白樹提取物、其制備方法及其組合物與用途的制作方法

專利名稱：白樹提取物、其制備方法及其組合物與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從白樹提取能抑制α-葡萄糖苷酶的提取物，這種提取物的制備方法，含有這種提取物的藥物組合物，以及這種提取物和其藥物組合物作為藥物的用途，尤其是制備治療高血糖癥和肥胖癥藥物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
據(jù)WHO有關(guān)資料表明，糖尿病的患病率、致殘率和死亡率以及總體健康危害程度已據(jù)非傳染疾病的第三位，它已成為繼心腦血管疾病及腫瘤之后，嚴(yán)重威脅人類健康的第三大疾病。當(dāng)今世界有糖尿病患者1.3億人，其中90％以上患有2型糖尿病，而且每年以1％的速度遞增，預(yù)計(jì)之2020年將猛增至2.3億。我國的糖尿病患者總數(shù)已有6000萬以上，預(yù)計(jì)每年發(fā)病增長率超過6％。此病不僅給患者帶來極大的痛苦，生活質(zhì)量受到很大影響，甚至威脅人們的生命，還給社會(huì)帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。臨床醫(yī)生和患者都希望有更多、更有效的治療手段。目前臨床上治療糖尿病的口服藥物有磺酰脲類、雙胍類、噻唑烷二酮類胰島素增敏劑、非磺酰脲類胰島素分泌劑以及α-葡萄糖苷酶抑制劑等。
磺酰脲類有甲苯磺酰脲、氯磺丙脲、格列苯脲、格列吡嗪和格列齊特。這類藥物除了首次治療的失敗率較高外，易發(fā)生繼發(fā)性失效，約有10％的病人對隨后的治療沒有應(yīng)答。不良反應(yīng)發(fā)生率較高，如過敏、眩暈、肝損傷，主要是低血糖休克和體重增加，尤其是氯磺丙脲、格列苯脲更為常見，以超重的病人不宜用此類藥物。
雙胍類藥物有二甲雙胍、苯乙雙胍。此類藥物雖然在50年代末已用于治療糖尿病，但不良反應(yīng)發(fā)生率很高，主要有胃腸刺激等明顯的消化道副作用和乳酸型中毒，使其應(yīng)用受到限制。特別是苯乙雙胍因?yàn)槠鋰?yán)重的不良反應(yīng)，很多國家已經(jīng)禁用。
噻唑烷二酮類藥物可直接增強(qiáng)2型糖尿病患者的肝臟、肌肉和肌肉組織對胰島素的敏感性，主要的作用靶點(diǎn)為過氧化物酶增殖體激活受體γ(PPARγ)，使2型糖尿病患者的空腹和餐后血糖降低，并使低密度脂蛋白和極低密度脂蛋白降低，高胰島素血癥改善，單獨(dú)使用不引起低血糖。近年來發(fā)展較快，先后有曲格列酮、羅格列酮、匹格列酮上市，曲格列酮由于嚴(yán)重的肝毒性(肝功能衰竭)而被撤出市場。
一種短效口服胰島素分泌促進(jìn)劑有瑞格列奈和那格列奈，主要作用于胰腺的β細(xì)胞膜的ATP-敏感的鉀通道，促進(jìn)β細(xì)胞分泌胰島素。病人餐時(shí)服用，能使2型糖尿病患者于進(jìn)食相關(guān)的異常胰島素分泌模式得到糾正，模擬生理胰島素分泌。其起效快，作用維持時(shí)間短，僅對餐時(shí)胰島素的分泌有較強(qiáng)的刺激作用，使患者達(dá)到良好的整體血糖控制。嚴(yán)重的低血糖發(fā)生率顯著低于磺酰脲類藥物。它經(jīng)糞便排泄，肝腎毒性小，但對β細(xì)胞衰竭、糖尿病酮癥酸中毒及嚴(yán)重的肝腎損害者禁用。
總之，雙胍類、胰島素增敏劑和促胰島素分泌劑在體內(nèi)經(jīng)過肝腎代謝，對于肝腎功能異常的病人使用就受到了限制。
α-葡萄糖苷酶抑制劑代表性的有阿卡波糖、伏格利波糖和米格列醇3種。隨著德國拜耳拜糖平(Acarbose)90年代初的上市，在國內(nèi)外已被公認(rèn)為是治療糖尿病的新途徑，其主要作用靶點(diǎn)在小腸，不受肝腎功能的影響，使用范圍較廣。因而拜糖平已成為治療糖尿病的一線藥物，并進(jìn)一步擴(kuò)大適應(yīng)癥。因此，研發(fā)新的α-葡萄糖苷酶抑制劑是非常必要，且具有重要意義。
白樹，拉丁名為suregade glomerulata (BL.)，屬大戟科白樹屬。喬木，高2-13米；小枝帶灰黑色或褐色。葉片革質(zhì)，寬或狹長橢圓形，或多少倒卵形或倒披針形，長5-12厘米，寬3-6厘米，全緣，頂端急尖或鈍或圓，稀凹缺，基部漸狹，中脈在兩面突起，側(cè)脈每邊5-10條；托葉靠近花序的寬三角形，較厚，長約1毫米，寬2毫米，頂端鈍，下部的托葉早落；葉柄長3-8毫米(海南植物志，陳煥鏞主編第二卷，第一版1965年，PP177)。有關(guān)白樹的化學(xué)成分和藥理作用均未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種從白樹中提取的提取物。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種制備這種提取物的方法。
本發(fā)明的又一目的在于提供一種藥物組合物，包括作為活性成分的本發(fā)明白樹提取物及制藥領(lǐng)域中常用的載體。
本發(fā)明的又一目的在于提供一種白樹和/或提取物，或含有白樹和/或提取物的組合物在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用。
本發(fā)明的再一目的在于提供一種白樹和/或提取物，或含有白樹和/或提取物的組合物在制備治療高血糖癥和肥胖癥藥物中的應(yīng)用。
為了完成本發(fā)明目的，本發(fā)明采取如下的技術(shù)方案白樹原藥材經(jīng)干燥并適當(dāng)?shù)姆鬯?，以利增大與溶劑的接觸面積，提高效率。
原藥材的提取溶劑使用水、醇類、或水與醇類的混合物。優(yōu)選的醇類包括甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇等。水與醇類的混合物，例如含有醇40-80％(體積比)的水。提取時(shí)溶劑量為原藥重量的4-14倍。提取可以在靜態(tài)或動(dòng)態(tài)下，優(yōu)選在動(dòng)態(tài)條件下。為了提高提取的效率，可以使用超聲波等。提取的溫度是從室溫(例如20℃)到溶劑回流溫度的范圍內(nèi)，優(yōu)選在回流的溫度下。提取可連續(xù)或間歇進(jìn)行，間歇提取時(shí)可重復(fù)1-4次。
上步結(jié)束后，合并濾液，濾去藥渣。濾液在動(dòng)態(tài)狀態(tài)下，在常壓或減壓加熱濃縮至藥材重量1-5倍的體積時(shí)冷卻。如果用水提取則加醇使其含有的醇達(dá)到40-80％(體積比)的濃度，使用的醇包括甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇等，或其混合物；優(yōu)選是乙醇。靜置沉淀，過濾或離心除去不溶物，不溶物用水洗滌，一般1-3次。將濾液合并進(jìn)一步濃縮成膏狀。
膏狀物進(jìn)行純化，通過大孔樹脂、離子樹脂或吸附柱層析，層析得到的有效部位。優(yōu)選的離子樹脂是陽離子樹脂，可以包括-SO3-H+、-COO-H+；陽離子樹脂中優(yōu)選磺酸型樹脂。樹脂的交聯(lián)度2-20％，優(yōu)選2-6％。吸附柱層析包括硅膠、氧化鋁、纖維素、聚酰胺。吸附劑的用量為樣品量的30-200倍，優(yōu)選80-100倍，更優(yōu)選為90-100倍。洗脫系統(tǒng)可以用薄層層析來篩分，選擇使被分離組分的Rf值在0.2-0.3的溶劑系統(tǒng)。洗脫劑中加入適當(dāng)?shù)膲A，例如氨、二乙胺、吡啶、2-甲基吡啶、三甲基吡啶、N-乙基嗎啉，以防止脫尾、促進(jìn)分離。活性碳可以拌入適量的硅藻土作稀釋劑，以增加溶液的流速。
提取液也可以直接用交換柱和膜技術(shù)進(jìn)行精制濃縮后，再成浸膏或干粉?？梢允褂玫慕粨Q柱包括大孔樹脂、離子交換樹脂、活性炭、葡聚糖凝膠等；優(yōu)選大孔樹脂和活性炭。
提取物可經(jīng)冷凍干燥或真空干燥成干粉，也可把濃縮液體直接噴霧干燥成干粉進(jìn)行各種制劑成型。
本發(fā)明還涉及含有作為活性成份的本發(fā)明提取物和常規(guī)藥物賦形劑或輔劑的藥物組合物。通常本發(fā)明藥物組合物含有0.1-95％重量的本發(fā)明提取物。
本發(fā)明還提供一種藥物組合物，它包括藥物有效劑量的，作為活性成分的如本發(fā)明方法提取的白樹提取物和/或白樹及藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明提取物的藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。用于此目的時(shí)，如果需要，可將本發(fā)明提取物與一種或多種固體或液體藥物賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成可作為人藥或獸藥使用的適當(dāng)?shù)氖┯眯问交騽┝啃问健?br> 本發(fā)明提取物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮膚、腹膜或直腸等，優(yōu)選克服給藥。
本發(fā)明提取物或含有它的藥物組合物的給藥途徑可為注射給藥。注射包括靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、皮內(nèi)注射等。
給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型。如液體劑型可以是真溶液類、膠體類、微粒劑型、乳劑劑型、混懸劑型。其他劑型例如片劑、膠囊、滴丸、氣霧劑、丸劑、粉劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、栓劑、凍干粉針劑等。
本發(fā)明提取物可以制成普通制劑、也可以是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。
為了將單位給藥劑型制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如淀粉、糊精、硫酸鈣、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、碳酸鈣、白陶土、微晶纖維素、硅酸鋁等；濕潤劑與粘合劑，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解劑，例如干燥淀粉、海藻酸鹽、瓊脂粉、褐藻淀粉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、碳酸鈣、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等；崩解抑制劑，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氫化油等；吸收促進(jìn)劑，例如季銨鹽、十二烷基硫酸鈉等；潤滑劑，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸鹽、硼酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。
例如為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高嶺土、滑石粉等；粘合劑，如阿拉伯膠、黃蓍膠、明膠、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等。
例如為了將給藥單元制成膠囊，將有效成分本發(fā)明提取物與上述的各種載體混合，并將由此得到的混合物置于硬的明膠膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明提取物制成微囊劑，混懸于水性介質(zhì)中形成混懸劑，亦可裝入硬膠囊中或制成注射劑應(yīng)用。
例如，將本發(fā)明提取物制成注射用制劑，如溶液劑、混懸劑溶液劑、乳劑、凍干粉針劑，這種制劑可以是含水或非水的，可含一種和/或多種藥效學(xué)上可接受的載體、稀釋劑、粘合劑、潤滑劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑。如稀釋劑可選自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的異硬脂醇、多氧化的異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，為了制備等滲注射液，可以向注射用制劑中添加適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油，此外，還可以添加常規(guī)的助溶劑、緩沖劑、pH調(diào)節(jié)劑等。這些輔料是本領(lǐng)域常用的此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑、甜味劑或其它材料。
為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。
本發(fā)明提取物藥物組合物的給藥劑量取決于許多因素，例如所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動(dòng)物的性別、年齡、體重、性格及個(gè)體反應(yīng)，給藥途徑、給藥次數(shù)、治療目的，因此本發(fā)明的治療劑量可以有大范圍的變化。一般來講，本發(fā)明中藥學(xué)成分的使用劑量是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的?？梢愿鶕?jù)本發(fā)明提取物組合物中最后的制劑中所含有的實(shí)際藥物數(shù)量，加以適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以達(dá)到其治療有效量的要求，完成本發(fā)明的預(yù)防或治療目的。本發(fā)明提取物的每天的合適劑量范圍本發(fā)明的提取物的用量為0.001-100mg/Kg體重，優(yōu)選為0.1-60mg/Kg體重，更優(yōu)選為1-30mg/Kg體重，最優(yōu)選為2-15mg/Kg體重。上述劑量可以單一劑量形式或分成幾個(gè)，例如二、三或四個(gè)劑量形式給藥這受限于給藥醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)以及包括運(yùn)用其它治療手段的給藥方案。每一種治療所需總劑量可分成多次或按一次劑量給藥。本發(fā)明的提取物或組合物可單獨(dú)服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用并調(diào)整劑量。
α-葡萄糖苷酶能使碳水化合物分解成小腸能吸收的單糖。多次試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的提取物對酶活性的IC50在5μg-10μg/ml生藥范圍內(nèi)。說明該提取物具有很強(qiáng)的α葡萄糖苷酶抑制作用。對正常小鼠葡萄糖負(fù)荷后血糖升高的實(shí)驗(yàn)中，單給葡萄糖(2.0g/kg)的空白對照組，葡萄糖與Acarbose(拜唐平，10mg/kg)陽性對照藥組和葡萄糖與不同劑量的本發(fā)明提取物(35mg/kg、70mg/kg、140mg/kg)實(shí)驗(yàn)組，在不同時(shí)間點(diǎn)的血糖值無差異。進(jìn)一步說明該藥治療糖尿病作用靶點(diǎn)是抑制α葡萄糖苷酶活性。
本發(fā)明提取物的小鼠淀粉負(fù)荷結(jié)果表明，本發(fā)明提取物在35mg/kg、70mg/kg、140mg/kg劑量下，能明顯抑制正常小鼠淀粉負(fù)荷后血糖的升高，血糖峰值后移，血糖曲線下面積減少，并呈現(xiàn)出一定的量效關(guān)系。本發(fā)明提取物小鼠蔗糖負(fù)荷實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg劑量下，明顯抑制正常小鼠蔗糖負(fù)荷后血糖的升高，血糖峰值后移，血糖曲線下面積減少，并呈現(xiàn)出較好的量效關(guān)系。
藥理實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明提取物是α-葡萄糖苷酶抑制劑，可在小腸內(nèi)與碳水化合物競爭性的與酶結(jié)合，可逆性的抑制小腸粘膜刷狀緣的近腔上皮細(xì)胞內(nèi)的α-葡萄糖苷酶水解酶，阻斷淀粉、蔗糖等糖類1，4-糖苷鍵的裂解，達(dá)到延緩碳水化合物的消化吸收作用。通過延緩碳水化合物的消化分解過程，從而減少葡萄糖吸收，降低餐后血糖水平，使餐后血糖升高的幅度下降。
以碳水化合物為主食的我國，這種糖吸收的延緩，血糖的降低，進(jìn)而影響糖向脂肪的轉(zhuǎn)化，減少脂肪在體內(nèi)的堆積，發(fā)揮減肥作用，因此，本發(fā)明提取物也可作為減肥藥。


圖1.對正常小鼠淀粉負(fù)荷后血糖曲線的影響。
圖2.對正常小鼠蔗糖負(fù)荷后血糖曲線的影響。
具體實(shí)施例方式
提取實(shí)驗(yàn)實(shí)施例1.水提提取物白樹枝葉100g，用蒸餾水500g熱回流，提取三次(500g水/次)，每次提取一小時(shí)，提取液減壓濃縮后得水提取物15.5g。提取物15.5g溶于100ml水溶解，加乙醇至含醇70％(體積比)，沉淀、過濾、濃縮濾液至干得黃色膏狀物13.6g。
濾液部分上大孔樹脂柱分離濾液部分13.6g用50ml水溶解，加到100g大孔樹脂柱(D-101)上，用蒸餾水洗至流出液無色，蒸餾水洗脫液濃縮至干得11g洗脫物。
再用乙醇洗脫大孔樹脂至流出液無色，乙醇洗脫部分濃縮得2.2g。大孔樹脂水洗至流出液無醇(大孔樹脂再生)。
大孔樹脂洗脫部分陽離子樹脂柱分離11g大孔樹脂洗脫部分用50ml水溶解，上100g磺酸型陽離子樹脂柱(003＊7 styrene-2VB)，先用蒸餾水洗至無色，然后用0.5N氫氧化氨洗脫至無生物堿反應(yīng)。0.5N氫氧化氨洗脫液減壓濃縮，得總堿洗脫物2.4g。
實(shí)施例2.水提提取物白樹枝1公斤，用蒸餾水14公斤加熱回流提取，提取三次(14公斤水/次)，每次提取一小時(shí)，提取液減壓濃縮后得水提取物155g。提取物155g溶于1550ml水溶解，加乙醇至含醇70％(體積比)，沉淀、過濾、濃縮濾液至干得黃色膏狀物136g。
濾液部分上大孔樹脂柱分離濾液部分136g用500ml水溶解，加到1000g大孔樹脂柱(D-101)上，用蒸餾水洗至流出液無色，蒸餾水洗脫液濃縮至干得110g洗脫物。
再用乙醇洗脫大孔樹脂至流出液無色，乙醇洗脫部分濃縮得22g。大孔樹脂水洗至流出液無醇(大孔樹脂再生)。
大孔樹脂洗脫部分活性炭柱層析分離取大孔樹脂柱水洗脫液部分15g用水溶解，上到80克活性炭柱(GH-2型)上層析，用水洗脫，收集茚三酮生物堿反應(yīng)部分，減壓濃縮該洗脫液至干得3.8g洗脫物。
實(shí)施例3.醇提提取物白樹樹皮1公斤，加6倍量70％(體積比)乙醇，浸泡過夜或4小時(shí)，緩慢加熱至沸騰，回流1小時(shí)，過濾；全過程重復(fù)二次，合并濾液，減壓濃縮，溫度60-70℃，壓力85-98KPa，濃縮至完全無乙醇時(shí)，加入1公斤水繼續(xù)加熱至沸騰，冷卻后離心除去不溶物，并加少量水洗不溶物三次，將濾液合并，在溫度60-70C下減壓濃縮，然后減壓干燥(溫度70-80℃，壓力85-98Kpa)得提取物106g。
藥理實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)例1對α葡萄糖苷酶活性的抑制作用正常大鼠斷頭處死，取上段空腸黏膜，用緩沖液勻漿后，高速冷凍離心提取α葡萄糖苷酶，-20℃保存?zhèn)溆?；?shí)施例1提取物用pH6.0的磷酸緩沖液配制并稀釋成不同濃度(如10mg，1mg，0.1mg，0.01mg，0.001mg/m1生藥)，以蔗糖為底物，測定對蔗糖酶活性的抑制百分率，根據(jù)抑制百分率計(jì)算對酶活性的IC50。多次試驗(yàn)結(jié)果表明，該提取物對酶活性的IC50在5μg-10μg/ml生藥范圍內(nèi)。說明該提取物具有很強(qiáng)的α葡萄糖苷酶抑制作用。
實(shí)驗(yàn)例2對正常小鼠葡萄糖負(fù)荷后血糖升高的影響正常ICR雄性小鼠，隨機(jī)分為5組(n＝10)，實(shí)驗(yàn)前禁食過夜，一組以葡萄糖(2.0g/kg)灌胃作為對照組，一組以葡萄糖與Acarbose(拜唐平，10mg/kg)灌胃作為陽性對照藥組，其余組分別以葡萄糖與不同劑量的提取物(35mg/kg、70mg/kg、140mg/kg)灌胃，于灌胃前和灌胃后30min、60min、120min采血，用葡萄糖氧化酶法測定血糖濃度。結(jié)果(未列出)表明，各劑量給藥組及陽性對照藥Acarbose組在不同時(shí)間點(diǎn)的血糖值，與對照組比較無差異。進(jìn)一步說明該藥治療糖尿病作用靶點(diǎn)是抑制α葡萄糖苷酶活性。
實(shí)驗(yàn)例3對正常小鼠淀粉負(fù)荷后血糖升高的抑制作用正常ICR雄性小鼠，隨機(jī)分為5組(n＝10)，實(shí)驗(yàn)前禁食過夜，一組以淀粉(3.0g/kg)灌胃作為對照組，一組以淀粉與Acarbose(拜糖平，10mg/kg)灌胃作為陽性對照藥組，其余組分別以淀粉(3.0g/kg)與不同劑量的提取物(35mg/kg、70mg/kg、140mg/kg)灌胃，于灌胃前和灌胃后30min、60min、120min采血，用葡萄糖氧化酶法測定血糖濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖1和表1。
表1.對正常小鼠淀粉負(fù)荷后血糖曲線下面積的影響組別 劑量(mg/kg) AUC(mg/dl.hr)對照組 - 435.1±63.2A210 35320.3±34.6***A210 70248.6±28.0***A210 140 224.3±17.8***Acarbose 10296.3±28.5***AUC為曲線下面積；與對照組比較***P＜0.001結(jié)果說明，提取物在35mg/kg、70mg/kg、140mg/kg劑量下，能明顯抑制正常小鼠淀粉負(fù)荷后血糖的升高，血糖峰值后移，血糖曲線下面積減少，并呈現(xiàn)出一定的量效關(guān)系。
實(shí)驗(yàn)例4 對正常小鼠蔗糖負(fù)荷后血糖升高的抑制作用正常ICR雄性小鼠，隨機(jī)分為5組(n＝10)，實(shí)驗(yàn)前禁食過夜，一組以蔗糖(4.0g/kg)灌胃作為對照組，一組以蔗糖與Acarbose(10mg/kg)灌胃作為陽性對照藥組，其余組分別以蔗糖與不同劑量的提取物(10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg)灌胃，于灌胃前和灌胃后30min、60min、120min測定血糖濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖2和表2。
表2.對正常小鼠蔗糖負(fù)荷后血糖曲線下面積的影響組別 劑量(mg/kg)AUC(mg/dl/hr)對照組 - 362.7±45.7A210 10 288.3±31.6***A210 20 261.6±13.1***A210 40 252.8±18.7***Acarbose 10 275.2±20.8***AUC為曲線下面積；與對照組比較***P＜0.001結(jié)果表明，提取物在10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg劑量下，明顯抑制正常小鼠蔗糖負(fù)荷后血糖的升高，血糖峰值后移，血糖曲線下面積減少，并呈現(xiàn)出較好的量效關(guān)系。
上述4個(gè)藥理實(shí)驗(yàn)表明，白樹提取物能特異性的抑制α葡萄糖苷酶并具有很強(qiáng)的活性，能使動(dòng)物多糖和雙糖負(fù)荷后血糖升高的峰值降低并后移，血糖曲線下面積減少，有益于糖尿病糖代謝、脂質(zhì)代謝紊亂的改善，可用于糖尿病及糖耐量異常的治療。
權(quán)利要求
1.白樹(suregade glomerulata (BL.))在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用。
2.白樹(suregade glomerulata (BL.))在制備降糖藥物中的應(yīng)用。
3.白樹(suregade glomerulata (BL.))在制備減肥藥物中的應(yīng)用。
4.一種植物白樹(suregade glomerulata (BL.))提取物的提取方法，其特征在于，原藥材白樹(suregade glomerulata (BL.))用溶劑提取，合并提取液，濃縮，再進(jìn)行純化。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的提取方法，其特征在于，所述的溶劑選自水、醇類、或水與醇類的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的提取方法，其特征在于，用水提取時(shí)，濃縮至藥材重量1-5倍的體積時(shí)，加醇，使其含有的醇達(dá)到40-80％(體積比)的濃度并靜置沉淀，過濾或離心除去不溶物，將濾液合并進(jìn)一步濃縮成膏狀。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的提取方法，其特征在于，所述的醇是甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇或其混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的提取方法，其特征在于，所述的提取為在溫度為從20℃到溶劑回流溫度的范圍進(jìn)行。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的提取方法，其特征在于，純化是通過大孔樹脂、離子樹脂或吸附柱層析。
10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的提取方法，其特征在于，純化時(shí)的洗脫劑是水或氨水。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的提取方法，其特征在于，離子樹脂是陽離子樹脂。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的提取方法，其特征在于，陽離子樹脂是磺酸型樹脂。
13.根據(jù)權(quán)利要求9所述的提取方法，其特征在于，所述吸附柱層析包括硅膠、氧化鋁、纖維素、聚酰胺、活性碳。
14.一種如權(quán)利要求4所述的方法提取的白樹(suregadeglomerulata (BL.))提取物。
15.一種藥物組合物，其特征在于，包括藥物有效劑量的，作為活性成分的如權(quán)利要求4所述的方法提取的白樹提取物和/或白樹及藥學(xué)上可接受的載體。
16.如權(quán)利要求4所述的方法提取的白樹(suregade glomerulata(BL.))提取物在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用。
17.如權(quán)利要求4所述的方法提取的白樹(suregade glomerulata(BL.))提取物在制備降糖藥物中的應(yīng)用。
18.如權(quán)利要求4所述的方法提取的白樹(suregade glomerulata(BL.))提取物在制備減肥藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了從白樹提取的抑制α－葡萄糖苷酶的提取物，這種提取物的制備方法，含有這種提取物的藥物組合物，以及這種提取物和其藥物組合物作為藥物的用途，尤其是制備治療高血糖癥和肥胖癥藥物的應(yīng)用。
文檔編號A61P3/04GK1506106SQ0215552
公開日2004年6月23日 申請日期2002年12月5日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月5日
發(fā)明者申竹芳, 陳若蕓, 陳躍騰, 王洪慶, 孫素娟, 劉超, 馬林, 劉泉 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所