專利名稱：薯蕷皂苷的抗腫瘤作用及其藥物制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明關(guān)于薯蕷皂苷(Dioscin)在抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用及其藥物制劑，屬于中藥領(lǐng)域。
薯蕷皂苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)式(其英文名稱為Dioscin) 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的之一是提供了薯蕷皂苷的藥物制劑；本發(fā)明的目的之二是提供了薯蕷皂苷的抗腫瘤新用途。
本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的藥物制劑含有1％-99％的薯蕷皂苷和99％-1％的賦形劑(包括其它配用的藥物)，優(yōu)選含有30％-80％的薯蕷皂苷和70％-20％的藥用賦形劑(包括其它配伍用的藥物)，最好含有60％-70％的薯蕷皂苷和40％-30％的賦形劑(包括其它配伍用的藥物)。
按藥劑學(xué)方法，可以將本發(fā)明的薯蕷皂苷制備成多種臨床藥物劑型作為抗腫瘤藥物，包括口服制劑或非腸道給藥的劑型。所說(shuō)的口服制劑選自于片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑中的任何一種；所說(shuō)的非腸道給劑型選自于注射劑、氣霧劑、栓劑或皮下給藥劑型當(dāng)中的一種。
本發(fā)明的抗腫瘤藥物中的輔料是指常規(guī)的賦形劑，如溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑等。本發(fā)明抗腫瘤藥物中的其它配伍用的藥物，指的是以有效劑量的薯蕷皂苷為一定的藥物原料，再配伍其它已允許合用的中藥或化學(xué)藥品。
本發(fā)明的薯蕷皂苷藥物制劑具有抗腫瘤作用，是通過(guò)以下的藥效實(shí)驗(yàn)得到證實(shí)的。實(shí)驗(yàn)例1薯蕷皂苷對(duì)體外腫瘤細(xì)胞的抑制作用細(xì)胞 MCF-7(人乳腺癌細(xì)胞)，NCI-H446(人小細(xì)胞肺癌)，MGC-803(人胃癌細(xì)胞)，Swillc(人結(jié)腸癌細(xì)胞)，U251(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)，SGC-7901(人胃癌細(xì)胞)，K562(人紅白血病細(xì)胞)，A375-S2(人黑色素瘤細(xì)胞)，Hela(人宮頸癌細(xì)胞)，BEL-7204(人肝癌細(xì)胞)、HL-60(白血病細(xì)胞)，均購(gòu)自吉林省腫瘤醫(yī)院試藥 薯蕷皂苷(Dioscin)由于吉林天藥科技股份有限公司天然藥物研究所中藥化學(xué)室提供，白色針狀結(jié)晶；四甲基偶氮唑鹽(MTT)、青霉素G鉀鹽、硫酸鏈霉素、HEPES和DMSO為Sigma公司產(chǎn)品；胰酶為Difco產(chǎn)品；新生牛血清(FBS)為北京元亨圣馬生物技術(shù)研究所產(chǎn)品；RPMI-1640培養(yǎng)基為Hyclone產(chǎn)品；儀器 CK2TRC-3熒光倒置顯微鏡，OLYMPUS-日本產(chǎn)品；D-63450-CO2培養(yǎng)箱，Hera-德國(guó)產(chǎn)品；FCANF129004酶標(biāo)儀為TECAN-澳大利亞產(chǎn)品。方法 MTT法將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞消化，離心，記數(shù)，以1×105個(gè)/mL密度接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔100μL，培養(yǎng)24小時(shí)后，加入濃度梯度藥物，同時(shí)設(shè)溶劑對(duì)照和空白對(duì)照，培養(yǎng)44小時(shí)后，每孔加入20μLMTT(5mg/mL)，再培養(yǎng)4小時(shí)，棄上清，每孔加入150μL二甲基亞砜，振蕩10分鐘，應(yīng)用酶標(biāo)儀于492nm處測(cè)OD值。
表1 MTT法測(cè)定十一種腫瘤細(xì)胞的抑制率(％) 結(jié)果 從表1可以看出，薯蕷皂苷對(duì)上述十一種腫瘤細(xì)胞均具有非常強(qiáng)的抑制生長(zhǎng)作用并具有明顯的量效關(guān)系，其中對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞(A375-S2)、人早幼白血病細(xì)胞(HL-60)、人宮頸癌細(xì)胞(Hela)作用最為顯著。薯蕷皂苷在濃度達(dá)8μg/mL時(shí)對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞(A375-S2)等八個(gè)細(xì)胞的抑制率幾乎達(dá)100％(98％以上)。實(shí)驗(yàn)例2薯蕷皂苷整體抗腫瘤作用動(dòng)物S180等4種腫瘤腹水傳代小鼠，均購(gòu)自吉林省腫瘤研究所。昆明小鼠，體重18-22g，購(gòu)自高新區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。
藥品 薯蕷皂苷由吉林天藥科技股份有限公司天然藥物研究所中藥化學(xué)室提供，白色針狀結(jié)晶，純度為98％以上。注射用環(huán)磷酰胺，規(guī)格為200mg/支，批號(hào)為20010102，上海華聯(lián)制藥有限公司產(chǎn)品。
儀器 電子天平，型號(hào)為酶特勒-托利多AB204-N方法實(shí)驗(yàn)用小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(ig蒸餾水200mlkg-1)、環(huán)磷酰胺(ip20mgkg-1)、薯蕷皂苷(ig200mg、100mg和50mgkg-1)，選取移植腫瘤7天、腫瘤生長(zhǎng)良好、腹部隆起明顯的小鼠，腹部皮膚消毒，用一次性無(wú)毒采血器經(jīng)腹壁刺入腹腔，抽取腹水，放入無(wú)菌燒杯中以生理鹽水稀釋成1∶3的癌細(xì)胞混懸液，于每只小鼠右腋下接種0.2ml，各組動(dòng)物于接種腫瘤次日開始給藥，每日一次，連續(xù)給藥10天。給藥結(jié)束后，將動(dòng)物稱重后處死，剝離腫塊稱重，比較各組腫瘤生長(zhǎng)情況(各組動(dòng)物初始數(shù)目均為10只，表中所列動(dòng)物數(shù)均為去除死亡動(dòng)物后剩余的數(shù)目)。試驗(yàn)表明，薯蕷皂苷200、100、50mg對(duì)S180、HepA、U14和EAC腫瘤細(xì)胞均具有明顯的抑制作用，對(duì)S180的抑瘤率為39-62％，對(duì)HepA抑瘤率為36-66％，對(duì)U14抑瘤率為37-54％，對(duì)EAC抑瘤率為38-56％，具體試驗(yàn)結(jié)果見表2-5。
表2薯蕷皂苷對(duì)小鼠S180瘤重的影響劑量 動(dòng)物數(shù) 動(dòng)物體重(g)瘤重抑瘤率組別mg.kg-1(n) 給藥前 給藥后 (g) (％)對(duì)照組 - 1020.6±1.68 28.3±1.83 2.08±0.86環(huán)磷酰胺201020.9±1.72 26.1±2.37 0.78±0.31***62.5薯蕷皂苷200 9 20.4±1.10 27.2±3.39 0.93±0.35**55.3薯蕷皂苷100 1020.8±1.47 27.8±2.89 0.98±0.37**52.3薯蕷皂苷509 20.5±1.43 28.0±3.18 1.25±0.18*39.9
注與對(duì)照組比較，***P＜0.001**P＜0.01*P＜0.05表3薯蕷皂苷對(duì)小鼠HepA瘤重的影響劑量 動(dòng)物數(shù)動(dòng)物體重(g)瘤重 抑瘤率組別mg.kg-1(n) 給藥前 給藥后 (g) (％)對(duì)照組 - 10 19.7±1.76 28.2±1.93 2.13±0.67環(huán)磷酰胺 20 919.9±1.60 25.1±2.38 0.71±0.29***66.7薯蕷皂苷 20010 19.4±1.08 26.2±3.46 0.88±0.28***58.7薯蕷皂苷 10010 19.7±1.57 26.8±2.90 1.05±0.39***50.6薯蕷皂苷 50 919.7±1.42 28.2±3.20 1.36±0.19**36.1注與對(duì)照組比較，***P＜0.001**P＜0.01表4薯蕷皂苷對(duì)小鼠U14瘤重的影響劑量 動(dòng)物數(shù)動(dòng)物體重(g)瘤重 抑瘤率組別mg.kg-1(n) 給藥前給藥后 (g) (％)對(duì)照組 - 1019.7±1.7627.4±1.93 1.97±0.76環(huán)磷酰胺 20 1020.9±1.6025.1±2.38 0.89±0.24***54.8薯蕷皂苷 2001020.4±1.0825.8±3.46 0.94±0.37***52.3薯蕷皂苷 1008 20.7±1.5725.7±2.90 1.02±0.25**48.2薯蕷皂苷 50 9 20.6±1.4228.0±3.20 1.23±0.16*37.6注與對(duì)照組比較，***P＜0.001**P＜0.01*P＜0.05表5薯蕷皂苷對(duì)小鼠EAC瘤重的影響劑量 動(dòng)物數(shù) 動(dòng)物體重(g) 瘤重 抑瘤率組別mg.kg-1(n)給藥前給藥后 (g) (％)對(duì)照組 - 9 20.8±2.0329.2±1.87 1.97±0.77環(huán)磷酰胺 209 20.9±1.6027.1±2.12 0.85±0.29***56.9薯蕷皂苷 200 10 20.4±1.0826.5±3.35 0.93±0.25**52.8薯蕷皂苷 100 10 20.7±1.5727.8±2.47 1.05±0.26**46.7薯蕷皂苷 509 20.3±1.4227.3±3.29 1.22±0.39*38.1注與對(duì)照組比較，***P＜0.001**P＜0.01*P＜0.05上述離體實(shí)驗(yàn)和整體實(shí)驗(yàn)表明，薯蕷皂苷對(duì)離體和整體腫瘤細(xì)胞均具有明顯的抑制作用。離體實(shí)驗(yàn)表明，在濃度為8μg/mL時(shí)對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞(A375-S2)等八個(gè)細(xì)胞的抑制率幾乎達(dá)100％(98％以上)；整體實(shí)驗(yàn)表明，薯蕷皂苷200、100、50mg對(duì)S180、HepA、U14和EAC腫瘤細(xì)胞均具有明顯的抑制作用，抑瘤率可達(dá)36-67％。
權(quán)利要求
1.一種藥物制劑，其特征在于含有有效治療劑量的薯蕷皂苷和一種或多種藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑，或可與薯蕷皂苷組方的其它藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物制劑，其特征在于含有1％-99％的薯蕷皂苷和99％-1％的藥用賦形劑或其它可組方的藥物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物制劑，其特征在于含有30％-80％的薯蕷皂苷和70％-20％的藥用賦形劑或其它可組方的藥物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物制劑，其特征在于含有60％-70％的薯蕷皂苷和40％-30％的藥用賦形劑或其它可組方的藥物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物制劑，其特征在于所說(shuō)的藥物是口服制劑或非腸道給藥的劑型。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物制劑，其特征在于所說(shuō)的口服制劑選自于片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑當(dāng)中的任何一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物制劑，其特征在于所說(shuō)的非腸道給藥劑型選自于注射劑、氣霧劑、栓劑或皮下給藥劑型當(dāng)中的任何一種。
8.薯蕷皂苷在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的用途，其特征在于所說(shuō)的抗腫瘤是指對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的用途，其特征在于所說(shuō)的腫瘤細(xì)胞是人乳腺癌細(xì)胞、人小細(xì)胞肺癌、人胃癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞、人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞、人胃癌細(xì)胞、人紅白血病細(xì)胞、人黑色素瘤細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞、早幼粒白血病細(xì)胞、肉瘤180、肝癌腹水型、小鼠宮頸癌-14或艾氏腹水癌。
全文摘要
本發(fā)明公開了從穿龍薯蕷等植物中獲得的薯蕷皂苷(Dioscin)在抗腫瘤方面的醫(yī)藥新用途。同時(shí)也公開了以薯蕷皂苷為制藥原料制備成片劑、膠囊劑、滴丸、注射劑等藥物制劑。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1416816SQ0214679
公開日2003年5月14日 申請(qǐng)日期2002年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2002年11月8日
發(fā)明者趙全成, 赫玉芳, 劉威, 南敏倫 申請(qǐng)人:吉林天藥科技股份有限公司