專利名稱：一種延緩慢性腎功能衰竭的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種治療和/或預防慢性腎功能衰減的藥物，具體說是延緩慢性腎功能衰竭的藥物組合物。又名“芪茸保元湯”。
因此，對于有效而且低費用的預防和治療腎功能衰減的藥物存在著迫切的需求。
發明人根據中醫理論和現代醫學研究，結合多年臨床經驗，從數千年浩瀚的中藥中有依據地精心篩選出十幾種中藥組成方劑，應用于臨床和動物實驗，結果發現本發明藥物可顯著改善慢性腎功能衰竭患者血清肌酐水平、血清尿素氮水平、血紅蛋白水平及增加血紅細胞數量；提高小鼠的抗疲勞及免疫功能；改善慢性腎功能不全小鼠的體重、腎重量、血清Cr和BUN；以及改善小鼠的由慢性腎功能衰減誘發的貧血，并由此完成了本發明。
本發明的藥物組合物包括按重量份計的以下原料黃芪10-150鹿茸1-10 大黃5-30白術10-120山芋10-30鎖陽6-15當歸10-60 丹參10-100 佩蘭0-60車前子0-60水蛭0-20 牡蠣10-60山楂0-30 神曲0-30 麥芽0-30大棗0-20 甘草0-10。
根據本發明的一個優選實施方案，本發明的藥物組合物包括黃芪15-120鹿茸1.5-8大黃6-25白術15-100山芋10-30鎖陽6-15當歸10-60 丹參15-90牡蠣10-60
車前子0-60水蛭0-15佩蘭0-60山楂0-30 神曲0-30麥芽0-30大棗0-20 甘草0-10。
其中牡蠣優選用生牡蠣，山楂優選用焦山楂，神曲優選用焦神曲，麥芽優選用焦麥芽。
根據本發明的進一步優選實施方案，本發明的藥物組合物包括黃芪10-150鹿茸1-10 大黃6-30白術10-120山芋10-30鎖陽6-15當歸10-60 丹參10-100 生牡蠣10-60車前子10-60 水蛭5-15 佩蘭10-60。
本方案適合用于慢性腎衰水腫較甚者。
根據本發明的另一個進一步優選的實施方案，本發明的藥物組合物包括黃芪10-150鹿茸1-10 大黃6-30白術10-120山芋10-30鎖陽6-15當歸10-60 丹參10-100 生牡蠣10-60焦神曲10-30 焦麥芽10-30 焦山楂10-30甘草6-10 大棗5-20本方案適合用于慢性腎衰消化道癥狀如納差、嘔呃等較為突出者。
方中含有黃芪、鹿茸、大黃等主要成分，具有補益脾腎，溫養精血，疏泄濁毒的功效，從而培植元氣，調暢氣機，達到保護腎臟，改善腎功能，延緩慢性腎功能衰竭的進程與發展的作用，故命名為芪茸保元湯。該方主要治療脾腎氣(陽)虛型和陰陽兩虛型，兼有濕濁、血瘀證的慢性腎功能衰竭。
本處方屬臨床經驗方。方中首選黃芪、鹿茸、大黃為主藥。黃芪補益脾氣，以資生血之源；鹿茸血肉有情之品，峻補腎陽，生精益髓；大黃通腑泄濁排毒以治標；三藥合用補脾益腎，降濁排毒。白術、山芋、鎖陽、當歸、丹參為輔藥。白術健脾益氣，燥濕行水，增強運化功能，助黃芪以益氣健脾，使之補氣而不滯；山芋既能補腎陽，有能補腎陰；鎖陽補腎陽，益精血；三藥既助鹿茸溫補腎陽，又補腎陰，益精血，使之陰陽雙補，精血自生；當歸、丹參養血活血，配以黃芪既陰生陽長，氣旺血生，又活血祛瘀，疏通血脈。佩蘭、車前子、水蛭、生牡蠣、焦山楂、焦神曲、焦麥芽、大棗、甘草為佐使藥。佩蘭芳化濕濁、車前子有較強的利水滲濕作用，同黃芪、白術相配，使濕去脾健；水蛭破血逐瘀，利水道，加強當歸、丹參、佩蘭、車前子的藥物療效；生牡蠣化痰軟堅除濕，偏走下竅(精竅、尿竅)；焦三仙健胃消食降逆；大棗、甘草甘平健脾和胃、同黃芪、白術，共成益氣健脾，養心安神之功，又能緩和藥性，調和諸藥。
本發明的藥物組合物可以制成任何一種適合于臨床常用的劑型，例如丸劑、散劑、膠囊、口服液、濃縮丸劑、顆粒制劑等。
例如，將本發明組合物制成口服液制劑的方法是取所述原料，用水煎2次，取2次的上層液體，包裝即可。
例如，將本發明組合物制成散劑的方法是取所述原料，清洗，晾干，粉碎，過篩，再裝袋。
需要說明的是，本發明的組合物還可以含有其它任選成分，例如改善慢性腎衰病人相應癥狀的中藥原料；同時本發明的藥物組合物也可以與治療慢性腎衰的西藥一起應用制成中西藥復方制劑。因此在本發明組合物的基礎上增加一味或多味中藥原料，或者將本發明組合物與西藥制成的復方制劑也屬于本發明保護的范圍。這些任選成分的量一般在本發明組合物總量的50％以下，優選20％以下。
實驗一芪茸保元湯延緩慢性腎功能衰竭療效觀察于1997年10月至2000年10月，為了客觀評價芪茸保元湯的療效及安全性，發明人對240例慢性腎功能衰竭(CRF)患者進行了全面系統的臨床觀察。
1、一般資料本臨床觀察病例均系我院門診及部分住院病人，共240例，中藥治療組120例，中、西藥對照組各60例。其中中藥治療組男52例，女68例，年齡最大83歲，最小23歲，平均年齡60.68歲，病程最短一個月，最長八年；中藥對照組男26例，女34例，年齡最大82歲，最小20歲，平均年齡56.83歲，病程最短一個月，最長四年；西藥對照組男25例，女35例，年齡最大79歲，最小22歲，平均年齡58.92歲，病程最短二個月，最長七年。原發病中，慢性腎小球腎炎67例，高血壓腎病64例，糖尿病腎病36例，多囊腎5例，腎盂腎炎5例，其它疾病19例，病因不明者44例。
2、診斷標準(1)西醫診斷標準參照1992年安徽太平腎臟病會議上制定的慢性腎衰診斷標準及分期中的I-III期。
(2)中醫辯證分型標準參照1986年第二界全國中醫腎病學術會議討論修改的辯證分型方案中脾腎氣(陽)虛和陰陽兩虛型。
3、治療方法(1)中藥治療組芪茸保元湯內服，每日4次，每次25ml；(2)中藥對照組尿毒清沖劑，溫開水沖服，每日4次，每次5g；(3)西藥對照組包醛氧化淀粉，溫開水沖服，每日3次，每次5g；(4)療程兩個月為一個療程。治療期間除對證治療(如高血壓、心衰等)外，均停用其它藥物或治療手段。
4、結果分析(1)療效判定標準(參照1987年全國腎衰保守療法專題學術會議擬定的標準)顯效①癥狀減輕或消失；②內生肌酐清除率增加≥30％；③血肌酐降低≥30％。
以上①項必備，②、③具備一項，即可判定。
有效①癥狀減輕或消失；②內生肌酐清除率增加≥20％；③血肌酐降低≥20％。
④治療前后以血肌酐的對數或倒數，用直線回歸方程分析，其斜率有明顯意義者。
以上①項必備，其它具備1項，即可判定。
無效不符合顯效和有效判斷條件者。
(2)療效分析1)療效對比見表1表1三組療效對比
各組間進行Ridit分析，中藥治療組與中藥對照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，尤其顯效率前者明顯優于后者；中藥治療組與西藥對照組相比，具有極顯著性差異(P＜0.001)。
2)不同分期腎功能衰竭療效分析見表2
表2不同分期腎功能衰竭療效對比
各組同期病例療效進行Ridit分析，中藥治療組與中藥對照組相比，I期、II期無顯著性差異，III期有極顯著性差異(P＜0.001)。中藥治療組與西藥對照組相比，三期均有極顯著性差異(P＜0.01)。3)癥狀療效分析見表3
表3癥狀療效對比
中藥治療組與其余各組間Ridit分析*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.0014)不同證型慢性腎功能衰竭的療效比較通過臨床觀察，中藥治療組脾腎氣虛型44例，脾腎陽虛型75例，陰陽兩虛型1例；中藥對照組脾腎氣虛型28例，脾腎陽虛型32例，無陰陽兩虛型。結果顯示中藥治療組脾腎氣虛型總有效率33.33％(40/120)，脾腎陽虛型總有效率51.67％(62/120)，陰陽兩虛型總有效率0.83％(1/120)；中藥對照組脾腎氣虛型總有效率39.99％(24/60)，脾腎陽虛型總有效率31.67％(19/60)。兩組療效經X2檢驗脾腎氣虛型無明顯差異(P＞0.05)；而脾腎陽虛型總有效率中藥治療組明顯優于中藥對照組，有顯著性差異(P＜0.01)。見表4
表4不同證型慢性腎功能衰竭的療效比較
5)對血肌肝(Scr)、尿素氮(BUN)的影響見表5、6表5芪茸保元湯中藥治療組及中、西藥對照組對慢性腎功能衰竭患者血清肌酐水平的影響
芪茸保元湯與其他組間進行t檢驗，*p＜0.05，**p＜0.01；各組治療前后進行配對t檢驗，Δp＜0.05，ΔΔp＜0.01。
表6芪茸保元湯中藥治療組及中、西藥對照組對慢性腎功能衰竭患者血清尿素氮水平的影響
芪茸保元湯與其他組間進行t檢驗，*p＜0.05，**p＜0.01；各組治療前后進行配對t檢驗，Δp＜0.05，ΔΔp＜0.01。
6)對血Hg、Rbc見表7、8表7芪茸保元湯中藥治療組及中、西藥對照組對慢性腎功能衰竭患者血紅蛋白水平的影響
芪茸保元湯與其他組間進行t檢驗，*p＜0.05，**p＜0.01；各組治療前后進行配對t檢驗，Δp＜0.05，ΔΔp＜0.01。
表8芪茸保元湯中藥治療組及中、西藥對照組對慢性腎功能衰竭患者血紅細胞數量的影響
芪茸保元湯與其他組間進行t檢驗，*p＜0.05，**p＜0.01；各組治療前后進行配對t檢驗，Δp＜0.05，ΔΔp＜0.01。
5、隨訪觀察(1)藥物副反應隨訪過程中除病人表現稀軟便，次數增多外，未發現其它明顯毒副作用及不良反應。
(2)藥物對慢性腎功能衰竭者轉歸的影響對芪茸保元湯中藥治療組80例患者進行一年以上遠期療效追蹤觀察，結果發現，凡堅持服用此藥者，病情均平穩，臨床癥狀不同程度改善或緩解，生活質量明顯提高，各種檢驗指標未見上升趨勢。17例Scr值已恢復到正常水平的I期病人，在停藥后或間斷服藥的情況下未出現反復。
結論通過對芪茸保元湯的臨床觀察，我們認為芪茸保元湯無任何毒副作用，能提高免疫功能，具有對抗腎損害，維護和改善腎功能，從而提高患者生活質量和生存能力，較好地穩定腎功能，延緩慢性腎功能衰竭的進程，值得深入探討。
1、研究補益脾腎、溫養精血、泄濁排毒對慢性腎功能衰竭整體調節作用中醫認為腎為先天之本，主水，主氣化，為調節機體水液代謝的重要器官。若腎臟虛衰，除本身的功能失調以外，必然累及其他臟器，首先是脾臟，因脾為后天之本，主運化水谷精微和水濕，脾主運化的功能有賴于腎陽的溫煦。如腎陽不足，不能溫煦脾陽而致脾腎陽虛。脾陽不振不能腐熟水谷，腎所藏之精得不到水谷精微的不斷充養，致氣血不足，而出現貧血證；脾腎虛衰，氣化不及，升清降濁的功能受到破壞，不能及時疏導、轉輸、運化水液及毒物，因而造成濕濁、熱毒和瘀血潴留，同時全身臟器功能失常，氣機失調，致使“邪氣”及機體廢物(代謝產物)不能排除體外。因而形成了因虛致實，虛中夾實的復雜綜合征候群。溫補脾腎陽氣，增強氣化功能，疏泄體內濁毒，調暢機體氣機，是治療CRF的重要一環，。通過芪茸保元湯補益脾腎、溫養精血、泄濁排毒對人體和模型動物的整體調節作用，使之收到較好效果，從而進一步論證了腎乃“先天之本”，脾乃“后天之本”理論的重要作用。
2、芪茸保元湯對CRF的作用機理芪茸保元湯方中主要藥物黃芪補益脾氣，以資生血之源；當歸養血活血，兩藥和用則陰生陽長，氣旺血生；鹿茸血肉有情之品，峻補腎陽，生精益髓；山芋即能補腎陰，又能補腎陽，兩藥同用陰陽雙補，精髓自生；大黃通腑泄濁排毒以治標證。現代藥理研究表明黃芪具有提高免疫功能、增強網狀內皮系統的吞噬功能、促進代謝和利尿作用；當歸有抗凝及抑制纖維組織增生的作用，從而改善腎臟微循環；鹿茸能促進紅細胞、血紅蛋白、網狀紅細胞新生；大黃除具有抗凝、消炎、免疫調節和血液流變學方面的作用外，對腎臟本身的研究包括抑制尿素氮合成、緩解殘存腎高代謝、抑制腎小球細胞和小管上皮細胞的增生、拮抗促腎因子刺激系膜細胞增殖的作用以及調節脂質代謝紊亂的效應。諸藥合用共奏補益脾腎、溫養精血、泄濁排毒的功效，從而培植元氣、調暢氣機、疏泄濁毒，達到改善腎功能，延緩CRF的進程與發展的作用。
3、對芪茸保元湯的療效評價臨床觀察各組間進行Ridit分析，中藥治療組與中藥對照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，其中顯效率前者優于后者；中藥治療組與西藥對照組相比，具有極顯著性差異(P＜0.001)。各組同期病例療效進行Ridit分析，中藥治療組與中藥對照組相比，I期、II期無顯著性差異，III期有極顯著性差異(P＜0.001)，說明芪茸保元湯對CRF各期均有效；中藥治療組與西藥對照組相比，三期均有極顯著性差異(P＜0.01)。中藥治療組與其余各組間癥狀療效進行Ridit分析有極顯著性差異(P＜0.01)。中藥治療組與中藥對照組不同證型CRF的療效比較，經X2檢驗，脾腎氣虛型無明顯差異(P＞0.05)；而脾腎陽虛型總有效率中藥治療組明顯優于中藥對照組，有顯著性差異(P＜0.01)。對慢性腎功能衰竭患者血清肌酐水平、血清尿素氮水平、血紅蛋白水平及血紅細胞數量的影響均進行t檢驗，芪茸保元湯與中、西藥對照組間，除對中藥對照組BUN和中、西藥對照組血紅細胞數量的影響無明顯差異外，其余各組均有顯著性差異(p＜0.05和p＜0.01)；各組治療前后進行配對t檢驗，中藥治療組有顯著性差異(P＜0.01)，其余各組均無明顯差異。
總之，我們認為該藥療效確切，使用安全，用于治療慢性腎功能衰竭具有良好的前景。實驗二芪茸保元湯對小鼠抗疲勞及免疫功能的影響芪茸保元湯是由首都醫科大學宣武醫院中藥制劑室生產的。方中含有黃芪、鹿茸、山芋、當歸等主要成分。諸藥合用共奏補益脾腎，溫養精血的功效，從而培植元氣，調暢氣機，疏泄濁毒，達到改善腎功能，延緩慢性腎功能衰竭的進程與發展的作用。經多年臨床驗證對各種腎衰病人有良好的療效。為驗證其療效，給臨床用藥提供藥理學依據，發明人對芪茸保元湯進行了基礎藥效學的實驗研究。
1實驗材料動物清潔級昆明雌、雄性小鼠，體重22±2g，中國藥品生物制品檢定所提供。
藥品芪茸保元湯(每毫升含生藥2.3g)，批號，9807091，由首都醫科大學宣武醫院中藥制劑室提供。
試劑明膠，Na2CO3，印度墨汁均由北京市化學試劑公司提供。
儀器751分光光度計，上海光學儀器廠生產。
2實驗方法及結果2.1芪茸保元湯對小鼠抗疲勞能力的影響(參考后面所列文獻1)選取雌雄性小鼠隨機分為正常照組、芪茸保元湯小劑量組(17.3g生藥/kg)和大劑量組(51.8g生藥/kg)，每組10只動物，連續灌胃給藥2周，實驗當天灌胃1小時后進行實驗。實驗在一水深30cm，直徑20cm圓形玻璃缸中進行，水溫20±0.5℃。實驗時在小鼠尾部系一體重10％重物，置于水中后立即計時，當小鼠頭部沉入水面10秒鐘不能浮出水面即為體力耗竭，即刻計時為小鼠游泳時間。
芪茸保元湯大劑量對小鼠有顯著提高抗疲勞能力的作用，結果見表9，10所示表9芪茸保元湯對雄性小鼠抗疲勞能力的影響
各給藥組與對照組t檢驗，以下各表相同表10芪茸保元湯對雌性小鼠抗疲勞能力的影響
2.2芪茸保元湯對小鼠血流中惰性碳粒吞噬能力的影響(參考后面所列文獻2)按以上劑量連續灌胃給藥3周，每組8只。實驗當天給藥1小時后，尾靜脈按0.1ml/10g注入稀釋墨汁，分別于30秒及6分鐘時眼眶取血25微升，加入2毫升0.1％Na2CO3中。以正常鼠25微升血，加入2毫升0.1％Na2CO3所得液體校零，675nm比色，得到每只小鼠30秒及6分鐘時眼眶取血所得溶液的OD值。動物取血后處死，稱取肝、脾重量。按以下公式計算吞噬指數αK＝(1gC1-1gC2)/(T1-T2)α=(W/WLS)3K]]>式中C為血中碳粒濃度，T為時間，W為體重，WLS為肝脾合重。
芪茸保元湯大劑量對雄性小鼠有顯著提高網狀內皮系統的吞噬功能，結果見表11，12所示表11芪茸保元湯對雄性小鼠血流中惰性碳粒吞噬系數的影響
表12芪茸保元湯對雌性小鼠血流中惰性碳粒吞噬指數的影響
2.3芪茸保元湯急性毒性試驗(參考后面所列文獻3)芪茸保元合劑加熱濃縮(每毫升含生藥5.75g)。健康小鼠30只，雌雄各半，給藥前1天稱重，并禁食，不禁水過夜。次日實驗，每只小鼠每次口服灌胃受試物0.25ml/10g，1日內給予2次，間隔5小時，每日劑量為287.5g生藥/kg。給藥后即刻觀察動物反應，動物外觀，四肢活動，攝食，飲水，排泄等，連續觀察七天，稱取體重。其中雄性大鼠有7只給藥次日出現黑色稀便，雌性11只，2日后均轉為正常。
結果小鼠口服灌胃芪茸保元湯287.2g生藥/kg(相當人用量的125倍)，全部健康存活，體重增加，肉眼觀察未見明顯毒性反應，僅部分動物出現黑色稀變，2日后均轉為正常。
3討論慢性腎功能衰竭是由于腎臟排泄功能障礙，體內代謝產物蓄積，導致機體功能紊亂，其中體能下降，免疫功能降低是造成生存期縮短的重要因素之一，但現代治療往往忽略這個方面。而中醫認為本病的病機為脾腎陽氣虛衰，氣化不及，升清降濁功能破壞導致水液毒物潴留。因此溫補脾腎為其大法，本方以黃芪、鹿茸為君，保元湯為佐使，共奏溫腎益氣助陽之功，其中黃芪現代藥理研究表明具有提高免疫功能、促進代謝和利尿作用(參考后面所列文獻4)，因此該方可能補充了現代治療之不足。
本研究通過小鼠負重游泳實驗表明，芪茸保元湯大劑量能顯著提高雌雄小鼠抗疲勞能力。碳粒廓清實驗表明，芪茸保元湯大劑量對雄性小鼠有顯著提高網狀內皮系統的吞噬功能，而對雌性小鼠的作用不顯著，可能因為雌激素對網狀內皮系統吞噬活性有一定影響。芪茸保元湯小鼠經口給藥急性毒性試驗結果，日最大耐受量為287.5g生藥/kg(相當于人日用量125倍)無毒性作用。
因此，根據本項研究認為芪茸保元湯能提高免疫功能，增強體質，從而達到延緩腎功能衰竭，提高患者生活質量的作用。實驗三芪茸保元湯對慢性腎功能衰竭治療作用的實驗研究發明人根據中醫理論和現代醫學研究，結合多年臨床經驗研制了治療慢性腎功能不全的方劑—芪茸保元湯。為驗證其療效，給臨床用藥提供藥理學依據，研究了芪茸保元湯對慢性腎功能不全小鼠模型的治療作用。
1實驗材料1.1動物清潔級昆明雄性小鼠，體重22±2g，中國藥品生物制品檢定所提供。
1.2藥品芪茸保元湯(每毫升含生藥2.47g)，由首都醫科大學宣武醫院中藥制劑室提供，主要成分為黃芪、鹿茸、山萸、當歸。腺嘌呤(Adenine)由上海東風生物生物技術有限公司提供。
1.3儀器7150型自動生化分析儀，購自日本日立公司。
2實驗方法
2.1造模方法隨機取雄性小鼠60只分別在第1天、第3天和第5天，按250mg/kg灌胃給予腺嘌呤，造成慢性腎功能不全動物模型，動物死亡約20％。隨機取雄性小鼠12只給予蒸餾水，為正常對照組(參考后面所列文獻5)。
2.2分組與給藥將上述造模動物隨機分為模型組、芪茸保元湯小劑量組(13.9g生藥/kg)和大劑量組(27.8g生藥/kg)，對照組仍為上述正常對照組。芪茸保元湯各劑量組每天灌胃給藥1次，連續給藥1個月，對照與模型組給予蒸餾水。在給藥的1個月期間，每周給予腺嘌呤(250mg/kg)1次，持續造成腎損害，用以觀察藥物的治療作用。
2.3測定指標 給藥1各月后，各組動物均稱取體重，眼眶取血分離血清，取雙腎臟稱平均重量。血清由自動生化分析儀測定Cr與BUN含量。
2實驗結果結果表明，模型組體重顯著低于對照組P＜0.001，芪茸保元湯各組體重均較模型組高，毛色等一般狀況均較模型組好，大劑量組與模型組體重有顯著性差異(P＜0.05＝。模型組腎重量顯著低于對照組P＜0.001，各給藥組與模型組無顯著性差異。模型組血清Cr與BUN含量均顯著高于對照組P＜0.001，芪茸保元湯各組Cr與BUN含量均較模型組顯著降低P＜0.05，見表13。
表13芪茸保元湯對慢性腎功能不全小鼠體重、腎重量及血清Cr與BUN含量的影響
模型組與其余各組間進行t檢驗，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.0013討論慢性腎功能衰竭是由于腎臟排泄功能障礙，體內代謝產物蓄積，導致機體功能紊亂，生活質量下降，如病情進一步發展，最終至腎功能衰竭。中醫認為本病的病機為脾腎陽氣虛衰，氣化不及，升清降濁功能破壞導致水液毒物潴留。因此溫補脾腎為其大法，本方以黃芪、鹿茸為君，保元湯為佐使，諸藥合用共奏補益脾腎，溫養精血的功效，從而培植元氣，調暢氣機，疏泄濁毒，達到改善腎功能，延緩慢性腎功能衰竭的進程與發展的作用。
本研究采用腺嘌呤致慢性腎功能不全小鼠模型研究了該藥的治療作用。腺嘌呤灌胃后，通過機體代謝，成為2，8-二羥基嘌呤沉積于腎小管，引起腎損傷(參見后面所列文獻6和7)。本研究首先給腺嘌呤3次，造成動物腎臟的基礎損害，然后在治療期間每周給腺嘌呤1次，繼續造成腎損害，來模擬臨床慢性腎功能不全的自然過程。研究發現芪茸保元湯具有對抗腎損害，維護功能，降低血清中Cr與BUN含量，增加模型動物的體重，改善機體一般狀況作用。因此該藥用于治療慢性腎功能不全具有良好的前景。
實驗四芪茸保元湯對慢性腎功能衰竭誘發貧血治療作用的實驗研究發明人根據中醫理論和現代醫學研究，結合多年臨床經驗研制了治療慢性腎功能衰竭的方劑—芪茸保元湯。為驗證其療效，給臨床用藥提供藥理學依據，通過動物實驗研究了芪茸保元湯對慢性腎功能不全所致腎性貧血的治療作用。
1實驗材料1.1動物清潔級昆明雄性小鼠，體重22±2g，中國藥品生物制品檢定所提供。
1.2藥品芪茸保元湯(每毫升含生藥2.47g)，由首都醫科大學宣武醫院中藥制劑室提供。腺嘌呤(Adenine)由上海東風生物生物技術有限公司提供。
1.3儀器7150型自動生化分析儀，購自日本日立公司，HCP 5220型血細胞自動分析儀，購自法國HYCEL公司。
2實驗方法2.1造模方法隨機取雄性小鼠80只分別在第1天、第3天和第5天，按250mg/kg灌胃給予腺嘌呤，造成慢性腎功能不全動物模型，動物死亡約20％。隨機取雄性小鼠12只給予蒸餾水，為正常對照組(參見后面所列文獻5)。
2.2分組與給藥將上述造模動物隨機分為模型組、芪茸保元湯小劑量組(13.9g生藥/kg)和大劑量組(27.8g生藥/kg)，對照組仍為上述正常對照組。芪茸保元湯各劑量組每天灌胃給藥1次，連續給藥1個月，對照與模型組給予蒸餾水。在給藥的1個月期間，每周給予腺嘌呤(250mg/kg)1次，持續造成腎損害，用以觀察藥物的治療作用。
2.3測定指標 給藥1各月后，各組動物均稱取體重。眼眶取血，50ul抗凝，余血不抗凝，分離血清。取雙腎臟稱平均重量。抗凝血由血細胞自動分析儀測定紅細胞計數(RBC)、血紅蛋白含量(HGB)、紅細胞比積(HCT)、平均紅細胞體積(MCV)、平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)及平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)，血清由自動生化分析儀測定肌酐(Cr)與尿素氮(BUN)含量。
2實驗結果模型組血清Cr與BUN含量均顯著高于對照組P＜0.001，芪茸保元湯各組Cr與BUN含量均較模型組顯著降低P＜0.05，見表14。
表14芪茸保元湯對慢性腎功能不全小鼠血清Cr與BUN含量的影響
模型組與其余各組間進行t檢驗，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001模型組RBC、HGB、HCT均顯著低于對照組(P＜0.001)，芪茸保元湯各組RBC、HGB、HCT均較模型組顯著升高(P＜0.05)。MCV、MCH及MCHC各組間均無顯著性差異，見表15。
表15芪茸保元湯對腎性貧血小鼠紅細胞計數、血紅蛋白含量、紅細胞比積及其相關數據的影響
模型組與其余各組間進行t檢驗，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.0013討論慢性腎功能衰竭是由于腎臟排泄功能障礙，體內代謝產物蓄積，導致機體功能紊亂。貧血是其主要的繼發癥狀，發病因素包括由于腎實質破壞導致促紅素生成減少；體內潴留的毒物抑制紅細胞生成，使紅細胞破壞增加等因素。中醫認為慢性腎功能不全的病機為脾腎陽氣虛衰，氣化不及，升清降濁功能破壞。因此溫補脾腎，升清降濁為其大法。本方以黃芪、鹿茸為君，保元湯為佐使，諸藥合用共奏補益脾腎，溫養精血的功效。
本研究采用腺嘌呤致慢性腎功能不全誘發腎性貧血小鼠模型觀察了該藥的治療作用。腺嘌呤灌胃后，通過機體代謝，成為2，8-二羥基嘌呤沉積于腎小管，引起腎損傷(參見后面所列文獻6、7)。本研究首先給腺嘌呤3次，造成動物腎臟的基礎損害，然后在治療期間每周給腺嘌呤1次，繼續造成腎損害，來模擬臨床慢性腎功能不全的自然過程。結果表明模型動物血清Cr及BUN均顯著升高，RBC、HGB、HCT顯著低于對照組，但MCV、MCH及MCHC與對照組無顯著性差異，表明該模型造成的貧血為正常細胞性貧血。芪茸保元湯具有降低血清中Cr與BUN含量，增加RBC、HGB、HCT的作用，因此該藥具有改善模型動物的腎功能，對腎性貧血有較好的治療作用。
以下結合實施例來說明本發明，應該理解的是，這些實施例僅用于說明的目的，不構成對本發明的任何限制。
實施例2黃芪120g 鹿茸8g 大黃20g白術90g山芋15g鎖陽15g當歸15g丹參20g佩蘭40g車前子40g 水蛭12g牡蠣20g焦山楂10g 焦神曲10g 焦麥芽10g大棗10g甘草10g將上述原料水煎制成口服液體制劑。
實施例3黃芪80g鹿茸6g 大黃15g白術60g山芋20g鎖陽10g當歸30g丹參60g佩蘭30g車前子40g 水蛭10g牡蠣40g大棗10g甘草10g將上述原料水煎制成口服液體制劑。
實施例4黃芪80g鹿茸5g 大黃18g白術65g山芋20g鎖陽10g當歸30g丹參50g焦山楂20g焦神曲20g 焦麥芽20g 大棗10g甘草10g將上述原料水煎制成口服液體制劑。
參考文獻1、宗瑞義.人參鎮靜抗疲勞及抗高溫低溫作用.生理學報，1964；(4)3242、陳奇主編.中藥藥理實驗方法.北京人民衛生出版社，1994.7573、王北嬰主編.中藥新藥研制與審批.北京中國中醫藥出版社，1995.2484、王筠默主編.中藥藥理學.上海上海科學技術出版社，1994.1105.鄭平東，朱燕俐，丁名城，候衛國，鐘念文.用腺嘌呤制作慢性腎功能衰竭動物模型中.華腎臟病雜志，1989，5(6)342-3446.Shields C.E.，et al.Investigation of nephrotoxic effects ofadenine and its metabolic product，2，8-dioxyadenine on primates(macaca irus).JClin Pharmacol.1970；103167.Lindblad G.et al.Adenine toxicityA three week intravenousstudy in dogs.Acta Pharmacol Toxicol 1973；3224權利要求
1.一種用于預防和/或治療各種原因造成的慢性腎功能衰減的藥物組合物，特征在于它包括按重量份計的以下原料黃芪10-150鹿茸1-10 大黃5-30白術10-120山芋10-30鎖陽6-15當歸10-60 丹參10-100 佩蘭0-60車前子0-60水蛭0-20 牡蠣10-60山楂0-30 神曲0-30 麥芽0-30大棗0-20 甘草0-10。
2.根據權利要求1的藥物組合物，特征在于各原料的配比是黃芪15-120鹿茸1.5-8大黃6-25白術15-100山芋10-30鎖陽6-15當歸10-60 丹參15-90牡蠣10-60車前子0-60水蛭0-15 佩蘭0-60山楂0-30 神曲0-30 麥芽0-30大棗0-20 甘草0-10。
3.根據權利要求1的藥物組合物，特征在于各原料的配比是黃芪10-150鹿茸1-10 大黃6-30白術10-120山芋10-30鎖陽6-15當歸10-60 丹參10-100 佩蘭10-60車前子10-60 水蛭5-15 生牡蠣10-60。
4.根據權利要求1的藥物組合物，特征在于各原料的配比是黃芪10-150鹿茸1-10 大黃6-30白術10-120山芋10-30鎖陽6-15當歸10-60 丹參10-100 生牡蠣10-60焦神曲10-30 焦麥芽10-30 焦山楂10-30甘草6-10 大棗5-20。
5.制備權利要求1-4中任一項的藥物組合物的方法，包括取所述原料水煎制成口服液體制劑。
6.根據權利要求1-4中任一項藥物組合物，其特征在于它可以是任何一種適合用于臨床的劑型。
7.權利要求1-4中任一項的藥物組合物，其特征在于它還可以含有其它任選成分，例如一味或多味其它中藥原料。
8.權利要求1-4中任一項的藥物組合物，其特征在于它可以與治療慢性腎功能衰減的西藥一起應用制成中西藥復方制劑。
全文摘要
本發明涉及一種治療和/或預防慢性腎功能衰減的藥物,具體說是延緩慢性腎功能衰竭的藥物組合物。又名“芪茸保元湯”。本發明藥物應用于臨床和動物實驗,結果發現可顯著改善慢性腎功能衰竭患者血清肌酐水平、血清尿素氮水平、血紅蛋白水平及增加血紅細胞數量;提高小鼠的抗疲勞及免疫功能;改善慢性腎功能不全小鼠的體重、腎重量、血清Cr和BUN;以及改善小鼠的由慢性腎功能衰減誘發的貧血。
文檔編號A61K35/62GK1363375SQ0210032
公開日2002年8月14日 申請日期2002年1月10日 優先權日2002年1月10日
發明者孫淑玲, 李斌 申請人:首都醫科大學宣武醫院