二吡啶并二氮雜酮類反轉錄酶抑制劑的制作方法

專利名稱：二吡啶并二氮雜酮類反轉錄酶抑制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及新穎化合物及其可藥用鹽、其在治療或預防HIV感染中的應用(單獨使用或與其他治療藥物組合使用)及包含這些化合物的藥物組合物。
背景技術：
被稱為獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的疾病是由人類免疫缺陷病毒(HIV)，尤其是被稱為HIV-1株引起的。為使HIV可被宿主細胞復制，病毒基因組的信息必須整合入宿主細胞的DNA中。然而，HIV是一種反轉錄病毒，意味著遺傳信息為RNA形式。因此HIV復制循環需要將病毒基因組(RNA)轉錄為DNA的步驟，此過程為正常事件鏈的逆轉。已被適當命名為反轉錄酶(RT)的酶可將病毒RNA轉錄為DNA。HIV病毒顆粒包括RT拷貝及病毒RNA。
已知反轉錄酶具有三種酶功能其可作為RNA依賴性DNA聚合酶、核糖核酸酶及DNA依賴性DNA聚合酶。作為RNA依賴性DNA聚合酶時，RT可將病毒RNA轉錄為單鏈DNA拷貝。作為核糖核酸酶時，RT可破壞初始病毒RNA，并將剛從初始RNA產生的DNA游離出來。最后，作為DNA依賴性DNA聚合酶時，RT可以第一DNA鏈為模板制造出第二股互補的DNA鏈。該兩股將形成雙鏈DNA，該雙鏈DNA通過另一種稱作整合酶的酶整合入宿主細胞基因組中。
抑制HIV-1反轉錄酶的酶功能的化合物將抑制受感染細胞中HIV-1的復制。這些化合物可用于預防或治療人類的HIV-1感染，這些預防或治療效果已公知的多種RT抑制劑例如3′-疊氮-3′-脫氧胸苷(AZT)、2′，3′-二脫氧肌苷(ddI)、2′，3′-二脫氧胞苷(ddC)、d4T、3TC、奈韋拉平、地拉韋啶、依法韋侖及阿巴卡韋所證實，這些抑制劑為迄今被批準用于治療AIDS的主要藥物。
正如任一抗病毒的治療，利用RT抑制劑治療AIDS最終導致病毒對所給藥物敏感變低。對這些藥物的抗性(敏感性降低)起因于pol基因的反轉錄酶片段中發生突變。幾種HIV突變株的特征業已被鑒定，且對已知治療藥物的抗性歸因于RT基因中的突變。臨床中某些最為常見的突變體為Y181C突變體，其中密碼子181上的酪氨酸(Y)突變為半胱氨酸(C)殘基；及K103N，其中103位上的賴氨酸(K)由天冬酰胺(N)替代。在利用已知的抗病毒藥進行治療期間，出現頻率愈來愈高的其他突變體包括單突變體V106A、G190A、Y188C及P236L；以及雙突變體K103N/Y181C、K103N/P225H、K103N/V108I及K103N/L100I。
持續使用抗病毒化合物來預防HIV感染必然將導致更多新HIV抗性株的出現。因此，需要對抗各種突變體、具有不同作用模式的新型RT抑制劑。
作為HIV-1抑制劑的具三環結構的化合物在第5,366,972號美國專利中被述及。其他HIV-1反轉錄酶抑制劑在Hargrave等人的J.Med.Chem.，34，2231(1991)中被記載。
第5,705,499號美國專利提出8-芳烷基-及8-芳雜烷基-5，11-二氫-6H-二吡啶并[3，2-B:2′，3′-E][1，4]二氮雜為RT抑制劑。這些例示的化合物顯示具有一定程度的對抗野生型HIV-1 RT及突變HIV-1 RT(尤其是Y181C)的活性，亦可對抗其他單突變體(雖作用較小)，例如K103N。
WO 01/96338A1及美國專利6,420,359公開了具喹啉及喹啉-N-氧化物取代基的二氮雜結構化合物物為RT抑制劑。所例示的化合物具有抗HIVWT、單突變株及雙突變株的活性。
發明概述本發明提供一種含取代苯甲酸的化合物，其為野生型(WT)HIV-1 RT及HIV-1 RT的雙突變株(尤其是雙突變株K103N/Y181C)的有效抑制劑。
本發明的第一方面是提供一種式I化合物
其中，R2為H、鹵素、(C1-4)烷基、O(C1-4)烷基、HN(C1-4烷基)或N(C1-4烷基)2；R4為H或CH3；R5為H或CH3；R12為H、鹵素、(C1-4)烷基、CF3或NO2；R13為H、(C1-4)烷基、鹵素、OH或NH2，條件是R12與R13不都為H；以及R14為COOR14a，其中R14a為H或(C1-6)烷基；或R14為(C2-4)烯基-COOR14a，其中R14a如本文中定義；或R14為(C1-4)烷基-COOR14a，其中R14a如本文中定義；或其鹽或前藥。
本發明的第二方面是提供一種用于治療或預防HIV感染的藥物組合物，其包含如本說明書所述的式I化合物，或其可藥用鹽，及可藥用載體。
本發明的第三方面是提供一種治療或預防HIV感染的方法，其包括對患者施用HIV抑制量的式I化合物或其可藥用鹽，或藥物組合物(二者皆如本說明書的定義)。
本發明的第四方面是提供一種治療或預防HIV感染的方法，其包括將包含這里定義的式I化合物的藥物組合物與抗反轉錄病毒藥物組合給藥。
本發明的第五方面是提供一種預防從母親至嬰兒的圍產期HIV-1傳染的方法，其包括在母親分娩前施用這里記載的式I化合物或藥物組合物。
發明詳述定義除非另有說明，否則適用下列定義本文中所用術語“(C1-2)烷基”、“(C1-4)烷基”及“(C1-6)烷基”(無論單獨出現或與另一基團組合出現)分別意指最多包含兩個、四個或六個碳原子的無環的烷基。這些基團的實例包括甲基、乙基、丙基、丁基、1-甲基乙基、1-甲基丙基、2-甲基丙基及1，1-二甲基乙基。
本文所用術語“(C2-4)烯基”(無論其單獨出現或與另一基團組合出現)意指包含兩個至四個碳原子的不飽和無環基團。
本文所用術語“鹵素”意指鹵素原子并包括氟、氯、溴及碘。
本文所用術語“可藥用鹽”包括衍生自可藥用堿且無毒性的鹽。適當的堿的實例包括膽堿、乙醇胺及乙二胺。Na+、K+及Ca++鹽亦被包括在本發明的范圍內(另參見Pharmaceutical salts(藥物鹽)，Birge，S.M.等人，J.Pharm.Sci.，(1977)，66，1-19，這里引入作為參考)。
本文所用術語“前藥”是指可藥用衍生物，由衍生物所得的生物轉化產物是式I化合物所定義的活性藥物。這些衍生物的實例包括(但不限于)酯與酰胺(參見Goodman及Gilman在The Pharmacological Basis ofTherapeutics，第9期，McGraw-Hill，Int.Ed.1995，“Biotransformation ofDrugs(藥物的生物轉化)”，p11-16，這里引入作為參考)。
優選實施方案的詳細說明優選地，R2為H、鹵素、(C1-4)烷基、O(C1-4)烷基或N(C1-4)烷基)2。更優選地，R2為H、Cl、F、(C1-4)烷基、O(C1-4)烷基或N(C1-4)烷基)2。更優選地，R2為H、Cl、F、CH3、OMe或OEt。最優選地，R2為H。
優選地，R4及R5不相同。
更優選地，R4為H。
更優選地，R5為CH3。
優選地，R12為鹵素、(C1-4)烷基、CF3或NO2。更優選地，R12為Br、Cl、CH3或CH3CH2。最優選地，R12為CH3或CH3CH2。
優選地，R13為H、CH3、鹵素、OH或NH2。更優選地，R13為H、CH3或OH。最優選地，R13為H。
優選地，R14為COOH、COOMe、(C2-4)烯基COOH或(C1-4)烷基COOH。更優選地，R14為COOH、CH＝CH-COOH、CH2COOH或CH2CH2COOH。最優選地，R14為COOH。
式I化合物為野生型HIV的有效抑制劑并可抑制雙突變體酶K103N/Y181C。
式I化合物對HIV-1反轉錄酶具有抑制性活性。當以適當劑型給藥時，這些化合物用于治療AIDS、ARC及與HIV-1感染相關的其他病癥。因此本發明的另一方面是一種治療HIV-1感染的方法，包括對感染HIV-1的人施用治療有效劑量的上述新穎式I化合物。無論被稱為治療或預防，該化合物亦可通過對分娩前母親給藥來防止從母親至嬰兒的圍產期HIV-1傳染。
這些式I化合物可通過口服或經腸胃外給藥方式一次給藥或分次給藥。式I化合物的適當口服劑量介于約0.5毫克/天與3克/天之間。對于體重為70公斤的患者而言，式I化合物的口服劑量優選介于約100毫克/天與800毫克/天之間。在腸胃外給藥制劑中，適當的劑量單位可包含0.1至250毫克所述化合物，優選為1毫克至200毫克。但是應該理解不同患者的給藥劑量不同，任一特定患者的給藥劑量取決于臨床醫師的診斷，該臨床醫師將依據患者的體重及狀況及其對藥物的反應確定適當給藥劑量。
若本發明的化合物通過口服方式給藥，則其可以藥物制劑形式作為藥物給藥，這些藥物制劑包含這些化合物以及與其可配伍的藥用載體。這些載體物質可為適于口服的惰性有機或無機載體物質。這些載體物質的實例為水、明膠、滑石粉、淀粉、硬脂酸鎂、阿拉伯膠、植物油、聚鏈烷二醇、凡士林等。
這些式I化合物可與本技術領域的普通技術人員熟悉的抗反轉錄病毒藥物組合使用，可供同時、單獨或依次給藥的組合制劑以用于治療或預防個體的HIV感染。可與式I化合物用于組合治療的抗反轉錄病毒藥物的實例包括(但不限于)核苷/核苷酸反轉錄酶抑制劑(例如AZT及替諾福韋)、非核苷類反轉錄酶抑制劑(例如奈韋拉平)、蛋白酶抑制劑(例如Ritanovir))、病毒融合抑制劑(例如T-20)、CCR5拮抗劑(例如SCH-351125)、CXCR4拮抗劑(例如AMD03100)、整合酶抑制劑(例如L-870，810)、TAT抑制劑、其他研制中的藥物(例如PRO-542、BMS-806、TMC-114或AI-183)、抗真菌劑或抗細菌劑(例如氟康唑)及免疫調節劑(例如左旋咪唑)。此外，一種式I化合物可與另一種式I化合物組合使用。
這些藥物制劑可通過常規方式加以制備，所制成的劑型可為固態劑型，例如片劑、糖衣片、膠囊等；或液態劑型，例如溶液、混懸劑、乳劑等。這些藥物制劑可進行常規的制藥操作，例如滅菌。此外，這些藥物制劑可包含常規佐劑，例如防腐劑、穩定劑、乳化劑、調味劑、潤濕劑、緩沖劑、用于改變滲透壓的鹽等。可應用的固態載體物質包括，例如淀粉、乳糖、甘露醇、甲基纖維素、微晶纖維素、滑石粉、二氧化硅、磷酸氫鈣及高分子量聚合物(例如聚乙二醇)。
進行腸胃外應用的時候，化學式I化合物可以水溶液，或在藥物可接受油中的非水性溶液、懸浮液或乳液，或混合液體的形式施藥，這些液體可包含抑菌劑、抗氧化劑、防腐劑、緩沖劑或其他使溶液與血液等滲的溶質、增稠劑、助懸劑或其它可藥用添加劑。這種類型的添加劑包括，例如酒石酸鹽、檸檬酸鹽及醋酸鹽緩沖液、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、螯合物形成劑(例如EDTA)、抗氧化劑(例如亞硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉及抗壞血酸)、用于調節粘度的高分子量聚合物(例如液態聚氧化乙烯)以及山梨醇酐的聚乙烯衍生物。必要時亦可加入防腐劑，例如苯甲酸、對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯、苯扎氯銨及其他季銨化合物。
本發明的化合物亦可作為經鼻用藥溶液施用，除本發明的這些化合物外，還包含溶于水媒劑中的適當緩沖劑、滲透壓調節劑、抗微生物防腐劑、抗氧化劑及增粘劑。用于增加粘度的試劑實例為聚乙烯醇、纖維素衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、聚山梨酸酯或甘油。所添加的抗微生物防腐劑可包括苯扎氯銨、硫柳汞、氯丁醇或苯乙醇。
另外，本發明所提供的化合物可以栓劑形式用藥。
方法及合成本發明的化合物可利用有機合成化學工作者所熟知的技術制備。示范性的反應流程如下

圖1至圖4所示。取代基R2、R4、R5、R12、R13及R14如本文中定義。
流程1中間體(其中R4為甲基)的制備 簡言之，用乙胺進行1(i)的芳環取代(SNAR)生成中間體1(ii)。然后，利用溴化劑(例如NBS或溴)鹵化第5位生成1(iii)。通過由堿參與的SnAR反應使1(iii)閉環，從而生成三環中間體1(iv)。由1(iv)中C-2氯的芳環取代反應引入R2取代基，從而生成中間體化合物1(v)。
流程2中間體(其中R5為甲基)的制備 流程2的反應順序與J.M.Klunder等人的J.Med.Chem.1998，41，2960-71及C.L.Cywin等人的J.Med.Chem.1998，41，2972-84中所述的反應順序類似。簡述之，由用乙胺進行2(i)的芳環取代(SNAR)生成中間體2(ii)。硝基的環原反應(例如利用催化加氫反應)生成2(iii)。堿參與的2(iii)與，例如5-溴-2-氯-3-吡啶基羰基氯的縮合反應生成2(iv)。通過堿參與的SnAR反應使2(iv)閉環，生成三環中間體2(v)。2(vi)中的R5甲基可利用本技術領域已知的烷基化反應例如碘甲烷引入。
流程3中間體(其中R2為C1-4烷基)的制備
簡言之，3(i)與3(ii)之間堿參與的縮合反應將生成中間體3(iii)。用乙胺進行的3(iii)的芳環取代(SNAR)生成中間體3(iv)。由堿參與的SnAR反應使3(iv)閉環，進而形成三環中間體，對該三環中間體進行烷基化生成中間體化合物3(v)。
流程4化合物(其中R4為甲基)的另一種制備方法 簡言之，4(i)與3(ii)之間的堿參與的縮合反應生成中間體4(ii)。乙胺進行的4(ii)的芳環取代((SNAR)生成中間體4(iii)。堿參與的SnAR反應使4(iii)閉環，進而形成三環中間體化合物1(v)。
流程5苯甲酸衍生物的引入
簡言之，如本文所述合成的溴衍生物5(i)與烯丙基錫試劑在非質子溶劑(例如DMF)中且在催化劑存在下發生交聯偶合反應，將形成具C-8取代基的5(ii)。氧化雙鍵(例如由臭氧分解生成臭氧化物)，然后進行還原反應，生成含C-8羥乙基取代基的5(iii)。當Y為R14時(COOH除外)，通過Mitsunobu型反應將萘衍生物5(iv)、5(v)或5(vi)與5(iii)縮合，進而生成式I化合物。或者，當Y為R14基團前體例如COOCH3時，可通過Mitsunobu型反應將5(iv)或5(v)與5(iii)縮合，然后，Y可以化學方式轉化成R14取代基，例如通過COOCH3的皂化反應生成COOH，從而得到式I化合物。
如前所述，本發明所提供的化合物可抑制HIV-1 RT的酶活性。基于下述對這些化合物的檢測，可知這些化合物抑制HIV-1 RT的RNA依賴性DNA聚合酶的活性。可知(數據未顯示)這些化合物亦抑制HIV-1 RT的DNA依賴性DNA聚合酶的活性。利用下述反轉錄酶(RT)分析法可檢測化合物抑制HIV-1 RT的RNA依賴性DNA聚合酶活性的能力。下述實施例中所述的某些特定化合物按照這種方式進行檢測。該檢測結果在表2中以IC50及EC50形式列出。
實施例本發明通過下列非限制性實施例進行詳細說明。除非另有說明，所有反應均在氮氣或氬氣氣氛中進行。溫度均以攝氏溫度表示。除非另有說明，溶液百分比或比率均表示體積-體積關系。
本文中所用縮略語或符號包括DEAD偶氮二甲酸二乙酯；
DIAD偶氮二甲酸二異丙酯；DIEA二異丙基乙胺；DMAP4-(二甲胺基)吡啶；DMSO二甲基亞砜；DMF二甲基甲酰胺；DCC二環己基碳二亞胺；ES MS電噴霧質譜法；Et乙基；EtOH乙醇；EtOAc醋酸乙酯；Et2O乙醚；HPLC高效液相色譜法；iPr異丙基；Me甲基；MeOH甲醇；MeCN乙腈；NaHMDS六甲基二甲硅基氨基鈉；NBSN-溴代丁二酰亞胺；Ph苯基；TBE三硼酸鹽-EDTA；TBTU2-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′N′-四甲基脲 四氟硼酸鹽；TFA三氟醋酸；THF四氫呋喃；PFU噬斑形成單位；DEPC焦碳酸二乙酯；DTT二硫蘇糖醇；EDTA乙二胺四乙酸鹽；UMP尿苷5′-單磷酸；UTP尿苷5′-三磷酸；MES2-(n-嗎啉代)乙磺酸；SDS-PAGE十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法；
MWCO分子量截斷；Bis-Tris Propane1，3-雙{三(羥甲基)-甲胺基}丙烷；GSH還原谷胱甘肽；OBGn-正辛基-β-D-葡萄糖苷。
合成方法下列實例例示說明本發明化合物的制備方法。
實施例1 步驟a將2M乙胺的THF溶液(365毫升，731毫摩爾)加至2-氯-3-硝基吡啶1a(51克，325毫摩爾)溶于THF(650毫升)的溶液中。將反應物在室溫下攪拌過夜。將得到的反應混合液倒入水(約1.5升)中，濾出生成的固體并在減壓下干燥，得到化合物1b(52克)。
步驟b
在20％的Pd(OH)2/C(10.4克)存在下，將2-(乙胺基)-3-硝基吡啶1b(52克)溶于MeOH(600毫升)的溶液在氫氣中(1大氣壓)及在室溫下攪拌過夜。催化劑通過硅藻土過濾去除。將濾液減壓濃縮，得到黑色固體的化合物1c(39克，步驟a與b的總收率為88％)。
步驟c將固體NaHCO3(56.3克，669毫摩爾)加入到冷卻的3-胺基-2-(乙胺基)吡啶1c(30.6克，223毫摩爾)在MeCN(740毫升)的溶液中。5分鐘后，加入粗制5-溴-2-氯-3-吡啶基羰基氯(由5-溴-2-羥基-3-吡啶基羧酸及SOCl2制得)(1當量，223毫摩爾)[如T.W.Gero等人在Synth.Commun.1989，19，553-559中所述(將其引入作為參考)，但略去水溶液的后處理]。2小時后，將反應混合液倒入冰/水(1.5升)中，過濾出所生成的固體，并依次用水及己烷洗滌。在減壓下干燥過夜后，得到黑色固體的化合物1d(54.9克，收率為69％)。
步驟d在50℃下，向2-氯-N-{2-(乙胺基)-3-吡啶基}-5-溴-3-吡啶基甲酰胺1d(54.9克，154.4毫摩爾)的吡啶(308毫升)溶液，滴加1M NaHMDS的THF溶液(355毫升，355毫摩爾)。10分鐘后，將反應溶液冷卻至室溫，然后倒入冰水中(2升)。過濾出所生成的固體，并用水然后用己烷洗滌。在減壓下干燥過夜后，得到暗綠色固體的化合物1e(36克，收率為75％)。
步驟e將NaH(3.5克，138毫摩爾)加至8-溴-5，11-二氫-11-乙基-6H-二吡啶并[3，2-b:2′，3′-e][1，4]二氮雜-6-酮1e(36.7克，115毫摩爾)的DMF(380毫升)溶液中，并將混合液在50℃加熱30分鐘。將反應混合液冷卻至室溫并用MeI(14.3毫升，230毫摩爾)處理。1.5小時后，將此反應混合液倒入冰水中。過濾出所生成的固體，并且水然后用己烷洗滌，經干燥后得到暗灰色固體的化合物1f(37.9克，收率為99％)。
步驟f
將烯丙基三丁基錫(30.7毫升，99.0毫摩爾)及Pd(Ph3P)4(5.20克，4.50毫摩爾)加至脫氣的8-溴-5，11-二氫-11-乙基-5-甲基-6H-二吡啶并[3，2-b:2′，3′-e][1，4]二氮雜-6-酮1f(30.0克，90.0毫摩爾)的DMF(450毫升)溶液中(向溶液中通入30分鐘氮氣)。將此混合液在90℃攪拌1.5小時，然后將其冷卻至室溫并減壓濃縮。所得的殘余物經快速層析法純化(己烷與EtOAc的比介于8∶2與7∶3之間)，得到化合物1g(22.19克，收率為84％)。
步驟g將臭氧化的氧氣流鼓泡通入5，11-二氫-11-乙基-5-甲基-8-(2-丙烯基)-6H-二吡啶并[3，2-b:2′，3′-e][1，4]二氮雜-6-酮1g(22.19克，75.4毫摩爾)溶于CH2Cl2(150毫升)及MeOH(150毫升)的冷(-78℃)溶液中，時間為2.5小時。然后在此溶液中通入15分鐘氮氣流，隨后加入固體NaBH4(4.99克，132毫摩爾)。讓此反應混合物溫熱至室溫。1小時后，加入飽和NH4Cl水溶液(200毫升)并在室溫下將此混合物攪拌2小時。在減壓下去除有機溶劑。將水(300毫升)及CHCl3(300毫升)加入至殘余物中。將各相分離，水層用CHCl3(3×300毫升)萃取。將合并的有機層干燥(MgSO4)、過濾并減壓濃縮。通過快速層析法(EtOAc∶CHCl3為4∶1)將所得的殘余物純化，得到白色固體的化合物1h(16.1克，收率為72％)。
實施例2 步驟a用15分鐘將EtNH2(49.8克，1.10摩爾)溶于甲苯(200毫升)的冰冷溶液加至2，6-二氯-3-硝基吡啶2a(100.0克，0.52摩爾)溶于甲苯(225毫升)的冰冷溶液中。在0℃下將該混合物攪拌45分鐘。加入水(500毫升)及EtOAc(500毫升)并將各相分離。依次用水(200毫升)及鹽水(200毫升)洗滌有機層并將其干燥(MgSO4)、過濾并減壓濃縮。使所得的殘余固體在MeOH中重結晶，得到黃色針狀的化合物2b(83.7克，收率為80％)。
步驟b化合物2c按與實施例1的步驟b類似的方式制備。
步驟c在室溫下，通過套管將5-溴-2-氯-3-吡啶基羰基氯(30.0克，97.0毫摩爾)溶于MeCN(100毫升)的溶液加入到3-胺基-6-氯-2-(乙胺基)吡啶2c(16.6克，97.0毫摩爾)溶于含固體NaHCO3(14.2克，169毫摩爾)的MeCN(180毫升)的溶液中。將此混合液在室溫下攪拌1小時。加入水(200毫升)并將該混合物攪拌10分鐘。過濾所生成的懸浮液。將所得的固體先用水然后用己烷洗滌并在減壓下干燥，得到化合物2d(28.4克，收率為75％)。
步驟d將1M NaHMDS的THF溶液(167.5毫升，167.5毫摩爾)緩慢地加至5-溴-2-氯-N-{2-(乙胺基)-6-氯-3-吡啶基}-3-吡啶基甲酰胺2d(28.4克，72.8毫摩爾)溶于吡啶(146毫升)的溶液中，并加熱至50℃。將反應混合液在50℃攪拌1.5小時。然后將該混合液倒入冰水混合液(1升)中，1小時后，過濾所生成的懸浮液。用水洗滌所得的固體并在減壓下干燥，得到化合物2e(23.4克，收率為91％)。
步驟e在50℃，用30分鐘將固體NaH(60％油分散體，3.46克，86.1毫摩爾)加至8-溴-2-氯-5，11-二氫-11-乙基-6H-二吡啶并[3，2-b2′，3′-e][1，4]二氮雜-6-酮2e(23.4克，66.3毫摩爾)溶于DMF(220毫升)的溶液中。將此混合液在50℃下攪拌1小時，然后冷卻至室溫。將該混合液倒入水(1升)中并過濾所生成的懸浮液。依次用水及己烷洗滌所得固體并在減壓下干燥，得到化合物2f(23.0克，收率為94％)。
步驟f將烯丙基三丁基錫(21.3毫升，68.7毫摩爾)及Pd(Ph3P)4(3.61克，3.12毫摩爾)加至脫氣的8-溴-2-氯-5，11-二氫-11-乙基-5-甲基-6H-二吡啶并[3，2-b2′，3′-e][1，4]二氮雜-6-酮2f(23.0克，62.5毫摩爾)溶于DMF(312毫升)的溶液(向溶液中通入30分鐘氮氣)中。將此混合液加熱至90℃并保持2小時。將其減壓濃縮。通過快速層析法(己烷∶EtOAc為7∶3)純化所得的殘余物，得到化合物2g(13.4克，收率為65％)。
步驟g將臭氧化的氧氣通入冷(-78℃)的2-氯-5，11-二氫-11-乙基-5-甲基-8-(2-丙烯基)-6H-二吡啶并[3，2-b2′，3′-e][1，4]二氮雜-6-酮2g(13.4克，40.7毫摩爾)溶于MeOH(102毫升)及CH2Cl2(102毫升)溶液中，直至烯完全消失。在該溶液中通入氮氣以去除過量臭氧。然后，將固體NaBH4(2.69克，71.1毫摩爾)分成小份加入，并將該溶液緩慢加熱至室溫。1小時后，加入飽和NH4Cl水溶液(150毫升)并將此混合液攪拌20分鐘。在減壓下將其中的有機溶劑去除。將水(100毫升)加至此水溶液中。用CHCl3(3×200毫升)萃取此溶液。將合并的有機層干燥(MgSO4)、過濾并減壓濃縮。通過快速層析法(EtOAc∶CHCl3為4∶1)將所得殘余物純化，得到化合物2h(10.4克，收率為77％)。
實施例3 步驟a將2，6-二氟吡啶3a(200克，1.74摩爾)滴加至在冰浴中(其內部溫度保持在5-10℃)的濃硫酸(600毫升)與發煙硝酸(90％，400毫升)的混合液中。將所得的混合液在室溫下攪拌過夜。將混合液緩慢倒入3公斤冰中并用Et2O(2×2升)萃取。將合并的有機層用1.5N NaOH(2×1升)洗滌，然后用飽和的NHCO3水溶液(400毫升)洗滌，或直至使pH值介于8-9之間為止。將有機層用MgSO4干燥，然后過濾及減壓濃縮，直至恒重(以去除未反應的2，6-二氟吡啶10-12％)為止。得到黃色液體的化合物3b(207.3克，收率為74％)。
步驟b在-40℃下，將乙胺(25.7克，570毫摩爾)溶于THF(250毫升)的溶液滴加至2，6-二氟-3-硝基吡啶3b(45.7克，285毫摩爾)溶于THF(500毫升)的溶液中。30分鐘后，減壓濃縮此反應混合液且使所得的殘余物溶解于EtOAc中。有機相用鹽水洗滌并干燥(MgSO4)、過濾及濃縮。所得的黃色固體通過快速層析法(15％EtOAc/己烷)純化，得到黃色固體狀的化合物3c(43.2克，收率為82％)。
步驟c在20％Pd(OH)2/C(4.35克)存在下，將2-乙胺基-6-氟-3-硝基吡啶3c(43.2克，230毫摩爾)溶于THF(1升)的溶液在室溫下及氫氣中(1大氣壓)攪拌過夜。催化劑通過硅藻土過濾去除。減壓濃縮該濾液，得到黑色固體的化合物3d(36.3克，收率為95％)。
步驟d將固體NaHCO3(50.4克，600毫摩爾)加至3-胺基-2-乙胺基-6-氟吡啶3d(31.0克，200毫摩爾)溶于MeCN(160毫升)的冷溶液(4℃)中。15分鐘后，加入5-溴-2-氯-3-吡啶羰基氯(1當量，200毫摩爾)溶于MeCN(155毫升)的溶液。在室溫下反應60分鐘后，將此反應混合液倒入水(1.2升)中并攪拌30分鐘。過濾出所生成的固體并在50℃減壓干燥過夜。得到黑色固體的化合物3e(73.7克，收率為99％)。
步驟e在50℃下，將1M NaHMDS的THF溶液(520毫升，520毫摩爾)滴加至2-氯-N-{2-(乙胺基)-6-氟-3-吡啶基}-5-溴-3-吡啶甲酰胺3e(73.5克，216毫摩爾)溶于吡啶(435毫升)的溶液中。10分鐘后，反應溶液冷卻至室溫，然后將其倒入冰水(2升)中。將生成的固體過濾并先用水然后用己烷洗滌。在減壓下干燥所得的固體，得到暗綠色固體的化合物3f(50.6克，收率為69％)。
步驟f將NaH(4.28克，178毫摩爾)加至8-溴-5，11-二氫-11-乙基-2-氟-6H-二吡啶并[3，2-b2′，3′-e][1，4]二氮雜-6-酮3f(44克，130.5毫摩爾)溶于DMF(520毫升)的溶液中，并將此混合液50℃加熱30分鐘。然后將反應混合液冷卻至室溫并用MeI(24.4毫升，522毫摩爾)處理。1.5小時后，將此反應混合物倒入冰水中。過濾出所生成的固體，先用水然后用己烷洗滌，并在減壓下干燥，得到黑灰色固體的化合物3g(43.2克，收率為94％)。
步驟g將烯丙基三丁基錫(32.0毫升，103.4毫摩爾)及Pd(Ph3P)4(5.43克，4.70毫摩爾)加至8-溴-5，11-二氫-11-乙基-2-氟-5-甲基-6H-二吡啶并[3，2-b:2′，3′-e][1，4]二氮雜-6-酮3g(33.0克，94.0毫摩爾)溶于DMF(470毫升)且經脫氣的溶液(向溶液中通入45分鐘氮氣)中。分別于1、2、3、4及5小時后進一步加入Pd(Ph3P)4(1.09克，0.94毫摩爾)，以完成該反應。將此混合液加熱至90℃并保持6小時。減壓濃縮該混合物。通過快速層析法(己烷∶EtOAc為8∶2至7∶3)純化所得殘余物，得到化合物3h(22.4克，收率為76％)。
步驟h將臭氧化的氧氣氣流通入5，11-二氫-11-乙基-2-氟-5-甲基-8-(2-丙烯基)-6H-二吡啶并[3，2-b2′，3′-e][1，4]二氮雜-6-酮3h(22.38克，71.6毫摩爾)溶于CH2Cl2(100毫升)及MeOH(100毫升)的冷(-78℃)溶液中，時間為3小時。然后在此溶液中通入15分鐘氮氣氣流，隨后加入固體NaBH4(5.05克，133毫摩爾)。將此反應混合物加熱至室溫。1小時后，向此反應混合物中進一步加入NaBH4(1.62克，43.0毫摩爾)。再經1小時后，在其中加入飽和的NH4Cl水溶液(150毫升)，并將此混合液在室溫下攪拌30分鐘。在減壓下去除有機溶劑。加入水(200毫升)并用CHCl3(3×300毫升)萃取此混合液。將合并的有機層干燥(MgSO4)、過濾并減壓濃縮。通過快速層析法(EtOAc∶CHCl3為4∶1)純化所得殘余物，得到白色固體的化合物3I(19.7克，收率為72％)。
實施例4(化合物編號為1003及1031) 步驟a將1.6M正丁基鋰的己烷溶液(6.22毫升，9.95毫摩爾)快速加至4a(0.87克，4.33毫摩爾)溶于THF(20毫升)的冷(-78℃)溶液中。將此混合液在-78℃下攪拌10分鐘，然后溫熱至0℃并在此溫度下維持1小時。將CO2氣流通入此反應混合液中10分鐘，并加入1.0N HCl溶液使此溶液呈酸性。用EtOAc萃取此溶液。將有機層干燥(MgSO4)、過濾并減壓濃縮。將所得殘余物溶解在Et2O(20毫升)中并用過量CH2N2溶于Et2O的溶液(約0.6M，10毫升)處理10分鐘。減壓濃縮此混合液并通過快速層析法(己烷∶EtOAc為4∶1至7∶3)純化所得殘余物，得到4b(0.13克，收率為17％)。
步驟b在25℃下，用30分鐘將DIAD(86微升，0.44毫摩爾)溶于THF(2.0毫升)的溶液加至1h(100毫克，0.33毫摩爾)、4b(60.0毫克，0.33毫摩爾)及PPh3(114毫克，0.44毫摩爾)溶于THF(10毫升)的溶液中。將此混合液攪拌1小時，然后減壓濃縮。通過快速層析法(己烷∶EtOAc為7∶3至1∶1)純化所得殘余物，得到化合物1031(128毫克，收率為83％)。
步驟c將1.0N的氫氧化鋰水溶液(1.52毫升，1.52毫摩爾)加至化合物1031(100毫克，0.22毫摩爾)溶于THF(6毫升)及MeOH(2毫升)的溶液中。將此反應混合物在25℃下攪拌24小時，然后加熱回流1小時。加入1.0N HCl水溶液使此溶液呈酸性，然后用EtOAc萃取。將有機層用水(2×)及鹽水洗滌，然后干燥(MgSO4)、過濾并減壓濃縮。將殘余物用Et2O/己烷研磨，得到為白色固體的化合物1003(80毫克，收率為83％)。將化合物1003(38.0毫克，0.085毫摩爾)與0.02N NaOH水溶液(4.3毫升，0.085毫摩爾)的混合物在MeCN(3毫升)中進行超音波處理。將所得溶液冷凍干燥，得到白色固體的相應鈉鹽(37毫克，收率為98％)。
實施例5(化合物編號為1019、1020及1028) 步驟a在25℃下，用2小時將DIAD(86微升，0.44毫摩爾)溶于THF(2.0毫升)的溶液加至3i(106毫克，0.34毫摩爾)、5a(56.0毫克，0.34毫摩爾)及PPh3(114毫克，0.44毫摩爾)溶于THF(7毫升)的溶液中。將此混合液攪拌1小時，然后減壓濃縮。通過快速層析法(己烷∶EtOAc為7∶3至1∶1)純化殘余物，得到白色固體的5b(115毫克，收率為73％)。
步驟b將1.0N氫氧化鋰水溶液(1.0毫升，1.0毫摩爾)加至5b(100毫克，0.21毫摩爾)在MeOH(6毫升)中的溶液中。在25℃下將此反應混合液攪拌24小時，加入1.0N HCl水溶液使此溶液呈酸性，然后用EtOAc萃取。用水及鹽水洗滌有機層，并對其加以干燥(MgSO4)、過濾并減壓濃縮。所得殘余物通過快速層析法(己烷∶EtOAc∶AcOH為50∶50∶1)純化，先得到白色固體的第一化合物1019(25毫克，收率為25％)，然后得到白色固體的化合物1020(48毫克，收率為50％)。其相應的鈉鹽用0.02N NaOH水溶液處理得到。
步驟c將1.0M二甲胺的THF溶液(5.0毫升，5.0毫摩爾)及1.0N氫氧化鋰水溶液(1.0毫升，1.0毫摩爾)加至5b(50.0毫克，0.11毫摩爾)溶于i-PrOH(3毫升)的溶液中。將反應混合液加熱回流48小時。在此混合液中加入1.0N的HCl水溶液(2毫升)并用EtOAc萃取。用水及鹽水洗滌有機層，并干燥(MgSO4)、過濾并減壓濃縮。通過快速層析法(己烷∶EtOAc∶AcOH為50∶50∶1)純化所得殘余物，得到白色固體的化合物1028(18毫克，收率為35％)。其相應的鈉鹽用0.02N NaOH處理得到。
實施例6(化合物編號為1014) 步驟a向酸6a(1.00克，5.55毫摩爾)溶于CH2Cl2(50毫升)的溶液中加入草酰氯(0.73毫升，8.3毫摩爾)及DMF(100微升)。將反應混合液攪拌90分鐘，然后加入EtOH(15毫升)，并將所得的反應混合液再攪拌1小時。減壓濃縮反應混合液，用EtOAc稀釋所得的殘余物并依次用水及鹽水洗滌，然后干燥(MgSO4)、過濾及濃縮，得到酯6b，其無需進一步純化即可使用。
步驟b向酯6b溶于CH2Cl2的溶液(50毫升)中加入1M BBr3的二氯甲烷溶液(7.2毫升，7.20毫摩爾)中。在室溫下反應3小時后，將此反應混合液冷卻至0℃并加入EtOH(5毫升)。在室溫下將此反應混合液攪拌30分鐘，然后減壓濃縮。用EtOAc稀釋殘余物，并依次用NaHCO3飽和水溶液、水及鹽水洗滌，然后干燥(MgSO4)、過濾并濃縮至干。通過快速層析法純化所得殘余物(己烷∶EtOAc為70∶30)，生成透明膠狀的酚6c(802毫克，兩步驟的總收率為74％)。
步驟c在室溫下，用2小時將DIAD(87微升，0.44毫摩爾)溶于THF(2.0毫升)的溶液加至1h(100毫克，0.33毫摩爾)、Ph3P(104毫克，0.44毫摩爾)及酚6c(65毫克，0.34毫摩爾)溶于THF(7.0毫升)的溶液中。將此混合液攪拌4小時，然后減壓濃縮。通過快速層析法(己烷∶EtOAc為30∶70至50∶50)純化所得殘余物，得到白色泡沫的化合物6d(46毫克，收率為29％)。
步驟d向酯6d(44毫克，0.09毫摩爾)溶于THF(3毫升)與MeOH(1毫升)的混合液的溶液中，加入1N氫氧化鋰水溶液(1.0毫升，1.0毫摩爾)。在室溫下4小時后，加入1N HCl(2毫升)。用EtOAc萃取此混合液。有機層用水及鹽水洗滌，并進行干燥(MgSO4)、過濾及濃縮，得到白色固體的化合物1014(39毫克，收率為93％)。其相應的鈉鹽通過1當量的氫氧化鈉水溶液處理、并對所得溶液凍干得到蓬松狀白色固體而得到。


反轉錄酶(RT)測定測定原理反轉錄酶(1)為人類免疫缺陷病毒(HIV-1)所編碼的眾多酶中的一種，該酶之所以如此命名乃因其可自RNA模板轉錄DNA拷貝。此活性可在無細胞的酶測定法定量，并基于觀測在使用合成模板聚r(C)及以生物素化寡d(G)引物下，反轉錄酶利用3H-dGTP底物轉錄放射性標記的DNA鏈的能力而評定。下述測定法利用野生型酶(其為HIV-1感染的患者中所觀測到酶的主要形式)，且亦可在類似測定條件下利用突變RT酶(例如Y181C，其通過定點誘變加以制備，其中密碼子181的酪胺酸殘基被半胱胺酸殘基替換)。通過此測定法可測定化合物對抑制突變酶的功效。
材料a)酶的制備HIV-1 IIIB克隆BH10 RT突變體由Dr.C.-K.Shih(Boehringer IngelheimPharmaceuticals Inc.，U.S.A.)以載體pKK233-2(Pharmacia)的方式提供。簡言之，僅包含由乳糖操縱子/trc啟動子調節的RT p66基因的HIV RT克隆pKRT2從Dr.W.Summers(耶魯大學)處獲得(2)。各種具體的氨基酸取代通過定點突變引入到野生型RT基因中。將RT克隆亞克隆至pKK233-2細菌表現載體中。所提供的克隆包括野生型、Vall06Ala、Tyr181Cys、Tyr188Cys、Tyr188Leu、Gly190Ala及Pro236Leu。其他通過對pKK233-2 RT克隆體自行進行定點突變而制得，其包括Lys103Asn、Lys103Asn/Tyr181Cys、Lys103Asn/Leu10011e、Lys103Asn/Pro225His及Lys103Asn/Val10811e。
b)酶的純化重組反轉錄酶的純化通過前述方法的組合實施(3)。在37℃下，使用取自轉化的JM109細胞的新鮮平板的單一菌落進行預培養。將該預培養的菌種接種至2升的生長培養基中。在OD600～1.5下(在37℃下進行5-6小時)，用IPTG(最終為1毫摩爾/升)誘發RT基因表達，且使發酵在37℃下再持續若干小時。經離心后，去除上清液，將細胞沉淀收集起來并在-80℃下存儲，以備純化。將細胞在4℃下解凍過夜并使之懸浮于裂解緩沖液(MES50mM，pH6；EDTA1mM；10％v/v甘油；0.02％w/vOBG；0.02％w/v疊氮化鈉)中。加入溶菌酶并將此混合液在冰浴中孵育40分鐘。在溶菌酶存在下用Dounce勻漿并用超音波處理后，將細胞離心30分鐘。收集上清液(S1)并在4℃儲存。將離心后所得沉淀再懸浮于萃取緩沖液(MES50mM，pH6；KPO450mM，pH6；KCl100mM；10％v/v甘油；0.02％w/v OBG；0.02％w/v疊氮化鈉)中并在4℃攪拌30分鐘。將此第二混合液離心并收集所得上清液(S2)。重復上述步驟2次以上，收集到上清液S3與S4，最后再進行過夜萃取(S5)。將Polymin P(終濃度為0.005％)加入合并的上清液中以去除核酸。將該溶液在4℃攪拌75分鐘并離心1小時。在冰上用20％w/v硫酸銨使所述上清液(SS1)沉淀并在4℃攪拌1小時。然后將此混合液離心，另加入40％w/v硫酸銨(總濃度為60％)沉淀生成的上清液(SS2)，攪拌1小時并再次離心。第二天進行純化前，將最終得到的沉淀(P1)在4℃存放過夜。除非另有規定，所有純化步驟均在4℃進行。將沉淀(P1)重新懸浮于含MES，50mM，pH6；KPO4，10mM，pH6；KCl，100mM；10％v/v甘油；0.02w/v OBG；以及0.02w/v疊氮化鈉的緩沖液中。利用12-14kD MWCO透析袋使此懸浮液相對于相同的緩沖液進行過夜透析。將透析液離心并通過Millex-PF 0.8微米的過濾設備過濾所得上清液，將濾出的樣品加載至羥基磷灰石柱(30毫升柱床體積)上并用相同緩沖液洗脫，用220毫升含有10～300mM線性梯度的KPO4的相同緩沖液將結合的酶洗脫。收集含p66/p51雜二聚體的部分(通過8％的SDS-PAGE及蛋白印跡法測定)，進行下一步純化。含RT的部分用含Bis-Tris丙烷(50mM，pH7.0)、OBG(0.02％w/v)、甘油(10％v/v)及疊氮化鈉(0.02％w/v)的溶液稀釋2倍，然后將其加載至Hi-Trap Hepparin Sepharose柱(5毫升柱床體積)上并用相同緩沖液洗脫。之后用75毫升含呈0～1M線性梯度的硫酸銨的相同緩沖液將結合的RT洗脫。依據SDS-PAGE及蛋白印跡分析收集含有RT的部分。該收集物中的蛋白質濃度以BSA為標準品通過Bradford方法測定。將最終酶制劑在含MES(50mM，pH6)、KPO4(300mM，pH6)、KCl(175mM)、甘油(10％v/v)及疊氮化鈉(0.02％w/v)的溶液中透析、然后進行等分并在-80℃冷凍。
測定步驟放射性酶測定法修改成適于96孔微量滴定板形式并利用鏈親和素閃爍鄰近小球實施。此測定法將在下文進行簡要描述。將HIV-1 RT酶解凍并用含NaCl(60mM)、氯化鎂六水合物(2mM)、DTT(6mM)、GSH(2mM)及Chaps(0.02％w/v)的Tris/HCl(50mM，pH7.8)適當稀釋，得到約3 nM的酶。向30微升該酶溶液中加入10微升抑制劑溶液(50μM至2.5nM抑制劑溶于上述的相同測定緩沖液中，其中包含15％v/vDMSO)。在進行下一步驟之前，先在室溫下將此微量滴定板預孵育15分鐘。在此預孵育步驟中，抑制劑的最高濃度與最低濃度分別為12.5μM與0.62nM，DMSO的濃度為3.75％v/v。然后加入10微升底物溶液引發酶反應。最終的反應混合液含有Tris/HCl(50mM，pH7.8)、NaCL(60mM)、硫酸鎂六水合物(2mM)、DTT(6mM)、GSH(2mM)、Chaps(0.02％w/v)、DMSO(3％v/v)、Poly rC(179nM)、生物素dG15(18nM)、dGTP(288nM)、3H-dGTP(71nM)及酶(1-2nM)。
在該培養步驟中，抑制劑的最高濃度及最低濃度分別為10μM及0.5nM。加入底物后，用塑封覆蓋微量滴定板并在37℃下置于干燥培養箱中培養1小時。然后加入75微升含5毫克/毫升的鏈親和素鄰近小球的EDTA(0.5摩爾/升)終止反應。
以中等速度將微量滴定板晃動2分鐘并在室溫下孵育1小時。然后加入75微升7M的氯化銫溶液，以中等速度將微量滴定板晃動2分鐘并在室溫下進一步孵育1小時。然后用塑封覆蓋微量滴定板并利用TopCount-NXTTM微量板閃爍熒光計數器(Packard)進行計數。對每一孔均計數60秒。每排的末端包含一空白孔及一對照孔。
抑制百分率計算方法如下 利用上述測定法檢測本發明的化合物對RT野生型(WT)及突變酶的抑制作用。測定結果在表2中以IC50(nM)形式列出。
為確認該化合物對HIV復制的抑制能力，亦在下述人T細胞培養(Syncytia)測定中進行檢測。
用于測定細胞培養中的活性的ELISA測定法在96孔板測定中，檢測了本發明的化合物對細胞培養中HIV復制的抑制能力。用完全RPMI 1640(由RPMI 1640+10％胎牛血清、10微克/毫升的慶大霉素及10μM β-巰基乙醇組成)稀釋化合物及細胞生長培養基。將T淋巴細胞系C8166通過編碼野生型及突變反轉錄酶的病毒以0.001的感染率多次感染。然后，在本發明化合物的一系列稀釋存在下將細胞培養三天。收集八個相同加樣孔中的上清液，并使用市售HIV-1 p24抗原測定試劑盒(Bechman-Coulter)測定細胞外p24的濃度。抑制水平(抑制百分率)通過下述公式計算 這些檢測結果在表2中以EC50(nM)形式列出。
參考文獻(以引用方式并入本文中)1.Benn，S.等人，Science 230949，1985。
2.D′Aquila，R.T.及Summers，W.C.J.Acq.Imm.Def.Syn.2579，1989。
3.a)Warren，T.C.等人，Protein Expression & Purification3479，1992；b)Kohlstaedt，L.A.Science 256(5065)1783，1992。
表2式I化合物對野生型RT及RT突變株的抑制作用


表中符號說明IC50及EC50A＝＞100nM；B＝100nm-50nM；C＝＜50nM；及NT＝未檢測
權利要求
1.一種式I化合物 其中，R2為H、鹵素、(C1-4)烷基、O(C1-4)烷基、HN(C1-4烷基)或N(C1-4烷基)2；R4為H或CH3；R5為H或CH3，條件是R4及R5不相同；R12為H、鹵素、(C1-4)烷基、CF3或NO2；R13為H、(C1-4)烷基、鹵素、OH或NH2，條件是R12與R13不都為H；及R14為COOR14a，其中R14a為H或(C1-6)烷基；或R14為(C2-4)烯基-COOR14a，其中R14a如這里定義；或R14為(C1-4)烷基-COOR14a，其中R14a定義同上，或其鹽或前藥。
2.如權利要求1的化合物，其中R2為H、鹵素、(C1-4)烷基、O(C1-4)烷基或N(C1-4烷基)2，且R4與R5不相同。
3.如權利要求2的化合物，其中R2為H、Cl、F、(C1-4)烷基、O(C1-4)烷基或N(C1-4烷基)2。
4.如權利要求3的化合物，其中R2為H、Cl、F、CH3、OMe或OEt。
5.如權利要求4的化合物，其中R2為H。
6.如權利要求1的化合物，其中R4為H。
7.如權利要求1的化合物，其中R5為CH3。
8.如權利要求1的化合物，其中R12為鹵素、(C1-4)烷基、CF3或NO2。
9.如權利要求8的化合物，其中R12為Br、Cl、CH3或CH3CH2。
10.如權利要求9的化合物，其中R12為CH3或CH3CH2。
11.如權利要求1的化合物，其中R13為H、CH3、鹵素、OH或NH2。
12.如權利要求11的化合物，其中R13為H、CH3或OH。
13.如權利要求12的化合物，其中R13為H。
14.如權利要求1的化合物，其中R14為COOH、COOMe、(C2-4)烯基-COOH或(C1-4)烷基-COOH。
15.如權利要求14的化合物，其中R14為COOH、CH＝CH-COOH、CH2COOH或CH2CH2COOH。
16.如權利要求15的化合物，其中R14為COOH。
17.如權利要求1的式I化合物 其中，R2為H、Cl、F、CH3、OMe或OEt；R4為H；R5為CH3；R12為Br、Cl、CH3或CH2CH3；R13為H、CH3或OH；及R14為COOH、CH＝CH-COOH、CH2COOH或CH2CH2COOH；或其鹽或前藥。
18.如權利要求17的化合物，其中R2為H；R4為H；R5為CH3；R12為CH3或CH3CH2；R13為H；且R14為COOH；或其鹽或前藥。
19.一種用于治療或預防HIV感染的藥物組合物，其包含權利要求1的式I化合物或其的可藥用鹽，以及可藥用載體。
20.一種治療或預防HIV感染的方法，包括對病人施用HIV抑制量的權利要求1的式I化合物或其可藥用鹽。
21.一種治療或預防HIV感染的方法，包括對病人施用HIV抑制量的權利要求19的藥物組合物或其可藥用鹽。
22.一種治療或預防HIV感染的方法，包括將權利要求1的式I化合物以及抗反轉錄病毒藥物組合給藥。
23.一種預防從母親至嬰兒的圍產期HIV-1傳染的方法，其包括對分娩前母親施用權利要求1的式I化合物。
24.權利要求1的式I化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預防HIV感染的藥物中的用途。
25.權利要求1的式I化合物或其可藥用鹽在制備用于治療或預防分娩前從母親至嬰兒的圍產期HIV-1傳染的藥物中的用途。
全文摘要
本發明公開了可用作HIV反轉錄酶抑制劑的式I化合物或其鹽或前藥其中R
文檔編號A61P43/00GK1642956SQ03806463
公開日2005年7月20日 申請日期2003年3月24日 優先權日2002年3月27日
發明者杰弗里·奧米拉, 布魯諾·西莫尼厄, 克里斯琴·約基姆, 羅伯特·德齊爾, 威廉·W·奧吉爾維 申請人:貝林格爾·英格海姆國際有限公司