專利名稱：肽脫甲酰酶抑制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的抗菌N-甲酰基-N-羥胺化合物的用途和用作肽脫甲酰酶抑制劑的含有這些化合物的藥物組合物。
背景技術：
細菌引發劑甲硫氨酰基tRNA通過甲硫氨酰基tRNA轉甲酰基酶(FMT)改性得到甲酰基-甲硫氨酰基tRNA。隨后在新合成的多肽的N-端引入甲酰基甲硫氨酸(f-Met)，多肽脫甲酰酶(PDF或Def)隨后脫甲酰基化初級轉化產物生成N-甲硫氨酰基多肽。大多數細胞內蛋白質通過用甲硫氨酸氨基肽酶(MAP)進一步加工生成成熟肽和循環的游離甲硫氨酸。PDF和MAP對于細菌生長都是必需的，PDF對于MPA活性是必需的，該系列反應稱為甲硫氨酸循環(
圖1) 圖1.甲硫氨酸循環至今，已在細菌、含葉綠體植物、小鼠和人體中發現多肽脫甲酰酶同源基因。植物蛋白質是核編碼的，但顯示攜帶葉綠體定位信號。這與葉綠體RNA和蛋白質合成過程高度類似于真細菌的觀察結果相一致。而在哺乳動物PDF基因同系物的蛋白質表達方面存在有限的信息(Bayer Aktiengesellschaft，Pat.WO2001/42431)，至今未證明對該蛋白質的功能作用(Meinnel T.2000，Parasitology Today，16(4)，165-168)。
多肽脫甲酰酶在所有真細菌中發現，為此可獲得高覆蓋基因序列信息。在PDF同系物中序列多樣性高，在遠緣相關序列間有低達20％的同一性。然而，在活性位周圍的保守是非常高的，有若干完全保守的殘基，包括配位活性位金屬所需的一個半胱氨酸和兩個組氨酸(Meinnel，T.等，1997，Journal ofMolecular Biology，267，749-761)。
由于PDF被證實對細菌體外生長是必需的，PDF被認為是有吸引力的抗細菌目標(Mazel，D.等，EMBO J.13(4)，914-923，1994)，不認為包括在真核細胞蛋白質合成中(Rajagopalan等，J.Am.Chem.Soc.119，12418-12419，1997)，普遍保存在原核生物中(Kozak，M.Microbiol.Rev.47，1-45，1983)。因此，PDF抑制劑可有效地用作廣譜抗菌劑。
發明概述本發明包括由如下式(I)表示的新的抗菌化合物和它們作為PDF抑制劑的用途。
發明詳述用于本發明方法的化合物選自如下式(I)化合物 其中，R1選自C1-C9烷基、C1-2烷基Ar和Ar；R2選自氫、C1-C9烷基、C1-4烷基Ar’、NR4、NC(O)R4、C2-4烷基NR3R4、C1-3烷基C(O)NR3R4、C1-3烷基C(O)Ar’、C2-3烷基NHC(O)NR3R4、C2-3烷基NHC(O)Ar’和C1-2烷基SO2R4；R3選自C1-C9烷基、C1-2烷基Ar和Ar；R4是R3、Ar’，或R4可以與R3和與它們相連的氮原子連接在一起形成被1、2或3個取代基任選取代的雜環，所述取代基選自C1-3烷基、芳基、C1-3烷氧基(任選被1-3個F取代)、芳氧基、羧基、氧代、羥基、氨基、硝基和氰基，或其可任選稠合于芐基、雜芳基或第二個雜環；
Ar選自苯基、呋喃基和噻吩基，它們均可任選被1、2或3個選自C1-3烷基、CN、F、Cl、Br和I的取代基取代；Ar’選自苯基、萘基、呋喃基、吡啶基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、咪唑基、咪唑烷基、苯并呋喃基、吲哚基、噻唑烷基、異噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡咯基和嘧啶基，它們均可任選被1、2或3個取代基取代，所述取代基選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、(CH2)0-5CO2R1、C(O)N(R1)2、CN、(CH2)0-5OH、NO2、F、Cl、Br、I、CF3、N(R1)2和NHC(O)R1；A選自C(O)NHOH或N(CHO)OH；當Y是C(O)時，X是NH，或當Y是C(O)或CH2時，X是CH2。
用于本文的“烷基”是指由碳-碳鍵連接在一起的任選取代的烴基，烷基烴基可以是直鏈、支鏈或環狀。
用于本文的“芳基”是指任選取代的芳基，至少一個環帶有共軛π電子體系，含有至多兩個共軛或稠合環系。“芳基”包括碳環芳基、雜環芳基和聯芳基，它們均可被任選取代。
用于本文的“雜環”是指3-7元環，含有一個或多個選自S，SO，SO2，O，或N的雜原子。該環可以是飽和的或有一個或多個不飽和度。“雜環”的實例包括，但不限于，嗎啉基、哌啶基和哌嗪基。
用于本發明的優選化合物選自如下N-[(S)-1-芐基-4-戊基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-1，4-二芐基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-l-芐基-4-丁基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-2，5-二氧代-4-戊基-1-苯基咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-4-丁基-1-(3，4-二氯芐基)-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-4-丁基-2，5-二氧代-1-(2-氧代-2-苯基乙基)-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-1-聯苯-4-基甲基-4-丁基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-l-芐基-4-環已基甲基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；
N-{(S)-4-丁基-1-[2-(5-氯-3-甲基-1-苯并[b]噻吩-2-基)-2-氧代乙基]-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基}-N-羥基甲酰胺；2-{(S)-4-丁基-4-[(甲酰基羥基氨基)甲基]-2，5-二氧代咪唑烷-1-基}-N-(3，5-二氯苯基)乙酰胺；2-{(S)-4-丁基-4-[(甲酰基羥基氨基)甲基]-2，5-二氧代咪唑烷-1-基甲基}苯甲酸甲酯；N-[(S)-4-丁基-1-(2-嗎啉-4-基-乙基)-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-1-(2-苯并呋喃-2-基-2-氧代乙基)-4-丁基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；和2-{(S)-4-丁基-4-[(甲酰基羥基氨基)-甲基]-2，5-二氧代咪唑烷-1-基甲基}苯甲酸。
同樣包括在本發明中的是可藥用的鹽和絡合物，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、三氟乙酸鹽、鈉、鉀和鎂鹽。本發明的化合物可含有一個或多個不對稱碳原子，可存在外消旋體和旋光體。所有這些化合物和非對映體均包括在本發明的范圍內。
式(I)化合物可根據如下典型的方案制備，該方案是所采用的方法的舉例，不用來限制在所附的權利要求中限定的本發明的范圍。式(I)化合物可通過類似于方案1的方法制備。
方案1 噁唑烷衍生物1-方案-1可如文獻[D.Seebach，J.D.Aebi，M.Gander-Coquoz和R.Naef，Helv.Chim.Acta.，70，1194(1987)]中所述由L-絲氨酸甲酯制備。1-方案-1用合適的堿，例如雙(三甲基甲硅烷基)氨基鈉在活性鹵化物R1X存在下在四氫呋喃/六甲基磷酰胺(10∶1)的混合溶劑中處理得到酯2-方案-1，它可在酸性條件下水解得到取代的絲氨酸3-方案-1。N-取代的乙內酰脲衍生物5-方案-1可通過用異氰酸酯R2NCO直接處理3-方案-1制備，或者用氰酸鉀處理3-方案-1得到乙內酰脲4-方案-1，它隨后用鹵化物R2X烷基化制備。醇5-方案-1可用合適的試劑，例如Dess-Martin高碘烷氧化得到醛，它可以用O-芐基羥胺處理得到肟6-方案-1。肟6-方案-1用氧基硼氫化鈉還原，隨后用由甲酸和乙酐形成的混合酐處理得到甲酰胺7-方案-1。最后，通過在醇溶劑中在催化劑，例如載于活性炭上的鈀存在下氫解7-方案-1得到N-甲酰基-N-羥胺8-方案-1。
用另一種方法，式(I)化合物可如方案2所示由醇5-方案-1制備。5-方案-2的Mitsunobu反應得到化合物9-方案-2。在酸性條件下除去保護基團得到羥胺衍生物10-方案-2。用甲酸和乙酐形成的混合酐處理10-方案-2得到N，O-甲酰基化的化合物11-方案-2，通過堿性水解除去O-甲酰基得到N-甲酰基-N-羥胺12-方案-2。
方案2 通過參考如下實施例可更好理解上述內容，實施例舉例說明可制備本發明化合物的方法，不用來限制所附的權利要求書中限定的本發明的范圍。
實施例1N-[(S)-1-芐基-4-丁基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺，SB-725291的制備1a.(2R，4S)-4-丁基-2-叔-丁基-3-甲酰基噁唑烷-4-羧酸甲酯在氮氣氣氛下，向(2R，4S)-2-叔-丁基-3-甲酰基噁唑烷-4-羧酸甲酯(4.6g，21.4mmol)[參見D.Seebach，J.D.Aebi，M.Gander-Coquoz和R.Naef，Helv.Chim.Acta.，70，1194(1987)]在無水THF(120mL)中的溶液中加入1-碘丁烷(12.2mL，106.8mmol)和HMPA(12mL)。混合物冷卻到-78℃，在15分鐘內滴加雙(三甲基甲硅烷基)氨基鈉在THF中的溶液(1M，32mL，32mmol)。2小時后，反應混合物溫熱到0℃，用飽和NH4Cl水溶液(200mL)猝滅，猝滅后的反應混合物用乙醚(400mL)稀釋，用水(3×200mL)和鹽水(200mL)洗滌，隨后干燥(硫酸鈉)和過濾。濃縮濾液，殘余物經快速色譜純化(20％乙酸乙酯/己烷)得到標題化合物淺棕色固體(4.0g，69％)。MS(ES)m/e 272[M+H]+。
1b.(S)-5-丁基-5-羥基甲基-咪唑烷-2，4-二酮將實施例1a化合物(4.0g，14.7mmol)在40mL濃含水鹽酸/二噁烷(1∶1)中的溶液回流加熱2小時。在冷卻到室溫后，真空濃縮反應混合物，重新溶解在水(15mL)中，向該溶液中加入氫氧化鉀(1g，17.8mmol)和氰酸鉀(2.39g，29.4mmol)，混合物加熱到115℃1小時。反應物冷卻到室溫，緩慢地用濃HCl水溶液(5mL)處理，回流2小時。真空除去溶劑，得到的固體用CH2Cl2/H2O(2∶1)(3×20mL)萃取，濃縮合并的有機層得到白色固體(4.8g)，用Gilson自動HPLC純化得到標題化合物白色固體(0.85g，31％)。MS(ES)m/e 187[M+H]+。
1c.(S)-3-芐基-5-丁基-5-羥基甲基-咪唑烷-2，4-二酮向實施例1b的化合物(0.13g，0.70mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入碳酸鉀(0.1g，0.74mmol)和芐基溴(0.087mL，0.74mmol)，反應混合物在室溫下攪拌過夜。過濾出固體，有機溶液用Gilson自動HPLC純化得到標題化合物白色固體(0.14g，73％)。MS(ES)m/e 277[M+H]+。
1d.(S)-1-芐基-4-丁基-2，5-二氧代-咪唑烷-4-醛O-芐基-肟向攪拌的實施例1c化合物(0.14g，0.51mmol)在10mL乙腈/二氯甲烷(1∶1)中的溶液中在0℃下加入Dess-Martin高碘烷(0.32g，0.77mmol)。反應混合物在0℃下攪拌1小時，隨后溫熱到室溫。在室溫攪拌過夜后，真空除去有機溶劑。白色固體溶解在吡啶(10mL)中，用O-芐基羥胺鹽酸鹽(0.123g，0.77mmol)處理。在室溫下1小時后，反應混合物濃縮至干。殘余物溶解在二氯甲烷(25mL)中，用飽和NaHCO3水溶液(20mL)，水(20mL)洗滌，干燥(硫酸鈉)和濃縮。固體用Gilson自動HPLC純化得到標題化合物褐色固體(0.09g，47％)。MS(ES)m/e 380[M+H]+。
1e.N-[(S)-1-芐基-4-丁基-2，5-二氧代-咪唑烷-4-基-甲基]-N-芐氧基甲酰胺在攪拌下，將氰基硼氫化鈉(45mg，0.72mmol)緩慢加入實施例1d化合物(0.09g，0.24mmol)在乙酸(5mL)中的溶液中。在室溫攪拌2小時后，反應混合物真空濃縮。殘余物溶解在飽和NaHCO3水溶液(15mL)中，用二氯甲烷(3×10mL)萃取。合并的有機萃取液用硫酸鈉干燥，過濾和濃縮得到粗(S)-3-芐基-5-(芐氧基氨基-甲基)-5-丁基-咪唑烷-2，4-二酮，MS(ES)m/e 382[M+H]+。
上述粗中間體溶解在二氯甲烷(5mL)中，向溶液中加入三乙胺(0.035mL)，隨后加入新制備的混合酐(通過在50℃下加熱0.019mL甲酸和0.045mL乙酐混合物1小時，冷卻到室溫制備)。反應混合物在室溫下攪拌1小時，隨后濃縮至干。殘余物用Gilson自動HPLC純化得到標題化合物白色固體(0.06g，62％)。MS(ES)m/e410[M+H]+。
lf.N-[(S)-1-芐基-4-丁基-2，5-二氧代-咪唑烷-4-基甲基]-N羥基甲酰胺將實施例1e化合物(0.06g，0.15mmol)溶解在甲醇(5mL)中，在氣球氫氣壓力下在鈀/活性炭(0.02g)存在下攪拌4小時。過濾反應混合物并濃縮，殘余物用Gilson自動HPLC純化得到標題化合物白色固體(0.04g，84％)。MS(ES)m/e 320[M+H]+。
以類似的方法進行，但用合適的中間體取代上述物質，制備如下化合物N-[(S)-1-芐基-4-環已基甲基-2，5-二氧代-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺，MS(ES)m/e 360[M+H]+。
2-{(S)-4-丁基-4-[(甲酰基羥基氨基)甲基]-2，5-二氧代-咪唑烷-1-基}-N-(3，5-二氯苯基)乙酰胺，MS(ES)m/e 431[M+H]+。
2-{(S)-4-丁基-4-[(甲酰基羥基氨基)甲基]-2，5-二氧代-咪唑烷-1-基甲基}苯甲酸甲酯，MS(ES)m/e 378[M+H]+。
N-[(S)-4-丁基-1-(2-嗎啉-4-基-乙基)-2，5-二氧代-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺，MS(ES)m/e 343[M+H]+。
2-{(S)-4-丁基-4-[(甲酰基羥基氨基)甲基]-2，5-二氧代-咪唑烷-1-基甲基}苯甲酸，MS(ES)m/e 364[M+H]+。
實施例2N-[(S)-2，5-二氧代-4-戊基-1-苯基-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺，SB-728794的制備2a.(S)-5-戊基-5-羥基甲基-3-苯基-咪唑烷-2，4-二酮按照實施例1a的方法，只是用戊基碘代替碘丁烷，隨后按照實施例1b的方法，用苯基異氰酸酯代替氰酸鉀，制備標題化合物白色固體(75％)。MS(ES)m/e 277[M+H]+。
2b.N-[(S)-2，5-二氧代-4-戊基-1-苯基-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺根據實施例1d-f的方法，只是用實施例2a的化合物代替實施例1c化合物，制備標題化合物白色固體。MS(ES)m/e 320[M+H]+。
以類似的方法進行，但用合適的中間體取代上述物質，制備如下化合物N-[(S)-1-芐基-4-戊基-2，5-二氧代-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺，MS(ES)m/e 334[M+H]+。
N-[(S)-1，4-二芐基-2，5-二氧代-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺，MS(ES)m/e354[M+H]+。
實施例3N-[(S)-4-丁基-2，5-二氧代-1-(2-氧代-2-苯基-乙基)-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺，SB-736063的制備3a.(S)-5-丁基-5-羥基甲基-3-(2-氧代-2-苯基-乙基)-咪唑烷-2，4-二酮根據實施例1c的方法，只是用2-溴-1-苯基乙酮替代芐基溴，制備標題化合物白色固體(93％)。MS(ES)m/e305[M+H]+。
3b.N-[(S)-4-丁基-2，5-二氧代-1-(2-氧代-2-苯基-乙基)-咪唑烷-4-基甲基]-N-(叔丁氧基羧基羰基氧基)氨基甲酸叔丁基酯在氮氣氣氛下，在0℃將實施例3a化合物(0.15g，0.49mmol)和N-(叔丁氧基羧基羰基氧基)氨基甲酸叔丁基酯(0.18g，0.74mmol)溶解在THF(3mL)中。在氮氣氣氛下，在0℃向該溶液中加入三丁基膦(0.19mL，0.74mmol)和偶氮二甲酸二叔丁基酯(0.176g，0.74mmol)在THF(2mL)中的預混合溶液。反應混合物保持在0℃1小時，溫熱至室溫，攪拌過夜。反應物用飽和碳酸氫鈉水溶液(15mL)猝滅，用二氯甲烷(3×10mL)萃取。合并的有機層用硫酸鈉干燥，過濾和濃縮。殘余物用Gilson自動HPLC純化得到標題化合物白色固體(0.11g，42％)。MS(ES)m/e 520[M+H]+。
3c.N-[(S)-4-丁基-2，5--二氧代-1-(2-氧代-2-苯基-乙基)-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺將實施例3b化合物(0.11g，0.21mmol)溶解在15％TFA/1，2-二氯乙烷(5mL)中，在室溫下攪拌1小時后，反應混合物被真空濃縮。將殘余物溶解在二氯甲烷(5mL)中，用三乙胺(0.3mL)處理，隨后用新制備的混合酐(0.031mL甲酸和0.069mL乙酐，50℃，1小時)處理。在室溫下攪拌1小時后，有機溶劑被真空除去，加入甲醇(10mL)，隨后在劇烈攪拌下加入飽和Na2CO3水溶液(3mL)。3小時后，反應混合物濃縮至干，固體用30％甲醇/二氯甲烷(3×5mL)萃取。過濾合并的萃取物，濃縮，得到的殘余物用Gilson自動HPLC純化得到標題化合物白色固體(0.03g，41％)。MS(ES)m/e348[M+H]+。
以類似的方法進行，但用合適的中間體取代上述物質，制備如下化合物N-[(S)-4-丁基-1-(3，4-二氯芐基)-2，5-二氧代-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺，MS(ES)m/e 388[M+H]+。
N-[(S)-1-聯苯基-4-基甲基-4-丁基-2，5-二氧代-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺，MS(ES)m/e 396[M+H]+。
N-{(S)-4-丁基-1-[2-(5-氯-3-甲基-1-苯并[b]噻吩-2-基)-2-氧代-乙基]-2，5-二氧代-咪唑烷-4-基甲基}-N-羥基甲酰胺，MS(ES)m/e452[M+H]+。
N-[(S)-1-(2-苯并呋喃-2-基-2-氧代-乙基)-4-丁基-2，5-二氧代-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺，MS(ES)m/e388[M+H]+。
通過任何化學官能團的合適處理和保護，式(I)其余化合物的合成通過類似于上述的方法進行。
本發明的化合物用于治療細菌感染。為使用式(I)化合物或其可藥用的鹽，它根據標準制藥實踐配制成藥物組合物。
式(I)化合物和其可藥用的鹽可以用于抗生素的標準方法給藥，例如口服，腸胃外，舌下，皮膚，皮下，直腸，經吸入或經頰給藥。
在口服給藥時，式(I)化合物和其活性的可藥用的鹽可配制成糖漿，片劑，膠囊，乳液和糖錠。糖漿制劑通過由化合物或其鹽在液體載體，例如乙醇，花生油，橄欖油，甘油或水中的懸浮液或溶液和香料或著色劑組成。當組合物是片劑形式時，可使用通常用于制備固體制劑的任何藥物載體。該載體的實例包括硬脂酸鎂、石膏粉，滑石，明膠，阿拉伯樹膠，硬脂酸，淀粉，乳糖和蔗糖。當組合物是膠囊形式時，任何常用包膠囊方法是合適的，例如在硬明膠膠囊殼中使用上述載體。當組合物是軟明膠殼膠囊形式時，通常用于制備分散液和懸浮液的任何藥物載體均可考慮，例如含水樹脂，纖維素，硅酸鹽或油，加入軟明膠膠囊殼。
典型的腸胃外組合物由化合物或其鹽在無菌含水或不含水載體中的溶液或懸浮液組成，并選擇性地含有腸胃外可接受的油，例如聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、花生油或芝麻油。
用于吸入的典型組合物是溶液、懸浮液或乳液形式，它們可以干粉給藥或是使用常規推進劑，例如二氯二氟甲烷或三氯氟甲烷的氣溶膠形式給藥。
典型栓劑配方含有它在以該方式給藥時是活性的式(I)化合物或其可藥用的鹽，和粘合劑和/或潤滑劑，例如聚合乙二醇、明膠、可可脂或其它低熔點植物蠟或脂肪或其合成類似物。
典型皮膚和經皮配方含有常規含水或非水載體，例如乳液、軟膏、洗液或漿狀物，或以加藥的膏藥、片或膜形式。
組合物優選是單位劑量形式，例如片劑、膠囊或計量氣溶膠劑量，從而患者可以給藥單位劑量。
用于口服給藥的每個劑量單位合適地含有0.1mg-500mg/Kg，優選1mg-100mg/Kg，用于腸胃外給藥的每個劑量單位合適地含有0.1mg-100mg/Kg式(I)化合物或其以游離酸計算的可藥用的鹽。用于鼻內給藥的每個劑量單位合適地含有每人1-400mg，優選10-200mg。局部配方合適地含有0.01-5.0％的式(I)化合物。
用于口服給藥的日給藥方案合適地為約0.01mg/Kg-40mg/Kg式(I)化合物或以其游離酸計算的可藥用的鹽。用于腸胃外給藥的日給藥方案合適地為約0.001mg/Kg-40mg/Kg式(I)化合物或以其游離酸計算的可藥用的鹽。
用于鼻內給藥或口腔吸入的日給藥方案合適地是約10-約500mg/人。活性組成可一天給藥1-6次，足以顯示所需活性。
在本發明的化合物根據本發明給藥時未預期不可接受的毒性效果。
式(I)化合物的生物學活性通過如下試驗說明生物學試驗A金黃色葡萄球菌或大腸桿菌PDF活性在25℃下測定，使用由Lazennec &Meinnel開發的有較小改進的連接酶連接試驗[(1997)“Formate dehydrogenase-coupled spectrophotometric assay of peptide deformylase”Anal.Biochem.244，第180-182頁]。反應混合物50μL，含有50mM磷酸鉀緩沖液(pH7.6)，15mMNAD，0.25U甲酸鹽脫氫酶。底物肽f-Met-Ala-Ser濃度KM。反應通過加入10nM Defl酶觸發，吸光率在340nm監測20分鐘。
抗菌活性試驗全細胞抗菌活性通過肉湯微量稀釋法使用National Committee for ClinicalLaboratory Standards(NCCLS)推薦的方法(Document M7-A4，“Methods forDilution Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically”(列為本文參考文獻))測定。化合物在0.06-64mcg/ml的系列雙倍稀釋范圍內試驗，在試驗中評價有12種菌株的試驗組，試驗組由如下實驗菌株組成金黃色葡萄球菌Oxford，金黃色葡萄球菌WCUH29，糞腸球菌I，糞腸球菌7，流感嗜血桿菌Q1，流感嗜血桿菌NEMC1，粘膜炎莫拉氏菌1502，肺炎鏈球菌1629，肺炎鏈球力N1387，肺炎鏈球菌N1387，大腸桿菌7623(AcrABEFD+)和大腸桿菌120(AcrAB-)。最小抑制濃縮(MIC)以抑制可見生長的化合物最低濃度測定。使用鏡子閱讀器以有助于測定MIC端點。
正如每個單獨的出版物完全公開的具體地和個別地說明被引入作為參考文獻那樣，在說明書中引用的所有出版物，包括，但不限于專利和專利申請均作為參考文獻列入本文。
如上說明完全公開了本發明，包括其優選實施方案。本文具體公開的實施方案的修正和改進在所附的權利要求的范圍內。無需進一步說明，可以認為本領域技術人員，使用前面的描述，能夠利用本發明至最完全的程度。因此本文的實施例僅被認為舉例說明，不是以任何方式限制本發明的范圍。其中要求保護專有權或特權的本發明的實施方案限定如下。
權利要求
1.式(I)化合物 其中，R1選自C1-C9烷基、C1-2烷基Ar和Ar；R2選自氫、C1-C9烷基、C1-4烷基Ar’、NR4、NC(O)R4、C2-4烷基NR3R4、C1-3烷基C(O)NR3R4、C1-3烷基C(O)Ar’、C2-3烷基NHC(O)NR3R4、C2-3烷基NHC(O)Ar’和C1-2烷基SO2R4；R3選自C1-C9烷基、C1-2烷基Ar和Ar；R4是R3、Ar’，或R4可以與R3和與它們相連的氮原子連接在一起形成被1、2或3個取代基任選取代的雜環，所述取代基選自C1-3烷基、芳基、C1-3烷氧基(任選被1-3個F取代)、芳氧基、羧基、氧代、羥基、氨基、硝基和氰基，或其可任選稠合于芐基、雜芳基或第二個雜環；Ar選自苯基、呋喃基和噻吩基，它們均可任選被1、2或3個選自C1-3烷基、CN、F、Cl、Br和I的取代基取代；Ar’選自苯基、萘基、呋喃基、吡啶基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、咪唑基、咪唑烷基、苯并呋喃基、吲哚基、噻唑烷基、異噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、吡咯基和嘧啶基，它們均可任選被1、2或3個取代基取代，所述取代基選自C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、(CH2)0-5CO2R1、C(O)N(R1)2、CN、(CH2)0-5OH、NO2、F、Cl、Br、I、CF3、N(R1)2和NHC(O)R1；A選自C(O)NHOH或N(CHO)OH；當Y是C(O)時，X是NH，或當Y是C(O)或CH2時，X是CH2。
2.權利要求1的化合物，其選自N-[(S)-1-芐基-4-戊基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-1，4-二芐基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-1-芐基-4-丁基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-2，5-二氧代-4-戊基-1-苯基咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-4-丁基-1-(3，4-二氯芐基)-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-4-丁基-2，5-二氧代-1-(2-氧代-2-苯基乙基)-咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-1-聯苯-4-基甲基-4-丁基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-1-芐基-4-環己基甲基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-{(S)-4-丁基-1-[2-(5-氯-3-甲基-1-苯并[b]噻吩-2-基)-2-氧代乙基]-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基}-N-羥基甲酰胺；2-{(S)-4-丁基-4-[(甲酰基羥基氨基)甲基]-2，5-二氧代咪唑烷-1-基}-N-(3，5-二氯苯基)乙酰胺；2-{(S)-4-丁基-4-[(甲酰基羥基氨基)甲基]-2，5-二氧代咪唑烷-1-基甲基}苯甲酸甲酯；N-[(S)-4-丁基-1-(2-嗎啉-4-基-乙基)-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；N-[(S)-1-(2-苯并呋喃-2-基-2-氧代乙基)-4-丁基-2，5-二氧代咪唑烷-4-基甲基]-N-羥基甲酰胺；和2-{(S)-4-丁基-4-[(甲酰基羥基氨基)-甲基]-2，5-二氧代咪唑烷-1-基甲基}苯甲酸，或其可藥用的鹽。
3.通過向需要治療的患者給藥權利要求1的化合物治療細菌感染的方法。
全文摘要
本發明提供了新的PDF抑制劑和它們的新使用方法。
文檔編號A61P31/04GK1652775SQ03810650
公開日2005年8月10日 申請日期2003年3月13日 優先權日2002年3月13日
發明者凱利·M·奧巴特, 阿吉塔·貝特, 西格弗里德·B·克里斯坦森第四, 杰克·D·萊伯, 廖湘民 申請人:史密絲克萊恩比徹姆公司