一種用于癌性疼痛鎮痛的藥物及其制備方法

專利名稱：一種用于癌性疼痛鎮痛的藥物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種用于癌性疼痛鎮痛的藥物，本發明還涉及該藥物的制備方法。
目前，癌痛尚屬于一種難于征服的病癥。世界衛生組織對癌性疼痛的治療，推薦使用三階梯療法。輕度疼痛，使用非阿片類止痛藥，如撲熱息痛，阿司匹林及布洛芬、萘普生、炎痛喜康等；中度疼痛，則使用弱阿片類鎮痛藥，如可待因、氨酚待因，或加入非阿片類鎮痛藥及輔助性藥物等；重度疼痛，則采用強阿片類藥，如嗎啡、二氫嗎啡酮、美沙酮等。這些強阿片類藥，可使患者解決暫時痛苦，并使精神得到適當休息，但連續使用易產生蓄積毒性和依賴性等副作用。如果使用不當，失之管理，更會危害人身健康和社會安定。近年來，這類藥呂的濫用和依賴性的產生明顯增加，以及由此而帶來的嚴重社會問題日益突出，使這類藥品的臨床應用受到嚴格限制，導致許多癌痛患者至今仍未得到良好治療，對癌痛的處理仍然是醫生們所而臨的一個棘手的問題。
本發明的另一目的在于提供該藥物的制備方法。
本發明提供的用于癌性疼痛鎮痛的藥物，是由下述重量配比的原料制成的藥劑青風藤4～200白屈菜5～230漢桃葉10～250上述用于癌性疼痛鎮痛的藥物，可以制成藥劑學上所說的多種劑型，如口服液、注射液。
上述用于癌性疼痛鎮痛的中藥注射液的制備方法，包括以下步驟(1)白屈菜、青風藤加6～15倍量60～95％乙醇浸泡0.5～48小時，加熱回流1～6次，合并醇提液，減壓回收乙醇并濃縮至1∶1，用磷酸調PH至1.5～6，靜置4～48小時，濾過，濾液用氫氧化鈉溶液調PH至9.5～11.5，用等量氯仿提取3～10次，合并氯仿液，回收氯仿，殘留物真空干燥，得總生物堿；(2)漢桃葉加水煎煮2～4次，合并煎煮液，濾過，濾液減壓濃縮，用乙醇沉淀處理二次，第一次溶液含醇量達60～80％，第二次達80～90％，每次均濾過，回收乙醇，然后加水稀釋，用鹽酸調PH至2.0，冷藏，濾過，濾液用氫氧化鈉溶液調PH至6.5～7.0，再加乙醇使含醇量達85％，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.35～1.40，真空干燥，得漢桃葉干膏；(3)取上述總生物堿、漢桃葉干膏，加注射用水，用磷酸調PH至4～5，攪拌使溶解，冷藏，濾過，加吐溫-80、苯甲醇、混勻，用微孔薄膜濾過，灌封，滅菌，即得本發明中藥注射液。
本發明注射液為純中藥制劑，對治療癌性疼痛具有鎮痛效果好、作用時間長、無成癮性和耐受性、無毒副作用等特點。
下面結合實施例及主要藥效學試驗對本發明作進一步的說明。
以下第4～9頁記載的為本發明的主要藥效學試驗，其中本發明中藥注射液稱為痛安注射液。
痛安注射液鎮痛試驗摘要 采用小鼠熱板法、醋酸扭體法、電刺激法、大鼠甩尾法、三叉神經痛等動物模型，研究痛安注射液的鎮痛作用。實驗結果表明，痛安注射液在各實驗中均表現有不同程度的鎮痛作用，其作用特點是(1)起效較快，20min起效，維持時間較長，60min鎮痛有效率達80％以上，2-4小時達作用高峰，4小時后逐漸下降，7小時后降至30％以下。(2)在本實驗所用劑量范圍內，痛安注射液的鎮痛作用隨劑量加大而加強，高劑量組給藥后，60-120min與陽性藥對比，無明顯差別，其作用強度與陽性對照藥相近。
試驗目的通過動物鎮痛實驗，觀察中藥制劑痛安注射液的鎮痛作用，評價其效果，為該藥的臨床應用提供藥理學依據。
受試藥物痛安注射液，規格5.0g生藥/2ml/支，批號990209，福州長富星新藥開發有限公司提供。
溶劑注射用水，南京金陵藥業集團公司提供，批號980802。
配制方法以注射用水將藥液配制成實驗所需濃度的注射液，每2天新鮮配制一次，放入4℃冰箱中貯存備用。
鹽酸哌替啶注射液，100mg/2ml，天津華津制藥廠，批號980423。
實驗動物ICR小鼠，體重20～22g，粵檢證字第98A035號，雌雄均用。Wistar大鼠，體重200～220g，粵檢證字第98A038號，雌雄各半。由第一軍醫大學實驗動物研究中心提供。動物進入實驗室后，雌雄分開，每籠放養5只，飼養3天后啟用，由專人飼養管理。動物室光照充足，通風和空調設備良好，室溫控制在20～25℃，濕度為40-65％。實驗室按常規定期消毒。給藥量的設定 按實驗動物與人藥量轉換因子計算方法，以動物用量等效量的0.25、0.5、1、2、5倍量作為實驗給藥的5個劑量。
痛安注射液成人臨床用法用量肌注，2ml/次，1-2次/天，每ml相當于2.50g生藥。按成人60kg計算，即成人日用最大劑量為0.167g生藥/kg。
小鼠用量等效量＝0.167×35÷3＝1.948(g生藥/kg)小鼠用量取5個劑量即1.948×0.25＝0.4871.948×0.5＝0.9741.948×1＝1.9481.948×2＝3.8961.948×5＝9.740大鼠用量等效量＝0.167×35÷6＝0.974(g生藥/kg)大鼠用量取5個劑量即0.974×0.25＝0.2440.974×0.5＝0.4870.974×1＝0.9740.974×2＝1.9480.974×5＝4.870給藥途徑 im，與擬推薦的臨床用藥途徑一致。
試驗對照空白對照，用等體積注射用水；陽性對照，以哌替啶注射液作為陽性對照藥，小鼠60mg/kg，大鼠30mg/kg，實驗數據統計實驗數據以x±s表示，由皖南醫學院孫瑞元編的新藥統計軟件NDST進行方差分析及組間檢驗。
實驗方法與結果1.小鼠熱板法鎮痛實驗1.1方法 選用ICR雌性小鼠。實驗前對小鼠進行篩選，將其置于55±1℃的熱板上，以放置熱板至出現小鼠舔后足所需的時間(s)為該鼠的正常痛閾值。凡在5s內或在30s后才出現舔后足者及跳躍者均棄之不用。選出合格小鼠140只，隨機分為7組，即空白對照組，痛安注射液5個劑量組，陽性對照組。每組20只小鼠。重復測定各鼠的正常痛閾值，取兩次測定的平均值作為該鼠的給藥前痛閾值。然后按各組劑量im給藥，0.2ml/10g體重。于給藥后60min測定各組小鼠的痛閾值。小鼠在熱板上停留時間超過60s仍無反應者，其痛閾值以60s計算。給藥后出現舔后足反應的潛伏期以30s以上作為有鎮痛效應，潛伏期不足30s者均算作無鎮痛效應。1.2結果給藥后，空白對照組在各測定時間的痛閾值均未見明顯改變，痛安注射液組ED50、95％可信限分別為1.22g生藥/kg(0.95～1.62g生藥/kg)，見表1。
表1 痛安注射液小鼠熱板法鎮痛結果(n＝20)組別 鎮痛動物數鎮痛百分率(％)空白對照組 0 0痛安組9.740(g生藥/kg) 20 1003.896 18 901.948 13 650.974 9 450.487 3 15陽性對照組 19 952.電刺激法2.1方法 選擇合格小鼠取健康小鼠，稱重，放入小鼠固定器。用75％酒精擦洗鼠尾，涂以導電膠，量刺激電極于小鼠尾部。電極板涂5％鹽水，用藥理生理多用儀進行方波電刺激(電壓10v，頻率1Hz，波寬10ms)。連續電刺激三次(每次間隔5min)，三次皆有嘶叫反應者為合格小鼠。實驗分組，取合格小鼠140只(雄雌各半)，按體重、性別隨機分為7組，即空白對照組、痛安注射液5個劑量組，陽性對照組，每組20只小鼠。按各組劑量給小鼠im給藥，0.2ml/10g體重，給藥后60min，重復電刺激小鼠，連續兩次刺激不嘶叫者，為鎮痛藥有效，計算鎮痛率(鎮痛鼠數/每組鼠數×100％)。2.2結果 給藥后，空白對照組在各測定時間的痛閾值均未見明顯改變，痛安注射液組的ED50、95％可信限分別為1.70g生藥/kg(1.27～2.24g生藥/kg)，見表2。
表2 痛安注射液小鼠電刺激法鎮痛結果(n＝20)組別 鎮痛動物數鎮痛百分率(％)空白對照組 0 0痛安組9.740(g生藥/kg) 20 1003.896 17 851.948 9 450.974 6 300.487 2 10陽性對照組 19 953.小鼠醋酸扭體實驗3.1方法 選用ICR雄性小鼠140只，隨機分為7組空白對照組，痛安注射液5個劑量組，陽性藥對照組。所有動物在實驗前禁食12h，飲水不限。按各組劑量小鼠im給藥，0.2ml/10g體重。60min后給每只小鼠ip0.6％醋酸，每只0.2ml。然后觀察小鼠的扭體反應，以腹部收縮、伸展后肢或臀部抬高為扭體反應陽性。注射醋酸后5min開始記錄20min內小鼠扭體的次數。以完全抑制醋酸引起的扭體反應為鎮痛指標，參照實驗藥理學方法(1)用Bliss法統計實驗藥物完全抑制扭體的半數有效量(ED50)。3.2結果 痛安注射液組的扭體抑制率分別是100％、90％、80％、45％、15％，鎮痛ED50及其95％可信限分別為1.12(0.82～1.45)g生藥/kg，見表3。
表3 痛安注射液給藥小鼠醋酸扭體反應結果(n＝20)組別完全抑制扭體動物數 鎮痛百分率(％)空白對照組 0 0痛安組9.740(g生藥/kg) 201003.896 18901.948 16800.974 9 450.487 3 15陽性對照組 19954.大鼠甩尾法鎮痛實驗4.1方法 取Wistar大鼠，以55±1℃恒溫水浴為熱致痛源，把大鼠固定后將其尾尖部以上5cm放入熱水中，記錄大鼠尾部入水到縮離水面的時間，3min后再測一次，挑選縮尾反應時間在3-10s以內的大鼠70只，雌雄各半，隨機分為7組，即空白對照組，痛安注射液5個劑量組，陽性對照組，每組10只大鼠。按各組劑量給大鼠im給藥，0.2ml/100g體重。于給藥后60min再次測定大鼠的甩尾時間，以給藥后甩尾反應時間比給藥前反應時間延長1倍為鎮痛有效，達不到的均屬無鎮痛效應。
用Bliss法計算鎮痛半數有效量(ED50)，測出ED50后，用2倍ED50量的痛安注射液im給藥，于給藥后10、20、30、45、60、90、120、150、180、240、300、360、420、480分鐘測定大鼠甩尾反應時間。鎮痛效應不明顯時結束實驗，記錄各點鎮痛有效百分率。4.2結果 結果表明，空白對照組個別大鼠在給藥后偶有出現縮尾反應延長現象。痛安注射液組出現的鎮痛有效數隨劑量的加大而增多(表4-1)；ED50、95％可信限為1.32g生藥/kg(0.85～2.19g生藥/kg)。
表4-1 痛安注射液大鼠甩尾試驗鎮痛結果(n＝10)組別 鎮痛動物數鎮痛百分率(％)空白對照組 1 10痛安9.740(g生藥/kg) 101003.896 5 501.948 4 400.974 1 100.487 1 10陽性對照組10100
痛安注射液劑量為2倍ED50(即2.64g生藥/kg)的時效曲線見表4-2，實驗表明痛安注射液比哌替啶起效慢，作用強度與哌替啶相當，但維持時間較長。im后20min起效，60min鎮痛有效率達80％以上，4小時后逐漸下降，7小時后降至30％以下。哌替啶組則在15min起效，30-60min達最大效果。
表4-2痛安注射液對大鼠甩尾試驗不同時間的鎮痛有效數(n＝10)時間(分)10 20 30 4560 90 120 150 180 240 300 360 420 480痛安組 2356 8999886532哌替啶組5791010 986531100空白對照0001 01000101005.痛安注射液對大鼠三叉神經痛的作用5.1方法 大鼠70只，雌雄均可，隨機分為7組，每組10只，按各組劑量給大鼠im給藥，0.2ml/100g體重。給藥后60min，乙醚麻醉，腹位固定，頭頸部剪毛，切開皮膚，分離肌肉，暴露枕骨及第一頸椎間的硬腦膜，以微量進樣器取新配制的青霉素G鉀3μl，在大鼠的腦閂左下1～2mm，第一頸椎棘突左上方約1mm處，相當于三叉神經脊束核尾側部緩慢注入，縫合切口，置籠內觀察。以大鼠尖叫、甩頭及左后肢快速抓同側面部的次數之和為總發作次數。以注藥完畢到出現第一次反應的時間為潛伏期，持續三分鐘實驗終止；三分鐘內無此反應為自發反應陰性，有此反應為自發反應陽性。5.2結果 給藥60min后，空白對照組自發反應無明顯變化。痛安注射液組大鼠的自發反應隨劑量的增大而逐漸減少。ED50、95％可信限為1.37g生藥/kg(0.89～2.29g生藥/kg)，見表5。
表5痛安注射液對大鼠三叉神經痛的作用(n＝10)組別 自發反應陰性動物數 鎮痛百分率(％)空白對照組 0 0痛安組4.870(g生藥/kg) 9 901.9486 600.9744 400.4872 200.2440 0陽性對照組 9 90
結論 經小鼠醋酸扭體法、熱板法、電刺激法鎮痛實驗和大鼠甩尾法鎮痛實驗及對大鼠三叉神經痛的鎮痛作用，結果表明痛安注射液有明顯的鎮痛作用，其作用特點是(2)im給藥起效較快，20min起效，維持時間較長，60min鎮痛有效率達80％以上，2-4小時達作用高峰，4小時后逐漸下降，7小時后降至30％以下。(2)在本實驗所用劑量范圍內，痛安注射液的鎮痛作用隨劑量加大而加強，高劑量組給藥后，60-120min與陽性藥對比，無明顯差別，其作用強度與陽性對照藥相近。
權利要求
1.一種用于癌性疼痛鎮痛的藥物，其特征在于是由下述重量配比的原料制成的藥劑青風藤4～200白屈菜5～230漢桃葉10～250
2.如權利要求1所述的用于癌性疼痛鎮痛的藥物，其特征在于所述的藥劑的劑型為注射液。
3.權利要求2所述的用于癌性疼痛鎮痛的藥物的制備方法，包括以下步驟(1)白屈菜、青風藤加6～15倍量60～95％乙醇浸泡0.5～48小時，加熱回流1～6次，合并醇提液，減壓回收乙醇并濃縮至1∶1，用磷酸調PH至1.5～6，靜置4～48小時，濾過，濾液用氫氧化鈉溶液調PH至9.5～11.5，用等量氯仿提取3～10次，合并氯仿液，回收氯仿，殘留物真空干燥，得總生物堿；(2)漢桃葉加水煎煮2～4次，合并煎煮液，濾過，濾液減壓濃縮，用乙醇沉淀處理二次，第一次溶液含醇量達60～80％，第二次達80～90％，每次均濾過，回收乙醇，然后加水稀釋，用鹽酸調PH至2.0，冷藏，濾過，濾液用氫氧化鈉溶液調PH至6.5～7.0，再加乙醇使含醇量達85％，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.35～1.40，真空干燥，得漢桃葉干膏；(3)取上述總生物堿、漢桃葉干膏，加注射用水，用磷酸調PH至4～5，攪拌使溶解，冷藏，濾過，加吐溫-80、苯甲醇、混勻，用微孔薄膜濾過，灌封，滅菌，即得本發明中藥注射液。
全文摘要
本發明公開了一種用于癌性疼痛鎮痛的藥物,由下述重量配比的原料制成:青風藤4～200、白屈菜5～230、漢桃葉10～250。本發明還公開了上述藥物的制備方法:(1)白屈菜、青風藤加乙醇回流,合并醇提液,濃縮,調pH,濾過,濾液調至堿性,用氯仿提取合并,回收,殘留物真空干燥,得總生物堿;(2)漢桃葉加水煎煮,合并,濾液減壓濃縮,用乙醇沉淀處理,回收乙醇,稀釋,冷藏,濾液調pH,再加乙醇,濾液減壓濃縮,真空干燥,得漢桃葉干膏;(3)取上述總生物堿、漢桃葉干膏,加注射用水,調pH,加吐溫－80、苯甲醇,濾過,灌封,滅菌,制得注射液。本發明注射液為純中藥制劑,對治療癌性疼痛具有鎮痛效果好、作用時間長、無成癮性和耐受性、無毒副作用等特點。
文檔編號A61P29/00GK1378859SQ0211498
公開日2002年11月13日 申請日期2002年3月21日 優先權日2002年3月21日
發明者張平 申請人:張平