專利名稱：蛇毒止血藥物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蛇毒止血藥物的制備方法。
以蛇毒制作止血藥的目前只有瑞士的立止血技術(shù)，該技術(shù)產(chǎn)品的凝血時間為2分05秒，這對于特殊情況下需要立即止血時間仍然太長。
本發(fā)明涉及的蛇毒止血藥物的制備方法達(dá)到了上述目的，其制備步驟如下一、按照蛇毒∶無離子水＝1.0g∶25ml的比例取蛇毒溶于無離子水，二、在10℃下靜置1小時，三、在-20℃冷凍離心機(jī)上離心，離心速度為10000轉(zhuǎn)/分鐘，四、將離心收得的上清液，通過10KD超濾膜過濾，五、通過柱層析，用PH＝5.6、濃度＝0.2mol/L的醋酸銨溶液梯度洗脫，洗脫速度為30ml/小時，六、集活力峰，濃縮脫鹽，縮膠濃度為3％，七、-4℃冷凍/干燥1小時，即得本發(fā)明所制備的純蛇毒止血藥，收率為2％。
本發(fā)明制備的止血藥外觀呈白色、凍干粉狀，無特殊氣味，易溶于水，溶液無色、澄清，無肉眼可見的沉淀。
人體體外促凝試驗將0.1ml新鮮人血漿，在37℃水浴中溫浴1分鐘，加入蒸餾水配置的本品0.1ml，濃度為30μg/ml，人血漿凝固時間不超過60秒，最短可達(dá)15.84秒。
本止血藥是從國產(chǎn)毒蛇毒液中分離得到的一種血液凝固酶(類凝血酶和類凝血激酶)，其凝血酶樣作用能促進(jìn)出血部位的血小板聚集，釋放一系列凝血因子，促使纖維蛋白原降解生成纖維蛋白原體，進(jìn)而形成纖維蛋白凝膠，促使出血部位凝血和止血。其類凝血激酶可激活凝血酶原，加速其凝血過程，縮短出血時間，減少出血量。本發(fā)明能作用于凝血過程的多個環(huán)節(jié)，是一種快速、有效、安全的新型止血藥，臨床上可廣泛應(yīng)用于呼吸道、消化道、肝膽管、泌尿道的止血，亦可用于顱腦、五官科、婦科、外傷和整形外科等各領(lǐng)域的出血性疾病及預(yù)防性手術(shù)出血。本發(fā)明與目前同類技術(shù)相比具有顯著的進(jìn)步，除了使人血漿凝固時間特別短外，其另一突出優(yōu)點是可以靜脈注射。
由上述制備方法生產(chǎn)的蛇毒止血藥外觀呈白色凍干粉狀，無特殊氣味，易溶于水。加1ml水溶解后其溶液無色、澄清，無肉眼可見沉淀。取0.1ml新鮮人血漿，在37℃水浴中溫浴1分鐘，加入本品0.1ml，(濃度30μg/ml，蒸餾水配置)，人血漿凝固時間不超過60秒。
實施例2制備蛇毒止血藥物的具體步驟如下
一、取蛇毒100g溶于2500ml無離子水；二、10℃下靜置1小時；三、在離心機(jī)上離心，離心速度10000轉(zhuǎn)/分鐘，溫度-20℃；四、將離心收得的上清液，通過10KD超濾膜過濾；五、通過柱層析，填料為Sephadex C25，用PH＝5.6、濃度＝0.2mol/L的醋酸銨溶液梯度洗脫，洗脫速度為30ml/小時；五、收集活力峰，濃縮脫鹽，縮膠濃度為3％；六、-4℃下冷凍干燥1小時，即得純化的蛇毒止血藥，收率為2％。
由上述制備方法生產(chǎn)的蛇毒止血藥外觀呈白色凍干粉狀，無特殊氣味，易溶于水。
權(quán)利要求
1.蛇毒止血藥物的制備方法，其制備步驟特征如下一、按照蛇毒∶無離子水＝1.0g∶25ml的比例取蛇毒溶于無離子水，二、在10℃下靜置1小時，三、在-20℃冷凍離心機(jī)上離心，離心速度為10000轉(zhuǎn)/分鐘，四、將離心收得的上清液，通過10KD超濾膜過濾，五、通過柱層析，用PH＝5.6、濃度＝0.2mol/L的醋酸銨溶液梯度洗脫，洗脫速度為30ml/小時，六、收集活力峰，濃縮脫鹽，縮膠濃度為3％，七、-4℃冷凍/干燥1小時，即得本發(fā)明所制備的純蛇毒止血藥，收率為2％。
全文摘要
本蛇毒止血藥物的制備方法生產(chǎn)是1.將蛇毒溶于無離子水，2.經(jīng)高速冷凍離心，3.取上清夜通過10KD超濾膜，4.經(jīng)柱層析，5.用NH4Ac溶液梯度洗脫，6.收集活力峰，7.冷凍干燥，即得本方法制備的蛇毒止血藥。本發(fā)明產(chǎn)品能作用于凝血過程的多個環(huán)節(jié)，是一種快速、有效、安全的新型止血藥，臨床上可廣泛應(yīng)用于呼吸道、消化道、肝膽管、泌尿道的止血，亦可用于顱腦、五官科、婦科、外傷和整形外科等各領(lǐng)域的出血性疾病及預(yù)防性手術(shù)出血。除了使人血漿凝固時間特別短外，其另一突出優(yōu)點是可以靜脈注射。
文檔編號A61P7/04GK1433779SQ0311731
公開日2003年8月6日 申請日期2003年2月18日 優(yōu)先權(quán)日2003年2月18日
發(fā)明者羅勇剛, 葉立人 申請人:成都諾迪康生物制藥有限公司, 成都五都生物高科技有限公司