用作丙型肝炎病毒蛋白酶抑制劑的藥物組合物的制作方法

專利名稱：用作丙型肝炎病毒蛋白酶抑制劑的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明大體上涉及具有改進(jìn)的生物利用率的丙型肝炎病毒蛋白酶抑制劑的藥物組合物，以及利用這些組合物抑制丙型肝炎病毒(HCV)復(fù)制及治療HCV感染的方法。
背景技術(shù)：
近年來發(fā)現(xiàn)，某些大環(huán)化合物為丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶有效的且特效的抑制劑。具體地講，已發(fā)現(xiàn)下式I的化合物是拮抗HCV的NS3絲氨酸蛋白酶的特別有效的抑制劑類型 其中-----表示在13及14位置間形成雙鍵的任選鍵；R1是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、羥基、或N(R5)2，其中每個R5獨立地為H、C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R2是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、C2-7烷氧基烷基、C6或C10芳基或Het，其中Het是五-、六-或七-員飽和或不飽和的雜環(huán)，含有一至四個環(huán)雜原子選自氮、氧及硫；該環(huán)烷基、芳基或Het任選被R6所取代，其中R6是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、NO2、N(R7)2、NH-C(O)-R7；或NH-C(O)-NH-R7，其中每個R7獨立地為H、C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；或R6是NH-C(O)-OR8，其中R8是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R3是R9O-或R9NH-，其中R9是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R4是H或在第8、9、10、11、12、13或14位上任何可用碳原子上的一至三個取代基，所述取代基獨立地選自C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氧代、硫代或C1-6硫烷基；見Tsanrtizos等人，于2001年1月16日提交的美國申請案系列No.09/760,946，以及WO 00/59929(都為Boehringer Ingelheim(Canada)，Ltd.)，兩者在此以全文引入作為參考，且在下文中共同稱為“Tsantrizos et al”。
式I化合物的結(jié)構(gòu)特征是存在有C-末端羧酸官能度，已顯示出其不僅引起抑制劑系列所觀察到的有效性及可逆性，而且也使得與其它絲氨酸/半胱氨酸蛋白酶相比對HCV蛋白具有極佳的特異性。如式I化合物的HCV絲氨酸蛋白酶抑制劑被預(yù)料是通過新的機制，即阻斷由病毒-編碼的HCV復(fù)制的基本功能，作用的抗病毒劑。通過此機制作用的藥物可抑止所有HCV基因型的病毒復(fù)制，因此對有慢性C型肝炎的患者可提供實質(zhì)的益處。
蛋白酶抑制劑間共同的問題是這些化合物是親脂性的，且有低的水溶性。由于較差的水溶性，因此含有這些抑制劑的傳統(tǒng)固體及液體藥物制劑，可能無法以令人滿意的方式為患者所吸收。當(dāng)經(jīng)口給藥時，可影響藥物生物利用率的各種因素中(包括水溶性、通過胃腸道的藥物吸收、劑量濃度及首次通過過效應(yīng)(first pass effect))，?？砂l(fā)現(xiàn)水溶性是其中最重要的因素。水溶性較差的化合物在消化道中常呈現(xiàn)不規(guī)律或不完全吸收，且因此產(chǎn)生不及所需的的反應(yīng)。
式I化合物是兩性離子，且可與強酸及堿形成鹽。而目前對可本質(zhì)上改進(jìn)水溶性的呈固體形式的此化合物鹽類的鑒定尚未成功。已發(fā)現(xiàn)這些化合物的各種鹽類極具吸濕性，因而降低了化合物的穩(wěn)定性。此外，這些化合物鹽類的制劑通常在胃腸道中有沉淀母(parent)游離酸的傾向。式I的代表性化合物當(dāng)以水性懸液形式給藥于動物時，顯示出較差的生物利用率，可推知含有這些抑制劑的傳統(tǒng)制劑無法以令人滿意的方式被吸收。因此，在本領(lǐng)域中需要具有改進(jìn)的生物利用率的式I化合物的藥學(xué)組合物。
以前已經(jīng)報道了將某些親脂性大環(huán)化合物配制成藥物制劑的方法。如，Cavanak，U.S.Pat.No.4,388,307中公開了商業(yè)上可得的環(huán)孢霉素的乳化制劑的制備，Hauer等人的U.S.Pat.No.5,342,625及Meizner等人的WO 93/20833公開了環(huán)孢霉素微乳劑及微乳劑預(yù)濃縮物的制備。Komiya等人的U.S.Pat.Nos.5,504,068，進(jìn)一步公開了環(huán)孢霉素的加強的局部制劑的制備。
親脂性化合物的“自乳化”制劑的實例包括Lipari等人的WO 96/36316，其中公開了一種自乳化的預(yù)濃縮物，其包括親脂性化合物、d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS)、及親脂相。Gao等人的U.S.Pat.Nos.6,121,313公開了吡喃酮蛋白酶抑制劑的自乳化制劑，其中包括吡喃酮化合物、單及二甘油酯的混合物、一種或多種溶劑及一種或多種表面活性劑；以及Gao等人的U.S.Pat.No.6,231,887 B1公開了吡喃酮蛋白酶抑制劑的自乳化制劑，其中包括吡喃酮化合物、胺、一種或多種溶劑及一種或多種表面活性劑。
Yu等人的U.S.Pat.Nos.5,360,615及5,071,643中公開了通過部分離子化作用來加強酸性、堿性或兩性化合物的溶出度的溶劑系統(tǒng)，其中包括聚乙二醇、氫氧化物、或氫離子及水的混合物。Morton等人的U.S.Pat.No.5,376,688公開了酸性、堿性或兩性藥劑的溶液，其包括藥劑、離子種類及溶劑系統(tǒng)。Bhagwat等人的U.S.Pat.Nos.6,056,977教導(dǎo)了為使磺胺脲類持續(xù)釋出，多醣為基礎(chǔ)的基質(zhì)的用法。盡管有這些進(jìn)展，但在本領(lǐng)域中繼續(xù)需要具有改進(jìn)的生物利用率的式I兩性離子化合物的口服藥物組合物。

發(fā)明內(nèi)容
與傳統(tǒng)的藥物制劑相比，本發(fā)明通過提供具有改進(jìn)的生物利用率的式I化合物的藥物組合物來克服上述問題。具體地講，已證明本發(fā)明的具體組合物與傳統(tǒng)藥物制劑相比具有極佳的體外溶出曲線，并且在生物利用率方面已獲得了顯著的增加。
本發(fā)明藥物組合物包括各種形式的組合物，但均含有式I化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受胺類。本發(fā)明組合物可根據(jù)所預(yù)期的組合物的類型而定，包括一種或多種額外的組分，如藥學(xué)上可接受溶劑、表面活性劑、油類、聚合物等，以下將有詳述。本發(fā)明也涉及這些組合物的制備方法，下文將描述。
在一般的實施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包括(a)式(I)化合物或其互變異構(gòu)體；
其中-----表示在13及14位置間形成雙鍵的任選鍵；R1是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、羥基或N(R5)2，其中每個R5獨立地為H、C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R2是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、C2-7烷氧基烷基、C6或C10芳基或Het，其中Het是五-、六-或七-員飽和或不飽和的雜環(huán)，其含有一至四個選自氮、氧及硫的環(huán)雜原子；所述環(huán)烷基、芳基或Het可任選被R6所取代，其中R6是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、NO2、N(R7)2、NH-C(O)-R7；或NH-C(O)-NH-R7，其中每個R7獨立地為H、C1-6烷基、或C3-6環(huán)烷基；或R6是NH-C(O)-OR8，其中R8是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R3是R9O-或R9NH-，其中R9是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R4是H或在第8、9、10、11、12、13或14位置的任一可用碳原子上的一或三個取代基，所述取代基獨立地選自C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氧代、硫代或C1-6硫烷基；(b)約0.1-10重量％的藥學(xué)上可接受胺或藥學(xué)上可接受胺的混合物；且(c)一種或多種藥學(xué)上可接受的油類、載體或親水性溶劑；并且當(dāng)(c)是一種或多種藥學(xué)上可接受的油類時，該藥物組合物可進(jìn)一步包括(d)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的親水性溶劑；(e)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的聚合物；及(f)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的表面活性劑；
并且當(dāng)(c)是一種或多種藥學(xué)上可接受載體時，該藥物組合物可進(jìn)一步包括(d)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的表面活性劑。
本發(fā)明另一重要方面是涉及抑制丙型肝炎病毒復(fù)制的方法，所述方法是將病毒曝露于丙型肝炎病毒NS3蛋白酶-抑制量的本發(fā)明藥物組合物中。
本發(fā)明另一重要方面是涉及治療哺乳動物丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包括將治療有效量的本發(fā)明藥物組合物給藥于需要該治療的哺乳動物。


圖1示出根據(jù)本發(fā)明含有氨基丁三醇的三種制劑(SEDDS及固體分散物)，以及無氨基丁三醇的比較制劑(1％ CMC/0.2％ Tween 80)的體外溶出曲線。
圖2示出根據(jù)本發(fā)明含有氨基丁三醇的濕粒制劑，以及不含有氨基丁三醇的比較制劑的體外溶出曲線。
具體實施例方式
術(shù)語及慣用語的定義文中未特別定義的術(shù)語，應(yīng)是本領(lǐng)域技術(shù)人員基于公開及上下文內(nèi)容所給予的定義。然而，如說明書中所用的，除非相反地指出，以下術(shù)語具有所示含義，并附注慣用語。
A.化學(xué)及藥學(xué)命名、術(shù)語及慣例在以下定義的基團(tuán)、自由基或部分中，碳原子數(shù)目常在基團(tuán)前詳細(xì)說明，如C1-6烷基表示具有1至6個碳原子的烷基或自由基。通常，對于含有二個或多個亞基團(tuán)的基團(tuán)，最后命名的基團(tuán)是基團(tuán)的附著點，如“硫烷基”表示式HS-Alk-的單價基團(tuán)。除非下文另外指出，術(shù)語的常規(guī)定義可控制并且在所有化學(xué)式及基團(tuán)中可推測并獲得傳統(tǒng)的穩(wěn)定原子的價數(shù)。
如文中所用的術(shù)語“C1-6烷基”或單獨的或與另外的取代基組合，表示非環(huán)狀、直鏈或支鏈的含有1至6個碳原子的烷基取代基，并且包括如甲基、乙基、丙基、丁基、己基、1-甲基乙基、1-甲基丙基、2-甲基丙基及1，1-二甲基乙基。
如文中所用的術(shù)語“C3-6環(huán)烷基”，或單獨的或與另外的取代基組合，表示含有3至6個碳原子的環(huán)烷基取代基，并且包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基及環(huán)己基。
如文中所用的術(shù)語“C1-6烷氧基”，或單獨的或與另外的取代基組合，表示取代基C1-6烷基-O-，其中烷基如上文所定義，含有多達(dá)6個碳原子。烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、1-甲基乙氧基、丁氧基及1，1-二甲基乙氧基。在后的取代基常稱為叔丁氧基。
如文中所用的術(shù)語“C3-6環(huán)烷氧基”，或單獨的或與另外的取代基組合，表示含有3至6個碳原子的取代基C3-6環(huán)烷基-O-。
如文中所用的術(shù)語“鹵素”表示選自溴、氯、氟或碘的鹵素取代基。
如文中所用的術(shù)語“鹵烷基”，或單獨的或與另外的取代基組合，表示非環(huán)狀、直鏈或支鏈烷基取代基，其中具有一個或多個氫替代鹵素，鹵素選自溴、氯、氟或碘。
如文中所用的術(shù)語“硫烷基”，或單獨或與另外的取代基組合，表示含有硫羥基(HS)為取代基的非環(huán)狀、直鏈或支鏈烷基取代基。硫烷基的實例是硫丙基，如HS-CH2CH2CH2-為硫丙基的一個實例。
如文中所用的術(shù)語“C6或C10芳基”，或單獨的或與另外的取代基組合，表示含有6個碳原子的芳族單環(huán)系，或含有10個碳原子的芳族二環(huán)系。例如，芳基包括苯基或萘基-環(huán)系。
如文中所用的術(shù)語“Het”，或單獨的或與另外的取代基組合，表示單價取代基，其是通過從五-、六-或七-員飽和或不飽和(包括芳族)雜環(huán)中移去一個氫衍生得到的，此雜環(huán)含有碳原子及選自氮、氧及硫的一至四個環(huán)雜原子。適合的雜環(huán)實例包括四氫呋喃、噻吩、二氮雜、異噁唑、哌啶、二噁烷、嗎啉、嘧啶或 而術(shù)語“Het”也包括稠合至一個或多個其它環(huán)上的如上所定義的雜環(huán)，其可為雜環(huán)或其它任何環(huán)。此實例之一包括噻唑并[4，5-b]-吡啶。雖然通常包括在“Het”術(shù)語的范圍內(nèi)，但如文中所用的術(shù)語“雜芳基”精確地定義為不飽和雜環(huán)，其中雙鍵形成芳族系。雜芳族系適合的實例包括喹啉、吲哚、吡啶、
或 術(shù)語“氧代”表示以取代基形式連接的雙鍵基(＝O)。
術(shù)語“硫代”表示以取代基形式連接的雙鍵基(＝S)。
術(shù)語“本發(fā)明化合物”及等效的表達(dá)，意思是指包含如文中所述的式(I)化合物，包括其互變異構(gòu)體及同分異構(gòu)體，其中該內(nèi)容是文中許可的。通常，應(yīng)當(dāng)理解即使當(dāng)不穩(wěn)定化合物被視為是化合物化學(xué)式所確實包括的，本發(fā)明化合物及表示本發(fā)明化合物的化學(xué)式僅包括其穩(wěn)定化合物，且排除不穩(wěn)定化合物。
術(shù)語“穩(wěn)定化合物”表示化合物足夠堅固可自反應(yīng)混合物中分離至有用的純化程度而仍存活，并配制成有效的藥物組合物。例如，具有“懸空化合價(dangling valency)”的化合物，或是“碳負(fù)離子”并不是本發(fā)明所指的化合物。
術(shù)語“本發(fā)明藥物組合物”及等效的表達(dá)意思是指包括下文所述的各種形式的藥物組合物，除非由文中清楚得知，本發(fā)明范圍內(nèi)的特定形式的藥物組合物作為參考。
對于文中所用的物質(zhì)，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”表示在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適合與人類及低等動物的組織接觸使用，并且無不當(dāng)?shù)亩拘?、刺激性、過敏反應(yīng)等，與合理的益處/危險性比例相稱，并且當(dāng)物質(zhì)在藥物組合物中使用時，在所需的用途方面是有效的。
術(shù)語“半固體”表示物質(zhì)既非固體(彈性行為)也非液體(粘稠行為)，且具有粘性及彈性兩種特性。半固體物質(zhì)的實例包括凝膠、軟膏、乳劑及高粘性液體。
術(shù)語“約”表示在特定的數(shù)值或范圍的20％，優(yōu)選10％以內(nèi)，更優(yōu)選5％以內(nèi)。例如“約10％”表示8％-12％，優(yōu)選9％-11％，且更優(yōu)選9.5％至10.5％。當(dāng)術(shù)語“約”加上數(shù)值范圍時，如“約X至Y％”，術(shù)語“約”用以修飾所示范圍的較低(X)及較高(Y)值。例如，“約0.1至10％”相當(dāng)于“約0.1％至約10％”。
在組合物中組分量所示的所有百分率，均為以全部組合物而言的按重量計的百分率。
B.異構(gòu)體術(shù)語及慣例術(shù)語“異構(gòu)體”或“立體異構(gòu)體”表示具有相同原子數(shù)目及種類的化合物，且因此有相同的分子量，但原子在空間的排列及構(gòu)型不同。此術(shù)語包括光學(xué)異構(gòu)體及幾何異構(gòu)體。
術(shù)語“光學(xué)異構(gòu)體”表示一種穩(wěn)定的異構(gòu)體，其有至少一個手性原子或有限的旋轉(zhuǎn)因而生成垂直的不對稱平面(如某些聯(lián)苯、丙二烯及螺化合物)，并且可旋轉(zhuǎn)平面偏振光。因為在式I化合物中存在有不對稱中心及其它化學(xué)結(jié)構(gòu)，其可生成旋光異構(gòu)現(xiàn)象，因此本發(fā)明包括旋光異構(gòu)體及其混合物。式I化合物包括不對稱碳原子，且因此可以單一立體異構(gòu)體、外消旋物、及對映異構(gòu)物及非對映異構(gòu)體的混合物形式存在。典型地，此化合物可制成外消旋混合物。然而，若需要，此化合物可以純的旋光異構(gòu)體形式制備或分離，即以單獨的對映異構(gòu)物或非對映異構(gòu)體、或富含立體異構(gòu)體的混合物?；衔锏膯为毩Ⅲw異構(gòu)體的制備是由含有所需的手性中心的旋光性起始物合成的，或通過制備對映異構(gòu)物產(chǎn)物的混合物隨后分離，如轉(zhuǎn)化成非對映異構(gòu)體的混合物隨后分離或重結(jié)晶，色譜技術(shù)，使用手性拆分劑，或在手性色譜柱上直接分離對映異構(gòu)物。特殊立體化學(xué)的起始化合物或者可以從市場上購得，或者可由下述方法制備并通過本領(lǐng)域已知的技術(shù)進(jìn)行拆分。
術(shù)語“對映異構(gòu)物”表示一對旋光異構(gòu)體，其互相為不能重疊的鏡像。
術(shù)語“非對映異構(gòu)體”表示旋光異構(gòu)體，其互相為非鏡像。
術(shù)語“外消旋混合物”表示含等量的單獨對映異構(gòu)物的混合物。
術(shù)語“非外消旋混合物”表示含不等量的單獨對映異構(gòu)物或立體異構(gòu)體的混合物。
術(shù)語“幾何異構(gòu)體”表示在雙鍵上有限制自由旋轉(zhuǎn)而生成的穩(wěn)定異構(gòu)體(如順-2-丁烯及反-2-丁烯)或在環(huán)狀結(jié)構(gòu)上(如順-1，3-二氯環(huán)丁烷及反-1，3-二氯環(huán)丁烷)。因為碳-碳雙鍵(烯鍵)、環(huán)狀結(jié)構(gòu)等可存在于式I化合物中，本發(fā)明包括各種穩(wěn)定幾何異構(gòu)體及由于這些雙鍵周圍和在這些環(huán)狀結(jié)構(gòu)中的取代基排列所致的其混合物中的每一個。取代基及異構(gòu)體使用順/反傳統(tǒng)命名。
某些式I化合物可以多于一種的互變形式存在。如上述，式I化合物包括所有的這種互變異構(gòu)體。
通常，包括化學(xué)結(jié)構(gòu)或化合物所有的互變異構(gòu)形式及異構(gòu)體形式及其混合物，例如單獨的幾何異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體或異構(gòu)體的外消旋或非外消旋的混合物，除非在化合物命名或結(jié)構(gòu)中特別指出特殊的立體化學(xué)或異構(gòu)體形式。
C.藥物的給予及治療術(shù)語及慣例術(shù)語“病人”包括人類及非人類哺乳動物。
術(shù)語“治療有效量”表示當(dāng)給藥于有所需要的患者時，根據(jù)本發(fā)明化合物的量足以有效地治療丙型肝炎病毒感染。此治療有效量可通過本領(lǐng)域一般技術(shù)人員考慮到他們本身的知識、現(xiàn)有技術(shù)及此公開而常規(guī)地確定。
術(shù)語“治療”或“處置”表示在病人中對丙型肝炎病毒感染進(jìn)行治療，且包括(i)預(yù)防病人發(fā)生丙型肝炎病毒感染，特別是當(dāng)此病人容易患此疾病狀態(tài)，但尚未被診斷出有此疾病時；(ii)抑制或緩解丙型肝炎病毒感染，即抑止或減緩其發(fā)展；或(iii)解除丙型肝炎病毒感染，即使疾病狀態(tài)復(fù)原或治愈。
本發(fā)明的優(yōu)選實施方案I.共溶劑系統(tǒng)在文中我們稱之為“共溶劑”系統(tǒng)的第一實施方案是指包括下列的藥物組合物(a)式(I)化合物或其互變異構(gòu)體；
其中-----表示在13及14位置間形成雙鍵的任選鍵；R1是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、羥基、或N(R5)2，其中每個R5獨立地為H、C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R2是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、C2-7烷氧基烷基、C6或C10芳基或Het，其中Het是五-、六-或七-員飽和或不飽和的雜環(huán)，其含有一至四個選自氮、氧及硫的環(huán)雜原子；所述環(huán)烷基、芳基或Het任選被R6所取代，其中R6是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、NO2、N(R7)2、NH-C(O)-R7；或NH-C(O)-NH-R7，其中每個R7獨立地為H、C1-6烷基、或C3-6環(huán)烷基；或R6是NH-C(O)-OR8，其中R8是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R3是R9O-或R9NH-，其中R9是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R4是H或在第8、9、10、11、12、13或14位上任何可用碳原子上的一至三個取代基，所述取代基獨立地選自C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氧代、硫代或C1-6硫烷基；(b)約0.1-10重量％的藥學(xué)上可接受胺或藥學(xué)上可接受胺的混合物；及(c)一種或多種藥學(xué)上可接受的親水性溶劑。
可存在于共溶劑系統(tǒng)組合物中的活性組分(式(I)化合物)的量可以大范圍的變化或根據(jù)所需的給藥途徑、所使用的具體活性組分的有效性、丙型肝炎病毒感染的嚴(yán)重度及所需的濃度而大范圍的調(diào)整。在具體的實施方案中，式(I)化合物在共溶劑系統(tǒng)組合物中的含量為約1％-50重量％，優(yōu)選為約5％-30重量％，更優(yōu)選為約5％-15重量％。
可用于組合物的藥學(xué)上可接受胺包括如C1-6烷基胺、二-(C1-6烷基)-胺或三-(C1-6烷基)-胺，其中其一個或多個烷基可任選被一個或多個羥基所取代、或C1-6亞烷基二胺、堿性氨基酸或膽堿氫氧化物、或其混合物。具體的胺包括乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、三(羥甲基)氨基甲烷、乙二胺或二甲基氨基乙醇、或其混合物。優(yōu)選的胺是三(羥甲基)氨基甲烷(也稱為“Tris”或“氨基丁三醇(Tromethamine)”)。胺的含量在約0.1-10重量％，更優(yōu)選為約0.5％-7重量％；甚至更優(yōu)選為約0.5％-5重量％。
可用于組合物中的藥學(xué)上可接受親水性溶劑包括如丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇(如PEG 400)、甘油、乙醇、二甲基異山梨醇酯、糖糠醛(glycofurol)、碳酸丙烯酯(propylene carbonate)、二甲基乙酰胺、水、或其混合物，優(yōu)選是丙二醇、聚乙二醇、乙醇、水、或其混合物。優(yōu)選溶劑是丙二醇、乙醇及水的混合物。組合物中的溶劑含量可大范圍的變化，并且根據(jù)組合物中其它組分的形式及含量，一般技術(shù)人員可以很容易地確定具體組合物中溶劑含量的最適宜的量。然而，通常，溶劑含量為約40％-99重量％，優(yōu)選為約80％-99重量％，更優(yōu)選為約80％-90重量％。
共溶劑系統(tǒng)的具體實施方案是指包括下列的藥物組合物(a)約5％-30重量％的式(I)化合物；(b)約0.5％-7重量％的藥學(xué)上可接受胺；及(c)約40％-99重量％的藥學(xué)上可接受親水性溶劑。
共溶劑系統(tǒng)的另一個具體實施方案是指包括下列的藥物組合物(a)約5％-15重量％的式(I)化合物；(b)約0.5％-5重量％的藥學(xué)上可接受胺；及(c)約80％-99重量％的藥學(xué)上可接受親水性溶劑。
共溶劑系統(tǒng)的再一個具體實施方案是指包括下列的藥物組合物(a)約5％-15重量％的式(I)化合物；(b)約0.5％-5重量％的三(羥甲基)氨基甲烷；及(c)約80％-90重量％的丙二醇、乙醇及水的混合物。
共溶劑系統(tǒng)組合物可以按照常規(guī)方法制備得到，如將胺溶解在藥學(xué)上可接受溶劑中，將式(I)化合物加入到所生成的溶液中，然后混合所生成的溶液直到所有的或基本上所有的式I化合物溶解于溶液中。這種制備組合物的方法構(gòu)成了本發(fā)明的另一方面。然后將生成的溶液配制成所需的劑型，如局部、腸胃外及特別是口服劑型。
II.脂質(zhì)-基礎(chǔ)的系統(tǒng)在文中我們稱之為“脂質(zhì)-基礎(chǔ)的系統(tǒng)”的第二實施方案是指包括下列的藥物組合物(a)式(I)化合物或其互變異構(gòu)體；
其中-----表示在第13及14位置間形成雙鍵的任選鍵；R1是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、羥基或N(R5)2，其中每個R5獨立地為H、C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R2是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、C2-7烷氧基烷基、C6或C10芳基或Het,其中het是五一、六一或七一員飽和或不飽和的雜環(huán)，其含有一至四個選自氮、氧及硫的環(huán)雜原子；所述環(huán)烷基、芳基或Het任選被R6所取代，其中R6是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、NO2、N(R7)2、NH-C(O)-R7；或NH-C(O)-NH-R7，其中每個R7獨立地為H、C1-6烷基、或C3-6環(huán)烷基；或R6是NH-C(O)-OR8，其中R8是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R3是R9O-或R9NH-，其中R9是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R4是H或在第8、9、10、11、12、13或14位上任何可用碳原子上的一至三個取代基，所述取代基獨立地選自C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氧代、硫代或C1-6硫烷基；(b)約0.1-10重量％的藥學(xué)上可接受胺或藥學(xué)上可接受胺的混合物；(c)一種或多種藥學(xué)上可接受的油類；(d)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的親水性溶劑；(e)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的聚合物；及(f)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的表面活性劑。
可在脂質(zhì)-基礎(chǔ)系統(tǒng)組合物中存在的活性組分(式(I)化合物)的含量可以大范圍的變化或根據(jù)所需的給藥途徑、所使用的具體活性組分的有效性、丙型肝炎病毒感染的嚴(yán)重度及所需的濃度而大范圍的調(diào)整。在具體的實施方案中，式(I)化合物在以脂質(zhì)為基礎(chǔ)系統(tǒng)中的含量為約1％-50重量％，優(yōu)選為約5％-30重量％，更優(yōu)選為約10％-20重量％。
可用于此組合物中的藥學(xué)上可接受胺包括如上所述“共溶劑”系統(tǒng)中所用的相同胺類。胺含量約0.1-10重量％，更優(yōu)選為約0.1％-7重量％，甚至更優(yōu)選為約0.1％-5重量％。
可用于組合物中的藥學(xué)上可接受油類，包括大范圍的水不混溶的物質(zhì)，如中或長鍵的單、二或三甘油酯，植物油如大豆油，鱷梨油，角鯊烯油(squalene oil)，芝麻油，橄欖油，低芥酸菜子油，玉米油，菜籽油，紅花油和向日葵油，魚油，有香味的油，水不溶性維生素，脂肪酸，及其混合物。更優(yōu)選的油類包括辛脂肪酸單、二或三甘油酯；癸脂肪酸單、二或三甘油酯；油酸，及其混合物。某些優(yōu)選的油類包括那些可以下列商品名購得的CapmulMCM，Capmul MCM C-8，Capmul MCM C-10，Capmul PG-8，Miglyol 810，Captex 355，Miglyol 812，Captex 200，Myvacet，Myverol 18-92，Maisine及Arlacel 186。組合物中油含量可大范圍的變化，并且根據(jù)組合物中其它組分的形式及含量，一般技術(shù)人員可以很容易地確定具體組合物中油含量的最適宜的量。然而，通常藥學(xué)上可接受油的含量為約1％-99重量％，更優(yōu)選為約20％-70重量％。
在某些狀況下，如就增加溶出度，改進(jìn)分散度目的而言，組合物中任選使用藥學(xué)上可接受的親水性溶劑，其包括如丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇(如PEG 400)、甘油、乙醇、異山梨酸二甲酯、糖糠醛、碳酸丙烯酯、二甲基乙酰胺、水、或其混合物；優(yōu)選是丙二醇、聚乙二醇、乙醇、水、或其混合物。優(yōu)選的溶劑是丙二醇、乙醇及水的混合物。組合物中溶劑含量可大范圍的變化，并且根據(jù)組合物中其它組分的形式及含量，一般技術(shù)人員可以很容易地確定具體組合物中溶劑含量的最適宜的量。然而，通常溶劑含量可高達(dá)約70重量％，優(yōu)選為約10％-30重量％。
為了調(diào)整制劑的粘度，或改進(jìn)穩(wěn)定性，可在組合物中任選使用藥學(xué)上可接受的聚合物，其包括如聚乙二醇(如PEG 1000，PEG 1500，PEG 3350，PEG6000及PEG 8000)、聚乙烯吡咯烷酮(如Kollidon 12 PF，Kollidon 17 PF，Kollidon 25 PF，Kollidon 30 PF，Kollidon 90 PF等)、聚乙烯醇、纖維素衍生物(如羥丙基甲基纖維素(HPMC)，羥丙基纖維素(HPC))、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、糖類(如乳糖)、多元醇、及其混合物。當(dāng)用于組合物時，藥學(xué)上可接受的聚合物含量優(yōu)選可高達(dá)約50重量％，優(yōu)選約1-20重量％。
為促進(jìn)自乳化作用，組合物中任選可加入藥學(xué)上可接受的表面活性劑，其包括維生素衍生物，如維生素E TPGS(d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)、聚氧化蓖麻油(如Cremophor EL)、聚氧化氫化蓖麻油、聚山梨醇酯(如Tween80)、聚乙二醇6-油酸酯(peglicol 6-oleate)、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚乙二醇甘油酯(polyglycolyzed glycerides)(如Gelucire 44/14)或泊洛沙姆(如PluronicF68)、硫酸月桂酯鈉及其混合物。優(yōu)選的表面活性劑包括維生素E TPGS，聚氧化40氫化蓖麻油或聚氧化35蓖麻油，及其混合物。
當(dāng)用于組合物中時，表面活性劑含量可高達(dá)約70重量％，優(yōu)選為約20％-50重量％。本發(fā)明此形式的以脂質(zhì)為基礎(chǔ)的系統(tǒng)，可進(jìn)一步加入表面活性劑，在此常稱為“自-乳化的藥物傳遞系統(tǒng)”或“SEDDS”。
根據(jù)本發(fā)明，SEDDS組合物的具體實施方案指含有下列的藥物組合物(a)約5％-30重量％的式(I)化合物；(b)約0.1％-7重量％的藥學(xué)上可接受胺；(c)約1％-99重量％的藥學(xué)上可接受油類；(d)高達(dá)約70重量％的藥學(xué)上可接受的親水性溶劑；(e)任選高達(dá)約50重量％的藥學(xué)上可接受的聚合物；及(f)高達(dá)約70重量％的藥學(xué)上可接受的表面活性劑。
根據(jù)本發(fā)明，SEDDS組合物的另一個具體實施方案指含有下列的藥物組合物(a)約10％-20重量％的式(I)化合物；(b)約0.1％-5重量％的藥學(xué)上可接受胺；(c)約20％-70重量％的藥學(xué)上可接受油類；(d)約10％-30重量％的藥學(xué)上可接受的親水性溶劑；(e)任選約1％-20重量％的藥學(xué)上可接受的聚合物；及(f)約20％-50重量％的藥學(xué)上可接受的表面活性劑。
根據(jù)本發(fā)明，SEDDS組合物的再一個具體實施方案指含有下列的藥物組合物(a)約10％-20重量％的式(I)化合物；(b)約0.1％-5重量％的三(羥甲基)氨基甲烷；
(c)約20％-70重量％的辛脂肪酸單或二甘油酯或癸脂肪酸單或二甘油酯，或其混合物；(d)約10％-30重量％的丙二醇、乙醇及任意量的水的混合物；(e)任選約1％-20重量％的聚乙二醇或聚乙烯吡咯烷酮；及(f)約20％-50重量％的d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯或聚氧化35蓖麻油(如Cremophor EL)。
以脂質(zhì)為基礎(chǔ)的系統(tǒng)的組合物可以常規(guī)方式制備，如所利用的方法包括將液體組分，如藥學(xué)上可接受的油類、及任何的表面活性劑及溶劑混合在一起；將藥學(xué)上可接受的胺及聚合物溶解在所生成的混合物中；若必要時任選加熱所得的混合物，以充分熔化混合物中一種或多種的組分；將式(I)化合物加入到所生成的混合物中，再進(jìn)一步混合直到所有的或基本上所有的式I化合物溶解為止。制備該組合物的方法構(gòu)成了本發(fā)明的另一方面。然后通過已知的制備技術(shù)將生成的溶液任選配制成所需的劑型，如膠囊劑，包括硬殼或軟明膠膠囊(如硬或軟膠囊)。組合物也可呈液體溶液或半固體形式，可供口服、腸胃外、經(jīng)直腸或局部給藥。可供使用的軟膠囊的實例包括在EP649651 B1及US Pat.5,985,321中所公開的那些。
III.固體劑型本發(fā)明也包括本發(fā)明組合物的各種固體劑型，如固體分散物及顆粒劑。
A.固體分散物本發(fā)明組合物的固體分散物形式包括(a)式(I)化合物或其互變異構(gòu)體；
其中-----表示在13及14位置間形成雙鍵的任選鍵；R1是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、羥基、或N(R5)2，其中每個R5獨立地為H、C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R2是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、C2-7烷氧基烷基、C6或C10芳基或Het，其中Het是五-、六-或七-員飽和或不飽和的雜環(huán)，其含有一至四個選自氮、氧及硫的環(huán)雜原子；所述環(huán)烷基、芳基或Het任選被R6所取代，其中R6是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、NO2、N(R7)2、NH-C(O)-R7；或NH-C(O)-NH-R7，其中每個R7獨立地為H、C1-6烷基、或C3-6環(huán)烷基；或R6是NH-C(O)-OR8，其中R8是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R3是R9O-或R9NH-，其中R9是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R4是H或在第8、9、10、11、12、13或14位上任何可用碳原子上的一至三個取代基，所述取代基獨立地選自C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氧代、硫代或C1-6硫烷基；(b)約0.1-10重量％的藥學(xué)上可接受胺或藥學(xué)上可接受胺的混合物；(c)一種或多種藥學(xué)上可接受的載體；及(d)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的表面活性劑。
固體分散物組合物中的活性組分(式(I)化合物)的量可以大范圍的變化或根據(jù)所需的給藥途徑、所使用的具體活性組分的有效性、丙型肝炎病毒感染的嚴(yán)重度及所需的濃度而大范圍的調(diào)整。在一個具體的實施方案中，式(I)化合物在固體分散物中的含量為約1％-50重量％，優(yōu)選為約5％-30重量％，更優(yōu)選為約10％-20重量％。
可用于此組合物中的藥學(xué)上可接受胺包括如上所述“共溶劑”系統(tǒng)中相同的胺。胺在其中的含量為約0.1-10重量％，更優(yōu)選為約0.1％-7重量％，甚至更優(yōu)選為約0.1％-5重量％。
可用于組合物中的藥學(xué)上可接受載體包括任何可將式(I)活性組分以分散狀況有效地保留在最終固體劑型中的物質(zhì)。適合的藥學(xué)上可接受載體包括如藥學(xué)上可接受的聚合物及藥學(xué)上可接受的脲類。優(yōu)選的載體包括聚乙二醇(如PEG 1000，PEG 1500，PEG 3350，PEG 4600，PEG 6000及PEG 8000)，聚乙烯吡咯烷酮(如Kollidon 12 PF，Kollidon 17 PF，Kollidon 25 PF，Kollidon 30 PF，Kollidon 90 PF等)，聚乙烯醇類，纖維素衍生物(如羥丙基甲基纖維素(HPMC))，羥丙基纖維素(HPC)，聚丙烯酸酯，聚甲基丙烯酸酯，聚乙二醇化甘油酯(polyglycolyzed glycerides)，脲類，糖類(如乳糖)，多元醇及其混合物?？捎糜诰唧w組合物的最佳載體可依各種因素而定，包括組合物中其它組分，及用于制備組合物的特定方法，如下述的共-熔化或共-沉淀作用。例如，當(dāng)利用共熔化過程制備組合物時，希望使用在適合的實驗室條件下如在低于約100℃，優(yōu)選低于約80℃下可熔化的載體。當(dāng)利用共-沉淀作用制備組合物時，希望使用可溶于適合的親水性溶劑的載體以及其它的組分，使得可發(fā)生共沉淀作用。
藥學(xué)上可接受載體的量可大范圍的變化，并且根據(jù)組合物中其它組分及所用的制備方法，一般制藥技術(shù)人員可以很容易地確定具體組合物的適宜量。然而，通常藥學(xué)上可接受載體在固體分散物組合物中的量，可高達(dá)約1-99重量％，優(yōu)選約60％-80重量％。
為了達(dá)到改進(jìn)的分散度及溶出性能，組合物中可使用藥學(xué)上可接受的表面活性劑，其包括例如維生素衍生物，如維生素E TPGS(d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)、聚氧化蓖麻油(如Cremophor EL)、聚氧化氫化蓖麻油、聚山梨醇酯(如Tween 80)、聚乙二醇6-油酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚乙二醇化甘油酯，如月桂酰聚乙二醇甘油酯(lauroyl macrogoglycerides)(Gelucire44/14)、泊洛沙姆如聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物(Pluronic F68)、硫酸月桂酯鈉(SLS)及其混合物。優(yōu)選的表面活性劑包括維生素E TPGS，PluronicF68，或硫酸月桂酯鈉，及其混合物。當(dāng)用于組合物時，表面活性劑含量優(yōu)選高達(dá)約50重量％，優(yōu)選為約1％-20重量％。
固體分散物組合物的具體實施方案是指包括下列的藥物組合物(a)約5％-30重量％的式(I)化合物；(b)約0.1％-7重量％的藥學(xué)上可接受胺；(c)約1％-99重量％的藥學(xué)上可接受載體；及(d)高達(dá)約50重量％的藥學(xué)上可接受的表面活性劑。
固體分散物組合物的另一個具體實施方案是指包括下列的藥物組合物(a)約10％-20重量％的式(I)化合物；(b)約0.1％-5重量％的藥學(xué)上可接受胺；(c)約60％-80重量％的藥學(xué)上可接受載體；及
(d)約1％-20重量％的藥學(xué)上可接受的表面活性劑。
固體分散物組合物的再一個具體實施方案是指包括下列的藥物組合物(a)約10％-20重量％的式(I)化合物；(b)約0.1％-5重量％的三(羥甲基)氨基甲烷；(c)約60％-80重量％的聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、乳糖或其混合物；及(d)約1％-20重量％的d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯、聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物、或硫酸月桂酯鈉。
固體分散物組合物可以通過兩種不同方法制備共熔化方法及共沉淀方法，其各自構(gòu)成了本發(fā)明的另一方面。
共-熔化方法包括(a)混合藥學(xué)上可接受載體及任選表面活性劑，并將所生成的混合物加熱以充分熔化載體及表面活性劑；(b)將藥學(xué)上可接受胺及式(I)化合物加入到步驟(a)所得的混合物中，并混合直到所有的或基本上所有的式(I)化合物溶解為止。然后將所生成的分散物冷卻，并形成固體或半固體分散物。然后通過已知的制備技術(shù)將所生成的分散物任選配制成所需的劑型，如膠囊劑，包括硬殼或軟明膠膠囊?？晒┦褂玫能浤z囊劑的實例包括在EP 649651 B1及US專利5,985,321中所述的那些。
共沉淀方法包括(a)將藥學(xué)上可接受的胺、藥學(xué)上可接受的載體及任選藥學(xué)上可接受的表面活性劑溶解于適合的親水性溶劑中；(b)將式(I)化合物加入到由步驟(a)中所得的溶液中，并混合以溶解式(I)化合物；及(c)蒸發(fā)親水性溶劑以使式(I)化合物、胺、載體及任選的表面活性劑可共沉淀。用于所述方法中優(yōu)選的親水性溶劑包括乙醇、甲醇及氯仿。然后通過已知的制備技術(shù)將生成的共沉淀固體或半固體分散物，通常是一種粉末，任選配制成所需的劑型，如片劑或膠囊劑，包括硬殼或軟明膠膠囊。可供使用的軟膠囊劑的實例包括在EP 649651 B1及US專利5,985,321中所公開的那些。
B.顆粒劑本發(fā)明的固體劑型藥物組合物也可呈顆粒形式，其是利用常規(guī)的制粒技術(shù)制備的。此顆粒劑通常含有與如上所述的本發(fā)明固體分散物組合物相同的組分相同的劑量。然后通過已知的制備技術(shù)將所生成的顆粒任選配制成所需的劑型，如壓縮成片劑，或充填至包括硬殼膠囊的膠囊內(nèi)。
顆粒劑可以通過兩種不同的方法制備干法制粒方法及濕法制粒方法，其各自構(gòu)成本發(fā)明另一方面。
干法制粒方法包括(a)將式(I)化合物、藥學(xué)上可接受胺、藥學(xué)上可接受載體，及任選藥學(xué)上可接受的表面活性劑研磨并混合以形成混合物，及(b)向混合物中任選加入潤滑劑，如＜1重量％的硬脂酸鎂?？蓪⑺傻幕旌戏勰褐瞥善?。
濕法制粒方法包括(a)混合式(I)化合物、藥學(xué)上可接受的胺、藥學(xué)上可接受的載體及任選藥學(xué)上可接受的表面活性劑，同時加水或另外的親水性溶劑至混合物中以得到糊狀物；(b)將(a)步驟的糊狀物干燥至充分的干燥水平；及(c)將干燥過的糊劑過篩。將生成的顆粒充填至膠囊中，或壓縮成片。
IV.任選的額外組分若需要，根據(jù)本發(fā)明的組合物可進(jìn)一步包括常規(guī)的藥物添加劑，如必要或所需的以獲得適合的制劑，藥物添加劑如抗氧化劑、潤滑劑、崩解劑、防腐劑、緩沖物質(zhì)、穩(wěn)定劑、增稠劑、著色劑、芳香劑、香料等。可用于本發(fā)明組合物中的額外添加劑公開于Tsantrizos等中。
在另一優(yōu)選實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物可進(jìn)一步含有一種或多種的抗氧化劑。優(yōu)選的抗氧化劑包括如抗壞血酸、硫苷脂鹽類、檸檬酸、沒食子酸丙酯、dl-α-生育酚、抗壞血酸棕櫚酸酯、BHT或BHA。若存在時，抗氧化劑的含量通常為約0.01％-1重量％。
V.式(I)化合物組合物中式(I)化合物的優(yōu)選實施方案如下所述。
優(yōu)選的實施方案包括如上所述的式I化合物，其中環(huán)丙基部分選自兩個不同的非對映異構(gòu)體，其中環(huán)丙基的1-碳中心具有R構(gòu)型，如結(jié)構(gòu)(i)及(ii)所代表 14與酰胺同側(cè)(i)，或14與COOH同側(cè)(ii)更優(yōu)選，第14位與環(huán)丙基相連，呈如結(jié)構(gòu)(ii)所代表的與COOH基同側(cè)的構(gòu)型。
因此，在一個實施方案中，式(I)化合物中的以下部分
具有由以下非對映異構(gòu)體所代表的構(gòu)型 其中構(gòu)型第14位與COOH基團(tuán)同側(cè)連接。
在另一個實施方案中，在式(I)化合物中R1是H、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基、氯、或N(R5)2，其中R5是H或C1-6烷基；且R2是H、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、苯基或選自下列的Het 或 其中R6是H、C1-6烷基、NH-R7、NH-C(O)-R7或NH-C(O)-NH-R7，其中每個R7獨立地為H、C1-6烷基、或C3-6環(huán)烷基；或NH-C(O)-OR8，其中R8是C1-6烷基。
在另一個實施方案中，在式(I)化合物中R1是H或C1-6烷氧基。
在另一個實施方案中，在式(I)化合物中
R2是C1-4烷氧基、苯基或選自下列基團(tuán)的Het 其中R6是H、C1-6烷基、NH-R7、或NH-C(O)-R7；其中每個R7是H、C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基、或NH-C(O)-OR8，其中R8是C1-6烷基。
在另一個實施方案中，在式(I)化合物中R2是乙氧基、或選自下列基團(tuán)的Het 或 其中R6是NHR7或NH-C(O)-R7，其中R7是H、C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；或R6是NH-C(O)-OR8，其中R8是C1-6烷基。
在另一個實施方案中，在式(I)化合物中R2選自下列基團(tuán) 和 R6是NHR′，其中每個R7獨立地為H、C1-6烷基、或C3-6環(huán)烷基。
在另一個實施方案中，在式(I)化合物中R3是R9O-，其中R9是丁基、環(huán)丁基或環(huán)戊基。
在另一個實施方案中，在式(I)化合物中在第13-14位上的鍵是單鍵。
在另一個實施方案中，在式(I)化合物中在第13-14位上的鍵是雙鍵，且該雙鍵是順式的。
在另一個實施方案中，在式(I)化合物中R4是H或C1-6烷基。
在另一個實施方案中，在式(I)化合物中R1是甲氧基；R2是 其中R6是NH-(C1-4烷基)或NH-(C3-6環(huán)烷基)；R3是R9O-，其中R9是丁基、環(huán)丁基或環(huán)戊基；R4是H或C1-6烷基；及以下部分 具有以下非對映異構(gòu)體所代表的構(gòu)型 其中構(gòu)型第14位置與COOH基團(tuán)在同側(cè)連接。
化合物表下列表列出式(I)化合物具代表性的化合物。
表1 指在環(huán)丙基部分的單一立體異構(gòu)體，其中R、R4、所述雙鍵位置、環(huán)丙基至14-位置鍵立體化學(xué)，及R1及R2定義如下

表2

其中由第14位置至環(huán)丙基的鍵與COOH在同側(cè)，X10、X11及X12定義如下

表3

其中由第14位置至環(huán)丙基的鍵與COOH在同側(cè)，且R1及R2定義如下
表4 其中由第14位置至環(huán)丙基的鍵與COOH在同側(cè)，且R4，13與14之間的雙鍵及R2如下定義



表5 其中由第14位置至環(huán)丙基的鍵與COOH在同側(cè)，該13、14雙鍵是順式，R3，R4及R2定義如下

表6 其中由第14位置至環(huán)丙基的鍵與COOH在同側(cè)，且R3，R4及R2如下定義
額外的可代表本發(fā)明化合物的特定化合物可見于Tsantrizos等中，且此公開被引入本文作為參考。
式I化合物可以Tsantrizos等中所示的步驟合成，但其公開也被引入本文作為參考。
治療用法式I化合物可充當(dāng)有效的HCV蛋白酶抑制劑，因此這些化合物及含有這些化合物的藥物組合物可用于抑制HCV的復(fù)制，并用于治療HCV感染，如Tsantrizos等中所述，此公開已被引入本文作為參考。
如上文所討論的，本發(fā)明的藥物組合物可依據(jù)所需的具體組合物配制成各種劑型。另外，根據(jù)具體組合物及劑型，各種給藥模式均可能，然而以片劑、膠囊劑或懸液劑口服為優(yōu)選的給藥模式。
式(I)化合物的劑量水平，及用于預(yù)防及治療HCV感染的單一療法中的各種治療療法均示于Tsantrizos等中。然而，本領(lǐng)域一般技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，根據(jù)生物利用率的改進(jìn)水平，本發(fā)明組合物使用較低劑量是可能的。結(jié)合一種或多種額外治療或預(yù)防劑的聯(lián)合治療也是可能的，其完全述于Tsantrizos等中。另外的試劑可與本發(fā)明化合物結(jié)合以生成單一劑型，或者這些額外的試劑可作為多劑型中的一部分分別給藥于哺乳動物。
為了更充分的理解本發(fā)明，列出以下的實施例。這些實施例用于解釋說明本發(fā)明的實施方案，并且不以任何方式構(gòu)成對本發(fā)明范圍的限制。
實施例制劑#1(共-溶劑系統(tǒng))

制劑#2(共-溶劑系統(tǒng))

制劑1及2的制備首先，將氨基丁三醇在蓋緊的容器內(nèi)溶于水、乙醇及丙二醇混合物中，然后將化合物#822加入到溶液中，并繼續(xù)攪拌直到所有的藥物變成可溶為止。
表4．施用200mg I．M．注射劑、300mg口服膠囊、400mg口服膠囊和4×100mg口服膠囊后的曲美芐胺非房室藥代動力學(xué)參數(shù)

制劑#5(以脂質(zhì)為基礎(chǔ)的系統(tǒng))

制劑#6(SEDDS)

制劑#6A(SEDDS)

制劑3，4，5，6及6A的制備首先，將液體組分如Capmul MCM、Cremophor EL、丙二醇、水及乙醇一起混合在緊蓋的容器中，然后將氨基丁三醇及抗氧化劑溶于混合物中。最后，將化合物#822加入到容器中，并繼續(xù)攪拌直到藥物完全溶解為止。當(dāng)VETPGS在制劑中時，將混合物在40℃的水浴中加熱以熔化，隨后加入藥物?？蓪⑦@些制劑充填至硬殼或軟明膠膠囊內(nèi)。
制劑#7(固體分散物-共熔化)

制劑#8(固體分散物-共熔化)

制劑7及8的制備將PEG及VETPGS置于有緊蓋的容器中，并在60℃的水浴中熔化。然后將氨基丁三醇及化合物#822加入到容器內(nèi)，并在相同溫度下繼續(xù)攪拌，直到藥物完全溶解為止。可將這些制劑充填至硬殼或軟明膠膠囊內(nèi)。
制劑#9(固體分散物-共沉淀-對比制劑)

制劑#10(固體分散物-共沉淀-本發(fā)明制劑)

制劑9及10的制備將Kollidon 25及其它賦形劑(如Tween 80及氨基丁三醇)在玻璃容器中溶于足夠量的乙醇中。然后將化合物#822加入到容器內(nèi)，并攪拌直到化合物完全溶解為止。通過在室溫下將容器置于真空烘箱中將乙醇除去。在乙醇完全蒸發(fā)后，將固體物質(zhì)(共沉淀物)從玻璃容器中取出，并過1毫米篩。將粉末充填至硬殼膠囊或進(jìn)一步壓制成片。用來溶解藥物及賦形劑的溶劑可為乙醇、甲醇或氯仿。
制劑#11(干顆粒)

制劑#12(干顆粒)

制劑#11及#12的制備在玻璃研缽中，將制劑組分用玻璃研杵研磨約2分鐘。將混合物轉(zhuǎn)移至玻璃瓶內(nèi)，并用torbola攪拌器(blender)混合6分鐘。將硬脂酸鎂加入到粉末中，再繼續(xù)混合4分鐘。將粉末用11毫米的鑄模塊(die set)壓制成片@6.6KN。
制劑#13(濕顆粒)

制劑#14(濕顆粒)

制劑#15(濕顆粒)

制劑#13，14及15的制備在玻璃研缽內(nèi)，將制劑組分用玻璃研杵研磨約2分鐘。將熱水(80℃)逐滴加入到混合物中，并同時用研杵攪拌。繼續(xù)加水直到獲得糊狀物為止。將糊狀物在烘箱中，于45℃，在培養(yǎng)皿上干燥。干燥2小時后，將糊狀物研磨，并通過#18篩。干燥粉末至恒重并等于最初重量。將粉末充填至硬殼膠囊內(nèi)，或壓制成片。
體外分散及溶解作用研究(1)分散試驗為了評估分散能力，將所制備的各制劑用pH2.0(0.05M HCl/KCl)及pH6.8緩沖溶液(0.05M KH2PO4/K2HPO)稀釋，觀察到分散物為澄清溶液、膠態(tài)分散物(乳劑或微乳劑)或具有藥物沉淀的懸浮液。優(yōu)選在緩沖溶液中無藥物沉淀的制劑并且具有較快的分散速率。
(2)溶出試驗使用USP XXIII裝置(槳式方法，50rpm)將藥物自所選定的制劑中釋出至37℃下，900毫升pH2.0緩沖溶液(0.05M HCl/KCl)的溶解介質(zhì)中。在不同時間間隔下，抽取10毫升樣品，以HPLC確定藥物濃度。優(yōu)選具有較快且較高藥物釋出的制劑。
圖1示出四種化合物#822制劑在體外溶出的曲線含有1％CMC/0.2％Tween 80(無氨基丁三醇)的常規(guī)懸浮液；根據(jù)本發(fā)明的制劑#4(SEDDS)；根據(jù)本發(fā)明的制劑#6A(SEDDS)；根據(jù)本發(fā)明的制劑#7(固體分散物)。溶出試驗是在如上所述的條件下進(jìn)行的。本發(fā)明組合物與傳統(tǒng)懸浮液比較，可呈現(xiàn)優(yōu)良的體外溶出作用。
已發(fā)現(xiàn)將堿性胺加入到固體劑型時，可顯著地改進(jìn)體外的溶出速率?；衔?822為水溶性較差化合物，因此其自固體劑型中溶出會限制其口服吸收作用及生物利用率。圖2示出含有和不含有氨基丁三醇(Tris)化合物#822的濕粒制劑，即分別為制劑#14及#13在體外的溶出曲線。溶出試驗是在如上所述的條件下進(jìn)行的，除了將含有0.2％硫酸月桂酯鈉(SLS)的水用作溶解介質(zhì)。
體內(nèi)生物利用率研究(1)在獼猴中的生物利用率研究在獼猴上進(jìn)行兩種制劑(制劑#1及制劑#3)的生物利用率與含有0.5％CMC及0.2％ Tween 80的含水懸液的生物利用率的比較。使用兩只雌性獼猴進(jìn)行交叉給藥設(shè)計，在制劑間有2周的清除期。以40毫克/公斤經(jīng)口給藥于猴子。PK變量歸納于表1中。制劑#1及#3的生物利用率分別比CMC/Tween懸液的生物利用率大15和20倍。
表1.單一40mg/kg口服劑量后，化合物#822在雌性獼猴中的PK參數(shù)

(2)在小獵犬中的生物利用率研究在小獵犬中比較二種SEDDS制劑(制劑#4及制劑#6A)和一種固體分散物(制劑#7)的生物利用率。根據(jù)上述步驟制備制劑，并充填至硬膠囊內(nèi)。
將稱重為10.4-14.8公斤重量的四只狗(1只雄性及3只雌性)用于進(jìn)行交叉給藥研究。四只狗接受含有100毫克化合物#822的單一膠囊。在給藥后0、30分鐘，1、1.5、2、3、4、6、8、24小時采取血樣，再利用LC/MS/MS系統(tǒng)分析。PK參數(shù)示于表2中。固體分散物提供如SEDDS制劑般可比的生物利用率。
表2.在小獵犬中，化合物#822兩種口服制劑的PK參數(shù)(平均值+SD)(毫克/公斤?；瘎┝?

權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其包括(a)式(I)化合物或其互變異構(gòu)體； 其中-----表示在第13及14位置間形成雙鍵的任選鍵；R1是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、羥基、或N(R5)2，其中每個R5獨立地為H、C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R2是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、C2-7烷氧基烷基、C6或C10芳基或Het，其中Het是五-、六-或七-員飽和或不飽和雜環(huán)，其含有一至四個選自氮、氧及硫的環(huán)雜原子；所述環(huán)烷基、芳基或Het任選被R6所取代，其中R6是H、鹵素、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、NO2、N(R7)2、NH-C(O)-R7；或NH-C(O)-NH-R7，其中每個R7獨立地為H、C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；或R6是NH-C(O)-OR8，其中R8是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R3是R9O-或R9NH-，其中R9是C1-6烷基或C3-6環(huán)烷基；R4是H或在第8、9、10、11、12、13或14位上任何可用碳原子上的一至三個取代基，所述取代基獨立地選自C1-6烷基、C16鹵烷基、C1-6烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氧代、硫代或C1-6硫烷基；(b)約0.1至10重量％的藥學(xué)上可接受胺或藥學(xué)上可接受胺的混合物；及(c)一種或多種藥學(xué)上可接受的油類、載體或親水性溶劑；且當(dāng)(c)為一種或多種藥學(xué)上可接受的油類時，該藥物組合物可進(jìn)一步包括(d)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的親水性溶劑；(e)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的聚合物；及(f)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的表面活性劑；且當(dāng)(c)是一種或多種藥學(xué)上可接受載體時，該藥物組合物進(jìn)一步包括(d)任選一種或多種藥學(xué)上可接受的表面活性劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中式(I)化合物的含量為約1％-50重量％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的藥物組合物，其中胺的含量為約0.1％-7重量％。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中胺是C1-6烷基胺、二-(C1-6烷基)-胺或三-(C1-6烷基)-胺，其中其一個或多個烷基可任選被一個或多個羥基所取代，或胺是C1-6烷撐二胺、堿性氨基酸或膽堿氫氧化物、或其混合物。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中胺選自乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、三(羥甲基)氨基甲烷、乙二胺或二甲氨基乙醇、或其混合物。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中一種或多種藥學(xué)上可接受的油類、載體或親水性溶劑含量為約1％-99重量％。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受的油類選自中或長鏈甘油單酯、甘油二酯或甘油三酯，水不溶性維生素，脂肪酸及其混合物。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受的油類選自辛脂肪酸甘油單酯、辛脂肪酸甘油二酯或辛脂肪酸甘油三酯；癸脂肪酸甘油單酯、癸脂肪酸甘油二酯或癸脂肪酸甘油三酯；油酸，及其混合物。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受的載體選自藥學(xué)上可接受的聚合物及藥學(xué)上可接受的脲。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受的載體選自聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、纖維素衍生物、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚乙二醇化甘油酯、脲類、糖類、多元醇、及其混合物。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受的親水性溶劑選自丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇、甘油、乙醇、二甲基異山梨醇酯、糖糠醛(glycofurol)、碳酸丙烯酯、二甲基乙酰胺、水、或其混合物。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受的親水性溶劑選自丙二醇、聚乙二醇、乙醇、水及其混合物。
13.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受聚合物的含量可高達(dá)約50重量％。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受聚合物選自聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、纖維素衍生物、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、糖類、多元醇、及其混合物。
15.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受的表面活性劑含量可高達(dá)約70重量％。
16.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受的表面活性劑選自d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯、聚氧化蓖麻油、聚山梨醇酯、聚乙二醇6-油酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚乙二醇甘油酯或泊洛沙姆、或硫酸月桂酯鈉及其混合物。
17.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中藥學(xué)上可接受的表面活性劑選自d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯、聚氧化40氫化蓖麻油、聚氧化35蓖麻油、聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物、或硫酸月桂酯鈉、及其混合物。
18.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中在式(I)化合物中，以下部分 具有以下非對映異構(gòu)體所代表的構(gòu)型 其中構(gòu)型第14位置是與COOH基團(tuán)于同側(cè)連接。
19.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中式(I)化合物中R1是H、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基、氯、或N(R5)2，其中R5是H或C1-6烷基；且R2是H、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、苯基或選自下列的Het 或 其中R6是H、C1-6烷基、NH-R7、NH-C(O)-R7、NH-C(O)-NH-R7，其中每個R7獨立地為H、C1-6烷基、或C3-6環(huán)烷基；或NH-C(O)-OR8，其中R8是C1-6烷基。
20.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中R2選自下列基團(tuán) 和 R6是NHR7，其中每個R7獨立地為H、C1-6烷基、或C3-6環(huán)烷基。
21.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中在式(I)化合物中R3是R8O-，其中R8是丁基、環(huán)丁基或環(huán)戊基。
22.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中在式(I)化合物中，在第13-14位上的鍵是單鍵或雙鍵，且該雙鍵是順式。23.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中在式(I)化合物中R4是H或C1-6烷基。
24.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中在式(I)化合物中R1是甲氧基；R2是 其中R6是NH-(C1-4烷基)或NH-(C3-6環(huán)烷基)；R3是R9O-，其中R9是丁基、環(huán)丁基或環(huán)戊基；R4是H或C1-6烷基；且以下部分 具有由以下非對映異構(gòu)體所代表的構(gòu)型 其中構(gòu)型第14位置與COOH基團(tuán)在同側(cè)連接。
25.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其中式(I)化合物選自由下表所列的化合物 其中由第14位至環(huán)丙基的鍵與COOH同側(cè)，所述13及14位間的雙鍵是順式的，R3、R4及R2如下定義
26.根據(jù)權(quán)利要求25的藥物組合物，其中式(I)化合物是化合物822。
27.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其包括(A)(a)約5％-15重量％的式(I)化合物；(b)約0.5％-5重量％的三(羥甲基)氨基甲烷；及(c)約80％-90重量％的丙二醇、乙醇及水的混合物；或(B)(a)約10％-20重量％的式(I)化合物；(b)約0.1％-5重量％的三(羥甲基)氨基甲烷；(c)約20％-70重量％的辛脂肪酸甘油單酯或辛脂肪酸甘油二酯或癸脂肪酸甘油單酯或癸脂肪酸甘油二酯、或其混合物；(d)約10％-30重量％的丙二醇、乙醇及任意量的水的混合物；(e)任選約1％-20重量％的聚乙二醇或聚乙烯吡咯烷酮；及(f)約20％-50重量％的d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯或聚氧化35蓖麻油；或(C)(a)約10％-20重量％的式(I)化合物；(b)約0.1％-5重量％的三(羥甲基)氨基甲烷；(c)約60％-80重量％的聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、乳糖或其混合物；及(d)約1％-20重量％的d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯、聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物或硫酸月桂酯鈉。
28.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其是呈流體劑型選自硬殼或軟明膠膠囊，或呈固體劑型選自散劑、片劑或膠囊劑。
29.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物，其進(jìn)一步包括一種或多種的抗氧化劑。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的藥物組合物，其中的抗氧化劑含量約0.01-1重量％。
31.根據(jù)權(quán)利要求29的藥物組合物，其中的抗氧化劑選自抗壞血酸、硫苷脂鹽類、檸檬酸、沒食子酸丙酯、d1-α-生育酚、抗壞血酸棕櫚酸酯、BHT或BHA。
32.一種制備前述權(quán)利要求中任一個的藥物組合物的方法，所述方法包括(A)(a)將胺溶解于一種或多種藥學(xué)上可接受溶劑中；(b)將式(I)化合物加入到步驟(a)所得的溶液中并使其混合或(B)(a)將藥學(xué)上可接受油類、表面活性劑及溶劑一起混合；(b)將藥學(xué)上可接受的胺溶解在步驟(a)所得的混合物中；(c)若必要時將步驟(b)所得的混合物任選加熱，以充分熔化混合物中一種或多種的組分；(d)將式(I)化合物加入到步驟(b)或(c)中所得的混合物內(nèi)，并使其混合；或(C)(a)將藥學(xué)上可接受胺、藥學(xué)上可接受載體及任選藥學(xué)上可接受表面活性劑溶解在適合的親水性溶劑內(nèi)；(b)將式(I)化合物加入到步驟(a)所得的溶液中，并混合以溶解式(I)化合物；(c)蒸發(fā)親水性溶劑以引起式(I)化合物、胺、載體及任選表面活性劑的共沉淀作用；或(D)(a)混合藥學(xué)上可接受載體及任選的表面活性劑，并加熱所生成的混合物以充分熔化載體及表面活性劑；(b)將藥學(xué)上可接受胺及式(I)化合物加入到步驟(a)所得的混合物中并使其混合；或(E)(a)混合式(I)化合物、藥學(xué)上可接受胺、藥學(xué)上可接受載體及任選藥學(xué)上可接受表面活性劑，以形成混合物，及(b)任選在混合物中加入潤滑劑；或(F)(a)混合式(I)化合物、藥學(xué)上可接受胺、藥學(xué)上可接受載體及任選藥學(xué)上可接受表面活性劑，同時將水或另外的親水性溶劑加入到混合物中以得到糊劑；(b)將步驟(a)的糊劑干燥至充分干燥的水平；及(c)將干燥的糊劑過篩。
33.一種抑制丙型肝炎病毒復(fù)制的方法，所述方法是將病毒曝露于丙型肝炎病毒NS3蛋白酶抑制劑量的權(quán)利要求1-31中任一個的組合物中。
34.一種治療哺乳動物中丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包括將治療有效量的權(quán)利要求1-31中任一個的組合物給藥于需要該治療的哺乳動物。
35.根據(jù)權(quán)利要求1-31中任一個的組合物在用于制備治療或預(yù)防丙型肝炎病毒感染的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了具有改進(jìn)的生物利用率的丙型肝炎病毒蛋白酶抑制劑的藥物組合物，及利用這些組合物抑制丙型肝炎病毒(HCV)的復(fù)制及治療HCV感染的方法。這些組合物包括共溶劑系統(tǒng)，以脂質(zhì)為基礎(chǔ)的系統(tǒng)，固體分散物及顆?；叶己斜透窝撞《镜鞍酌敢种苿?，及至少一種藥學(xué)上可接受胺及任選一種或多種額外的組分。
文檔編號A61K9/48GK1627959SQ03803395
公開日2005年6月15日 申請日期2003年2月5日 優(yōu)先權(quán)日2002年2月7日
發(fā)明者舍林·陳, 梅笑輝 申請人:貝林格爾·英格海姆藥物公司