包含一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑的組合物和方法

專利名稱：包含一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑的組合物和方法
技術領域：
本發明總體涉及誘導、促進或利于疼痛緩解的組合物和方法。更特別的是，本發明涉及在阻止或減輕疼痛的方法或組合物中使用直接或間接阻止、減輕或逆轉阿片樣物質敏感性降低的發展的化合物，以及激活阿片樣物質敏感性降低主題的阿片樣物質受體的化合物。甚至更特別的是，本發明計劃在脊椎動物(特別是人)受試者疼痛相關的病癥中，特別是在神經病變病癥中，更特別是在如疼痛性糖尿病性神經病變(painful diabetic neuropathy)(PDN)之類的外周神經病變病癥中，使用兩種或更多的化合物減輕疼痛的癥狀。這些化合物可以被單獨提供或與其它化合物(如對于控制神經病變病癥，特別是外周神經病變病癥(如PDN)有用的化合物)聯用。本發明的一個實施方案涉及在為阻止或緩解包括人在內的脊椎動物的疼痛的治療中使用一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑，特別是μ-阿片樣物質受體激動劑，或K2-阿片樣物質受體激動劑。在另一實施方案中，本發明包括在包含人的脊椎動物中產生鎮痛的方法，包括同時、連續或分別施用一氧化氮供體和μ-阿片樣物質受體激動劑，或一氧化氮供體和K2-阿片樣物質受體激動劑。
背景技術：
疼痛性糖尿病性神經病變(PDN)是糖尿病常見的衰弱性并發癥，它會導致麻木、虛弱、麻刺感、敏感性上升、劇烈疼痛，以及受影響的神經的功能喪失，這可能發生于整個自主和軀體神經系統。有40％到60％的糖尿病人會發展成輕度到中度的PDN，有5％到10％的病人進一步發展成嚴重的臨床癥狀，這可能使截指或截肢之類的外科手術干預成為必要。PDN的臨床表現從對輕壓或觸及之類的溫和刺激的過敏(感覺易位(allodynia))到對更強刺激的夸張反應(痛覺過敏)(Merskey，International Association for the Study of Pain.Elsevier 2261986)。
由于還沒有對PDN的預防治療(Sima等人，Diabetologia 42 773-881999)，因此對病癥的治療主要是緩解措施。這一緩解措施也代表了重大的治療障礙，因為可獲得的最有效的止痛藥(μ-阿片樣物質受體激動劑)對于PDN無效。對阿片樣物質不敏感的機制還不清楚，但已有研究顯示薄弱的低血糖(glycaemic)控制會降低疼痛耐受和疼痛閾值，因而降低嗎啡之類的止痛劑的效果(Morley等人，Am J Med 77(1)79-83 1984)。另外，可能存在與糖尿病相聯系的嗎啡藥代動力學的改變(Courteix等人，J Pharmacol Exp Ther 285(1)63-70 1998)和/或阿片樣物質受體與激動劑親和力的變化。
一些使病人發展成PDN的糖尿病危險因素包括薄弱的代謝控制、血脂異常、身體質量指數和微白蛋白尿，但是這些因素也不是絕對的許多對糖尿病控制良好的病人發展成了PDN，相反許多對糖尿病控制較差的病人沒有發展成此病癥。這類觀察結果的混淆，加之動物和人糖尿病模型的差異，使對PDN成因的闡釋變得困難。目前，關于這一病癥的發展有兩個廣泛的理論血管功能障礙理論和代謝功能障礙理論。
血管功能障礙理論認為對神經(神經血管或神經滋養血管)的血液供給的變化繼血液動力學的異常(如血小板的加速聚集和血液粘度的增加)而發生(Fusman等人，Acta Diabetol 38(3)129-34 2001)。另外，可能發生神經血管的小血管的病理改變(如血管內皮細胞產生一氧化氮的降低和血管收縮物質反應的加速)(McAuley等人，ClinSci(Lond)99(3)175-9 2000)。這些獨立或協同發生的血液動力學和血管的改變能夠導致神經束膜缺血性改變和在病人和動物糖尿病模型上觀察到的隨后的神經內膜缺氧(Cameron等人，Diabetologia 44(11)1973-882001)。這些異常的最終結果是可能引起PDN癥狀和征候的神經損傷。
另一方面代謝功能障礙理論認為神經損傷是通過多元醇代謝途徑的激活和非酶蛋白質的糖化介導引起的。這些途徑誘導線粒體和胞質NAD+/NADH氧化還原失衡以及神經的能量缺失，這能最大程度的損傷神經和神經血管組織(Obrosova等人，FASEB J 16(1)123-5 2002)。另外，這些代謝變化被認為會激活蛋白激酶C(PKC)，它能提高疼痛反應(Kamei等人，Expert Opin Investig Drugs 10(9)1653-64 2001)和降低阿片樣物質受體的敏感性(Wang等人，Brain Res 723(1-2)61-91996)。另外，提高的PKC活力被認為會減小μ-阿片樣物質受體與配體的結合親和力(Ohsawa等人，Brain Res 764 244-8 1998)。這些代謝異常的結果是在PDN病人身上所見到的神經損傷和阿片樣物質受體敏感性的降低。
這兩種理論可能并不是相互排斥的，兩理論的支持者都認為在血管功能障礙或代謝異常的下游，在神經滋養血管內的血管活性化合物的產生存在失衡，這導致了糖尿病神經的缺血性改變。
在所有的內源性血管擴張劑中，一氧化氮是最為有效的，因此可能是降低合成和隨后的糖尿病誘導的血管緊張度(vascular tone)收縮的候選者。除了松弛血管平滑肌，它還抑制血小板的聚集過程、有絲分裂和培養的血管平滑肌的增殖、白細胞的粘附(Wroblewski等人，Prev Cardiol 3(4)172-177 2000)。一氧化氮由血管內皮中一組被稱為一氧化氮合酶的酶產生。一氧化氮合酶(NOS)有三種同工型，根據它們的活性或它們被首先描述的組織類型命名。這些酶都將內源性的底物(精氨酸)轉變為瓜氨酸，在此過程中產生NO。
在獲得本發明的工作中，發明者在糖尿病性神經病變動物模型中檢測了所提供的一氧化氮供體(L-精氨酸)在促進神經滋養血管中小血管擴張中的作用，并且意外的發現此氨基酸的使用使動物對阿片樣物質敏感，因而能夠使用嗎啡減輕神經病變性疼痛。根據先前的證據，此發現確實是令人吃驚的，先前的證據發現精氨酸通過改變嗎啡的吸收和分布而減弱阿片樣物質的止痛效果(Bhargava等人，Pharmacol BiochemBehav 61(1)29-33 1998)，并發現抑制一氧化氮的產生能重建嗎啡的止痛生理效果(Bian等人，Gen Pharmacol 30(5)753-7 1998)。
發明概述部分基于測定，本發明斷言一氧化氮供體(如L-精氨酸)能夠廣泛的阻止、減弱和/或逆轉對于阿片樣物質受體激動劑減小的止痛敏感性的發展，包括由長期施用激動劑所導致的對阿片樣物質受體激動劑耐受的發展和對與神經病變病癥，特別是外周神經病變病癥(如PDN)有關的阿片樣物質受體激動劑低敏感性的發展。因此，本發明一方面對阿片樣物質受體激動劑止痛敏感性降低(或處于發展的危險之中)的受試者提供產生鎮痛的方法。在一實施方案中，通過對受試者施用對于阻止、減弱和/或逆轉降低的止痛劑敏感性有效量的一氧化氮供體而產生鎮痛。所述一氧化氮供體和產生鎮痛有效量的阿片類物質止痛劑分開、同時或順序施用。合適的，阿片樣物質止痛劑作為阿片樣物質受體激動劑激活導致止痛敏感性降低的相同阿片樣物質受體。在一實施方案中，減小的止痛劑敏感性與神經病變病癥有關，包括外周神經病變病癥，如PDN或相關病癥。一氧化氮供體和阿片樣物質受體激動劑適合以一種或多種分別包含藥物上可接受的載體和/或稀釋劑的組合物的形式被使用。組合物可以通過注射、局部施用或口服途徑被使用，包括持久釋放模式的施用，其中施用的時間和數量足以在受試者中產生鎮痛效果。
一氧化氮供體適合選自任何在體內被轉變，或降解或代謝成一氧化氮，或提供一氧化氮資源的物質。在一實施方案中，一氧化氮供體是L-精氨酸或它的類似物或衍生物。在一實施方案中，阿片樣物質受體激動劑是μ-阿片樣物質受體激動劑或在體內被代謝或轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物。例如，阿片樣物質受體激動劑可以選自嗎啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氫嗎啡酮、羥嗎啡酮，它們的類似物、衍生物或前藥和這些物質中的任何一種的藥物兼容鹽。合適的μ-阿片樣物質受體激動劑是嗎啡或它的類似物或衍生物或前藥，或這些物質的藥物兼容鹽。在另一實施方案中，阿片樣物質受體激動劑是K2-阿片樣物質受體激動劑。合適的K2-阿片樣物質受體激動劑是羥考酮或它的類似物或衍生物或前藥，或這些物質的藥物兼容鹽。
在另一方面，本發明提供對具有降低的阿片樣物質受體激動劑止痛敏感性(或處于發展的危險之中)的對象產生鎮痛的方法。在一實施方案中，通過對對象使用能夠有效阻止、減弱和/或逆轉降低的止痛劑敏感性的數量的L-精氨酸而產生鎮痛。所述L-精氨酸與足以產生鎮痛效果的量的阿片樣物質止痛劑分開、同時或順序施用，其中所述阿片樣物質與作為止痛敏感性降低的主題的阿片樣物質受體激動劑激活同一種阿片樣物質受體。
在另一方面，本發明提供止痛組合物，它一般包含在數量上分別能使對象有效產生鎮痛的一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑。典型的是，對象表現出降低的阿片樣物質受體激動劑止痛敏感性，或處于其發展的危險之中。在一此類型的實施方案中，阿片樣物質止痛劑與作為止痛敏感性降低的主題的阿片樣物質受體激動劑激活相同阿片樣物質受體。
在一實施方案中，一氧化氮供體與阿片樣物質止痛劑相聯系，包括以分離的化合物或綴合的形式提供一氧化氮受體和阿片樣物質止痛劑。一氧化氮供體和阿片樣物質受體激動劑合適以藥物兼容的鹽形式存在，并以以上廣泛描述的有效的量被使用。在一實施方案中，組合物一般包含L-精氨酸和阿片樣物質止痛劑，其中所述阿片樣物質止痛劑與作為止痛敏感性降低的主題的阿片樣物質受體激動劑激活相同的阿片樣物質受體。適合的是，降低的止痛劑敏感性與神經病變病癥相關，包括如PDN之類的外周神經病變病癥或相關病癥。
還在另一方面，本發明涉及一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑在制造用于在對象中產生鎮痛的藥物中的用途。適合的是，對象具有神經病變病癥，包括如PDN之類的外周神經病變病癥或相關病癥，或處于其發展的危險之中。在一實施方案中，本發明包括L-精氨酸和阿片樣物質止痛劑在制造用于在對象中產生鎮痛的藥物中的用途。
附圖簡述

圖1圖示描述在6個月研究時期中，在STZ誘導的糖尿病大鼠中機械性異常性疼痛(PDN的定義癥狀)的發展和保持。對重量匹配的對照大鼠和注射STZ 8天(n＝10)、3(n＝10)、9(n＝46)、12(n＝53)和24(n＝36)周后的STZ糖尿病大鼠的左后足顯示基線腳掌收縮閾值的時間進程。與非糖尿病對照大鼠(11.9±0.2g)的腳掌收縮閾值平均值(±SEM)相比，在STZ糖尿病大鼠中測定的相應值明顯降低(p＜0.05)，在注射STZ 8天之后降到8.0(±0.3)g，3周之后降到5.2(±0.3)g。之后，基線腳掌收縮閾值保持相對恒定，直到注射STZ之后的12周(p＞0.05)。在注射STZ之后的12周到24周，腳掌收縮閾值從4.7(±0.1)g到3.3(±0.1)g進一步變小，但是明顯降低。
圖2圖示表示在注射STZ 12周之后，嗎啡的除痛覺能力被完全廢除了。注射STZ之后3、9、12、24周的糖尿病大鼠對皮下注射嗎啡的平均(±SEM)劑量-反應曲線被展示了。
圖3圖示表示在整個24周的研究時期，羥考酮的效率被保持，雖然在12周的時候其除痛覺能力降低了4倍，但是相對于非糖尿病對照大鼠這一能力保持到第24周未變。注射STZ之后3、9、12、24周的糖尿病大鼠對皮下注射羥考酮的平均(±SEM)劑量-反應曲線被展示了。
圖4圖示表示食物補充L-精氨酸3周之后，發生在注射STZ 9到12周之間的嗎啡除痛覺能力的廢除被阻止了。喂以標準大鼠料的雄性糖尿病DA大鼠或在注射STZ之后的9到24周給予L-精氨酸食物添加劑的大鼠在注射STZ后9、12和24周皮下注射嗎啡之后的除痛覺平均(±SEM)劑量-反應曲線被展示了。與在喂以L-精氨酸食物添加劑一周之后的非糖尿病對照大鼠中測定的劑量反應曲線進行了比較。
圖5圖示表示食物補充L-精氨酸3周之后，發生在注射STZ后9到12周之間的羥考酮能力的兩倍降低被阻止了。喂以標準大鼠料的雄性糖尿病DA大鼠或在注射STZ后9到24周給予L-精氨酸食物添加劑的大鼠在注射STZ后9、12和24周后皮下注射羥考酮的除痛覺劑量反應平均值(±SEM)曲線被展示了。與在喂以L-精氨酸食物添加劑一周之后的非糖尿病對照大鼠中測定的劑量反應曲線進行了比較。
圖6圖示表示在STZ糖尿病大鼠中，食物補充L-精氨酸將嗎啡減輕機械性異常性疼痛的能力增加到約為在非糖尿病對照大鼠中發現的90％。特定的，附圖分別表示對喂以和沒有喂以食物L-精氨酸添加劑的注射STZ后9、12、16、20和24周的雄性糖尿病DA大鼠皮下注射嗎啡(5.45和6.1mg/kg，n＝7、6、5、5和6，每劑量)之后，平均(±SEM)除痛覺程度對時間的曲線。
圖7圖示表示食物補充L-精氨酸將羥考酮減輕機械性異常性疼痛的能力增加到約為喂以標準飼料的、注射STZ后9周的糖尿病大鼠中發現的150％。特定的，附圖分別表示對喂以和沒有喂以食物L-精氨酸添加劑的注射STZ后9、12、20和24周的雄性糖尿病DA大鼠皮下注射羥考酮ED50(2.0mg/kg，n＝7、7、6和4，每劑量)之后，平均(±SEM)除痛覺程度對時間的曲線。
發明詳述1.定義除非另有定義，否則這里使用的所有技術和科學術語與本發明所屬領域的普通技術人員的通常理解具有相同的意義。雖然任何與這里所描述的相似或等價的方法和材料能夠被用于本發明的實踐或測試中，優選的方法和材料被描述了。為了本發明的目的，以下的術語被定義如下這里使用的冠詞“a”和“an”指的是一個或多個(即至少一個)該冠詞在語法上所修飾的物體。例如，“元件”指的是一個或多于一個元件。
這里使用的術語“大約”指的是與參考的數量、水平、值、尺度、大小或總量相比，變化在30％、20％或10％以內的數量、水平、值、尺度、大小或總量。
這里使用的術語“異常性疼痛”指的是由無害刺激(即通常不會激起疼痛的刺激)引起的疼痛。異常性疼痛的例子包括(但不限于)冷異常性疼痛、觸覺異常性疼痛(輕壓或觸摸引起疼痛)等等。
這里使用的術語“鎮痛”描述的是降低疼痛知覺的狀態，包括痛感缺失和對有害刺激降低感覺或沒有感覺的狀態。如本領域通常所理解的，這種降低或沒有疼痛知覺的狀態是通過施用疼痛控制試劑，并在不喪失意識的情況下被誘導的。術語“鎮痛”包括術語“痛覺除去”，它被用于本領域作為動物模型鎮痛或疼痛敏感性降低的定量測量。
這里使用的術語“灼痛”指的是燃燒疼痛，以及神經外傷損傷后的異常性疼痛和痛覺過敏，通常伴有血管收縮和泌汗功能障礙以及之后的向性改變。
“復雜性區域疼痛綜合征”包括(但不限于)反射性交感神經萎縮癥、灼痛、交感神經維持性疼痛等。
貫穿這一說明書，除非上下文需要，否則“包含”應該被理解為含有一規定的步驟或元件，或步驟或元件的組合，但并不排除其它步驟或元件，或步驟或元件的組合。
在上下文中治療或預防病癥時所用的“有效量”是指施用給需要這種治療或預防的個體的活性成分的數量(可能是單獨的劑量或者是一系列劑量的一部分)，該劑量對于阻止該病癥的癥狀的發生，控制此癥狀和/或治療現有癥狀等是有效的。
有效的量將依賴于被治療個體的健康和身體狀況、所屬分類群、組合物的配方、醫學狀態的評估以及其它相關因子而變化。預計該劑量處于通過常規實驗所能確定的相對寬的范圍內。
“一氧化氮供體”、“NO供體”之類是指任何在體內被轉變、降解、代謝成一氧化氮或NO，或提供一氧化氮或NO資源的物質。
“痛覺過敏”是指對通常引起疼痛的刺激的加大反應。
“神經病變性疼痛”是指由外周或中樞神經系統的原發性損傷或功能障礙所引發或導致的任何疼痛綜合征。神經病變性疼痛的例子包括(但不限于)熱或機械痛覺過敏、熱或機械異常性疼痛、糖尿病疼痛、截留疼痛之類。
“傷害感受性疼痛”是指定位于未受損的皮膚、內臟和其它缺乏感受的器官的傷害感受器的激活所引起的正常的尖銳疼痛感。
這里所使用的術語“阿片樣物質受體激動劑”是指任何在施用后能與阿片樣物質受體結合并導致受體激動、部分激動或激動/拮抗混合的化合物。阿片樣物質受體激動劑術語也包括所施用化合物的代謝物。優選的阿片樣物質受體激動劑是產生鎮痛的化合物。
這里使用的術語“疼痛”被給予了最廣泛的含義，包括不快的感覺和與實際的或可能的組織損傷相關的情感經歷，或根據這些術語所描述的，包括由專門的神經末梢的刺激所產生的或多或少的不適、憂傷或痛苦的局部感覺。疼痛有許多類型，包括(但不限于)lightning pain、幻痛、射痛、急性痛、發炎痛、神經病變性疼痛、復雜性區域疼痛、神經痛、神經病變等等(Dorland′s Illustrated Medical Dictionary，28thEdition，W.B.Saunders Company，Philadelphia，Pa.)。治療疼痛的目標是降低被治療對象所感覺到的疼痛的嚴重性。
“藥物可接受的載體”是指固體或液體填充物、稀釋劑或形成膠囊的物質，它能被安全的用于局部、體表(local)或系統給藥。
這里使用的術語“藥物兼容的鹽”是指在毒理上能安全用于人和動物的鹽。此鹽可以選自氫氯化物、氫溴化物、氫碘化物、硫酸鹽、硫酸氫鹽、硝酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、酒石酸氫鹽、磷酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、萘磺酸鹽(napsylate)、延胡索酸鹽、琥珀酸鹽、醋酸鹽、對苯二酸鹽、pamoate和果膠酸鹽。
術語“前藥”被用于其最廣泛的含義，包括根據本發明在體內被轉變為阿片樣物質受體激動劑的化合物。本領域的技術人員將容易的想到這類化合物，包括例如，其自由羥基基團被轉變成酯衍生物的化合物。化合物的前藥形式可以被用來例如提高生物利用率，隱藏如苦味之類的令人不快的特征，改變靜脈內使用的溶解性，或者提供化合物位點專一的遞送。
這里可互換使用的術語“降低的阿片樣物質止痛敏感性”、“降低的對阿片樣物質受體激動劑的止痛敏感性”等等，指的是由使用一定量或一定濃度的阿片樣物質受體激動劑所產生的鎮痛的廢除、削弱或降低，而在未用過阿片樣物質的個體，特別是沒有神經病變性疼痛病癥的未用過阿片樣物質的個體，更特別的是沒有外周神經病變性疼痛病癥的未用過阿片樣物質的個體，甚至更特別的是在未用過阿片樣物質的沒有糖尿病的個體中則會產生鎮痛。
這里可互換使用的術語“對象”或“個體”或“病人”，指的是任何需要治療或預防的對象，特別是脊椎動物對象，甚至更特別的是哺乳動物對象。落入本發明范圍的合適的脊椎動物包括(但不限于)靈長類、鳥類、家畜動物(如綿羊、奶牛、馬、驢、豬)，實驗室實驗動物(如兔、小鼠、大鼠、豚鼠、倉鼠)，寵物(如貓、狗)，捕獲的野生動物(如狐貍、鹿、野狗)。優選的對象是需要治療或預防外周神經病變病癥(特別是PDN)的人。然而需要理解的是上述術語并沒有已具有癥狀的含義。
2.產生鎮痛的方法本發明對具有(或處于發展的危險之中)降低的阿片樣物質受體激動劑止痛敏感性的對象提供產生鎮痛的方法。這些方法一般包括對對象分開、同時或順序施用一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑，所述阿片樣物質止痛劑與作為止痛敏感性降低主題的阿片樣受體激動劑激活相同的阿片樣物質受體。使用的一氧化氮供體的量能夠有效的阻止、減弱和/或逆轉對阿片樣物質受體激動劑的降低的敏感性，而使用的阿片樣物質受體激動劑的量能有效的產生鎮痛，該效果通過施用一氧化氮供體而被賦予或者成為可能。一氧化氮供體或阿片樣物質受體激動劑可以合適地與藥物可接受的載體和/或稀釋劑組合，并可以彼此分開或聯合施用。
降低的止痛劑敏感性可能與長期使用阿片樣物質受體激動劑導致的對該激動劑耐受的發展有關。在一實施方案中，降低的止痛劑敏感性與神經病變病癥相關，因此本發明的方法在阻止和/或減輕與神經病變病癥相關的疼痛癥狀上有特別的效用。神經病變病癥有許多可能的病因，可以理解本發明企圖治療或阻止與任何神經病變病癥相關的疼痛，而不論其病因如何。在一實施方案中，神經病變病癥是神經疾病(初級神經病變)和系統疾病引起的神經病變(次級神經病變)的結果，次級神經病變包括但不限于糖尿病神經病變、Herpes Zoster(帶狀皰疹)相關神經病變、尿毒癥相關神經病變、淀粉樣變性病神經病變、HIV感覺神經病變、遺傳性運動和感覺神經病變(HMSN)、遺傳性感覺神經病變(HSNs)、遺傳性感覺和自主神經病變、潰瘍毀損性遺傳神經病變、呋喃妥因神經病變、tumaculous神經病、營養缺乏導致的神經病變和腎衰竭導致的神經病變。其它的原因包括打字或在生產線上工作之類的反復行為、已知引起外周神經病變的藥物治療，如一些AIDS藥物(DDC和DDI)、抗生素(用于克羅恩氏病的抗生素——甲硝唑，用于肺結核的異煙肼)、金化合物(用于風濕性關節炎)、一些化療藥物(如長春新堿及其它)和許多其它藥物。已知化學化合物也會導致外周神經病變，包括醇類、鉛、砷、水銀和有機磷酸酯殺蟲劑。一些外周神經病與感染過程相聯系(如Gulllian-Barre綜合征)。在另一實施方案中，神經病變病癥是如PDN之類的外周神經病變病癥或相關病癥。
神經病變病癥可能是急性或慢性的，在這一關系上，本領域的技術人員將會理解神經病變的時間進程會基于其病因而發生變化。在外傷的情況下，癥狀的發作可能是急性或突然的，最嚴重的癥狀出現于起始或隨后發展。發炎和一些代謝神經病病具有持續幾天至幾周的亞急性過程。持續幾周到幾月的慢性過程通常表明是毒性或代謝性神經病病。慢性的、持續幾年的緩慢進展性神經病病發生于大多數遺傳性神經病變或慢性炎性脫髓鞘病變(CIDP)中。具有復發和緩和癥狀的神經病變病癥包括Guillian-Barre綜合征。
有利的是，一氧化氮供體和阿片樣物質受體激動劑與具有其它有用的抗神經病變特性的組合物或利于減輕目標神經病變病癥的癥狀和征兆的組合物一起使用。
不希望被任何特定的理論或操作模式所束縛，因此認為一氧化氮供體誘導直接的或間接的對阿片樣物質受體的生理作用，以使它們能被相關的阿片樣物質受體激動劑激活，由此產生除痛覺/鎮痛效果。因此，在另一實施方案中，本發明提供對具有與阿片樣物質受體低敏性相關病癥(或處于發展的危險之中)的對象產生鎮痛的方法，其中所述方法一般包括將能使阿片樣物質受體被相關的阿片樣物質受體激動劑激活的有效量的一氧化氮供體分別、同時或相繼地與能在對象中激活該受體并產生鎮痛的有效量的阿片樣物質受體激動劑一起給對象使用。
一氧化氮供體包括任何在體內能被轉變、降解或代謝成一氧化氮，或提供一氧化氮資源的物質。這一范疇包括具有不同結構特征的化合物。例如，一氧化氮供體包括(但不限于)L-精氨酸、硝普鈉、硝化甘油、三硝酸甘油、單硝酸異山梨醇酯、二硝酸異山梨醇酯、S-亞硝基-N-乙酰基-青霉胺、假酸棗仁皂苷配糖類(pseudojujubogenin glycoside(如達瑪烷型三萜皂苷(如bacopasaponins))和它們的衍生物或類似物。在一實施方案中，一氧化氮供體是L-精氨酸或其類似物或衍生物。因此，在另一方面，本發明向具有(或處于發展的危險之中)降低的阿片樣物質受體激動劑止痛敏感性的對象提供產生鎮痛的方法，包括向對象分別、同時或相繼施用有效量的L-精氨酸(或其類似物或衍生物)和有效量的阿片樣物質止痛劑，所述阿片樣物質止痛劑與作為止痛敏感性降低地主題的阿片樣物質受體激動劑激活相同的阿片樣物質受體。
在一實施方案中，阿片樣物質止痛劑是μ-阿片樣物質受體激動劑或在體內被代謝或轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物。例如，阿片樣物質受體激動劑可以選自嗎啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氫嗎啡酮、羥嗎啡酮，它們的類似物、衍生物或前藥和它們藥物兼容的鹽。合適的阿片樣物質受體激動劑是嗎啡或其類似物、衍生物或前藥或其藥物兼容的鹽。在另一實施方案中，阿片樣物質止痛劑是K2-阿片樣物質受體激動劑。K2-阿片樣物質受體激動劑在體內可被代謝成或轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑。合適的K2-阿片樣物質受體激動劑是任何在施用后能與阿片樣物質受體結合并導致該受體激動、部分激動或混合激動/拮抗的化合物，它的除痛覺效果會被nor-BNI(nor-binaltorphimine，一種假定的選擇性K1/K2-阿片樣物質受體配體)減弱或損害，它并不從大鼠腦膜中取代K2-選擇性放射配體[3H]U69,593的結合。施用的化合物的代謝物也包含于術語阿片樣物質受體激動劑中。合適的阿片樣物質受體激動劑是羥考酮和其類似物、衍生物或前藥或它們的藥物兼容的鹽。
一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑可以分離的化合物或以綴合物的形式被提供。本發明設計的綴合物包含與至少一個阿片樣物質止痛劑連接或偶聯或結合的至少一個一氧化氮供體。在一實施方案中，綴合物包括通過合適的連接物與硝酸基基團偶聯的阿片樣物質受體激動劑。此類的綴合物包括(但不限于) 嗎啡 羥嗎啡酮 可待因 羥考酮其中R是H或下式表示的基團 其中A不存在或代表基團-O-、-S-、-NH-、-C6H4-、-OC6H4-、-SC6H4-或-NHC6H4-；m是0或從1到10的整數；和n是從1到10的整數，或者當A不存在并且m是0時，n是3到10的整數，
和它們的藥物兼容的鹽。
合適的R是以下通式所代表的基團
在本發明的實施方案中，綴合物是以下通式所代表的化合物和其藥物兼容的鹽
一氧化氮供體的有效劑量是這樣一種劑量，其能有效阻止、減輕和/或逆轉降低的止痛劑敏感性，將止痛劑敏感性恢復到以前存在的敏感性水平，包括阻止、減輕和/或逆轉對阿片樣物質受體激動劑的止痛低敏性的發展，其與神經病變病癥，包括如PDN之類的外周神經病變病癥或相關病癥相關。阿片樣物質受體激動劑的有效劑量是這樣一種劑量，其由于一氧化氮受體而能有效治療或阻止疼痛相關病癥中的疼痛，包括阻止疼痛的發生、控制疼痛，和/或治療存在的疼痛。疼痛可以與任何疼痛相關病癥相聯，包括癌癥和神經病變病癥，特別是如PDN之類的外周神經病變病癥。本發明的方法中所使用的施用模式、所用一氧化氮供體和阿片樣物質受體激動劑的量和配劑將在下文公開。
疼痛是否被治療是通過測試一項和多項指示疼痛的診斷參數(如主觀疼痛評分、tail-flick test和觸覺異常性疼痛)并與合適的對照相比較而得出的。在動物實驗的情況下，“合適的對照”是沒有用一氧化氮供體和/或阿片樣物質受體激動劑治療，或用不含一氧化氮供體和/或阿片樣物質受體激動劑的藥物組合物治療的動物。在人類對象的情況下，“合適的對照”可以是治療之前的個體，或用安慰劑治療的人(如年齡匹配的或相似的對照)。根據本發明，對疼痛的治療包括但不限于(i)阻止對象所經歷的疼痛，該對象可能會發展成某一病癥，但是還沒有被診斷出此病癥，因此，所述治療構成對該病理病癥的預防治療；(ii)抑制疼痛的發生或疼痛病癥，即阻止它的發展；(iii)減輕疼痛，即導致疼痛起始或疼痛病癥的衰退；或(iv)減輕被認為導致疼痛的疾病或病癥的癥狀，如減輕疼痛的感覺但不解決其病因。
3.組合物本發明的另一方面提供產生鎮痛，特別是治療、阻止和/或減輕神經病變病癥的疼痛癥狀的組合物。這些止痛組合物一般包括有效阻止、減輕或逆轉降低的對阿片樣物質受體激動劑的止痛敏感性的一氧化氮供體，和阿片樣物質止痛劑。合適的是，阿片樣物質止痛劑與作為止痛敏感性降低的主題的阿片樣物質受體激動劑激活相同的阿片樣物質受體，并且以能夠在對象中有效產生鎮痛的劑量存在。
任何已知的一氧化氮供體和/或阿片樣物質受體激動劑組合物能被用于本發明的方法中，只要一氧化氮供體和/或阿片樣物質止痛劑具有藥物活性。“藥物活性的”一氧化氮供體處于這樣一種形式，這種形式能夠阻止、減輕或逆轉對阿片樣物質受體激動劑的降低的止痛敏感性的發展，如阻止、減輕或逆轉與神經病變病癥相關的阿片樣物質受體激動劑低敏性的發展。“藥物活性的”阿片樣物質止痛劑處于這樣一種形式，這種形式激活相應阿片樣物質受體，或被賦予了激活相應阿片樣物質受體的能力，或在體內被代謝或轉變成能激活相應的阿片樣物質受體。
本發明組合物的效果可以被本領域已知的一種或多種公開的疼痛/傷害感受模型，或神經病變，特別是外周神經病變，更特別的是PDN模型來檢測。如這里所描述的例子，這可以通過使用評估痛覺過敏或觸覺異常性疼痛發作和發展之類的模型來證明。本發明組合物的止痛活性可以通過本領域已知的任何方法來評估。這類方法的例子有Tail-flicktest(D’Amour等人1941，J.Pharmacol.Exp.and Ther.7274-79)；Rat Tail Immersion Model、Carrageenan-誘導的腳掌異常性疼痛模型；Formalin Behavioral Response Model(Dubuisson等人1977，Pain 4161-174)；Von Frey Filament Test(Kim等人1992，Pain 50355-363)；Chronic Constriction Injury；Radiant Heat Model；Cold AllodyniaModel(Gogas等人1997，Analgesia 3111-118)；poor pressuretest(Randall和Selitto，1997，Arch Int Pharmacodyn 111409-414)以及paw pressure test(Hargreaves等人1998，Pain，3277-88)。實施例2描述了測量神經病變大鼠中測試化合物對觸覺異常疼痛反應的效果的體內分析。
在這類分析中被測試為陽性的組合物對于阻止、降低或逆轉包括癌癥在內的各種疼痛相關病癥和病理的阿片樣物質低敏性特別有用，并且對于阻止、降低或逆轉神經病變性疼痛引起的阿片樣物質低敏性(如在糖尿病人中發現的)特別有用。
本發明的活性化合物可以以鹽與藥物兼容的抗衡離子的形式被提供。藥物兼容的鹽可通過許多酸來形成，包括(但不限于)鹽酸、硫酸、醋酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、琥珀酸等等。鹽在水或其相應游離堿形式的質子溶劑中更易溶。
適合用于本發明的藥物組合物包括含有能完成它們設計意圖的有效量的藥物活性化合物的組合物。用于病人的活性化合物的劑量應該在病人體內經過一段時間足以完成一有利的反應，如降低或減輕疼痛。使用的藥物活性化合物的量可能依賴于被治療的對象，包括他們的年齡、性別、體重和總體健康情況。在此考慮下，所使用的活性化合物的精確量將依賴于從業者的判斷。在確定被用于產生鎮痛的活性化合物的有效量時，醫生可以評估與傷害性疼痛或發炎疼痛相關的疼痛癥狀的嚴重性，或與神經病變病癥，特別是如PDN之類的外周神經病變病癥相關的麻木、虛弱、疼痛、反射的喪失和觸覺異常性疼痛的嚴重性。無論如何，本領域的技術人員可以容易的確定本發明一氧化氮供體和/或阿片樣物質受體激動劑的合適的劑量，而無需過多的實驗。
在一實施方案中，依賴于設計的施用模式，含有一氧化氮供體的組合物一般含有重量百分比約0.1％到90％、約0.5％到50％或約1％到約25％的一氧化氮供體，其余是合適的藥物載體和/或稀釋劑等等，以及任選阿片樣物質受體激動劑。通常，對于二硝酸異山梨醇酯，每目的一氧化氮供體劑量可能是每天約5到250mg、約10到150mg或20到120mg。一氧化氮供體的劑量可能依賴于大量因素，如不同的一氧化氮供體、施用模式、作用對象的種類、年齡和/或個體狀況。通常，口服的情況下，對于重量約為75kg的成年病人，每日所用L-精氨酸的劑量約10到5000mg，或者約200到2000mg，合適的劑量為500到1000mg。
在另一實施方案中，依賴于設計的施用模式，含有阿片樣物質受體激動劑的組合物一般含有重量百分比約0.1％到90％、約0.5％到50％或約1％到約25％的阿片樣物質受體激動劑，其余是合適的藥物載體和/或稀釋劑等等，和任選一氧化氮供體。通常，對于沒有用過阿片樣物質的成年人而言，一日的嗎啡口服劑量可能是約每天10到300mg、約每天20到200mg或約每天30到180mg。通常，口服的情況下，對于沒有用過阿片樣物質的成年人而言，羥考酮一日的口服劑量可能是約每天5到200mg、每天約10到約150mg或每天約20到100mg，這是為體重約75公斤的人估算的。
依賴于所治療的特定的神經病變病癥，活性化合物可以配制成為系統、體表或局部使用。配制或施用的技術可見于″Remington′sPharmaceutical Sciences，″Mack Publishing Co.，Easton，Pa.最新版。合適的途徑可包括如口腔、直腸、跨粘膜或腸內施用；腸胃外施用，包括肌內、皮下、髓內注射，以及鞘內注射、直接心室注射、靜脈注射、腹腔注射、鼻內注射、或眼內注射。為了注射，本發明的治療試劑可在水溶液中配制，合適的是在Hanks′溶液、Ringer′s溶液或生理鹽緩沖液之類的生理兼容的緩沖液中配制。為了跨粘膜給藥，在配方中使用了適合透過障礙的滲透劑，這類滲透劑是本領域通常所熟悉的。
替代的是，本發明的組合物可以被配制來用于局部或體表給藥。在這種情況下，目的組合物可以任何合適的方式被配制，包括(但不限于)霜劑、凝膠、油、軟膏、溶液和栓劑。這類體表組合物可能包括苯扎氯銨、洋地黃皂苷、二氫細胞松弛素B、癸酸之類的滲透增強劑，將pH從7.0增加到8.0。在這種考慮下，加強活性化合物對表皮滲透的滲透增強物是有利的。替代的，體表組合物可以包括包裹本發明活性化合物的脂質體。
本發明的組合物可以以含有可接受的稀釋劑(如鹽水和無菌水)的液體形式，或以含有可接受的稀釋劑或載體(以獲得所需的結構、稠度、粘度和外觀)的洗液、霜劑或凝膠形式被配制施用。可接受的稀釋劑和載體是本領域的技術人員所熟悉的，包括(但不限于)乙氧基化和非乙氧基化的表面活性劑、脂肪醇、脂肪酸、烴油(如棕櫚油、椰子油和礦物油)、可可油蠟、硅油、pH平衡劑、纖維素衍生物、乳化劑(如非離子有機和無機基礎的)、保存試劑、蠟酯、固醇、甘油三酯、磷脂(如卵磷脂和腦磷脂)、多羥基醇酯、脂肪醇酯、親水羊毛酯衍生物和親水蜂蠟衍生物。
替代的，可以用本領域眾所周知的藥物可接受載體將本發明的活性化合物配制成適合口服的劑型，這也是本發明的實踐所優選的。這類載體能夠使本發明的化合物配制成如藥片、藥丸、膠囊、液體、凝膠、糖漿、結晶漿液、懸浮液之類的藥劑形式，以便被治療病人口服攝取。這些載體可選自糖、淀粉、纖維素和其衍生物、麥芽、明膠、滑石、硫酸鈣、植物油、合成油、多元醇、褐藻酸、磷酸緩沖溶液、乳化劑、等滲鹽水和無熱源水。
腸胃外給藥的藥物配方包括水溶形式的活性化合物的水溶液。另外，可制備活性化合物的懸浮液，作為適當的油性注射懸浮液。合適的親脂性溶劑或載體包括脂肪油(如芝麻油)或合成脂肪酸酯(如油酸乙酯或甘油三脂)，或脂質體。水性注射懸浮液可能包括增加懸浮液粘性的物質，如羧甲基纖維素鈉、山梨醇或右旋糖酐。可選的，懸浮液還包括合適的穩定劑或增加化合物穩定性的試劑，以允許制備高濃度的溶液。
口服用途的藥物制品可以通過將活性化合物與固體賦形劑混合獲得，可選地在加入合適的輔料之后(如果需要)，研磨產生的混合物，并將混合物加工成顆粒，以得到藥片或糖衣丸。特別的，合適的賦形劑是填充物，如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纖維素制品，如玉米淀粉、小麥淀粉、大米淀粉、土豆淀粉、明膠、黃芪膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要的話，可以加入分解劑，如交聯聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或褐藻酸或其鹽(如藻酸鈉)。這類組合物可以通過藥劑學的任何方法制備，但是所有的方法都包括將以上描述的一種或多種治療試劑與組成一種或多種必要成分的載體相組合的步驟。總體而言，本發明的組合物可以通過它自身已知的方法被制造，如通過傳統的混合、溶解、粒化、制作糖衣、磨細、乳化、裝入膠囊、截留或凍干的方法。
給糖衣丸提供合適的包衣。為此目的可能使用合適的糖溶液，它可選地含有阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚羰乙烯膠、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液和合適的有機溶劑或溶劑混合物。染料或色素可以被加入藥片或糖衣，以用于鑒定或表征活性化合物劑量的不同組合。
能夠被用于口服的藥品包括由明膠制成的推入插合(push-fit)膠囊，和由明膠和可塑劑(如甘油或山梨醇)制成的柔軟密封的膠囊。推入插合膠囊可以含有活性成分，并混合有填充劑(如乳糖)、粘合劑(如淀粉)和/或潤滑劑(如滑石或硬脂酸鎂)，可選地含有穩定劑。在軟膠囊中，活性化合物可以被溶解或懸浮于合適的液體，如脂肪油、液體石蠟或液態聚乙二醇。另外，也可以加入穩定劑。
本發明活性化合物的劑型也可以包括為這一目的專門設計的注射或植入型控制釋放裝置或以這種方式附加運作地的其它形式的植入體。本發明活性化合物的控制釋放可以通過包裹活性化合物來完成，如使用疏水性聚合物，包括丙烯酸樹脂、蠟、高級脂肪醇、多聚乳酸和多聚乙醇酸以及一定的纖維素衍生物(如羥丙基甲基纖維素)。另外，通過使用其它聚合物基質、脂質體和/或微球體也可以完成控制釋放。
依賴于一些因素，本發明活性化合物可以被施用幾小時、幾天、幾周或幾月，這些因素包括被治療的神經病變病癥的嚴重性，考慮病癥是否會反復等等。施用可以是連續的，如持續幾小時、幾天、幾周、幾月的連續灌輸等等。可選的，施用也可以是間斷的，如活性化合物可以在若干天內每天施用一次，或若干小時內每小時施用一次，或任何其它認為合適的此類方案。
本發明的組合物也可以通過呼吸道施用，作為鼻或肺吸入的氣霧劑或噴霧器用的溶液，或噴射用的超細粉末，單獨或與惰性載體(如乳糖)或與其它藥物接受的賦形劑組合。在這種情況下，配劑的顆粒直徑低于50微米較為有利，合適的是低于10微米。
為了本發明能被容易的理解并付諸應用，通過以下非限制性的實施例描述了特定的優選實施方案。
實施例實施例1評估μ-阿片樣物質受體激動劑在STZ糖尿病大鼠中的短暫除痛覺能力材料和方法頸靜脈套管插入術和糖尿病誘導使用氯胺酮(100mg/kg，腹膜內)和噻拉嗪(16mg/kg，腹膜內)的混合物誘導深度和穩定的麻醉，以便將聚乙烯管(事先填入0.1ml無菌鹽水)插入右頸總靜脈。通過抽出少量的血液來測試頸靜脈管是否被正確放置。通過向頸靜脈迅速靜脈內注射鏈脲菌素(STZ)(85mg/kg)的0.1M檸檬酸緩沖液來誘導糖尿病。
通過監測單個大鼠的攝水量和血糖濃度來確證糖尿病。對于快速研究使用，用GlucostixTM或Precision QIDTM測試試劑盒來監測血糖。
與本領域接受的標準規程一致，在注射STZ 7天后，每天飲水超過100ml的大鼠被歸為糖尿病，只有血糖濃度超過15mM的大鼠被用于以后的實驗。通過比較，對照的非糖尿病大鼠的攝水量約為每天20ml，血糖濃度在5-6mM范圍，與之前本領域眾所周知的研究相一致。各種實驗中糖尿病誘導的整體成功率約為75％。首次用于實驗的非糖尿病大鼠被用于對照實驗(n＝36)。在使用STZ之后，使用芐青霉素(60mg，皮下)來防止感染，并在手術恢復過程中嚴密監控大鼠。依據它們所屬的研究組，大鼠被單獨或成對飼養3至38周的時間。
藥物劑量溶液通過將鹽酸嗎啡和鹽酸羥考酮溶解于無菌鹽水制備成濃度分別為45和80mg/ml(以游離堿計算)的用于皮下給藥的嗎啡和羥考酮儲備液。這些儲存溶液被等分成若干存與-20℃，直至使用。分裝的嗎啡或羥考酮儲存液在溶化之后被無菌鹽水連續稀釋成皮下給藥所需的阿片樣物質藥物濃度。在使用CO2/O2(50∶50％)輕度麻醉大鼠的同時，使用250μl Hamilton注射器于大鼠頸底脊區皮下注射100μl一種阿片樣物質或載體(鹽水)。
除痛覺的評估用von Frey filament定量機械性異常性疼痛(疼痛性糖尿病性神經病變的區別特征)。大鼠被置于具有金屬網底的代謝籠(20cm×20cm×20cm)，并允許約十分鐘的適應。von Frey filament被用來定量敏捷腳掌收縮反應所需的最低機械閾值。將力量施加于左后腳的腳掌表面，并保持到纖維發生輕微彎曲。在5s之后沒有反應則立即將增加力量施加下一根纖維。可使用的纖維包括產生2、4、5、6、8、10、12、14、16和18g彎曲重量的纖維。在進行除痛覺測試之前對纖維進行每日校準。對于使用任何von Frey filament在左后足腳底表面而沒有反應的動物被計為20g。用藥前(阿片樣物質或鹽水)反應取間隔5分鐘的3次讀數的平均值。von Frey filament反應的評估于使用阿片樣物質(或鹽水)之后的15、30、45、60、90、120和180分鐘進行。
數據分析根據公式％MPE＝(用藥后閾值-用藥前閾值)/(最大閾值-用藥前閾值)×100/1(其中最大VFF閾值＝20g)，將單個大鼠的von Frey記錄轉變成最大可能除痛覺效果(％MPE)的百分率。
使用梯形法則計算％MPE-時間曲線(時間＝0-180分鐘)的面積(％MPE AUC)。根據以下公式％Max AUC＝％MPE AUC/最大％MPE AUC×100/1(其中最大％MPE AUC＝263％MPE-h)，計算最大AUC(％Max AUC)平均百分數(±SEM)。
以每一嗎啡或羥考酮劑量的％Max AUC對各自的藥物劑量作圖，產生單個劑量-反應曲線。統計分析包(GraphPad PrismTM)對％Max AUC和劑量值對數進行非線性回歸以估計嗎啡或羥考酮的ED50劑量(平均值±SEM)。通過引入理論最大和最小％Max AUC值而方便了ED50估計。
研究設計和阿片樣物質劑量方案這一研究包括3組STZ-糖尿病DA大鼠。在使用STZ后第3周，組1(n＝36，207±5g，平均值±SEM)大鼠皮下接受3藥丸之一劑量的嗎啡或羥考酮。皮下注射羥考酮和嗎啡的起始劑量是我們實驗室先前用于減輕坐骨神經慢性收縮性損傷引起的觸覺異常性疼痛的劑量。隨后的劑量是為了構建減輕觸覺異常性疼痛的劑量-反應曲線。使用校準的von Frey filament定量除痛覺。
作為比較，在9周的時期內研究了組2糖尿病大鼠(n＝25，256±3.6g，平均值±SEM)的急性除痛覺反應，以便單個大鼠在皮下接受3藥丸之一劑量的嗎啡或羥考酮，從而在使用STZ后第9周產生劑量-反應曲線。
組3糖尿病大鼠(n＝37，233.0±5.1g，平均值±SEM)在6個月的研究時期內被連續研究，以便單個大鼠皮下接受3藥丸之一劑量的嗎啡或羥考酮，從而在使用STZ后的12和24周產生劑量-反應曲線。
在每一次的除痛覺測試中，每一實驗組的大鼠被隨機分配皮下接受藥丸劑量的羥考酮或嗎啡，以便于每只大鼠接受兩次或三次阿片樣物質的劑量，并且在兩次劑量間具有完整4天的清除時間。
另外，研究了一組重量匹配的首次用于實驗的非糖尿病對照大鼠(n＝36，210±4g，平均值±SEM)，以便單個大鼠皮下接受3藥丸之一劑量的嗎啡或羥考酮，從而產生產生劑量-反應曲線。
結果糖尿病性神經病變性疼痛在短期(3周)和長期研究(6月)中糖尿病性神經病變性疼痛的發展在注射STZ后的第8天，腳掌收縮閾值的平均值(±SEM)出現顯著(p＜0.0001)降低，從對照非糖尿病大鼠的11.9(±0.15)g降到8.0(±0.3)g(圖1)。注射STZ后3周，腳掌收縮閾值的平均值(±SEM)進一步顯著(p＜0.0001)降低到5.23(±0.34)g(圖1)。在接下來的兩個月，腳掌收縮基線閾值平均值(±SEM)相對穩定，在注射STZ后的9和12周分別為5.0(±0.1)g和4.7(±0.1)g。在12到24周之間，腳掌收縮閾值基線平均值(±SEM)的減小幅度較小，但仍然顯著(p＜0.0001)，以致注射STZ后24周，腳掌收縮閾值平均值(±SEM)為3.3(±0.1)g。綜上，在對STZ誘導的糖尿病大鼠的6個月的研究中，這些數據與機械性異常性疼痛(PDN的定義癥狀)的發展和保持相一致。
STZ-糖尿病對嗎啡和羥考酮減輕機械性異常性疼痛能力的影響的縱向研究注射STZ后第3周在皮下給藥嗎啡(4mg/kg)后，15分之內獲得除痛覺峰值(70％MPE)。在注射之后的90分鐘，除痛覺水平降到基線水平(＜20％MPE)。在藥丸皮下給藥羥考酮(1.7mg/kg)之后，注射的30分鐘之后獲得除痛覺峰值(90％MPE)，然后在注射的120分鐘之后降到基線水平(＜20％MPE)。皮下施用其它藥丸劑量的羥考酮和嗎啡產生了相似的除痛覺程度(％MPE)對時間的曲線。嗎啡和羥考酮在糖尿病大鼠中的相應平均(±SEM)ED50劑量分別是6.1(±0.3)mg/kg和2.0(±0.15)mg/kg(表1)，表明在STZ-糖尿病大鼠中，羥考酮減輕機械性異常性疼痛的能力比嗎啡高三倍。作為比較，在不具有糖尿病的大鼠(初次用于實驗的對照大鼠)中，嗎啡和羥考酮的ED50劑量分別是2.4(±0.3)mg/kg和1.2(±0.04)mg/kg(表1)。綜上，這些數據表明在施用STZ后第3周，STZ誘導的糖尿病使DA大鼠的嗎啡劑量-反應曲線向右偏移約2.5倍(p＜0.05)，羥考酮曲線偏移約1.7倍(p＜0.05)。
注射STZ后第9周皮下施用嗎啡和羥考酮的除痛覺反應(％MPE)平均值(±SEM)對時間的曲線及劑量對數-反應的曲線被示于圖2和3。對于皮下施用嗎啡和皮下施用羥考酮來說，第9周的劑量-反應曲線與各自第3周的劑量-反應曲線并無顯著差別。特別是，嗎啡和羥考酮的平均(±SEM)ED50值分別是6.1(±0.4)mg/kg和2.1(±0.4)mg/kg。
注射STZ后第12周值得注意的是，在施用STZ后的12周，嗎啡的除痛覺能力被完全廢除了。為了測試高劑量的嗎啡是否會引起除痛覺反應，使用了約為起始ED50值2.5倍的劑量(14.2mg/kg)。然而，嗎啡功效仍然被完全廢除。皮下施用更高的嗎啡劑量(18mg/kg)的初始實驗在STZ糖尿病大鼠中產生了中度的神經興奮行為(肌陣攣和撕咬金屬網籠底部)和除痛覺反應的消失，進一步增加嗎啡劑量得到了相似的結果。
相反，在注射STZ后的12周羥考酮仍然保持除痛覺功效，雖然在9到12周之間其能力進一步降低了兩倍。特別是，在注射STZ 12周之后的糖尿病大鼠中，羥考酮減輕機械性異常性疼痛的平均(±SEM)ED50劑量是4.1(±0.3)mg/kg(表1)，在第9周為2.1(±0.4)mg/kg。
注射STZ后第24周與使用STZ后12周所觀察到的結果相似，嗎啡的功效被完全廢除，即沒有嗎啡除痛覺功效喪失的短暫逆轉。相反，發現羥考酮的能力與注射STZ后的12周所測定的相同(ED50＝4.2(±0.3)mg/kg)。
總結上述實驗表明，羥考酮和嗎啡的除痛覺能力都有短暫的逐步下降，但是這兩種阿片樣物質試劑的效能喪失的時間過程卻不同。與臨床上所廣泛認為的嗎啡對于減輕病人的PDN無效的觀點一致，這些結果表明，在使用STZ后的12周，嗎啡減輕糖尿病大鼠機械性異常性疼痛的功效被完全廢除了。相比而言，在整個24周的研究時期內，羥考酮的功效被保持了，雖然在12周時其除痛覺能力下降了4倍，在24周時其相對于非糖尿病對照大鼠保持不變。
重要的是，羥考酮的除痛覺功效在注射STZ之后的整個24周的研究時期內被保持了，雖然相對于初次實驗的非糖尿病大鼠的ED50降低了4倍。推廣到臨床應用，此發現表明羥考酮(與嗎啡相反)將保持其減輕病人疼痛性糖尿病性神經病變的功效，這與Watson等人最近報道的羥考酮能有效減輕帶狀皰疹后神經痛(另一難以治療的持續疼痛)病人的神經病變性疼痛(Neurology，50 1837-41 1998)相一致。
與先前關于非糖尿病嚙齒類的報道相一致，在皮下途徑給予初次實驗非糖尿病大鼠的情況下，在注射STZ之后的3周和9周，發現羥考酮的效力比嗎啡高兩倍。另外，發明者先前的實驗室研究已表明用tailflick test在初次實驗Dark Agouti大鼠中定量時，皮下施用羥考酮比嗎啡的效力高三倍，而在具有坐骨神經慢性收縮性損傷(CCI)的大鼠中，羥考酮減輕機械性異常性疼痛的能力比嗎啡高4倍(Smith等人，2001，Eur J Pain 5(Suppl A)135-136)。
實施例2L-精氨酸恢復阿片樣物質受體激動劑在PDN中的除痛覺能力材料和方法研究設計，L-精氨酸的施用和阿片樣物質的劑量方案此研究包括3組STZ-糖尿病DA大鼠組1的STZ-糖尿病DA大鼠(n＝25，256±3.6g，平均值±SEM)在6個月的時期內被連續研究，單個大鼠受到(i)3藥丸之一劑量的皮下嗎啡或羥考酮，以產生施用STZ后9、12和24周的劑量-反應曲線，或(ii)施用STZ后16和20周的嗎啡和/羥考酮ED50劑量。在交叉實驗中的一些情況下，每個實驗組中大鼠有兩次或三次機會皮下接受單劑量的嗎啡或羥考酮，在兩次劑量之間具有完整4天的清除時間。在使用STZ后第9周，組1的STZ-糖尿病大鼠受到加入鼠飼料的L-精氨酸添加劑(每天1g)的飲食干涉，直到24周的研究時期的結束。
組2的STZ-糖尿病大鼠(n＝17，233.7±4.1g，平均值±SEM)在6個月的時期內被連續研究，以便單個大鼠(n＝6)皮下接受ED50劑量的嗎啡和/或羥考酮(分別為6.1mg/kg或2.0mg/kg)，以評估使用STZ后14、18和22周的快速除痛覺反應。在使用STZ后第14周，開始持續8周的含有L-精氨酸添加劑(于鼠飼料中每天1g)的飲食干涉。
組3的STZ-糖尿病大鼠(n＝6，224.7±2.9g，平均值±SEM)是用于上述實施例1相同的大鼠。這些大鼠先前在注射STZ后第9、12和24周皮下接受了單一.藥丸劑量的羥考酮或嗎啡。此后，單個大鼠皮下接受ED50劑量的嗎啡或羥考酮，以產生34和38周的快速除痛覺反應-時間曲線。在使用STZ后的30周，開始含有L-精氨酸添加物(于鼠飼料中每天1g)的飲食干涉，并持續8周。
另外，研究了一組重量匹配的初次實驗非糖尿病對照DA大鼠(n＝18，236.8±2.5g，平均值±SEM)，單個大鼠皮下接受3藥丸之一劑量的嗎啡或羥考酮，以產生除痛覺劑量-反應曲線。重量匹配的初次實驗DA對照大鼠在快速施用阿片樣物質以及同時進行的除痛覺測試之前至少接受一周的飲食補充L-精氨酸(于鼠飼料中每天1g)。重要的是，由于糖尿病大鼠的食量是初次實驗非糖尿病對照大鼠的兩倍，在喂給非糖尿病對照大鼠的鼠飼料中的L-精氨酸的濃度被加倍了，以保持STZ-糖尿病大鼠和非糖尿病對照大鼠的L-精氨酸劑量一致。
結果糖尿病性神經病變性疼痛糖尿病性神經病變性疼痛的發展及L-精氨酸添加劑對von Frey腳掌收縮閾值的影響的長期研究未使用過藥物的STZ-糖尿病DA大鼠的腳掌收縮閾值平均值(±SEM)顯著低于(p＜0.0001)非糖尿病對照大鼠的腳掌收縮閾值平均值(±SEM)(11.9±0.2g)。特別是，在注射STZ后第9周，非糖尿病大鼠的腳掌收縮閾值平均值(±SEM)顯著降低(p＜0.0001)，從11.9(±0.2)g降到6.8(±0.3)g(組1)。相似的，在注射STZ后第14周的組2 STZ-糖尿病大鼠(3.8±0.2g)和注射STZ后第24周的組3 STZ-糖尿病大鼠(3.1±0.3g)中觀察到的相對于初次實驗非糖尿病對照大鼠(11.9±0.2g)的腳掌收縮閾值平均值(±SEM)的顯著降低(p＜0.0001)表明了在誘導大鼠糖尿病之后的累積6個月內，觸覺異常性疼痛(PDN的定義癥狀)得到了發展和保持。這些發現說明了在我們實驗室中STZ-糖尿病和相關觸覺異常性疼痛的誘導和保持是具有重復性的。
組1連續15周(從注射STZ之后的9周到24周)對組1的STZ-糖尿病大鼠的食物中加入L-精氨酸，導致腳掌收縮閾值在注射STZ后第9周為6.8(±0.3)g，在注射STZ后第12周為4.3(±0.1)g，并在注射STZ后第24周增加到5.2(±0.1)g。
組2相似的，對組2的STZ糖尿病大鼠于注射STZ后第14周開始食物添加L-精氨酸，導致腳掌收縮閾值從注射STZ后第14周的3.8(±0.2)g少量增加到L-精氨酸治療4周(注射STZ 18周后)后的4.9(±0.2)g和8周(注射STZ 22周后)后的6.1(±0.4)g。
組3雖然在組3的STZ-糖尿病大鼠中直到注射STZ 30周后才使用含有L-精氨酸的食品添加劑，但是觀察到了少量卻顯著的腳掌收縮閾值的增加，其中閾值從24周的3.1(±0.3)g增加到L-精氨酸治療開始4周后的3.9(±0.2)g和8周后的5.0(±0.2)g(分別是注射STZ后的34和38周)。這些數據與整個實驗時期注射STZ的大鼠的觸覺異常性疼痛(PDN的定義癥狀)的發展和保持相一致。
使用L-精氨酸的對照組相對于接受標準鼠飼料食物的非糖尿病對照大鼠的閾值(11.9±0.2g)而言，對重量匹配的非糖尿病對照大鼠食物加入L-精氨酸一周后，沒有對基線腳掌收縮閾值(13.3±0.12g)產生明顯的作用。
L-精氨酸食品添加對STZ-糖尿病大鼠體重的影響組1僅僅在使用STZ之前，組1大鼠的體重為256.0(±3.6)g。與發明者先前在實驗室的研究相一致，STZ的使用導致體重下降約10％，以致于在注射STZ后第9周，STZ-糖尿病大鼠的體重為223.6(±5.5)g。在食物添加L-精氨酸3周和7周后(分別為注射STZ后的12周和16周)，重量平均值(±SEM)保持相對穩定，分別為229.0(±6.0)g和218.0(±7.2)g。發現在精氨酸治療11和15周后(分別為使用STZ后的20周和24周)，體重平均值(±SEM)為253.4(±9.9)g(注射STZ之后20周，n＝6)和234.5(±5.1)g(注射STZ之后24周，n＝25)。使用L-精氨酸11周和15周之后(使用STZ之后的20和24周)的約5％的平均體重差異幾乎肯定是由于兩組樣品大小的顯著差異所致。重要的是，體重的保持貫穿于整個精氨酸治療的長時期(15周)內，并在使用L-精氨酸食品添加約10周后發現體重的逐漸增加。
組2對于組2 STZ-糖尿病大鼠，在使用STZ時的平均(±SEM)體重為239.7(±4.9)g，在使用STZ后的14周體重為211.5(±3.4)g，下降約10％。在食物添加L-精氨酸的4周和8周后(注射STZ后的18和22周)，糖尿病大鼠的平均(±SEM)體重保持相對穩定，分別為203.2(±6.4)g和220.9(±11.6)g。
組3在使用STZ時，組3大鼠的平均(±SEM)體重為228.8(±4.18)g。這些大鼠的平均體重下降了約10％，降為201.0(±7.1)g，此結果一直保持到使用STZ之后的24周。食物L-精氨酸干涉后的第4周(注射STZ后的34周)，這些大鼠的體重平均值(±SEM)為207.8(±10.7)g。與接受食物L-精氨酸干涉8周的組2 STZ-糖尿病大鼠相一致，從開始添加食物L-精氨酸之后的4到8周內，這些大鼠的平均體重(±SEM)有少量卻是顯著的增長(p＜0.05)，在治療的8周后(即注射STZ后的38周)體重達到了221.7(±11.7)g。
使用L-精氨酸的對照組先于除痛覺測試之前添加食物L-精氨酸1周的重量匹配的非糖尿病對照大鼠的平均體重(±SEM)從215.2(±2.0，n＝8)g增加到236.3(±2.5，n＝18)g，與預期的此年齡非糖尿病對照大鼠的體重增加相一致。
食物精氨酸干涉對嗎啡和羥考酮減輕STZ-糖尿病大鼠的機械性異常性疼痛能力的影響的縱向研究使用L-精氨酸的對照大鼠對先于除痛覺測試之前添加食物L-精氨酸1周的未使用過阿片樣物質的非糖尿病對照大鼠皮下施用嗎啡的劑量-反應曲線的統計比較表明，嗎啡的ED50與接受標準鼠飼料食物的對照大鼠所測定的值并無顯著差異(p＞0.05)。相似的，接受食物L-精氨酸干涉的大鼠的羥考酮ED50值(1.0±0.1mg/kg)與喂以標準鼠飼料食物的大鼠的值并無顯著差異(p＞0.05)。這些發現表明，在未使用過阿片樣物質的非糖尿病對照大鼠中長期使用L-精氨酸并不會并不會以與嗎啡相似的方式調節羥考酮的除痛覺作用。
食物補充L-精氨酸的組1 STZ-糖尿病大鼠注射STZ后9周—先于添加食物L-精氨酸之前在發明者早期的實驗室研究中，使用STZ后第9周的皮下嗎啡和皮下羥考酮的劑量-反應曲線(圖4和圖5)都與可比的在使用STZ后第3周測定的劑量-反應曲線沒有顯著差異。特別的，嗎啡和羥考酮的ED50平均值(±SEM)分別為6.1(±0.3)mg/kg和2.1(±0.4)mg/kg。
注射STZ后的12周——食物添加L-精氨酸3周出乎意料的是，在食物添加L-精氨酸3周后阻止了發生于使用STZ后9到12周、喂以標準鼠飼料食物的糖尿病大鼠的嗎啡除痛覺功效的廢除，以致于發現(±SEM)嗎啡ED50值(7.0±0.5mg/kg)與測定的喂以標準鼠飼料食物的、使用STZ后3和9周的糖尿病大鼠的值沒有顯著差異(6.1±0.3mg/kg)(圖4)。
相似的，在同一組大鼠中羥考酮的除痛覺能力也被保持了，以致于羥考酮的ED50值(2.0±0.3mg/kg)(圖5)與發明者早期建立的使用STZ后3和9周的糖尿病大鼠的值沒有顯著差異(2.1±0.4mg/kg)。因此，食物添加L-精氨酸3周后能夠阻止發生于使用STZ后9到12周的喂以標準鼠飼料食物的糖尿病大鼠的羥考酮能力的兩倍降低。
注射STZ后第16周——食物添加L-精氨酸7周對已經接受7周食物添加L-精氨酸的大鼠(注射STZ 16周后)使用ED50劑量的嗎啡(6.1mg/kg，測定于注射STZ 3和9周后)表明嗎啡減輕機械性異常性疼痛的功效被保持了。特別的，在快速使用ED50劑量的嗎啡(6.1mg/kg)后，％MPE AUC(±SEM)值為101.9(±1.9)％MPE-h，這顯著(p＜0.05)高于喂以標準鼠飼料的、注射STZ后第9周的糖尿病大鼠的％MPE AUC值(63.4±7.5％MPE-h)。這些發現表明食物添加L-精氨酸7周之后，相對于重量匹配的非糖尿病對照大鼠，皮下注射嗎啡的功效增加了。
注射STZ后20周——食物添加L-精氨酸11周食物添加L-精氨酸11周后，皮下單次ED50劑量的嗎啡(6.1mg/kg，注射STZ后3和9周)引起的％MPE AUC(±SEM)從喂以標準鼠飼料的糖尿病大鼠的63.4±7.5％MPE-h增加到喂以含有L-精氨酸添加劑的大鼠飼料的糖尿病大鼠的119.2(±19.1)％MPE-h。這些數據表明在STZ糖尿病大鼠食物中添加L-精氨酸將嗎啡減輕機械性異常性疼痛的能力增加到在非糖尿病對照大鼠中發現的約90％(％MPE AUC＝136.9±16.1％MPE-h)(圖6)。
另外，對同樣的接受食物添加L-精氨酸11周的大鼠快速皮下給藥ED50劑量的羥考酮(2.0mg/kg)，其所激起的除痛覺反應(％MPE AUC(±SEM))的程度和持續時間(160.3 7.6％MPE-h)相對于相同劑量的皮下羥考酮對喂以標準飼料的、注射STZ后9周的糖尿病大鼠所引起的％MPEAUC值(108.7±13.2％MPE-h)顯著(p＜0.05)增加(圖7)。這些發現表明食物添加L-精氨酸將羥考酮減輕機械性異常性疼痛的能力增加到施用STZ后9周在喂以標準飼料的非糖尿病對照大鼠中發現的約150％。
注射STZ后第22周——食物添加L-精氨酸15周與在接受食物添加L-精氨酸3、7和11周的糖尿病大鼠中觀察到的結果相似，嗎啡的功效被保持了(圖4)，即在喂以標準大鼠飼料食物的24周的STZ糖尿病大鼠中觀察到的嗎啡功效的廢除被阻止了，并且相對于食物L-精氨酸干涉11周后所測定的值而言，嗎啡的能力增加了。這一結果通過皮下嗎啡的劑量-反應曲線的明顯向左遷移(圖4)而被顯示，以致于ED50值(5.0±0.9mg/kg)低于在9周的STZ糖尿病大鼠中所測定的值(6.1±0.4mg/kg)。然而，ED50值仍然接近在初次實驗非糖尿病大鼠中所測定值(2.4±0.7mg/kg)的兩倍。
作為比較，食物添加L-精氨酸15周的STZ糖尿病大鼠(注射STZ后第24周)保持的羥考酮能力(ED50＝1.8±0.3mg/kg)(圖5)與在注射STZ后第9周所測定的(2.1±0.4mg/kg)接近相同。
組2STZ糖尿病大鼠食物L-精氨酸干涉8周對嗎啡和羥考酮減輕機械性異常性疼痛能力的影響在注射STZ后第14周—開始食物L-精氨酸干涉之前對注射STZ后第14周的糖尿病大鼠皮下使用注射STZ后3和9周的ED50劑量的嗎啡，結果表明皮下快速使用的嗎啡的除痛覺功效被完全廢除了。
注射STZ后第18周——食物L-精氨酸干涉4周值得注意的是，在組2糖尿病大鼠中食物添加L-精氨酸4周后(注射STZ后第18周)恢復了皮下嗎啡的除痛覺能力(6.1mg/kg)，以致于除痛覺的程度和持續時間(％MPE AUC值)為109.8±28.6％MPE-h，相對于同樣劑量的嗎啡在喂以標準鼠飼料的、14周STZ糖尿病大鼠中所激起的除痛覺反應(AUC值)(5.2±2.5％MPE-h)而言，這代表嗎啡除痛覺的程度和持續時間增長了21倍。
注射STZ后第22周——食物L-精氨酸干涉8周對接受食物添加L-精氨酸8周(注射STZ后22周)的STZ糖尿病大鼠皮下使用同樣劑量的嗎啡(6.1mg/kg)激起了嗎啡除痛覺效果的程度和持續時間的進一步增加，以致于％MPE AUC值為149.5±9.5％MPE-h，這顯著高于(p＜0.05)僅食物添加L-精氨酸4周后所觀察到的值，并且與在初次實驗非糖尿病對照大鼠中所見的除痛覺反應(136.9±16.1％MPE-h)沒有顯著差異(p＜0.05)。在同樣的大鼠(食物L-精氨酸干涉8周)中，由2.0mg/kg(9周STZ糖尿病大鼠的ED50)劑量的羥考酮引起的除痛覺的程度和持續時間(％MPE AUC值)顯著(p＜0.05)高于(139.4±9.4MPE-h)在喂以標準大鼠飼料的12周STZ糖尿病大鼠中所見到的(37.0±1.1％MPE-h)。
組3STZ糖尿病大鼠——食物L-精氨酸干涉8周對嗎啡和羥考酮減輕機械性異常性疼痛能力的影響注射STZ后第24周無L-精氨酸治療與發明者早期在實驗室完成的研究相一致，在注射STZ后24周，嗎啡的功效被完全廢除了。另外，發現羥考酮的能力與早期的研究所測定的使用STZ后12周的糖尿病大鼠相同(ED50＝4.2(±0.3)mg/kg)。
注射STZ后第34周——食物L-精氨酸干涉4周值得注意的是，盡管嗎啡的除痛覺能力從注射STZ后的12周就被廢除了，但食物添加L-精氨酸4周后(從注射STZ后的30到34周)，嗎啡的除痛覺能力被部分的恢復了。特別是，由皮下單一藥丸劑量的嗎啡(6.1mg/kg，注射STZ后3周和9周的ED50)激起的除痛覺的程度和持續時間為62.2±15.8％MPE-h，這與喂以標準大鼠飼料的糖尿病大鼠在注射STZ后9周時所測定的％MPE AUC值(63.4±7.5％MPE-h)幾乎相同。
注射STZ后第38周8周的食物L-精氨酸食物L-精氨酸干涉從4周延長到8周(使用STZ后的30到38周)，導致嗎啡除痛覺能力進一步恢復。特別是，皮下單一藥丸劑量的嗎啡(6.1mg/kg)激起的％MPE AUC為117.1(±15.4)％MPE-h，這幾乎比使用L-精氨酸食品添加劑僅4周的％MPE AUC值(62.2±15.8％MPE-h)高出大約190％。
在同樣的食物L-精氨酸干涉8周的大鼠中，皮下使用單次藥丸劑量的羥考酮(2.0mg/kg，注射STZ后38周的ED50)激起的除痛覺的程度和持續時間(％MPE AUC＝147.0±1.9％MPE-h)與劑量為4.0mg/kg的羥考酮在喂以標準大鼠飼料的、注射STZ后24周的糖尿病大鼠中激起的(144.0±13.7MPE-h)相似。這些數據表明食物添加L-精氨酸8周后恢復的羥考酮能力與在喂以標準大鼠飼料的、注射STZ后3周和9周的糖尿病大鼠中所測定的相當。
總結與發明者早期的實驗室研究的結果相似，到注射STZ后的第9周，嗎啡和羥考酮的能力在具有糖尿病的誘導所引起的機械性異常性疼痛(PDN的定義癥狀)的大鼠中，相對于在重量匹配的非糖尿病對照大鼠中所表現的降低了大約2倍。然而，相對于喂以標準鼠飼料的糖尿病大鼠，從注射STZ后的9到12周向食物添加L-精氨酸，能阻止在注射STZ后的12周所觀察到的嗎啡功效的廢除。相似的，從注射STZ后的9到12周，補充3周的食物L-精氨酸，能阻止注射STZ后9到12周之間在喂以標準鼠飼料的糖尿病大鼠中觀察到的羥考酮能力的兩倍下降。另外，從注射STZ后的9到12周向食物補充L-精氨酸添加劑不僅在糖尿病大鼠中保持了嗎啡的功效，而且也類似地保持了羥考酮的功效，嗎啡減輕機械性異常性疼痛的能力與在注射STZ后3周和9周的糖尿病大鼠中所觀測到的沒有顯著差異。
值得注意的是，嗎啡功效在糖尿病大鼠中被完全廢除后(即分別為注射STZ后14周的組2和注射STZ后30周的組3)開始L-精氨酸食物干涉，僅4周的L-精氨酸食物干涉便恢復了嗎啡功效。食物補充L-精氨酸8周后，嗎啡的能力被進一步增加，以致于ED50與喂以標準鼠飼料的、注射STZ后3周的糖尿病大鼠沒有顯著差異。這些關于嗎啡的發現也反映出了羥考酮的情況，以致于晚開始的L-精氨酸食物干涉(即在注射STZ后的14周和30周)導致在注射STZ后的12周之前所見的羥考酮除痛覺能力的2倍降低被逆轉。這些食物干涉4-8周之后的皮下單劑量羥考酮和嗎啡的能力的顯著提高發生在糖尿病大鼠潛在的異常疼痛狀態不發生逆轉的情況下。
實施例3嗎啡-一氧化氮綴合物1的制備嗎啡1將三水合鹽酸嗎啡(1.5g)溶于最少量的水中(RO型)(～20mL)并加入足量的飽和碳酸氫鈉以沉淀嗎啡。用真空過濾收集嗎啡1并先用蒸餾水(20mL)，再用少量冷的二乙醚(5mL)洗滌。白色固體用鋁箔避光保護，并置于高度真空中(0.01mmHg)3小時。
5-硝酸基戊酸2標題化合物按照EP 0 984 012 A2(K.M.Lundy，M.T.Clark)的方法制備。簡要的，用高度真空(0.01mmHg)將硝酸銀(23.48g，0.153mol)預干燥，然后在氬氣環境中將其溶解于無水乙腈(70mL)。將溶液加熱到50℃，并用注射器迅速加入5-溴戊酸(5g，0.028mol)(溶解于無水乙腈(3mL))。立即形成沉淀。混合物在80℃被加熱20分鐘。冷卻后通過過濾除去沉淀(AgBr)。濃縮濾液，并用醋酸乙酯和水使剩余部分分層。用水洗滌醋酸乙酯層，干燥(Na2SO4)，濃縮，并在真空(0.01mm Hg)下進一步干燥。標題化合物不經進一步的純化而被使用。
嗎啡NO供體3新制的嗎啡1(500mg，1.75mmol)、二環己基碳二亞胺(362mg，1.75mmol)和5-硝酸基戊酸2(286mg，1.75mmol)在氬氣環境中被溶解于無水氯仿(90mL)。混合物被回流12小時，并冷卻。加入額外的二環己基碳二亞胺(362mg，1.75mmol)和5-硝酸基戊酸(286mg，1.75mmol)，繼續回流6小時。冷卻后真空除掉溶劑，剩余物溶解于加熱的醋酸乙酯/甲醇(6∶4)(～5mL)中，過濾除去N，N-二環己脲。濾液被濃縮并經硅膠柱層析(醋酸乙酯/甲醇；6∶4)，此層析可獲得嗎啡衍生物3的淺黃色固體(600mg，80％)。1H n.m.r(200MHz)1.70-1.95(m，5H)，2.07(dt，1H)，2.22-2.38(m，2H)，2.42(s，3H)，2.5 4-2.73(m，3H)，3.05(d，1H)，3.35(bs，OH)，3.33-3.40(m，2H)，4.08-4.20(m，1H)，4.40-4.55(m，2H)，4.90(d，1H)，5.20-5.34(m，1H)，5.67-5.78(m，1H)，6.65(dd，2H)。質普m/z(E1) 430(M+，27％)，384(1)，366(1)，354(18)，326(1)，285(100)，268(10)，215(18)，174(8)，162(21)，124(13)，94(6)。
3的酒石酸鹽上述化合物3(300mg，0.697mmol)被懸浮于水中(RO型)(15mL)，并加入酒石酸(105mg，0.697mmol)。在加入二甲亞砜(AR級)(15mL)之前將混合物攪拌30分鐘。所得溶液被儲存于-20℃。化合物1、2和3的結構如下
實施例4嗎啡—一氧化氮綴合物2的制備5-硝酸酸戊酰氯4標題化合物根據EP 0 984 012 A2(K.M.Lundy，M.T.Clark)的方法被制備。簡要的，用高度真空(0.01mmHg)將5-硝酸基戊酸(13.34g，0.082mol)預干燥，然后在氬氣環境中將其溶解于無水二氯甲烷(200mL)。在2分鐘內分批加入五氯化磷(17.03g，0.082mol)。混合物在室溫攪拌15小時。真空除掉溶劑和多余的鹽酸，并將殘留物溶解于無水甲苯。然后在氬氣環境中、大氣壓下蒸餾除掉90％的甲苯。[注意不能用蒸餾來完全除掉甲苯，因為這會導致自發的爆炸性分解]。甲苯對于除掉次氯化磷(phosphorous oxy chloride)是必要的。不經進一步純化而使用該甲苯酸氯化物的混合物。
嗎啡一氧化氮供體5三水合鹽酸嗎啡(50mg，0.133mmol)和5-硝酸基戊酰氯4(169mg，0.931mmol)被一起于135℃無水加熱7分鐘，以產生均一的混合物。冷卻后用二氯甲烷(10mL)稀釋液體并轉移到含有飽和碳酸氫鈉溶液(20mL)的分液漏斗。在洗滌幾次之后，干燥有機相(Na2SO4)并蒸發。剩余物經硅膠柱層析(醋酸乙酯/甲醇，梯度)獲得棕色油狀的嗎啡一氧化氮供體5。1H n.m.r(200MHz)1.60-2.01(m，12H)，2.25-2.71(m，4H)，2.65(s，3H)，2.89-3.28(m，3H)，3.65-3.75(m，1H)，4.35-4.55(m，4H)，5.09-5.25(m，2H)，5.32-5.45(m，1H)，5.60-5.71(m，1H)，6.55-6.85(m，2H)。質譜m/z(EI) 575(M+，6％)，548(1)，530(1)，503(1)，472(1)，454(1)，430(1)，403(1)，385(1)，354(1)，285(20)，268(60)，215(22)，162(20)，146(13)，124(13)，100(24)，81(19)，42(100)。
化合物4和5的結構如下 實施例5羥考酮—一氧化氮綴合物的制備羥考酮6鹽酸羥考酮(1.5g)被溶于最少量的水中(RO型)(約20mL)，并向其中加入足量的飽和碳酸氫鈉，將溶液的pH上調至約11以沉淀羥考酮。通過真空過濾收集羥考酮6，先用蒸餾水(20mL)，再用少量冷的二乙醚(5mL)洗滌。白色固體用鋁箔避光包護，并置于高度真空(0.01mm Hg)中3小時。
羥考酮NO供體7新制的羥考酮6(500mg，1.59mmol)、二環己基碳二亞胺(327mg，1.59mmol)和5-硝酸基戊酸2(259mg，1.59mmol)在氬氣環境中被溶解于無水氯仿(90mL)。混合物被回流12小時，并冷卻。加入額外的二環己基碳二亞胺(327mg，1.59mmol)和5-硝酸基戊酸(259mg，1.59mmol)，并繼續回流6小時。冷卻后真空除掉溶劑，剩余物溶解于加熱的醋酸乙酯溶液(～5mL)中，過濾除去N，N-二環己脲。濾液被濃縮并經硅膠柱層析(醋酸乙酯/二氯甲醇；梯度)，此層析可獲得淺黃色固體形式的衍生物7。
7的酒石酸鹽上述化合物7(300mg，0.651mmol)被懸浮于水中(RO型)(15mL)，并加入酒石酸(98mg，0.651mmol)。在加入二甲亞砜(AR級)(15mL)之前將混合物攪拌30分鐘。所得溶液被儲存于-20℃。
化合物6和7的結構如下 這里引用的每一專利、專利申請和出版物的公開內容以其整體引入作為參考。
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整個說明書的目的是描述本發明優選的實施方案，而不將本發明限制于任何實施方案和特定的特征集合。根據這里公開的本發明，本領域的技術人員將因此認識到可以對所示例的實施方案進行各種修飾和改變而不偏離本發明的范圍。在附加的權利要求的范圍中意圖包括所有的這種修飾和改變。
表1在使用STZ后的第3周，STZ誘導的糖尿病在DA大鼠中產生嗎啡和羥考酮劑量-反應曲線的向右偏移
權利要求
1.在具有或有可能具有對阿片樣物質受體激動劑降低的止痛敏感性的對象中產生鎮痛的方法，此方法包括向對象分別、同時或相繼使用能阻止、減弱和/或逆轉降低的止痛敏感性的有效量的一氧化氮供體和能產生鎮痛的有效量的阿片樣物質止痛劑，其中所述阿片樣物質止痛劑與作為止痛敏感性降低主題的阿片樣物質受體激動劑使相同的阿片樣物質受體激動。
2.根據權利要求1的方法，其中一氧化氮供體選自能轉化成一氧化氮的化合物、能降解或代謝成一氧化氮的化合物和提供體內一氧化氮來源的化合物。
3.根據權利要求1的方法，其中所述一氧化氮供體選自L-精氨酸、硝普鈉、硝化甘油、三硝酸甘油、單硝酸異山梨醇酯、二硝酸異山梨醇酯、S-亞硝基-N-乙酰基-青霉胺、假酸棗仁皂苷配糖類、達瑪烷型三萜皂苷、它們的衍生物或類似物和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
4.根據權利要求1的方法，其中一氧化氮供體是L-精氨酸或其類似物或衍生物。
5.根據權利要求1的方法，其中阿片樣物質止痛劑選自μ-阿片樣物質受體激動劑、代謝成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物和在體內被轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物。
6.根據權利要求5的方法，其中μ-阿片樣物質受體激動劑選自嗎啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氫嗎啡酮、羥嗎啡酮、它們的類似物、衍生物或前藥以及它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
7.根據權利要求5的方法，其中μ-阿片樣物質受體激動劑選自嗎啡、嗎啡類似物、嗎啡衍生物、嗎啡前藥和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
8.根據權利要求1的方法，其中阿片樣物質受體激動劑選自K2-阿片樣物質受體激動劑、代謝成K2-阿片樣物質受體激動劑的化合物和在體內轉變成K2-阿片樣物質受體激動劑的化合物。
9.根據權利要求8的方法，其中K2-阿片樣物質受體激動劑在體內被代謝或轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑。
10.根據權利要求8的方法，其中K2-阿片樣物質受體激動劑選自羥考酮、羥考酮類似物、羥考酮衍生物、羥考酮前藥和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
11.根據權利要求1的方法，其中一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑以單一組合物的形式被施用。
12.根據權利要求11的方法，其中一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑以分開的化合物的形式存在。
13.根據權利要求11的方法，其中一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑是綴合物形式。
14.根據權利要求1的方法，其中降低的止痛劑敏感性與神經病變病癥相關。
15.根據權利要求14的方法，其中神經病變病癥是原發性神經病變病癥。
16.根據權利要求14的方法，其中神經病變病癥是外周神經病變病癥。
17.根據權利要求14的方法，其中神經病變病癥是疼痛性糖尿病性神經病變(PDN)。
18.根據權利要求1的方法，其中一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑都通過選自下列的途徑施用腸胃外注射，包括肌內、皮下、髓內、鞘內、心室內、靜脈內、腹膜內和眼內途徑；局部應用，包括上皮和粘膜遞送，如直腸、陰道和鼻內途徑；和口腔遞送。
19.根據權利要求1的方法，其中一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑都通過口腔施用。
20.根據權利要求1的方法，其中一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑都被配制成能在對象中持續釋放。
21.根據權利要求1的方法，其中一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑都與藥物可接受的載體和/或稀釋劑一同施用。
22.在具有或可能具有神經病變病癥的對象中產生鎮痛的方法，此方法包括向對象施用能阻止、減弱或逆轉降低的止痛敏感性的有效量的一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑。
23.根據權利要求22的方法，其中所述阿片樣物質止痛劑是對象對其已經產生了降低的止痛劑敏感性的物質。
24.根據權利要求22的方法，其中所述阿片樣物質止痛劑以能有效產生鎮痛的量施用。
25.根據權利要求22的方法，其中所述神經病變病癥與對阿片樣物質受體激動劑的降低的止痛敏感性的發展有關。
26.根據權利要求25的方法，其中所述阿片樣物質止痛劑與所述阿片樣物質受體激動劑激動同樣的阿片樣物質受體。
27.根據權利要求22的方法，其中所述神經病變病癥是原發性神經病變病癥。
28.根據權利要求22的方法，其中所述神經病變病癥是外周神經病變病癥。
29.根據權利要求22的方法，其中所述神經病變病癥是疼痛性糖尿病性神經病變(PDN)。
30.根據權利要求29的方法，其中所述神經病變病癥與選自糖尿病、尿毒癥、淀粉樣變性病、tumaculous神經病變、營養缺乏和腎衰竭的病癥有關。
31.根據權利要求22的方法，其中所述神經病變病癥選自遺傳性運動和感覺神經病變(HMSN)、遺傳性感覺神經病變(HSNs)、遺傳性感覺和自主神經病變、潰瘍毀損性遺傳性神經病變。
32.根據權利要求22的方法，其中所述神經病變病癥與重復性活動有關，所述重復性活動選自打字和在裝配線上的工作。
33.根據權利要求22的方法，其中所述神經病變病癥與外傷有關。
34.根據權利要求22的方法，其中所述神經病變病癥與向對象施用選自AIDS藥物、抗生素、金化合物和化療試劑的藥物有關。
35.根據權利要求34的方法，其中所述藥物選自呋喃妥因、雙脫氧胞苷、雙脫氧次黃苷、甲硝唑、長春新堿和順鉑。
36.根據權利要求22的方法，其中所述神經病變病癥與對象暴露于選自醇類、鉛化合物、砷化合物、水銀化合物和有機磷酸酯化合物的化學化合物有關。
37.根據權利要求22的方法，其中所述病癥與感染過程有關。
38.根據權利要求37的方法，其中所述感染過程選自Guillian-Barre綜合征HIV和帶狀皰疹。
39.在對象中阻止、減弱或逆轉阿片樣物質受體激動劑止痛低敏性的發展的方法，此方法包括對對象施用能阻止、減弱或逆轉對阿片樣物質受體激動劑的止痛低敏性的有效量的一氧化氮供體。
40.根據權利要求39的方法，其中所述一氧化氮供體和藥物可接受的載體和/或稀釋劑一同施用。
41.根據權利要求39的方法，其中所述一氧化氮供體選自轉變為一氧化氮的化合物、降解或代謝成一氧化氮的化合物和提供體內一氧化氮來源的化合物。
42.根據權利要求39的方法，其中所述一氧化氮供體選自L-精氨酸、硝普鈉、硝化甘油、三硝酸甘油、單硝酸異山梨醇酯、二硝酸異山梨醇酯、S-亞硝基-N-乙酰基-青霉胺、假酸棗仁皂苷配糖類、達瑪烷型三萜皂苷、它們的衍生物或類似物和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
43.根據權利要求39的方法，其中所述一氧化氮供體是L-精氨酸或它的類似物或衍生物。
44.根據權利要求39的方法，其中所述阿片樣物質受體激動劑選自μ-阿片樣物質受體激動劑、代謝成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物和在體內被轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物。
45.根據權利要求44的方法，其中所述μ-阿片樣物質受體激動劑選自嗎啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氫嗎啡酮、羥嗎啡酮、它們的類似物、衍生物或前藥以及它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
46.根據權利要求44的方法，其中所述μ-阿片樣物質受體激動劑選自嗎啡、嗎啡類似物、嗎啡衍生物、嗎啡前藥和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
47.根據權利要求39的方法，其中所述阿片樣物質受體激動劑選自K2-阿片樣物質受體激動劑、代謝成K2-阿片樣物質受體激動劑的化合物和在體內被轉變成K2-阿片樣物質受體激動劑的化合物。
48.根據權利要求47的方法，其中所述K2-阿片樣物質受體激動劑在體內被代謝或轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑。
49.根據權利要求47的方法，其中所述K2-阿片樣物質受體激動劑選自羥考酮、羥考酮類似物、羥考酮衍生物、羥考酮前藥和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
50.在具有或可能具有對阿片樣物質受體激動劑的降低的止痛敏感性的對象中產生鎮痛的方法，此方法包括向對象施用一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑。
51.根據權利要求50的方法，其中所述阿片樣物質止痛劑是阿片樣物質受體激動劑。
52.根據權利要求50的方法，其中所述一氧化氮供體以能有效逆轉阿片樣物質受體激動劑止痛低敏性的發展的量施用。
53.根據權利要求50的方法，其中所述一氧化氮供體以能有效逆轉對阿片樣物質受體激動劑耐受的發展的量施用。
54.根據權利要求50的方法，其中所述對象受到或可能受到神經病變病癥的折磨。
55.根據權利要求50的方法，其中所述神經病變病癥是外周神經病變病癥。
56.根據權利要求55的方法，其中所述神經病變病癥是PDN。
57.根據權利要求50的方法，進一步包括施用藥物可接受的載體和/或稀釋劑。
58.根據權利要求50的方法，其中所述阿片樣物質止痛劑選自μ-阿片樣物質受體激動劑、代謝成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物和在體內被轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物。
59.根據權利要求58的方法，其中所述μ-阿片樣物質受體激動劑選自嗎啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氫嗎啡酮、羥嗎啡酮、它們的類似物、衍生物或前藥以及它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
60.根據權利要求58的方法，其中所述μ-阿片樣物質受體激動劑選自嗎啡、嗎啡類似物、嗎啡衍生物、嗎啡前藥和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
61.根據權利要求50的方法，其中所述阿片樣物質止痛劑選自K2-阿片樣物質受體激動劑、代謝成K2-阿片樣物質受體激動劑的化合物和在體內被轉變成K2-阿片樣物質受體激動劑的化合物。
62.根據權利要求50的方法，其中所述K2-阿片樣物質受體激動劑在體內被代謝或轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑。
63.根據權利要求62的方法，其中所述K2-阿片樣物質受體激動劑選自羥考酮、羥考酮類似物、羥考酮衍生物、羥考酮前藥和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
64.根據權利要求50的方法，其中所述阿片樣物質止痛劑是嗎啡。
65.根據權利要求50的方法，其中所述阿片樣物質止痛劑是羥考酮。
66.根據權利要求50的方法，其中所述一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑被分開施用。
67.根據權利要求50的方法，其中所述一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑在組合物中被聯合施用。
68.根據權利要求67的方法，其中所述一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑被同時施用。
69.根據權利要求50的方法，其中所述對象具有降低的阿片樣物質止痛敏感性。
70.根據權利要求50的方法，其中所述對象發展了對阿片樣物質受體激動劑的耐受性。
71.在對象中阻止或逆轉阿片樣物質受體激動劑止痛低敏性的發展的方法， 此方法包括施用一氧化氮供體和阿片樣物質受體激動劑。
72.在對象中阻止或逆轉對阿片樣物質受體激動劑的耐受發展的方法，此方法包括施用一氧化氮供體和阿片樣物質受體激動劑。
73.根據權利要求71或72的方法，其中所述一氧化氮供體和阿片樣物質受體激動劑在組合物被聯合施用中，該組合物進一步包括藥物可接受的載體。
74.包括一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑的止痛組合物，其中一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑各自的量足以在具有可能具有降低的阿片樣物質受體激動劑止痛敏感性的對象有效產生鎮痛。
75.根據權利要求74的組合物，其中所述一氧化氮供體選自轉變成一氧化氮的化合物、降解或代謝成一氧化氮的化合物和提供體內一氧化氮來源的化合物。
76.根據權利要求74的組合物，其中所述一氧化氮供體選自L-精氨酸、硝普鈉、硝化甘油、三硝酸甘油、單硝酸異山梨醇酯、二硝酸異山梨醇酯、S-亞硝基-N-乙酰基-青霉胺、假酸棗仁皂苷配糖類、達瑪烷型三萜皂苷、它們的衍生物或類似物和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
77.根據權利要求76的組合物，其中所述一氧化氮供體是L-精氨酸或它的類似物或衍生物。
78.根據權利要求76的組合物，其中所述阿片樣物質止痛劑與所述阿片樣物質受體激動劑使同樣的受體激動。
79.根據權利要求78的組合物，其中所述阿片樣物質止痛劑是阿片樣物質受體激動劑。
80.根據權利要求74的組合物，其中所述阿片樣物質止痛劑選自μ-阿片樣物質受體激動劑、代謝成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物和在體內被轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物。
81.根據權利要求80的組合物，其中所述μ-阿片樣物質受體激動劑選自嗎啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氫嗎啡酮、羥嗎啡酮、它們的類似物、衍生物或前藥以及它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
82.根據權利要求80的組合物，其中所述μ-阿片樣物質受體激動劑選自嗎啡、嗎啡類似物、嗎啡衍生物、嗎啡前藥和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
83.根據權利要求74的組合物，其中所述阿片樣物質受體激動劑選自K2-阿片樣物質受體激動劑、代謝成K2-阿片樣物質受體激動劑的化合物和在體內被轉變成K2-阿片樣物質受體激動劑的化合物。
84.根據權利要求83的組合物，其中所述K2-阿片樣物質受體激動劑在體內被代謝或轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑。
85.根據權利要求83的組合物，其中所述K2-阿片樣物質受體激動劑選自羥考酮、羥考酮類似物、羥考酮衍生物、羥考酮前藥和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
86.根據權利要求74的組合物，其中所述一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑以分開的化合物形式存在。
87.根據權利要求74的組合物，其中所述一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑是綴合物形式。
88.根據權利要求74的組合物，其中所述一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑是選自如下化合物的綴合物形式 其中R是H或下面通式表示的基團 其中A不存在或代表基團-O-、-S-、-NH-、-C6H4-、-OC6H4-、-SC6H4-或-NHC6H4-；m是0或從1到10的整數；n是從1到10的整數，或者當A不存在并且m是0時，n是3到10的整數，和它們的藥物兼容的鹽。
89.根據權利要求88的組合物，其中R是如下通式表示的基團
90.根據權利要求88的組合物，其中所述綴合物是如下通式表示的化合物和它們的藥物兼容的鹽
91.根據權利要求74的組合物，進一步包括藥物可接受的載體。
92.包含L-精氨酸和嗎啡的組合物。
93.包含L-精氨酸和羥考酮的組合物。
94.一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑在制備使對象產生鎮痛的藥物中的應用。
95.根據權利要求94的應用，其中所述對象已經發展了或處于發展神經病變病癥的風險中。
96.根據權利要求94的應用，其中所述病癥是外周神經病變病癥。
97.根據權利要求96的應用，其中所述病癥是PDN或相關病癥。
98.根據權利要求94的應用，其中所述一氧化氮供體選自轉變成一氧化氮的化合物、降解或代謝成一氧化氮的化合物和提供體內一氧化氮來源的化合物。
99.根據權利要求94的應用，其中所述一氧化氮供體選自L-精氨酸、硝普鈉、硝化甘油、三硝酸甘油、單硝酸異山梨醇酯、二硝酸異山梨醇酯、S-亞硝基-N-乙酰基-青霉胺、假酸棗仁皂苷配糖類、達瑪烷型三萜皂苷、它們的衍生物或類似物和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
100.根據權利要求94的應用，其中所述一氧化氮供體是L-精氨酸或它的類似物或衍生物。
101.根據權利要求94的應用，其中所述阿片樣物質止痛劑與所述阿片樣物質受體激動劑使同樣的受體激動。
102.根據權利要求101的應用，其中所述阿片樣物質止痛劑是阿片樣物質受體激動劑。
103.根據權利要求94的應用，其中所述阿片樣物質止痛劑選自μ-阿片樣物質受體激動劑、代謝成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物和在體內被轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑的化合物。
104.根據權利要求103的應用，其中所述μ-阿片樣物質受體激動劑選自嗎啡、美沙酮、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、氫嗎啡酮、羥嗎啡酮、它們的類似物、衍生物或前藥以及它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
105.根據權利要求103的應用，其中所述μ-阿片樣物質受體激動劑選自嗎啡、嗎啡類似物、嗎啡衍生物、嗎啡前藥和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
106.根據權利要求94的應用，其中所述阿片樣物質受體激動劑選自K2-阿片樣物質受體激動劑、代謝成K2-阿片樣物質受體激動劑的化合物和在體內被轉變成K2-阿片樣物質受體激動劑的化合物。
107.根據權利要求106的應用，其中所述K2-阿片樣物質受體激動劑在體內被代謝或轉變成μ-阿片樣物質受體激動劑。
108.根據權利要求106的應用，其中所述K2-阿片樣物質受體激動劑選自羥考酮、羥考酮類似物、羥考酮衍生物、羥考酮前藥和它們中任何一種的藥物兼容的鹽。
109.根據權利要求94的應用，其中所述一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑以分開的化合物形式存在。
110.根據權利要求94的應用，其中所述一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑是綴合物形式。
111.根據權利要求94的應用，其中所述一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑是選自如下化合物的綴合物形式 其中R是H或下面通式表示的基團 其中A不存在或代表基團-O-、-S-、-NH-、-C6H4-、-OC6H4-、-SC6H4-或-NHC6H4-；m是0或從1到10的整數；n是從1到10的整數，或者當A不存在并且m是0時，n是3到10的整數，和它的藥物兼容的鹽。
112.根據權利要求111的應用，其中R是如下通式表示的基團
113.根據權利要求111的應用，其中所述綴合物是如下通式表示的化合物和它們的藥物兼容的鹽
114.根據權利要求94的組合物，進一步包括藥物可接受的載體。
115.L-精氨酸和嗎啡在制備使對象產生鎮痛的藥物中的應用。
116.L-精氨酸和羥考酮在制備使對象產生鎮痛的藥物中的應用。
117.包含一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑的綴合物。
118.根據權利要求117的綴合物，其中所述綴合物選自如下化合物 其中R是H或下面通式表示的基團 其中A不存在或代表基團-O-、-S-、-NH-、-C6H4-、-OC6H4-、-SC6H4-或-NHC6H4-；m是0或從1到10的整數；n是從1到10的整數，或者當A不存在并且m是0時，n是3到10的整數，和它的藥物兼容的鹽。
119.根據權利要求118的綴合物，其中所述R是如下通式表示的基團
120.根據權利要求118的綴合物，其中所述綴合物是如下通式表示的化合物和它們的藥物兼容的鹽
全文摘要
誘導、促進或利于疼痛緩解的組合物和方法被公開了。這些組合物和方法包括一氧化氮受體，它直接或間接的阻止、減輕或逆轉阿片樣物質敏感性降低的發展，還包括激活阿片樣物質受體的化合物，其中阿片樣物質受體是阿片樣物質敏感性降低的主題。此組合物和方法阻止或減輕疼痛，特別是在神經病變病癥中，更特別是在如疼痛性糖尿病性神經病變(PDN)之類的外周神經病變病癥中。優選的一氧化氮供體是L－精氨酸，同時優選的激活阿片樣物質受體的化合物是嗎啡和羥考酮。包含一氧化氮供體和阿片樣物質止痛劑的綴合化合物也被公開了。
文檔編號A61K31/00GK1703416SQ03809229
公開日2005年11月30日 申請日期2003年3月20日 優先權日2002年3月20日
發明者M·T·史密斯, L·布朗, M·B·P·哈維, C·M·威廉斯 申請人:昆士蘭大學