓干燥(SavantSpeedvac，低溫，完全真空設定)。向剩余物中加入二甲基亞砜(0.4mL)，然后加樣于入預處理的WatersC18SepPak(5g)中，進行固相提取(按照制造商的指導事先處理柱體)。加樣后，用24mL蒸餾水，然后用24mL25％甲醇水溶液，然后用24mL50％甲醇水溶液洗脫色譜柱，以除去多余的原料。用24mL75％甲醇的水溶液洗脫所需化合物。減壓干燥75％甲醇水溶液洗脫部分(SavantSpeedvac，低溫設置，完全真空設置)過夜。向每個試管中加入甲醇，使合并的剩余物(約0.6mL)進行反向高效液相色譜(HPLC方法1)以分離所需化合物。HPLC方法1色譜柱WatersSymmetryPrepC185μ19×300mm。流動相在0-20分鐘采用線性梯度。在20分鐘內由90∶10至50∶50；在20.5分鐘調節到10∶90；在10∶90保持7分鐘；(含水緩沖液[5mM醋酸銨，pH4.5]乙腈)流量12mL/min。檢測器波長254nm的UV吸收度；200-400nm的光電二極管陣列。操作時間27分鐘。標題化合物的保留時間約為17.2分鐘。收集含有標題化合物的HPLC餾分。用1NNaOH調節洗脫液的pH至8.6，然后用等體積二氯甲烷提取2次。取等分試樣的有機相在氮氣流中干燥(40℃水浴)，懸浮在甲醇中進行反向高效液相色譜(HPLC方法2)分析。在此分析測定中，所需化合物的保留時間約為14.7分鐘。在同樣的測定中，在約19.3分鐘洗脫得到母體化合物。HPLC方法2色譜柱WatersSymmetryC185μ2.1×150mm。流動相0-20分鐘為線性梯度；在20分鐘內由90∶10至50∶50；在20.5分鐘調節到10∶90；在10∶90保持7分鐘；(含水緩沖液[5mM醋酸銨，pH4.5]乙腈)流量0.3mL/min。檢測器波長254nm的UV吸收度；200-400nm的光電二極管陣列。操作時間30分鐘。用旋轉蒸發器減壓(40℃水浴)濃縮剩余的有機相，然后減壓至干(SavantSpeedvac，低溫設定，完全真空設定)。分離黃色粉末狀的所需化合物(15.6mg)。它在242.6nm、312.5nm和347nm有最大UV-光吸收度(λmax)。質譜m/z＝486.5。1H(CD3OD)δ8.78(s，1H)，8.65(d，J＝1.6Hz，1H)，8.45(d，J＝2.8Hz，1H)，8.23(dd，J＝8.7，1.6Hz，1H)，8.02(d，J＝2.8Hz，1H)，7.98(dd，J＝8.7，2.8Hz，1H)，7.85(d，J＝8.7Hz，1H)，7.81(dd，J＝8.7，2.8Hz，1H)，7.78(d，J＝8.7，1H)，7.21(d，J＝8.7Hz，1H)6.78(d，J＝15.9Hz，1H)，6.64(dt，J＝15.9，5.6Hz，1H)，4.74(s，2H)，4.14(dd，J＝5.6，1.2Hz，2H)，3.98(s，2H)，3.48(s，3H)，2.73(s，3H)。13C(CD3OD)δ171.6，161.2，160.9，160.5，154.8，151.1，150.4，150.0，139.0，137.9，134.8，134.6，134.3，1329，132.7，130.8，128.9，128.2，125.9，125.7，121.2，120.0，119.9，114.3，71.7，58.8，′58.7，40.6，18.9。實施例3制備E-N-(3-{4-[4-(6-羥甲基-吡啶-3-基氧基)-3-甲基-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺用實施例2描述的方法制備需要的化合物E-N-(3-{4-[4-(6-羥甲基-吡啶-3-基氧基)-3-甲基-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-2-甲氧基-乙酰胺，不同之處如下所述所用微生物為龜裂鏈霉菌(Streptomycesrimosus)(ATCC23955)菌絲體(代替小白鏈霉菌(ATCC12757)菌絲體)。另外再搖動加反應物的燒瓶5天(而非3天)。用實施例2的HPLC方法1，標題化合物的保留時間約為18.5分鐘。收集HPLC餾分(從HPLC方法1)后，洗脫液用等體積的二氯甲烷提取2次(不調節洗脫物的pH)。相應于第二種高效液相色譜(HPLC方法2)，所需化合物的保留時間約為15.3分鐘。在同一測定中，母體化合物在約19.3分鐘洗脫。分離出黃色粉末狀的所需化合物(10.4mg)。所述化合物在242.6nm、312.5nm和347nm有UV-光最大吸收(λmax)。質譜m/z＝486.5。1H(CD3OD)δ8.53(s，1H)，8.40(d，J＝1.2Hz，1H)，8.22(d，J＝2.8Hz，1H)，8.03(dd，J＝8.7，2.0Hz，1H)，7.72(d，J＝2.8Hz，1H)，7.76(d，J＝8.7Hz，1H)，7.64(dd，J＝8.7，2.8Hz，1H)，7.54(d，J＝8.7Hz，1H)，7.41(dd，J＝8.7，2.8Hz，1H)，7.04(d，J＝8.7Hz，1H)，6.76(d，J＝15.9Hz，1H)，6.53(dt，J＝15.9，5.6Hz，1H)，4.70(s，2H)，4.12(m，2H)，3.99(s，2H)，3.48(s，3H)，2.29(s，3H)。13C(CD3OD)δ171.6，159.3，155.1，154.3，153.7，151.2，147.1，138.0，136.7，135.3，131.9，130.7，130.1，128.5，127.0，126.0，125.4，123.1，122.2，120.4，120.3，115.5，71.7，64.2，58.6，40.6，15.4。實施例4制備E-3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酸向冷卻的(0℃)NaH(4.8g，60％，0.12mol)在無水DMF(60ml)中的攪拌懸浮液中滴加PhOH(11.3g，0.12mol)在干燥DMF(50mL)中的溶液。滴加后，分批添加4-氯-6-碘喹唑啉(29g，0.1mol)。然后除去冷卻浴，在室溫下攪拌所得溶液1.5小時，用水(300mL)終止反應。產物沉淀，然后用EtOAc(400mL)提取。用NaOH水溶液、水、鹽水洗滌分離的有機層，用Na2SO4干燥，濃縮，得到黃白色固體6-碘-4-苯氧基喹唑啉(32.9g，94％)。從EtOAc中結晶，得到白色柔軟而短的針狀結晶。用N2將上一段制備的6-碘-4-苯氧基喹唑啉(3.5g，10mmol)、丙酸甲基酯(6g，70mmol)、Pd(OAc)2(140mg，0.62mmol)和Ph3P(320mg，1.22mmol)在Et3N/DMF中的混合物凈化，將壓力反應器蓋緊。然后在油浴上將反應物在110℃加熱并攪拌。薄層色譜顯示在3小時后反應完成。然后將產物混合物轉入圓底燒瓶，并用N2氣流純化以除去丙酸甲基酯。然后將剩余物溶解在乙酸乙酯中，用水、鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮得到黃色固體粗E-3-(4-苯氧基-喹唑啉-6-基)-丙烯酸甲酯，從乙酸乙酯中重結晶，分2批得到2.3g(70％)淡黃色固體結晶。從上一段得到的產物(E-3-(4-苯氧基-喹唑啉-6-基)-丙烯酸甲酯)(307mg，1mmol)和所需苯胺(215mg，1mmol)的混合物溶解于苯酚(2g)中，然后將所得混合物在油浴上在100℃加熱，得到澄清液體。加熱20小時后，減壓蒸餾棕色液體以除去苯酚。將剩余物在稀NaOH和二氯甲烷之間分配。用鹽水洗滌分離的有機相，用硫酸鈉干燥，濃縮得到粗產物，用色譜法純化，得到純的E-3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酸甲酯(480mg)。將上述甲酯(450mg，1mmol)和LiOH·H2O(0.63g，15mmol)在甲醇/水(10/1ml)混合物中回流3小時。冷卻后反應混合物用在2mL水中的醋酸(0.9g，15mmol)中和至pH6.0。最初得到澄清液體，后來得到沉淀的酸產物黃色固體，真空過濾收集，干燥，得到為黃色固體的終產物E-3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-丙烯酸(280mg，68％)。1H(CD3OD)δ2.24(s，3H)，2.48(s，3H)，6.70(d，J＝16Hz，1H)，6.98(d，1H)，7.28(m，2H)，7.6(m，1H)，7.69(m，1H)，7.76(m，1H)，7.78(d，J＝16Hz，1H)，8.1(m，2H)，8.5(s，1H)，8.6(d，1H)。m/z(ES+)(M+1)413.4。HPLCRt＝4.831分鐘。本發明化合物也可以以結構如下所示的E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺的代謝物而以混合物的形式被制備。因此，可以用小鼠、大鼠、猴、狗和人的肝組織制品(切片、勻漿(homogentates)、肝細胞、微粒體)或用重組酶(例如，含有昆蟲細胞微粒體的人CYP)培養E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺。可以收集膽汁、尿和血漿樣品，并進一步處理得到代謝產物混合物的樣品。然后這些樣品可以用HPLC分離，并用標準檢測方法，例如質譜、NMR和UV分析。權利要求1.通式1的化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑合物或前體藥物其中R1選自H和C1-C6烷基組成的組；R2選自H、C1-C10烷基、C1-C6烷氧基和C1-C6羥基烷基組成的組；R3選自H、C1-C6烷基、C1-C6羥基烷基和C(O)OR4，其中R4選自H和C1-C6烷基組成的組；R5選自-C(O)OH和-(CR6R7)m-NR1R8組成的組，其中m為0-3的整數；R6和R7各自獨立地選自H和C1-C6烷基組成的組且其中R8選自C1-C6烷基和-C(O)-(CR6R7)m-O(C1-C6烷基)組成的組；其中通式1的化合物進一步任選被羥基或O-葡糖醛酸取代基取代。2.權利要求1所述的化合物，其中R1為H，R2為羥甲基，R3為甲基，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。3.權利要求1所述的化合物，其中R1為H，R2為甲基，R3為羥甲基，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。4.權利要求1所述的化合物，其中R1為H，R2為甲基，R3為甲基，且R5為-C(O)OH。5.權利要求1所述的化合物，其中R1為H，R2為甲基，R3為-COOH，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。6.權利要求1所述的化合物，其中通式1的化合物進一步含有羥基取代基，且其中R1為H，R2為甲基，R3為甲基，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。7.權利要求1所述的化合物，其中通式1的化合物進一步含有羥基取代基，且其中R1為H，R2為甲基，R3為羥甲基，且R5為-CH2NHC(O)CH2OCH3。8.權利要求1所述的化合物，其中R1為H，R2為羥甲基，R3為甲基，且R5為-CH2NHC(O)CH2OH。9.權利要求1所述的化合物，其中通式1的化合物進一步含有-O-葡糖醛酸取代基。10.權利要求1所述的化合物，其中所述的化合物基本上是純的。11.治療哺乳動物異常細胞生長的方法，包括對所述的哺乳動物給藥治療異常細胞生長有效量的權利要求1的化合物的步驟。12.用于治療哺乳動物異常細胞生長的藥物組合物，包括治療異常細胞生長有效量的權利要求1的化合物和藥物上可接受的載體。13.測定患者是否被給藥了E-2-甲氧基-N-(3-{4-[3-甲基-4-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-苯基氨基]-喹唑啉-6-基}-烯丙基)-乙酰胺的方法，該方法包括測定獲自患者的血漿、尿、膽汁或糞便樣品是否顯示存在權利要求1的化合物的步驟。14.用于治療異常細胞生長的試劑盒，包括a)含有權利要求1的化合物和藥物上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物；和b)描述使用該藥物組合物治療異常細胞生長的方法的說明書。全文摘要本發明涉及通式(1)的化合物及其藥物上可接受的鹽、前體藥物和溶劑合物，其中R文檔編號A61P35/00GK1729001SQ200380106955公開日2006年2月1日申請日期2003年12月8日優先權日2002年12月18日發明者約翰·C·卡思,劉正宇,瑪麗亞·S·布朗,史蒂文·M·溫特,蘇珊·J·特魯斯德爾,魯比·A·斯澤克申請人:輝瑞產品公司