專利名稱：中藥丁香及其提取物在制備減肥藥物中的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥的新用途，具體地說，本發明涉及中藥丁香及其提取物在制備減肥藥物中的用途。
背景技術：
據《中華本草》記載(上海科技出版社，1999年9月第1版，第五卷647-652)丁香是桃金娘科植物丁香Eugeniacaryophyllata Thumb的干燥花蕾，又稱公丁香。原產馬來群島及非洲，我國廣東、海南、廣西、云南等地有栽培。定植5-6年后，花蕾香辣，有麻舌感。丁香為常用傳統中藥，為具有溫中降逆、溫腎助陽的功能，主治胃寒呃逆，脘腹冷痛，食少吐瀉，腎虛陽，腰膝酸冷，陰疽等癥。
現代藥化研究表明王浴生，等。中藥藥理與應用，人民衛生出版社，1983，9，第1版，4-10；北京醫學，1994，30(4)9；實用中醫藥雜志，2002；18(6)54；陜西中醫，1995，16(9)419-422，丁香花蕾中主要含揮發油(丁香油)15-20％，丁香油中主要含丁香酚64％-85％，乙酸丁香酚，β-丁香烯等。花蕾中還含有齊墩果酸、沒食子酸、黃酮、山萘酚及其甙，槲皮素及其苷，鼠李素等其他化學成分。藥理研究表明，丁香水提物、丁香乙醚、丁香油具有極為廣泛的藥理活性，主要包括抗氧化作用；抑制花生四烯酸代謝作用；解熱、鎮痛、抗炎作用；抗血小板聚集、抗凝和抗血栓作用；抗突變作用；抗缺氧作用；麻醉作用；抗細菌、病毒、霉菌、殺寄生蟲作用；抗胃潰瘍，促進胃酸和胃蛋白的酶分泌，解除腸痙攣、抗腹瀉和利膽作用。此外，丁香還具有抑制腦內膽堿酯酸活性，降低血壓，促進透皮吸收等其它藥理活性。以上有關丁香的現代藥理研究，均未涉及丁香及丁香提取物減肥藥理活性研究報道。
肥胖癥是一組常見的代謝異常癥群，隨著人們物質生活的日益提高，肥胖癥已經成為嚴重危及人類生命的疾病，在我國發病率為10％-20％，目前對于肥胖癥有很多療法，如飲食療法、運動療法、行為療法、藥物治療等。在藥物治療方面，中西藥物治療肥胖癥已有較為廣泛的研究和臨床應用。現代減肥西藥主要按作用機制分為食欲抑制藥(如去甲腎上腺素、多巴胺及5-羥色胺等)、增加能量消耗的藥物(如麻黃堿、茶堿等)、抑制腸道消化吸收的藥物及其他治療肥胖的藥物(如肥胖基因產品、胰島素增敏劑等)四類。西布曲明(Sibutramine)和奧利司他(orlistat)是迄今為止美國FDA和中國國家藥品監督管理局批準的兩種減肥藥。羅氏公司的賽尼可(奧利司他)是第一個、也是唯一的非中樞神經作用的減肥藥物，是一種作用于腸道的脂肪酶抑制劑，在推向中國大陸市場之前，賽尼可已經占據了國際減肥藥市場80％的市場份額。曲美(西布曲明)是一種中樞神經抑制劑，它通過抑制食欲，增加飽脹感達到減少進食進而減輕體重的目的。
有關中藥減肥的研究也不斷深入，從有減肥作用的中藥、中成藥研究，到中藥減肥活性成分研究，都有了較為明顯的進展。已有研究表明中醫藥減肥療法概況，中藥材，2002，25(7)534-537，單味中藥中，麻黃、山楂、大黃、虎杖、蒼術、澤瀉、茵陳、草決明、半夏、番瀉葉、元蔥、大蒜、蠶腎、槐米、金銀花、姜黃、白茅根、荷葉、薏苡仁、茺蔚子、丹參、赤子、益母草、三七、五靈脂、香、三棱、莪術、雞血藤、牛膝、當歸、川芎、旱蓮草、女貞子、何首烏、生地、山茱萸、枸杞子、菊花、桑寄生、靈芝均有不同程度的減肥作用。有關減肥中藥有效成分的研究主要涉及大黃蒽醌、枸杞多糖、茶葉多糖、靈芝多糖、人參皂甙、絞股藍總皂甙、三七葉總皂甙、刺五加葉總皂甙、柴胡皂甙、大豆皂甙、大豆磷脂、葛根素、甘草甜素、山楂黃酮、橙皮甙、黃芩甙、白藜蘆醇、植物固醇、澤瀉萜醇、銀杏苦內酯、茶多酚、決明子大黃酚、荷葉生物堿、川芎嗪、姜黃素、大蒜素、阿魏酸、亞麻酸、α-生育酚等。此外，尚有不少中藥減肥復方的研究應用報告，如烏龍強力減肥茶(鐵雞音、山楂、決明、金銀花)，減肥降脂茶(枸杞子、何首烏、草決明、山楂、丹參)等。有關中藥減肥降脂的機理研究尚未進行全面深入研究，其作用機理比較復雜，可能涉及減少外緣性脂質的吸收、減少內緣性脂質的合成、促進脂質的轉運和排泄、調節脂肪代謝等多方面。已有研究報道，烏龍茶水提物具有抑制胰脂肪酶活性的作用，烏龍茶中分離得到的活性物質咖啡因具有增強去甲腎上腺素誘導脂肪分解的作用，烏龍茶減肥作用可能是通過抑制小腸對食物的吸收和促進脂肪分解作用而實現的烏龍茶減肥作用機制的研究，營養科學學報，200，23(4)342-343。但以上有關中藥減肥及減肥機理的研究，均未涉及中藥丁香及丁香提取物。
發明內容
本發明目的是提供丁香的新用途，具體地說，提供丁香在制備減肥藥物中的用途。
進一步地，本發明的目的是提供丁香及丁香提取物在制備脂肪酶抑制劑藥物中的用途。
本發明的技術方案是使用中藥丁香制備減肥藥物，特別是制備脂肪酶抑制劑藥物，使用丁香制備上述藥物時可以用中藥丁香Eugenia caryophyllata Thumb的原生藥粉，也可以用中藥丁香Eugenia caryophyllata Thumb提取物為活性成分。所述的丁香提取物為丁香水提取物，或者為丁香油提取物，其中更進一步地，丁香油提取物為丁香重油(其比重大于1)提取物。
本發明還提供一種具有減肥作用的藥物組合物，它含有上文所述的丁香原生藥或提取物，再加上藥學上可接受的載體或輔助性成分可制成藥劑。所述的藥劑是口服制劑，如膠囊、軟膠囊、顆粒劑、片劑、滴丸、口服乳劑。
在使用丁香制備減肥藥物時，可以是將丁香原生藥直接加工成藥物，也可以是對丁香原生藥進行化學分離提取，將各種提取物(包括丁香水提取物、丁香有機溶劑提取物、丁香油、丁香重油)制備成藥品。也可以是將丁香原生藥或其各種提取物與其它藥物或中藥配合制成復方制劑。
用丁香為原料，直接加工制備成藥品。可以是將上述原生藥凈制后粉碎，過80-120目篩，制成細粉，再將細粉裝膠囊，或制備成膠囊、片劑、丸劑、顆粒劑、散劑。
用丁香原生藥為原料，進行初步提取后制備成藥品。可以采用現代技術中的各種常規提取方法進行提取。例如，用丁香原生藥為原料，以水或有機溶劑提取，其有機溶劑可以是乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙醚、石油醚等有機溶劑。優選以水或10～95％乙醇為溶劑提取丁香水溶性或醇溶性成分制備成藥品，可以采用以下常規分離提取方法將原藥材經過凈制后粉碎為粗粉，用水直接加熱提取1～3小時，重復1～3次，水煎液減壓濃縮，制備水提浸膏；用水，或10～95％乙醇，回流加熱提取1～3小時，可重復提取1～3次，然后濾去藥渣，濾液在常壓或減壓下濃縮，得濃縮水浸膏或醇浸膏，經真空或冷凍干燥成干粉。用丁香原生藥為原料，可采用冷浸法或滲濾法或熱回流法提取，即得丁香揮發油，即丁香油。
用丁香為原料，配伍其它中藥，如大黃、山楂、澤瀉、枸杞子、丹參等，亦可制備成具有減肥作用的中藥復方。
以上丁香或丁香各種提取物，或以丁香為主要原料組成的中藥復方，加上藥學上可接受的載體，如淀粉、乳糖、蔗糖、飴糖、糊精、纖維素類、瓊脂、硬脂酸鎂、滑石、植物油、阿拉伯膠，明膠等，可以制成膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、丸劑、滴丸劑、散劑、顆粒劑、口服液或注射液等多種劑型。如①片劑的制備包括普通片、薄膜片、腸溶片等。用上述丁香水提取物，加入適量稀釋劑如淀粉、糊精、甘露醇、微晶纖維等，適量的粘合劑如水、乙醇、淀粉漿、明膠、纖維素等，適量的崩解劑如干淀粉、羧甲基淀粉鈉、羥丙基纖維素、海藻酸鈉等，以及適量的潤滑劑如硬脂酸鎂、滑石粉、聚乙二醇等，按常規濕法制粒，干燥后整粒或干法制粒后壓片。如是包薄膜衣片，可用成膜材料如纖維素類、聚乙二醇類等，按常規包衣，分裝入密閉瓶或鋁塑板中。②膠囊劑的制備將上述丁香水提取物加入適量輔料如淀粉、碳酸鈣、甘露醇、氧化鎂、微粉硅膠等，適量潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鎂、乙二醇酯，聚硅酮類等，以及適量的黏合劑如礦物油、食油等，混合成干粉或制成顆粒，填充入膠囊，分裝如密閉鋁塑包裝中。以上各劑型可加入適量甜味劑，如D-木糖，木糖醇、麥芽糖醇、甜葉菊素、天冬甜母等。③口服液的制備口服液制備過程中，用上述丁香水提取物加入藥用添加劑，如懸浮劑(如山梨醇糖漿、纖維素衍生物、葡萄糖/蔗糖糖漿、明膠、硬脂酸鋁膠或氫化食用脂肪)；乳化劑(例如卵磷脂、阿拉伯膠或失水山梨醇-油酸酯)；非水載體(例如杏仁油、油狀酯、乙醇或精煉植物油)；以及防腐劑(例如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯或山梨酸)。根據需要，液體制劑還可以含有已知的緩沖劑、矯味劑和芳香成分、染料和甜味劑。
丁香原生藥，或其水提物，或其有機溶劑提取物、或其揮發油即丁香油提取物、或其中藥復方制備的藥物及其制劑具有顯著的減肥藥理作用，對肥胖動物的體重、脂肪重量及李氏指數均有明顯抑制作用。
丁香原生藥，或其水提物，或其有機溶劑提取物、或其揮發油即丁香油提取物、或其中藥復方制備的藥物及其制劑具有顯著的減肥藥理活性，即對胰脂肪酶活性具有明顯抑制作用。
由丁香原生藥，或丁香水提取物，或丁香有機溶劑提取物，或丁香油提取物，或丁香重油提取物，或其藥物復方制備的藥物及其制劑，具有顯著的減肥作用，可將其制成膠囊、軟膠囊、片劑、顆粒劑、丸劑、滴丸劑、口服液、注射液等多種劑型，適用于肥胖癥的治療，具有療效顯著、價格低廉、使用安全方便等優勢特點。
顯然，根據本發明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。
具體實施例方式
實施例1丁香原生藥藥品的制備以丁香植物花蕾為原料，凈制后按常規方法粉碎，過篩，制成粒度小于60目的丁香細粉8.5g，細粉裝入膠囊，滅菌，分裝即成。
實施例2丁香水提取物及丁香重油提取物制備取丁香原生藥4kg，粉碎后加入10倍量水，采用水蒸餾法加熱提取8小時，收集芳香水，濾渣再加10倍量水，加熱回流提取2小時，過濾。合并兩次濾液，濃縮得丁香水提取物495g，真空干燥為干粉(以下稱DX-1)，為棕褐色粉末。將收集的芳香水靜置分層，并收集分離其中下層液體，得丁香重油提取物480ml(以下稱DX-2)，以丁香酚為對照品，采用氣相色普法測定其中含丁香酚為84％。實施例3丁香水提取物、丁香重油提取物對肥胖大鼠的減肥作用試驗實驗材料供試藥品DX-1、DX-2為實施例2所得丁香水提取物和丁香重油提取物，陽性藥物為西藥賽尼可(上海羅氏制藥有限公司生產)，藥物濃度根據需要配制。試驗動物剛斷奶的SD健康大白鼠，體重50-60g，為I級合格鼠，合格證號為川實動管質(99)第32號，由四川抗菌素工業研究所提供。飼料分基礎飼料和營養飼料兩種，基礎飼料為25％的麥粉、22％共同豆粉、1％酵母粉、5％骨粉、20％玉米粉、16％大米粉、10％魚粉、1％食鹽，營養飼料為在基礎飼料中按100g飼料加奶粉10g、豬油10g、雞蛋1枚、魚肝油0.3g、豆芽250g(切碎后拌入飼料中，每天飼料分2次喂給動物，以吃完為止，自由飲水。飼料喂養量，每天以相同量的飼料分給各鼠，在第1、2周內，每天喂13g(只.d)-1；第3周14g(只.d)-1；第4周16g(只.d)-1；第5周18g(只.d)-1；第6周20g(只.d)-1，每天以吃完為止，不再添食。
方法與結果取斷奶大鼠72只，分性別按體重隨機均分為5組，除1組只喂基礎飼料外，其余4組均按上述喂量喂以基礎飼料加營養飼料，各組均在喂飼料的前后分別灌胃DA-1、DX-2、DX-3賽尼可。觀察指標，重點觀察體重、脂肪墊重、李氏指數，體重觀察以給藥前、給藥后1、2、3、4周，各稱體重1次，第4周稱體重后，ip戊巴比妥麻醉后取生殖器周圍的脂肪墊稱重，并量體長(從鼻尖至肛門)，按公式計算李氏指數(Lees’)Lees’＝體重1/3×103÷身長，結果如表1、表2。
表1 丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2對肥胖大鼠體重的影響劑量 給藥前給藥后(體重.g.x±s)組別 g(ml).(kg (0d) 7d 14d 21d 28d.d)-1正常 ♀55.21±5.4591.3±2.47 113.96±8.39 118.58±11.77 131.36±18.9組 ♂55.7±3.82 87.27±6.00 110.94±12.73 113.6±13.25 138.65±18.4肥胖 ig等量♀55.27±4.1497.87±11.45 139.25±11.71 168.03±5.68 180.43±10.24組 0.5％cmc ♂55.34±4.56100.93±12.17136.2±13.05 173.19±25.29 191.33±13.52賽尼 ♀55.56±5.0289.93±10.74 120.0±12.89 128.46±15.05 147.41±17.49**0.06可 ♂55.63±3.5397.6±11.76 132.89±19.93 155.69±11.4 175.86±19.76*♀55.5±5.04 91.23±16.18 127.7±20.38 148.82±22.0 156.89±21.09**DX-1 0.9♂54.96±2.8390.46±6.89 127.73±13.78 124.56±17.86 149.66±29.42*0.25 ♀54.97±4.3 80.97±14.38 104.59±22.16 128.96±34.35 159.97±18.8*DX-2(ml) ♂55.04±4.3185.47±7.80 124.39±22.60 161.42±36.36 167.8±27.11*與肥胖組比*P＜0.05 **P＜0.01從表1可見灌胃一周后，各給藥組的體重比肥胖組減輕，當灌胃至28天后，DX-1組、DX-2組對雌鼠和雄鼠的體重均較肥胖組顯著減輕，其中以DX-1的作用最強，賽尼可組對雌鼠的體重均較肥胖組有顯著減輕作用，但賽尼可對雄鼠的減肥作用不明顯，減肥速度較慢。試驗結果表明，DX-1減肥速度比賽尼可快，且無副反應，無性別差異，且動物皮毛光滑潔凈。
表2 丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2對雌性大鼠的脂重、尾長及李氏指數的影響劑量脂肪(g.x±s) 尾長(g.x±s) Lees’(g.x±s)組別g(ml).(kg 雌 雄 雌 雄 雌 雄.d)-1正常組 - 1.5± 1.71± 11.62± 12.43± 293.5± 273.5±0.15 0.050.83 0.64 13.3 12.4肥胖組 Ig等量 2.18±2.39± 16.5±17.3±306.7± 307.5±0.5％cmc0.18 0.071.13 0.82 18.8 17.3賽尼可 0.061.8± 2.19± 13.2±15.5±265.1± 274.7±0.22 0.070.96 0.18 8.95** 13.2**DX-10.9 1.87±1.77± 14.5±1.3 13.3±264.4± 260.5±0.11 0.11* 0.62 12.3** 14.1**DX-20.25(ml)1.82±1.83± 14.3±15.1±278.2± 282.96±0.11 0.141.07 0.74 11.5 0.82與肥胖組比*P＜0.05 **P＜0.01從表2可見，DX-1不僅對肥胖大鼠體重作用有明顯抑制作用，同時對大鼠生殖器周圍的脂肪墊重及李氏指數均有顯著的抑制作用，表明DX-1對肥胖鼠的相關指標亦表現出良好的作用，而DX-2亦有一定的抑制肥胖鼠的脂肪墊重及李氏指數作用，但作用不如DX-1，且與賽尼可有相似的副作用，即有一過性腹瀉作用。
實施例4 丁香水提取物、丁香重油提取物對肥胖小鼠體重的影響取16-18g小鼠55只，分性別按體重隨機均分為5組，每雌6、雄5只，各組的基礎飼料與第1組相同，但在飼料中另加致肥營養飼料比例同實施例3，各組每天每只鼠的進食量基本相似(不要在進食體積上產生差別)，各組分別于餐前和餐后各給藥1次，7天稱體重1次，結果如表3。
表3 丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2對致肥小鼠體重的影響劑量給藥后(體重.g.x±S)組別 g(ml).(kg.致肥前(g.x±s)7d 14dd)-1正常組 - 16.9±0.8525.32±3.46 26.22±4.9718.4±1.4425.02±2.36 29.56±5.75肥胖組 Ig等量17.62±1.01 27.18±2.91 32.5±3.320.5％cmc 18.64±0.829.82±1.95 39.14±3.12賽尼可 ig1.2 16.73±1.13 24.92±1.68 31.27±3.3918.82±0.92 25.18±1.03 37.12±3.44DX-1 ig1.2 16.93±1.25 23.9±4.22* 28.85±2.57*1.81±1.0828.3±2.93 34.8±6.46DX-2 ig0.5(ml) 17.38±0.99 23.02±3.68* 25.38±3.64**18.4±0.6724.7±2.14** 25.66±4.5**與肥胖組比*P＜0.05 **P＜0.01表3可見，灌胃給藥后7天和14天，DX-2組、DX-1組對肥胖小鼠的體重均有不同程度的抑制作用，即丁香水提取物和丁香重油提取物能明顯減輕肥胖小鼠的體重，陽性藥賽尼可組在給藥14天內作用不明顯。
實施例5 丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2對胰脂肪酶活性影響試驗胰脂肪酶是一種脂肪水解酶，它作用于甘油三酯的乳化顆粒，使甘油三酯轉化為游離脂肪酸和2-甘油-酯。本實驗通過抑制胰脂肪酶對甘油三酯的水解作用，建立了胰脂肪酶抑制劑的篩選方法，脂肪酶抑制劑賽尼可作為本實驗的陽性對照，并以IC50評價供試樣品的抑制效率。試驗方法分別取10ug/10ul，50ug/10ul，100ug/10ul不同濃度的丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2、賽尼可陽性樣品各20μl，加入微量反應管，再加入40μl酶試劑，其中胰脂肪酶含量0.2U，甘油激酶0.024U，甘油-3-磷酸氧化酶0.15U，過氧化物酶0.2U，腺苷三磷酸2.8μM，4氨基安替比林2μM；將樣品與酶試劑混勻后放置37℃5分鐘，最后加入160μl顯色試劑(含4-氯酚14μM)，充分混勻，37℃放置10分鐘，用酶標儀測定490nm波長下各反應管吸光度值，并計算各樣品IC50值。試驗結果見表4。
表4 丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2對胰脂肪酶活性的抑制效率樣品編號 IC50(ug/ml)DX-1 6.5DX-2 7.2賽尼可0.15結果表明，丁香水提取物DX-1、丁香重油提取物DX-2及陽性藥物賽尼可對胰脂肪酶活性有顯著抑制作用，其IC50值分別為6.5ug/ml，7.2ug/ml，0.15ug/ml。
權利要求
1.中藥丁香在制備減肥藥物中的用途。
2.權利要求1所述的丁香在制備脂肪酶抑制劑藥物中的用途。
3.權利要求1或2所述的丁香的用途，其特征在于所述的藥物為中藥丁香Eugenia caryophyllata Thumb的原生藥粉。
4.權利要求1至3所述的丁香的用途，其特征在于所述的藥物是以中藥丁香Eugenia caryophyllata Thumb提取物為活性成分。
5.根據權利要求4所述的丁香的用途，其特征在于所述的提取物為丁香水提取物。
6.根據權利要求4所述的丁香的用途，其特征在于所述的提取物為丁香油提取物。
7.根據權利要求6所述的丁香的用途，其特征在于所述的丁香油提取物為丁香重油提取物。
8.一種具有減肥作用的藥物組合物，它含有權利要求3至7所述的丁香原生藥或提取物。
9.根據權利要求8所述的藥物組合物，其特征是含有如權利要求4或5所述的丁香原生藥或提取物作為活性成份，加上藥學上可接受的載體或輔助性成分制成的藥劑。
10.根據權利要求9所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥劑是口服制劑膠囊、軟膠囊、顆粒劑、片劑、滴丸、口服乳劑。
全文摘要
本發明提供中藥丁香及其提取物在制備減肥藥物和制備脂肪酶抑制劑藥物中的新用途。用單味丁香，或丁香水提取物、或丁香有機溶劑提取物、或丁香油提取物制備成藥品，以及用丁香和丁香提取物制備成復方制劑。具有減肥療效顯著、價格低廉、使用安全方便等特點。
文檔編號A61P3/00GK1535717SQ0311767
公開日2004年10月13日 申請日期2003年4月11日 優先權日2003年4月11日
發明者劉忠榮, 李伯剛, 付鐵軍, 鄒文俊, 黃璜, 銀慶志, 高小平, 蘇芝 申請人:成都地奧制藥集團有限公司