姜黃提取物注射劑及其制備方法和用途的制作方法

專利名稱：姜黃提取物注射劑及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及姜黃提取物的新注射劑型，更具體地說涉及這些制劑的脂質體劑型，納米脂質體劑型，前體脂質體劑型，長循環脂質體劑型，長循環納米脂質體劑型，納米微乳劑型，靜脈乳劑型，脂質納米球劑型和脂肪乳劑型。本發明還涉及這些劑型的制備方法和用途。
背景技術：
近年來，在抗癌天然藥物研究領域中的許多研究人員都致力于研究紫杉醇、欖香烯各種異構體、姜黃提取物、溫郁金提取物等的抗癌活性和這些藥物的各種制劑形式。
欖香烯是存在于某些植物中的一種倍半萜類化合物，拉丁名為Elemenum，英文名為Elemene，化學名是1-甲基-1-乙烯基-2，4-二異丙烯基環己烷，分子式C15H24。欖香烯有多種異構體，這些異構體中β-欖香烯，δ-欖香烯，γ-欖香烯已被證實有抗癌活性。欖香烯是可以從植物溫郁金(Curcuma Wenyujin Y.H.Chen et C.ling)的根莖(俗稱溫莪術)的揮發油中提取的化合物，或是從植物香茅(Cymbopoqon citratus(DC.)Stapt)的油中提取的化合物，例如從香茅油中除掉檸檬醛、香茅醇之后余下的混合油狀物，提取的化合物實際上是包含β-欖香烯的欖香烯異構體混合物。
上述植物溫郁金與另外兩種可作為天然藥物使用的植物莪術和姜黃同屬于姜科植物類群，產于中國的廣東、四川、福建、廣西、浙江等省。包含欖香烯的植物有溫郁金、香茅、水菖蒲、土木香、人參等50多種，其中香茅是在中國分布廣、資源充足的植物。目前，欖香烯類化合物主要從溫郁金油和香茅油中提取。
有許多文獻涉及直接采用天然藥物制備防治癌癥的草藥制劑，例如中國專利公開CN1216256A公開了治療肝癌的草藥制劑，它包括含有白花蛇舌草、姜黃，虎杖和山豆根的提取物作為主要天然藥物的可注射組合物(A)和含有白花蛇舌草、重樓、虎杖、山豆根、龍膽草、大黃、連翹、赤芍、姜黃和石菖蒲的提取物作為主要天然藥物的口服組合物(B)。
在中國專利公開CN1302559中公開了姜黃素制劑，它是通過制備在水可混合的有機溶劑中或水和水可混合的有機溶劑的混合物中的姜黃素分子分散體，然后向該溶液添加保護膠體水溶液，姜黃素的疏水相形成毫微分散相。最終的制劑形式主要是水性分散體或干粉，在優選的情況下粒徑小于10μm。
在CN1200266A中公開了通過二次分餾從香茅油中提取β-欖香烯的方法。
在中國專利公開CN1247756A中公開了用于治療惡性腫瘤的姜郁注射液，其中姜黃與郁金的重量比為50-60∶50-40，該注射液是一種簡單的混合物。
中國專利公開CN1076613A涉及欖香烯乳注射液及其制備方法，該注射液是一種乳狀液，平均粒徑一般不超過15微米，特別不超過2微米。
中國專利公開CN1244389A涉及欖香烯注射液及其制備方法，該注射液是一種簡單混合物，不是脂質體。
中國專利公開CN1110134A涉及脂質體制備工藝及制劑，其中特別描述了欖香烯脂質體注射液制備方法和由該方法獲得的欖香烯脂質體注射液，欖香烯的包封率達85％以上，但沒有給出有關脂質體的平均粒徑的數據。從制備方法可以判斷該脂質體具有較大的平均粒徑。
中國專利公開CN1221607A涉及利用CO2的臨界或超臨界方法來制備脂溶性藥物脂質體的工藝和所制備的欖香烯脂質體注射液，雖然欖香烯的脂質體的包封率很高，但脂質體的平均粒徑同樣太大。
以上這些文獻所公開的制劑在貯存穩定性和抗癌活性上都存在著不足。
另外，在一些專利文獻中還公開了欖香烯的各種衍生物和欖香烯金屬絡合物。例如，在CN11531158A中公開了一種欖香烯金屬絡合物和它作為抗癌藥物的使用。CN1153167A涉及欖香烯含氮衍生物及其作為抗癌藥物的用途。CN1153168A涉及欖香烯羥基類衍生物及其作為抗癌藥物的用途。

發明內容
本發明的目的是提供姜黃提取物注射劑，它含有從姜黃植物中提取的具有總倍半萜烯類含量≥70wt％的提取物，表面活性劑，和含水介質，該注射劑是一種水性分散體，分散相的平均粒徑≤1微米，表面活性劑的量是總注射劑的1-5wt％，在注射劑中總倍半萜烯類(活性成分)的濃度是1-10mg/ml。更優選地，該含水介質是水。
本發明的另一目的是提供姜黃提取物的新注射劑型，更具體地說涉及該提取物的脂質體劑型，納米脂質體劑型，前體脂質體劑型，長循環脂質體劑型，長循環納米脂質體劑型，納米微乳劑型，靜脈乳劑型，脂質納米球劑型或脂肪乳劑型。
本發明的另一個目的是提供這些注射劑型的制備方法。
本發明的再一個目的是提供這些新劑型的制劑用于制備治療癌癥或缺血性中風的藥物注射劑的用途，這些注射劑型用于緩解腫瘤疼痛的用途，以及這些新劑型的制劑用于抑制和/或治療腫瘤的用途。
本發明提供這些藥物的新劑型。以姜黃提取物作為原料分別制備成其納米脂質體劑型，前體脂質體劑型，長循環脂質體劑型，長循環納米脂質體劑型，納米微乳劑型，靜脈乳劑型，脂質納米球劑型和脂肪乳劑型。這些劑型的平均粒徑一般小于或等于1微米，甚至小于或等于100納米。


圖1是實施例1的1A制劑的透射電鏡照片。
本發明的詳細說明現有技術領域中已經知道欖香烯某些異構體、姜黃提取物、溫郁金提取物具備抑制腫瘤的作用，一些文獻公開了這些天然藥物的各種制劑形式(或劑型)，例如脂質體、乳劑、脂肪乳等制劑。但是，由于這些劑型的平均粒徑普遍較大，注射到人或動物體內后會引起人或動物體內的各種反應，例如刺激性大，有時候發生溶血現象。
本發明人經過多年的研究工作，發現將倍半萜烯類化合物或從植物中提取的含倍半萜烯類的提取物制成平均粒徑≤1微米或≤100納米的各種注射劑型，其中包括脂質體劑型，納米脂質體劑型，前體脂質體劑型，長循環脂質體劑型，長循環納米脂質體劑型，納米微乳劑型，靜脈乳劑型，脂質納米微球劑型，脂肪乳劑型等，可以克服現有技術的注射制劑中的諸多問題，尤其本發明的這些劑型在靜脈注射應用中大大減少了刺激性，它們的穩定性得到進一步提高。本發明的新劑型顯著提高了藥物制劑的藥效，但這些劑型的抑制癌細胞的機理目前還不是十分清楚。本發明人根據大量的試驗結果作出以下推測由于本發明制劑具有小的平均粒徑并且具有特殊的表面性質(例如親水/親脂平衡，表面電荷等)，使得這些制劑中的藥物(或活性成分)對癌細胞有較強的親和力，能夠充分附著于癌細胞上，讓活性成分直接作用于癌細胞，達到抑制或殺滅癌細胞的效果。另外，發現，納米粒度的制劑起效快，防止癌細胞轉移方面有一定效果。
同時，盡管本發明制劑具有小的平均粒徑，但是所獲得的各種劑型的制劑同時具有高的穩定性，它們在長時間的貯存中不會發生凝聚問題，使得可以較長時間進行貯存而不降低穩定性。
本發明提供提取物注射劑，它含有從植物中提取的具有總倍半萜烯類含量≥70wt％的提取物，表面活性劑，和含水介質，該注射劑是一種水性分散體，分散相的平均粒徑≤1微米，提取物與表面活性劑的重量比是0.5-1.5∶3.5-6.0，在注射劑中總倍半萜烯類(活性成分)的濃度是1-10mg/ml。
本發明提供提取物注射劑的制備方法，它包括用總倍半萜烯類含量≥70wt％的從植物中提取的提取物作為原料，添加表面活性劑，利用旋轉蒸發儀成膜或CO2臨界或超臨界方法來混合均勻，添加注射用水，進行高壓均質化處理和/或超聲波處理，一直處理到獲得分散相平均粒徑≤1微米的穩定水性分散體為止，從而制得注射劑，其中提取物與表面活性劑的重量比是0.5-1.5∶3.5-6.0，注射劑中總倍半萜烯異構體的最終濃度為1～10mg/ml。
能夠在本發明中用來制成新劑型的從植物中提取的倍半萜烯類(在這里有時候稱作活性成分)基本上包括全部倍半萜烯類化合物(C15H24)，倍半萜烯類化合物的混合物或從植物中提取的倍半萜烯類提取物，對于這些提取產物要求倍半萜烯類化合物的純度在70％以上，優選在75％以上，更優選在85％以上，特別優選在90％以上，甚至特別優選在95％以上。
需要指出的是，在本發明中用于制備各種劑型的制劑的各種原料可以使用商購的產品如欖香烯產品(提取物)、β-欖香烯產品(提取物)、姜黃提取物或溫郁金提取物，以及樹蘭花、香椿子、海風藤、丁香、沒藥、黃花杜鵑、葛縷子、百里香、歐芹、廣藿香、茅蒼術、蛇床子、啤酒花、檀香木、香檸檬、防風根、柏木、松節油以及香茅、人參等的提取物產品。如果在本申請中需要自己制備這些提取物，用于制備這些提取物的各種揮發油可以使用商購產品，也可以使用通過普通的水蒸汽蒸餾法或分子蒸餾法從植物中獲得的揮發油。
倍半萜烯類包括欖香烯(elemene)，姜黃烯(curcumene)，姜烯(zingiberene)，波旁烯(bourbonene)，蛇麻烯(humulene)，金合歡花烯(farnesene)，杜松烯(cadinene)，芹子烯(selinene)，馬阿里烯(maaliene)，檀香烯(santalene)，廣藿香烯(patchonlene)，石竹烯(也稱作丁香烯，caryophyllene)，吉馬烯(大香葉烯，germacrene)，畢澄茄油烯(cubebene)，柏木烯(cedrene)，長葉烯(longifolene)，防風根烯(或紅沒藥烯，bisabolene)，香檸檬烯(bergamotene)，古蕓烯(gurjunene)，愈瘡木烯(guaiene)，衣蘭烯(ylangene)，異石竹烯(isocaryophyllene)，長蒎烯(longipinene)，白菖烯(calarene)，木羅烯(muurolene)，菖蒲二烯(acoradiene)，倍半水芹烯(β-sesquiphellandrene)等。
原則上，從植物中提取的含有60wt％以上倍半萜烯類的所有提取物都可用于制備本發明的新劑型，倍半萜烯類是所有劑型的活性成分。含有70wt％以上倍半萜烯類的提取物是理想的，含有75wt％以上倍半萜烯的提取物是優選的，含有85wt％以上倍半萜烯的提取物是更優選的，含有90wt％以上或甚至含有95wt％以上倍半萜烯類的提取物是特別優選的。
從天然植物中提取的含欖香烯的提取物通常含有α-欖香烯，β-欖香烯，δ-欖香烯，γ-欖香烯，波旁烯等。在本發明中作為特定的實施方案，以溫郁金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling揮發油、香茅油Cymbopoqon citratus(DC.)Stapt次要成分(香茅油除掉檸檬醛、香茅醇之后余下的混合油狀物)為原料，經填料式真空精餾裝置或分子蒸餾儀精制出欖香烯。
另外，每一種欖香烯異構體如α-欖香烯，β-欖香烯，δ-欖香烯或γ-欖香烯只要純度在85wt％以上也能夠用于制成本發明的新劑型。
目前根據國內欖香烯質量標準(參見2000年的國家藥品監督管理局頒發的國家藥品標準WS1-(X-094)-2000Z)，若分離出的產物(提取物)用氣相色譜法(聚乙二醇20M為固定相，白色硅藻土擔體60～80目，柱溫為135～140℃，理論板數按β-欖香烯計算應不低于1000)檢測總欖香烯異構體純度達到≥85％則該產物稱作欖香烯，若檢測出β-欖香烯純度達到≥95％則產物為β-欖香烯，實際上這是不準確的，因為使用靈敏度更高的色譜儀器例如30米長毛細管氣相色譜-質譜聯用儀(色譜儀Bio-Rad FTS-65A，HP5890II，色譜柱BP-5)來檢測該≥95％純度的β-欖香烯樣品，會發現它仍然含有至少6％的波旁烯(在低靈敏度色譜儀的色譜圖，β-欖香烯的峰與波旁烯的峰重疊成一個峰)，欖香烯樣品是多種倍半萜烯的混合物，即含有β-欖香烯，δ-欖香烯，γ-欖香烯，波旁烯，丁香烯、吉馬烯等。
姜黃Rhizoma Curcuma Longa L.提取物是從姜黃植物獲取的揮發油中提取的產物。在本發明中作為特定的實施方案，姜黃提取物指姜黃揮發油經填料式真空精餾裝置或分子蒸餾儀精制出的提取物，經GC-MS檢測，姜黃提取物通常含有≥70wt％，優選≥75wt％，更優選≥80wt％，特別優選≥85wt％，甚至更優選≥90wt％的倍半萜烯類如姜黃烯、姜烯等和少量(相當于全部倍半萜烯類總重量的約1/25～1/5)的姜黃素。
溫郁金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling提取物包括從溫郁金植物中獲取的揮發油中提取的產物。在本發明中作為特定的實施方案，溫郁金提取物指溫郁金揮發油經真空填料式精餾裝置精餾出的組分或經分子蒸餾儀精制出的產物，經GC-MS檢測，姜黃提取物通常含有≥70wt％，優選≥75wt％，更優選≥80wt％，特別優選≥85wt％，甚至更優選≥90wt％的倍半萜烯類如各種欖香烯異構體、吉馬烯、丁香烯等和較少量(相當于全部倍半萜烯類總重量的約1/50～1/10)的姜黃素。
術語的解釋在本發明中所述的粒徑或粒度是指分散相的粒徑或粒度。
在本申請中，姜黃提取物指姜黃揮發油經真空填料式精餾裝置精餾出的組分或經分子蒸餾儀精制出的組分，經GC-MS檢測，姜黃提取物含有主要量的倍半萜烯類和少量的姜黃素。
如果在劑型前加“納米”修飾，則指該劑型的平均粒徑≤150納米，在理想的情況下平均粒徑≤100納米。注射劑和注射制劑可互換使用。
脂質體劑型，在本發明中是指分散或懸浮在含水介質中的由磷脂和膽固醇等組成的脂雙層結構，該脂雙層結構類似于細胞膜結構。
納米脂質體劑型，在本發明中是指平均粒徑低于或等于150納米的脂質體。
前體脂質體劑型，在本發明中是指在脂質體的配方基礎上再添加賦形劑，通過真空冷凍干燥(真空凍干)方法所制備的凍干粉。該凍干粉在臨床應用之前通過添加注射用水，經過振搖或振蕩，使之恢復成脂質體形態。
長循環脂質體劑型，簡單地說，在本發明中是指在脂質體的配方基礎上再增加聚乙二醇磷脂酰乙醇胺所制備的脂質體。它注射到體內后比普通的脂質體在體內發揮效用的時間更長，或在體內消除緩慢。
納米微乳劑型，指平均粒徑≤150納米，在理想情況下≤100納米的乳劑。
靜脈乳劑型，在本發明中指平均粒徑≤1微米的注射乳。
脂質納米微球劑型，在本發明中是指平均粒徑≤150納米的脂肪乳。
脂肪乳劑型，在本發明中要求它的平均粒徑≤1微米；另外在中國國家藥典中也規定平均粒徑≤1微米。
nm是指納米，μ是指微米。在本申請中純度是指按重量計的百分純度，除非另有說明。
在本申請中所使用的原料是姜黃提取物，它的總倍半萜烯類含量≥70wt％，理想的是75wt％，優選≥80wt％，更優選≥85wt％，特別優選≥90wt％，更特別優選≥95wt％。該提取物含有≤28wt％的姜黃素，理想地含有≤15wt％的姜黃素，優選含有≤10wt％的姜黃素，更優選含有≤5wt％的姜黃素。
使用這里所述的30米長毛細管氣相色譜-質譜聯用儀檢測提取物，含有≥70wt％倍半萜烯類的提取物就可用于本發明中。本申請中所使用的姜黃提取物可以通過商業途徑以提取物(各種異構體混合物)或純異構體(要求純度高于85wt％)產物形式購買獲得，也可以根據需要自己制備，對于姜黃提取物的制備方法參見制備例。
本申請中所使用的姜黃提取物原料、試劑沒有特別的限制，只要該提取物是從天然植物姜黃中提取并且總倍半萜烯類純度≥70wt％就可在本發明中使用，更理想的是，該純度≥75wt％，更理想≥80wt％，優選≥85wt％，特別優選≥90wt％。
除非另有說明，否則在本發明中使用的其它成分如膽固醇、大豆磷脂、卵磷脂、甘油、亞油酸、聚乙二醇磷脂酰乙醇胺、脂族胺、大豆油等一般要求符合國家藥用標準，溶劑也應該符合國家藥用標準，這些主要出于健康方面的考慮；類似地，對于一些原料用“精制”修飾，表明該原料必須符合國家藥用標準，例如精制大豆磷脂是注射劑可用的產品，精制大豆油是注射劑可用的產品。
除非另有說明，否則在本申請中色譜分析所使用的氣相色譜儀是Bio-Rad FTS-65A，HP5890II，色譜柱是BP-5。
本發明的各種劑型能夠以靜脈注射、局部給藥方式用于治療目的。
本發明的優選實施方案在下列的實施方案中作為原料主要使用提取物“欖香烯”、提取物“β-欖香烯”、姜黃提取物、溫郁金提取物，還可以使用樹蘭花、香椿子、海風藤、丁香、沒藥、黃花杜鵑、葛縷子、百里香、歐芹、廣藿香、茅蒼術、蛇床子、啤酒花、檀香木、香檸檬、防風根、柏木、松節油以及香茅、人參等的提取物。顯然，其中某一種倍半萜烯異構體的純度較高(例如≥85wt％)的產品都能夠作為原料，而且利用化學方法合成的各種倍半萜烯類及其衍生物都能夠用于本發明中。
本發明提供了脂質體或納米脂質體的制備方法，它包括將提取物與大豆磷脂、膽固醇以重量比0.5-1.5∶2.5-4.0∶1.0-2.0，優選0.8-1.2∶2.8-3.6∶1.2-1.8，更優選0.9-1.1∶3.0-3.4∶1.4-1.6，特別優選1∶3.2∶1.5進行混合；添加溶劑(如乙醚或丙酮或氯仿)，添加量足以使混合物充分溶解，置入旋轉蒸發儀上脫除溶劑成膜，添加余量的注射用水(根據所要配制的最終濃度來計算該余量)，然后置入常規的超聲波細胞粉碎機中進行超聲波處理；取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀、電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，在達到規定的平均粒徑例如≤1微米(脂質體)，或≤100納米(納米脂質體)后，調節PH，使PH值為4.5～6.5，經0.8μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，利用色譜儀(氣相或液相)測得活性成分的最終濃度(倍半萜烯類活性成分的重量(mg)/總制劑體積(ml))為1～10mg/ml，優選為2～7.5mg/ml，更通常為5～7.5mg/ml。
納米脂質體的包封率檢測用分子篩法檢測，即，利用SephadexG25層析系統，將提取物納米脂質體制劑分成兩個流份，即提取物納米脂質體流份和游離的提取物流份，經氣相色譜儀檢測兩個流份中含有的提取物含量。包封率計算公式＝提取物納米脂質體流份的提取物含量÷(提取物納米脂質體流份的提取物含量+游離的提取物含量)。顯微鏡或透射電鏡驗證是否為脂質體。
本發明提供前體脂質體的制備方法將提取物與精制大豆磷脂、膽固醇以重量比0.5-1.5∶2.5-4.0∶1.0-2.0，優選0.8-1.2∶2.8-3.6∶1.2-1.8，更優選0.9-1.1∶3.0-3.4∶1.4-1.6，特別優選1∶3.2∶1.5進行混合，添加溶劑(如乙醚或丙酮或氯仿)，添加量足以充分溶解該混合物，置入旋轉蒸發儀上脫除溶劑成膜，添加余量的注射用水(根據所要配制的最終濃度來計算該余量)，然后置入超聲波細胞粉碎機進行超聲處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡或Coulter儀來檢驗平均粒徑，當平均粒徑≤1微米后，調節PH，使PH值為4.5～6.5，經0.8μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，加入占總制劑量的1-2wt％的賦形劑(例如乳糖或平均分子量Mw為約4000-40000的低分子右旋糖苷)，100℃蒸汽流滅菌，無菌條件下冷凍干燥、灌封。在使用之前添加注射水以達到最終活性成分濃度(倍半萜烯類活性成分的重量(mg)/制劑體積(ml))為1～10mg/ml，優選為2～8mg/ml，更優選為2～7.5mg/ml，更通常為5～7.5mg/ml。
包封率的檢測用分子篩法檢測方法，即根據所要配制的最終制劑濃度(mg/ml)，將一定量的提取物前體脂質體制劑先添加余量體積的水振搖均勻，此時又變成了脂質體，利用Sephadex G25層析系統分成兩個流份，即提取物脂質體流份和游離的提取物流份，經氣相色譜儀檢測兩個流份中含有的提取物量。包封率計算公式＝提取物脂質體流份的提取物含量÷(提取物脂質體流份的提取物含量+游離的提取物量)。顯微鏡或透射電鏡證實是否為前體脂質體。
本發明提供長循環提取物納米脂質體的制備方法，該方法包括將提取物與精制大豆磷脂、聚乙二醇(2000)磷脂酰乙醇胺、膽固醇以重量比0.5-1.5∶1.5-3.5∶0.3-1.2∶0.8-2.0，優選以重量比0.8-1.2∶1.8-3.0∶0.4-1.0∶1.2-1.8，更優選以重量比0.9-1.1∶2.4-2.8∶0.6-1.0∶1.2-1.6，特別優選以重量比1∶2.6-2.7∶0.7-0.9∶1.3-1.5進行混合，添加溶劑(如乙醚或丙酮或氯仿)，添加量足以充分溶解該混合物，置入旋轉蒸發儀上脫除溶劑成膜，添加余量的注射用水(根據所要配制的最終濃度來計算該余量)，然后置入常規的超聲波細胞粉碎機進行超聲波處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀或電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，在達到規定的平均粒徑(例如≤100納米)后，調節PH，使PH值為4.5～6.5，經0.8μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，(氣相或液相)色譜法測得活性成分的最終濃度(倍半萜烯類活性成分的重量(mg)/總制劑體積(ml))為1～10mg/ml，優選為2～7.5mg/ml，更優選為2～8mg/ml，更通常為5～7.5mg/ml。對于聚乙二醇(2000)磷脂酰乙醇胺，其中“2000”指聚乙二醇鏈段的平均分子量(道爾頓)。
該注射劑的包封率的檢測與前面的脂質體注射劑的包封率檢測方法相同。
本發明提供帶負電荷及帶正電荷的提取物納米微乳的制備方法制備方法1帶負電荷的納米微乳的制備將提取物與精制大豆磷脂、膽固醇以重量比0.5-1.5∶2.5-4.0∶1.0-2.0，優選0.8-1.2∶2.8-3.6∶1.2-1.8，更優選0.9-1.1∶3.0-3.4∶1.4-1.6，特別優選1∶3.2∶1.5進行混合，添加溶劑(如乙醚或丙酮或氯仿)，添加量足以充分溶解該混合物，置入旋轉蒸發儀上脫除溶劑成膜，添加余量的注射用水(根據所要配制的最終濃度來計算該余量)，然后置入常規的超聲波細胞粉碎機進行超聲波處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀或電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，在達到規定的平均粒徑(例如≤100納米)后，調節PH，使PH值為4.5～6.5，經0.8μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，活性成分的最終濃度(倍半萜烯類活性成分的重量(mg)/總制劑體積(ml))為1～10mg/ml，優選為2～7.5mg/ml，更通常為5～7.5mg/ml。顯微鏡、透射電鏡檢測，證實是否是納米微乳。
制備方法2帶正電荷的納米微乳的制備將提取物、精制卵磷脂、C14-C22直鏈或支鏈脂族胺、膽固醇以重量比0.5-1.5∶2.5-3.5∶0.2-0.6∶1.0-2.0，優選0.8-1.2∶2.5-3.0∶0.3-0.5∶1.2-1.8，更優選0.9-1.1∶2.7-2.9∶0.3-0.5∶1.4-1.6，特別優選1∶2.8∶0.4∶1.5進行混合，添加溶劑(如乙醚或丙酮或氯仿)，添加量足以充分溶解該混合物，置入旋轉蒸發儀上脫除溶劑成膜，然后添加余量的注射用水(根據所要配制的濃度計算出該余量)，然后置入常規的超聲波細胞粉碎機進行超聲處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀或電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，在達到規定的平均粒徑(例如≤100納米)后，調節PH，使PH值為7.5～9.0，經0.8μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，倍半萜烯類活性成分的最終濃度為1～10mg/ml，優選為2～7.5mg/ml，更通常為5～7.5mg/ml。顯微鏡、透射電鏡檢測，證實是否為納米微乳。
本發明還提供提取物脂質納米球的制備方法，該方法包括取提取物與大豆磷脂一起加入大豆油中，升溫控制成油相(保持為油相)，將該油相加入到含甘油的水溶液中。其具體重量比例為提取物占最終配制劑總量的0.08～0.8wt％，大豆磷脂0.8～2.5wt％，大豆油8-12wt％，甘油1.8-2.8wt％，注射用水加至5000ml；優選的重量比例為提取物占最終配制劑總量的0.1wt％～0.5wt％，大豆磷脂1.2wt％～2.0wt％，大豆油10wt％，甘油2.25～2.5wt％，注射用水加至5000ml。然后高速攪拌，調節PH為4.5～6.5，再經過普通的高壓均質機(例如M110-E/H型(日本MIZUHO產))處理，然后進行前面所述的超聲波處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀或電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，在其脂質球的平均粒徑達到規定值例如≤100nm之后，再經0.8μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，100℃～120℃滅菌。(氣相或液相)色譜法測得倍半萜烯類活性成分的最終濃度為1～10mg/ml，優選為2～7.5mg/ml，更通常為2～5mg/ml，更理想為2.0～3.0mg/ml。根據需要可以在該最終制劑中加入適量膽固醇、亞油酸等。
本發明提供提取物靜脈注射乳的制備方法，該方法包括將提取物、精制大豆磷脂、膽固醇以重量比0.5-1.5∶2.5-4.0∶1.0-2.0，優選0.8-1.2∶2.8-3.6∶1.2-1.8，更優選0.9-1.1∶3.0-3.4∶1.4-1.6，特別優選1∶3.2∶1.5，與余量的注射用水(根據所要配制的最終濃度來計算該余量)進行混合，用常規的高壓均質機(例如M110-E/H型(日本MIZUHO產))乳化，取樣利用帶標尺的顯微鏡或Coulter儀來檢驗平均粒徑，在達到規定的平均粒徑例如≤1微米后，調節PH，使PH值為4.5～6.5，經1.2μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，經100℃～120℃滅菌，得到提取物靜脈乳，(氣相或液相)色譜法測得倍半萜烯類活性成分的最終濃度為1～10mg/ml，優選為2～7.5mg/ml，更通常為5～7.5mg/ml。
本發明提供提取物脂肪乳的制備方法，該方法包括取提取物與大豆磷脂加入大豆油中，升溫控制成油相(保持為油相)，將該油相加入到含甘油的水溶液中。其具體重量比為提取物占最終配制劑總量的0.08～0.8wt％，大豆磷脂0.8～2.5wt％，大豆油8-12wt％，甘油1.8-2.8wt％，注射用水加至5000ml；優選的重量比例為提取物占最終配制劑總量的0.1wt％～0.5wt％，大豆磷脂1.2wt％～2.0wt％，大豆油10wt％，甘油2.25～2.5wt％，注射用水加至5000ml。然后高速攪拌，調節PH為4.5～6.5，再經過普通的高壓均質機(例如M110-E/H型(日本MIZUHO產))處理，使其粒徑小于1μ，再經1.2μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，100℃～120℃滅菌。倍半萜烯類活性成分的最終濃度為1～10mg/ml，優選為2～7.5mg/ml，更理想為2.0～3.0mg/ml或為5～7.5mg/ml。根據需要可以在該最終制劑中加入適量膽固醇、亞油酸等。
根據需要，本發明的制劑可以用不同尺寸例如1.2μ、1.0μ、0.9μ、0.8μ、0.7μ、0.6μ、0.5μ等的微孔濾膜進行過濾，可以截取平均粒徑≤0.8μ、≤0.7μ、≤0.6μ、≤0.5μ、≤0.45μ、≤0.4μ、≤0.3μ等的分散相。
下面的制備例和實施例用于舉例說明本發明，但不應認為限制本發明的范圍。本發明的保護范圍由權利要求來定義。
制備例姜黃提取物的制備制備方法A姜黃揮發油的分子蒸餾以姜黃揮發油為原料，經廣州漢維機電公司MD-S80型分子蒸餾儀精制，其工藝條件蒸餾溫度35～45℃，蒸餾壓力70～90Pa，刮膜速度300-320轉/分，冷凝面溫度20～25℃，系統保溫20～25℃，物料流速15～30毫升/小時，得到餾出物，僅收集餾余物，積累到足夠量，繼續進行分子蒸餾。蒸餾溫度45～60℃，蒸餾壓力30～70Pa，刮膜速度300-320轉/分，冷凝面溫度20～25℃，系統保溫20～25℃，該餾分流速15～30毫升/小時，分別收集餾出物與餾余物，將得到的二次餾余物積累到足夠量，繼續進行分子蒸餾。蒸餾溫度30～70℃，蒸餾壓力10～50Pa，刮膜速度300-320轉/分，冷凝面溫度20～25℃，系統保溫20～25℃，該餾分流速15～30毫升/小時，收集餾出物，放掉餾余物，將溜出物再添加到分子蒸餾儀中繼續重復蒸餾一直到用氣相色譜儀(利用30米長毛細管氣相色譜-質譜聯用儀氣相色譜儀檢測，色譜儀Bio-Rad FTS-65A，HP5890II，色譜柱BP-5)檢測時總倍半萜烯含量≥75wt％為止。該提取物經上述氣相色譜儀檢測，還含有相當于全部倍半萜烯類總重量的約1/20的姜黃素。用氣相色譜法制定供檢測用指紋圖譜。該產物稱作姜黃提取物A。
制備方法B填料式真空精餾將姜黃揮發油經填料式真空精餾裝置精餾，填料式真空精餾裝置由裝姜黃揮發油的釜、填料精餾塔、回流器、真空泵構成，由上海化工研究院新型填料技術開發中心設計，填料為狄克松填料(Q網環填料)，真空度為1-3mmHg，收集82℃/3mmHg以上的餾分，經氣相色譜儀(利用30米長毛細管氣相色譜-質譜聯用儀氣相色譜儀檢測，色譜儀Bio-Rad FTS-65A，HP5890II，色譜柱BP-5)分析為倍半萜烯化合物。總倍半萜烯含量≥75wt％，還含有相當于全部倍半萜烯類總重量的約1/20的姜黃素。用氣相色譜法制定供檢測用指紋圖譜。該產物稱作姜黃提取物B。
另外，將姜黃經CO2超臨界提取得到的揮發油留下的渣，添加甲醇，加熱抽提3小時得到黃色粘稠液，將甲醇蒸餾掉，得到棕黃色膏狀物，將這些膏狀物用硅膠制備色譜純化，用氯仿洗脫得到純度≥90wt％的姜黃素產物。將上述產物A和產物B以50∶50重量比混合，將所形成的混合物與該姜黃素產物按20∶1(重量)的比例進行混合而獲得另一種混合物，稱作提取物C。
實施例1姜黃提取物的納米脂質體注射劑的制備程序1A將制備例的產品A與精制大豆磷脂、膽固醇以重量比1∶3.2∶1.5混合，添加乙醚，添加量足以充分溶解該混合物，置入旋轉蒸發儀上脫除乙醚成膜，添加余量的注射用水(根據所要配制的最終濃度即5mg/ml來計算該余量)，然后置入山東濟寧超聲電子儀器廠出產的超聲波細胞粉碎機(型號JCS-204)超聲處理，取樣利用帶標尺的顯微鏡、Coulter儀或電子顯微鏡來檢驗平均粒徑，當平均粒徑≤100納米后，用1M磷酸二氫鈉水溶液調節PH，使PH值為4.5～6.5，經0.8μ微孔濾膜(上海新亞凈化器件廠生產，規格0.8μ)過濾和然后裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，所獲得的注射劑產品簡稱1A。取樣用氣相色譜法(利用30米長毛細管氣相色譜-質譜聯用儀氣相色譜儀)測得活性成分(總倍半萜烯類活性成分的重量(mg)/制劑體積(ml))的最終濃度為5±0.10mg/ml。
用分子篩法檢測包封率，即，利用Sephadex G25層析系統將提取物納米脂質體制劑分成兩個流份，即提取物納米脂質體流份和游離的提取物流份，經氣相色譜儀檢測兩個流份中含有的提取物含量。包封率超過85％。包封率計算公式＝提取物納米脂質體流份的提取物含量÷[提取物納米脂質體流份的提取物含量+游離的提取物量]。顯微鏡、透射電鏡檢測，證實是納米脂質體，在附圖1中給出該注射劑的透射電鏡照片(標尺50nm)。
程序1B重復上述1A程序，只是用制備例的產物B代替制備例的產物A。顯微鏡、透射電鏡檢測，證實制劑是納米脂質體。制劑中總倍半萜烯類的濃度為約5±0.10mg/ml。包封率高于85％。該注射劑簡稱1B。
實施例2姜黃提取物的前體脂質體的制備2A按照與實施例1的1A程序中相同的方法和原料配比，重復進行實施例1的1A程序，只是超聲波處理后要求分散相的粒徑≤1微米以及在過濾之后和在裝瓶之前，加入占總制劑重量的1-2％的乳糖，然后利用100℃蒸汽流滅菌，無菌條件下冷凍干燥、灌封(分裝)。用Coulter儀檢測證實制劑是前體脂質體。該注射劑產品簡稱2A。包封率高于85％。該制劑在注射應用之前添加注射水以達到最終活性成分(總倍半萜烯類)濃度為5±0.10mg/ml。
2B重復上述2A，只是用制備例的B產物代替制備例的產物A，用平均分子量Mw為約40000的低分子右旋糖苷代替乳糖。該注射劑簡稱2B。用Coulter儀檢測證實制劑是前體脂質體。包封率高于85％。該制劑在注射應用之前添加注射水以達到最終活性成分濃度(總倍半萜烯類的重量(mg)/制劑體積(ml))為5±0.10mg/ml。
實施例3姜黃提取物的長循環納米脂質體的制備3A按照與實施例1的1A程序中相同的方法，重復進行實施例1的1A程序，只是原料和它們的重量配比是姜黃提取物A∶大豆磷脂∶聚乙二醇(2000)磷脂酰乙醇胺∶膽固醇＝1∶2.6∶0.8∶1.4。該注射劑簡稱3A。取樣檢驗平均粒徑≤100nm。制劑中總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。包封率高于85％。
3B重復上述3A，只是用制備例的產物B代替制備例的產物A。所獲得的注射劑簡稱3B。平均粒徑≤100nm。制劑中總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。包封率高于85％。
實施例4帶負電荷及帶正電荷的姜黃提取物的納米微乳的制備4A-1帶負電荷的納米微乳的制備重復實施例1的1A程序，只是不測定包封率。取樣測得總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。用Coulter儀證實是納米微乳。該注射劑產品簡稱4A-1。
4A-2帶正電荷的納米微乳的制備重復實施例1的1A程序，只是原料和它們的重量配比是提取物A∶卵磷脂∶正十八烷基胺∶膽固醇＝1∶2.8∶0.4∶1.5，不測定包封率。取樣測得總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。用Coulter儀證實是納米微乳。該注射劑簡稱4A-2。
4B-1帶負電荷的納米微乳的制備重復上述4A-1，只是用制備例的產物B代替制備例的產物A。取樣測得總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。用Coulter儀證實是納米微乳。所獲得的注射劑簡稱4B-1。
4B-2帶正電荷的納米微乳的制備重復上述4A-2，只是用制備例的產物B代替制備例的產物A。取樣測得總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。用Coulter儀證實是納米微乳。所獲得的注射劑簡稱4B-2。
實施例5姜黃提取物的脂質納米球制劑的制備5A取制備例的提取物A與大豆磷脂一起加入大豆油中，升溫控制成油相(即保持為油相)，將該油相加入到含甘油的水溶液中。其具體重量比為提取物占總制劑重量的0.2％，大豆磷脂1.6％，大豆油10％，甘油2.5％，余量為注射用水，然后高速攪拌，用1M磷酸二氫鈉水溶液調節PH為4.5～6.5，再經M110-E/H型(日本MIZUHO產)高壓均質機處理，然后按照實施例3中相同方法進行超聲波處理，使其脂質球的平均粒徑≤100nm，再經0.8μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，100℃～120℃滅菌。取樣測得總倍半萜烯類的最終濃度為2±0.04mg/ml。所獲得的注射劑簡稱5A。根據需要可以在原料中包括適量的膽固醇、亞油酸等。
5B重復上述5A程序，只是用制備例的產物B代替制備例的產物A。脂質球的平均粒徑≤100nm。色譜法測得總倍半萜烯類的最終濃度為2±0.04mg/ml。所獲得的注射劑簡稱5B。
實施例6姜黃提取物的靜脈注射乳的制備6A將制備例的姜黃提取物A、精制大豆磷脂、膽固醇以重量比1∶3.2∶1.5與余量的注射用水(根據所需最終的濃度即5mg/ml來計算該余量)混合，用M110-E/H型(日本MIZUHO產)高壓均質機乳化，一直用Coulter儀檢驗粒徑小于1μ為止。然后，用1M磷酸二氫鈉水溶液調節PH，使PH值為4.5～6.5，經1.2μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，經100℃～120℃滅菌，得到姜黃提取物靜脈乳，取樣測得總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。該注射劑簡稱6A。
6B重復以上6A，只是用制備例的產物B代替制備例的產物A。用Coulter儀檢驗粒徑小于1微米。制劑中總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。所獲得的注射劑簡稱6B。
實施例7姜黃提取物脂肪乳的制備7A取制備例的產物A與大豆磷脂加入大豆油中，升溫控制成油相，將該油相加入到含甘油的水溶液中。其具體重量比為提取物A占總制劑重量的0.2％，大豆磷脂1.2％，大豆油l0％，甘油2.5％，余量為注射用水。然后高速攪拌，用1M磷酸二氫鈉水溶液調節PH為4.5～6.5，再經M110-E/H型(日本MIZUHO產)高壓均質機處理，一直到用Coulter儀檢驗粒徑≤1μ為止，再經1.2μ微孔濾膜過濾和然后裝瓶，100℃～120℃滅菌。測得總倍半萜烯類的最終濃度為2±0.04mg/ml。所獲得的注射劑簡稱7A。根據需要可以在原料中包括適量膽固醇、亞油酸等。
7B重復上述7A，只是用制備例的產物B代替制備例的產物A。測得在制劑中總倍半萜烯類的最終濃度為2±0.04mg/ml。所獲得的注射劑簡稱7B。
實施例8CO2超臨界法制備脂質體8A將占膽固醇重量的10wt％的三氯甲烷加入膽固醇中使之浸潤，將大豆磷脂和制備例的提取物A加入其中進行混合(提取物A∶大豆磷脂∶膽固醇＝重量比1.2∶3.2∶1.5)，將所獲得的混合物放入CO2超臨界提取儀(廣州漢維機電公司生產，型號SFE100ml)的萃取器中，通入CO2(壓力50-80kg)，體系溫度50℃，進行臨界或超臨界分散，使混合物均勻混合，然后緩慢減壓釋放CO2，讓CO2將三氯甲烷帶出，取出萃取器，在萃取器中加入余量的注射用水(根據注射劑的最終濃度計算該余量)，用攪拌器攪拌，將所形成的分散體用超聲波處理，一直到脂質體的分散相粒徑≤1微米為止(稱作脂質體)，或根據需要，超聲波處理一直到分散相平均粒徑≤100納米為止(稱為納米脂質體)。然后將脂質體用1M磷酸二氫鈉水溶液調節PH，使PH值為4.5～6.5，經0.8μ微孔濾膜(上海新亞凈化器件廠生產，規格0.8μ)過濾和然后裝瓶，100℃蒸汽流滅菌，所獲得的注射劑產品簡稱8A。取樣用氣相色譜法測得總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。包封率高于88％。
8B重復上述8A，只是用制備例的產物B代替制備例的產物A，制得脂質體。測得在制劑中總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。所獲得的注射劑簡稱8B。包封率高于88％。
8C重復上述8A，只是用制備例的提取物C代替制備例的產物A，制得脂質體。測得在制劑中總倍半萜烯類的最終濃度為5±0.10mg/ml。所獲得的注射劑簡稱8C。包封率高于88％。
藥效學試驗藥物制劑的體內抗腫瘤效果的評價方法已在以上列舉的某些專利文獻中有描述(例如參見CN1153168A)。
在本發明中，各種劑型的制劑對皮下接種的人體腫瘤異種移植模型QGY肝癌、MKN-45胃癌的療效，可以通過以80mg(倍半萜烯類)/kg(體重)、40mg/kg和20mg/kg的劑量，每天尾靜脈給藥1次，連續給藥10天的治療方案來確認，其中沒有給藥的作為對照組。具體的操作過程和腫瘤抑制率(抑瘤率)的計算按照目前(指本申請的申請日以前)的國家藥品監督管理局的相關規定“抗腫瘤藥物的藥效評價辦法”來實施。
抑瘤率％＝[(沒有給藥的模型的腫瘤重量-給藥的模型的腫瘤重量)/沒有給藥的模型的腫瘤重量]×100％表1.人體腫瘤異種移植模型QGY肝癌的抑瘤率


表2.人體腫瘤異種移植模型MKN-45胃癌的抑瘤率


表3對顱內原位接種小鼠腦瘤G422模型的療效(抑瘤率)。

表4對皮下接種小鼠腦瘤G422模型的療效(抑瘤率)。


另外，各種劑型的注射劑對荷Lewis肺癌的小鼠NK細胞與對照組比活性提高21％～23％。
各種劑型的注射劑對荷Lewis肺癌的小鼠淋巴細胞增殖活性影響、刺激指標提高了1.5～1.45。
總之，從上述表中數據可以看出，各種制劑經QGY肝癌、MKN-45胃癌、小鼠腦瘤G422模型藥理學試驗有效。對免疫功能影響試驗，荷Lewis肺癌的小鼠NK細胞與對照組比提高21％～23％。淋巴細胞增值活性影響、刺激指標提高了1.5～1.45.
所以，注射劑能夠用于抑制和/或治療腫瘤。另外，經過試驗，該制劑還能夠用于抑制癌細胞轉移，用于緩解腫瘤疼痛，用于預防或治療缺血性中風。
權利要求
1.一種姜黃提取物注射劑，其特征在于該種姜黃提取物注射劑含有從姜黃植物中提取的具有總倍半萜烯類含量≥70wt％的提取物，表面活性劑，和含水介質，其特征在于該注射劑是一種水性分散體，分散相的平均粒徑≤1微米，提取物與表面活性劑的重量比是0.5-1.5∶3.5-6.0，注射劑中總倍半萜烯類的最終濃度為1～10mg/ml。
2.根據權利要求1的姜黃提取物注射劑，其特征在于其中注射劑的劑型包括脂質體劑型，納米脂質體劑型，長循環脂質體劑型或長循環納米脂質體劑型，其中這些注射劑的總倍半萜烯類的濃度是2-7.5mg/ml，這些制劑的包封率≥80％。
3.根據權利要求1的姜黃提取物注射劑，其特征在于其中注射劑時劑型包括納米微乳劑型，靜脈乳劑型，脂質納米球劑型或脂肪乳劑型；其中注射劑的總倍半萜烯類的濃度是2-7.5mg/ml。
4.根據權利要求2的姜黃提取物注射劑，其特征在于進一步包括前體脂質體劑型，它是通過先制備脂質體，添加賦形劑，然后凍干而制得，包封率≥80％，該前體脂質體制劑在注射之前添加注射水以達到最終活性成分濃度(總倍半萜烯類的重量(mg)/制劑體積(ml))為2～8mg/ml。
5.根據權利要求2或3的注射劑，其特征在于其中納米脂質體劑型、長循環納米脂質體劑型、納米微乳劑型或脂質納米球劑型的注射劑的分散相平均粒徑≤100納米，當劑型為前體脂質體、脂質體或長循環納米脂質體時包封率≥85％；和其中表面活性劑是磷脂和/或膽固醇。
6.根據權利要求3或5的注射劑，其特征在于脂質納米球劑型和脂肪乳劑型的注射劑的總倍半萜烯類的濃度為2.0-3.0mg/ml。
7.根據權利要求1-6中任何一項的注射劑，其特征在于它是靜脈注射劑。
8.根據權利要求1或4的注射劑，其特征在于其中姜黃提取物含有相當于倍半萜烯類總重量的約1/25～1/5的姜黃素。
9.根據權利要求1或3的注射制劑，其特征在于其中注射劑進一步含有選自植物油和動物油的油或作為等滲透劑的甘油。
10.根據權利要求1或3的注射制劑，其特征在于其中當表面活性劑是卵磷脂時，注射劑進一步含有C14-C22直鏈或支鏈脂族胺。
11.一種如權利要求1所述的姜黃提取物注射劑的制備方法，其特征在于它包括用總倍半萜烯類含量≥70wt％的從姜黃植物中提取的提取物作為原料，添加表面活性劑，利用旋轉蒸發儀成膜或CO2臨界或超臨界方法來混合均勻，添加注射用水，進行高壓均質化處理和/或超聲波處理，一直處理到獲得分散相平均粒徑≤1微米的穩定水性分散體為止，從而制得注射劑，其中提取物與表面活性劑的重量比是0.5-1.5∶3.5-6.0，注射劑中總倍半萜烯類的最終濃度為1～10mg/ml。
12.根據權利要求11的制備方法，其中注射劑的劑型包括脂質體劑型，納米脂質體劑型，長循環脂質體劑型或長循環納米脂質體劑型，其中這些注射劑的總倍半萜烯類的濃度是2.0-7.5mg/ml，這些制劑的包封率≥80％。
13.根據權利要求11的制備方法，其中注射劑的劑型包括納米微乳劑型，靜脈乳劑型，脂質納米球劑型或脂肪乳劑型；其中這些注射劑的總倍半萜烯類的濃度是2.0-7.5mg/ml。
14.根據權利要求12的制備方法，進一步包括在制備脂質體之后，添加賦形劑，然后凍干，從而制備前體脂質體劑型的制劑。
15.根據權利要求11的制備方法，其中姜黃提取物含有相當于倍半萜烯類總重量的1/25～1/5的姜黃素。
16.根據權利要求11或13的制備方法，其中與表面活性劑一起還添加選自植物油和動物油的油或作為等滲透劑的甘油。
17.權利要求1-10中任何一項的姜黃提取物注射劑用于抑制和/或治療腫瘤，用于抑制癌細胞轉移，用于緩解腫瘤疼痛，用于預防或治療缺血性中風的用途。
18.權利要求1-10中任何一項的姜黃提取物注射劑用于制備抑制或治療癌癥的藥物的用途。
19.由權利要求11-16中任何一項的方法制備的注射劑。
全文摘要
本發明涉及姜黃提取物的新劑型，更具體地說涉及它們的納米脂質體劑型，前體脂質體劑型，長循環脂質體劑型，長循環納米脂質體劑型，納米微乳劑型，靜脈乳劑型，脂質納米球劑型和脂肪乳劑型。
文檔編號A61K31/122GK1451379SQ0211721
公開日2003年10月29日 申請日期2002年4月17日 優先權日2002年4月17日
發明者李德山, 陳澤平 申請人:大連醫大安鵬生物醫藥技術有限公司