麻醉椒內(nèi)酯組合物及其使用方法

專利名稱：麻醉椒內(nèi)酯組合物及其使用方法
相關(guān)申請(qǐng)的交叉參考本申請(qǐng)要求2002年1月22日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)60/351,167、2001年11月30日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)10/010,201以及2001年5月11日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)09/853,304的優(yōu)先權(quán)，這些專利申請(qǐng)作為參考文獻(xiàn)被引入本文。
背景人們相信麻醉椒(kava)(卡瓦胡椒(Piper methysticum Forst.))存在于有記載歷史之前。認(rèn)為該植物起源于新幾內(nèi)亞島/印度尼西亞地區(qū)，人們相信波利尼亞探險(xiǎn)家使其從一個(gè)島嶼向另一個(gè)島嶼傳播。已知大洋洲(即，密克羅尼西亞、美拉尼西亞和波利尼西亞的太平洋島群)地區(qū)的島民數(shù)世紀(jì)以來在禮儀和典禮上引用一種飲料，該飲料也稱作麻醉椒，是從麻醉椒的根莖得來的，引用其的原因是據(jù)報(bào)道它具有鎮(zhèn)靜作用和促進(jìn)社交能力的作用。這種根莖和飲料顯然是在JamesCook上校于1768年南太平洋探險(xiǎn)之后所著的西方世界(Westernworld)中被首次描述。圍繞麻醉椒的使用有許多神話和奇聞?shì)W事，這些神話和奇聞?shì)W事從一種文化到另一種文化各不相同。
已知麻醉椒根的提取物中含有一類被稱為麻醉椒內(nèi)酯(kavalactone)的結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物。已知至少存在16種這一化學(xué)類別化合物。提取物的松馳作用(即，鎮(zhèn)靜作用、睡眠誘導(dǎo)作用)是由于這類中的某些化合物所引起的。麻醉椒內(nèi)酯具有低生物利用度；實(shí)際上它們幾乎不溶于水。因此，口服給藥背景下的生物利用度歷來是必須指出的一個(gè)問題。麻醉椒內(nèi)酯的作用機(jī)制仍不確知，以及它們對(duì)細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素的影響不清楚。
細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素12(IL-12)介導(dǎo)對(duì)發(fā)炎刺激的急相反應(yīng)、增強(qiáng)巨噬細(xì)胞及其它細(xì)胞的殺微生物功能和促進(jìn)特定的淋巴細(xì)胞應(yīng)答。例如參見Fearon和Locksley，科學(xué)(Science)，272卷50頁(yè)(1996)。最近，體內(nèi)試驗(yàn)提示，在對(duì)炎癥如膿毒病(Zisman等人，歐洲免疫學(xué)雜志，27卷2994頁(yè)(1997))、膠原質(zhì)誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(Malfait等人，臨床和實(shí)驗(yàn)免疫學(xué)，111卷377頁(yè)(1998))、建立性結(jié)腸炎(美國(guó)專利5,853,697)、實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(Leonard等人，實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，181卷381(1995))、實(shí)驗(yàn)性自身免疫性眼色素層視網(wǎng)膜炎(Yokoi等人，歐洲免疫學(xué)雜志，27卷641頁(yè)(1997))、牛皮癬(Turka等人，Mol.Med.，1卷690頁(yè)(1995))和環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的糖尿病(Rothe等人，Diabetologia，40卷641頁(yè)(1997))的治療作用中，IL-12的產(chǎn)生受到抑制。因此，具有抑制IL-12活性的化合物為對(duì)付這些及其它IL-12介導(dǎo)的疾病的治療對(duì)策提供了新方法。
概述本發(fā)明在某種程度上是以意外地發(fā)現(xiàn)三個(gè)麻醉椒內(nèi)酯二氫醉椒素、二氫醉人素和醉椒素(結(jié)構(gòu)如下所示)具有IL-12抑制活性為基礎(chǔ)的。
二氫醉椒素 醉椒素
二氫醉人素 同樣地，本發(fā)明的化合物、組合物和方法可用于治療受試者體內(nèi)IL-12介導(dǎo)的疾病或者病征(如，與IL-12過量產(chǎn)生相關(guān)的病癥)。IL-12介導(dǎo)的疾病或者病征是指涉及到IL-12活性的疾病或者病征，如那些IL-12與疾病進(jìn)程的信號(hào)傳輸、介導(dǎo)、調(diào)節(jié)或者調(diào)控有關(guān)的疾病或者病征。與IL-12過量產(chǎn)生相關(guān)的病癥包括那些以IL-12的過量產(chǎn)生為基礎(chǔ)的病癥。
在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及含有1-90wt％(如，1-40wt％、1.5-30wt％、2-25wt％或者含下限為1-89wt％之間的任何整數(shù)wt％和含上限是2-90wt％之間的任何整數(shù)wt％的任何范圍內(nèi))的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯以及一種藥物可接受載體的藥用軟膏劑。本文的術(shù)語(yǔ)“活性麻醉椒內(nèi)酯”僅指二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素或者其組合。在另一個(gè)方面，組合物(如藥用軟膏劑)及使用方法為那些其中二氫醉椒素和二氫醉人素為合成的，也就是說，不是直接由根提取得來而是使用一個(gè)或多個(gè)化學(xué)變化反應(yīng)合成的組合物和使用方法。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明是含有含活性麻醉椒內(nèi)酯材料層的貼片(例如參見美國(guó)專利5,186,938)。更準(zhǔn)確地說，所述材料層如墊片或者壓敏粘合劑用作用于接受1-90wt％(如，1-40wt％、1.5-30wt％、2-25wt％或者含下限為1-89wt％之間的任何整數(shù)wt％和含上限是2-90wt％之間的任何整數(shù)wt％的任何范圍內(nèi))的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯的基材?；钚月樽斫穬?nèi)酯可以是含有1-90wt％(如，1-40wt％、1.5-30wt％、2-25wt％或者含下限為1-89wt％之間的任何整數(shù)wt％和含上限是2-90wt％之間的任何整數(shù)wt％的任何范圍內(nèi))的與材料層關(guān)聯(lián)(如浸漬、嵌入或者涂布在表面上)的活性麻醉椒內(nèi)酯的組合物形式。貼片選擇性地具有與材料層的一邊緊密粘結(jié)的保護(hù)層，該保護(hù)層可抵制活性麻醉椒內(nèi)酯的通過。
本發(fā)明也涉及用于治療(如，醫(yī)治、預(yù)防或者改善)與IL-12過量產(chǎn)生相關(guān)的病癥的方法，所述方法包括對(duì)需治療的受試者(如人、狗、貓)施用有效量的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯。治療方法對(duì)疾病本身或者癥狀有效。所述效果可以是客觀的，即可測(cè)量的物理效應(yīng)(如，更大的活動(dòng)范圍、腫脹減小、皮疹面積減小)，或者主觀的，即以受試者的感覺或者知覺為基礎(chǔ)(如，刺激減小、痛苦減小、總的緩解感覺)?？梢酝ㄟ^本方法治療的病癥包括結(jié)腸炎、克羅恩疾病、糖尿病、腦脊髓炎、多發(fā)性硬化、骨關(guān)節(jié)炎、牙周炎、牛皮癬、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、膿毒病和眼色素層視網(wǎng)膜炎。
本發(fā)明也涉及用于治療(如，醫(yī)治、預(yù)防、緩解或者改善)疼痛的方法，該方法包括對(duì)需治療的受試者(如哺乳動(dòng)物、人、狗、貓、馬)施用有效量的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯。本治療方法對(duì)疼痛本身或者對(duì)其癥狀有效。所述效果可以是客觀的，即可測(cè)量的物理效應(yīng)(如燒灼感減小、疼痛減輕、腫脹減小、活動(dòng)性或者活動(dòng)范圍提高)，或者是主觀的，即以受試者的感覺或者知覺為基礎(chǔ)(如刺激減小、痛苦減輕、總的緩解感覺)?？梢酝ㄟ^本方法治療的病癥包括原發(fā)性或者繼發(fā)性痛覺過敏、與辣椒辣素相關(guān)的灼燒、肌筋膜疼痛、頑固性肌筋膜疼痛、骨關(guān)節(jié)炎疼痛、先占性(preemptive)痛覺缺失、神經(jīng)性疼痛和炎性疼痛。本文所述用于治療疼痛的化合物和組合物的給藥可以是局部的，包括通過任何含有本文所述的化合物或者組合物的貼片給藥。在一個(gè)方面，所述方法以單次施用或者給予本文所述的化合物或者組合物而提供約8-約24小時(shí)間的疼痛減輕。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及通過施用含有六個(gè)主要麻醉椒內(nèi)酯中(如脫甲氧羊高寧、二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素、醉人素和羊高寧)的任何一個(gè)或者任何其組合的組合物(如局部用組合物)治療需要緩解疼痛的受試者(如哺乳動(dòng)物、人、動(dòng)物、狗、貓、馬)的疼痛的方法。在另一個(gè)方面，本文的方法包括施用含有六個(gè)主要麻醉椒內(nèi)酯中(如脫甲氧羊高寧、二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素、醉人素和羊高寧)的任何一個(gè)或者任何其組合的組合物(如局部用組合物)，其中所述組合物基本不含有(如含有小于1％、小于0.5％、小于0-1％之間的任何百分比，或者為0％)任何的對(duì)氨基苯甲酸(PABA)、d-泛酸鈣或者蘆薈。在另一個(gè)方面，本文的方法包括施用含有六個(gè)主要麻醉椒內(nèi)酯中(如脫甲氧羊高寧、二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素、醉人素、羊高寧或其任何組合)的任何一個(gè)的組合物(如局部用組合物)，其中所述組合物進(jìn)一步含有任何的礦脂、蜂蠟或者植物油(如希蒙德木油)或者任何其組合。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及含有容器、組合物和標(biāo)簽的包裝產(chǎn)品，所述組合物含有置于容器中的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯，所述標(biāo)簽(如不干膠貼紙、產(chǎn)品插頁(yè))與容器一起使用并含有用于治療IL-12過量產(chǎn)生相關(guān)病癥的活性麻醉椒內(nèi)酯施用的用法說明。
本發(fā)明也提供了用于治療疾病(如IL-12介導(dǎo)的疾病或者病征(如骨關(guān)節(jié)炎)或者其它疾病(如纖維肌疼痛)的組合物，以及這些組合物用于生產(chǎn)前述疾病或者病征治療用藥物的用途。
本發(fā)明涉及從稱作卡瓦-卡瓦(kava-kava)的卡瓦胡椒(胡椒麻醉品，胡椒科)根莖中得到的高麻醉椒內(nèi)酯含量的組合物及其生產(chǎn)方法。所述組合物包括那些具有高麻醉椒內(nèi)酯含量的組合物以及包括那些含有高比例的麻醉椒內(nèi)酯7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素的組合物。另外，所述組合物及其生產(chǎn)方法也減少或者消除了卡瓦-卡瓦提取物中存在的某些化合物，所述化合物可能與一種或者多種不良反應(yīng)有關(guān)。
本發(fā)明的一個(gè)目的也是提供通過麻醉椒內(nèi)酯的氫化(如催化氫化)將四種活性卡瓦-卡瓦成分(如麻醉椒內(nèi)酯)轉(zhuǎn)變成兩種活性麻醉椒內(nèi)酯二氫醉椒素和二氫醉人素的方法。本發(fā)明在某種程度上是以對(duì)所述的四種活性麻醉椒內(nèi)酯可以被區(qū)分為兩組化合物基團(tuán)以及每組中兩種化合物基團(tuán)之間的區(qū)別在于分子中C-7和C-8(碳-碳鍵)連接處存在雙鍵(不飽和鍵)或者單鍵(飽和鍵)的理解為基礎(chǔ)的。麻醉椒提取物含有更高比例的四種麻醉椒內(nèi)酯(醉椒素、醉人素、二氫醉椒素、二氫醉人素)，這四種物質(zhì)經(jīng)過氫化生成更高比例的二氫醉椒素和二氫醉人素。另外，還原過程(如氫化還原)使得黃醉椒素(flavokawain)(或者其它卡瓦-卡瓦成分)側(cè)鏈內(nèi)的碳-碳雙鍵被還原而生成飽和的黃醉椒素衍生物(或者其它毒性小或者更易于分離的卡瓦-卡瓦成分衍生物)，所述衍生物在某種程度上改善顏色以及減少刺激作用。此外，黃醉椒素或者其它卡瓦-卡瓦成分暴露于堿水處理(如LiOH、NaOH)中也使得黃醉椒素或者其它卡瓦-卡瓦成分轉(zhuǎn)變成水溶性衍生物，該水溶性衍生物或者具有較少的顏色(以及較少的刺激)或者比含有不飽和側(cè)鏈的黃醉椒素或者原型卡瓦-卡瓦成分更容易從其它麻醉椒內(nèi)酯中分離(如除去、提取、層析、分離)。
在一個(gè)方面，本發(fā)明是富集7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素的氫化卡瓦胡椒根莖提取物(如麻醉椒內(nèi)酯提取物)，其中所述的提取物含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量的50％(如至少60％、至少70％、至少80％、至少為50-99％之間的任何整數(shù)％)的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素。
本發(fā)明的另一個(gè)方面是富集7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素并且含有減少的7，8-環(huán)氧羊高寧和7，8-環(huán)氧-5，6-脫氫醉椒素的氫化卡瓦胡椒根莖提取物(如麻醉椒內(nèi)酯提取物)，其中所述的提取物含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量50％的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素，并且含有每個(gè)小于0.01wt％的7，8-環(huán)氧羊高寧和7，8-環(huán)氧-5，6-脫氫醉椒素。
本發(fā)明的另一個(gè)方面是富集7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素并且含有減少的真菌毒素的氫化卡瓦胡椒根莖提取物(如麻醉椒內(nèi)酯提取物)，其中所述的提取物含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量50％的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素并且含有小于0.1wt％的真菌毒素。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明是含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量50％(如至少60％、至少70％、至少80％、至少為50-99％之間的任何整數(shù)％)的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素的卡瓦胡椒根莖干提取物的制備方法。該方法包括將原麻醉椒提取液在氫氣存在下使用催化劑進(jìn)行化學(xué)還原(如氫化)。本文所述方法可進(jìn)一步包括提取已粉碎的卡瓦胡椒根莖(卡瓦-卡瓦根莖)(通過使用有機(jī)溶劑的各種提取法，包括超臨界流體抽提)以獲得提取液。提取有機(jī)溶劑可以是任何合適的有機(jī)溶劑，包括任何的EtOH(80-100％)、MeOH(80-100％)、乙酸乙酯、三氯甲烷、丙酮或者其組合。本文所述的方法可進(jìn)一步包括將提取液在氫化反應(yīng)中進(jìn)行還原以獲得富集7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素的氫化混合物；真空過濾該氫化混合物而得到溶液；以及對(duì)溶液濃縮至干以得到含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量50％的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素的提取物。
在其它方面，本發(fā)明涉及本文所述的任何方法，其中氫化反應(yīng)在乙醇中進(jìn)行、氫化反應(yīng)在乙酸乙酯中進(jìn)行；氫化反應(yīng)在含有乙醇和乙酸乙酯的混合物中進(jìn)行；氫化反應(yīng)在乙酸乙酯和另一個(gè)溶劑的混合物中進(jìn)行；或者氫化反應(yīng)在除了甲醇之外的溶劑中進(jìn)行。在其它方面，本發(fā)明涉及本文所述的任何方法，其中全部氫化反應(yīng)在室溫下進(jìn)行；其中全部氫化反應(yīng)在大于5℃的溫度進(jìn)行；其中全部氫化反應(yīng)在溫度下限為約5-39℃之間的整數(shù)和上限是約6-40℃之間的整數(shù)的任何范圍內(nèi)進(jìn)行；或者其中全部氫化反應(yīng)在約15-30℃之間進(jìn)行。在其它方面，本發(fā)明涉及本文所述的任何方法，其中氫化反應(yīng)在大氣壓力下進(jìn)行；或者其中氫化反應(yīng)在加壓下(如大于1個(gè)大氣壓的氣壓，在帕爾氫化裝置中)進(jìn)行。在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及本文所述的任何方法，其中反應(yīng)開始時(shí)的反應(yīng)混合物(如原材料或者試劑與溶劑的混合物)本質(zhì)上是均勻的(催化劑或者其載體除外)。
本發(fā)明的另一個(gè)方面是本文所述的任何方法其中催化劑包括任何的鈀、鉑、鎳、鐵或者其組合的催化金屬；其中催化金屬是催化劑重量的0.001-5％；其中催化劑是活性炭載體上的鈀；或者其中鈀的量以活性炭載體上的鈀的重量為基礎(chǔ)，為約1-30wt％(如約1-10wt％、約為范圍的較低值是1-29wt％之間的整數(shù)wt％以及較高值是2-30wt％之間的整數(shù)wt％的任何范圍)。
本發(fā)明的另一個(gè)方面是本文所述的任何方法，其中過濾方法通過使用任何的助濾劑，包括CELITE、氧化鋁、硅膠或者FLORISIL而完成。本發(fā)明的另一個(gè)方面是本文所述的任何方法，所述方法進(jìn)一步包括使用堿的水溶液(如0.05-0.5N、0.05-1N、0.05-3N、0.05-5N、0.05-10N)在室溫下處理所述溶液以得到純提取液；和使用中性氧化鋁、硅膠或者FLORISIL通過色譜法對(duì)所述的純提取液進(jìn)行純化。在其它方面，所述方法是本文所述的那些方法，其中堿的水溶液是任何的LiOH、NaOH或者KOH溶液。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及本文所述的任何方法，所述方法包括向提取液中引入第二種溶劑。第二種溶劑可以是乙酸乙酯。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及本文所述的任何方法，其中從卡瓦胡椒的根莖中得到的干提取物比化學(xué)還原處理之前的干提取物含有更低含量的真菌毒素(如低至少50％、低至少10-90％之間的整數(shù)％)。
本發(fā)明也涉及用于減少含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量的50％的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素的卡瓦胡椒根莖干提取物中的真菌毒素量的方法，所述方法包括將原麻醉椒提取液在氫氣存在下使用催化劑進(jìn)行化學(xué)還原。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及本文所述的任何方法，其中卡瓦胡椒根莖干提取物比化學(xué)還原處理之前的干提取物含有更低含量的(如低至少50％、低至少10-90％之間的整數(shù)％)的7，8-環(huán)氧羊高寧和7，8-環(huán)氧-5，6-脫氫醉椒素。
本發(fā)明也涉及用于減少含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量的50％的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素的卡瓦胡椒根莖干提取物中7，8-環(huán)氧羊高寧和7，8-環(huán)氧-5，6-脫氫醉椒素?cái)?shù)量的方法，所述方法包括將原麻醉椒提取液在氫氣存在下使用催化劑進(jìn)行化學(xué)還原。
已知卡瓦-卡瓦提取物用于安神、誘導(dǎo)松弛和睡眠、對(duì)抗疲勞、用于尿路保健、用于氣喘病和風(fēng)濕癥和減少體重。提取物的松馳作用(即鎮(zhèn)靜作用、睡眠誘導(dǎo)作用)、止痛作用和抗微生物活性是由提取物中的某些化合物所引起的。在幾個(gè)研究中，將麻醉椒與許多包括苯二氮類的處方藥進(jìn)行了有利地比較，知道麻醉椒最普及的應(yīng)用是用作天然的抗焦慮藥。它亦稱民間醫(yī)藥，作為植物鎮(zhèn)定劑用于神經(jīng)過敏和過度興奮情況中的松馳、作為用于睡眠的藥劑。麻醉椒內(nèi)酯是造成許多被觀察到的效果的原因。
已知麻醉椒根的提取物含有一類被稱為麻醉椒內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物。已知這一化學(xué)類別中的至少十六種不同化合物。然而，發(fā)現(xiàn)四種麻醉椒內(nèi)酯分子醉椒素、二氫醉椒素、醉人素和二氫醉人素具有顯著的生物效應(yīng)。(M.Greewood-Robinson，Kava(第五章)，由Dell出版社出版，紐約，1999年)。特別是二氫醉椒素和二氫醉人素用作止痛藥或者疼痛緩解劑。(麻醉椒綜述Special review Herbalgram，第39卷，(1998)，The Journal of the American Botanical Council and theHerb Research Foundation Research Foundation)。因此，增加這些麻醉椒內(nèi)酯量的方法是有用的。
為了從天然草藥中獲得最大益處，希望制備含有活性組分比例增加的麻醉椒提取物。然而，從切實(shí)可行的觀點(diǎn)考慮，難以通過分級(jí)分離法和/或其它提純法分離某些活性組分，因?yàn)樵S多麻醉椒內(nèi)酯具有非常相似的官能團(tuán)、相似的極性和非常不同的外觀(如油、結(jié)晶)。在文獻(xiàn)中未報(bào)道特別用于將二氫醉椒素與二氫醉人素麻醉椒內(nèi)酯一同從麻醉椒內(nèi)酯提取混合物中分離的分離方法和純化方法。
在下面的附圖和說明書中闡述了本發(fā)明的一個(gè)或者多個(gè)方面的細(xì)節(jié)。本發(fā)明的其它特點(diǎn)、目的和優(yōu)點(diǎn)從說明書和權(quán)利要求書將變得顯而易見。
附圖詳述附

圖1說明六種麻醉椒內(nèi)酯的IL-12抑制活性。
詳述本發(fā)明在某種程度上是以意外發(fā)現(xiàn)特殊麻醉椒內(nèi)酯抑制IL-12的產(chǎn)生為基礎(chǔ)的，IL-12的過量產(chǎn)生涉及到許多疾病和病征。使用用于確定IL-12細(xì)胞因子抑制的細(xì)胞檢測(cè)方法測(cè)量了六種主要的麻醉椒內(nèi)酯(如脫甲氧羊高寧、二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素、醉人素和羊高寧)的IL-12細(xì)胞因子抑制活性。發(fā)現(xiàn)其中醉椒素、二氫醉椒素和二氫醉人素相對(duì)于其它麻醉椒內(nèi)酯而言具有更高的IL-12抑制活性。這些結(jié)果如附圖1所示。因此，含有三種活性麻醉椒內(nèi)酯即醉椒素、二氫醉椒素、二氫醉人素之一或者其組合的組合物可用于治療與IL-12過量產(chǎn)生有關(guān)的疾病或者病征。
活性麻醉椒內(nèi)酯醉椒素、二氫醉椒素、二氫醉人素或者其組合也用于通過施用(如局部給藥)有效量的本文所述的化合物或者組合物治療受試者(如哺乳動(dòng)物、人、狗、貓或者馬)的疼痛或者疼痛癥狀。另外，六種主要麻醉椒內(nèi)酯(如脫甲氧羊高寧、二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素、醉人素和羊高寧)或者任何其組合用于本文所述的疼痛或者疼痛癥狀的治療方法中。麻醉椒內(nèi)酯在局部軟膏劑中的使用可以提供比口服給藥更有效的給藥途徑，因?yàn)槁樽斫穬?nèi)酯不受到與口服生物利用度有關(guān)的首過效應(yīng)(如代謝、降解)的影響。在口服給藥的一小時(shí)內(nèi)各種酶催化過程使得麻醉椒內(nèi)酯發(fā)生降解。另外，本文所述的組合物中的局部載體可以與麻醉椒內(nèi)酯的親脂性質(zhì)協(xié)同地發(fā)生作用而提供更有利的麻醉椒內(nèi)酯向受試者(如哺乳動(dòng)物、人、狗、貓、馬)的疼痛部位的遞送方法(即通過皮膚而不是使用針進(jìn)行注射)。
回到附圖1，在如下IL-12抑制分析中檢驗(yàn)了六種麻醉椒內(nèi)酯脂多糖(LPS，Serratia marscencens)購(gòu)自Sigma(密蘇里州，圣路易斯)。人重組IFNg購(gòu)自Boehringer Mannheim(德國(guó)，曼海姆)。人外周血單核細(xì)胞，使用Ficall-Paque(瑞典，Uppsala，Pharmacia生物技術(shù)公司)通過離心作用進(jìn)行分離，在具有1×106細(xì)胞/孔的96-微孔板上的充有10％的FCS和抗菌素的RPMI培養(yǎng)基中制備而成。將人的PBMC和IFNγ(30U/mL)接觸16小時(shí)，然后在不同濃度的試驗(yàn)化合物存在下使用1mg/mL的LPS進(jìn)行刺激。20h后取無細(xì)胞的上清液用于測(cè)量細(xì)胞因子。使用MTS[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲氧苯基)-2-(4-硫代苯基)-2H-四唑](WI，Madison的Promega)的生物還原來評(píng)價(jià)細(xì)胞的生存能力。以化合物處理組的吸光度對(duì)無化合物的對(duì)照組的吸光度的比率評(píng)價(jià)細(xì)胞存活。使用ELISA試劑盒(麻省，劍橋的Endogen)并基本根據(jù)該廠家的用法說明分析人IL-12。還可以通過其它分析酶抑制活性的方法(如體內(nèi)、體外、動(dòng)物模型)來測(cè)量IL-12的抑制。
本發(fā)明在某種程度上也是以另一個(gè)意外發(fā)現(xiàn)為基礎(chǔ)的活性麻醉椒內(nèi)酯，即二氫醉椒素、二氫醉人素和醉椒素可以有效地以經(jīng)皮方式施用(如作為藥用軟膏劑、按摩油)?；钚月樽斫穬?nèi)酯依靠惰性載體中的均勻制劑在缺乏滲透促進(jìn)劑(如二甲亞砜、1-十二烷基氮雜環(huán)庚-2-酮、愈創(chuàng)木薁-3-磺酸鈉)的情況下有效地施用。因此，本發(fā)明的組合物可以作為軟膏劑而施用，因此避免了與口服給藥有關(guān)的生物利用度問題(如首過效應(yīng)、血液半衰期短、降解、細(xì)胞色素P450代謝、內(nèi)臟代謝、肝或者腎代謝、或者吸收)。這些給藥技術(shù)供二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素或者其組合的全身給藥或者局部給藥之用。本發(fā)明的藥用軟膏劑包括使得一種或者多種活性麻醉椒內(nèi)酯達(dá)到皮下水平和提供了超出化妝品或者皮膚藥物之外的效果，其在皮膚水平影響活性(如皮膚細(xì)胞的呼吸、再生和水化)。
本發(fā)明的軟膏劑組合物可以使用一種或者多種懸浮或者溶解在載體如礦物油、液體石油、白石油、丙二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯化合物、乳化蠟、水、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、聚山梨酸酯60、十六烷基酯蠟、十六烷醇、2-辛基十二烷醇和十八醇中的一種或多種活性麻醉椒內(nèi)酯進(jìn)行配制?？山邮艿妮d體可以包括水、溶劑、軟化劑、表面活性劑、防腐劑或者其組合。當(dāng)存在水時(shí)，水量可以是5-80wt％。除了水之外，可接受載體還可以含有相對(duì)揮發(fā)性溶劑如1-70wt％的C1-C3一元鏈烷醇(如甲醇或者乙醇)和0.1-30wt％的如硅油和合成酯形式的軟化劑。作為可接受載體的其它溶劑包括任何適于二氫醉椒素、二氫醉人素和醉椒素給藥的溶劑，如二甲亞砜、C1-C20醇、二醇和醚。陰離子、非離子或者陽(yáng)離子表面活性劑還可以被歸入生物學(xué)可接受載體中?？偙砻婊钚詣舛瓤梢詾?.1-40wt％。陰離子表面活性劑的實(shí)例包括皂類、烷基醚硫酸鹽和磺酸鹽、烷基硫酸鹽和磺酸鹽、烷基苯磺酸鹽、烷基和二烷基硫代琥珀酸鹽、C8-C20?；u乙基磺酸鹽、酰基谷氨酸鹽、C8-C20烷基醚磷酸鹽及其組合。非離子型表面活性劑的實(shí)例包括與相對(duì)于每摩爾疏水物為2-100摩爾的環(huán)氧乙烷或者環(huán)氧丙烷酸縮合的C10-C20脂肪醇或者酸疏水物；與2-20摩爾的烯化氧縮合的C2-C10烷基酚；乙二醇的一脂肪酸酯和二脂肪酸酯；甘油單脂肪酸酯；脫水山梨糖醇單和二C8-C20脂肪酸酯；嵌段共聚物(環(huán)氧乙烷/環(huán)氧丙烷)；聚氧化乙烯脫水山梨醇及其組合。防腐劑還可以被歸入生物學(xué)可接受載體中，防止?jié)撛诘挠泻ξ⑸锷L(zhǎng)，使用量可以為0.01-2wt％。防腐劑的實(shí)例包括對(duì)羥基苯甲酸烷基酯、乙內(nèi)酰脲衍生物、丙酸鹽和各種季銨化合物。每個(gè)防腐劑的選擇應(yīng)該以其與組合物中其它成分的相容性為基礎(chǔ)。本發(fā)明的軟膏劑可以施用到任何的特殊體表面(包括牙齦)。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)也提供用于治療與IL-12過量產(chǎn)生相關(guān)的病癥或者疼痛的方法，所述方法包括對(duì)需治療的受試者(如人、狗、貓)施用有效量的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯?；钚月樽斫穬?nèi)酯的有效量為每天0.01-100mg/千克體重的、另外地為每天0.5-75mg/千克體重的二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素或者其組合。所述有效量可以是前述范圍內(nèi)的或者是活性麻醉椒內(nèi)酯量的任何下述范圍內(nèi)的具體量，在所述范圍中下限是包含在0.01-99.99mg/kg體重之間的任何值以及上限是包含在0.02-100mg/kg體重之間的任何值。有效量用于單次治療或者聯(lián)合治療與IL-12過量產(chǎn)生相關(guān)的疾病或者病征或者疼痛或者疼痛癥狀。技術(shù)人員將理解，可能需要低于或者高于上述劑量的劑量。用于任何具體受試者(如人、狗、貓)的有效量和治療方案將取決于各種因素，包括使用的具體化合物的活性、年齡、體重、總的健康狀態(tài)、性別、飲食、給藥時(shí)間、排泄率、藥物組合、疾病、狀況或者癥狀的嚴(yán)重程度和病程、患者對(duì)疾病、狀況或者癥狀的易感性以及治療醫(yī)師或者獸醫(yī)的判斷。
為了實(shí)踐本發(fā)明方法，含活性麻醉椒內(nèi)酯的組合物可以口服、胃腸外、噴霧吸入、局部、直腸、鼻、頰、陰道、神經(jīng)周、硬膜上、通過離子電滲療法或者通過植入貯器的方式而施用。本文的術(shù)語(yǔ)“胃腸外”包括皮下、皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、病灶內(nèi)和顱內(nèi)注射或者輸注技術(shù)。
無菌注射制劑如無菌注射水或者油質(zhì)懸浮液可以根據(jù)本領(lǐng)域已知的技術(shù)使用合適的分散劑或者潤(rùn)濕劑(如Tween 80)和懸浮劑而配制。無菌注射制劑還可以是在無毒胃腸外可接受的稀釋液或者溶劑中的無菌注射溶液或者懸浮液，如在1，3-丁二醇中的溶液?？梢允褂玫目山邮芙橘|(zhì)或者溶劑為甘露糖醇、水、Ringer′s溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，通常使用的無菌固定油用作溶劑或者懸浮介質(zhì)(如合成的甘油一酯或者甘油二酯)。脂肪酸如油酸及其甘油酯衍生物用于注射劑的配制，天然的藥物可接受油如橄欖油或者蓖麻油特別是它們的聚氧乙烯化形式也用于注射劑的配制。這些油溶液或者懸浮液還可以含有長(zhǎng)鏈醇類稀釋劑或者分散劑、或者羧甲基纖維素或者相似的分散劑。其它通常使用的表面活性劑如Tweens或者Spans或者其它相似的通常用于藥物可接受固體劑型、液體劑型或者其它劑型的生產(chǎn)中的乳化劑或者生物利用度增強(qiáng)劑也可以用于制劑目的。
用于口服給藥的制劑可以是任何的口服可接受劑型，包括但不限于膠囊劑、片劑、乳劑和水懸液、分散液和溶液(包括例如飲料)。就用于口服用片劑而言，通常使用的載體包括乳糖和玉米淀粉。也典型地加入潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂。對(duì)于膠囊劑型的口服給藥而言，有用的稀釋劑包括乳糖和干玉米淀粉。當(dāng)水懸液或者乳劑口服給藥時(shí)，活性成分可以懸浮或者溶解在與乳化劑或者懸浮劑相組合的油相中。如果需要，可以添加某些甜味劑、調(diào)味劑或者著色劑。鼻氣霧劑或者吸入劑組合物可以根據(jù)藥劑領(lǐng)域著名的技術(shù)而配制并可以被制備成鹽水溶液，使用苯甲醇或者其它合適的防腐劑、提高生物利用度的吸收促進(jìn)劑、碳氟化合物和/或其它本領(lǐng)域已知的增溶劑或者分散劑。含活性麻醉椒內(nèi)酯的組合物還可以以栓劑或者植入裝置的形式而施用。植入裝置和相關(guān)技術(shù)在本領(lǐng)域是已知的以及用作需要連續(xù)或者定時(shí)地遞送本文所述的純麻醉椒內(nèi)酯化合物或者組合物的遞送系統(tǒng)。另外，植入裝置遞送系統(tǒng)用于純麻醉椒內(nèi)酯化合物或者組合物遞送的靶向特異點(diǎn)(如局部部位或者器官)。參見，Negrin CM，Delgado A，Llabres M和Evora C.，Biomaterials，22(6)，563(2001)。涉及交替遞送方法的定時(shí)釋放技術(shù)也可以用于本發(fā)明中。例如，以聚合物技術(shù)、控釋技術(shù)和成囊技術(shù)(如聚合或者脂質(zhì)體)為基礎(chǔ)的定時(shí)釋放制劑還可以用于本文所述的純麻醉椒內(nèi)酯化合物和組合物的遞送。含有純二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素或者其組合或者組合物的局部貼片也包括在本發(fā)明中。
可用于制備本發(fā)明的含活性麻醉椒內(nèi)酯的組合物的可接受載體包括但不局限于離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、自乳化藥物遞送系統(tǒng)(如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)、在藥物劑型中使用的表面活性劑(如Tweens或者其它相似的聚合物遞送基質(zhì))、緩沖物質(zhì)(如磷酸鹽)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、鹽或者電解質(zhì)(如硫酸精蛋白)、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態(tài)氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素基物質(zhì)、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。還可以有利地使用其它的增溶劑來增強(qiáng)二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素或者其組合的遞送。
在本發(fā)明中也提供用于遞送活性麻醉椒內(nèi)酯的貼片。貼片包括材料層(如聚合物、布料、紗布、繃帶)和1-90wt％(如1-40wt％或者含下限為1-89wt％之間的任何整數(shù)wt％和含上限為2-90wt％之間的任何整數(shù)wt％的任何范圍內(nèi))的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯。所述材料層的一面可以含有與它粘結(jié)的保護(hù)層以抵制活性麻醉椒內(nèi)酯組合物的通過。貼片可以另外地包括粘合劑以使貼片保持在受試者體表位。粘合劑是包括天然或者合成來源的組合物，當(dāng)粘合劑與受試者的皮膚接觸時(shí)，其暫時(shí)地粘結(jié)在皮膚上。它可以是耐水的?？梢詫⒄澈蟿┲糜谫N片上使得貼片與受試者的皮膚在持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間段內(nèi)保持接觸。可以制備具有如此粘性和粘合強(qiáng)度的粘合劑以至于其使得所述裝置粘著在受試者部位達(dá)到臨時(shí)接觸，然而，由于確定行為(如扯開、剝離或者其它有意清除)，粘合劑讓步于施加于裝置上的或者粘合劑本身的外部壓力，粘合接觸中斷。粘合劑可以是壓敏材料，也就是說，其可以供粘合劑(和欲粘著在皮膚上的裝置)通過施加到粘合劑或者裝置上的壓力(如推、摩擦)而貼緊皮膚的放置之用。也包括可剝膜片，其可以通過將凝膠或者糊狀作合物放置在由成膜聚合物(如聚乙烯醇)和粘合促進(jìn)聚合物(如疏水性丙烯酸酯或者甲基丙烯酸酯聚合物，如Pemulen TR2.RTM，購(gòu)自B.F.Goodrich公司)制成的保護(hù)層上而配制。另外地，可使用包括任何的一種或者多種活性麻醉椒內(nèi)酯的水凝膠組合物(例如參見美國(guó)專利5,961,479或者5,306,504)。
本發(fā)明也涵蓋了含有選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素或者其組合的純活性麻醉椒內(nèi)酯的藥物組合物。這些組合物用于治療IL-12介導(dǎo)的疾病或者病征、或者其它疾病(如纖維肌疼痛)、或者疼痛或者疼痛癥狀。本發(fā)明也涵蓋了通過對(duì)受試者施用含純麻醉椒內(nèi)酯的組合物而治療受試者的疾病或者病征(包括IL-12介導(dǎo)的疾病或者病征、疼痛、或者疼痛癥狀)的方法。受試者可以是人或者動(dòng)物(如狗、貓)。術(shù)語(yǔ)“純”是指90％或者更高水平。純活性麻醉椒內(nèi)酯或者其組合可以從天然(如根提取和純化)或者合成方法(如從天然或者合成材料合成)或其組合得到。
麻醉椒根的粗提取物(使用各種提取法(如簡(jiǎn)單溶劑浸泡、超臨界流體抽提)得到)可用作活性麻醉椒內(nèi)酯源而用于本發(fā)明組合物的配制。如果需要，活性麻醉椒內(nèi)酯可通過柱色譜法進(jìn)一步純化。它們還可以通過常規(guī)的化學(xué)方法從容易得到的原材料合成。例如參見Kostermans，Reclk.Trav.Chim.Pays-Bas.，70，79(1951)；Klohs等人，有機(jī)化學(xué)雜志，24卷，1829頁(yè)(1959)；Spino等人，四面體通訊，37卷，6503頁(yè)(1996)，每個(gè)作為參考文獻(xiàn)被引入本文。存在于組合物中的活性麻醉椒內(nèi)酯可以通過加入那些麻醉椒內(nèi)酯(得自天然或者合成源)被富集。三種活性麻醉椒內(nèi)酯(如二氫醉椒素、二氫醉人素和醉椒素)含有一個(gè)或者多個(gè)不對(duì)稱中心，因此可以作為外消旋物和外消旋混合物、單一對(duì)映異構(gòu)體、各自非對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體混合物存在。它們也可作為順式或者反式或者E-雙鍵或者Z-雙鍵同分異構(gòu)形式存在?？梢允褂肐L-12分析檢驗(yàn)所有這些同分異構(gòu)形式以確定它們的抑制活性。
在各種試圖選擇性還原C-7和C-8間的雙鍵而不還原分子內(nèi)其它官能度(如γ-吡喃酮環(huán)內(nèi)的雙鍵)的努力失敗后，使用以活性炭載體上的鈀、鉑或者其組合為基礎(chǔ)的催化劑通過催化氫化而完成需要的還原。因此，麻醉椒內(nèi)酯的生產(chǎn)方法包括那些包括對(duì)含有不飽和官能團(tuán)(如碳-碳雙鍵)的麻醉椒內(nèi)酯(如化合物、卡瓦-卡瓦根的提取物、卡瓦胡椒根莖提取物)進(jìn)行催化氫化的方法。在一個(gè)方面，本文方法中的氫化反應(yīng)引起還原(如氫化、催化氫化、存在或者不存在催化劑的氫氣處理)以給出麻醉椒內(nèi)酯，包括那些含有與化合物的γ-吡喃酮環(huán)或者內(nèi)酯環(huán)連接的飽和官能團(tuán)的麻醉椒內(nèi)酯。
麻醉椒根的粗提取物(使用各種提取法(如簡(jiǎn)單溶劑浸泡、超臨界流體抽提)獲得)可以用作活性麻醉椒內(nèi)酯源用于本發(fā)明組合物的配制和方法。溶劑浸泡可以使用任何的標(biāo)準(zhǔn)溶劑如醇(如甲醇、乙醇)、乙酸乙酯、三氯甲烷、丙酮、二氯甲烷、醚(如乙醚)或者其組合而完成。可以使用那些本領(lǐng)域描述的超臨界流體抽提方法(例如參見V.J.Krukonis，ACS Symposium Series 289(1984)，155-175頁(yè))。
麻醉椒內(nèi)酯包括在卡瓦-卡瓦根中發(fā)現(xiàn)的任何化合物或者從卡瓦-卡瓦提取物得來的在其結(jié)構(gòu)中含有一個(gè)內(nèi)酯環(huán)官能度的化合物。麻醉椒內(nèi)酯包括，例如任何的(1)羊高寧，(2)醉椒素，(3)醉人素，(4)7，8-二氫醉人素，(5)脫甲氧羊高寧，(6)7，8-二氫醉椒素，(7)二氫脫甲氧羊高寧，(8)7，8-二氫羊高寧，(9)11-羥基羊高寧，(10)7，8-二氫脫甲氧羊高寧，(11)11-甲氧基-12-羥基脫氫醉椒素，(12)10-甲氧基羊高寧，(13)11-甲氧基羊高寧，(14)11，12-二甲氧基-7，8-二氫醉椒素，(15)5，6-二氫羊高寧，(16)5，6，7，8-四羥基羊高寧和(17)5，6-二氫-5-羥基-4-甲氧基-6-(2-苯基乙基)-2H-吡喃-2-酮。例如參見CD-ROM上的天然產(chǎn)物字典，Chapman & Hall/CRC出版社，ISBN/ISSN0412491508，v.8.2。
可以使用標(biāo)準(zhǔn)的物理化學(xué)和波譜分析技術(shù)識(shí)別這些化合物，包括核磁共振(包括質(zhì)子、碳探測(cè)、1維、2維)、紅外光譜法、質(zhì)譜學(xué)、高效液相色譜法、薄層色譜法、元素分析、紫外分光法等等。
本發(fā)明也涉及用于提供基本無色的麻醉椒提取物的生產(chǎn)方法以及通過所述方法生產(chǎn)的基本無色的麻醉椒提取物。使用有機(jī)溶劑或者含水有機(jī)溶劑的常用提取法生成具有強(qiáng)黃顏色的提取物，這主要是由于提取物含有被稱為黃醉椒素(包括如flavokavins、flavokavains、flavokavin A、flavokavin B、dihydrokavain-5-ol)的化合物以及其它的天然基質(zhì)顏料。這些顯色材料經(jīng)常誘導(dǎo)不良副作用，如稱作“麻醉椒皮膚病”的鱗狀皮疹，當(dāng)長(zhǎng)期或者大量地使用黃色粗制麻醉椒提取物時(shí)出現(xiàn)該副作用。當(dāng)與皮膚接觸時(shí)，含有這些材料的提取物也與不受歡迎的(如不舒服、難看、變色)沾染有聯(lián)系。在一個(gè)方面，這些基本無色的提取物制劑基本不含有黃醉椒素，也就是說小于1％(如(在千分之一級(jí))小于1wt％黃醉椒素的任何百分比)。這些包括那些基本不含有黃醉椒素的基本無色麻醉椒提取物或者其制劑理想地用于給予麻醉椒內(nèi)酯的保健益處，而避免與典型的麻醉椒提取物制劑有關(guān)的不良效應(yīng)(如皮膚病、沾染、皮膚刺激)。
也有某些關(guān)于卡瓦-卡瓦提取物對(duì)某些肝臟毒性現(xiàn)象的報(bào)告，而迄今尚未完全具體化，這種事件中一個(gè)可能的因素可能與提取物中存在的真菌毒素有關(guān)。真菌毒素(從真菌源如曲霉和鐮刀霉得到的天然存在的毒素)與肝病之間的關(guān)系為大家所熟知。實(shí)例包括黃曲霉毒素B1(T.Asao等人，J.Am Chem.Soc.，1963年，85卷，1705頁(yè))，黃曲霉毒素G1(B.E.Nesbitt等人，自然(倫敦)，1962年，195卷，1062頁(yè))，黃曲霉毒素GM1(J.G.Heathcote等人，四面體，1969年，25卷，1497頁(yè))，黃曲霉毒素M1(C.W.Hozapfel等人，四面體通訊，1966年，2799頁(yè))，赭曲毒素(K.J.Van der Merwe，J.Chem.Soc.，1965年，7083頁(yè))，柄曲菌素(J.E.Davis等人，1962年，4179頁(yè))，Rubroskyrin(A.C.Ghosh等人，Appl.Environ.Microbiol.，1978年，35卷，563頁(yè))，僅舉幾個(gè)例子。請(qǐng)參閱C.W.Hesseltine，Mycotoxins andPhycotoxins，ElsevierAmsterdam(1986)和該文的參考文獻(xiàn)。大部分的這些化合物含有不穩(wěn)定雙鍵(其在正常代謝過程中易于氧化成導(dǎo)致毒性及其它疾病進(jìn)程的化合物(如DNA烷化劑、致癌物質(zhì))和/或?qū)λ鼈兊亩拘允遣豢扇鄙俚腃OOH取代基。麻醉椒提取物的氫化可以將含有不穩(wěn)定碳-碳雙鍵的真菌毒素轉(zhuǎn)變成相應(yīng)地具有較小毒性或者無毒或者更加容易地分離的二氫形式。堿處理也將真菌毒素中的COOH官能團(tuán)轉(zhuǎn)變成解離形式(COO-)，這種形式可以容易地被提取和分離。因此，本發(fā)明提供了用于消除/或者減小引起有害副作用的真菌毒素的便利方法。
兩個(gè)含環(huán)氧化物的衍生物從麻醉椒提取物級(jí)分中分離。一個(gè)是7，7-環(huán)氧羊高寧(R＝OCH3)(參見日本KOKAI 2001-316260A)。另一個(gè)是7，8-環(huán)氧-5，6-二氫醉椒素(R＝H)(參見J.Indian Chem.Soc.，63卷，1986，780頁(yè))，參見下式。兩個(gè)分子在芐基位置都含有非?；顫姷沫h(huán)氧化物部分，其涉及到肝損害的發(fā)生。這兩個(gè)天然的麻醉椒內(nèi)酯在長(zhǎng)期和大量使用時(shí)具有引起肝臟毒性的潛能。這些活潑的麻醉椒內(nèi)酯可以與DNA、酶類和蛋白質(zhì)形成共價(jià)鍵而引起肝壞死。因此，本發(fā)明方法也將這些不需要的天然麻醉椒內(nèi)酯環(huán)氧化物轉(zhuǎn)變成(通過氫化)羥基形式(R＝H，OCH3)，該種形式具有較小毒性和可以分離或者分開。

氫化是指將化合物暴露在氫氣中的化學(xué)反應(yīng)(如氫化)。這一反應(yīng)可以在催化劑存在或者不存在下進(jìn)行以及可以在大氣壓或者高壓下(如在帕爾發(fā)生器中)進(jìn)行。催化劑是任何能促進(jìn)所述反應(yīng)的化學(xué)組合物，例如，氫化催化劑包括碳載鈀金屬、乙酸鈀、二氯化釕、氧化鉑、氯化-(三苯基膦)銠等等。催化劑可以包括這樣的催化金屬，所述催化金屬含有任何能促進(jìn)需要的反應(yīng)的金屬，如鈀、釕、鎳、銠、鉑等等。也參見P.N.Rylander，Hydrogenation Methods，科學(xué)出版社，紐約，1985年。標(biāo)準(zhǔn)條件和催化劑在本領(lǐng)域是已知的，包括那些在R.Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCH出版社(1989)、T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in OrganicSynthesis，第三版，John Wiley and Sons(1999).L.Fieser和M.Fieser，F(xiàn)ieser and Fieser′s Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1994)和L.Paquette等編輯，Encyclopedia of Reagents for OrganicSynthesis，John Wiley and Sons(1995)及其后續(xù)版中所列的那些標(biāo)準(zhǔn)條件和催化劑。助濾劑是能將混合物的一種成分與另一種成分分離的任何適當(dāng)?shù)倪^濾器，包括紙、CELITE、氧化鋁、FLORISIL、二氧化硅、玻璃(燒結(jié))等等。堿物質(zhì)包括任何的堿性物質(zhì)或者鹽，如氫氧化鋰、氫氧化鉀或者氫氧化鈉。適用于這些方法的設(shè)備、溶劑、化學(xué)試劑和催化劑可以從商業(yè)上獲得，包括例如Aldrich化學(xué)公司、Fluka AG和東京化學(xué)工業(yè)公司。
麻醉椒內(nèi)酯(如二氫醉椒素、二氫醉人素)含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心以及因此可以作為外消旋物和外消旋混合物、單一光學(xué)異構(gòu)體、單獨(dú)非對(duì)映體和非對(duì)映混合物而存在。它們還可以順式或者反式或者E-雙鍵或者Z-雙鍵同分異構(gòu)形式存在。所有這些同分異構(gòu)形式包含在麻醉椒內(nèi)酯的描述中。
為了使得本文所述的發(fā)明更容易理解，闡述以下實(shí)施例。很清楚這些實(shí)例僅僅用于說明性用途以及不能認(rèn)為其以任何方式限制了本發(fā)明。所有引入本文的參考文獻(xiàn)作為參考文獻(xiàn)以全文形式被表達(dá)性地引入。
實(shí)施例1醉椒素合成基本如下。將N-溴代琥珀酰亞胺(1當(dāng)量)慢慢加入到2.3M的β-甲氧基巴豆酸乙酯(1當(dāng)量)的四氯化碳溶液中。反應(yīng)達(dá)平衡后，將混合物加熱回流約4h。然后冷卻混合物(0℃)及過濾，然后用冷CCl4洗滌沉淀物，將合并的濾液濃縮(真空、旋蒸)，蒸餾殘余物給出需要的產(chǎn)物，γ-溴代-β-甲氧基巴豆酸乙酯，通過包括核磁共振波譜和質(zhì)譜的各種方法確認(rèn)其結(jié)構(gòu)。
將0.5M的γ-溴代-β-甲氧基巴豆酸乙酯(1當(dāng)量)的苯溶液傾入到含有鋅屑(1.2當(dāng)量)的燒瓶中。加入肉桂醛(1.2當(dāng)量)。緩和加熱引發(fā)反應(yīng)，混合物回流約1hr?；旌衔锝?jīng)冷卻，傾入到冷飽和氯化銨水溶液中，用乙醚萃取水相三次。合并的提取液用硫酸鈉干燥，過濾，真空干燥。得到的殘余物進(jìn)行重結(jié)晶(MeOH)給出需要的產(chǎn)物，通過包括核磁共振波譜和質(zhì)譜的各種方法確認(rèn)其結(jié)構(gòu)。
實(shí)施例2二氫醉椒素合成基本如下。將3-羥基-5-苯基戊酸甲酯(1當(dāng)量)的四氫呋喃溶液加入到-78℃乙酸叔丁酯的烯醇化鋰的溶液中(3當(dāng)量，從二異丙基胺基鋰和乙酸叔丁酯得到)，慢慢回溫到0℃?；旌衔镉?N HCl猝滅和用二氯甲烷萃取。將合并的提取液用碳酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮給出殘余物。該殘余物可經(jīng)純化(硅膠色譜法)或者直接轉(zhuǎn)化。然后基本根據(jù)Tabuchi等人的(三氟乙酸，二氯甲烷；J.Org.Chem.59卷，4749頁(yè)(1994))方法進(jìn)行內(nèi)酯化將得到的β-二酮進(jìn)行水解以給出需要的產(chǎn)物，通過包括核磁共振波譜和質(zhì)譜的各種方法確認(rèn)其結(jié)構(gòu)。
實(shí)施例3二氫醉人素合成基本如下。將10％的鈀碳(0.03wt.當(dāng)量)加入到1M的麻醉椒苦素(1當(dāng)量)的四氫呋喃溶液中。使用帕爾裝置在約35p.s.i.下將混合物進(jìn)行氫化。混合物過濾，將合并的濾液濃縮(真空，旋蒸)給出固體。將該固體材料重結(jié)晶(i-PrOH)給出需要產(chǎn)物，通過包括核磁共振波譜和質(zhì)譜的各種方法確認(rèn)其結(jié)構(gòu)。
實(shí)施例4將含有約40g麻醉椒內(nèi)酯(PureWorld botanicals，NJ)的卡瓦-卡瓦粗制EtOH提取物(100g)懸浮到水(300mL)和乙酸乙酯(200mL)的混合物中。除去不溶殘余物后，有機(jī)層從水層中分離。水層進(jìn)一步用乙酸乙酯(200mL×2)萃取得到有機(jī)提取液。將所有的有機(jī)提取液合并得到有機(jī)溶液，該溶液用飽和NaCl溶液(200mL×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥并蒸干。使用800g的Kieselgel 60(230-400目ASTM，德國(guó)EM科學(xué)公司)，正己烷/乙酸乙酯(2∶1)作為洗脫劑，通過柱色譜法將得到的深咖啡色油(45g)進(jìn)行純化。收集淡黃色麻醉椒內(nèi)酯級(jí)分并蒸干生成部分結(jié)晶的無定型油(36g)。由此得到的產(chǎn)物中麻醉椒內(nèi)酯總含量約93wt％。通過高壓液相色譜法鑒定三個(gè)麻醉椒內(nèi)酯二氫醉椒素、二氫醉人素和醉椒素的每一個(gè)。
實(shí)施例5將含有約15g的麻醉椒內(nèi)酯(PureWorld botanicals，NJ)的卡瓦-卡瓦粗制EtOH提取物(100mL)減壓濃縮以除去過量的EtOH。使用500g的Florisil(200目，Aldrich)，正己烷/乙酸乙酯(2∶1)作為洗脫液，通過柱色譜法將已濃縮提取液(60mL)進(jìn)行純化。收集黃色麻醉椒內(nèi)酯級(jí)分并蒸干，生成淡黃色無定型油(13g)。由此得到的產(chǎn)物中麻醉椒內(nèi)酯的總含量為約95wt％。
實(shí)施例6使用300g中性氧化鋁(J.T.Barker，NJ)，用正己烷/乙酸乙酯(2∶1)作為洗脫液，通過柱色譜法將通過超臨界流體抽提方法(V.J.Krukonis，ACS Symposium Series 289(1984)，155-175頁(yè))得到的含有約5g麻醉椒內(nèi)酯的淺黃色卡瓦-卡瓦提取液(10g)(由MA的Phasex公司提取)進(jìn)行純化。收集淡黃色麻醉椒內(nèi)酯級(jí)分并蒸干，生成部分結(jié)晶的無定型油(4.2g)。由此得到的產(chǎn)物中麻醉椒內(nèi)酯的總含量為約95wt％。
實(shí)施例7本發(fā)明的含麻醉椒內(nèi)酯的膏劑配方
實(shí)施例8
本發(fā)明的另一個(gè)含麻醉椒內(nèi)酯的膏劑配方
實(shí)施例9
本發(fā)明的另一個(gè)含麻醉椒內(nèi)酯的膏劑配方
實(shí)施例10可以向其中加入各種量的麻醉椒內(nèi)酯的膏劑配方
實(shí)施例11本發(fā)明的含麻醉椒內(nèi)酯的凍膠配方
實(shí)施例12水包油乳劑配方，可以向其中加入各種量的麻醉椒內(nèi)酯
實(shí)施例13患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者(左腿，關(guān)節(jié))對(duì)幾種口服藥無反應(yīng)。將含有5g膏劑(如實(shí)施例10所述)與500mg麻醉椒內(nèi)酯(根據(jù)實(shí)施例4制備的提取物)的組合物對(duì)關(guān)節(jié)給藥，一日三次。在對(duì)關(guān)節(jié)局部施用含麻醉椒內(nèi)酯的膏劑30min后，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎癥狀顯著減輕。
實(shí)施例14患者患有慢性下背問題，通過口服藥物(如阿司匹林和布洛酚)不能得到緩解。在對(duì)患者背部施用實(shí)施例13所述的含麻醉椒內(nèi)酯的膏劑10min后，癥狀顯著緩解(如受影響區(qū)域灼燒感減輕，總體緩解使得可以重新進(jìn)行日?；顒?dòng)(如行走))。
實(shí)施例15左膝患有纖維肌痛癥狀的患者。在對(duì)膝蓋施用實(shí)施例13所述的含麻醉椒內(nèi)酯的膏劑10分鐘后，患者感覺不適減輕。
實(shí)施例16患有牙周炎(臼齒)的患者。對(duì)齒齦區(qū)施用實(shí)施例11所述的含麻醉椒內(nèi)酯的凍膠(使用實(shí)施例4制備的麻醉椒內(nèi)酯提取物)10分鐘后，癥狀減輕，包括病變區(qū)發(fā)紅減輕和不適緩解。
實(shí)施例17四名患者分為兩組局部接觸1％的辣椒素。約1小時(shí)后，當(dāng)灼燒非常強(qiáng)烈時(shí)，以不使之知情方式對(duì)有效區(qū)施用安慰劑或者30％的麻醉椒。所有患者報(bào)告在接受辣椒素的皮表與辣椒素相關(guān)的灼傷有顯著減輕而接受安慰劑的皮表沒有變化。這表明麻醉椒(如麻醉椒內(nèi)酯)能對(duì)抗與辣椒素相關(guān)的灼傷(如繼發(fā)性或者原發(fā)性痛覺過敏)。
實(shí)施例18對(duì)三名患有頑固性肌筋膜疼痛和骨關(guān)節(jié)炎疼痛的患者局部施用麻醉椒。所有患者的疼痛完全減輕。在單次給藥后這種疼痛緩解持續(xù)8-24小時(shí)。
實(shí)施例19將455g的EUCERIN crème的EtOH溶液與5g的天然辣椒素(反式-8-甲基-N-香草基-壬酰胺)(購(gòu)自Aldrich化學(xué)公司，Milwaukee，WI)進(jìn)行混和而配制1％的辣椒素膏劑。
實(shí)施例20粗制粉碎的麻醉椒根粉末(500g)(品種名Mo′i(購(gòu)自BotanicalLiaisons，1180 Crestmoor Drive，Boulder，CO 80303)在機(jī)械攪拌下用回流EtOAc(1.8L)提取3小時(shí)，冷卻至室溫，過濾，用EtOAc(500mL)洗滌。合并濾液和洗液和蒸發(fā)給出粗制提取物(60g)。將粗制材料溶解在乙酸乙酯(300mL)中，加入5％Pd/C(6.0g)和活性炭(6.0g)。然后將該混合物在帕爾氫化器上在40psi H2下氫化60分鐘，過濾除去催化劑和碳。除去溶劑得到最終的灰白色糊狀物麻醉椒提取物(50g，從麻醉椒根計(jì)算收率為10％)。7，8-二氫醉椒素(38wt％)和7，8-二氫醉人素(24wt％)的總含量為62wt％。
實(shí)施例21將麻醉椒干燥根的粉末(500g)(品種名Nene ele ele，購(gòu)自Botanical Liaisons，1180 Crestmoor Drive，Boulder，CO 80303)與95％的EtOH(1.8L)攪拌回流3小時(shí)，冷卻至室溫，過濾，用95％的EtOH(800mL)洗滌。合并濾液和洗液，使用活性炭(20g)在80℃處理30-60分鐘，冷卻至室溫，通過Al2O3(中性，活化，120g)和CELITE(100g)層過濾，用95％的EtOH(2×500mL)洗滌。合并濾液和洗液蒸發(fā)得到粗制提取物(38g)。向300mL的粗制提取物溶液中慢慢加入5％的Pd/C(3.8g)。然后將該混合物在帕爾氫化器上在40psi H2下氫化30分鐘，通過CELITE層過濾除去催化劑和碳。除去溶劑得到最后為灰白色糊的麻醉椒混合物(30g，從麻醉椒根計(jì)算的收率為6％)。7，8-二氫醉椒素(48wt％)和7，8-二氫醉人素(20wt％)的總含量為68wt％。
實(shí)施例22將干燥已粉碎的麻醉椒根(500g)(產(chǎn)地瓦努阿圖，購(gòu)自BotanicalLiaisons，1180 Crestmoor Drive，Boulder，CO 80303)與丙酮(1.8L)攪拌回流3-5小時(shí)，冷卻至室溫，過濾，用丙酮(800mL)洗滌。合并濾液和洗液，用活性炭(10g)在45℃處理60分鐘，冷卻至室溫，通過Al2O3(中性，活化，90g)和CELITE(50g)層過濾，用丙酮(2×500mL)洗滌。蒸發(fā)合并的濾液和洗液給出粗制提取物(40g)。向300mL的粗制提取物的乙酸乙酯溶液中加入5％的Pd/C(4.3g)。然后將該混合物在帕爾氫化器上在40psi H2下氫化30分鐘，通過CELITE層過濾除去催化劑和碳。除去溶劑得到最終為灰白色糊的麻醉椒混合物(33g，從麻醉椒根計(jì)算的收率為6.6％)。
實(shí)施例23將粗制粉末狀麻醉椒根(500g)(品種名Mo′i，購(gòu)自BotanicalLiaisons，1180 Crestmoor Drive，Boulder，CO 80303)用回流EtOAc(1.8L)機(jī)械攪拌下提取3小時(shí)，冷卻至室溫，過濾，用EtOAc(500mL)洗滌。合并濾液和洗液并蒸發(fā)給出粗制提取物(35g)。向300mL的粗制提取物乙酸乙酯溶液中慢慢加入5％的Pd/C(3.5g)和活性炭(3.5g)。然后將該混合物在帕爾氫化器上在40psi H2下氫化60分鐘，過濾除去催化劑和碳。濾液用0.2N LiOH(2×150mL)處理。分離有機(jī)層，除去溶劑，得到最后為灰白色糊的麻醉椒內(nèi)酯混合物(32g，從麻醉椒根計(jì)算的收率為6.4％)。7，8-二氫醉椒素(38wt％)和7，8-二氫醉人素(23wt％)的總含量為61wt％。
實(shí)施例24將含有84％麻醉椒內(nèi)酯的麻醉椒黃色提取物(100g)(Kaviar+80，購(gòu)自Cosmopolitan Trading，P.O.Box 85840，Seattle，WA 98145)溶解在EtOAc(150ml)中。然后將溶液在帕爾氫化器上在40psi的H2下使用5％Pd/C(5g)氫化60分鐘。通過CELITE層過濾除去催化劑和碳。除去溶劑后得到最終為淡綠色糊的麻醉椒混合物(95g)。7，8-二氫醉椒素(47wt％)和7，8-二氫醉人素(20wt％)的總含量為67wt％。
實(shí)施例25然后將實(shí)施例5得到的淡綠色糊(30g)用0.2N的LiOH溶液(200ml×2)處理。有機(jī)層用水洗滌(200ml×2)并用Na2SO4干燥。蒸干有機(jī)溶劑得到淡綠色糊(27g)。7，8-二氫醉椒素(49wt％)和7，8-二氫醉人素(22wt％)的總含量為71wt％。
實(shí)施例26然后將實(shí)施例6得到的淡綠色糊(20g)在200g的中性氧化鋁上進(jìn)行柱層析(己烷/乙酸乙酯＝2∶1)，得到15g的7，8-二氫醉椒素(64wt％)和7，8-二氫醉人素(30wt％)的混合物。
實(shí)施例27將干燥已粉碎的麻醉椒根(500g)(品種名Nene，購(gòu)自BotanicalLiaisons，1180 Crestmoor Drive，Boulder，CO 80303)與95％的EtOH(1.8L)攪拌回流3-5小時(shí)，冷卻至室溫，過濾，用95％的EtOH(800mL)洗滌。合并濾液和洗液，使用活性炭(8g)在80℃處理30分鐘，冷卻至室溫，通過Al2O3(中性，活化，120g)和CELITE(50g)層過濾，用95％的EtOH(2×500mL)洗滌。合并的濾液和洗液蒸發(fā)得到粗制提取物(43g)。向300mL的粗制提取物的乙酸乙酯溶液中加入5％的Pd/C(3.2g)。然后將該混合物在帕爾氫化器上在40psi H2下氫化60分鐘，通過CELITE層過濾除去催化劑和碳。除去溶劑得到最后為灰白色糊的麻醉椒混合物(39g，從麻醉椒根計(jì)算的收率為7.8％)。7，8-二氫醉椒素(37wt％)和7，8-二氫醉人素(27wt％)的總含量為64wt％。
實(shí)施例28將已粉碎麻醉椒根(500g)(品種名Molokai，購(gòu)自BotanicalLiaisons，1180 Crestmoor Drive，Boulder，CO 80303)與95％的EtOH(1.8L)攪拌回流3小時(shí)，冷卻至室溫，過濾，用95％的EtOH(800mL)洗滌。合并濾液和洗液，使用活性炭(10g)在80℃處理30分鐘，冷卻至室溫，通過Al2O3(中性，活化，90g)和CELITE(50g)層過濾，用95％的EtOH(2×500mL)洗滌。合并的濾液和洗液蒸發(fā)得到粗制提取物(32g)。然后將粗制提取物溶解在EtOAc(300mL)中，加入5％的Pd/C(3.2g)。然后將該混合物在帕爾氫化器上在40psiH2下氫化30分鐘，通過CELITE層過濾除去催化劑和碳。濾液與0.2N的LiOH(2×150mL)震搖，然后與H2O(150mL)震搖，分離有機(jī)層，并真空濃縮得到最終為灰白色糊的麻醉椒內(nèi)酯混合物(30g，從麻醉椒根計(jì)算的收率為6％)。7，8-二氫醉椒素(46wt％)和7，8-二氫醉人素(19wt％)的總含量為65wt％。
本文引用的所有參考文獻(xiàn)，無論為印刷品、電子版、計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)媒體或者其它形式，作為參考文獻(xiàn)以全文引入本文，包括但不限于摘要、文章、雜志、出版物、教材、論文、科技數(shù)據(jù)單、因特網(wǎng)網(wǎng)址、數(shù)據(jù)庫(kù)、專利、專利申請(qǐng)和專利公開。
描述了本發(fā)明的許多實(shí)施方案。然而，應(yīng)該理解可以作各種修正而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。
權(quán)利要求
1.一種含有1-90wt％的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯、并且含有藥學(xué)可接受載體的藥用軟膏劑。
2.權(quán)利要求1所述的藥用軟膏劑，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉椒素。
3.權(quán)利要求1所述的藥用軟膏劑，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素。
4.權(quán)利要求1所述的藥用軟膏劑，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素、二氫醉椒素和醉椒素的組合。
5.權(quán)利要求1所述的藥用軟膏劑，其中所述軟膏劑含有1.5-30wt％的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯；并且含有藥學(xué)可接受載體。
6.權(quán)利要求5所述的藥用軟膏劑，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉椒素。
7.權(quán)利要求5所述的藥用軟膏劑，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素。
8.權(quán)利要求5所述的藥用軟膏劑，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素、二氫醉椒素和醉椒素的組合。
9.權(quán)利要求1所述的藥用軟膏劑，其中所述軟膏劑含有2-25wt％的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯；并且含有藥學(xué)可接受載體。
10.權(quán)利要求9所述的藥用軟膏劑，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉椒素。
11.權(quán)利要求9所述的藥用軟膏劑，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素。
12.權(quán)利要求9所述的藥用軟膏劑，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素、二氫醉椒素和醉椒素的組合。
13.一種包括材料層和與所述材料層關(guān)聯(lián)的組合物的貼片，所述組合物含有1-90wt％的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的與材料層關(guān)聯(lián)的活性麻醉椒內(nèi)酯。
14.權(quán)利要求13所述的貼片，其進(jìn)一步包括與所述材料層的一面緊密粘接的抵制活性麻醉椒內(nèi)酯通過的保護(hù)層。
15.權(quán)利要求14所述的貼片，其中所述的材料層包括壓敏粘合劑。
16.權(quán)利要求15所述的貼片，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉椒素。
17.權(quán)利要求15所述的貼片，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素。
18.權(quán)利要求15所述的貼片，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素、二氫醉椒素和醉椒素的組合。
19.權(quán)利要求15所述的貼片，其中所述的粘合劑層含有1.5-30wt％的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯；并且含有藥學(xué)可接受載體。
20.權(quán)利要求19所述的貼片，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉椒素。
21.權(quán)利要求19所述的貼片，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素。
22.權(quán)利要求19所述的貼片，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素、二氫醉椒素和醉椒素的組合。
23.權(quán)利要求15所述的貼片，其中所述的粘合劑層含有2-25wt％的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯；并且含有藥學(xué)可接受載體。
24.權(quán)利要求23所述的貼片，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉椒素。
25.權(quán)利要求23所述的貼片，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素。
26.權(quán)利要求23所述的貼片，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯為二氫醉人素、二氫醉椒素和醉椒素的組合。
27.用于治療疼痛的方法，該方法包括對(duì)需要減輕疼痛的患者施用含有1-90wt％的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的活性麻醉椒內(nèi)酯并且含有藥學(xué)可接受載體的藥用軟膏劑。
28.用于治療疼痛的方法，該方法包括對(duì)需要減輕疼痛的患者施用含有材料層和與材料層關(guān)聯(lián)的組合物的貼片，所述組合物含有1-90wt％的選自二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素及其組合的與材料層關(guān)聯(lián)的活性麻醉椒內(nèi)酯。
29.用于治療疼痛的方法，該方法包括對(duì)需要減輕疼痛的患者施用含有1-90wt％的選自脫甲氧羊高寧、二氫醉椒素、二氫醉人素、醉椒素、醉人素、羊高寧及其組合的麻醉椒內(nèi)酯并且含有藥學(xué)可接受載體的藥用軟膏劑。
30.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述的疼痛是肌筋膜疼痛。
31.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述的疼痛是痛覺過敏。
32.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述的疼痛是先占性痛覺缺失。
33.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述的疼痛是骨關(guān)節(jié)炎疼痛。
34.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述的疼痛是炎性疼痛。
35.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述的疼痛是神經(jīng)性疼痛。
36.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述的藥用軟膏劑進(jìn)一步含有礦脂、蜂蠟、植物油或者其組合。
37.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述的藥用軟膏劑基本不含有對(duì)氨基苯甲酸。
38.權(quán)利要求1所述的藥用軟膏劑，其中所述的二氫醉椒素和二氫醉人素是合成的。
39.權(quán)利要求1所述的藥用軟膏劑，其中所述的活性麻醉椒內(nèi)酯是從氫化麻醉椒提取物得來的。
40.富集7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素的氫化卡瓦胡椒根莖提取物，其中所述的提取物含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量50％的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素。
41.制備含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量50％的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素的卡瓦胡椒根莖干燥提取物的方法，該方法包括將原麻醉椒提取液在氫氣存在下使用催化劑進(jìn)行化學(xué)還原。
42.減少含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量50％的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素的卡瓦胡椒根莖干提取物中真菌毒素?cái)?shù)量的方法，該方法包括將原麻醉椒提取液在氫氣存在下使用催化劑進(jìn)行化學(xué)還原。
43.富集7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素并含有減少的真菌毒素的氫化卡瓦胡椒根莖提取物，其中所述的提取物含有至少為麻醉椒內(nèi)酯總重量50％的7，8-二氫醉椒素和7，8-二氫醉人素并且含有小于0.1％的真菌毒素。
全文摘要
本發(fā)明涉及使用具有健康促進(jìn)作用的組合物的方法，更涉及含有麻醉椒內(nèi)酯的組合物及其用途和制備方法。
文檔編號(hào)A61K9/70GK1870955SQ02813213
公開日2006年11月29日 申請(qǐng)日期2002年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月11日
發(fā)明者喬艾爾·麥克克里律, 孫黎君, 彼得·S·史塔滋, 陳秀君 申請(qǐng)人:卡瓦制藥公司