改性釋放的藥物制劑的制作方法

專利名稱：改性釋放的藥物制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及新穎的改性釋放藥物制劑，所述制劑提供特定藥物的改性遞送，還涉及這類制劑的制造和這類制劑在血栓形成治療或預防中的用途。
經常有必要在一天內頻繁給以藥學活性化合物，目的是維持活性成分在血漿、機體組織和/或胃腸道中的所需治療水平。特別是在打算口服遞送藥物和長時間提供始終如一的響應時更是如此。
近三十年來，改性釋放劑型已經日益成為向患者遞送某些藥物的優選方法，特別是經由口服途徑。這類劑型例如可以提供長時間的藥物釋放，從而減少所需每日給藥的次數，在此期間釋放的速率可以在胃腸道的特定部位內基本上是始終如一的和/或恒定的，或者是脈動的。
本領域已知有大量改性釋放劑型，它們尤其已經被總結在下列文獻中De Haan and Lerk in Pharmaceutisch Weekblad ScientificEdition，6，57(1984)；Bankerin″Medical Applications of ControlledRelease″，Vol II，eds.Langer and Wise(1984)Bocaraton，Florida，atpages 1 to 34；Graffner in Industrial Aspects of Pharmaceuticals，ed.Sandel，Swedish Pharmaceutical Press(1993)at pages 93 to 104；和Proudfoot″Dosage RegimensTheir Influence on the Concentration-Time Profile of the Drug in the Body″at pages 191 to 211 of″Pharrnaceutics.The Science of Dosage Form Design″，ed.M.E.Aulton(1988)(Churchill Livingstone)。
國際專利申請No.PCT/SE01/02657(WO 02/44145，最早的優先權日為2000年12月1日，于2001年11月30日提交，于2002年6月6日公布)公開了大量化合物，它們是、或者被代謝為這樣的化合物，它們是胰蛋白酶樣蛋白酶、例如凝血酶的競爭性抑制劑。其中具體公開了下列三種化合物(a)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)
該化合物以下被稱為化合物A；(b)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2，6-二F)(OMe) 該化合物以下被稱為化合物B；(c)Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe) 該化合物以下被稱為化合物C。
甲氧基脒化合物A、B和C在對哺乳動物口服和/或腸胃外給藥后被代謝生成對應的游離脒化合物，已經發現后者化合物是有力的凝血酶抑制劑。因而·化合物A經由前體藥物中間體Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OH)(該化合物以下被稱為化合物G)被代謝為Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(該化合物以下被稱為化合物D)；·化合物B經由前體藥物中間體Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2，6-二F)(OH)(該化合物以下被稱為化合物H)被代謝為Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2，6-二F)(該化合物以下被稱為化合物E)；·化合物C經由前體藥物中間體Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OH)(該化合物以下被稱為化合物J)被代謝為Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(該化合物以下被稱為化合物F)。
化合物A、B、C、D、E、F、G和J的合成方法(分別)被描述在國際專利申請No.PCT/SE01/02657的實施例12、40、22、3、39、21、2和31中。這些化合物或它們代謝產物的改性釋放制劑尚未見諸文獻報道。
我們已經發現，化合物A和C能夠被配制在某些改性釋放的ι-角叉菜膠制劑中，還已經發現，式(I)化合物和它們的鹽能夠被配制在其他改性釋放的藥物制劑中，這些制劑是容易給藥的，例如借助口服給藥。
按照本發明的第一方面，提供了改性釋放的藥物制劑，包含式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽作為活性成分 其中R1代表被一個或多個氟代取代基取代的C1-2烷基；R2代表氫、羥基、甲氧基或乙氧基；n代表0、1或2；和藥學上可接受的稀釋劑或載體，其條件是當式(I)化合物是鹽的形式時，該制劑可以僅含有ι-角叉菜膠和中性膠凝聚合物；這些制劑以下被稱為“本發明的制劑”。
式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽可以是溶劑化物、水合物、混合型溶劑化物/水合物的形式，或者優選為無溶劑化物的形式，例如無水化物。溶劑可以是一種或多種有機溶劑，例如低級(例如C1-4)烷基醇(例如甲醇、乙醇或異丙醇)、酮(例如丙酮)、酯(例如乙酸乙酯)或其混合物。
在本發明的一個特定方面，R1是CHF2或CH2CH2F。
變量n優選地是0或2。
更優選的式(I)化合物包括其中n代表0的那些或其中n代表2的那些，于是提供兩個位于2-和6-位的氟原子(也就是兩個鄰-位，相對于苯環與-NH-CH2-基團的連接點而言)。
式(I)化合物尤其是化合物A、化合物B或化合物C。
中性膠凝聚合物是單一的或者一種以上中性可侵蝕聚合物的混合物，它(們)具有膠凝性質，并且具有基本上依賴于pH的溶解度。
式(I)化合物的優選的鹽是酸加成鹽。酸加成鹽包括無機酸加成鹽，例如硫酸、硝酸、磷酸和氫鹵酸的鹽，氫鹵酸例如氫溴酸和鹽酸。更優選的酸加成鹽包括有機酸的鹽，例如二甲基磷酸、糖精酸、環己氨基磺酸的鹽；羧酸的鹽，羧酸例如馬來酸、富馬酸、天冬氨酸、琥珀酸、丙二酸、乙酸、苯甲酸、對苯二甲酸、馬尿酸、1-羥基-2-萘甲酸、撲酸、羥基苯甲酸等；羥基酸的鹽，羥基酸例如水楊酸、酒石酸、檸檬酸、蘋果酸(包括L-(-)-蘋果酸和D，L-蘋果酸)、葡糖酸(包括D-葡糖酸)、乙醇酸、抗壞血酸、乳酸等；氨基酸的鹽，氨基酸例如谷氨酸(包括D-谷氨酸、L-谷氨酸和D，L-谷氨酸)、精氨酸(包括L-精氨酸)、賴氨酸(包括L-賴氨酸和鹽酸L-賴氨酸)、甘氨酸等；特別是磺酸的鹽，磺酸例如1，2-乙烷二磺酸、樟腦磺酸(包括1S-(+)-10-樟腦磺酸和(+/-)-樟腦磺酸)、乙烷磺酸、丙烷磺酸(包括正丙烷磺酸)、丁烷磺酸、戊烷磺酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸、對-二甲苯磺酸、2-磺酸、萘磺酸(包括1，5-萘磺酸和萘磺酸)、苯磺酸、羥基苯磺酸、2-羥基乙烷磺酸、3-羥基乙酸磺酸等。
特別優選的鹽包括C1-6(例如C1-4)鏈烷磺酸的鹽，鏈烷磺酸例如乙烷磺酸(乙烷磺酸)和丙烷磺酸(例如正丙烷磺酸)；和可選被取代的(例如被一個或多個C1-2烷基取代的)芳基磺酸，例如苯磺酸和萘二磺酸。
酸與游離堿的適合的化學計量比在0.25∶1.5至3.0∶1的范圍內，例如0.45∶1.25至1.25∶1，包括0.50∶1至1∶1。
按照本發明的進一方面，提供了包含基本上結晶形式的式(I)化合物的制劑。
盡管我們已經發現有可能生成結晶性大于80％的本發明化合物，不過“基本上結晶性”包括結晶性大于20％，優選大于30％，更優選大于40％(例如大于任意的50、60、70、80或90％)。
按照本發明的進一方面，還提供了部分結晶形式的本發明化合物。“部分結晶性”包括5％或者在5％與20％之間的結晶性。
技術人員利用X-射線粉末衍射(XRPD)可以測定結晶度(％)。還可以采用其他技術，例如固態NMR、FT-IR、拉曼光譜學、示差掃描量熱法(DSC)和微量熱法。
可以制成結晶形式的優選式(I)化合物包括C1-6(例如C2-6，例如C2-4)鏈烷磺酸的鹽，鏈烷磺酸例如乙烷磺酸、丙烷磺酸(例如正丙烷磺酸)和可選被取代的芳基磺酸(例如苯磺酸和萘二磺酸)。
術語“改性釋放”藥物組合物將被技術人員容易理解為包括任意這樣的組合物/制劑，其中藥物的起效和/或釋放速率被蓋侖操作所改變，因而包括如美國藥典(USP XXH)緒言/前言部分第xliii和xliv頁所提供的定義，該文獻的相關披露結合在此作為參考。
目前，改性釋放可以借助適當的藥學上可接受的載體和/或其他手段來提供，該載體或手段(酌情)引起活性成分的起效和/或釋放速率的改變。因而，該術語將被本領域技術人員理解為包括這樣的組合物，它們經過修改(例如本文所述)，以提供藥物的“持續”、“延長”或“延續”釋放(其中藥物以充分延遲的速率被釋放，以產生治療反應歷經所需一段時間，可選地包括提供在給藥后預定時間內可獲得的初始量藥物，以導致初始所需的治療反應)；它們提供藥物的“延時”釋放(其中藥物的釋放被延時了，直至到達胃腸道的指定區域，此后藥物的釋放可以是脈沖性的或者進一步如上所示加以修飾)；以及所謂的“反復作用”組合物(其中一劑藥物被立即或者在給藥后一定時間釋放，其他劑量在后面的時間被釋放)。
我們優選的是，本發明組合物提供藥物的延時釋放或者更優選持續(也就是延長或延續)釋放歷經一段時間。更優選的本發明組合物可以經過修改(例如本文所述)，以提供充分的藥物劑量歷經服藥間隔(與每單位時間服藥次數無關)，以產生所需的治療效果。在所延續的一段時間，釋放可以是統一的和/或恒定的，或者其他。
本發明組合物例如可以是下列形式，所有這些都是本領域技術人員熟知的(a)包衣的顆粒劑、片劑或膠囊劑，它們可以被設計成當有關制劑到達胃腸道特定區域時釋放至少一些藥物。這類片劑例如可以帶有一定形式的胃酸耐受性包衣，例如腸溶衣層，在胃腸道的特定部分、例如腸區釋放存在于制劑中的至少一部分藥物。
(b)多單元或多粒子系統，它們可以是微粒、微球或顆粒的形式，其中包含有藥物(該多單元/多粒子可以提供含藥制劑從胃進入十二指腸的逐漸排空，進一步穿過小腸和大腸，同時以預定速率釋放藥物)。
(c)在一種基質中包含活性化合物分散體或固體溶液的制劑，所述基質可以是蠟、樹膠或脂肪的形式，或者特別是聚合物的形式，在其中借助片劑的逐漸表面侵蝕和/或擴散發生藥物釋放。
(d)包含一種生物粘合層的系統，該層可以提供本發明組合物的長時間留置在胃腸道的特定區域(例如胃)。這包括漂浮或沉沒系統(分別是低密度和高密度系統)，以及所謂的“擴容”系統。
(e)所謂的“待定”藥具，其中藥物附著于離子交換樹脂，借助存在于胃腸道中的其他離子的影響提供藥物的逐漸釋放，例如胃的酸性環境。
(f)這樣的藥具，其中借助其化學電位控制藥物的釋放速率(例如滲透泵)。
(g)這樣的系統，其中借助跨膜擴散釋放藥物，包括多層系統。
(h)根據外部信號發揮作用的藥具，以釋放少量藥物。
(i)主動的自程序化系統，它可以含有傳感元件，該元件響應于特定的生物環境，以調節藥物遞送。
(j)硅橡膠控釋藥庫，作為水和/或胃腸液經由入口/出口擴散進入藥具的函數而釋放藥物，導致藥物的溶解和隨后釋放。
上述原理詳盡討論在現有技術參考文獻中，包括PharmaceutischWeekblad Scientific Edition，6，57(1984)；Medical Applications ofControlled Release，Vol II，eds.Langer and Wise(1984)Bocaraton，Florida，p.1-34；Industrial Aspects of Pharmaceuticals，ed.Sandel，Swedish Pharmaceutical Press(1993)p.93-104；″PharmaceuticsTheScience of Dosage Form Design″，ed.M.E.Aulton(1988)p.191-211(Churchill Livingstone)；以及上述文獻所引用的參考文獻，全部這些文獻的披露結合在此作為參考。
另一方面，本發明提供口服改性釋放制劑，其中R2是羥基或甲氧基(例如化合物A、B、C、G、H或J；R2尤其是甲氧基，例如化合物A、B或C)或其藥學上可接受的鹽(尤其是其結晶性鹽；例如C1-6(例如C2-6，例如C2-4)鏈烷磺酸鹽或可選被取代的芳基磺酸鹽)。
本發明包括采用式(I)化合物的腸胃外改性釋放制劑。進一方面，本發明提供腸胃外改性釋放制劑，其中R2是氫(例如化合物D、E或F)。
更進一方面，本發明提供包含膠凝基質的改性釋放制劑。該基質優選地包含羥丙基甲基纖維素(HPMC)、ι-角叉菜膠、十二烷基硫酸鈉(SDS)和/或黃原膠。更優選地，該基質包含羥丙基甲基纖維素(HPMC)、ι-角叉菜膠和/或PEO。HPMC可以是一種HPMC或者兩種或多種不同粘度或分子量HPMC的混合物(如下文所述)。
本發明還提供包含一種或多種HPMC和一種或多種其他組分的改性釋放制劑，所述其他組分選自由ι-角叉菜膠、微晶纖維素、潤滑劑(例如硬脂酰富馬酸鈉)或甘露糖醇組成的組。
本發明在進一方面進一步提供包含黃原膠或者包含ι-角叉菜膠和PEO的改性釋放制劑(如下所述)。
適合的改性釋放制劑因而可以按照藥學中的標準技術加以制備，如本文或上述文獻所述，和/或是熟知的。
我們優選的是，在本發明的組合物中，活性成分是與藥學上可接受的載體一起被提供的。我們特別優選的是，本發明組合物呈現活性成分在聚合物基質中的形式。
在這方面我們優選的是，本發明組合物是供口服給藥的，為所謂的“溶脹”改性釋放系統或“膠凝基質”改性釋放系統的形式，其中活性成分是與一種聚合物一起被提供的，所述聚合物在水性介質中溶脹(也就是“親水性膠凝組分”)。術語“水性介質”在本文中被理解為包括水和這樣的液體，它們是或者近似于存在于哺乳動物胃腸道中的那些。這類聚合物系統通常包含親水性大分子結構，它們在干燥時可以是玻璃狀或至少部分結晶性狀態，在與水性介質接觸時溶脹。藥物的改性釋放因而受到一種或多種下列過程的影響溶劑向聚合物基質中的轉運、聚合物的溶脹、藥物穿過溶脹聚合物的擴散和/或聚合物的侵蝕，其中一種或多種過程可以起到從聚合物基質中緩慢釋放藥物進入水性介質的作用。
因而，適合的聚合材料(充當載體)可以用作膠凝基質改性釋放組合物的親水性膠凝組分，包括分子量在5,000g/mol以上的那些，它們(a)至少微溶于水性介質(如上文所定義)；或者(b)在與水性介質接觸時溶脹，使藥物能夠從載體中釋放。
適合的膠凝基質聚合物可以是合成的或天然的，因而包括多糖，例如麥芽糖糊精、黃原膠、小核菌聚糖、葡聚糖、淀粉、藻酸鹽、支鏈淀粉、透明質酸、殼多糖、殼聚糖等；其他天然聚合物，例如蛋白質(白蛋白、明膠等)、聚-L-賴氨酸；聚(丙烯酸)鈉；聚(羥基烷基異丁烯酸酯)，例如聚(羥乙基異丁烯酸酯)；羧聚乙烯，例如CarbopolTM；carbomer；聚乙烯吡咯烷酮；樹膠，例如瓜爾膠、阿拉伯膠、卡拉牙膠、印度膠、槐樹豆膠、羅望子膠、吉蘭糖膠、黃蓍膠、瓊脂、果膠、谷膠等；聚(乙烯醇)；亞乙基乙烯醇；聚(氧化乙烯)(PEO)；和纖維素醚，例如羥甲基纖維素(HMC)、羥乙基纖維素(HEC)、羥丙基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、乙基纖維素(EC)、羧乙基纖維素(CEC)、乙基羥乙基纖維素(EHEC)、羧甲基羥乙基纖維素(CMHEC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥丙基乙基纖維素(HPEC)和羧甲基纖維素鈉(NaCMC)；以及任意上述聚合物的共聚物和/或(簡單)混合物。某些上述聚合物可以進一步借助標準工藝而交聯。
就膠凝基質系統形式的本發明組合物而言，我們優選的是，所采用的主要溶脹聚合物是HPC、麥芽糖糊精、小核菌聚糖或羧聚乙烯，更優選PEO或黃原膠，尤其是HPMC，以及任意這些聚合物的共聚物和/或(簡單)混合物。ι-角叉菜膠也是優選的。
當在親水性膠凝組分中采用PEO、黃原膠和HPMC時(也就是作為聚合物的至少一種)，這些聚合物優選的分子量(也就是重均分子量，由標準技術測定，例如滲透壓測定、采用折光檢測器的尺寸排阻色譜(其中分子量是借助標準校正曲線測定的)、光散射和/或超離心技術)在5,000g/mol至200,000,000g/mol的范圍內，例如至多100,000,000g/mol，優選至多25,000,000g/mol，更優選至多20,000,000g/mol。可以采用具有這些范圍內不同分子量的PEO、黃原膠與HPMC的混合物。
適合的HPMC聚合物也包括形成2％w/w聚合物水溶液的那些，其粘度根據標準技術的測量，例如美國藥典XXN(USP XXIV/NF19)p.2002 et seq的一般描述和p.843-844的具體描述(該文獻中的有關披露結合在此作為參考)，在3與150,000cps(20℃)之間，例如10與120,000cps之間，優選30與50,000cps之間，更優選50與15,000cps之間。可以采用具有這些范圍內不同粘度的HPMC聚合物混合物，目的例如是形成這樣的HPMC混合物，它們形成“平均”粘度(即混合物的粘度)在上述優選范圍內的上述溶液。類似地，可以采用HPMC聚合物(粘度和/或“平均”粘度在這些范圍內)與其他上述聚合物的混合物。適合的HPMC聚合物包括滿足美國藥典標準替換型2208、2906、2910和1828的那些(進一步細節參見USPXXIV/NF19)。適合的HPMC聚合物因而包括冠以商標METHOCELTM(Dow Chemical Corporation)或商標METOLOSETM(Shin-Etsu)銷售的那些。
適合的黃原膠聚合物包括形成1％w/w聚合物水溶液的那些，其粘度根據標準技術的測量，例如美國藥典XXN(USP XXIV/NF19)p.2002 et seq的一般描述和p.2537-2538的具體描述(該文獻中的有關披露結合在此作為參考)，在60與2,000cps(24℃)之間，例如600與1,800cps之間，優選1,200與1,600cps之間。可以采用具有這些范圍內不同粘度的黃原膠聚合物混合物，目的例如是形成這樣的黃原膠混合物，它們形成“平均”粘度(即混合物的粘度)在上述優選范圍內的上述溶液。類似地，可以采用黃原膠聚合物(粘度和/或“平均”粘度在這些范圍內)與其他上述聚合物的混合物。適合的黃原膠聚合物包括冠以商標XANTURALTM與KELTROLTM(CPKelco)和SATIAXANETM(Degussa，Texturant Systems)銷售的那些。
聚合物的選擇將取決于用在本發明組合物中的活性成分/藥物的屬性以及所需的釋放速率。特別是將為技術人員所領會到的是，例如在HPMC的情況下，一般而言分子量越高，藥物從組合物中釋放的速率越慢。進而，在HPMC的情況下，不同的甲氧基和羥丙基取代度將引起藥物從組合物中釋放的速率變化。在這一點上，并且如上所述，可能需要提供膠凝基質系統形式的本發明組合物，其中聚合物載體是兩種或多種(例如)不同分子量的聚合物的摻合物，實例如下所述，目的是產生特殊需要的或所需的釋放行為。
在膠凝基質系統形式中，我們還已發現，藥物從本發明組合物中釋放的速率可以借助控制下列兩種比例得以進一步控制包含藥物和聚合物載體系統的個別組合物(例如片劑)的藥物聚合物之比和表面積體積之比。
本發明組合物無論膠凝基質系統還是其他，都可以含有一種或多種進一步的賦形劑(除了聚合物載體系統以外)，以進一步修飾藥物釋放，改進最終組合物的物理和/或化學性質，和/或有利于制備的過程。這類賦形劑是改性釋放組合物配制中常見的。
例如，本發明組合物可以含有一種或多種下列稀釋劑磷酸鈣(磷酸一鈣、磷酸二鈣和磷酸三鈣)、乳糖、微晶纖維素、甘露糖醇、山梨糖醇、二氧化鈦、硅酸鋁等。優選的稀釋劑包括微晶纖維素和甘露糖醇。
本發明組合物可以含有一種或多種下列潤滑劑硬脂酸鎂、硬脂酰富馬酸鈉等。
本發明組合物可以含有助流劑，例如膠體二氧化硅。
本發明組合物可以含有一種或多種下列粘合劑聚乙烯吡咯烷酮、乳糖、甘露糖醇、微晶纖維素、聚乙二醇(PEG)、低分子量HPMC、低分子量MC、低分子量HPC等。優選的粘合劑包括微晶纖維素。
本發明組合物可以含有一種或多種下列pH控制劑有機酸(例如檸檬酸等)或其堿金屬(例如鈉)鹽、無機酸(例如碳酸或磷酸)的藥學上可接受的鹽(例如鈉、鎂或鈣鹽)、鎂的氧化物以及堿金屬與堿土金屬(例如鈉、鈣、鉀等)的硫酸鹽、偏硫酸氫鹽、丙酸鹽與山梨酸鹽。
其他進一步的賦形劑可以包括著色劑、矯味劑、增溶劑(例如SDS)、包衣劑、防腐劑等。
可以采用上述進一步賦形劑的組合。
將被領會到的是，一些上述可以存在于最終本發明組合物中的進一步賦形劑可以具有一種以上的上述功能。而且，上述進一步賦形劑還可以在膠凝基質系統中充當親水性膠凝組分的一部分。
可以存在于本發明組合物中的進一步賦形劑(在膠凝基質系統的情況下不包括主要的聚合物載體)的總量將依賴于組合物的屬性以及該組合物其他成分的屬性和含量，可以是至多85％，例如在0.1至75％之間，例如0.2至65％，優選0.3至55％，更優選0.5至45％，尤其是1至40％，例如2至35％w/w。無論如何，技術人員可以按照慣例(也就是無需求助創造性勞動)可以確定賦形劑的選擇和含量。
在膠凝基質系統中，系統中聚合物的含量應當足以確保歷經服藥間隔提供充分劑量的藥物，以產生所需的治療效果。因而，就膠凝基質系統而言，我們優選的是，在下文所述試驗條件下，80％(尤其60％)的組合物最初藥物成分在給藥后被釋放至患者花費至少2小時(優選至少4小時，尤其至少6小時，特別是歷經8與24小時之間的階段。最優選地，80％的組合物最初藥物成分在8與24小時之間的某一時間被釋放。可以包括在內的適量聚合物將尤其依賴于用在組合物中的活性成分、任意可能存在的賦形劑和所用聚合物的屬性，為5至99.5％，例如10至95％，優選30至80％w/w。無論如何，技術人員可以按照慣例確定聚合物的選擇和含量。
在另一種優選的制劑中，我們優選的是，本發明化合物被一起配制在膠凝基質組合物中，其中包含ι-角叉菜膠和一種或多種中性膠凝聚合物。
ι-角叉菜膠優選地在這樣一種優選制備物中的含量水平為15重量％以上。優選的ι-角叉菜膠級別包括藥物級ι-角叉菜膠(例如可從FMCBiopolymer獲得)，它的粘度不小于5厘泊(cps)，優選為5-10cps(就1.5％溶液而言，溫熱至82℃，然后在75℃下利用裝有#1轉軸的Brookfield LV粘度計測量粘度，轉速30rpm)，和技術級ι-角叉菜膠(例如可從Fluka Biochemica獲得)，它的粘度優選地不小于14mPa.s(就0.3％水溶液而言，溫熱至20℃，然后利用Haake型落球粘度計以及Lauda恒溫器C3和Hakke Mess-System III測量粘度，采用密度7.8g/cm3的包金不銹鋼球)。
中性膠凝聚合物可以是單一的或者一種以上中性聚合物的混合物，它(們)具有膠凝性質，并且具有基本上依賴于pH的溶解度。中性膠凝聚合物優選地在制劑中的含量水平超過10％，但是優選地超過20％，按重量計。
適合的中性膠凝聚合物包括聚氧乙烯(PEO)、PEO家族的衍生物和成員(例如聚乙二醇(PEG))，優選地天然以固體狀態存在，具有適合的分子量或粘度。如果用作單一的中性膠凝聚合物，那么PEO優選地具有大于4百萬(4M)的MW，相當于1650-5500mPa.s的水溶液粘度范圍(或1650-5500cps；就25℃的1％水溶液而言，利用Brookfield RVF粘度計測量，No.2轉軸轉速2rpm)。其他適合的PEO實例包括MW在5百萬(5M)左右的PEO，相當于5500-7500mPa.s的水溶液粘度范圍，或者MW在8百萬(8M)左右的PEO，相當于10000-15000mPa.s的水溶液粘度范圍。這種范圍覆蓋了在25℃下測量的典型溶液粘度值(以cps表示)，以這種聚合物為例，見USP 24/NF 19，2000年版pp.2285-2286。如果PEG用作單一的中性膠凝聚合物，那么它優選地具有高分子量，例如MW在20000左右，相當于2700-3500mPa.s(或2700-3500cps)的粘度范圍，就20℃的50％水溶液(w/w)而言，例如毛細管粘度計測量(Ubbelohde或等價儀器)[RefEuropean Pharmacopoeia 3rd Ed.，2000，Supplement，pp.908-909]。
其他適合的中性膠凝聚合物包括纖維素衍生物，例如羥丙基甲基纖維素(HPMC)或羥乙基纖維素(HEC)，具有適當高的粘度(例如“HPMC 50cps”、“HPMC 10000cps”、“HPMC 15000cps”、“HH型HEC”或“H型HEC”)。在用作單一的中性聚合物時，羥丙基甲基纖維素聚合物、象“HPMC 10000cps”和“HPMC 15000cps”分別具有7500-14000mPa.s(或7500-14000cps)和11250-21000mPa.s(或11250-21000cps)的表觀粘度，利用毛細管粘度劑(Ubbelohde或等價儀器)測量20℃的2％(w/w)水溶液，根據干燥后的物質計算。有一種類型的羥乙基纖維素聚合物，例如“Natrosol 250 Pharma，HH型”，來自Hercules Incorporated(Aqualon)，通常顯示約20,000mPa.s的Brookfield粘度，利用Brookfield Synchro-Lectric LVF型儀器測量，條件是1％溶液濃度，No.4轉軸，轉速30rpm，系數200，溫度25℃(Natrosol Physical and Chemical Properties booklet，33.007-E6(1993)，p.21)。
特別可以提到的制劑包括這樣的，其中本發明化合物是與ι-角叉菜膠和HPMC(10,000cps)按50∶50(wt％)比例一起配制的，或者與ι-角叉菜膠和HPMC(50cps)&HPMC(10,000cps)按35∶60∶5(wt％)比例一起配制，或者與ι-角叉菜膠和PEO 4M按50∶50(wt％)比例一起配制。這類制劑中優選的另外賦形劑包括潤滑劑，例如硬脂酰富馬酸鈉。
本發明在一方面提供不可注射的本發明制劑，包含化合物A、B或C或其鹽、HPMC和潤滑劑(例如硬脂酰富馬酸鈉)。進一方面，該制劑可以包含兩種或多種不同粘度(例如10,000cps和50cps)HPMC的混合物。進而，該制劑可以另外包含增溶劑(例如十二烷基硫酸鈉(SDS)、月桂基硫酸鈉或聚氧40氫化蓖麻油)。
本發明組合物無論膠凝基質系統還是其他，適量活性成分依賴于很多因素，例如該成分的屬性(游離堿/鹽等)、所需要的劑量和組合物其他成分的屬性與含量。不過，它們可以在0.5至80％的范圍內，例如1至75％，例如3至70％，優選5至65％，更優選10至60％，尤其是15至55％w/w。無論如何，技術人員可以按照慣例確定所要包括的活性成分的量。
式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽的典型每日劑量在0.001至100mg/kg體重的游離堿的范圍內(也就是說，在鹽的情況下排除所有由抗衡離子的存在所帶來的重量)，與在當天內給藥的個別劑量次數無關。優選的每日劑量在20-500mg的范圍內。
本發明組合物、例如上述那些可以按照熟知技術制備，例如上述參考文獻所述那些。膠凝基質系統形式的本發明化合物可以利用技術人員已知的標準設備借助標準技術加以制備，包括濕法或干法造粒、直接壓制/壓縮、干燥、研磨、混合、壓片和包衣，以及這些過程的組合，例如如下所述。
盡管本發明組合物優選地適合于口服給藥，不過它們的用途并不限于這種給藥方式。本發明的腸胃外改性釋放組合物可以包括本領域技術人員熟知的系統，例如基于泊洛沙姆、生物可降解微球、脂質體、油懸液和/或乳液的那些，都可以按照標準技術制備，例如Leung et al″Controlled Drug DeliveryFundamentals and Applications″(Drugsand the Pharmaceutical Sciences；vol.29，2nd edition，eds.Robinsonand Lee，Dekker(1987)第10章第433頁，該文獻的披露結合在此作為參考。
本發明組合物可以每天服藥一次或多次(優選每天一次，但是不超過兩次)，與作為一“劑”的一部分給藥的個別單元(制劑/組合物)的數量無關。
本發明制劑是對哺乳動物患者(包括人類)給藥的，就其中R2不是氫的式(I)化合物而言，隨后在體內被代謝生成其中R2是氫的式(I)化合物，后者是有藥理活性的。
按照本發明的進一方面，因而提供用作藥物的本發明制劑。
特別是式(I)化合物是或者在給藥后被代謝生成有力的凝血酶抑制劑，例如這可以得到國際專利申請No.PCT/SE01/02657以及國際專利公報WO 02/14270、WO 01/87879和WO 00/42059所述試驗的證明，這些文獻的有關披露結合在此作為參考。
“凝血酶抑制劑的前體藥物”包括這樣的化合物，它們在給藥后被代謝生成實驗可檢測量的凝血酶抑制劑。
“活性成分”和“活性物質”表示存在于制劑中的藥物成分(涵蓋凝血酶抑制劑和其前體藥物)。
本發明制劑因而被預期可用于需要抑制凝血酶的病癥，和/或適用抗凝療法的病癥，包括下列治療和/或預防動物、包括人類血液和/或組織中的血栓形成和凝固性過高。已知凝固性過高可以引起血栓-栓子疾病。可以提到的與凝固性過高和血栓-栓子疾病有關的病癥包括遺傳性或獲得性活化C蛋白抗性，例如V因子突變(V因子Leiden)，和遺傳性或獲得性抗凝血酶、C蛋白、S蛋白、肝素輔因子II缺陷。其他已知與凝固性過高和血栓-栓子疾病有關的病癥包括循環抗磷脂抗體(狼瘡抗凝劑)、高半胱氨酸血、肝素誘發的血小板減少和纖維蛋白溶解不足以及凝血綜合征(例如播散性血管內凝血(DIC))和全身血管損傷(例如由手術引起)。
治療存在不可取過量的凝血酶而無凝固性過高跡象的病癥，例如神經變性疾病，例如阿爾茨海默氏病。
可以提到的特定疾病狀態包括靜脈血栓形成(例如DVT)與肺栓塞、動脈血栓形成(例如心肌梗塞、不穩定型絞痛、基于血栓形成的中風和外周動脈血栓形成)和通常在心房纖維性顫動(例如非瓣膜性心房纖維性顫動)期間來自心房的全身栓塞或在透壁心肌梗塞后來自左心室或者由充血性心力衰竭所致的全身栓塞的治療性和/或預防性處置；血栓溶解、經皮經腔血管成形術(PTA)和冠脈旁路手術后重新閉塞(也就是血栓形成)的預防；全身顯微手術和血管手術后的重新血栓形成的防止。
進一步的適應癥包括由細菌、多發性創傷、中毒或任意其他機理所導致的播散性血管內凝血的治療性和/或預防性處置；抗凝處理，此時血液與體內外來表面接觸，例如血管移植物、血管固定模、血管導管、機械與生物修復閥或任意其他醫用裝置；抗凝處理，此時血液與體外醫用裝置接觸，例如在采用心-肺機的心血管手術期間或者在血液透析中；自發性與成人呼吸窘迫綜合征、放射或化療后肺纖維變性、膿毒性休克、敗血病、炎性反應(包括但不限于水腫)、急性或慢性動脈粥樣硬化(例如冠狀動脈疾病和動脈粥樣硬化斑的生成)、腦動脈疾病、腦梗塞、腦血栓形成、腦栓塞、外周動脈疾病、局部缺血、絞痛(包括不穩定型絞痛)、再灌注損傷、經皮經腔血管成形術(PTA)和冠狀動脈旁路手術后再狹窄的治療性和/或預防性處置。
本發明制劑還可以包含任何作用機理不同于式(I)化合物的抗血栓形成劑，例如下列一種或多種抗血小板劑乙酰水楊酸、噻氯匹定和氯吡格雷；血栓烷受體和/或合成酶抑制劑；纖維蛋白原受體拮抗劑；前列腺環素模擬物；磷酸二酯酶抑制劑；ADP-受體(P2T)拮抗劑；和羧肽酶U(CPU)抑制劑。
抑制胰蛋白酶和/或凝血酶的式(I)化合物還可以用于胰腺炎的治療。
本發明制劑因而適用于這些病癥的治療性和/或預防性處置。
本發明制劑可用于式(I)化合物或其鹽向患者的遞送。由于式(I)化合物及其鹽可用于血栓形成的預防和治療，本發明制劑也可用于這樣一種障礙的治療。
按照本發明的進一方面，提供了血栓形成的治療方法，該方法包含本發明制劑對患有或者易患這樣一種病癥的個人的給藥。
本發明在更進一步的方面提供在藥劑制備中的本發明制劑，該藥劑用于血栓形成的治療。
為了避免疑問，“治療”包括病癥的治療性處置以及預防。
本發明組合物具有這樣的優點，它們可以提供式(I)化合物或任意這些化合物的藥學上可接受的鹽的改性釋放，目的是獲得更加連貫和/或延長的抗血栓形成效果，因而可以提供活性成分的有效服藥，優選地每天不超過一次或兩次。
本發明組合物還可以具有這樣的優點，它們可以利用既定的藥學加工方法加以制備，并且采用獲得食用或藥用許可或者法定的材料。
式(I)化合物可以利用下列工藝制備。
一般工藝TLC是在硅膠上進行的。手性HPLC分析是利用46mm×250mmChiralcel OD柱進行的，該柱具有一個5cm保護柱。柱溫維持在35℃。使用1.0mL/min的流速。使用228nm的Gilson 115 UV檢測器。移動相由己烷、乙醇和三氟乙酸組成，就每種化合物而言列出了適當的比例。通常，將產物溶于少量乙醇，再用移動相稀釋。
在下列制備例A至I中，LC-MS/MS是利用HP-1100儀器進行的，該儀器配有CTC-PAL注射器和5Tm，4×100mm ThermoQuest，Hypersil BDS-C18柱。使用API-3000(Sciex)MS檢測器。流速為1.2mL/min，移動相(梯度)由10-90％乙腈與90-10％4mM含水乙酸銨組成，二者均含有0.2％甲酸。或者，低分辨率質譜(LRMS)是利用Micromass ZQ光譜計以ESI正負轉換離子模式記錄的(質量范圍m/z 100-800)；高分辨率質譜(HRMS)是利用Micromass LCT光譜計以ES負離子化模式記錄的(質量范圍m/z 100-1000)，以亮氨酸腦啡肽(C28H37N5O7)作為內部質量標準。
1H NMR光譜是使用四甲基硅烷作為內標記錄的。
式(I)化合物的合成過程參見國際專利申請No.PCT/SE01/02657(WO 02/44145，最早的優先權日為2000年12月1日，于2001年11月30日提交，于2002年6月6日公布)，有關信息結合在此。
制備例A化合物A的制備(i)3-氯-5-甲氧基苯甲醛在25℃下，向預先用0.5N HCl的THF(100mL)溶液洗滌過的鎂金屬(14.2g，585mmol)滴加3，5-二氯茴香醚(74.0g，419mmol)的THF(200mL)溶液。加入后，滴加1，2-二溴乙烷(3.9g，20.8mmol)。將所得暗褐色混合物在回流下加熱3小時。將混合物冷卻至0℃，一次性加入N，N-二甲基甲酰胺(60mL)。將混合物用二乙醚(3×400mL)和6N HCl(500mL)分配。合并有機萃取液，用鹽水(300mL)洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮，得到油。經過硅膠快速色譜處理(2x)，用己烷∶EtOAc(4∶1)洗脫，得到小標題化合物(38.9g，54％)，為黃色的油。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.90(s，1H)，7.53(s，1H)，7.38(s，1H)，7.15(s，1H)，3.87(s，3H).
(ii)3-氯-5-羥基苯甲醛將3-氯-5-甲氧基苯甲醛(22.8g，134mmol；見上步驟(i))的CH2Cl2(250mL)溶液冷卻至0℃。歷經15分鐘滴加三溴化硼(15.8mL，167mmol)。將反應混合物攪拌2小時后，緩慢加入H2O(50mL)。溶液然后用Et2O萃取(2×100mL)。合并有機層，干燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮。經過硅膠快速色譜處理，用己烷∶EtOAc(4∶1)洗脫，得到小標題化合物(5.2g，25％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.85(s，1H)，7.35(s，1H)，7.20(s，1H)，7.10(s，1H)，3.68(s，1H).
(iii)3-氯-5-二氟甲氧基苯甲醛將3-氯-5-羥基苯甲醛(7.5g，48mmol；見上步驟(ii))的2-丙醇(250mL)與30％KOH(100mL)溶液加熱至回流。在攪拌的同時，向反應混合物通入CHClF2達2小時。將反應混合物冷卻，用1N HCl酸化，用EtOAc萃取(2×100mL)。將有機層用鹽水(100mL)洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮。經過硅膠快速色譜處理，用己烷∶EtOAc(4∶1)洗脫，得到小標題化合物(4.6g，46％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.95(s，1H)，7.72(s，1H)，7.52(s，1H)，7.40(s，1H)，6.60(t，JH-F＝71.1Hz，1H).
(iv)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R，S)CH(OTMS)CN將3-氯-5-二氟甲氧基苯甲醛(4.6g，22.3mmol；見上步驟(iii))的CH2Cl2(200mL)溶液冷卻至0℃。加入ZnI2(1.8g，5.6mmol)和三甲代甲硅烷基氰(2.8g，27.9mmol)，使反應混合物溫熱至室溫，攪拌15小時。在真空中部分濃縮混合物，得到小標題化合物，為液體，直接用于下列步驟(v)，無需進一步純化或鑒別。
(v)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R，S)CH(OH)C(NH)OEt
向HCl/EtOH(500mL)滴加Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R，S)CH(OTMS)CN(6.82g，預計22.3mmol；見上步驟(iv))。將反應混合物攪拌15小時，然后在真空中部分濃縮，得到小標題化合物，為液體，直接用于步驟(vi)，無需進一步純化或鑒別。
(vi)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R，S)CH(OH)C(O)OEt將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R，S)CH(OH)C(NH)OEt(6.24g，預計22.3mmol；見上步驟(v))溶于THF(250mL)，加入0.5M H2SO4(400mL)，將反應物在40℃下攪拌65小時，冷卻，然后在真空中部分濃縮，以除去大部分THF。然后將反應混合物用Et2O萃取(3×100mL)，干燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮，得到小標題化合物，為固體，直接用于步驟(vii)，無需進一步純化或鑒別。
(vii)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R，S)CH(OH)C(O)OH將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R，S)CH(OH)C(O)OEt(6.25g，預計22.3mmol；見上步驟(vi))的2-丙醇(175mL)與20％KOH(350mL)溶液在室溫下攪拌15小時。然后在真空中部分濃縮反應物，以除去大部分2-丙醇。將剩余混合物用1M H2SO4酸化，用Et2O萃取(3×100mL)，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，得到固體。經過硅膠快速色譜處理，用CHCl3∶MeOH∶濃NH4OH(6∶3∶1)洗脫，得到小標題化合物的銨鹽。然后將銨鹽溶于EtOAc(75mL)與H2O(75mL)的混合物，用2N HCl酸化。分離有機層，用鹽水(50mL)洗滌，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，得到小標題化合物(3.2g，57％，從步驟(iv)至(vii)計算)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.38(s，1H)，7.22(s，1H)，7.15(s，1H)，6.89(t，JH-F＝71.1Hz，1H)，5.16(s，1H)(vii)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH(a)和Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(S)CH(OH)C(O)OH(b)將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R，S)CH(OH)C(O)OH(3.2g，12.7mmol；見上步驟(vii))與脂酶PS“Amano”(～2.0g)在乙酸乙烯酯(125mL)與MTBE(125mL)中的混合物在回流下加熱48小時。將反應混合物冷卻，通過Celite過濾，濾餅用EtOAc洗滌。在真空中濃縮濾液，進行硅膠快速色譜處理，用CHCl3∶MeOH∶濃NH4OH(6∶3∶1)洗脫，得到小標題化合物(a)和(b)的銨鹽。將化合物(a)的鹽溶于H2O，用2N HCl酸化，用EtOAc萃取。將有機層用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮，得到小標題化合物(a)(1.2g，37％)。
就小標題化合物(a)而言，1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.38(s，1H)，7.22(s，1H)，7.15(s，1H)，6.89(t，JH-F＝71.1Hz，1H)，5.17(s，1H)(ix)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)在0℃，向Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH(1.1g，4.4mmol；見上步驟(viii))與H-Aze-Pab(Teoc)(參見國際專利申請WO 00/42059，2.6g，5.7mmol)的DMF(50mL)溶液加入PyBOP(2.8g，5.3mmol)和三甲吡啶(1.3g，10.6mmol)。將反應物在0℃下攪拌2小時，然后在室溫下攪拌另外15小時。在真空中濃縮反應混合物，經過硅膠快速色譜處理(3x)，先用CHCl3∶EtOH(9∶1)洗脫，再用EtOAc∶EtOH(20∶1)洗脫，最后用CH2Cl2∶CH3OH(95∶5)洗脫，得到小標題化合物(1.0g，37％)，為白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD，旋轉異構體混合物)δ7.79-7.85(d，J＝8.7Hz，2H)，7.15-7.48(m，5H)，6.89和6.91(t，JH-F＝71.1Hz，1H)，5.12和5.20(s，1H)，4.75-4.85(m，1H)，3.97-4.55(m，6H)，2.10-2.75(m，2H)，1.05-1.15(m，2H)，0.09(s，9H).MS(m/z)611(M+1)+.
(x)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe，Teoc)將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.40g，0.65mmol；見上步驟(ix))溶于20mL乙腈，加入0.50g(6.0mmol)鹽酸O-甲基羥胺。將混合物在70℃下加熱2小時。蒸發溶劑，使殘余物在水與乙酸乙酯之間分配。水相用乙酸乙酯萃取兩次，合并有機相，用水、鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，蒸發。收率0.41g(91％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.83(bt，1H)，7.57(bs，1H)，7.47(d，2H)，7.30(d，2H)，7.20(m，1H)，7.14(m，1H)，7.01(m，1H)，6.53(t，1H)，4.89(s，1H)，4.87(m，1H)，4.47(m，2H)，4.4-4.2(b，1H)，4.17-4.1(m，3H)，3.95(s，3H)，3.67(m，1H)，2.68(m，1H)，2.42(m，1H)0.97(m，2H)，0.01(s，9H).
(xi)化合物A將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe，Teoc)(0.40g，0.62mmol；見上步驟(x))溶于5mL TFA，反應30分鐘。蒸發TFA，使殘余物在乙酸乙酯與NaHCO3(aq.)之間分配。水相用乙酸乙酯萃取兩次，合并有機相，用水、鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，蒸發。將產物從水/乙腈中冷凍干燥。沒有純化的必要。收率0.28g(85％)。
1H NMR(600MHz，CDCl3)δ7.89(bt，1H)，7.57(d，2H)，7.28(d，2H)，7.18(m，1H)，7.13(m，1H)，6.99(m，1H)，6.51(t，1H)，4.88(s，1H)，4.87(m，1H)，4.80(bs，2H)，4.48(dd，1H)，4.43(dd，1H)，4.10(m，1H)，3.89(s，3H)，3.68(m，1H)，2.68(m，1H)，2.40(m，1H)13C-NMR(125MHz；CDCl3)(羰基和/或脒碳，旋轉異構體)δ172.9，170.8，152.7，152.6HRMS關于C22H23ClF2N4O5(M-H)-的計算值495.1242，實測值495.1247制備例B化合物B的制備(i)2，6-二氟-4-[(甲基亞磺酰基)(甲硫基)甲基]芐腈在氬下，將(甲基亞磺酰基)(甲硫基)甲烷(7.26g，0.0584mol)溶于100mL無水THF，冷卻至-78℃。滴加丁基鋰的己烷溶液(16mL，1.6M，0.0256mol)，同時攪拌。將混合物攪拌15分鐘。同時，在氬下將3，4，5-三氟芐腈(4.0g，0.025mmol)的100mL無水THF溶液冷卻至-78℃，將前者溶液通過套管歷經35分鐘加入到后者溶液中。30分鐘后，除去冷卻浴，當反應已經達到室溫時，倒入400mL水中。蒸發THF，剩余水層用二乙醚萃取三次。合并醚相，用水洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發。收率2.0g(30％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.4-7.25(m，2H)，5.01(s，1H，非對映體)，4.91(s，1H，非對映體)，2.88(s，3H，非對映體)，2.52(s，3H，非對映體)，2.49(s，3H，非對映體)，2.34(s，3H，非對映體)，1.72(寬峰，1H)(ii)2，6-二氟-4-甲酰基芐腈將2，6-二氟-4-[(甲基磺酰基)(甲硫基)甲基]芐腈(2.17g，8.32mmol；見上步驟(i))溶于90mL THF，加入3.5mL濃硫酸。將混合物在室溫下放置3天，隨后倒入450mL水中。然后用EtOAc萃取三次，合并醚相，用碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌兩次，干燥(Na2SO4)，蒸發。收率1.36g(98％)。甲酰基的位置得到13C NMR的確認。氟化碳的信號出現在162.7ppm，表明了預期的偶合方式，兩個偶合常數分別為260Hz和6.3Hz，相當于氟原子的ipso與meta偶合。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.35(s，1H)，7.33(m，2H)
(iii)2，6-二氟-4-羥甲基芐腈將2，6-二氟-4-甲酰基芐腈(1.36g，8.13mmol；見上步驟(ii))溶于25mL甲醇，在冰浴上冷卻。分批加入硼氫化鈉(0.307g，8.12mmol)，同時攪拌，將反應物放置65分鐘。蒸發溶劑，使殘余物在二乙醚與碳酸氫鈉水溶液之間分配。將醚層用更多的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發。粗產物很快結晶，無需進一步純化即可使用。收率1.24g(90％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.24(m，2H)，4.81(s，2H)，2.10(寬峰，1H)(iv)4-氰基-2，6-二氟芐基甲烷磺酸酯向冰冷卻的2，6-二氟-4-羥甲基芐腈(1.24g，7.32mmol；見上步驟(iii))與甲磺酰氯(0.93g，8.1mmol)的60mL二氯甲烷溶液加入三乙胺(0.81g，8.1mmol)，同時攪拌。在0℃下3小時后，將混合物用1M HCl洗滌兩次，用水洗滌一次，干燥(Na2SO4)，蒸發。產物無需進一步純化即可使用。收率1.61g(89％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.29(m，2H)，5.33(s，2H)，3.07(s，3H)(v)4-疊氮甲基-2，6-二氟芐腈將4-氰基-2，6-二氟芐基甲烷磺酸酯(1.61g，6.51mmol；見上步驟(iv))與疊氮化鈉(0.72g，0.0111mol)在10mL水與20mL DMF中的混合物在室溫下攪拌過夜。隨后將所得物倒入200mL水中，用二乙醚萃取三次。合并醚相，用水洗滌五次，干燥(Na2SO4)，蒸發。蒸發少量樣品供NMR分析，使產物結晶。小心地蒸發其余產物，但是不至完全干燥。基于NMR和分析型HPLC，假設收率(理論值1.26g)是幾乎定量的。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.29(m，2H)，4.46(s，2H)(vi)4-氨基甲基-2，6-二氟芐腈該反應是按照J.Chem.Res.(M)(1992)3128所述工藝進行的。向520mg 10％Pd/C(50％水)的20mL水懸液加入硼氫化鈉(0.834g，0.0221mol)的20mL水溶液。有一些氣體放出。將4-疊氮甲基-2，6-二氟芐腈(1.26g，6.49mmol；見上步驟(v))溶于50mL THF，歷經15分鐘在冰浴上加入到該含水混合物中。將混合物攪拌4小時，然后加入20mL2M HCl，使混合物通過Celite過濾。Celite用更多的水沖洗，合并水相，用EtOAc洗滌，隨后用2M NaOH調至堿性。然后用二氯甲烷萃取三次，合并有機相，用水洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發。收率0.87g(80％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.20(m，2H)，3.96(s，2H)，1.51(寬峰，2H)(vii)2，6-二氟-4-叔丁氧羰基氨基甲基芐腈將4-氨基甲基-2，6-二氟芐腈(0.876g，5.21mmol；見上步驟(vi))溶于50mL THF，加入二碳酸二叔丁酯(1.14g，5.22mmol)的10mL THF溶液。將混合物攪拌3.5小時。蒸發THF，使殘余物在水與EtOAc之間分配。將有機層用0.5M HCl和水洗滌三次，干燥(Na2SO4)，蒸發。產物無需進一步純化即可使用。收率1.38g(99％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.21(m，2H)，4.95(寬峰，1H)，4.43(寬峰，2H)，1.52(s，9H)(viii)Boc-Pab(2，6-二F)(OH)將2，6-二氟-4-叔丁氧羰基氨基甲基芐腈(1.38g，5.16mmol；見上步驟(vii))、鹽酸羥胺(1.08g，0.0155mol)與三乙胺(1.57g，0.0155mol)在20mL乙醇中的混合物在室溫下攪拌36小時。蒸發溶劑，使殘余物在水與二氯甲烷之間分配。將有機層用水洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發。產物無需進一步純化即可使用。收率1.43g(92％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.14(m，2H)，4.97(寬峰，1H)，4.84(寬峰，2H)，4.40(寬峰，2H)，1.43(s，9H)(ix)Boc-Pab(2，6-二F)x HOAc該反應是按照Judkins et al，Synth.Comm.(1998)4351所述工藝進行的。將Boc-Pab(2，6-二F)(OH)(1.32g，4.37mmol；見上步驟(viii))、乙酸酐(0.477g，4.68mmol)和442mg 10％Pd/C(50％水)在100mL乙酸中在5atm壓力下氫化3.5小時。使混合物通過Celite過濾，用乙醇沖洗，蒸發。將殘余物從乙腈和水和幾滴乙醇中冷凍干燥。小標題產物無需進一步純化即可使用。收率1.49g(99％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.45(m，2H)，4.34(s，2H)，1.90(s，3H)，1.40(s，9H)(x)Boc-Pab(2，6-二F)(Teoc)
向Boc-Pab(2，6-二F)x HOAc(1.56g，5.49mmol；見上步驟(ix))的100mL THF與1mL水溶液加入2-(三甲代甲硅烷基)乙基對-硝基苯基碳酸酯(1.67g，5.89mmol)。歷經5分鐘滴加碳酸鉀(1.57g，0.0114mol)的20mL水溶液。將混合物攪拌過夜。蒸發THF，使殘余物在水與二氯甲烷之間分配。水層用二氯甲烷萃取，合并有機相，用碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次，干燥(Na2SO4)，蒸發。經過硅膠快速色譜處理，用庚烷/EtOAc＝2/1洗脫，得到1.71g(73％)純化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43(m，2H)，4.97(寬峰，1H)，4.41(寬峰，2H)，4.24(m，2H)，1.41(s，9H)，1.11(m，2H)，0.06(s，9H)(xi)Boc-Aze-Pab(2，6-二F)(Teoc)將Boc-Pab(2，6-二F)(Teoc)(1.009g，2.35mmol；見上步驟(x))溶于50mL用HCl(g)飽和的EtOAc。將混合物放置10分鐘，蒸發，溶于18mL DMF，然后在冰浴上冷卻。加入Boc-Aze-OH(0.450g，2.24mmol)、PyBOP(1.24g，2.35mmol)和最后的二異丙基乙胺(1.158g，8.96mmol)。將反應混合物攪拌2小時，然后倒入350mL水中，用EtOAc萃取三次。合并有機相，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發。經過硅膠快速色譜處理，用庚烷∶EtOAc(1∶3)洗脫，得到1.097g(96％)所需化合物。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.46(m，2H)，4.65-4.5(m，3H)，4.23(m，2H)，3.87(m，1H)，3.74(m，1H)，2.45-2.3(m，2H)，1.40(s，9H)，1.10(m，2H)，0.05(s，9H)(xii)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-二F)(Teoc)將Boc-Aze-Pab(2，6-二F)(Teoc)(0.256g，0.500mmol；見上步驟(xi))溶于20mL用HCl(g)飽和的EtOAc。將混合物放置10分鐘，蒸發，溶于5mL DMF。加入Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.120g，0.475mmol；見上制備例A(viii))、PyBOP(0.263g，0.498mmol)和最后的二異丙基乙胺(0.245g，1.89mmol)。將反應混合物攪拌2小時，然后倒入350mL水中，用EtOAc萃取三次。合并有機相，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發。經過硅膠快速色譜處理，用EtOAc洗脫，得到0.184g(60％)所需小標題化合物。
1H NMR(400MHz，CD3OD，旋轉異構體混合物)δ7.55-7.45(m，2H)，7.32(m，1H，主要旋轉異構體)，7.27(m，1H，次要旋轉異構體)，7.2-7.1(m，2H)，6.90(t，1H，主要旋轉異構體)，6.86(t，1H，次要旋轉異構體)，5.15(s，1H，主要旋轉異構體)，5.12(m，1H，次要旋轉異構體)，5.06(s，1H，次要旋轉異構體)，4.72(m，1H，主要旋轉異構體)，4.6-4.45(m，2H)，4.30(m，1H，主要旋轉異構體)，4.24(m，2H)，4.13(m，1H，主要旋轉異構體)，4.04(m，1H，次要旋轉異構體)，3.95(m，1H，次要旋轉異構體)，2.62(m，1H，次要旋轉異構體)，2.48(m，1H，主要旋轉異構體)，2.22(m，1H，主要旋轉異構體)，2.10(m，1H，次要旋轉異構體)，1.07(m，2H)，0.07(m，9H)(xiii)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-二F)(OMe，Teoc)將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-二F)(Teoc)(64mg，0.099mmol；見上步驟(xii))與鹽酸O-甲基羥胺(50mg，0.60mmol)在4mL乙腈中的混合物在70℃下加熱3小時。蒸發溶劑，使殘余物在水與EtOAc之間分配。水層用EtOAc萃取兩次，合并有機相，用水洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發。產物無需進一步純化即可使用。收率58mg(87％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.90(bt，1H)，7.46(m，1H)，7.25-6.95(m，5H)，6.51(t，1H)，4.88(s，1H)，4.83(m，1H)，4.6-4.5(m，2H)，4.4-3.9(m，4H)，3.95(s，3H)，3.63(m，1H)，2.67(m，1H)，2.38(m，1H)，1.87(寬峰，1H)，0.98(m，2H)，0.01(s，9H)(xiv)化合物B將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-二F)(OMe，Teoc)(58mg，0.086mmol；見上步驟(xiii))溶于3mL TFA，在冰浴上冷卻，反應2小時。蒸發TFA，將殘余物溶于EtOAc。將有機層用碳酸鈉水溶液和水洗滌兩次，干燥(Na2SO4)，蒸發。將殘余物從水和乙腈中冷凍干燥，得到42mg(92％)標題化合物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.95(bt，1H)，7.2-7.1(m，4H)，6.99(m，1H)，6.52(t，1H)，4.88(s，1H)，4.85-4.75(m，3H)，4.6-4.45(m，2H)，4.29(寬峰，1H)，4.09(m，1H)，3.89(s，3H)，3.69(m，1H)，2.64(m，1H)，2.38(m，1H)，1.85(寬峰，1H)13C-NMR(100MHz；CDCl3)(羰基和/或脒碳)δ172.1，169.8，151.9
APCI-MS(M+1)＝533/535m/z制備例C化合物C的制備(i)(2-一氟乙基)甲烷磺酸酯在0℃氮下，向磁攪拌著的2-氟乙醇(5.0g，78.0mmol)的CH2Cl2(90mL)溶液加入三乙胺(23.7g，234mmol)和甲磺酰氯(10.7g，93.7mmol)。將混合物在0℃下攪拌1.5小時，用CH2Cl2(100mL)稀釋，用2N HCl(100mL)洗滌。水層用CH2Cl2(50mL)萃取，合并有機萃取液，用鹽水(75mL)洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮，得到小標題化合物(9.7g，88％)，為黃色的油，無需進一步純化即可使用。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.76(t，J＝4Hz，1H)，4.64(t，J＝4Hz，1H)，4.52(t，J＝4Hz，1H)，4.43(t，J＝4Hz，1H)，3.09(s，3H).
(ii)3-氯-5-一氟乙氧基苯甲醛在室溫氮下，向3-氯-5-羥基苯甲醛(8.2g，52.5mmol；見上制備例A(ii))與碳酸鉀(9.4g，68.2mmol)的DMF(10mL)溶液滴加(2-一氟乙基)甲烷磺酸酯(9.7g，68.2mmol；見上步驟(i))的DMF(120mL)溶液。將混合物加熱至100℃達5小時，然后在室溫下攪拌過夜。將反應物冷卻至0℃，倒入冰冷的2N HCl中，用EtOAc萃取。合并有機萃取液，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮。褐色的油經過硅膠色譜處理，用己烷∶EtOAc(4∶1)洗脫，得到小標題化合物(7.6g，71％)，為黃色的油。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.92(s，1H)，7.48(s，1H)，7.32(s，1H)，7.21(s，1H)，4.87(t，J＝4Hz，1H)，4.71(t，J＝3Hz，1H)，4.33(t，J＝3Hz，1H)，4.24(t，J＝3Hz，1H).
(iii)Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R，S)CH(OTMS)CN在0℃氮下，向3-氯-5-一氟乙氧基苯甲醛(7.6g，37.5mmol；見上步驟(ii))與碘化鋅(3.0g，9.38mmol)的CH2Cl2(310mL)溶液滴加三甲代甲硅烷基氰(7.4g，75.0mmol)。將混合物在0℃下攪拌3小時，在室溫下攪拌過夜。反應物用H2O(300mL)稀釋，分離有機層，干燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮，得到小標題化合物(10.6g，94％)，為褐色的油，無需進一步純化或鑒別即可使用。
(iv)Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R，S)CH(OH)C(O)OH
向Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R，S)CH(OTMS)CN(10.6g，5.8mmol；見上步驟(iii))加入濃鹽酸(100mL)，將溶液在100℃下攪拌3小時。冷卻至室溫后，將反應物進一步冷卻至0℃，用3N NaOH(～300mL)緩慢堿化，用Et2O洗滌(3×200mL)。將水層用2N HCl(80mL)酸化，用EtOAc萃取(3×300mL)。合并EtOAc萃取液，干燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮，得到小標題化合物(8.6g，98％)，為淡黃色固體，無需進一步純化即可使用。
Rf＝0.28(90∶8∶2 CHCl3∶MeOH∶濃NH4OH)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.09(s，1H)，7.02(s，1H)，6.93(s，1H)，5.11(s，1H)，4.77-4.81(m，1H)，4.62-4.65(m，1H)，4.25-4.28(m，1H)，4.15-4.18(m，1H).
(v)Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(S)CH(OAc)C(O)OH(a)和Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)OH(b)將Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R，S)CH(OH)C(O)OH(8.6g，34.5mmol；見上步驟(iv))與脂酶PS“Amano”(4.0g)的乙酸乙烯酯(250mL)與MTBE(250mL)溶液在70℃氮下加熱3天。將反應物冷卻至室溫，通過Celite過濾除去酶。濾餅用EtOAc洗滌，在真空中濃縮濾液。經過硅膠色譜處理，用CHCl3∶MeOH∶Et3N(90∶8∶2)洗脫，得到小標題化合物(a)的三乙胺鹽，為黃色的油。另外，得到小標題化合物(b)的三乙胺鹽(4.0g)。將小標題化合物(b)的鹽溶于H2O(250mL)，用2N HCl酸化，用EtOAc萃取(3×200mL)。合并有機萃取液，干燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮，得到小標題化合物(b)(2.8g，32％)，為黃色的油。
小標題化合物(b)的數據Rf＝0.28(90∶8∶2 CHCl3∶MeOH∶濃NH4OH)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.09(s，1H)，7.02(s，1H)，6.93(s，1H)，5.11(s，1H)，4.77-4.81(m，1H)，4.62-4.65(m，1H)，4.25-4.28(m，1H)，4.15-4.18(m，1H).
(vi)化合物C在0℃氮下，向Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)OH(818mg，3.29mmol；見上步驟(v))的DMF(30mL)溶液加入HAze-Pab(OMe).2HCl(1.43g，4.27mmol，參見國際專利申請WO00/42059)、PyBOP(1.89g，3.68mmol)和DIPEA(1.06g，8.23mmol)。將反應物在0℃下攪拌2小時，然后在室溫下攪拌過夜。在真空中濃縮混合物，殘余物經過硅膠色譜處理兩次，先用CHCl3∶EtOH(15∶1)洗脫，再用EtOAc∶EtOH(20∶1)洗脫，得到標題化合物(880mg，54％)。
Rf＝0.60(10∶1 CHCl3∶EtOH)1H NMR(300MHz，CD3OD，旋轉異構體的復雜混合物)δ7.58-7.60(d，J＝8Hz，2H)，7.34(d，J＝7Hz，2H)，7.05-7.08(m，2H)，6.95-6.99(m，1H)，5.08-5.13(m，1H)，4.77-4.82(m，1H)，4.60-4.68(m，1H)，3.99-4.51(m，7H)，3.82(s，3H)，2.10-2.75(m，2H).
13C-NMR(150MHz；CD3OD)(羰基和/或脒碳)δ173.3，170.8，152.5.
APCI-MS(M+1)＝493m/z.
制備例D化合物D的制備Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.045g，0.074mmol；見上制備例A(ix))溶于3mL TFA，反應1小時。蒸發TFA，將殘余物從水/乙腈中冷凍干燥，得到0.043g(100％)小標題化合物，為它的TFA鹽。
1H-NMR(400MHz；CD3OD)旋轉異構體δ7.8-7.75(m，2H)，7.55-7.5(m，2H)，7.35(m，1H，主要旋轉異構體)，7.31(m，1H，次要旋轉異構體)，7.19(m，1H，主要旋轉異構體)，7.15(m，1H)，7.12(m，1H，次要旋轉異構體)，6.89(t，1H，主要旋轉異構體)，6.87(t，1H，次要旋轉異構體)，5.22(m，1H，次要旋轉異構體)，5.20(s，1H，主要旋轉異構體)，5.13(s，1H，次要旋轉異構體)，4.80(m，1H，主要旋轉異構體)，4.6-4.4(m，2H)，4.37(m，1H，主要旋轉異構體)，4.19(m，1H，主要旋轉異構體)，4.07(m，1H，次要旋轉異構體)，3.98(m，1H，次要旋轉異構體)，2.70(m，1H，次要旋轉異構體)，2.55(m，1H，主要旋轉異構體)，2.29(m，1H，主要旋轉異構體)，2.15(m，1H，次要旋轉異構體)13C-NMR(100MHz；CD3OD)(羰基和/或脒碳，旋轉異構體)δ172.6，172.5，172.0，171.7，167.0MS(m/z)465(M-1)-，467(M+1)+制備例E化合物E的制備
Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-二F)將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-二F)(Teoc)(81mg，0.127mmol；見上制備例B(xii))溶于0.5mL二氯甲烷，在冰浴上冷卻。加入TFA(3mL)，將反應物放置75分鐘。蒸發TFA，將殘余物從水和乙腈中冷凍干燥。粗產物經過制備型RPLC純化，用CH3CN∶0.1M NH4OAc(35∶65)洗脫，得到39mg(55％)標題化合物，為它的HOAc鹽，純度99％。
1H NMR(400MHz，CD3OD，旋轉異構體混合物)δ7.5-7.4(m，2H)，7.32(m，1H，主要旋轉異構體)，7.28(m，1H，次要旋轉異構體)，7.2-7.1(m，3H)，6.90(t，1H，主要旋轉異構體)，6.86(t，次要旋轉異構體)，5.15(s，1H，主要旋轉異構體)，5.14(m，1H，次要旋轉異構體)，5.07(s，1H，次要旋轉異構體)，4.72(m，1H，主要旋轉異構體)，4.65-4.45(m，2H)，4.30(m，1H，主要旋轉異構體)，4.16(m，1H，主要旋轉異構體)，4.03(m，1H，次要旋轉異構體)，3.95(m，1H，次要旋轉異構體)，2.63(m，1H，次要旋轉異構體)，2.48(m，1H，主要旋轉異構體)，2.21(m，1H，主要旋轉異構體)，2.07(m，1H，次要旋轉異構體)，1.89(s，3H)13C-NMR(75MHz；CD3OD)(羰基和/或脒碳，旋轉異構體混合物)δ171.9，171.2，165.0，162.8，160.4APCI-MS(M+1)＝503/505 m/z.
制備例F化合物F的制備Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab x TFA(i)Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)在0℃氮下，向Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)OH(940mg，3.78mmol；見上制備例C(v))的DMF(30mL)溶液加入HAze-Pab(Teoc)-HCl(2.21g，4.91mmol)、PyBOP(2.16g，4.15mmol)和DIPEA(1.22g，9.45mmol)。將反應物在0℃下攪拌2小時，然后在室溫下攪拌4小時。在真空中濃縮混合物，殘余物經過硅膠色譜處理兩次，先用CHCl3∶EtOH(15∶1)洗脫，再用EtOAc∶EtOH(20∶1)洗脫，得到小標題化合物(450mg，20％)，為可粉碎的白色泡沫。
Mp80-88℃Rf＝0.60(10∶1 CHCl3∶EtOH)1H NMR(300MHz，CD3OD，旋轉異構體的復雜混合物)δ7.79(d，J＝8Hz，2H)，7.42(d，J＝8Hz，2H)，7.05-7.08(m，1H)，6.93-6.99(m，2H)，5.08-5.13(m，1H)，4.75-4.80(m，2H)，4.60-4.68(m，1H)，3.95-4.55(m，8H)，2.10-2.75(m，2H)，1.05-1.11(m，2H)，0.08(s，9H).
APCI-MS(M+1)＝607 m/z.
(ii)化合物F將Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.357g，0.589mmol；見上步驟(i))溶于10mL TFA，反應40分鐘。蒸發TFA，將殘余物從水/乙腈中冷凍干燥，得到0.33g(93％)標題化合物，為它的TFA鹽。
1H-NMR(600MHz；CD3OD)旋轉異構體δ7.8-7.7(m，2H)，7.54(d，2H)，7.08(s，1H，主要旋轉異構體)，7.04(s，1H，次要旋轉異構體)，6.99(s，1H，主要旋轉異構體)，6.95(s，1H)，6.92(s，1H，次要旋轉異構體)，5.18(m，1H，次要旋轉異構體)，5.14(s，1H，主要旋轉異構體)，5.08(s，1H，次要旋轉異構體)，4.80(m，1H，主要旋轉異構體)，4.73(m，1H)，4.65(m，1H)，4.6-4.4(m，2H)，4.35(m，1H，主要旋轉異構體)，4.21(多重峰的雙峰，2H)，4.12(m，1H，主要旋轉異構體)，4.06(m，1H，次要旋轉異構體)，3.99(m，1H，次要旋轉異構體)，2.69(m，1H，次要旋轉異構體)，2.53(m，1H，主要旋轉異構體)，2.29(m，1H，主要旋轉異構體)，2.14(m，1H，次要旋轉異構體).
13C-NMR(150MHz；CD3OD)(羰基和/或脒碳)δ172.8，172.1，167.4.
ESI-MS+(M+1)＝463(m/z)制備例G化合物G的制備Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)(i)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH，Teoc)將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.148g，0.24mmol；見上制備例A步驟(ix))溶于9mL乙腈，加入0.101g(1.45mmol)鹽酸羥胺。將混合物在70℃下加熱2.5小時，通過Celite過濾，蒸發。粗產物(0.145g；75％純)直接用于下一步，無需進一步純化。
(ii)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH，Teoc)(0.145g，0.23mmol；見上步驟(i))溶于0.5mL CH2Cl2和9mL TFA。使反應進行60分鐘。蒸發TFA，殘余物用制備型HPLC純化。匯集有關部分，冷凍干燥(2x)，得到72mg(兩步收率62％)標題化合物。
MS(m/z)482(M-1)-；484(M+1)+1H-NMR(400MHz；CD3OD)δ7.58(d，2H)，7.33(m，3H)，7.15(m，2H)，6.89(t，1H，主要旋轉異構體)，6.86(t，1H，次要旋轉異構體)，5.18(s，1H，主要旋轉異構體；和m，1H，次要旋轉異構體)，5.12(s，1H，次要旋轉異構體)，4.77(m，1H，主要旋轉異構體)，4.42(m，2H)，4.34(m，1H，主要旋轉異構體)，4.14(m，1H，主要旋轉異構體)，4.06(m，1H，次要旋轉異構體)，3.95(m，1H，次要旋轉異構體)，2.66(m，1H，次要旋轉異構體)，2.50(m，1H，主要旋轉異構體)，2.27(m，1H，主要旋轉異構體)，2.14(m，1H，次要旋轉異構體)13C-NMR(100MHz；CD3OD)(羰基和/或脒碳，旋轉異構體)δ172.4，172.3，172.0，1711.4，152.3，152.1制備例H化合物H的制備Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2，6-二F)(OH) (i)Boc-(S)Aze-NHCH2-Ph(2，6-二F，4-CN)將Boc-(S)Aze-OH(1.14g，5.6mmol)溶于45mL DMF。加入4-氨基甲基-2，6-二氟芐腈(1.00g，5.95mol，見上實施例1(xiv))、PyBOP(3.10g，5.95mmol)和DIPEA(3.95mL，22.7mmol)，將溶液在室溫下攪拌2小時。蒸發溶劑，使殘余物在H2O與EtOAc(各75mL)之間分配。水相用2×50mL EtOAc萃取，合并有機相，用鹽水洗滌，經Na2SO4干燥。快速色譜處理(SiO2，EtOAc/庚烷(3/1))得到小標題化合物(1.52g，77％)，為油，在冰箱中結晶。
1H-NMR(400MHz；CD3OD)δ7.19(m，2H)，4.65-4.5(m，3H)，3.86(m，1H)，3.73(m，1H)，2.45-2.3(m，2H)，1.39(s，9H)(ii)H-(S)Aze-NHCH2-Ph(2，6-二F，4-CN)xHCl將Boc-(S)Aze-NHCH2-Ph(2，6-二F，4-CN)(0.707g，2.01mmol，見上步驟(i))溶于60mL用HCl(g)飽和的EtOAc。在室溫下攪拌15分鐘后，蒸發溶劑。將殘余物溶于CH3CN/H2O(1/1)，冷凍干燥，得到小標題化合物(0.567g，98％)，為灰白色無定形粉末。
1H-NMR(400MHz；CD3OD)δ7.49(m，2H)，4.99(m，1H)，4.58(m，2H)，4.12(m，1H)，3.94(m，1H)，2.80(m，1H)，2.47(m，1H)MS(m/z)252.0(M+1)+(iii)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-NHCH2-Ph(2，6-二F，4-CN)將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.40g，1.42mmol，見上實施例1(viii))溶于10mL DMF，加入H-(S)Aze-NHCH2-Ph(2，6-二F，4-CN)x HCl(0.43g，1.50mmol，見上步驟(ii))和PyBOP(0.779g，1.50mmol)，繼之以DIPEA(1.0mL，5.7mmol)。在室溫下攪拌2小時后，蒸發溶劑。使殘余物在H2O(200mL)與EtOAc(75mL)之間分配。水相用2×75mL EtOAc萃取，合并有機相，用鹽水洗滌，經Na2SO4干燥。經過快速色譜處理(SiO2，EtOAc/庚烷(4/1))，得到小標題化合物(0.56g，81％)，為油。
1H-NMR(400MHz；CD3OD)旋轉異構體δ7.43(m，2H)，7.31(m，1H，主要旋轉異構體)，7.26(m，1H，次要旋轉異構體)，7.2-7.1(m，2H)，6.90(t，1H，主要旋轉異構體)，6.86(t，1H，次要旋轉異構體)，5.14(s，1H，主要旋轉異構體)，5.11(m，1H，次要旋轉異構體)，5.04(s，1H，次要旋轉異構體)，4.71(m，1H，主要旋轉異構體)，4.6-4.45(m，2H)，4.30(m，1H，主要旋轉異構體)，4.2-3.9(m，1H；和1H，次要旋轉異構體)，2.62(m，1H，次要旋轉異構體)，2.48(m，1H，主要旋轉異構體)，2.21(m，1H，主要旋轉異構體)，2.09(m，1H，次要旋轉異構體)13C-NMR(100MHz；CD3OD)(羰基碳)δ171.9，171.8MS(m/z)484.0，485.9(M-1)-，486.0，487.9(M+1)+(iv)Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-二F)(OH)將Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-NHCH2-Ph(2，6-二F，4-CN)(0.555g，1.14mmol，來自上步(iii))溶于10mL EtOH(95％)。向該溶液加入鹽酸羥胺(0.238g，3.42mmol)和Et3N(0.48mL，3.44mmol)。在室溫下攪拌14小時后，除去溶劑，將殘余物溶于EtOAc。將有機相用鹽水和H2O洗滌，經Na2SO4干燥。粗產物經過制備型RPLC純化，使用CH3CN0.1M NH4OAc作為洗脫劑，冷凍干燥后得到標題化合物，為無定形粉末(0.429g，72％)。
1H-NMR(400MHz；CD3OD)旋轉異構體δ7.35-7.1(m，5H)，6.90(t，1H，主要旋轉異構體)，6.85(t，1H，次要旋轉異構體)，5.15(s，1H，主要旋轉異構體)，5.12(m，1H，次要旋轉異構體)，5.08(s，1H，次要旋轉異構體)，4.72(m，1H，主要旋轉異構體)，4.6-4.4(m，2H)，4.30(m，1H，主要旋轉異構體)，4.12(m，1H，主要旋轉異構體)，4.04(m，1H，次要旋轉異構體)，3.94(m，1H，次要旋轉異構體)，2.62(m，1H，次要旋轉異構體)，2.48(m，1H，主要旋轉異構體)，2.22(m，1H，主要旋轉異構體)，2.10(m，1H，次要旋轉異構體)13C-NMR(100MHz；CD3OD)(羰基和脒碳，旋轉異構體)δ172.4，171.9，171.0，152.3，151.5MS(m/z)517.1，519.0(M-1)-，519.1，521.0(M+1)+制備例J化合物J的制備Ph(3-Cl)(5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)(i)Ph(3-Cl)(5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Z)將Boc-Aze-Pab(Z)(參見國際專利申請WO 97/02284，92mg，0.197mmol)溶于10mL用HCl(g)飽和的EtOAc，反應10分鐘。蒸發溶劑，將殘余物與Ph(3-Cl)(5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH(50mg，0.188mmol；見上制備例C(v))、PyBOP(109mg，0.209mmol)、最后與二異丙基乙胺(96mg，0.75mmol)混合在2mL DMF中。將混合物攪拌2小時，然后倒入50mL水中，用EtOAc萃取三次。合并有機相，用水洗滌，干燥(Na2SO4)，蒸發。粗產物經過硅膠快速色譜處理，用EtOAc∶MeOH(9∶1)洗脫。收率100mg(87％)。
1H-NMR(300MHz；CD3OD，旋轉異構體混合物)δ7.85-7.75(m，2H)，7.45-7.25(m，7H)，7.11(m，1H，主要旋轉異構體)，7.08(m，1H，次要旋轉異構體)，7.05-6.9(m，2H)，6.13(bt，1H)，5.25-5.05(m，3H)，4.77(m，1H，部分被CD3OH信號隱藏)，4.5-3.9(m，7H)，2.64(m，1H，次要旋轉異構體)，2.47(m，1H，主要旋轉異構體)，2.25(m，1H，主要旋轉異構體)，2.13(m，1H，次要旋轉異構體)(ii)Ph(3-Cl)(5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)將鹽酸羥胺(65mg，0.94mmol)與三乙胺(0.319g，3.16mmol)混合在8mL THF中，在40℃下聲波處理1小時。加入Ph(3-Cl)(5-OCH2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Z)(96mg，0.156mmol；見上步驟(i))和8mL更多的THF。將混合物在40℃下攪拌4.5天。蒸發溶劑，粗產物經過制備型RPLC純化，用CH3CN∶0.1M NH4OAc(40∶60)洗脫。收率30mg(38％)。純度99％。
1H-NMR(300MHz；CD3OD，旋轉異構體混合物)δ7.6-7.55(m，2H)，7.35-7.3(m，2H)，7.12(m，1H，主要旋轉異構體)，7.09(m，1H，次要旋轉異構體)，7.05-6.9(m，2H)，6.15(多重峰的三重峰，1H)，5.15(m，1H，次要旋轉異構體)，5.13(s，1H，主要旋轉異構體)，5.08(s，1H，次要旋轉異構體)，4.77(m，1H，主要旋轉異構體)，4.5-4.2(m，5H)，4.08(m，1H，主要旋轉異構體)，3.97(m，1H，次要旋轉異構體)，2.66(m，1H，次要旋轉異構體)，2.50(m，1H，主要旋轉異構體)，2.27(m，1H，主要旋轉異構體)，2.14(m，1H，次要旋轉異構體).
13C-NMR(100MHz；CD3OD)(羰基和/或脒碳，旋轉異構體混合物)δ172.8，172.2，171.4，159.1，158.9，154.2.
APCI-MS(M+1)＝497/499 m/z方法1和2化合物A的鹽的制備方法1鹽制備的一般方法采用下列一般方法制備化合物A的鹽將200mg化合物A(見上制備例A)溶于5mL MeOH。向該溶液加入有關酸(1.0摩爾當量)的5mL MeOH溶液。在室溫下攪拌10分鐘后，借助旋轉蒸發器除去溶劑。將剩余固體重新溶于8mL乙腈∶H2O(1∶1)。在每種情況下冷凍干燥得到無色無定形產物。
所采用的酸(1S)-(+)-10-樟腦磺酸蘋果酸環己氨基磺酸磷酸二甲基磷酸對-甲苯磺酸L-賴氨酸鹽酸L-賴氨酸糖精酸甲烷磺酸鹽酸適當的鑒別數據如表1所示。
表1
所有在這種方法中生成的鹽都是無定形的。
方法2從下列酸開始，利用類似于上述方法1所述的技術制備化合物A的其他無定形鹽氫溴酸(1∶1鹽)鹽酸(1∶1鹽)硫酸(1∶0.5鹽)1，2-乙烷二磺酸(1∶0.5鹽)1S-樟腦磺酸(1∶1鹽)(+/-)-樟腦磺酸(1∶1鹽)乙烷磺酸(1∶1鹽)硝酸(1∶1鹽)甲苯磺酸(1∶1鹽)甲烷磺酸(1∶1鹽)對-二甲苯磺酸(1∶1鹽)2-磺酸(1∶1鹽)1，5-萘磺酸(1∶0.5鹽)萘磺酸(1∶1鹽)苯磺酸(1∶1鹽)糖精酸(1∶1鹽)馬來酸(1∶1鹽)磷酸(1∶1鹽)D-谷氨酸(1∶1鹽)L-谷氨酸(1∶1鹽)D，L-谷氨酸(1∶1鹽)L-精氨酸(1∶1鹽)L-賴氨酸(1∶1鹽)鹽酸L-賴氨酸(1∶1鹽)甘氨酸(1∶1鹽)水楊酸(1∶1鹽)酒石酸(1∶1鹽)富馬酸(1∶1鹽)檸檬酸(1∶1鹽)L-(-)-蘋果酸(1∶1鹽)D，L-蘋果酸(1∶1鹽)
D-葡糖酸(1∶1鹽)方法3無定形化合物A乙烷磺酸鹽的制備將化合物A(203mg；見上制備例A)溶于乙醇(3mL)，向該溶液加入乙烷磺酸(1eq.，95％，35μL)。將混合物攪拌幾分鐘，然后蒸發溶劑。將所得油懸浮在異辛烷中，蒸發至干，直至得到固體產物。最后，將該物質重新懸浮在異辛烷中，再次蒸發溶劑，得到白色干燥的無定形固體。在40℃真空下干燥過夜。
方法4至9結晶性化合物A乙烷磺酸鹽的制備方法4無定形產物的結晶將無定形化合物A乙烷磺酸鹽(17.8mg；見上方法3)懸浮在甲基異丁基酮(600μL)中。1周后，觀察到結晶性針狀物，濾出，風干。
方法5至7結晶反應(沒有反溶劑)方法5將化合物A(277mg；見上制備例A)溶于甲基異丁基酮(3.1mL)。加入乙烷磺酸(1eq.，95％，48μL)。立即發生無定形乙烷磺酸鹽的沉淀。加入更多的甲基異丁基酮(6mL)，將漿液用超聲波處理。最后，加入第三部分的甲基異丁基酮(3.6mL)，然后將漿液放置過夜，同時攪拌(磁攪拌器)。第二天，該物質已經轉化為結晶性針狀物。濾出漿液，用甲基異丁基酮(0.5mL)洗滌，風干。
方法6將化合物A(236mg；見上制備例A)在室溫下溶于甲基異丁基酮(7mL)。將乙烷磺酸(1eq.，41μL)與2mL甲基異丁基酮混合在小瓶中。向化合物A的溶液接種結晶性化合物A乙烷磺酸鹽(見上方法4和5)。然后，歷經45分鐘分批加入250μL乙烷磺酸的甲基異丁基酮溶液。再次接種溶液，提高溫度至30℃。然后，歷經大約1小時加入500μL甲基異丁基酮溶液。將所得漿液放置過夜，然后歷經20分鐘加入最后一批甲基異丁基酮/酸溶液。將小瓶用1.5mL甲基異丁基酮沖洗，加入到漿液中。另外6小時后，濾出晶體，用甲基異丁基酮(2mL)洗滌，在40℃減壓下干燥。得到總計258mg結晶性鹽，相當于收率大約87％。
方法7將化合物A(2.36g；見上制備例A)溶于甲基異丁基酮(90mL)。向該溶液加入化合物A乙烷磺酸鹽(見上方法4至6)的晶種(10mg)，然后分兩批加入乙烷磺酸(40TL)。然后加入另外的晶種(12mg)和兩批乙烷磺酸(2×20μL)。將漿液用甲基異丁基酮(15mL)稀釋，然后繼續加入乙烷磺酸。歷經1小時分批加入總計330μL的乙烷磺酸。加入少量晶種，最后將漿液放置過夜，同時攪拌。第二天，濾出晶體，用甲基異丁基酮洗滌(2×6mL)，在40℃減壓下干燥。干燥后，得到總計2.57g的白色結晶性產物，相當于收率89％。
方法8和9結晶反應(含有反溶劑)方法8將化合物A(163mg；見上制備例A)溶于異丙醇(1.2mL)。將該溶液加熱至35℃。加入乙烷磺酸(28μL)。然后加入乙酸乙酯(4.8mL)，向溶液接種結晶性化合物A乙烷磺酸鹽(見上方法4至7)。幾乎立即開始結晶。將漿液在35℃下放置約80分鐘，然后冷卻至環境溫度(21℃)。兩小時后，濾出晶體，用乙酸乙酯洗滌三次(3×0.4mL)，在40℃減壓下干燥。得到總計170mg的結晶性標題產物，相當于收率大約82％。
方法9將化合物A(20.0g；見上制備例A)溶于40℃異丙醇(146.6mL)，向該溶液加入乙烷磺酸(3.46mL，95％，1eq.)。向所得澄清的溶液加入化合物A乙烷磺酸鹽的晶種(50mg；見上方法4至8)。然后歷經10分鐘加入乙酸乙酯(234mL)。向所得略微不透明的溶液再一次接種(70mg)，在40℃下放置1小時，同時攪拌，使結晶開始。此后，歷經1小時以恒定速率加入總計352mL的乙酸乙酯。當已經加入全部乙酸乙酯后，將漿液放置1小時，然后歷經2小時冷卻至21℃。使結晶在21℃下繼續1小時，然后濾出晶體，用乙酸乙酯洗滌兩次(50mL+60mL)，最后在40℃減壓下干燥過夜。得到總計21.6g的白色結晶性鹽，相當于收率大約90％。
化合物A乙烷磺酸鹽用NMR鑒別如下將23mg鹽溶于氘代甲醇(0.7mL)troscopy。采用1D(1H，13C和選擇性NOE)與2D(gCOSY，gHSQC和gHMBC)NMR實驗的組合。全部數據與鹽的理論結構吻合良好，如下所示。分子在甲醇中以兩種構型存在。基于稱為H5(優勢構象異構體)的峰和稱為H5’(其他構象異構體)的峰的整合，發現兩種構象異構體之比為70∶30。不能觀察到H22，因為這些質子被溶劑CD3OD迅速置換。
對應于1-位的質子和碳共振都因與兩個氟核在該位置的自旋-偶合而分裂。偶合常數為2JHF＝73Hz和1JCF＝263Hz。
1H和13C NMR化學漂移值和質子-質子相關性如表2所示。
表2
a相對于49.0ppm的溶劑共振而言b相對于3.30ppm的溶劑共振而言cs＝單峰，t＝三重峰，m＝多重峰，br＝寬峰，d＝雙峰d在gCOSY實驗中獲得
e由于與兩個氟核偶合，共振是三重峰。1JCF＝263HzC24H29ClF2N4O8S的HRMS(M-H)-計算值605.1284，實測值605.1296。
用XRPD分析化合物A乙烷磺酸鹽晶體(借助一種或多種上述方法4至9得到)，結果列表如下(表3)，并且如

圖1所示。
表3
DSC顯示為吸熱，推斷熔化起始溫度為約131℃。TGA顯示在熔點附近質量減少約0.2％(w/w)。利用較低溶劑含量的樣品重復DSC分析，顯示熔化起始溫度為約144℃。
方法10無定形化合物A苯磺酸鹽的制備將化合物A(199mg；見上制備例A)溶于乙醇(2mL)。在小瓶中，將苯磺酸(1eq.，90％，70mg)溶于乙醇(1mL)。將酸的乙醇溶液加入到化合物A的溶液中，將小瓶用1mL乙醇沖洗，然后也加入到混合物中。將混合物攪拌幾分鐘，然后蒸發乙醇，直至生成油。加入乙酸乙酯(3mL)，再次蒸發溶劑至干。生成無定形固體。
方法11至13結晶性化合物A苯磺酸鹽的制備方法11無定形產物的結晶將無定形化合物A苯磺酸鹽(20.7mg；見上方法10)懸浮在乙酸乙酯(600μL)中。5天后，在漿液中觀察到結晶性針狀物。
方法12和13結晶反應方法12將化合物A(128mg；見上制備例A)溶于乙酸乙酯(3mL)。向該溶液接種上述方法11的漿液。然后加入苯磺酸(1eq.，90％，45mg)。立即發生苯磺酸鹽的沉淀。向漿液加入異丙醇(0.8mL)，再次向混合物接種。兩天后，該物質已經轉化為結晶性針狀物。濾出漿液，用乙酸乙酯洗滌(3×0.2mL)，在40℃真空下干燥很短時間。得到總計大約140mg的白色固體。
方法13將化合物A(246mg；見上制備例A)溶于異丙醇(1.52mL)。加入苯磺酸(88mg，90％)。向該澄清的溶液加入乙酸乙酯(3mL)，然后向混合物接種，引發結晶。1小時后，加入更多的乙酸乙酯(2.77mL)。最后使漿液結晶過夜，然后濾出晶體，用乙酸乙酯洗滌(3×0.3mL)，在40℃真空下干燥。得到總計279mg的鹽，相當于收率大約86％。
化合物A苯磺酸鹽用NMR鑒別如下將20mg鹽溶于氘代甲醇(0.7mL)。采用1D(1H，13C和選擇性NOE)與2D(gCOSY，gHSQC和gHMBC)NMR實驗的組合。全部數據與鹽的理論結構吻合良好，如下所示。分子在甲醇中以兩種構型存在。基于稱為H12(優勢構象異構體)的峰和稱為H12’(其他構象異構體)的峰的整合，發現兩種構象異構體之比為70∶30。不能觀察到H22，因為這些質子被溶劑CD3OD迅速置換。
對應于1-位的質子和碳共振都因與兩個氟核在該位置的自旋-偶合而分裂。偶合常數為2JHF＝74Hz和1JCF＝260Hz。
1H和13C NMR化學漂移值和質子-質子相關性如表4所示。
表4
a相對于49.0ppm的溶劑共振而言b相對于3.30ppm的溶劑共振而言cs＝單峰，t＝三重峰，m＝多重峰，br＝寬峰，d＝雙峰d在gCOSY實驗中獲得e由于與兩個氟核偶合，共振是三重峰。1JCF＝260Hzf由于共振102與103之間的重疊，連通性難以測定C28H29ClF2N4O8S的HRMS(M-H)-計算值653.1284，實測值653.1312。
用XRPD分析化合物A苯磺酸鹽晶體(借助一種或多種上述方法11至13得到)，結果列表如下(表5)，并且如圖2所示。
表5
DSC顯示為吸熱，推斷熔化起始溫度為約152℃。TGA顯示在熔點附近質量減少約0.1％(w/w)。
方法14無定形化合物A正丙烷磺酸鹽的制備將化合物A(186mg；見上制備例A)溶于異丙醇(1.39mL)，加入正丙烷磺酸(1eq.，95％，39μL)。加入乙酸乙酯(5.6mL)，蒸發溶劑，直至生成干燥的無定形固體。
方法15和16結晶性化合物A正丙烷磺酸鹽的制備方法15無定形產物的結晶將無定形化合物A正丙烷磺酸鹽(20mg；見上方法14)溶于異丙醇(60μL)，加入乙酸異丙酯(180μL)。3天后觀察到結晶性針狀物。
方法16結晶反應將化合物A(229mg；見上制備例A)溶于異丙醇(1.43mL)。加入正丙烷磺酸(1eq.，95％，48μL)。加入乙酸乙酯(2mL)，然后向溶液接種來自上述方法15的結晶性鹽。加入更多的乙酸乙酯(5mL)，使漿液結晶過夜。濾出晶體，用乙酸乙酯洗滌(3×0.3mL)，在40℃真空下干燥。
化合物A正丙烷磺酸鹽用NMR鑒別如下將13mg鹽溶于氘代甲醇(0.7mL)troscopy。采用1D(1H，13C)與2D(gCOSY)NMR實驗的組合。全部數據與鹽的理論結構吻合良好，如下所示。分子在甲醇中以兩種構型存在。基于稱為H12(優勢構象異構體)的峰和稱為H12’(其他構象異構體)的峰的整合，發現兩種構象異構體之比為65∶35。不能觀察到H22，因為這些質子被溶劑CD3OD迅速置換。
對應于1-位的質子和碳共振都因與兩個氟核在該位置的自旋-偶合而分裂。偶合常數為2JHF＝74Hz和1JCF＝260Hz。
1H和13C NMR化學漂移值和質子-質子相關性如表6所示。
表6
a相對于49.0ppm的溶劑共振而言b相對于3.30ppm的溶劑共振而言cs＝單峰，t＝三重峰，m＝多重峰，br＝寬峰，d＝雙峰d在gCOSY實驗中獲得e由于與兩個氟核偶合，共振是三重峰。1JCF＝260HzC25H31ClF2N4O8S的HRMS(M-H)-計算值619.1441，實測值619.1436。
用XRPD分析化合物A正丙烷磺酸鹽晶體(借助一種或多種上述方法15和16得到)，結果列表如下(表7)，并且如圖3所示。
表7
DSC顯示為吸熱，推斷熔化起始溫度為約135℃。TGA顯示在熔點附近質量沒有減少。
方法17方法17-A無定形化合物A正丁烷磺酸鹽的制備將無定形化合物A(277mg)溶于IPA(1.77mL)，加入丁烷磺酸(大約1eq.，70μL)。加入乙酸乙酯(6mL)，蒸發溶劑直至生成干燥的無定形固體。
方法17-B結晶性化合物A丁烷磺酸鹽的制備將無定形化合物丁烷磺酸鹽(71.5mg；見上制備例)懸浮在乙酸乙酯(500μL)中過夜。濾出晶體，風干。
化合物A丁烷磺酸鹽用NMR鑒別如下將21.6mg鹽溶于氘代二甲基亞砜(0.7mL)，用1H和13C NMR光譜進行研究。
光譜與同一化合物的其他鹽是非常相似的，與下示結構吻合良好。光譜中的大多數共振以一組兩個峰存在，這是由于C9-N10鍵附近的緩慢旋轉，導致在溶液中同時存在兩種阻轉異構體。同一化合物的其他鹽也顯示這一點。
1-位的兩個氟核引起該位置質子和碳的分裂共振。偶合常數為2JHF＝73Hz和1JCF＝258Hz。
質子和碳的化學漂移列在表1中。由于化學置換沒有檢測到22和24位質子。在質子光譜中對應于這些質子的8與9ppm之間存在非常寬的隆起。
表8化合物A正丁烷磺酸鹽在25℃氘代二甲基亞砜中的1H和13CNMR化學漂移值
a相對于49.0ppm的溶劑共振而言b相對于3.30ppm的溶劑共振而言cs＝單峰，t＝三重峰，m＝多重峰，br＝寬峰，d＝雙峰d由于與兩個氟核偶合，共振是三重峰。1JCF＝258Hze與間位質子的4JHH偶合未被完全解析na＝不可用，nd＝未測定C26H32ClF2N4O8S的HRMS(M-H)-計算值633.1597，實測值633.1600。
用XRPD分析化合物A正丁烷磺酸鹽晶體(如上方法17-B所述得到)，結果列表如下(表9)，并且如圖4所示。
表9
DSC顯示為吸熱，推斷熔化起始溫度為約118℃，TGA顯示0.04％重量損失。
方法18化合物B的鹽的制備方法18-A鹽制備的一般方法采用下列一般方法制備化合物B的鹽將200mg化合物B(見上制備例B)溶于5mL MIBK(甲基異丁基酮)。向該溶液加入有關酸(1.0或0.5摩爾當量，如表10所示)的1.0mL MIBK溶液。在室溫下攪拌10分鐘后，借助旋轉蒸發器除去溶劑。將剩余固體產物重新溶于約8mL乙腈∶H2O(1∶1)。在每種情況下冷凍干燥得到無色無定形產物。
所采用的酸乙烷磺酸鹽(乙烷磺酸)苯磺酸鹽(苯磺酸)環己氨基磺酸鹽硫酸鹽溴化物對-甲苯磺酸鹽2-萘磺酸鹽半硫酸鹽甲烷磺酸鹽硝酸鹽鹽酸鹽適當的鑒別數據如表10所示。
表10
所有在本實施例中生成的鹽都是無定形的。
方法18-B從下列酸開始，利用類似于上述方法18-A所述的技術制備化合物B的其他無定形鹽1，2-乙烷二磺酸(0.5鹽)1S-樟腦磺酸(+/-)-樟腦磺酸對-二甲苯磺酸2-磺酸糖精酸馬來酸磷酸D-谷氨酸L-精氨酸L-賴氨酸
L-賴氨酸*HCl方法18-C無定形化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽的制備將無定形化合物B(110.9mg)溶于2.5mL 2-丙醇，加入0.5當量1，5-萘二磺酸四水合物(溶于1mL 2-丙醇)。將樣品攪拌過夜。借助顯微鏡觀察到僅有少量粒子(無定形)或油滴。將樣品蒸發至干。
方法18-D結晶性化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽的制備結晶實驗是在環境溫度下進行的。將無定形化合物B(0.4g)溶于乙醇(1.5mL)，加入0.5eq 1.5-萘二磺酸四水合物(1.35g，10％乙醇溶液)。然后加入庚烷(0.7mL)，直至溶液變為輕微渾濁。約15分鐘后，溶液變為渾濁。約30分鐘后，得到稀薄的漿液，加入另外的庚烷(1.3mL)。然后將漿液放置過夜使成熟。為了稀釋濃稠的漿液，加入乙醇與庚烷的混合物(分別為1.5mL和1.0mL)。約1小時后過濾漿液，將晶體用乙醇與庚烷的混合物(1.5∶1)洗滌，最后用純庚烷洗滌。將晶體在環境溫度下干燥1天。干燥晶體重0.395g。
方法18-E結晶性化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽的制備將無定形化合物B(1.009g)溶于20mL 2-丙醇+20mL乙酸乙酯。逐滴加入351.7mg 1，5-萘二磺酸四水合物的20mL 2-丙醇溶液。在約5分鐘內發生沉淀。將漿液攪拌過夜，然后過濾。
方法18-F結晶性化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽的制備將430.7mg 1，5-萘二磺酸鹽溶于30mL 1-丙醇。將溶液加熱至沸騰，目的是使物質溶解。將溶液在環境溫度下放置過夜使結晶，然后濾出晶體。
方法18-G結晶性化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽的制備蒸發來自方法18-F的母液，將其余固體(61.2mg)溶于6mL乙腈/1-丙醇(2∶1)。將溶液在環境溫度下放置過夜使結晶，然后濾出晶體。
方法18-H結晶性化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽的制備將來自方法18-C的樣品溶于約2mL甲醇。在環境溫度下加入乙醇(約3mL)為反溶劑，加入晶種。沒有發生結晶，因此蒸發溶劑(約一半體積)，加入新的乙醇(約2mL)和晶種。在環境溫度下攪拌過夜后生成結晶性粒子。
方法18-I結晶性化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽的制備將無定形化合物B(104.1mg)溶于2-丙醇，加入1當量1，5-萘二磺酸四水合物的2-丙醇溶液。2-丙醇的總量為約2.5mL。將溶液在44℃下攪拌約80分鐘，生成沉淀。根據偏振光顯微鏡，粒子結晶。將樣品過濾。
方法18-J結晶性化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽的制備將化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽(56.4mg)溶于1.5mL甲醇。加入甲乙酮(3mL)。向該溶液加入晶種，開始結晶。濾出晶體，用甲乙酮洗滌，風干。
方法18-K結晶性化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽的制備將無定形化合物B(161.0mg)溶于3.5mL 1-丁醇，將該溶液加熱至40℃。在另一只燒杯中，將57.4mg萘二磺酸四水合物溶于3mL 1-丁醇。向化合物B的溶液加入幾滴酸溶液。然后向溶液加入晶種，2小時后緩慢加入其余酸溶液(40℃)。然后緩慢降低溫度至室溫，攪拌過夜。將漿液過濾，用1-丁醇洗滌，在44℃真空下干燥2小時。收率為83％。
鑒別用NMR鑒別借助上述方法18-D所得化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽晶體如下將21.3mg鹽溶于氘代甲醇(0.7mL)，用NMR光譜進行研究。采用1D(1H，13C和選擇性NOE)與2D(gCOSY，gHSQC和gHMBC)NMR實驗的組合。全部數據與鹽的理論結構吻合良好，如下所示。測定了所有碳和與碳連接的質子。與雜原子連接的質子被溶劑中的氘置換，沒有檢測。1D1H和13C NMR光譜中的大多數共振以一組兩個峰存在。其原因是C9-N10鍵附近的緩慢旋轉，這導致在溶液中同時存在兩種阻轉異構體。1D NOE實驗是其證據。當一種阻轉異構體的共振被照射時，飽和度轉移至其他阻轉異構體的對應峰。對應于1，5-萘二磺酸鹽抗衡離子的共振不顯示阻轉異構現象。

在分子中存在四個氟原子。它們引起一些質子和碳的分裂共振。對應于1-位的質子和碳共振都因與兩個氟核在該位置的自旋-偶合而分裂。偶合常數為2JHF＝73Hz和1JCF＝263Hz。進而，對應于H19的質子共振是畸變的雙峰，3JHF＝6.9Hz，這是由于與18-位氟核的自旋-偶合。對應于C17、C18、C19和C20的碳共振也表現與這些氟核的偶合。C17和C20共振是三重峰，2JCF＝19Hz，3JCF＝11Hz。C18共振是雙重雙峰，1JCF＝251Hz，3JCF＝8Hz。C19共振是多重峰。
對比對應于1，5-萘二磺酸鹽抗衡離子和母體化合物的共振整合幅度，得到單一1，5-萘二磺酸鹽抗衡離子與兩分子母體化合物結晶的化學計量關系。
1H和13C NMR化學漂移值和質子-質子相關性如表11所示。
表11
a相對于49.0ppm的溶劑共振而言b相對于3.30ppm的溶劑共振而言cs＝單峰，t＝三重峰，m＝多重峰，br＝寬峰，d＝雙峰d在gCOSY實驗中獲得e由于與兩個氟核F1偶合，共振是三重峰。1JCF＝263Hzf由于與兩個氟核F18偶合，共振是三重峰。2JCF＝19Hzg由于與兩個氟核F18偶合，共振是雙重雙峰。1JCF＝251Hz，3JCF＝8Hzh由于與兩個氟核F18偶合，共振是多重峰i由于與兩個氟核F18偶合，共振是三重峰。3JCF＝11Hzj與間位質子的4JHH偶合未被完全解析na＝不可用，nd＝未測定用XRPD分析化合物B半-1，5-萘二磺酸鹽晶體(借助上述方法18-I得到)，結果列表如下(表12)，并且如圖5所示。
表12
DSC顯示為吸熱，推斷熔化起始溫度為約183℃，TGA顯示在25-110℃之間有0.3％重量損失。
縮寫Ac ＝ 乙酰基APCI ＝ 大氣壓化學電離(關于MS)API＝ 大氣壓電離(關于MS)aq.＝ 含水Aze(&(S)-Aze) ＝ (S)-氮雜環丁烷-2-羧酸酯(另有指定除外)Boc＝ 叔丁氧羰基br ＝ 寬峰(關于NMR)CI ＝ 化學電離(關于MS)d ＝ 天d ＝ 雙峰(關于NMR)DCC＝ 二環己基碳二亞胺dd ＝ 雙重雙峰(關于NMR)DIBAL-H＝ 氫化二異丁基鋁DIPEA ＝ 二異丙基乙胺DMAP ＝ 4-(N，N-二甲氨基)吡啶DMF＝ N，N-二甲基甲酰胺DMSO ＝ 二甲基亞砜DSC＝ 示差掃描量熱法DVT＝ 深靜脈血栓EDC＝ 鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺eq.＝ 當量ES ＝ 電子噴霧ESI＝ 電子噴霧界面Et ＝ 乙基醚 ＝ 二乙醚EtOAc ＝ 乙酸乙酯EtOH ＝ 乙醇Et2O ＝ 二乙醚HATU ＝ O-(氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽HBTU＝ [N，N，N’，N’-四甲基-O-(苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸鹽]HCl ＝ 氫氯酸、氯化氫氣體或鹽酸鹽(因上下文而異)Hex ＝ 己烷HOAc＝ 乙酸HPLC＝ 高效液相色譜LC ＝ 液相色譜m ＝ 多重峰(關于NMR)Me ＝ 甲基MeOH＝ 甲醇min ＝ 分鐘MS ＝ 質譜MTBE＝ 甲基叔丁基醚NMR ＝ 核磁共振OAc ＝ 乙酸鹽Pab ＝ 對-脒基芐氨基H-Pab ＝ 對-脒基芐胺Pd/C＝ 披鈀碳Ph ＝ 苯基PyBOP ＝ (苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基鏻六氟磷酸鹽q ＝ 四重峰(關于NMR)QF ＝ 氟化四丁基銨rt/RT ＝ 室溫s ＝ 單峰(關于NMR)t ＝ 三重峰(關于NMR)TBTU＝ [N，N，N’，N’-四甲基-O-(苯并三唑-1-基)脲鎓四氟硼酸鹽TEA ＝ 三乙胺Teoc＝ 2-(三甲代甲硅烷基)乙氧羰基TEMPO ＝ 2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧基游離基TFA ＝ 三氟乙酸
TGA ＝ 熱重量分析THF ＝ 四氫呋喃TLC ＝ 薄層色譜UV ＝ 紫外前綴n-、s-、i-、t-和tert-具有它們的通常含義正、仲、異和叔。
下列實施例闡述但決不限制本發明。除非另有指定，HPMC聚合物是從Shin-Etsu(商標METOLOSETM)獲得的。就ι-角叉菜膠而言，供應商是Fluka，就全部實施例而言，實施例11和12除外(CP-Kelco是供應商)。具體級別和它們的USP等價物如下所示(僅在首次提到時)。
一般試驗方法利用USP溶解儀器2(槳+籃1)，在50rpm和37℃下，在900ml介質中試驗三種個別片劑的藥物釋放。所用溶解介質是0.1M鹽酸(pH 1)和0.1M磷酸鈉緩沖液(pH6.8)。線上量化是利用C Technologies光纖系統進行的，當使用0.1M HCl作為溶解介質時以220nm作為分析波長，當使用磷酸鹽緩沖液pH6.8作為溶解介質時以260nm作為分析波長。兩種介質都使用350nm作為參比波長。在分析的前兩個小時，每15分鐘測量一次釋放值，然后在剩余分析時間每小時測量一次。
(1習慣上采用四角形絲網籃，它的上部窄側之一焊接在鋼柱末端。鋼柱穿過溶解容器的蓋子，借助兩個特富龍螺帽固定在距離容器中心3.2cm處。籃子底部下緣在槳片上方1cm處。籃子指向流動方向，將供試藥片放在它的邊緣上。)實施例1化合物A與50∶50的HPMC 10,000cPs和HPMC 50cPs的直接壓制將活性物質和賦形劑原料混合在大桶中。將顆粒用硬脂酰富馬酸鈉潤滑，利用偏心壓片機壓制成片。
釋放數據
實施例2化合物A與HPMC、增溶劑和填充劑的造粒和壓制將活性物質、抗氧化劑和增溶劑溶于乙醇，分布在賦形劑中。然后將該混合物用HPC的乙醇溶液造粒。然后將顆粒在干燥烘箱中干燥。將顆粒用硬脂酰富馬酸鈉潤滑，利用偏心壓片機壓制成片。
釋放數據
結果沒有對來自片劑基質的顯著背景吸收進行校正，因而分別在0.1M HCl和0.1M磷酸鈉緩沖液pH6.8中見到120％和132％的釋放值。
實施例3化合物A與HPMC、SDS和填充劑的造粒和壓制將活性物質和賦形劑原料混合在大桶中。將顆粒用硬脂酰富馬酸鈉潤滑，利用偏心壓片機壓制成片。
實施例4包含化合物A乙烷磺酸鹽、HPMC和SDS的制劑實例
按照實施例3的方法制備該制劑。
實施例5含有化合物A乙烷磺酸鹽和黃原膠的制劑實例
按照實施例3的方法制備該制劑。
實施例6化合物A乙烷磺酸鹽與HPMC和ι-角叉菜膠的制劑實例
按照實施例3的方法制備該制劑。
實施例7化合物A正丙烷磺酸鹽與HPMC和ι-角叉菜膠的制劑實例
按照實施例3的方法制備該制劑。
實施例8化合物A苯磺酸鹽與HPMC和ι-角叉菜膠的制劑實例
按照實施例3的方法制備該制劑。
實施例9化合物A乙烷磺酸鹽與50∶50的HPMC 10,000cPs和HPMC 50cPs的直接壓制
將活性物質和賦形劑原料混合在大桶中。將顆粒用硬脂酰富馬酸鈉潤滑，利用偏心壓片機壓制成片。
釋放數據
實施例10化合物A乙烷磺酸鹽與50∶50的HPMC 10,000cPs和ι-角叉菜膠的直接壓制將活性物質和賦形劑原料混合在大桶中。將顆粒用硬脂酰富馬酸鈉潤滑，利用偏心壓片機壓制成片。
釋放數據
實施例11將化合物A的苯磺酸鹽和賦形劑原料在高剪切造粒機中造粒。將顆粒用硬脂酰富馬酸鈉潤滑，利用偏心壓片機壓制成片。
釋放數據
實施例12將化合物A的苯磺酸鹽和賦形劑原料在高剪切造粒機中造粒。將顆粒用硬脂酰富馬酸鈉潤滑，利用偏心壓片機壓制成片。
釋放數據
實施例13直接壓制化合物A的苯磺酸鹽和賦形劑原料。
釋放數據
實施例14包含化合物A苯磺酸鹽的制劑實例按照實施例3或11的一般方法制備實施例14-A和14-B。
實施例14-A
實施例14-B
實施例14-C
按照實施例3的方法制備該制劑。
實施例14-C的釋放數據
實施例15包含化合物B半萘-1，5-二磺酸鹽的制劑實例按照實施例11的一般方法制備全部制劑。
實施例15-A
實施例15-B
實施例15-C
如上可以制備其他實施例，其中將HPMC用PEO代替或者與PEO混合。在混合物的情況下，PEO∶HPMC的比例可以是90∶10至10∶90％。一種確切的混合物是PEO∶HPMC 80％∶20％或75％∶25％。
實施例16化合物A與HPMC、SDS和填充劑的造粒和壓制將活性物質和賦形劑原料混合在大桶中。將顆粒用硬脂酰富馬酸鈉潤滑，利用偏心壓片機壓制成片。
釋放數據
實施例17化合物A與50∶50的黃原膠和ι-角叉菜膠的直接壓制將活性物質和賦形劑原料混合在大桶中。將顆粒用硬脂酰富馬酸鈉潤滑，利用偏心壓片機壓制成片。
釋放數據
使用化合物A的苯磺酸鹽，可以重復任意上述使用化合物A游離堿或除苯磺酸鹽以外的鹽的實施例。
如下提供本發明的確切方面1、改性釋放藥物組合物，包含式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽作為活性成分 其中R1代表被一個或多個氟代取代基取代的C1-2烷基；R2代表氫、羥基、甲氧基或乙氧基；n代表0、1或2；和藥學上可接受的稀釋劑或載體，其條件是當式(I)化合物是鹽的形式時，該制劑可以僅含有ι-角叉菜膠和中性膠凝聚合物。
2、如第1方面所述的組合物，其中該活性成分是下列化合物的鹽Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)(化合物A)；Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2，6-二F)(OMe)(化合物B)；或Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)(化合物C)。
3、如第1或2方面所述的組合物，其中該活性成分是下列化合物的結晶性鹽Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)(化合物A)；Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2，6-二F)(OMe)(化合物B)；或Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)(化合物C)。
4、如第1、2或3方面所述的組合物，其中該組合物包含一種膠凝基質。
5、如第4方面所述的組合物，其中該基質包含HPMC。
6、如第4或5方面所述的組合物，其中該基質包含ι-角叉菜膠。
7、如第4方面所述的組合物，其中該基質包含SDS。
8、如第2和5或者2和6方面所述的組合物，其中該基質另外包含黃原膠。
9、如第1方面所述制劑作為藥劑的用途。
10、如第1方面所述制劑在藥劑制備中的用途，該藥劑用于心血管障礙的治療。
11、治療患有心血管障礙或者面臨所述障礙危險的患者所述障礙的方法，該方法包含對該患者給以治療有效量的如第1方面所述藥物制劑。
12、制備如第1方面所述即時釋放制劑的方法。
還提供了可由本文所述方法和/或實施例獲得的組合物。
權利要求
1.改性釋放藥物組合物，包含式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽作為活性成分 其中R1代表被一個或多個氟代取代基取代的C1-2烷基；R2代表氫、羥基、甲氧基或乙氧基；n代表0、1或2；和藥學上可接受的稀釋劑或載體，其條件是當式(I)化合物是鹽的形式時，該制劑可以僅含有ι-角叉菜膠和中性膠凝聚合物。
2.如權利要求1所要求保護的組合物，其中該活性成分是下列化合物的鹽Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)；Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2，6-二F)(OMe)；或Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)。
3.如權利要求1或2所要求保護的組合物，其中該活性成分是下列化合物的結晶性鹽Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)；Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2，6-二F)(OMe)；或Ph(3-Cl)(5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)。
4.如權利要求1、2或3任意一項所要求保護的組合物，其中該活性成分是Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)或Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2，6-二F)(OMe)的乙烷磺酸、正丙烷磺酸、苯磺酸、1，5-萘二磺酸或正丁烷磺酸加成鹽。
5.如權利要求1至4任意一項所要求保護的組合物，其中該活性成分是Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)苯磺酸鹽，其特征在于X-射線粉末衍射圖案特征峰的d值為5.9、4.73、4.09和4.08。
6.如權利要求1至4任意一項所要求保護的組合物，其中該活性成分是Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2，6-二F)(OMe)半-1，5-萘二磺酸鹽，其特征在于X-射線粉末衍射圖案特征峰的d值為18.3、9.1、5.6、5.5、4.13、4.02、3.86、3.69和3.63。
7.如權利要求1至6任意一項所要求保護的組合物，其中該組合物包含一種膠凝基質。
8.如權利要求7所要求保護的組合物，其中該基質包含HPMC。
9.如權利要求7或8所要求保護的組合物，其中該基質包含ι-角叉菜膠。
10.如權利要求7所要求保護的組合物，其中該基質包含SDS。
11.如權利要求1所要求保護的制劑作為藥劑的用途。
12.如權利要求1所要求保護的制劑在藥劑制備中的用途，該藥劑用于心血管障礙的治療。
13.治療患有心血管障礙或者面臨所述障礙危險的患者所述障礙的方法，該方法包含對該患者給以治療有效量的如權利要求1所要求保護的藥物制劑。
全文摘要
改性釋放的藥物組合物，包含式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽作為活性成分，其中R
文檔編號A61K47/36GK1655761SQ03812492
公開日2005年8月17日 申請日期2003年5月27日 優先權日2002年5月31日
發明者A·芒努松, M·圖恩 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司