一種復方阿比朵爾廣譜抗病毒感冒藥物的制作方法

專利名稱：一種復方阿比朵爾廣譜抗病毒感冒藥物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種新型的廣譜抗病毒藥物，明確地講是公開一種復方阿比朵爾廣譜抗病毒感冒藥物，屬于抗病毒藥物生產技術領域。
背景技術：
原藥物鹽酸阿比朵爾(6-溴-5-羥基-4-二甲氨甲基-2-苯硫甲基吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽一水合物，Arbidol hydrochloride)是引自俄羅斯的一種新型抗病毒藥物，它對呼吸道病毒具有一定的抑制作用，但對于解熱、鎮痛、抗炎及抗過敏臨床試驗沒有反應。

發明內容
本發明提供一種復方阿比朵爾廣譜抗病毒藥物，對甲型流感病毒H1N1亞型、呼吸道合胞病毒均有較強的抑制作用，對腺病毒3型也具有一定的抑制作用，并具有解熱、鎮痛、抗炎及抗過敏作用。
本發明主要是由下列重量份數原料藥制成阿比朵爾50～500份、對乙酰氨基酚150～400份。
本發明的優選配比為阿比朵爾100份、對乙酰氨基酚250～350份。
本發明的藥物中還有以下原料撲爾敏1～2份。
本發明的藥物中還可添加以下原料
氯雷他定1～5份。
本發明原料藥可與常規的藥用輔劑如賦形劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑、抗氧化劑、包衣劑、著色劑、芳香劑、表面活性劑等混合，制成顆粒劑、膠囊、片劑等口服藥常規劑型。其它項目應符合中華人民共和國藥典2000版相關劑型項目有關要求。
本發明的生產工藝如下按上述比例稱取阿比朵爾、對乙酰氨基酚原料及藥用輔料糖粉、淀粉、制糊淀粉、硬脂酸鎂等，將原、輔料分別在粉碎機中粉碎，篩過，按照藥劑學上的常規生產工藝制成相應的口服藥劑型。
本發明為口服給藥，給藥量(成人)每天500～1720mg，兒童減半。
具體實施例方式下面的實驗例、實施例可更詳細的說明本發明，但不以任何形式限制本發明。
實施例1稱取阿比朵爾10kg、對乙酰氨基酚25kg、氯雷他定0.2kg原料及輔料糖粉1.9kg、淀粉3.6kg、制糊淀粉1.4kg、硬脂酸鎂0.5kg為制備十萬片藥物。
將原、輔料分別在粉碎機中粉碎30min，后分別經100目篩過篩，備用。分別稱取原輔料，混合均勻，再通過80目篩，使之充分混合。
操作工藝將阿比朵爾，對乙酰氨基酚，氯雷他定、糖粉、干淀粉投入濕法混合制粒機的鍋料內，干混均勻后加入淀粉漿制成濕粒。
淀粉漿配置方法將批料中的煮漿淀粉置于煮漿罐中加入純水配成15％濃度，攪拌使其成均勻的懸浮液后進行加熱至75℃左右糊化為好，放氣至30℃～60℃待用。
干混攪拌速度800轉/分，切碎速度為低檔，干混時間5分鐘。
制粒攪拌速度800轉/分，切碎速度為高檔，攪拌、切碎1分鐘為宜。
干燥濕顆粒的干燥溫度應在55℃，干燥至含水量為2～5％為宜。
整粒干燥后于搖擺顆粒機中整粒，整粒目數為14目。
批混將整粒后的干顆粒中加入批數量的硬脂酸鎂于批混機中批混，批混時間為0.5小時，轉速為70轉/分。
壓片檢驗合格的顆粒根據含量檢測結果，計算片重，上機壓片，十萬片。
試驗實施例1對乙酰氨基酚250mg/kg及實施例2355mg/kg、118mg/kg，71mg/kg對小鼠熱板法試驗給藥60分鐘大劑量具有一定的鎮痛作用；對扭體反應試驗小鼠對乙酰氨基酚250mg/kg及實施例2355mg/kg有鎮痛作用。對107/0.5ml個大腸桿菌所致的大鼠發熱，對乙酰氨基酚160mg/kg及實施例2大劑量227mg/kg具有一定的解熱作用，114mg/kg、57mg/kg解熱作用不明顯。
目的根據實施例2的適應癥建立靈敏動物模型，觀察其主要藥效學作用，為臨床應用提供實驗室理論依據。
試驗材料藥物對乙酰氨基酚，實施例2，均由吳太醫藥集團提供。
動物ICR潔凈級小白鼠，體重18～20g，合格證編號scxk(吉)2003-0001；wistar大鼠，體重為190～200g，合格證編號scxk(吉)2003-0001；由吉林大學基礎醫學院動物部提供。
儀器YLS-6A智能熱板儀，由山東醫學科學院設備站生產，出廠編號6007274。
結果與方法。
一、實施例2對小鼠熱板鎮痛作用的影響用YLS-6A智能熱板儀將溫度設定在55℃，作為熱刺激，記錄小鼠自投入熱板儀致出現舔后足的潛伏期作為該鼠痛閾值，在給藥前先測定每只小鼠的痛閾值作為基礎痛閾值，剔除喜跳躍者，以5～30s者為合格，將篩選合格的雌性小鼠50只分為5組，既陽性對照組對乙酰氨基酚(250mg/kg)；實施例2高、中、低三個劑量組(355mg/kg、118mg/kg、71mg/kg)；空白對照給予同體積生理鹽水，灌胃給藥后30、、60、90分鐘分別測定各組小鼠的痛閾值，結果見表1。
表1實施例2對小鼠熱板法鎮痛作用的影響 (X±S n＝10)組別 劑量(mg/kg)藥前 藥后30分空白 16.56±5.6313.69±4.34對乙酰氨基酚25013.16±5.4817.31±7.64組方大35514.59±6.2916.64±9.51組方中11815.36±5.1615.36±9.43組方小71 12.93±5.1215.35±6.01與空白對照組比較P＞0.05
組別劑量(mg/kg)藥后60分 藥后90分空白 13.54±4.79 15.85±5.06對乙酰氨基酚 250 13.08±5.36 17.26±7.81組方大 355 15.36±7.61*13.49±4.64組方中 118 16.33±4.77 15.36±8.16組方小 7115.82±8.67 19.60±4.64與空白對照組比較*P＜0.05；由表1可見，給藥60分后實施例2高劑量組對小鼠由熱板引起的疼痛具有抑制作用，與空白對照組比較有統計學意義(P＜0.05)，但中、低劑量組與空白對照組比較無統計學意義(P＞0.05)；同時陽性對照組亦未顯示明顯鎮痛作用。
二、實施例2對小鼠扭體試驗的鎮痛作用取小鼠50只，雌雄各半，分組及給藥同上，灌胃給藥30分鐘后，分別將各組小鼠腹腔注射0.6％冰醋酸，每只0.2ml觀察注射冰醋酸15分鐘內出現的扭體次數及藥物對扭體反應的抑制率，以判定實施例2的鎮痛效果，結果見表2。
抑制率(％)＝(空白組扭體均數-試藥組扭體均數)/空白組扭體均數×100％表2實施例2對小鼠扭體試驗的鎮痛作用。(X±S n＝10)組別 劑量 扭體次數 抑制率(mg/kg) (藥后45分) (％)空白 42.1±13.54對乙酰氨基酚 250 27.1±16.60*35.6組方大 355 25.3±18.32*39.9組方中 118 34.6±13.08 17.8組方小 7137±18.96 12.0與空白對照組比較*P＜0.05由表2可見，陽性藥對乙酰氨基酚與實施例2高劑量可減少小鼠由冰醋酸引起的扭體次數，但抑制率均小于50％，乙酰氨基酚與實施例2高劑量組與空白對照組比較有統計學意義(P＜0.05)。
三、實施例2對大鼠發熱反應的影響取體重為190～200g大鼠50只，分為5組，每組10只，雌雄各半，即陽性對照對乙酰氨基酚組(160mg/kg)，實施例2三個劑量組(227mg/kg、114mg/kg、57mg/kg)，空白對照組，給藥前將大鼠肛表涂上凡士林，使其潤滑后將肛溫計插入大鼠肛門2cm，放置3分鐘后，取出讀數，記錄每只大鼠的正常體溫(攝氏溫度)，各組大鼠由尾靜脈注射107/0.5ml個細菌濃度的大腸桿菌菌液150min后灌胃給藥，空白對照組給予同體積生理鹽水，用同樣方法測量給藥后1h、2h、3h、4h、5h的大鼠體溫，比較給藥組與對照組大鼠體溫的差異情況，結果見表3.
表3實施例2對大鼠發熱反應的影響(X±S n＝10)組別 劑量(mg/kg) 藥前1h 2h 3h空白 38.3±0.39 39.09±0.4439.56±0.4139.61±0.31對乙酰氨基酚 160 38.35±0.39 38.93±0.1839.46±0.2838.89±0.26**組方大 227 38.43±0.38 38.89±0.5739.1±0.54 38.89±0.46**組方中 114 38.4±0.41 38.93±0.4439.41±0.3739.25±0.42組方小 57 38.38±0.23 38.95±0.2139.54±0.2839.35±0.59與空白對照組比較**P＜0.01組別 劑量(mg/kg) 4h 5h空白 39.69±0.14 39.88±0.33對乙酰氨基酚 160 38.9±0.36***39.71±0.47組方大 227 39.13±0.34***39.24±0.79組方中 114 39.4±0.57 39.55±0.57組方小 57 39.49±0.74 39.74±0.42與空白對照組比較***P＜0.01
結果表明，對乙酰氨基酚及實施例2給藥組于給藥30分后均具有解熱作用。其實施例2與對乙酰氨基酚的作用相同，實施例2中、低劑量組作用不明顯，與空白組比較無統計學意義。
討論對實施例2的藥效學研究結果表明，該實施例2西藥制劑在高劑量具有一定的解熱、鎮痛作用與實施例1的作用相似，但扭體法鎮痛試驗的鎮痛強度弱于實施例1。可能與馬來酸氯苯那敏的中樞抑制作用缺乏有關。熱板法鎮痛模型在給藥高劑量組尚可見到一定的鎮痛效果，扭體法乙酰氨基酚與實施例2高劑量亦可見到一定的鎮痛效果，由此可以證明該藥具有一定的鎮痛作用。在解熱作用中，本試驗可見在高劑量組3-4小時期間出現明顯體溫下降(P＜0.01)，可以說明實施例2具有解熱作用。但如何確定實施例2的最佳配伍，尚需進一步拆方試驗來證明。
結論實施例2具有一定的解熱、鎮痛作用試驗實施例2鹽酸阿比朵爾治療流行性感冒作用的主要藥效學研究(體外)提要通過對呼吸道病毒致細胞病變抑制作用的研究表明，鹽酸阿比朵爾及其復方制劑對甲型流感病毒H1N1亞型和呼吸道合胞病毒(RSV)均有較強的抑制作用，對腺病毒3型(Ad3)也有一定的抑制作用。提示鹽酸阿比朵爾及鹽酸阿比朵爾復方制劑對由呼吸道病毒所引起的流行性感冒具有一定的預防和治療作用。
試驗目的原藥物鹽酸阿比朵爾是引自俄羅斯的一種新型抗病毒藥物。有文獻報道，它對呼吸道病毒具有一定的抑制作用，為了進一步確定其抗呼吸道病毒的作用，我們對鹽酸阿比朵爾單方進行了初步抗呼吸道病毒的實驗研究，同時配以對乙酰氨基酚和氯雷他定組成了復方鹽酸阿比朵爾，并進行了相關的藥效學及臨床應用藥物對比試驗，以確定其用于治療流行性感冒的藥學功效。
受試藥物名稱，鹽酸阿比朵爾(6-溴-5-羥基-4-二甲氨甲基-2-苯硫甲基吲哚-3-羧酸乙酯鹽酸鹽一水合物，Arbidol hydrochloride)。實驗用鹽酸阿比朵爾復方制劑是由鹽酸阿比朵爾、對乙酰氨基酚、氯雷他定三種西藥組成，由吉林大學基礎醫學院藥理研究室提供。
配制方法鹽酸阿比朵爾、對乙酰氨基酚和氯雷他定分別用環氧乙烷除菌，鹽酸阿比朵爾復方制劑的配制比例為鹽酸阿比朵爾∶對乙酰氨基酚∶氯雷他定＝1∶1.17∶0.02，實驗時用IMDM細胞培養液配制成所需濃度待用。
劑量選擇根據各藥物對培養細胞的毒性試驗結果決定各組實驗劑量(見表1)。
儀器多用氣體培養箱，NCPC03100-1，美國；深低溫冰箱，SANYO，日本；雙人超凈工作臺，SW-CT-ZF型，蘇州；離心沉淀機，LXT-II型，上海；酶標儀，G3022型，南京；真空冷凍干燥機，MRK，日本。
試劑IMDM細胞培養液，HyClone公司，美國；新生小牛血清，大連生化試劑廠；胰蛋白酶，Difco進口分裝，上海；噻唑藍(MTT，[3-4，5-dimethylthiazo(-2-yl)-2，5-diphenylte-trazoliumdromide]，Sigma)產品。
陽性對照藥物鹽酸胍(Guanidine HCL)，SIGMA，美國，臨用時以IMDM細胞培養液配制所需濃度(僅體外試驗用)。
臨床應用藥物對照組病毒唑(利巴韋林注射液)，蘇州第六制藥廠，批號021027，應用劑量參照細胞毒性實驗結果(見表1)，應用時用IMDM細胞培養液配制成實驗所需各濃度。
細胞狗腎傳代細胞(MDCK)，美國引進，由中國科學院細胞庫提供，人宮頸癌細胞(Hela)和人羊膜細胞(FL)均由本室保藏。
病毒株甲型流感病毒H1N1亞型，由長春生物制品研究所提供、呼吸道合胞病毒(RSV)標準Long毒株和腺病毒3型(Ad3)標準毒株均由本室保存。
體外抗病毒實驗主要步驟和結果1.鹽酸阿比朵爾、對乙酰氨基酚、氯雷他定、利巴韋林注射液和鹽酸胍對體外培養細胞毒性的測定將待測藥物分別配制成2000μg/ml、1500μg/ml、1000μg/ml、800μg/ml、600μg/ml、400μg/ml、200μg/ml、100μg/ml、50μg/ml在人宮頸癌細胞(Hela)上分別測定最大無毒濃度(TD0)和半數中毒濃度(TD50)。結果見表1，鹽酸阿比朵爾對細胞的無毒濃度(TD0)為1500μg/ml，本實驗未測出半數中毒濃度(TD50)；對乙酰氨基酚的無毒濃度(TD0)為200μg/ml，半數中毒濃度(TD50)為1500μg/ml；氯雷他定的無毒濃度(TD0)為200μg/ml，半數中毒濃度(TD50)為600μg/ml；利巴韋林注射液的無毒濃度(TD0)為800μg/ml，半數中毒濃度(TD50)為1500μg/ml；鹽酸胍的無毒濃度(TD0)為250μg/ml，半數中毒濃度(TD50)為500μg/ml。
2.實驗分組實驗設正常細胞對照組、完全病毒感染組、陽性藥物鹽酸胍對照組、臨床應用藥物利巴韋林注射液對照組和實驗組。鹽酸阿比朵爾單方實驗組自TD0開始設1000μg/ml，500μg/ml，250μg/ml共3個濃度實驗組。復方鹽酸阿比朵爾實驗組自TD0開始設250μg/ml，125μg/ml，62.5μg/ml共3個濃度實驗組。根據陽性藥物毒性實驗結果，陽性藥物鹽酸胍實驗濃度為250μg/ml。臨床應用藥物利巴韋林注射液實驗濃度為800μg/ml。
3.對呼吸道病毒感染細胞病變抑制實驗將各濃度組再分為先加藥后吸附病毒組；吸附病毒同時加藥組；先吸附病毒后加藥組。以20萬/ml細胞，0.1ml/孔接種96孔板，2天后用于實驗，每組均設8個平行孔，感染病毒的毒力均為100TCID50/0.1ml。72小時后開始在顯微鏡下觀察細胞CPE，待病毒對照組CPE為++++時記錄結果，并用MTT法測定各孔的OD570值，以確定各實驗組藥物對病毒感染細胞的病變抑制程度。結果見表2、3、4、5、6、7。由100TCID50病毒感染的細胞病變抑制實驗結果表明對甲型流感病毒H1N1亞型和呼吸道合胞病毒(RSV)標準Long毒株的致細胞病變具有較強的抑制作用，對腺病毒3型(Ad3)的致細胞病變也具有一定的抑制作用。
討論實驗結果表明，鹽酸阿比朵爾及復方制劑對甲型流感病毒H1N1亞型、呼吸道合胞病毒均有較強的抑制作用，對腺病毒3型也具有一定的抑制作用。顯然，鹽酸阿比朵爾及復方鹽酸阿比朵爾對引起流行性感冒和呼吸系統疾病的主要感染病毒具有較強的抑制作用，同時又對由呼吸道病毒感染的體外培養宿主細胞具有一定的保護作用。由于鹽酸阿比朵爾已被證明是一種新型的廣譜抗病毒藥物，我們的實驗又進一步證明了該藥物及其復方制劑對引起呼吸道感染及流行性感冒的主要致病病毒均具有較強的抑制繁殖作用，其作用明顯高于臨床應用對比藥物利巴韋林注射液，所以它可以作為一種用于治療流行性感冒的新藥進行開發。
結論綜上所述，鹽酸阿比朵爾及復方制劑能夠達到治療感冒、流行性感冒的主要藥效學功效。鹽酸阿比朵爾復方制劑與陽性對照藥物鹽酸胍和臨床應用藥物利巴韋林注射液相比，在抗病毒作用上具有明顯的提高。
實施例2稱取原料阿比朵爾10kg、對乙酰氨基酚25kg、撲爾敏0.2kg和輔料糖粉1.9kg、淀粉3.6kg、制糊淀粉1.4kg、硬脂酸鎂0.5kg為制成十萬片藥物量。
操作工藝1將檢驗合格的原輔料分別在粉碎機中粉碎30min，后分別經100目篩過篩，備用。
2根據處方量分別稱取原輔料，混合均勻，再通過80目篩，使之充分混合。
3濕法制粒
3.1將阿比朵爾，對乙酰氨基酚，撲爾敏、糖粉、干淀粉投入濕法混合制粒機的鍋料內，干混均勻后加入淀粉漿制成濕粒。
3.2工藝參數淀粉漿配置方法將批料中的煮漿淀粉置于煮漿罐中加入純水配成15％濃度，攪拌使其成均勻的懸浮液后進行加熱至75℃左右糊化為好，放氣至30℃～60℃待用。
干混攪拌速度800轉/分，切碎速度為低檔，干混時間5分鐘。
制粒攪拌速度800轉/分，切碎速度為高檔，攪拌、切碎1分鐘為宜。
4干燥濕顆粒的干燥溫度應在55℃，干燥至含水量為2～5％為宜5整粒干燥后于搖擺顆粒機中整粒，整粒目數為14目。
6批混將整粒后的干顆粒中加入批數量的硬脂酸鎂于批混機中批混，批混時間為0.5小時，轉速為70轉/分。
7壓片檢驗合格的顆粒根據含量檢測結果，計算片重，上機壓片。
試驗實施例2對乙酰氨基酚250mg/kg及實施例1352mg/kg、117.2mg/kg，70.4mg/kg對扭體反應試驗小鼠有明顯鎮痛作用；對小鼠熱板法試驗給藥60分鐘大劑量具有一定的鎮痛作用。對107/0.5ml個大腸桿菌所致的大鼠發熱，對乙酰氨基酚160mg/kg及實施例1大劑量225mg/kg具有一定的解熱作用，112.5mg/kg、56.2mg/kg解熱作用不明顯。
目的根據實施例1的適應癥建立靈敏動物模型，觀察其主要藥效學作用，為臨床應用提供實驗室理論依據。
試驗材料藥物對乙酰氨基酚，實施例1，均由吳太醫藥集團提供。
動物ICR潔凈級小白鼠，體重18～20g，合格證編號scxk(吉)2003-0001；wistar大鼠，體重為190～200g，合格證編號scxk(吉)2003-0001；由吉林大學基礎醫學院動物部提供。
儀器YLS-6A智能熱板儀，由山東醫學科學院設備站生產，出廠編號6007274。
結果與方法。
一、實施例1對小鼠熱板鎮痛作用的影響用YLS-6A智能熱板儀將溫度設定在55℃，作為熱刺激，記錄小鼠自投入熱板儀致出現舔后足的潛伏期作為該鼠痛閾值，在給藥前先測定每只小鼠的痛閾值作為基礎痛閾值，剔除喜跳躍者，以5～30s者為合格，將篩選合格的雌性小鼠50只分為5組，既陽性對照組對乙酰氨基酚(250mg/kg)；實施例1高、中、低三個劑量組(352mg/kg、117.2mg/kg、70.4mg/kg)；空白對照給予同體積生理鹽水，灌胃給藥后30、60、90分鐘分別測定各組小鼠的痛閾值，結果見表1。
表1實施例1對小鼠熱板法鎮痛作用的影響 (X±S n＝10)組別 劑量(mg/kg) 藥前 藥后30分空白16.16±5.7118.23±8.55對乙酰氨基酚 250 17.03±7.1018.07±9.66組方大 352 17.08±6.7716.61±8.16組方中 117.216.21±7.5420.11±10.70組方小 70.4 16.67±4.2518.49±6.98
與空白對照組比較P＞0.05組別劑量(mg/kg) 藥后60分藥后90分空白25.93±13.7819.43±5.73對乙酰氨基酚 25021.47±13.1721.40±12.76組方大 35215.86±5.34*16.05±6.74組方中 117.2 18.34±7.79 24.36±15.95組方小 70.4 27.95±4.85 20.52±7.70與空白對照組比較P＞0.05，*P＜0.05；由表1可見，給藥60分后實施例1高劑量組對小鼠由熱板引起的疼痛具有抑制作用，與空白對照組比較有統計學意義(P＜0.05)，但中、低劑量組與空白對照組比較無統計學意義(P＞0.05)；同時陽性對照組亦未顯示明顯鎮痛作用。
二、實施例1對小鼠扭體試驗的鎮痛作用取小鼠50只，雌雄各半，分組及給藥同上，灌胃給藥30分鐘后，分別將各組小鼠腹腔注射0.6％冰醋酸，每只0.2ml觀察注射冰醋酸15分鐘內出現的扭體次數及藥物對扭體反應的抑制率，以判定實施例1的鎮痛效果，結果見表2。
抑制率(％)＝(空白組扭體均數-試藥組扭體均數)/空白組扭體均數×100％表2實施例1對小鼠扭體試驗的鎮痛作用。(X±S n＝10)組別劑量(mg/kg) 扭體次數(藥后45分) 抑制率(％)空白 30.9±9.81對乙酰氨基酚250 10.7±11.22***65.37組方大352 4±8.75***87.06組方中117.24.2±7.81***86.41組方小70.4 8.9±10***71.20與空白對照組比較***P＜0.001由表2可見，陽性藥對乙酰氨基酚與實施例1高、中、低劑量可減少小鼠由冰醋酸引起的扭體次數，抑制率均大于50％，與空白對照組比較有顯著的統計學意義(P＜0.001)，量效關系明顯，但給藥各組標準差值過高，甚至超過均值。根據試驗記錄，對乙酰氨基酚及給藥組中各組有不同例數的零值，由此導致標準差值過高。
三、實施例1對大鼠發熱反應的影響取體重為190～200g大鼠50只，分為5組，每組10只，雌雄各半，即陽性對照對乙酰氨基酚組(160mg/kg)，實施例1三個劑量組(225mg/kg、112.5mg/kg、56.2mg/kg)，空白對照組，給藥前將大鼠肛表涂上凡士林，使其潤滑后將肛溫計插入大鼠肛門2cm，放置3分鐘后，取出讀數，記錄每只大鼠的正常體溫(攝氏溫度)，各組大鼠由尾靜脈注射107/0.5ml個細菌濃度的大腸桿菌菌液150min后灌胃給藥，空白對照組給予同體積生理鹽水，用同樣方法測量給藥后1h、2h、3h、4h、5h的大鼠體溫，比較給藥組與對照組大鼠體溫的差異情況，結果見表3。
表3實施例1對大鼠發熱反應的影響(X±S n＝10)組別(mg/kg) 劑量 藥前 1h 2h 3h空白38.49±0.53 39.08±0.3939.52±0.3939.53±0.34對乙酰氨基酚 160 38.53±0.52 39.01±0.2539.44±0.2838.98±0.30**組方大 225 38.6±0.50 38.95±0.5339.13±0.4838.98±0.46**組方中 112.5 38.56±0.50 39.01±0.4439.43±0.4339.29±0.39組方小 56.238.54±0.41 38.98±0.2039.51±0.3239.43±0.56與空白對照組比較P＞0.05；**P＜0.01組別(mg/kg) 劑量4h 5h空白 39.6±0.22 39.82±0.32對乙酰氨基酚 160 38.92±0.35***39.78±0.44組方大 225 39.15±0.31**39.33±0.73組方中 112.539.44±0.53 39.57±0.54組方小 56.2 39.6±0.69 39.8±0.39與空白對照組比較P＞0.05；***P＜0.01
結果表明，對乙酰氨基酚及實施例1給藥組于給藥30分后均具有解熱作用。其實施例1與對乙酰氨基酚的作用相同，實施例1中、低劑量組作用不明顯，與空白組比較無統計學意義。
討論對實施例1的藥效學研究結果表明，該實施例1西藥制劑在高劑量具有一定的解熱、鎮痛作用。熱板法鎮痛模型是一種物理方法造成的急性銳痛，在對乙酰氨基酚常規動物用量下未見鎮痛作用，而給藥高劑量組尚可見到一定的鎮痛效果，由此可以證明該藥具有一定的鎮痛作用.扭體法實驗結果支持前面的結論。在解熱作用中，利用生存狀態的高濃度大腸桿菌導致發熱反應，是一可靠的動物模型，其特點為發熱反應出現緩慢，在3.5小時達高峰，但由于內毒素等致熱源的不斷釋放，發熱持續時間較長，一般藥物尚難以控制。本試驗可見在3-4小時期間出現明顯體溫下降(P＜0.01)，可以說明實施例1具有解熱作用。但如何確定實施例1的最佳配伍，尚需進一步拆方試驗來證明。
結論實施例1具有一定的解熱、鎮痛作用試驗實施例2鹽酸阿比朵爾治療流行性感冒的主要藥效學研究(體內)摘要通過對流感病毒體內感染模型抗病毒作用的研究表明鹽酸阿比朵爾與鹽酸阿比朵爾復方制劑對小鼠肺內流感A1型病毒顆粒的增殖具有較強的抑制作用。提示鹽酸阿比朵爾復方對由病毒而引起的流行性感冒具有一定的預防和治療作用。
試驗目的流行性感冒的發病與由流感病毒直接損傷組織細胞而導致的呼吸系統炎癥有關。本項實驗的目的在于通過動物體內模型，觀察鹽酸阿比朵爾復方對小鼠肺組織流感病毒感染的抑制作用。
受試藥物系西藥鹽酸阿比朵爾、對乙酰氨基酚和氯雷他定組成的白色粉末。鹽酸阿比朵爾復方的配制比例為鹽酸阿比朵爾∶對乙酰氨基酚∶氯雷他定＝100g∶250g∶2g本復方配制比例由吉林大學基礎醫學院藥理教研室提供。
配制方法和劑量選擇將鹽酸阿比朵爾、對乙酰氨基酚和氯雷他定按上述比例配方混合，研成細粉，干燥即成。體內試驗，將鹽酸阿比朵爾復方制劑用水調和成懸液，鹽酸阿比朵爾復方高劑量組49.28mg/ml，其中鹽酸阿比朵爾凈含量為14mg/ml；鹽酸阿比朵爾復方中劑量組16.408mg/ml，其中鹽酸阿比朵爾凈含量為4.6614mg/ml；鹽酸阿比朵爾復方低劑量組9.856mg/ml，其中鹽酸阿比朵爾凈含量為2.8mg/ml；鹽酸阿比朵爾對照組49.28mg/ml，各劑量組含量符合試驗要求。
陽性對照藥物鹽酸嗎啉胍片，東芝堂藥業(安徽)有限公司出品，批號030318，規格0.1g。配制成1.9mg/ml的溶液備用。
儀器多用氣體培養箱，NCPC03100-1，美國；深低溫冰箱，SANYO，日本；SARTORIUS GMBH GOTTINGEN精密天平(精度0.00001)，德國；雙人超凈工作臺，SW-CT-ZF型，中國蘇州；離心沉淀機，LXT-II型，中國上海；真空冷凍干燥機，MRK，日本；雙筒顯微鏡，OLYMPUSBHF。
試劑IMDM細胞培養液，HyClone公司，美國；新生小牛血清，大連生化試劑廠。
動物及飼養條件遠雜交系昆明種小白鼠，封閉群，起源于瑞士，1989年由中國科學院引進，雌雄兼用，體重13-15g，動物合格證號960101017，動物數1000只，封閉式隔離無菌觀察室飼養。由吉林省中醫中藥研究院動物飼養室提供。
病毒株流感病毒A1型鼠肺適應株(H1N1)，由長春生物制品研究所提供。
細胞狗腎細胞(MDCK)，由上海中國科學院細胞庫提供。
試驗主要步驟和結果1.實驗分組小鼠雌雄兼用，隨機分組，每籠同性別10只飼養。實驗分成5組，正常對照組；病毒對照組；西藥陽性藥物(鹽酸嗎啉胍片)對照組，13.3mg/kg；鹽酸阿比朵爾組和鹽酸阿比朵爾復方藥物實驗組。實驗組中再設3個劑量試驗組，鹽酸阿比朵爾復方高劑量組(352mg/kg)；鹽酸阿比朵爾復方中劑量組(117.2mg/kg)；鹽酸阿比朵爾復方低劑量組(70.4mg/kg)。
2.病毒毒力測定于試驗前7天取20只小鼠，滴鼻感染流感A1型鼠肺適應株病毒，稀釋度分別為10-1、10-2、10-3和10-4的病毒液0.03ml，次日開始統計死亡％，計算LD50。LD50的測定結果為100TCID50/0.03ml。
3.對小鼠流感病毒引起肺炎的抑制作用于感染前1天開始灌胃給藥，每只鼠0.1ml，連續3天，正常對照組和病毒對照組連續灌服相同體積的生理鹽水。灌藥后第3天，各實驗組(正常對照組除外)經乙醚淺度麻醉下滴鼻流感病毒A1型鼠肺適應株15LD50/0.05ml。感染后實驗組每天繼續按上述劑量灌胃服藥，96小時后隨機選取10只殺剖小鼠取肺稱重，計算出各實驗組肺重量指數的平均值，分別與病毒對照組比較，計算出肺病變抑制率。結果見表1。鹽酸阿比朵爾復方3個劑量組，均有顯著的治療作用。鹽酸阿比朵爾組也同樣具有相似的作用，與陽性藥物病毒靈對照組比較，其作用有明顯提高，與病毒對照組比較，差異呈極顯著水平。
4.對體內病毒顆粒增殖的影響以流感A1型鼠肺適應株病毒原液50μl滴鼻感染小鼠，藥物實驗組于病毒感染前一天開始灌胃給藥0.1ml，感染后實驗組每天繼續按同樣劑量灌胃服藥，8天后剖殺小鼠，取肺勻漿制成懸液，離心并冷凍真空濃縮上清液，微量濾菌器濾菌后，接種MDCK細胞，每天觀察CPE，待病毒對照組細胞90％以上出現病變后，收集各組細胞，反復凍融三次，在MDCK細胞上測定各實驗組肺懸液中的病毒滴度(TCID50)，與病毒對照組比較，以TCID50降低1個對數值以上判為有效[1]，確定藥物在動物體內對病毒顆粒增殖的影響，結果見表2，各實驗組與病毒對照組比較，TCID50值均降低1個以上對數值，差異呈極顯著水平。
試驗結論試驗結果表明，鹽酸阿比朵爾復方制劑對流感A1型病毒具有較強的抑制作用，其作用明顯強于陽性對照藥物病毒靈。提示鹽酸阿比朵爾復方對流感病毒而引發的流行性感冒具有一定的治療作用。上述實驗結果表明，鹽酸阿比朵爾復方對流行性感冒具有一定的治療作用，同時對由病毒感染所致的組織細胞損傷具有一定的恢復和保護作用。鹽酸阿比朵爾復方的抗病毒作用可以為該藥物治療流行性感冒提供藥效學依據。
結論綜上所述，鹽酸阿比朵爾及復方制劑能夠達到治療感冒、流行性感冒的主要藥效學功效。鹽酸陽比朵爾復方制劑與陽性對照藥物鹽酸胍和臨床應用藥物利巴韋林注射液相比，在抗病毒作用上具有明顯的提高。
實施例3稱取阿比朵爾10kg、對乙酰氨基酚25kg原料及輔料糖粉1.9kg、淀粉3.6kg、制糊淀粉1.4kg、硬脂酸鎂0.5kg為制備十萬片藥物。其它項目應符合中華人民共和國藥典2000版片劑項目有關要求。
實施例4稱取阿比朵爾20kg、對乙酰氨基酚55kg原料及輔料糖粉1.9kg、淀粉4.0kg、制糊淀粉1.9kg、50％乙醇適量，制粒，整粒，烘干，裝1#膠囊，每粒0.2g。其它項目應符合中華人民共和國藥典2000版膠囊項目有關要求。
權利要求
1.一種復方阿比朵爾廣譜抗病毒感冒藥物，其特征在于主要是由下列重量份數原料藥制成阿比朵爾50～500份、對乙酰氨基酚150～400份。
2.根據權利要求1所述的藥物，其中各原料藥的用量為阿比朵爾100份、對乙酰氨基酚250～350份。
3.根據權利要求1或2所述的藥物，其中原料藥還有撲爾敏1～2份。
4.根據權利要求1或2所述的藥物，其中原料藥還有1～5份。
5.根據權利要求1-4所述的藥物為藥劑學任何口服劑型。
全文摘要
本發明提供一種復方阿比朵爾廣譜抗病毒感冒藥物，主要是由阿比朵爾、對乙酰氨基酚及撲爾敏或氯雷他定組成，通過常規的炮制工藝制成口服藥物劑型。本發明對甲型流感病毒H1N1亞型、呼吸道合胞病毒均有較強的抑制作用，對腺病毒3型也具有一定的抑制作用，并具有解熱、鎮痛、抗炎及抗過敏作用，是一種廣譜抗病毒感冒藥物。
文檔編號A61P31/00GK1546019SQ20031011591
公開日2004年11月17日 申請日期2003年12月12日 優先權日2003年12月12日
發明者李欣, 李 欣 申請人:吉林省吳太感康藥業有限公司