專利名稱：一種高穩定性抗白內障藥物的制作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，確切地說它是關于二乙基二硫代氨基甲酸與鋅形成螯合物——一種高穩定性抗白內障藥物。
背景技術：
白內障患者在世界上約有一億一仟萬，在中國老年人口約一億，其中白內障患者約占42％，雖然市場上有一些治療白內障的藥物，如白內停等，中國專利號96199436公開了一種名稱為“膦酸二酯衍生物”的發明專利，它可以做為白內障的制劑使用，中國專利號97107788和中國專利號99113152都公開了一種名稱為“一種治療白內障中藥的配方及制備方法”的發明專利，還有中國專利號00110652公開了一種名稱為“眼明膠囊”的發明專利，上述專利雖然都說有一定療效，但市場上還未見銷售。從現有的治療手段看，目前除手術治療外，還沒有很好的藥物。本發明是研究開發DDC及其衍生物制成制劑用于抗白內障藥物，進一步提高生物利用度。(特許開平7-233057號)。DDC水溶解性差，通過角膜困難，所以生物利用度低，又易氧化，很不穩定，藥效很難發揮，不能制成藥物。
發明內容
本發明是將DDC與鋅形成螯合物(DDC)2Zn來解決上述問題的。本發明含有高穩定性抗白內障有效成分(DDC)2Zn。本發明是將(DDC)2Zn與環糊精衍生物進行包合形成包合物，可使該化合物溶解性提高，制備成抗白內障藥物滴眼液。提高(DDC)2Zn的生物利用度并解決DDC的穩定性，可適用于水難溶性藥物。
(DDC)2Zn與HP-β-CD形成包合物可使在水中溶解度增加(如附
圖1)，角膜的透過性高，生物利用度增大(如附圖2)。抗白內障藥物制劑的安全性及穩定性提高，可以長期使用(如表2)，有效成分的藥物完全溶解，患者可安心使用。本發明是(DDC)2Zn和HP-β-CD形成包合物時經加熱處理可制備成穩定性好、藥物包合率高的包合物，又2分子HP-β-CD包合(DDC)2Zn使溶解度增加。據此，長時間角膜透過性高，生物利用度增大(如附圖2)。本發明加入纖維狀高分子纖維素衍生物，例如加入羥丙基纖維素(HPMC)可提高抗白內障藥物(DDC)2Zn穩定(如表2)。
分子式[(C2H5)2NS2]2Zn，(DDC)2Zn融點 177℃(白色粉末)
溶解性苯、氯仿等有機溶劑中溶解，水、乙醇不溶促進劑天然橡膠、苯乙烯丁二烯、苯烯腈丁二烯、異丁烯-異戊二烯等合成橡膠及膠乳的硫化促進劑。
毒性低LD503340mg/kg(小鼠口服)本發明是(DDC)2Zn與環糊精衍生物形成包合物，α、β、γ環糊精，2，6-二-O-甲基-β-環糊精，2，3，6-三-O-甲基-β-環糊精，2-羥乙基-β-環糊精，2-羥丙基-β-環糊精，3-羥丙基-β-環糊精，2，3-二羥丙基-β-環糊精等均可形成包合物。較好的有2-羥丙基-β-環糊精，3-羥丙基-β-環糊精，2，3-二羥丙基-β-環糊精，葡萄糖基-β-環糊精，麥芽糖基-β-環糊精，最好的是2-羥丙基-β-環糊精。
(DDC)2Zn中環糊精及其衍生物的添加量是0.1～50％，較好的是0.5～30％，再好的是0.5～20％。
本發明(DDC)2Zn的穩定劑考察了羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)、甲基纖維素(MC)、羥丙基纖維素(HPMC)、聚乙烯醇(PVA)、海藻酸鈉等，較好的是PVA、HPMC，最好的是HPMC。HPMC的添加量一般是0.05～10％，較好的是0.1～5％，最好是0.1～1.0％。
本發明的(DDC)2Zn水性滴眼液，要加入其他緩沖液、等滲、抑菌劑、粘稠劑等。(DDC)2Zn的眼用制劑中含量，由于毒性低，沒有特別限制，由醫生確定，一次投與量是1μg～5mg，一日投與量是5μg～50mg。
藥劑學試驗(A)(DDC)2Zn的溶解度測定試驗(B)(DDC)2Zn溶液制劑的熱穩定性試驗(C)(DDC)2Zn-HP-β-CD溶液制劑的體外兔角膜透過性試驗實驗材料及試驗1.實驗材料A.試藥(DDC)2Zn，2-羥丙基-β-環糊精，HPMC，吲哚美辛，TFA(三氟醋酸)，甲醇，乙腈，氯芐酰氨(新潔爾滅)(BC)，NaCL，HEPES(N-2-羥乙基哌嗪乙烷基磺酸)，KCL，磷酸氫二鈉，CaCL·H2O，葡萄糖。
B.使用制劑0.5％(DDC)2Zn，10％HPCD，0.9％NaCL，0.005％BC，0％，0.1％，0.25％HPMC加熱攪拌48h以上。
其后，以0.2μm濾膜過濾，將試樣裝入具塞試管在沸水浴中煮沸30分鐘，進行加熱處理。
各處方的成分如下表1
制劑 (DDC)2Zn％ HPCD％HPMC％加熱處理處方1 0.5 10 0.00-處方2 0.5 10 0.00+處方3 0.5 10 0.10-處方4 0.5 10 0.10+處方5 0.5 10 0.25-處方6 0.5 10 0.25+處方7 0.5 10 0.50-處方8 0.5 10 0.50+C.實驗動物雌性白色家兔(2～3kg)，25±2℃動物室，裝入籠中，供給水與食物。2.試驗(A)(DDC)2Zn的溶解度測定法實驗方法HPLC法對(DDC)2Zn定量，色譜柱RP-18 GP50～2.0(3μm)，流動相含有0.1％TFA45％乙腈；流速0.25ml/min；35℃進行測定。DDC的檢測波長為215nm，采樣50μl，內標物2.5μg/ml吲哚美辛甲醇溶液100μl混合而成檢測樣品液，以HPLC法測定。
(DDC)2Zn的標準曲線是(4～40μg/ml)50μl中加入內標物吲哚美辛甲醇溶液(2.5μl/ml)100μl混合而成。
以測得(DDC)2Zn峰面積與內標物吲哚美辛峰面積比為縱軸，(DDC)2Zn濃度為橫軸，求出標準曲線的斜率，由下式求得(DDC)2Zn的濃度(DDC)2Zn的濃度(μg/ml)＝(DDC)2Zn的峰面積/內標物的峰面積*斜率試驗結果(DDC)2Zn在水中不溶，加入HP-β-CD后增加溶解度，加熱處理后，(DDC)2Zn溶解性增大。處方3、5、7非加熱處理制劑，加入HPMC后(DDC)2Zn的溶解度上升，加熱處理的2、6、8，隨HPMC含量增加，(DDC)2Zn溶解度顯著增加。如圖1是說明(DDC)2Zn的溶解性隨加入HPMC和加熱處理的影響。(B)各處方(DDC)2Zn的穩定性試驗實驗方法各處方在80℃(0，4，8，16，32，64h)，90℃(0，2，4.5，9，13.5，18h)，100℃(0，0.5，1.5，3，4.5，6h)恒溫下不同時間取樣，按溶解度測定的同樣方法以HPLC法測定(DDC)2Zn濃度。以一級動力學方程求得降解速率常數。
C＝C0e-kt式中C0--(DDC)2Zn初濃度；t—加熱時間；C--(DDC)2Zn在t時間濃度；k—速率常數求各處方在80℃、90℃、100℃下的速率常數k，以lnk對1/T進行回歸，得直線方程。
Lnk＝lnA-Ea/RT則Awhenius指數式為k＝Ae-Ea/RT式中Ea—活化能；A—頻率因子；R—摩爾氣體常數；T—熱力學溫度。由斜率可求活化能；由截距可求A值。
實驗結果求各處方制劑的活化能Ea與頻率因子A，并求25℃時速率常數k25℃，及t0.9，處方6分解速率最小。t0.9約為30年，非常穩定。又加入HPMC的制劑，可增加穩定性。各處方的動力學及穩定性數據如下表2制劑 Ea/kJ·mol-1A/h-1k25℃/h-1t0.9，25℃/year處方1 118 1.73×10153.23×10-63.72處方2 124 1.06×10161.83×10-66.58處方3 131 1.85×10171.88×10-66.41處方4 129 3.27×10168.36×10-714.4處方5 124 8.50×10151.59×10-67.56處方6 144 5.91×10183.98×10-730.2實驗方法C-1緩沖溶液的配制HEPES(+GLC)緩沖液、10mmol/LHEPS、136.2mmol/L NaCL、5.3mmol/L KCL、1.0mmol/L K2HPO4、1.7mmol/L CaCL2·2H2O、5.5mmol/L glucose、37℃，以1mol/L NaOH調pH＝7.4，0.20μm微孔濾膜過濾以下實驗使用。
C-2體外角膜透過實驗家兔(雌性，2.5～3.0kg)，將空氣從耳靜脈注入使家兔安樂死后，小心摘出眼球，將鞏膜全部剪去，小心除去附著在角膜上的虹膜及水晶體，殘余的角膜部分不要損傷，摘出固定在丙烯樹脂角膜透過器上，受體池側裝入等張HEPES緩沖液pH7.4，供體池側裝入制劑(表1的處方5及6)，角膜表面溫度35℃加熱。不同時間從受體池側取樣50μl，以HPLC法測定透過DDC量。
所得數據以非線性最小二乘法由計算機程序處理求出透過動力學參數，τ＝δ2/6D，JC=Q/A(t-τ)=KmDC(DDC)2Zn/δ=KpC(DDC)2Zn]]>式中JC是DDC的透過速度；Km是藥物在角膜/制劑的分配系數；D是在角膜內的擴散系數；τ是時滯；δ是角膜的厚度(平均0.0625cm)；A是所用角膜的有效面積(0.64cm2)；Q是t時間貯水側透過累積藥物量； 是(DDC)2Zn-HP-β-CD溶液制劑中(DDC)2Zn的濃度。JC及τ可由上式計算。
實驗結果實驗進行3小時，處方5(非加熱處理)和處方6(加熱處理)均非常緩慢的透過。但3小時以后加熱處理的處方6透過速度增加很快。圖2是(DDC)2Zn-HPCD溶液制劑的兔角膜透過性，所得數據解析，求出透過動力學參數，算出結果如表3所示。表3制劑 JC(nmol/ml/min) Kp(×105/min) D(×106)Km處方50.391±0.051 2.98±0.39 4.24±0.412.25±0.21處方60.717±0.029 3.40±0.14 4.17±0.561.42±0.19實際的透過速度以JC表示，加熱處理的處方6比未加熱處理的處方5大1.8倍，制劑中(DDC)2Zn濃度高透過速度大。制劑中(DDC)2Zn的透過速度常數是Kp，比較相近，可以說明藥物濃度高，透過速度JC上升。
本發明的優點是生物利用度增大，制成的抗白內障藥物制劑的安全性及穩定性提高，可以長期使用，有效成分的藥物完全溶解，患者可安心使用。
具體實施例方式實施例10.5％(DDC)2Zn，10％HPCD，0.9％NaCL，0.005％BC中加入0.1％HPMC攪拌48小時，經0.2μm濾膜過濾沸水浴上煮沸30分鐘，制成水性滴眼劑。
實施例20.5％(DDC)2Zn，10％HPCD，0.9％NaCL，0.005％BC中加入0.25％HPMC，實驗例1同樣制成水性滴眼劑實施例30.5％(DDC)2Zn，10％HPCD，0.9％NaCL，0.005％BC中加入0％，0.25％HPMC，實驗例2同樣操作制成水性滴眼劑。
權利要求
1.一種高穩定性抗白內障藥物，其特征在于作為抗白內障藥物有效成分為二乙基二硫代氨基甲酸鋅(DDC)2Zn。
2.根據權利要求1所述的一種高穩定性抗白內障藥物，其特征在于該藥物的水溶液為滴眼液。
3.根據權利要求1所述的一種高穩定性抗白內障藥物，其特征在于上述二乙基二硫代氨基甲酸鋅((DDC)2Zn與羥丙-β-環糊精形成包合物。
4.根據權利要求3所述的一種高穩定性抗白內障藥物，其特征在于藥物形成包合物需經加熱處理。
5.根據權利要求1所述的一種高穩定性抗白內障藥物，其特征在于藥物組成含有穩定劑。
6.根據權利要求5所述的一種高穩定性抗白內障藥物，其特征在于穩定劑是可溶性纖維素衍生物。
全文摘要
本發明是一種高穩定性抗白內障藥物，它具有生物利用度高，安全性和穩定性也高的特點，它的有效成分為二乙基二硫代氨基甲酸鋅(DDC)
文檔編號A61P27/12GK1408418SQ02132849
公開日2003年4月9日 申請日期2002年9月2日 優先權日2002年9月2日
發明者王思玲, 蘇德森, 王敏偉, 姚新生, 崛了平, 伊藤吉將 申請人:沈陽藥科大學