專利名稱：對(duì)苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷治療抑郁癥的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及豆腐果苷化合物用于制備治療抑郁癥藥物的用途。
豆腐果苷，又名昆明神衰果素，系從中國(guó)云南省野生植物山龍眼科蘿卜樹(shù)(Helicia essatia Hook)的果實(shí)豆腐果中提取的有效成分，該化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與天麻素(gastrodin)(對(duì)羥甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖甙)有相似的單體糖苷，該化合物的化學(xué)名稱是對(duì)苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷，分子式是C13H16O7，結(jié)構(gòu)式如下 該化合物為白色針狀結(jié)晶性粉末，無(wú)臭，味微苦。在熱水中溶解，在水、乙醇或甲醇中略溶，在乙醚或氯仿中均不溶?，F(xiàn)有技術(shù)中，人們通過(guò)研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，豆腐果苷具有鎮(zhèn)靜、催眠和止痛作用，已經(jīng)在臨床上將其用于治療神經(jīng)衰弱，但是，現(xiàn)有技術(shù)中沒(méi)有將豆腐果苷用于治療抑郁、焦慮等精神疾病的報(bào)道。本發(fā)明人通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，豆腐果苷化合物可以用于治療抑郁癥等精神疾病。
因此，本發(fā)明的目的是提供了將對(duì)苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷化合物用于制備治療抑郁癥疾病的藥物的用途。
本發(fā)明人在兩個(gè)抑郁行為模型和兩個(gè)藥理模型上，將對(duì)苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷化合物單次小鼠灌胃給藥顯示明確的抗抑郁作用。在小鼠懸尾抑郁模型上，其抗抑郁有效劑量為25mg/kg，在大鼠強(qiáng)迫性游泳模型上，其有效劑量為50mg/kg。在此劑量范圍內(nèi)，豆腐果苷能增加5-羥色胺(5-HT)和去甲腎上腺素(NA)能神經(jīng)功能，并對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)無(wú)明顯影響。在小鼠明暗穿箱(6.25-100mg/kg)和大鼠Vogel飲水沖突(10-90mg/kg)兩個(gè)焦慮行為模型上，豆腐果苷單次灌胃未顯示明顯的抗焦慮作用。豆腐果苷可增強(qiáng)戊巴比妥鈉閾下催眠劑量的中樞作用，該作用在單次口服灌胃1小時(shí)后起效，2小時(shí)作用達(dá)到高峰，3-4小時(shí)后作用減退至消失。
具體的藥理試驗(yàn)如下一.受試藥物名稱對(duì)苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷，即豆腐果苷(代號(hào)MN-7-6)性狀白色粉末來(lái)源藥物配制、給藥容積及給藥途徑臨用前加蒸餾水至最大配制濃度(10-12.5mg/ml)并水浴加溫至藥物完全溶解。并倍比稀釋到所需濃度，小鼠以10ml/kg的容積、大鼠以2ml/kg的容積一次性口服灌胃，較高受試劑量以最大配制濃度增加給藥容積(小鼠最高給藥容積為20ml/kg，大鼠最高給藥容積為8ml/kg)。
二.對(duì)照藥物1.丙咪嗪(Imipramine，Imp)，購(gòu)自Sigma公司，用蒸餾水配制成所需濃度。
2.安定(Diazepam，Dzp)(注射液)，上海海普制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)930704。臨用前以蒸餾水稀釋成懸濁液。
三.動(dòng)物1.昆明種小鼠雄性，18-24g，由中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證醫(yī)動(dòng)字D01-3023。
2.Wistar大鼠雄性，180-250g，由中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證醫(yī)動(dòng)字D01-3039。
四.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理計(jì)量資料結(jié)果用x±s表示，進(jìn)行單因素方差分析，組間比較用Dunnet t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料結(jié)果用x2檢驗(yàn)。
五.試驗(yàn)方法1.小鼠懸尾試驗(yàn)參考文獻(xiàn)1即Butterweck V，et al.Effects of the total extractand fractions of hypericum perforatum in animal assays forantidepressant activity.Pharmacopsychiat 1997，30(Supplement)117-124中描述的方法，懸尾箱(25×25×25cm)頂板中心固定一塑料夾子，試驗(yàn)時(shí)用夾子夾住鼠尾尖約1cm處，將小鼠倒懸，使頭部離箱底4～5cm。觀察6分鐘，并用電子秒表記錄后4分鐘內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間。MN-7-6于試驗(yàn)前120分鐘單次口服灌胃，陽(yáng)性對(duì)照藥丙咪嗪于試驗(yàn)前30分鐘單次腹腔注射。
2.大鼠強(qiáng)迫性游泳試驗(yàn)參考文獻(xiàn)1中的方法，玻璃游泳缸，直徑18cm，高40cm，水深23cm，水溫28℃。試驗(yàn)前24小時(shí)，將大鼠置游泳缸內(nèi)預(yù)游15分鐘，然后取出用布擦拭后用紅外電暖爐烤干。試驗(yàn)時(shí)，將大鼠置游泳缸內(nèi)，并立即開(kāi)始計(jì)時(shí)，觀察并記錄5分鐘內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間(四肢不游動(dòng)時(shí)間)。實(shí)驗(yàn)觀察采用盲法。MN-7-6于試驗(yàn)前120分鐘單次口服灌胃，丙咪嗪于試驗(yàn)前30分鐘單次腹腔注射。
3.小鼠自發(fā)活動(dòng)計(jì)數(shù)試驗(yàn)小鼠有機(jī)玻璃活動(dòng)箱(35×30×20cm)四個(gè)，田字形排列置圖像運(yùn)動(dòng)解析儀(美國(guó))觀察視野內(nèi)。小鼠單次口服灌胃不同劑量MN-7-6 120分鐘后，每箱內(nèi)放一只動(dòng)物，由圖像運(yùn)動(dòng)解析儀自動(dòng)觀察，記錄10分鐘內(nèi)小鼠自發(fā)活動(dòng)情況，觀察指標(biāo)為運(yùn)動(dòng)距離、運(yùn)動(dòng)時(shí)間和靜止時(shí)間。
4.小鼠5-HTP甩頭試驗(yàn)參考文獻(xiàn)2即Bhattacharya SK，et alActivity profiles of twohyperforin-containing hypericum extracts in behavioralmodels.Pharmacopsychiat 1998，31(Supplement)22-29中的方法，5-HTP(Sigma公司)120mg/kg腹腔注射可引起小鼠甩頭行為，計(jì)數(shù)給予5-HTP后20分鐘內(nèi)出現(xiàn)的甩頭次數(shù)。分別于注射5-HTP前90分鐘單次口服灌胃MN-7-6不同劑量，丙咪嗪于注射5-HTP前30分鐘單次腹腔注射。
5.大鼠利血平化試驗(yàn)參考文獻(xiàn)3即中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，1997，11(1)17-21中描述的方法，將大鼠隨機(jī)分組，每組分別口服灌胃MN-7-6不同劑量或蒸餾水，1小時(shí)后觀察動(dòng)物活動(dòng)性及瞼下垂情況并測(cè)量肛溫(用北京司南儀器廠生產(chǎn)的電子測(cè)溫計(jì)，將探頭插入肛門(mén)內(nèi)3cm處)，隨即腹腔注射利血平5mg/kg，1小時(shí)后，對(duì)活動(dòng)性和瞼下垂情況進(jìn)行觀察打分，并再次測(cè)量肛溫(同上)。
評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)眼瞼下垂——眼瞼閉1/4得1分，閉1/2得2分，閉3/4得3分，眼瞼全閉得4分?；顒?dòng)性——將大鼠放在直徑18cm的圓圈中心，15秒內(nèi)動(dòng)物四肢未全部出圈得1分。利血平化癥狀越重，得分越高，每只動(dòng)物滿分為5分。
6.小鼠明暗穿箱試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)9即shimada T，et al.The modified light/darktransition test in mice elevation of classic and putativeanxiolytic and anxiogenic drugs.Gen Pharmaco，1995，26205-210，稍加改進(jìn)。小鼠明暗反應(yīng)箱(40×20×20cm)由明箱(占3/4)和暗箱(占1/4)兩部分組成。明箱是由白色透明有機(jī)玻璃制成，暗箱是由不透光的灰色塑料板制成，頂部加蓋。兩箱中間的隔板下方開(kāi)—門(mén)洞(5×5cm)，供小鼠進(jìn)出。用一盞白炙燈(200W)調(diào)節(jié)，并用照度計(jì)測(cè)試，使明箱內(nèi)平均照度達(dá)70001x，暗箱內(nèi)照度為0。試驗(yàn)前90或120分鐘分別單次口服灌胃不同劑量的MN-7-6，陽(yáng)性藥安定于試驗(yàn)前30分鐘腹腔注射1次。動(dòng)物給藥后置于安靜的暗環(huán)境中。測(cè)試時(shí)，將小鼠放入明箱中央，背向暗箱，觀察記錄10分鐘內(nèi)動(dòng)物穿箱次數(shù)(即小鼠進(jìn)入暗箱后再返回明箱的次數(shù))。
7.大鼠Vogel飲水沖突試驗(yàn)參考文獻(xiàn)4即Shimizu H，Hirose A，Tatsuno T，Nakamura M，Katsube J.Pharmacological properties of SM-3997A newanxioselective anxiolytic candidate.Japan J Pharmacol，1987，45(4)493-500中描述的方法，試驗(yàn)裝置為Model-102型飲水焦慮儀系統(tǒng)(美國(guó))，包括飲水操作箱(45×25×20cm)、刺激器和控制器。操作箱為有機(jī)玻璃箱，底部墊不銹鋼柵欄，頂蓋上插入一個(gè)不銹鋼嘴的水瓶，分別與刺激器相連，在大鼠舔水時(shí)可形成回路，由控制器自動(dòng)記錄舔水次數(shù)，每舔水20次可自動(dòng)給予一次電擊。大鼠禁水24h放入操作箱內(nèi)進(jìn)行無(wú)電擊訓(xùn)練，選擇3分鐘內(nèi)飲水次數(shù)不少于300次的動(dòng)物繼續(xù)禁水24h(共禁水48h)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，每飲水20次給予一次電擊(0.25mA，2s)，記錄3分鐘內(nèi)大鼠飲水次數(shù)。實(shí)驗(yàn)前120分鐘單次口服灌胃不同劑量的MN-7-6，陽(yáng)性對(duì)照藥安定于試驗(yàn)前30分鐘腹腔注射。
8.鎮(zhèn)靜催眠實(shí)驗(yàn)參考文獻(xiàn)5即徐叔云等，藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué).人民衛(wèi)生出版社，1994中的方法，(1)量效關(guān)系測(cè)定小鼠單次口服灌胃不同劑量的MN-7-6或蒸餾水，2小時(shí)后腹腔注射閾下睡眠劑量的戊巴比妥鈉(25mg/kg)，觀察各劑量組在給予戊巴比妥鈉后5、10、15和20分鐘時(shí)入睡動(dòng)物只數(shù)。以動(dòng)物翻正反射消失1分鐘以上作為判別“入睡”的標(biāo)準(zhǔn)。(注MN-7-6給藥后2小時(shí)注射催眠藥系根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選定)(2)時(shí)效關(guān)系測(cè)定小鼠單次口服灌胃MN-7-6(100mg/kg)或蒸餾水，分別于給藥后1、2、3或4小時(shí)腹腔注射閾下睡眠劑量的戊巴比妥鈉(25mg/kg)，觀察指標(biāo)和判別標(biāo)準(zhǔn)同上，測(cè)查時(shí)間為注射戊巴比妥鈉后10和15分鐘。
八.試驗(yàn)結(jié)果(一)抗抑郁試驗(yàn)1.小鼠懸尾試驗(yàn)與對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照藥丙咪嗪(Imp)10mg/kg可顯著縮短懸尾不時(shí)間(P＜0.01)；豆腐果苷單次口服灌胃12.5、25、50、100mg/kg，與對(duì)照組比較，25mg/kg組顯著減少懸尾不動(dòng)時(shí)間(P＜0.05)。(見(jiàn)表1)表1.小鼠口服豆腐果苷對(duì)懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響藥物及劑量動(dòng)物數(shù) 懸尾后4分鐘內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間(mg/kg)(n) (秒)蒸餾水 16 71.3±35.6Imp 10 15 39.8±19.2**MN-7-6 100 16 74.3±39.050 18 79.5±41.825 16 47.2±32.5*12.5 16 59.1±31.1注x±s。*P＜0.05，**P＜0.01，與蒸餾水對(duì)照組比較。
2.大鼠強(qiáng)迫性游泳試驗(yàn)與對(duì)照組比較，丙咪嗪10mg/kg可明顯縮短大鼠強(qiáng)迫性游泳的不動(dòng)時(shí)間(P＜0.01)；豆腐果苷單次口服灌胃12.5、25、50、100mg/kg，在50mg/kg劑量下，顯著縮短不動(dòng)時(shí)間(P＜0.05)。(見(jiàn)表2)表2.大鼠口服豆腐果苷對(duì)強(qiáng)迫性游泳不動(dòng)時(shí)間的影響藥物及劑量 動(dòng)物數(shù) 游泳5分鐘內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間(mg/kg) (n) (秒)蒸餾水13109.6±38.0Imp 10 1361.5±46.6**MN-7-6 100 1498.1±45.650 1483.0±19.7*25 1387.8±48.912.5 1499.6±39.0注x±s。*P＜0.05，**P＜0.01，與蒸餾水對(duì)照組比較。
3.小鼠自發(fā)活動(dòng)計(jì)數(shù)試驗(yàn)與對(duì)照組比較，單次口服灌胃豆腐果苷12.5、25、50、100mg/kg，對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)計(jì)數(shù)無(wú)明顯影響(見(jiàn)表3)。
表3.小鼠口服豆腐果苷對(duì)白發(fā)活動(dòng)次數(shù)的影響藥物及劑量 動(dòng)物數(shù) 10分鐘內(nèi)自發(fā)活動(dòng)計(jì)數(shù)(mg/kg)(n)運(yùn)動(dòng)距離 運(yùn)動(dòng)時(shí)間靜止時(shí)間蒸餾水 10 1072.3±211.5 307.2±35.8 292.7±36.0MN-7-6 100 10 1069.0±248.3 285.1±54.2 309.9±60.050 10 1330.9±400.9 339.4±45.6 260.9±45.825 10 1078.7±174.3 329.3±114.5 300.0±47.212.5 10 1039.0±178.4 313.6±42.8 286.2±42.9注x±s。
4.小鼠5-羥色胺酸(5-HTP)甩頭試驗(yàn)小鼠腹注5-HTP 120mg/kg可引起甩頭行為，與對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照藥丙咪嗪10mg/kg明顯增加小鼠甩頭次數(shù)(P＜0.01)，口服灌胃MN-7-6 12.5、25、50、100mg/kg，在50mg/kg劑量下可顯著增加甩頭次數(shù)(P＜0.05)。(見(jiàn)表4)表4.小鼠口服MN-7-6對(duì)5-HTP誘導(dǎo)的甩頭行為的影響藥物及劑量 動(dòng)物數(shù)20分鐘內(nèi)累計(jì)甩頭次數(shù)(mg/kg) (n) (次)蒸餾水22 10.3±9.4Imp 1010 32.9±19.7**MN-7-6 10016 10.6±11.95020 18.1±13.1*2522 15.6±15.112.521 9.0±9.4注5-HTP 120mg/kg，ip。試驗(yàn)結(jié)果以x±s表示；*P＜0.05；**P＜0.01，與蒸餾水對(duì)照組比較。
5.大鼠利血平化試驗(yàn)腹腔注射利血平會(huì)引起體內(nèi)單胺遞質(zhì)耗竭，使動(dòng)物出現(xiàn)體溫下降、活動(dòng)減少和眼瞼下垂等行為表現(xiàn)。大鼠單獨(dú)腹腔注射利血平5mg/kg使肛溫平均下降0.74℃，利血平化癥狀(活動(dòng)減少、眼瞼下垂)得分接近滿分(5分)。大鼠預(yù)先給予MN-7-6 25、50、100mg/kg，各劑量均可明顯對(duì)抗眼瞼下垂(P＜0.01)；在100mg/kg劑量下顯著對(duì)抗利血平誘導(dǎo)的大鼠體溫下降(P＜0.05)，并具有劑量依賴關(guān)系；以上劑量對(duì)利血平化誘導(dǎo)的活動(dòng)減少無(wú)明顯對(duì)抗作用。(見(jiàn)表5)表5.大鼠口服MN-7-6對(duì)利血平化效應(yīng)的影響藥物及劑量 動(dòng)物數(shù) 利血平化得分肛溫變化(mg/kg) (n) 眼瞼下垂活動(dòng)性 (℃)蒸餾水8 3.50±0.5 1 --0.74±0.9MN-7-6 100 8 2.25±0.7*1 ++0.25±0.3*50 8 1.25±0.7**0.88±0.4 --0.29±0.525 7 1.86±0.9**1 --0.51±0.7
注利血平5mg/kg，ip。體溫變化值以x±s表示；“-”，表示體溫降低；“+”，表示體溫升高。*P＜0.05；**P＜0.01，與蒸餾水對(duì)照組比較。
(二) 抗焦慮試驗(yàn)1.小鼠明暗穿箱試驗(yàn)與對(duì)照組比較，抗焦慮劑安定1mg/kg腹胺注射30分鐘后可顯著增加小鼠穿箱次數(shù)，顯示抗焦慮效應(yīng)。小鼠口服灌胃豆腐果苷120分鐘后在12.5、25、50mg/kg劑量范圍內(nèi)對(duì)10分鐘內(nèi)小鼠穿箱次數(shù)無(wú)明顯影響，口服灌胃豆腐果苷90分鐘后，在6.25、12.5、25、50、100mg/kg劑量范圍內(nèi)對(duì)該項(xiàng)指標(biāo)亦無(wú)明顯影響(見(jiàn)表6、表7)。
表6.小鼠口服豆腐果苷120分鐘對(duì)明暗穿箱行為的影響藥物及劑量 動(dòng)物數(shù) 10分鐘內(nèi)累計(jì)穿箱次數(shù)(mg/kg) (n) (次)蒸餾水10 5.40±4.48安定 1 9 15.78±8.98*MN-7-6 5010 5.20±4.942510 5.30±3.6812.510 5.10±3.57注x±s。*P＜0.05，**P＜0.01，與蒸餾水對(duì)照組比較。
表7.小鼠口服豆腐果苷90分鐘對(duì)明暗穿箱行為的影響藥物及劑量 動(dòng)物數(shù) 10分鐘內(nèi)累計(jì)穿箱次(mg/kg) (n) (次)蒸餾水 16 6.65±4.90安定 1 12 16.25±6.58**MN-7-6 100 14 4.43±4.5250 14 4.07±3.8725 14 6.07±4.0112.5 14 6.00±4.446.25 14 6.14±4.72注x±s。*P＜0.05，**P＜0.01，與蒸餾水對(duì)照組比較。
2.大鼠Vogel飲水沖突試驗(yàn)陽(yáng)性對(duì)照藥安定2mg/kg可明顯增加禁水48小時(shí)大鼠的電擊飲水次數(shù)，與對(duì)照組比較結(jié)果具有顯著性差異(P＜0.05)，豆腐果苷單次灌服在10、30、90mg/kg劑量范圍內(nèi)對(duì)電擊飲水次數(shù)無(wú)明顯影響(見(jiàn)表8)。
表8.大鼠口服豆腐果苷對(duì)Vogel電擊飲水次數(shù)的影響藥物及劑量 動(dòng)物數(shù)3分鐘內(nèi)電擊飲水次數(shù)(mg/kg) (n)(次)蒸餾水 8 365.5±105.7安定 28 476.3±72.5*MN-7-6 908 443.4±67.9308 386.9±64.4108 422.0±30.1注大鼠共禁水48小時(shí)，電擊強(qiáng)度I＝0.25mA。結(jié)果以x±s表示。*P＜0.05；**P＜0.01，與蒸餾水對(duì)照組比較。
(三)鎮(zhèn)靜催眠試驗(yàn)1.小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量催眠試驗(yàn)對(duì)照組小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉25mg/kg后，在各時(shí)間點(diǎn)內(nèi)最多有33.3％的動(dòng)物出現(xiàn)翻正反射消失入睡，戊巴比妥鈉的作用高峰在5-20分鐘。小鼠單次口服灌胃MN-7-6 25、50、100、200mg/kg 2小時(shí)后，對(duì)戊巴比妥鈉25mg/kg的鎮(zhèn)靜催眠作用均有增強(qiáng)作用，且隨劑量增加而作用增強(qiáng)，其中100mg/kg作用顯著，入睡動(dòng)物數(shù)最多達(dá)到100％(P＜0.01)(見(jiàn)表9)。
表9.小鼠口服豆腐果苷對(duì)戊巴比妥鈉閾下催眠的增強(qiáng)作用藥物及劑量動(dòng)物數(shù)腹注戊巴比妥鈉后不同時(shí)間入睡動(dòng)物比(mg/kg)(n) 5分鐘 10分鐘 15分鐘 20分鐘蒸餾水 211/21 6/21 7/21 6/21MN-7-6 200 103/10 4/10 8/10 8/10100 105/10 10/10 8/10 7/10**50 100/10 5/10 5/10 4/1025 101/10 4/10 4/10 3/10
注小鼠口服MN-7-6不同劑量2小時(shí)，戊巴比妥鈉25mg/kg，ip，分別于不同時(shí)間觀察計(jì)數(shù)入睡動(dòng)物只數(shù)，以翻正反射消失達(dá)1分鐘以上者視為“入睡”。
小鼠MN-7-6 100mg/kg單次灌胃后，分別于1、2、3、4小時(shí)檢測(cè)其對(duì)戊巴比妥鈉閾下催眠的增強(qiáng)作用，以測(cè)定其時(shí)效關(guān)系。從表10可見(jiàn)，藥后1小時(shí)最大藥效為2/10動(dòng)物入睡，藥后2小時(shí)入睡動(dòng)物數(shù)為5/10，藥后3小時(shí)為2/10，藥后4小時(shí)未顯示藥效作用。
表10.小鼠口服豆腐果苷(100mg/kg)不同時(shí)間對(duì)戊巴比妥鈉閾下催眠的增強(qiáng)作用藥物作用時(shí)間 動(dòng)物數(shù) 腹注戊巴比妥鈉后不同時(shí)間，入睡動(dòng)物比(小時(shí)) (n)10分鐘 15分鐘蒸餾水 10 0/10 0/10MN-7-61 10 2/10 2/102 10 3/10 5/10*3 10 2/10 1/104 10 0/10 0/10注MN-7-6 100mg/kg，p.o.；戊巴比妥鈉25mg/kg，ip；分別于ip戊巴比妥鈉后10和15分鐘觀察計(jì)數(shù)入睡動(dòng)物只數(shù)，以翻正反射消失達(dá)1分鐘以上者視為“入睡”。
上述結(jié)果表明，MN-7-6時(shí)效關(guān)系大致為藥后1小時(shí)起效，2小時(shí)達(dá)峰，以后逐漸減弱，4小時(shí)作用消失(見(jiàn)圖1)。
九.討論豆腐果苷(MN-7-6)在臨床用于治療神經(jīng)衰弱。文獻(xiàn)報(bào)道，該藥具有鎮(zhèn)靜、催眠、止痛的作用，腹腔注射MN-7-6可明顯延長(zhǎng)戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間，使閾下催眠劑量的戊巴比妥鈉、巴比妥鈉、硫噴妥鈉及水合氯醛的動(dòng)物入睡[7]。本試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)，在25-200mg/kg劑量范圍內(nèi)，MN-7-6-次性灌胃可劑量依賴性增強(qiáng)閾下催眠劑量的戊巴比妥鈉的中樞作用，其鎮(zhèn)靜催眠作用于1小時(shí)后開(kāi)始起效，2小時(shí)作用達(dá)到高峰，4小時(shí)作用消失。根據(jù)以上結(jié)果，在抗焦慮、抗抑郁及其它藥理試驗(yàn)中，選擇藥物作用時(shí)間為90-120分鐘。
在兩個(gè)經(jīng)典的抑郁行為模型——小鼠懸尾模型和大鼠強(qiáng)迫性游泳模型上，MN-7-6單次口服灌胃均顯示出減少不動(dòng)時(shí)間的作用，有效劑量分別在25mg/kg和50mg/kg，并且在此劑量范圍，該藥對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)無(wú)明顯影響。說(shuō)明其減少不動(dòng)時(shí)間的作用確為抗抑郁作用，而非中樞興奮作用。
進(jìn)一步藥理試驗(yàn)結(jié)果顯示，MN-7-6能增強(qiáng)5-HTP誘導(dǎo)的小鼠甩頭行為，并能對(duì)抗利血平引起的體溫下降，提示MN-7-6有增強(qiáng)5-HTP和NA能神經(jīng)系統(tǒng)功能的作用，這可能是其抗抑郁作用的機(jī)制之一。
在小鼠明暗穿箱焦慮模型上，MN-7-6單次口服灌胃在給藥后90分鐘和120分鐘兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，各受試劑量均未顯示增加穿箱次數(shù)的抗焦慮作用，而在同樣試驗(yàn)條件下，陽(yáng)性對(duì)照藥安定(1mg/kg，ip)顯著增加沖突行為。在大鼠Vogel飲水沖突試驗(yàn)中，MN-7-6也未顯示增加電擊飲水次數(shù)，與小鼠明暗箱試驗(yàn)結(jié)果一致。提示在單次口服灌胃條件下，MN-7-6無(wú)明顯抗焦慮效應(yīng)。
十.結(jié)論1.小鼠單次口服灌胃MN-7-6 25-200mg/kg可增強(qiáng)戊巴比妥鈉催眠閾下劑量的作用，其中100mg/kg作用效果最佳。MN-7-6口服灌胃后1小時(shí)開(kāi)始起效，2小時(shí)效果最佳，3-4小時(shí)作用減弱至消失。
2.單次單次口服灌胃MN-7-6可縮短小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間和大鼠強(qiáng)迫性游泳不動(dòng)時(shí)間，其有效劑量分別為25mg/kg和50mg/kg，在此劑量范圍對(duì)中樞無(wú)明顯興奮或抑制作用。
3.單次口服灌胃MN-7-6對(duì)5-HTP誘導(dǎo)小鼠甩頭有增強(qiáng)作用，在50mg/kg時(shí)效果最佳。
4.單次口服灌胃MN-7-6可明顯對(duì)抗利血平化引起的大鼠眼瞼下垂，劑量依賴性對(duì)抗利血平化引起的大鼠體溫下降作用，而對(duì)利血平化引起的活動(dòng)減少無(wú)明顯對(duì)抗作用。
5.單次口服灌胃MN-7-6對(duì)小鼠明暗箱次數(shù)和大鼠Vogel飲水次數(shù)無(wú)明顯影響。
附圖1是小鼠口服MN-7-6 100mg/kg催眠增強(qiáng)作用時(shí)效曲線(注結(jié)果同表10，*P＜0.05，與對(duì)照組比較)。
由此說(shuō)明，本發(fā)明化合物對(duì)苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷，即豆腐果苷，具有明顯的抗抑郁活性，可以用于治療抑郁癥等精神疾病。
權(quán)利要求
1.下式的對(duì)苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷化合物用于制備治療抑郁癥疾病的藥物的用途
全文摘要
本發(fā)明涉及豆腐果苷化合物用于制備治療抑郁癥藥物的用途，豆腐果苷，又名昆明神衰果素，系從中國(guó)云南省野生植物山龍眼科蘿卜樹(shù)(Helicia essatia Hook)的果實(shí)豆腐果中提取的有效成分，該化合物的化學(xué)名稱是對(duì)苯甲醛－O－β－D－阿洛吡喃糖苷，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)該化合物可以用于治療抑郁等精神疾病的報(bào)道。
文檔編號(hào)A61P25/24GK1507872SQ02155478
公開(kāi)日2004年6月30日 申請(qǐng)日期2002年12月16日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月16日
發(fā)明者王壯, 胡利昆, 羅質(zhì)璞, 李云峰, 趙楠, 王子厚, 王滟華, 陳映谷, 王 壯 申請(qǐng)人:昆明貝克諾頓制藥有限公司