專利名稱：三環－[5.2.1.0的制作方法
技術領域：
本發明涉及含有外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯的藥物制劑，含有作為活性成分的外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯用于治療生殖器皰疹、唇皰疹、AIDS、腫瘤或自身免疫疾病的藥物，以及制備三環-[5.2.1.02.6]-癸烷-9-醇和三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯的純立體異構體的方法。
與病毒性疾病的抗爭具有相當的挑戰性，因為病毒利用機體內在的機制自我繁殖。而且，通過快速突變，病毒能在非常短的時間之后，使最初有效的治療劑失效。結果，不斷地需要新的和更有效的抗病毒疾病的藥物。
專利說明書US 4,602,037描述了具有通式I的黃酸基衍生物 其中R1為被取代的或未取代的芳基或烷基基團，還描述了其作為抗病毒劑的用途。披露的作為R1實例的是環十二烷基、十二烷基、芐基、環己基、金剛烷基、三環-[5，2，1，02，6]-癸基、4-異冰片基環己基和二環-[2，2，11，4]-庚基。
US 4,981,869描述了與US 4,602,037相同的化合物作為抗癌劑的用途。
US 4,851,435描述了離子型去垢劑作為通式I黃酸基衍生物的增效助劑的用途。
WO 96/14841披露了通式I黃原酸酯和助劑，與基于脂質或類固醇的載體物質一體化。與載體物質一體化的設計，用于改善藥劑的耐受性。
非在先公開的DE 101 17 728披露了一種藥物制劑，包含黃原酸酯、視需要一種增強活性的助劑和用于減輕黃原酸酯和活性增強助劑的刺激作用的乳化劑。該乳化劑相當于WO 96/14841中所述的載體物質。然而，與WO 96/14841相比，按照DE 101 17 728，活性成分和乳化劑僅僅是被混和的。活性成分與載體的一體化不再是必要的，這大大簡化了制備方法。
在所有這些出版物中，優選的化合物中包括三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯。三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯以外/外、外/內、內/外和內/內四種不同形式的異構體存在。上述出版物使用非精確定義的異構體混合物。專利說明書US 4,602,037描述了二環-[2，2，11，4]-庚基的外型和內型異構體，并且稱其具有相同的抗病毒作用。
現在，令人驚奇地發現，純異構體的三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯與現有技術中描述的異構體混合物相比，具有明顯改善的抗病毒功效。純外/外異構體的抗病毒作用比包括83％外/外異構體和17％外/內、內/外和內/內異構體的混合物強約4-10倍。這種混合物由市售三環-[5.2.1.02.6]-癸烷-9-醇與堿金屬和CS2在惰性溶液中反應而得。
因此，本發明涉及包含純外/外三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯作為活性成分的藥物制劑和藥物。按照本發明的藥物適用于治療病毒性疾病、腫瘤和自身免疫疾病。作為純異構體在此涉及除了指定的異構體外，還包括不多于5％，優選不多于1％和特別優選少于0.1％的其它可能的異構體。
令人驚奇地發現，可以通過蒸餾來分餾三環-[5.2.1.02.6]-癸烷-9-醇的外/外、外/內、內/外和內/內異構體，在轉化成黃原酸酯的過程中，純的異構體保留下來。
因此，本發明也涉及三環-[5.2.1.02.6]-癸烷-9-醇和三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯的純異構體的制備。
除了活性成分，按照本發明的藥物還包括普通的賦型劑和助劑。只要不妨礙按照本發明的黃原酸酯的作用和穩定性，還可以包括其它活性成分。
特別是，加入由US 4,851,435中公開的助劑，優選離子型去垢劑，并特別優選含6-19個碳原子的脂肪酸或其鹽。特別優選十酸、十一酸或十二酸的鉀鹽。活性增強助劑也可以是含8-18個碳原子的脂肪族基團的硫酸鹽。特別優選月桂酸硫酸鈉。此外助劑還可以是去氧膽酸或其藥學上可耐受的鹽或膦酸。
而且，活性成分和可能的助劑，可以與按照WO 96/14841中的基于脂質或類固醇的載體物質一體化，特別是與如膽固醇、膽甾烷醇、膽酸、菠菜甾醇和α，β，γ-谷甾醇的類固醇一體化。特別是，活性成分和可能的助劑，與按照DE 101 17 728中的載體物質混合。特別優選膽固醇。磷脂也是適宜的載體物質，特別是磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇或硬脂酰胺。
特別優選的制劑包含外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯和作為活性增強助劑的癸酸的Na或K鹽和膽固醇。特別是，一份黃原酸酯和一份癸酸鉀鹽和四份膽固醇合用。
另一個優選的制劑包含外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯、磷脂酰膽堿和和作為活性增強助劑的癸酸的Na或K鹽。特別是，一份黃原酸酯和一份癸酸和四份磷脂酰膽堿合用。
按照本發明的藥物以口服、胃腸道外途徑和局部的給藥形式，以及以注射液的形式制備。優選以軟膏的形式局部應用，其中用親脂性物質作為軟膏基質。優選使用凡士林作為軟膏基質。
藥物劑量取決于疾病的嚴重程度和病程，與用異構體混合物給藥相比，通過按照本發明的黃原酸酯純異構體的更高功效可以使劑量減小。典型地，將包含濃度為0.5至10％，特別是1至5％黃原酸酯的軟膏每天多次涂敷在需要治療的皮膚上。
下列實施例進一步說明本發明，但不限制本發明的范圍。
實施例1制備外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸烷-9-醇市售三環-[5.2.1.02.6]-癸烷-9-醇異構體的混合物于49℃，真空(10-4托)蒸餾。收集到的第一份餾分就是純的外/外異構體。異構體用NMR光譜鑒定。
圖1顯示了第一份餾分的部分1H-NMR圖譜。用Bruker DRX 250型光譜儀于250MHz，以具有CHCl3的CDCl3溶液作為標準測定。外/外異構體在3.7和3.8ppm之間顯示雙峰。圖2顯示了異構體混合物相應的光譜。其它異構體在約4.0ppm，以及4.1和4.3ppm之間有峰。
實施例2制備外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯457g(約3mol)的外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸烷-9-醇在保護氣體(氮氣)中，于150至160℃，逐份加入攪拌混合總量為19.55g的鉀(去除表皮之后)。將混合物保持在這一溫度下，直至所有的金屬轉化。隨后，真空蒸餾除去過量的醇。將醇化物真空干燥，并溶解于500ml四氫呋喃。在冷卻的條件下，逐份加入31ml(0.5mol)溶于150ml乙醚的CS2。混合物于40℃攪拌1小時。加入1L無水乙醚，沉淀出黃原酸酯，抽濾收集沉淀，并在過濾器上用乙醚徹底沖洗。用乙醇重結晶后，得到104g(理論產量的78％)黃色針晶。純品用NMR光譜鑒定。
實施例3通過測量致細胞病變的作用來測定外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基黃原酸酯對皰疹繁殖的抑制。為此，將猴腎臟細胞(Rita品系)接種于Linbro平板中。24小時后，將50個噬斑形成單位的皰疹單式病毒1加入每個培養基中。吸附1小時后加入調配為pH6.8的新鮮培養基基質。用純外/外異構體或包含83％外/外異構體的異構體混合物各4個培養基，使用以下濃度0，5，10，15或20μg/ml處理。6天后，用顯微鏡分析培養基。結果顯示于圖3。作為病毒繁殖的結果(致病變的作用)，未處理的培養基的細胞完全被溶解。所有用外/外異構體處理過的培養基沒有致細胞病變作用的跡象。這意味著即使5μg/ml濃度的藥物也能完全抑制病毒繁殖。異構體混合物僅在20μg/ml濃度下顯示出這種作用。
實施例4通過測量病毒繁殖來測定外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基黃原酸酯對皰疹繁殖的抑制。為此，將猴腎臟細胞(Rita品系)接種于Linbro平板中。24小時后，將100個噬斑形成單位的皰疹單式病毒1加入每個培養基中。吸附1小時后，加入調配為pH6.8的新鮮培養基基質。用純外/外異構體或包含83％外/外異構體的異構體混合物各4個培養基，使用以下濃度0，5，10或15μg/ml處理。四天后，用噬斑測定確定培養基上清液的病毒濃度。計算每個濃度的平均值并標入如圖4所示的劑量-作用曲線。由曲線測定抑制病毒繁殖50％所需的濃度(IC50)。測出0.6μg/ml外/外異構體的IC50。測出異構體混合物的IC50是7.6。這意味著純外/外異構體使病毒繁殖降低50％所需的濃度比異構體混合物低10倍。
權利要求
1.包含通式1黃原酸酯的藥物制劑， 其中R1為三環-[5.2.1.02.6]-癸基，R2為金屬原子、任選被取代的烷基、烷氧基、氨基或銨基團或鹵素，其特征在于，是純的外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯。
2.根據權利要求1所述的藥物制劑，其特征在于，R2為鈉或鉀原子，或二甲基甘氨酰酯或甲酯。
3.根據權利要求1或2所述的藥物制劑，其特征在于，包含用于降低黃原酸酯刺激作用的類固醇或磷脂。
4.根據權利要求3所述的藥物制劑，其特征在于，包含膽固醇或磷脂酰膽堿。
5.根據權利要求3或4所述的藥物制劑，其特征在于，基于每一份黃原酸酯，包含1至10份，優選2至4份類固醇或磷脂。
6.根據權利要求1至5之一所述的藥物制劑，其特征在于，包含離子型去垢劑，優選含6至19個碳原子的脂肪酸或含8至18個碳原子的烷基硫酸鹽，作為增強黃原酸酯活性的助劑。
7.根據權利要求1至5之一所述的藥物制劑，其特征在于，包含去氧膽酸或其藥學上可耐受的鹽，作為增強黃原酸酯活性的助劑。
8.根據權利要求1至5之一所述的藥物制劑，其特征在于，包含膦酸，作為增強黃原酸酯活性的助劑。
9.制備三環-[5.2.1.02.6]-癸烷-9-醇的純的立體異構體的方法，其特征在于，用減壓蒸餾來分餾立體異構體的混合物。
10.制備三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯純的立體異構體的方法，其中純異構體的三環-[5.2.1.02.6]-癸烷-9-醇與堿金屬或金屬氫化物反應，產生醇化物，然后將醇化物溶解于惰性溶液，通過加入CS2通過以制備黃原酸酯。
11.用于治療生殖器皰疹、唇皰疹、AIDS、腫瘤或自身免疫疾病的藥物，其特征在于，包含根據權利要求1至8任何一項所述的藥物制劑作為活性成分。
12.根據權利要求11所述的藥物，其特征在于，它是軟膏或霜劑。
13.純的外/外-三環-[5.2.1.02.6]-癸-9-基-黃原酸酯在制備用于治療生殖器皰疹、唇皰疹、AIDS、腫瘤或自身免疫疾病的藥物中的用途。
全文摘要
本發明涉及包含外/外－三環－[5.2.1.0
文檔編號A61K31/56GK1589142SQ02822809
公開日2005年3月2日 申請日期2002年11月2日 優先權日2001年11月17日
發明者E·阿姆特曼 申請人:拜奧斯菲恩斯股份公司