含有輔酶q的制作方法

專利名稱：含有輔酶q的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種含有輔酶Q10的水溶性組合物，還涉及生產該水溶性組合物的方法、含有該水溶性組合物的藥物、食品和飲料、化妝品和飼料。本發明具體涉及可含有高濃度輔酶Q10的水溶性組合物，存儲穩定性好，因此在長期保存期間輔酶Q10不會沉淀、堆積或懸浮，且具有良好的吸收性能，因此該組合物即便在禁食情況下也能被吸收。本發明進一步涉及包含含有輔酶Q10組合物的藥物、食品和飲料、化妝品以及飼料，具備應用所需要的良好的耐熱性、耐酸性和耐鹽性。
背景技術：
輔酶Q10與泛醌(分子式C59H90O4；分子量863.4))相應，即2，3-二甲氧基-5-甲基-6-聚異戊二烯基-1，4-苯醌，具有含有10個異戊二烯單元的側鏈，且存在于高等動物中。它是一種已知為癸烯酯(ubidecarenone)或輔酶Q10的輔酶Q。輔酶Q10的物理性質已知為橙色晶體，是熔點為約49℃的脂溶性物質。已知輔酶Q10不僅是具有生物學活性的輔酶，也是一種類似維生素的活性物質，具有提高氧的利用效率的功能。輔酶Q10被認為對線粒體中三磷酸腺苷的產生十分重要，已有報道輔酶Q10通過提高個體的免疫功能有效地治療心臟病、高血壓、風濕性瓣膜病或牙槽感染。它也被用于治療充血性心力衰竭或腦血管失調，預防抗癌藥物的副作用(預防阿霉素造成的心臟病)、疲勞反應、能量活化，以及體內活性氧的抗氧化。人們也預期了它作為皮膚外用制劑來預防老化的有效性。因此輔酶Q10具有較高的生物活性，被認為是存在于體內的高度安全的物質。
在這種情況下，近年來公開了多種與輔酶Q10相關的技術。
例如，JP-A-60-199814公開了通過用Manton Gaulin型高壓勻漿器(500到550kg/cm2)處理非離子表面活性劑如聚乙烯乙二醇，硬化蓖麻油聚氧乙烯-(20)-醚等等獲得的脂肪乳液。
JP-A-63-150221公開了一種具有極好的吸收性能的用作藥劑學藥物的乳化組合物，該組合物通過采用泛醌作為結晶制劑，將其在過飽和狀態下溶解于己二酸(adipicacid)或油如大豆油等，用表面活性劑，例如聚氧乙烯堿、聚甘油脂肪酸酯、吐溫(Tween)堿等，以及通過加入另一種O/W型微乳液來制備O/W型微乳液。
EP-494651B1和U.S.5,298,246公開了一種具有提高的吸收率的組合物，通過將泛醌溶解于油中，采用哺乳動物乳汁中的脂肪球膜乳化，并將其分級為具有特定顆粒直徑(1-5μm)的顆粒制備而成。
JP-A-2000-212066公開了一種含有脂溶性物質的水性乳液，通過將作為脂溶性物質的泛醌、作為乳化劑的聚甘油脂肪酸酯和甘油磷脂結合起來，再加入聚乙醇和水，然后進行攪拌，接著用500-2000kg/cm2的高壓進行均質化(homogenization)處理。
JP-A-60-199814中所描述的輔酶Q10脂肪乳劑存在著顆粒尺寸大，透明度差的問題。
EP-494651B1和U.S.5,298,246所公開的需要將輔酶Q10溶解于油中的組合物存在著顆粒直徑大，透明度差的問題。另外，還存在著制造食品和飲料中所需要的耐熱性、耐酸性和耐鹽性差的問題。
JP-A-63-150221進一步教導了在低溫下存儲穩定性較好的化妝液，然而在這項技術中，透明度變得較差，隨著液體溫度的降低而發生沉淀，而且存在著在生產食品和飲料時所需要具備的的耐熱性、耐酸性和耐鹽性均較差的問題。
JP-A-2000-212066也教導了可應用于多種油性物質的水包油型的微乳劑。然而，這一技術存在著在多種情形下耐酸性、耐鹽性和耐熱性差的問題。
JP-A-9-168369公開了一種含有聚甘油脂肪酸酯，水和食品添加劑的溶解的油和脂肪組合物。然而，該組合物存在著透明度和穩定性差的問題。
一種含有輔酶Q10的水溶性組合物預期滿足下列要求(1)小的顆粒大小，以及良好的透明度；(2)高濃度的輔酶Q10，而不需要油成分來溶解或分散；(3)食用和品嘗時良好的味覺。
(4)制造時不需要特殊的條件或復雜的過程；以及(5)在添加入多種食物時需要的良好的耐酸抗熱性和耐鹽抗熱性。
然而，通過乳化來制備輔酶Q10的制劑通常伴隨著困難，因為輔酶Q10不溶于水，在光、熱或堿性條件下不穩定，高度易結晶。而且即使一旦制備成乳劑后，輔酶Q10的重結晶也會導致分離、沉積、沉淀或懸浮的發生。盡管需要提高輔酶Q10在水溶性組合物中的濃度以獲得足夠的輔酶Q10的效應，但由于它的溶解延遲和高度結晶性而難于在水中溶解。
而且，迫切需要一種增溶的溶液，當在食品和飲料、化妝品等中加入輔酶Q10時，無需普通油性成分；良好的透明度、耐酸性、耐鹽性和耐熱性，這些在與食物和飲料、化妝品等混合時都是必需的；極好的乳劑穩定性和存儲穩定性；能夠含有高濃度的輔酶Q10。更進一步的，由于體內的吸收率很低，也需要提高輔酶Q10的吸收率。
相應的，本發明的目的為克服以上問題、提供含有輔酶Q10的水溶性組合物及其生產方法，不需采用如油等的溶劑、具有良好儲存穩定性，從而使輔酶Q10不會在長期保存中沉淀、沉積或懸浮，在加入藥物、食品和飲料、化妝品和飼料時質地、口味、耐酸性、耐鹽性、耐熱性良好；且進一步顯著地提高生物吸收率。本發明的另一個目的是同時提供即便在組合物與之混合后，沒有輔酶Q10的沉積、沉淀或懸浮，使用時具有良好的透明度的藥品、食品和飲料、化妝品和飼料。

發明內容
基于本發明人為了達到上述目的而進行透徹研究和學習的結果，發現采用兩種特定的表面活性劑來形成水包油型的乳劑將保持高濃度的輔酶Q10的極好的溶解狀態，且將提高生物吸收率，導至本發明的完成。
即，本發明提供下述[1]-[8][1]一種水溶性組合物含有(A)5-40％重量的輔酶Q10，(B)5-30％重量的平均聚合度為10的聚甘油和含18碳原子脂肪酸的單酯，(C)1-18％重量的平均聚合度為3-6的聚甘油和含18碳原子脂肪酸的單、雙、三或五酯，以及(D)水，其平均顆粒直徑為110nm或更小；[2][1]項中的水溶性組合物，其中組成(B)的脂肪酸為硬脂酸、油酸或亞油酸，其中組成(C)的脂肪酸為硬脂酸、油酸或亞油酸；[3][1]或[2]項中的水溶性組合物，進一步包括(E)10-80％重量的增溶劑。
[3]項中的水溶性組合物，其中增溶劑為樹膠、糖類或多元醇；[5][1]項中的水溶性組合物，其中[(A)]/[(B)+(C)]的重量比在1/(5-0.7)的范圍內，其中[(B)]/[(C)]重量比在1/(0.2-1)范圍內；[6]一種生產根據[1]項的水溶性組合物的方法，包括下列步驟(I)將成分(B)、(C)、(D)和可選的成分(E)加熱并溶解；(II)加入成分(A)并混合；且至少一個選自(III)用均質混合機以750m/分鐘或更大的剪切力作為攪動刀片的外圍速度將得到的混合物均質化；或(IV)用勻漿器在98MPa(1,000kg/cm2)或更大均質壓力將得到的混合物均質化。
[6]項的方法，其中重復步驟(III)或(IV)，或者相繼完成步驟(III)或(IV)。
包含[1]項的水溶性組合物的藥物、食品和飲料、化妝品以及飼料。
附圖的簡要說明

圖1為表示禁食期間攝入輔酶Q10的吸收圖。
圖2為表示餐后攝入輔酶Q10的吸收圖。
發明概述本發明涉及一種水溶性組合物，含有(A)5-40％重量的輔酶Q10，(B)5-30％重量的平均聚合度為10的聚甘油和含18碳原子脂肪酸的單酯，(C)1-18％重量的平均聚合度為3-6的聚甘油和含18碳原子脂肪酸的單、雙、三或五酯，(D)水，以及可選地，(E)10-80％重量的增溶劑，其平均顆粒直徑為110nm或更小；優選為80nm或更小，更為優選為60nm或更小。
組分(A)作為組分(A)的輔酶Q10在日本藥典中被稱為泛醌10，癸烯酯(ubidecarenone)或輔酶UQ10。本發明中所采用的輔酶Q10可以從如牛等動物的心臟提取，它也可以通過合成法或發酵法制備。商品化的輔酶Q10的特定實例包括食品材料輔酶Q10(Nissin Pharma Inc.)，Kaneka輔酶Q10(Kaneka公司)，CoEnzyme Q10(Asahi Kasei公司)，等等。盡管輔酶Q10的純度并非根據其應用而特別地確定，必須根據應用充分地控制雜質和它的含量，或產品的質量，因為本發明的水溶性組合物應用于藥品、飲料和包括多種添加劑等的食品以及化妝品。
組合物中輔酶Q10的量在5-40％重量的范圍內，優選7-30％重量，更為優選9-25％的重量。
當輔酶Q10的量小于5％重量時是不適宜的，因為為了達到目標效應，水溶性組合物的量將增加。當輔酶Q10的量大于40％重量時也是不適宜的，因為保持輔酶Q10在組合物中的溶解狀態將變得困難。
組分(B)組分(B)，即平均聚合度為10的聚甘油和含18碳原子的脂肪酸的單酯的量在5-30％重量的范圍內、從乳劑穩定性或口味的觀點來看，優選的量為5-25％重量范圍內，更為優選在7-20％重量的范圍內。
脂肪酸組成成分(B)并非特定地限定，只要脂肪酸含有18碳原子，優選采用硬脂酸、油酸或亞油酸等。
相應地，十甘油單硬脂酸酯(decaglycerinmonostearate)、十甘油單油酸酯(decaglycerimonooleate)、十甘油單亞油酸酯(decaglycerinmonolinoleate)等也優選作為組分(B)的單酯，但并不局限于此。此外，可以采用上述單酯的任意組合。
這種聚甘油單酯和C18脂肪酸可以商業購買得到，實例包括SunsoftQ-18S，Sunsoft Q-17S(Taiyo Kagaku Co.，Ltd.)，Poem J-0381(RikenVitamin Co.，Ltd.)，SY-Glyster MO-750，FRL-1(Sakamoto YakuhinKogyo Co.，Ltd.)，0-15D(Mitsubishi-Kagaku Foods公司)。
單酯的純度沒有特別限定，考慮到其制備，除了具有平均聚合度為10的聚甘油脂肪酸單酯外，它可能包括一定量的雙酯和三酯。
組分(C)組分(C)即平均聚合度為3-6的聚甘油和含18碳原子的單、雙、三或五酯的量在1-18％重量范圍內，優選2-18％重量比，從乳劑穩定性或口味的觀點來看，更為優選3-9％重量比。
脂肪酸組成成分(C)并非特定地限定，只要是脂肪酸18碳原子的，優選采用硬脂酸、油酸或亞油酸等。
平均聚合度為3-6的聚甘油酯的例子包括C18脂肪酸和三甘油、四甘油、五甘油或六甘油單、雙、三或五酯。特別優選的實例為五甘油單酯。
甘油部分為平均聚合度為3-6的聚甘油，也可以采用其混合物。
組成組分(C)的聚甘油和脂肪酸的的單、雙、三或五酯實例包括三、四、五或六甘油的單、雙、三或五-硬脂酸酯；三、四、五或六甘油的單、雙、三或五-油酸酯；三、四、五或六甘油的單、雙、三或五-亞油酸酯；也可以采用它們的混合物。
這些聚甘油和C18脂肪酸酯可以購買獲得，實例包括SY-GlystersMS-310，TS-310，MO-310，PO-310，MS-500，PS-500，MO-500和PO-500(Sakamoto Yakuhin Kogyo Co.，Ltd.)，Sunsofts Q-18F，Q-17F，A-181C，A-171C，A181E，A171E，A-183E和A-173E(Taiyo Kagaku Co.，Ltd.)以及Poem J-4581(Riken Vitamin Co.，Ltd.)等等。
單酯的純度沒有特別限定，考慮到其制備，其可能包括兩種或多種酯。
另外，例如組分(B)和(C)的表面活性劑并非必須要求通過蒸餾而高度純化，但可以作為反應混合物。
為了制備穩定的水溶性組合物，本發明的水溶性組合物中，優選混合比例[(A)]/[(B)+(C)](重量比)為1/(5-0.7)，混合比例[(B)]/[(C)](重量比)為1/(0.2-1)。
組分(D)組分(D)即水，并非特別限定，只要能與藥物、食品和飲料、化妝品或飼料混合的水，實例包括離子交換水、蒸餾水等純化水、自來水、自然界的水，堿離子水。另外，這里用的水可以包含食品添加劑，添加劑的例子包括維生素、表面活性劑、穩定劑、調味品、酸和鹽。
組分(E)作為組分(E)的增溶劑的例子包括樹膠、糖醇(glycitol)、糖類等等，具有穩定輔酶Q10的溶解狀態的功能。特定的實例包括樹膠，例如阿拉伯膠、黃原膠、黃蓍膠、瓜耳膠、gellan膠、刺槐豆膠；例如乙二醇、丙二醇、甘油、赤蘚糖醇等等的多元醇；單糖和二糖，例如multitol、再生淀粉糖漿、乳糖醇、帕拉金糖醇(Palatinit)、山梨糖醇、甘露糖醇、葡萄糖-果糖液糖(liquid sugar)和乳糖；以及多糖例如糊精。這些增溶劑可以單獨應用或其中兩種或更多種組合應用。增溶劑優選為還原糖，例如葡萄糖-果糖糖漿，因為它香甜，以及樹膠，例如阿拉伯膠，因為它味好。
增溶劑的混合量在10-80％重量的范圍內，優選10-70％重量，更優選15-60％重量。當增溶劑的量超過80％重量時，輔酶Q10或表面活性劑的混合量降低，導致發揮輔酶Q10的效果和制備穩定的水溶性組合物產生不必要的困難。
在本發明中，除了(B)聚甘油脂肪酸單酯和(C)聚甘油脂肪酸單、雙、三或五酯外，只要不妨礙本發明的效果，可以聯合采用一種或多其它表面活性劑。表面活性劑的實例包括除組分(B)和(C)外的聚甘油脂肪酸酯、有機酸單酸甘油酯、甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、失水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯失水山梨糖醇脂肪酸酯(聚山梨酸酯)、丙二醇脂肪酸酯、卵磷脂、酶水解卵磷脂、皂角苷、甾醇、膽酸、脫氧膽酸、絲蘭提取物、陽離子表面活性劑、陰離子表面活性劑、兩性表面活性劑、除上述物質外的其它非離子表面活性劑。
生產本發明的水溶性組合物的方法將在下文說明。
本發明涉及生產水溶性組合物的方法，包括如下步驟(I)，(II)，(III)和/或(IV)。
步驟(I)分別稱取指定量的組分(B)、(C)、(D)和可選組分(E)，進行加熱和溶解。例如，優選在60-80℃水浴用three-one-motor等邊攪拌邊加熱和溶解。
步驟(II)加入組分(A)，即輔酶Q10，并混勻。
步驟(III)用攪動刀片的外圍速度至少為750m/分鐘的剪切力的均質混合機進行均質化；步驟(IV)用勻漿器在至少98MPa(1,000kg/cm2)壓力均質化。
通過以上步驟，本發明組合物中水包油型乳液中的輔酶Q10的平均顆粒直徑變為110nm或更小，優選80nm或更小，更優選為60nm或更小。
當平均顆粒直徑超過110nm時，本組合物的存儲穩定性，生物吸收率和透明度還不夠，可能還達不到本發明的效果。
而且平均顆粒直徑期望達到60nm或更小來提高輔酶Q10的吸收率。
步驟(III)中均質化處理所采用的均質混合機的實例包括T.K.HOMO MIXER(TOKUSHU KIKA KOGYO Co.，Ltd.)、Clear MIX(M TechniqueCo.，Ltd.)。用外圍速度為750m/分鐘或更高的攪動刀片提供高剪切力攪動，優選1000m/分鐘或更快，更加優選1500m/分鐘或更快的速度，來表現均質化法。
步驟(IV)中均質化所采用的高壓勻漿器的例子包括Microfluidizer(MIZUHO Industrial Co.，Ltd.)、Ultimaizer(SuginoMachine Limited)等等。步驟(IV)中均質化采用98MPa(1,000kg/cm2)或更高的剪切力，優選150MPa(1531kg/cm2)或更高，更加優選200MPa(2039kg/cm2)或更高。
單獨重復步驟(III)或(IV)的均質化過程或相繼進行步驟(III)和(IV)，以提供均質化的含有輔酶Q10的水溶性組合物液體。這一均質化過程優選進行兩次或更多次，以提供更好和穩定的輔酶Q10水溶性組合物。
另外，多種勻漿器例如Nanomizer，超聲乳化器和多種均質混合機例如AGI HOMO MIXER，Ultra Mixer等也可以用來進行均質化。
生產本發明的水溶性組合物的方法可以包括自然乳化法、相位倒置乳化法、液態晶體乳化法、凝膠乳化法，D相乳化法或PIT乳化法。而且，本發明的方法可以將這些方法與例如前述的均質化等機械乳化法組合操作。
任意地，食品中可以采用的油、脂質和其它油性組分均可以被混入，因為輔酶Q10是一種油性組分。食品中可采用的油的實例包括從動物、植物和微生物獲得或合成的油，特定的例子包括豬油、牛脂、雞油、鯨油、魚油、肝油、大豆油、棉籽油、紅花油、稻米油、玉米油、菜籽油、棕櫚油、牛排植物油、椒香紫蘇油，可可黃油、花生油、椰子油、夜來香油，琉璃苣油，奶油、黃油和通過混合合成的如中鏈甘油三酯等的甘油三酯而制成的油。
脂質的實例包括特定的重力緩和劑，例如葡基神經酰胺，二十八烷醇，卵磷脂，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰絲氨酸，磷脂酰肌糖，植物甾醇類，番茄紅素，β-胡蘿卜素，葉黃素，醋酸/異丁酸蔗糖酯(SAIB)等等。
其它油性組分的例子包括脂溶性維生素、脂溶性香料、碳水化合物等等。脂溶性維生素的特定例子包括維生素A、維生素D、維生素E、維生素K、維生素P等等。脂溶性香料的特定例子包括薄荷醇、橙油、檸檬油、Citrus junos油，精油等等。
碳水化合物的例子包括角三十碳六烯、異三十烷、羊毛脂、液體石蠟等。
在本發明中，油、脂和其它油性組分的量并不特別限制，因為這些并不影響輔酶Q10的應用，但是優選為0.1-20％重量。
盡管本發明中含有輔酶Q10的水溶性組合物可以僅用作水包油型乳劑，但是例如，它可以通過噴射干燥去除水分而用作干粉制劑，等等。當干粉被加入水性液體中，例如水中，干粉可以迅速溶解，產生含有輔酶Q10的水溶液。當干粉被攝入或食用時，它將溶解入個體的水中，從而形成水溶液。
本發明的水溶性組合物可以只用于消費(consume)，它可以被用作在多種食品中加入輔酶Q10的混合材料。它的應用不被特定地限制，可以用于任意品種的食品和飲料。
含有本發明組合物的食品的例子包括飲料，例如清爽(refreshing)飲料，運動飲料，汽水飲料、健康飲料等；面條，例如udon面條，意大利式細面條等等；面包或糖果，例如蔬菜薄餅、面包、小甜餅、蜜餞、果凍等等；牛奶果肉加工食品，例如酸奶、Ham等等；調味品，例如味噌(Miso)，沙司(sauce)、液體湯料、混合調味料、調味油等等；加工食品，例如豆腐、面條等等；油加工食品，例如人造黃油(margarine)、低脂人造黃油、起酥油(shortening)等等。另外，這樣的例子還包括，考慮到形態，例如飲料粉劑、湯料粉等的粉狀食品；形式為膠囊、片劑、粉末、顆粒等的健康食品；其它作為豐富營養而加入的藥品、醫療食品，動物飼料等等。
飲料的典型例子包括含有至少一種選自下列的物質的飲料，鹽或礦物質例如精制食鹽或鐵、酸味劑、甜味劑、酒精、維生素、香料和花蜜；即，清爽飲料、運動飲料、果汁、酸奶飲料、酒精飲料、維生素礦物質飲料、健康飲料等等。另外還包括加工奶制品、豆漿、用來提高體質的飲料、通過和預期具有生理效應的天然材料混合而制成的飲料。
攝入便利的飲料優選如清爽飲料、健康飲料等等的飲料。這些飲料在任何地方都易于飲用，對衰弱年老者、吞咽困難的人、術后營養等等食用固體食物有困難、進一步期待生物利用率提高的人來說，確實有補充作用。
在上述應用中，輔酶Q10的量并不特別限制，但優選在產品中為0.001-80％重量。
含有本發明水溶性組合物的化妝品的例子包括O/W型洗液、O/W型面霜、粘性微乳液、O/W型香精等等。在該技術領域中通常采用多種添加劑，例如，抗氧化劑、紫外線防護劑、角質細胞層清除劑、表面活性劑、香水、色素、殺菌劑、pH緩和劑、螯合劑等等被適當地混合入本發明的化妝品。本發明的化妝品用于預防皮膚衰老、預防和改善粗糙、干燥皮膚。
本發明將用實施例來闡明，但并不僅限于此。
實施例采用的測量和評估方法將在下文闡明。
1.平均顆粒直徑的測量方法通過用亞微粒子大小分布測量儀[Type N4SD；Beckman Coulter，Inc.]測量分散粒子來確定樣品的平均顆粒直徑。
2.耐酸&耐熱測試將含有輔酶Q10的水溶性組合物以1％的重量比的量加入用檸檬酸調節的pH值為3或更小的純化水中，當溫度達到85℃時，將含有水溶性組合物的酸性水溶液在水浴中溫育30分鐘，將酸溶液冷卻至室溫，通過1天后的平均顆粒直徑來評估其耐酸&耐熱性能。
3.耐鹽&耐熱測試將含有輔酶Q10的水溶性組合物以1％重量的量加入含有5％重量的精制食鹽的純化水中，將鹽溶液溫育30分鐘，當溫度達到85℃時，將鹽溶液熱處理30分鐘，將鹽溶液冷卻至室溫，通過1天后的平均顆粒直徑來評估其耐鹽&耐熱性能。
實施例1將12％重量的十甘油單油酸酯、5％重量的五甘油三油酸酯和78％重量的水加熱并徹底溶解形成水相。將5％重量的輔酶Q10(食品材料輔酶Q10，Nissin Pharma Inc.)邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用高壓勻漿器在150MPa(1531kg/cm2)壓力下均質化，從而得到均一水溶性組合物。用前述的方法評估該組合物。
該組合物的組成和評估結果列于表1。在表1中，“AA”表示顆粒直徑小于100nm時均一性在±10nm范圍內；顆粒直徑為100nm或更大時均一性在±10％的范圍內；表現出良好的穩定性。“BB”表示當顆粒直徑小于100nm時均一性在±20nm范圍內，顆粒直徑為100nm或更大時的均一性在±20％的范圍內；表現出稍差的穩定性。“CC”表示穩定性很差且揭示了超出范圍的波動。
實施例2將9.5％重量的十甘油單油酸酯，6.5％重量的五甘油單油酸酯，24％重量的水和50％重量的葡萄糖果糖液糖加熱并完全溶解，形成水相。將10％重量比的輔酶Q10邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用1500m/分鐘的刀刃邊緣速度的均質混合機處理15分鐘，接著，將混合溶液用高壓勻漿器在200MPa(2039kg/cm2)壓力下均質化，因此得到均一水溶性組合物。用與實施例1同樣的方式評估該組合物。該組合物的組成和評估結果列于表1。
實施例3將9.5％重量的十甘油單油酸酯，6.5％重量的五甘油單油酸酯，18％重量的水和52％重量的葡萄糖果糖液糖加熱并完全溶解，形成水相。將預先混合并溶解為油性狀態的10％重量的輔酶Q10和4％重量的棕櫚油邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用均質混合機在1500m/分鐘的刀片邊緣速度下處理15分鐘，接著，將混合溶液用高壓勻漿器在200MPa(2039kg/cm2)壓力下均質化，從而得到均一水溶性組合物。用與實施例1同樣的方式評估該組合物。該組合物的組成和評估結果列于表1。
實施例4將9.5％重量的十甘油單油酸酯，4％重量的五甘油單油酸酯，2％重量的檸檬酸單酸甘油酯，55.5％重量的水和19％重量的阿拉伯樹膠加熱并完全溶解，形成水相。將10％重量的輔酶Q10邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用1800m/分鐘的刀片邊緣速度的均質混合機處理60分鐘，從而得到均一水溶性組合物。用與實施例1同樣的方式評估該組合物。該組合物的組成和評估結果列于表1。
實施例5將13.5％重量的十甘油單油酸酯，6.5％重量的六甘油單油酸酯，31％重量的水和30％重量的還原淀粉糖加熱并完全溶解，形成水相。將預先混合并溶解為油性狀態的15％重量的輔酶Q10和4％重量的SAIB邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用物質混合機在1500m/分鐘的刀片邊緣速度下處理15分鐘，接著，將混合溶液用高壓勻漿器在245MPa(2500kg/cm2)壓力下均質化，從而得到均一水溶性組合物。用與實施例1同樣的方式評估該組合物。該組合物的組成和評估結果列于表1。
實施例6將13.5％重量的十甘油單油酸酯，6.5％重量的四甘油單油酸酯，31％重量的水和30％重量的還原淀粉糖加熱并完全溶解，形成水相。將預先混合并溶解的15％重量的輔酶Q10和4％重量的SAIB邊攪拌邊緩緩加入該水相中，然后將混合溶液用均質混合機在1500m/分鐘的刀片邊緣速度下處理20分鐘，接著，將混合溶液用高壓勻漿器在245MPa(2500kg/cm2)壓力下均質化，從而得到均一水溶性組合物。用與實施例1同樣的方式評估該組合物。該組合物的組成和評估結果列于表1。
實施例7將12.5％重量比的十甘油單油酸酯，8.5％重量比的五甘油單油酸酯，19％重量比的水和30％重量比的葡萄糖果液糖加熱并完全溶解，形成水相。將30％重量的輔酶Q10邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用高壓均勻漿在150MPa(1531kg/cm2)壓力下均質化，接著用勻漿器在200MPa(2039kg/cm2)壓力下均質化兩次，從而得到均一水溶性組合物。用與實施例1同樣的方式評估該組合物。該組合物的組成和評估結果列于表1。
對比實施例1除了用17％重量的十甘油單油酸酯代替12％重量的十甘油單油酸酯以及5％重量的五甘油單油酸酯外，對比實施例1與實施例1同樣進行，從而得到均一水溶性組合物。用與實施例1同樣的方式評估該組合物。該組合物的組成和評估結果列于表1。
對比實施例2除了用17％重量的十甘油硬脂酸酯代替12％重量的十甘油單油酸酯以及5％重量的五甘油單油酸酯外，對比實施例2與實施例1類似進行，從而得到均一的水溶性組合物。用與實施例1同樣的方式評估該組合物。該組合物的組成和評估結果列于表1。
對比實施例3將3％重量的十甘油單油酸酯、0.5％重量的五甘油單油酸酯、34.5％重量的水和52％重量的葡萄糖果糖液糖加熱并完全溶解，形成水相。將10％重量的輔酶Q10邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用均質混合機在1500m/分鐘的刀片邊緣速度下處理15分鐘，接著，將混合溶液用高壓勻漿器在200MPa(2039kg/cm2)壓力下均質化，從而得到均一水溶性組合物。用與實施例1同樣的方式評估該組合物。該組合物的組成和評估結果列于表1。
對比實施例4將40％重量的十甘油單油酸酯，20％重量的五甘油單油酸酯和30％重量的水加熱并完全溶解，形成水相。將10％重量的輔酶Q10邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用均質混合機以1500m/分鐘的刀片邊緣速度處理15分鐘，接著，用高壓勻漿器在200MPa(2039kg/cm2)壓力下均質化，然而沒能制備成水溶性組合物，因為得到的組合物的粘度相當高。
在表中，“Ex.”、“Co.Ex.”、“B.C.”和“R.”分別為表示“實施例”、“對比實施例”、“混合成分”和“結果”的縮寫。
表1水溶性組合物的組成(％)和結果

*由于過于粘稠沒能制備成功上述結果揭示了對比實施例1的組合物，其中增溶劑只有十甘油單油酸酯，以及對比實施例2，其中顆粒直徑為110nm或更大，耐酸&耐熱性能和耐鹽&耐熱性能較差。
對比實施例3的組合物，其中(B)十甘油單油酸酯和(C)五甘油單油酸酯的量比發明中定義的范圍少，具有組合物的大顆粒直徑，且耐酸&耐熱性能和耐鹽&耐熱性能差。
在對比實施例4中(B)十甘油單油酸酯和(C)五甘油單油酸酯的量比發明中定義的范圍大，不可能制備出任何穩定的水溶性組合物。
相反，顯然驗證了根據本發明的實施例1-7成功地制備了水溶性組合物，顆粒直徑為110nm或更小，穩定性好且具有良好的耐酸&耐熱和耐鹽&耐熱性能。
實施例8將16％重量的十甘油單硬脂酸酯、4％重量的五甘油單硬脂酸酯、20％重量的水和50％重量的葡萄糖果糖液糖加熱并徹底溶解形成水相。將作為油相的10％重量的輔酶Q10邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用均質混合機在1500m/分鐘的刀等邊緣速度下處理15分鐘，接著用高壓均質器在200MPa(2039kg/cm2)壓力下均質化，從而得到均一水溶性組合物。
用與實施例1相同的方式評估該組合物，組合物的組成和評估結果列于表2中。
實施例9將16％重量的十甘油單油酸酯、4％重量的五甘油單硬脂酸酯、20％重量的水和50％重量的葡萄糖果糖液糖加熱并徹底溶解形成水相。將10％重量的輔酶Q10邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用均質混合機在1500m/分鐘處理15分鐘，接著用高壓勻漿器在200MPa(2039kg/Gm2)壓力下均質化，從而得到均一水溶性組合物。用與實施例1相同的方式評估該組合物，組合物的組成和評估結果列于表2中。
實施例10將8％重量的十甘油單硬脂酸酯、8％重量的十甘油單亞油酸酯、4％重量的五甘油單硬脂酸酯、20％重量的水和46％重量的葡萄糖果糖液糖加熱并徹底溶解形成水相。將預先混合并溶解的10％重量的輔酶Q10和4％重量的棕櫚油作為油相邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用均質混合機在1500m/分鐘的刀片邊緣速度下處理15分鐘，接著用高壓均勻漿器在200MPa(2039kg/cm2)壓力下均質化，從而得到均一水溶性組合物。用與實施例1相同的方式評估該組合物，組合物的組成和評估結果列于表2中。
實施例11將8％重量的十甘油單油酸酯、8％重量的十甘油單亞油酸酯、4％重量的五甘油單油酸酯、20％重量的水和46％重量的葡萄糖果糖液糖加熱并徹底溶解形成水相。將10％重量的輔酶Q10作為油相邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用均質混合機在1500m/分鐘的刀片邊緣速度下處理15分鐘，接著用高壓勻漿器在200MPa(2039kg/cm2)壓力下均質化，從而得到均一水溶性組合物。用與實施例1相同的方式評估該組合物，組合物的組成和評估結果列于表2中。
表2水溶性組合物的組成(％)

作為結果，證實了實施例8到11，其中組分(B)或(C)中的至少一種油酸酯被其它含有18碳原子的脂肪酸酯或其混合物替代后，也成功地制備出顆粒直徑為110nm或更小的水溶性組合物，穩定性好，并具有優良的耐酸&耐熱性能和耐鹽&耐熱性能。
實施例12一種飲料，由0.3％重量的實施例2或實施例3的水溶性組合物、15％重量的葡萄糖果糖液糖、7％重量的砂糖、4％重量的5倍濃縮的葡萄汁、0.3％重量的檸檬酸、0.2％重量的檸檬酸鈉、0.2％重量的葡萄香料以及73％重量的水組成，制備好后，裝入100ml的瓶子，接著，85℃滅菌30分鐘。
經過滅菌后，觀察不到去乳化的輔酶Q10，飲料可以毫無問題地飲用。
對比實施例5將9份重量的四甘油單硬脂酸酯、6份重量的十甘油單硬脂酸酯、5份重量的甘油和70份重量的水加熱并徹底溶解形成水相。將10份重量的輔酶Q10邊攪拌邊緩緩加入水相中，然后將混合溶液用均質混合機處理5分鐘，從而得到輔酶Q10分散溶液，具有380nm的平均顆粒直徑。當剛剛制備好后乳化狀態好，然而兩周后就發現溶液上部出現去乳化。
對比實施例6；乳化粉末通過加熱將100g輔酶Q10熔融，將其加入預先在60℃加熱熔融的200g葡萄糖脂肪酸酯中，它們被進一步乳化。將其通過高壓勻漿器(H-11；SANWA MACHINE CO.，INC.)后，用流化床型制粒機(FLO-MINI；Freund Corporation)在由1000g乳糖和700g淀粉組成的流動賦形劑混合物中霧化，形成橘色粉狀或粒狀組合物。將1g粉末組合物放入100g水中，迅速分散并溶解，產生含有輔酶Q10的淺黃色的分散體。通過測量分散體中分散的輔酶Q10的顆粒直徑，50％的顆粒直徑為2.62μm。
對比實施例；軟膠囊將60g輔酶Q10、240g大豆油和300g甘油脂肪酸酯(COCONARD MT)在60℃加熱并溶解。等確定輔酶Q10溶解后，將混合溶液冷卻到大約25℃，從而制備裝有流體的膠囊。然后，用常規技術制備含有30mg輔酶Q10的軟膠囊。
參考檢驗1
通過動物實驗來比較實施例2和對比實施例5的水溶性組合物的吸收率。
<動物吸收率實驗>
兩組比格犬(雄性)，每組3只，用來進行吸收率實驗。從給藥前一天的17:00開始禁食后，含有實施例2的組合物和對比實施例5的分散體的硬膠囊，以每只狗90mg輔酶Q10的劑量將所有的狗強制給藥一次。定期取血樣直至給藥后24小時，確定輔酶Q10的血漿濃度，結果列于表3。
<測量輔酶Q10血漿濃度的方法>
在下述條件下用高效液相色譜儀(HPLC)檢測輔酶Q10的血漿濃度。另外，由于血漿中同時具有氧化型和還原型的輔酶Q10，通過加入鐵氧化物將還原型轉化為氧化型后，再用HPLC對樣本進行檢測。
<HPLC條件>
柱子Nucleosil 5C18，4.6mmφ×25cm，流動相乙醇/乙腈(＝60/40體積比)，流速1ml/分鐘，監測器UV分光光度計，檢測波長＝275nm。
表3

Cf.Cmax(μg/ml)最大血液濃度tmax(hr)達到最大血液濃度的時間
AUC(0→24)(μg·hr/ml)血藥濃度曲線下的面積/時間。
作為結果，證實了與對比實施例5的分散體對比，給予顆粒直徑較小的實施例2的水溶性組合物的實例中，生物吸收率顯著增高。通常認為禁食期間輔酶Q10的吸收率較差，然而，證實了給予本發明中顆粒直徑較小的含有輔酶Q10的水溶性組合物可以顯著提高它的生物吸收率。
參考檢驗2；禁食期間的吸收率通過分別給三個受試者口服實施例2的水溶性組合物、對比實施例6中的乳化粉劑組合物或對比實施例7中的軟膠囊，進行禁食期間的吸收率檢測。
從給藥的前一天21:00開始禁食，到第二天早上8:00在禁食情況下給受試者口服給藥60mg輔酶Q10，給藥后2，4，6，8，12和24小時取血樣，檢測輔酶Q10的血液濃度。濃度的測量用HPLC在下述條件下進行。由于血液中同時具有氧化型和還原型的輔酶Q10，通過相加兩種類型的測量值來確定濃度。
柱子Nhdeosil 5C18 4.6mm×25cm流動相乙醇/乙腈(55∶45)流速1ml/分鐘監測器UV分光光度計275nm結果表明，給藥后，對比實施例6的乳化粉劑組合物和對比實施例7的軟膠囊都產生極少的血藥濃度的升高，幾乎不吸收。然而，證實了即便在禁食條件下給藥，實施例2的水溶性組合物可以產生高水平的輔酶Q10生物吸收率。盡管現有技術教導除非給藥時同時進食，否則輔酶Q10無法得到吸收，但證實了本發明的水溶性組合物即便在禁食條件下顯著提高了吸收率，這些結果列于圖1。
參考檢驗3；餐后吸收實驗通過分別給三個受試者口服實施例2的水溶性組合物、對比實施例6中的乳化粉劑組合物或對比實施例7中的軟膠囊，進行餐后吸收實驗。
給藥的前一天到22:00結束晚餐，第二天早上從每個動物分別抽取血樣，接著在早餐后十分鐘內給受試者口服60mg輔酶Q10，給藥后2，4，6，8，12和24小時取血樣，用與參考檢驗2同樣的方式檢測輔酶Q10的血液濃度。
結果表明，對比實施例6的乳化粉劑組合物和對比實施例7的軟膠囊的血藥濃度給藥后2小時開始升高，實施例2的組合物給藥后立即升高，與對比實施例相比，表現出極快的吸收量的增加。證實了本發明的水溶性組合物生物吸收率極好。這些結果列于圖2。
工業實用性根據本發明的含有輔酶Q10的水溶性組合物存儲穩定性好，能夠在長期保存期間保持均一性和穩定性，而輔酶Q10不沉淀。本發明的組合物具備良好的耐酸性、耐鹽性和耐熱性，另外即便與藥物、食品和飲料、化妝品、飼料及其常用添加劑等混合后也能夠保持良好的水溶性狀態。組合物在加熱狀態下穩定，能夠承受高溫消毒和除菌。而且，本發明的組合物輔酶Q10的吸收性能顯著提高，特別是足夠量的輔酶甚至可在饑餓狀態下也能夠被利用。
盡管可以直接利用本發明的水溶性組合物，將其與藥物、食品和飲料、化妝品或飼料混合可以有效地吸收足夠量的輔酶Q10。特別是該組合物能夠確保給體弱年老者、吞咽困難的人、吞咽固體物質困難的術后營養者提供輔酶Q10。
權利要求
1.一種水溶性組合物，含有(A)5-40％重量的輔酶Q10，(B)5-30％重量的平均聚合度為10的聚甘油和具有18碳原子的脂肪酸的單酯，(C)1-18％重量的平均聚合度為3-6的聚甘油和具有18碳原子的脂肪酸的單、雙、三或五酯，以及(D)水，其平均顆粒直徑為110nm或更小。
2.權利要求1的水溶性組合物，其中所述組成成分(B)的脂肪酸為硬脂酸、油酸或亞油酸，其中所述的組成成分(C)的脂肪酸為硬脂酸、油酸或亞油酸；
3.權利要求1或2中的水溶性組合物，另外含有(E)10-80％重量的增溶劑。
4.權利要求3的水溶性組合物，其中所述的增溶劑為樹膠、糖類或多元醇。
5.權利要求1的水溶性組合物，其中[(A)]/[(B)+(C)]的重量比在1/(5-0.7)的范圍內，其中[(B)]/[(C)]的重量比在1/(0.2-1)范圍內。
6.一種生產根據權利要求1的水溶性組合物的方法，包括下列步驟(I)將成分(B)、(C)、(D)和可選的成分(E)加熱并溶解；(II)加入成分(A)并混合；且至少一個選自(III)用均質混合機以750米/分鐘或更大的剪切力作為攪動刀片的外圍速度將得到的混合物均質化；或(IV)用勻漿器在98Mpa(1,000kg/cm2)或更大均質化壓力下將得到的混合物均質化。
7.權利要求6的方法，其中重復步驟(III)或(IV)，或者相繼完成步驟(III)和(IV)。
8.含有權利要求1所述的水溶性組合物的藥物。
9.含有權利要求1所述的水溶性組合物的食品和飲料。
10.含有權利要求1所述的水溶性組合物的化妝品。
11.含有權利要求1所述的水溶性組合物的飼料。
全文摘要
一種水溶性組合物，含有(A)5－40％重量的輔酶Q
文檔編號A61K47/26GK1720033SQ20038010500
公開日2006年1月11日 申請日期2003年12月2日 優先權日2002年12月4日
發明者瀨川丈史, 阿部敦子, 峰村剛, 久保田浩敬 申請人:日清藥業股份有限公司