治療腫瘤性疾病藥物(例如,氯丙嗪和噴他脒)的聯合應用的制作方法

專利名稱：治療腫瘤性疾病藥物(例如,氯丙嗪和噴他脒)的聯合應用的制作方法
技術領域：
本發明背景本發明涉及腫瘤性疾病如癌癥的治療。
癌癥是一種以異常細胞的失控性增長為標志的疾病。這些異常細胞不再執行正常細胞的功能，并且它們擠出并破壞健康組織。
肺癌在男性和女性中是最常見的癌癥相關性死因。在最常見的發生于男性和女性的癌癥中，它居于第二位；預計僅2000年一年中美國新發肺癌病例將超過164000人。在美國男性肺癌病例發病率降低的同時，女性發病率卻持續增長。肺癌可以是致命性的，根據美國肺學會預測，2000年死于肺癌的美國人預計為156900人。
根據細胞在顯微鏡下形態，原發性肺癌被分成兩種主要類型，非小細胞肺癌和小細胞肺癌。非小細胞肺癌(鱗狀細胞癌、腺癌和大細胞癌)向其它器官的擴散一般比小細胞肺癌慢。小細胞肺癌是較少見的類型，約占全部肺癌的20％。
其它癌癥包括腦癌、乳房癌、宮頸癌、結腸癌、胃癌、腎癌、白血病、肝癌、淋巴癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、直腸癌、肉瘤、皮膚癌、睪丸癌和子宮癌。同肺癌一樣，這些癌癥有時以化療方法治療。
目前使用或臨床試驗中的化療藥物包括紫杉醇、多西紫杉醇、他莫昔芬、維諾瑞平、吉西他賓、順鉑、依托泊甙、拓撲替康、伊利替康、阿那曲唑、利妥昔單抗、曲妥珠單抗、氟達拉賓、環磷酰胺、gentuzumab、卡鉑、干擾素和阿霉素。最常用的抗癌藥是紫杉醇，其可單獨使用或與其它化療藥如5-FU、阿霉素、維諾瑞平、環磷酰胺、及順鉑等聯合使用。
本發明概述我們發現抗精神病藥氯丙嗪和抗原蟲藥噴他脒聯合使用可表現出確切的抗癌細胞增殖活性。這些藥物各自的結構和功能類似物是已知的，并且這些類似物中的任何一個均可以用于本發明的抗增殖聯合用藥中。氯丙嗪和噴他脒的代謝物也是已知的。這些代謝物中有不少具有其母體化合物之一項或一項以上的生物學活性，并且相應地，也可以用于本發明的抗增殖聯合用藥中。因此，本發明的特征是治療患有癌癥或其它腫瘤病的患者的方法，其通過同時或在14天內分別給予患者以足以抑制腫瘤生長的劑量的氯丙嗪和噴他脒進行。
兩種化合物優選在十天內分別給予，更優選在五天內分別給予，最優選在二十四小時內分別給予或甚至同時給予。如下文所述，根據本發明之任何一種方法治療的癌癥可以是肺癌(鱗狀細胞癌、腺癌或大細胞癌)、腦癌、乳癌、宮頸癌、結腸癌、胃癌、腎癌、白血病、肝癌、淋巴癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、直腸癌、肉瘤、皮膚癌、睪丸癌或子宮癌。
在一個相關方面，本發明還以治療腫瘤(如癌癥)患者的方法為特征。在這種方法中，對患者給予(a)選自丙氯拉嗪、奮乃靜、甲哌啶嗪、左美丙嗪、乙酰丙嗪、乙酰哌非納嗪、培拉嗪、丙酰異丙嗪、putaperazine、硫乙哌丙嗪、甲氧丙嗪、chlorfenethazine、氰甲丙嗪、奮乃靜庚酸脂(perphenazine，enanthate)、norchlorpromazine、三氟拉嗪、甲硫噠嗪(或上述任何一個的鹽)，以及多巴胺D2拮抗劑(例如，止嘔靈、哌迷清、螺哌隆、普羅吩胺、克立波必利、安非他酮和長安靜)的第一種化合物；和(b)選自普羅帕脒、丁氧苯脒(butamidine)、庚氧苯脒(heptamidine)、壬氧苯脒(nonamidine)、司替巴脒、羥茋巴脒、二脒那秦、苯甲脒、4，4’-(五亞甲基二氧基)二-，二鹽酸鹽、氧二苯脒、雙溴丙脒、1，3-雙(4-脒基-2-甲氧基苯氧基)丙烷、氧二苯脒和雙脒苯脲(或上述任何一個的鹽)的第二種化合物。此外，第二種化合物可以是噴他脒的功能類似物，例如紡錘菌素、偏端霉素、博來霉素、放線菌素D或柔紅霉素。所述第一種和第二種化合物優選同時或在14天內分別用足以抑制腫瘤生長的劑量給予。
在另一個相關的方面，本發明還以通過給予下列化合物而治療腫瘤(如癌癥)患者的方法為特征a)具有結構式(I)的第一種化合物 其中R2選自一組包括以下的基團 R10選自一組包括以下的基團
R1、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9相互獨立，分別是H、F、OH、OCF3或OCH3；且W是選自一組包括以下的基團 以及b)具有結構式(II)的第二種化合物
其中Y和Z相互獨立，分別是O或N；R11和R12相互獨主，分別是H、OH、Cl、Br、OCH3、OCF3、NO2或NH2；n是2至6的整數，包括2和6；且R13，和R14相互獨立，分別位于鄰位或對位并選自一組包括以下的基團 其中將所述第一種和第二種化合物用足以抑制腫瘤生長的劑量同時或在14天內分別給予。
在上述任何一種治療中，作為藥物聯合之一部分的各個化合物優選作為藥用組合物的一部分給予患者，其組合物還包括藥學上可接受的載體。氯丙嗪優選以10至2500毫克的劑量給予，而噴他脒優選以1至1000毫克的劑量給予。優選給藥方式包括靜脈內、肌內、吸入和口服給藥。
本發明之抗增殖藥物聯合可以是藥用制劑盒的一部分。優選將氯丙嗪和噴他脒以各自的劑量在一起或單獨配制。
本領域內人員應當理解在配制時這些化合物的鹽也是有用的。例如，如本說明書所述，噴他脒的羥乙基磺酸鹽在與氯丙嗪聯合時顯示出協同的抗增殖活性。其它噴他脒的鹽包括鉑鹽、二鹽酸鹽及二甲基磺酸鹽(參見，例如，Mongiardo等，Lancet 2108，1989)。類似地，氯丙嗪的鹽包括，例如，鹽酸鹽和馬來酸鹽。
本發明還以鑒別有益于治療腫瘤患者的化合物的方法為特征。該方法所包括的步驟是使(i)噴他脒或氯丙嗪以及(ii)侯選化合物與體外癌細胞接觸，然后檢測其癌細胞是否比(a)與噴他脒或氯丙嗪接觸但不與侯選化合物接觸的癌細胞，以及(b)與侯選化合物接觸但不與氯丙嗪或噴他脒接觸的癌細胞的生長更加緩慢。一種侯選化合物，當與氯丙嗪或噴他脒聯合使用時，減少細胞增殖，但在沒有氯丙嗪或噴他脒存在時沒有作用，這種化合物則是有益于治療腫瘤患者的化合物。
聯合治療可以在進行化療的任何地點提供在家中、醫生診所、醫務所、醫院門診部或醫院。治療通常在醫院開始，以使醫生能夠仔細觀察治療效果并作出任何必要的調整。聯合治療的療程取決于所治療的癌癥種類、患者的年齡和病情、患者疾病的程度和類型以及患者身體對治療的反應情況。藥物可以按不同的間期給予(例如，每天、每周或每月)并且給予各藥物可以單獨決定。可以給予包括間歇期的不連續的循環聯合治療，以使患者身體有機會構建新的健康細胞并恢復其體力。
根據癌癥類型及其發展程度，該聯合治療可以用于治療癌癥減緩癌癥擴散、減緩癌的生長、殺滅或捕獲可能已經從原發腫瘤中擴散到身體其它部位的癌細胞、減輕癌所致的癥狀或預防首發部位的癌癥。聯合治療還可以通過清除導致疼痛和不適的癌細胞而幫助人們生活得更好。
本發明的其它特征和優勢可以顯而易見于下文之詳細描述以及權利要求書中。
本發明詳述我們發現抗精神病藥氯丙嗪與抗原蟲藥噴他脒聯合應用能顯示出明確的抗癌細胞增殖活性。顯示最大的抗癌細胞增殖活性的濃度對正常細胞無毒性。因此，這種藥物聯合法有益于治療癌癥及其它腫瘤。
根據已知的氯丙嗪及其類似物和代謝物之間，以及噴他脒及其類似物和代謝物之間的共同的已知特性，結構上相關的化合物有可能可以替代本發明之抗增殖聯合用藥中的氯丙嗪和/或噴他脒。下文提供涉及各藥物及其類似物和代謝物的資料。
吩噻嗪類在本發明抗增殖藥物聯合療法中有用的吩噻嗪類是具有通式(I)的化合物 其中R2選自一組包括以下的基團R1、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9相互獨立，分別是H、OH、F、OCF3或OCH3；W選自一組包括以下的基團 且R10選自一組包括以下的基團
在優選化合物中，R2為Cl；R1、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9分別為H或F。更優選的R1、R4、R5、R6和R9分別為H。
處方中最常見的吩噻嗪類藥物是氯丙嗪，其具有下列結構 目前可以獲得下列劑型的氯丙嗪片劑、膠囊、栓劑、口服濃縮液和糖漿劑以及注射用制劑。
被認為是氯丙嗪之類似物的吩噻嗪類包括氟非那嗪、甲哌氯丙嗪、甲硫噠嗪和三氟拉嗪。這些藥物中有許多與氯丙嗪一樣具有抗精神病和鎮吐活性。
吩噻嗪被認為是通過干擾大腦的中邊緣葉和延髓化學感受器激發區的中樞多巴胺能通路而呈現其抗精神病和鎮吐作用。與基底神經節中的多巴胺能通路的相互作用導致了錐體外副作用。盡管經常被稱為多巴胺阻斷劑，但是代表這些藥物抗精神病活性的準確的多巴胺能干擾機制尚未確認。氯丙嗪具有很強的α-腎上腺素能阻斷活性，并且能夠導致直立性低血壓。氯丙嗪還具有溫和的抗膽堿能活性，其特征為偶爾的口干、目昏、尿潴留以及便秘。由于對垂體和下丘腦多巴胺受體的阻斷作用，氯丙嗪能增加催乳素分泌。
氯丙嗪易于從胃腸道中吸收。其生物利用度由于顯著的肝臟首過代謝而不穩定。濃縮液可以比片劑具有更高的生物利用度。未發現食物對生物利用度的一致的影響。肌內注射給藥避免了大部分的首過作用，因而達到更高的血漿濃度。其起效通常在肌內注射給藥后15至30分鐘及口服給藥后30至60分鐘。氯丙嗪直腸內給藥所需起效時間通常長于氯丙嗪口服給藥。
氯丙嗪代謝物由于氯丙嗪經過廣泛的代謝轉化而成為可能具有治療活性的大量代謝產物，因此這些代謝產物有可能取代本發明之抗增殖藥物聯合療法中的氯丙嗪。氯丙嗪代謝產生的產物有，例如，N-氧化脫甲基反應生成相應的伯和仲胺，芳氧化生成酚，N-氧化生成N-氧化物，S-氧化生成亞砜或砜，氨丙基側鏈氧化脫氨基反應生成吩噻嗪母核，以及酚羥基基團及叔胺基團的糖醛酸化反應生成葡萄糖醛酸的季銨鹽。
用于本發明之抗增殖藥物聯合的氯丙嗪代謝產物的其它實例中，吩噻嗪的3、7和8位可以分別獨立地被羥基或甲氧基基團取代。
噴他脒噴他脒目前被用于治療肺炎肺囊蟲、杜氏利什曼蟲、布氏錐體蟲、岡比亞椎蟲及羅得西亞錐蟲感染。噴他脒的結構為 其可以被制成注射或吸入制劑。對于注射劑，噴他脒以無熱原的、凍干產品形式包裝。在重新制成溶液后，其通過肌內或靜脈內注射給藥。
羥乙基磺酸噴他脒是一種可溶于水和甘油而不溶于乙醚、丙酮和氯仿的白色、結晶性粉末。其化學命名為4，4’-二脒基-二苯氧基戊烷二(β-羥基乙磺酸鹽)。其分子式為C23H36N4O10S2，分子量為592.68。
噴他脒的作用方式尚不完全清楚。體外動物組織及原生動物oncopelti短膜蟲(Crithidia oncopelti)實驗表明該藥干擾細胞核代謝，對DNA、RNA、磷脂及蛋白質的合成產生抑制作用。
此藥的藥代動力學也所知甚少。在7名每日以4mg/kg噴他脒肌內注射10至12天治療的患者中，血漿濃度在0.3和0.5μg/mL之間。直至停止治療后六至八周，患者持續在尿液中排出含量逐漸減低的噴他脒。
噴他脒的組織分布研究是對小鼠單劑量腹腔注射噴他脒10mg/kg。其濃度在腎臟中最高，其次是在肝臟中。在小鼠中，噴他脒以原藥排泄，主要通過腎臟而部分從糞便排泄。尿液和糞便排泄量的比值(4∶1)在整個實驗階段中恒定。
噴他脒類似物芳族雙脒化合物可以替代本發明之抗增殖藥物聯合療法中的噴他脒。芳族雙脒化合物如普羅帕脒、丁氧苯脒、庚氧苯脒和壬氧苯脒在它們呈現抗病原體或DNA結合特性方面與噴他脒具有相同的性質。其它類似物(例如，司替巴脒及司替巴脒的吲哚類似物、羥茋巴脒、二脒那秦、苯甲脒、4，4’-(五亞甲基二氧基)二-，二鹽酸鹽、氧二苯脒、雙溴丙脒、1，3-雙(4-脒基-2-甲氧基苯氧基)丙烷(DAMP)、紡錘菌素、偏端霉素、氧二苯脒、雙脒苯脲、博來霉素、放線菌素D及柔紅霉素)也顯示出類似于噴他脒的那些特性。當這些化合物與氯丙嗪(或氯丙嗪之類似物或代謝物)聯合給藥時可能具有抗增殖活性。
舉例來說，優選類似物如式(II)所示。
其中Y和Z相互獨立，分別是O或N；R11和R12相互獨立，分別是H、OH、Cl、Br、OCH3、OCF3、NO2或NH2；而n是2至6的整數，包括2和6；且R13和R14相互獨立，分別位于間位或對位，選自一組包括以下的基團 其它類似物包括司替巴脒(G-1)及羥茋巴脒(G-2)以及它們的吲哚類似物(例如，G-3)。
各脒基部分可以被上述D-2、D-3、D-4或D-5所示基團之一所替代。如氯丙嗪和噴他脒的情形一樣，司替巴脒及其相關化合物的鹽在本發明的方法中也是有用的。優選的鹽包括，例如，二鹽酸鹽和甲磺酸鹽。
噴他脒代謝物噴他脒代謝物也有用于本發明之抗增殖藥物聯合療法中。噴他脒在體內被迅速代謝成至少七種主要代謝物。這些代謝物中有些與噴他脒具有一項或一項以上的相同活性。噴他脒的某些代謝物在與氯丙嗪或其類似物聯合用藥時可能顯示出抗增殖活性。
七種噴他脒代謝物表示如下
治療本發明之化合物聯合用藥有益于腫瘤治療。聯合治療可以單獨或與其它治療(例如，手術、放療、化學療法、生物療法)結合進行。此外，具有較高的腫瘤發病危險的人(例如，具有遺傳傾向者和先前患有腫瘤者)可以接受預防性治療以抑制或減緩腫瘤發生。
各組分的給藥劑量和頻次可以分別控制。例如，一種化合物可能每天口服給藥三次，期間第二種藥物則可能每天肌內給藥一次。還可將這些化合物一起制成制劑，使得兩種組分一次給予。下文敘述劑型及劑量。
藥用組合物制劑可以用任何合適的方式，給予聯合用藥的每個化合物而使得與其它化合物聯合的該化合物在到達靶區域時產生特定的抗腫瘤作用的濃度。該化合物可以以任何合適的劑量存在于任何合適的載體物質中，其通常占組合物總重量的1-95％。可以以適合于口服、腸道外(例如，靜脈內、肌肉內)、直腸、皮內、鼻腔、陰道、吸入、皮膚(貼片)或眼部給藥途徑的劑型，提供該組合物。由此，其組合物的劑型可以是例如，片劑、膠囊劑、丸劑、粉末劑、顆粒劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、包括水凝膠的凝膠劑、糊劑、軟膏劑、乳膏劑、膏藥、浸液、釋藥裝置、栓劑、灌腸劑、注射劑、植入劑、噴霧劑或氣霧劑。藥用組合物可按照常規制藥準則配制(見，例如，RemingtonTheScience and Practice of Pharmacy，A.R.Gennaro主編(第19版)，1995，Mack Publishing Company，Easton，P.A.及Encyclopedia ofPharmaceutical Technology，J Swarbrick和J.C.Boylan主編，1988-1999，Marcel Dekker，New York)。
本發明的藥用組合物可以被配制成給藥時幾乎即刻釋放或在給藥后的任何預定時間或時間段釋放活性化合物的劑型。后一種類型的組合物被統稱為控釋制劑，其包括(i)在延長的時間段內建立基本恒定的體內藥物濃度的制劑；(ii)在預定的滯后時間點之后確立延長的時間段內的基本恒定的體內藥物濃度的制劑；(iii)通過保持體內相對恒定、有效的藥物水平以保持在預定時間段內的藥物作用，同時使所伴有的與活性藥物血漿水平波動(鋸齒形動力學圖形)相關的副作用最小化的制劑；(iv)通過，例如，將控釋制劑放置于特定的病變組織或器官附近或之中而使藥物作用定位的制劑；以及(v)通過采用載體或化學衍生物而將藥物釋放于特定類型靶細胞中的藥物靶向作用制劑。
以化合物的控釋劑型給藥的特別優選的情況是化合物，在單用或聯用時，具有以下特點的情況，(i)狹窄的治療指數(即，產生副作用或毒性作用的血漿濃度與產生治療作用的血漿濃度之間的差異很小；通常，治療指數，TI，被定義為半數致死量(LD50)與半數有效量(ED50)的比值)；(ii)窄短的胃腸道吸收部位；或(iii)很短的生物半衰期而需要每天多次給藥以保持治療水平的血漿水平。
可以運用多種方法的任何一種以獲得控釋制劑，在該制劑中所討論的化合物的釋放速率超過其代謝速率。在一個實例中，通過適當選擇各種制劑參數和成分而獲得控制性釋放，其包括，例如，各種類型的控釋組合物及包衣。因此，可將該藥物與合適的賦形劑配制成藥用組合物，在其對器官給藥時，以控制性方式釋放活性物質。實例包括單一或多單位劑量的片劑或膠囊組合物、油溶液、混懸劑、乳劑、微囊、微球、納米粒、貼劑及脂質體。
口服使用的固體劑型口服用藥的制劑包括含有與藥學上可接受的無毒賦形劑混合的活性成分的片劑。這些賦形劑可以是，例如，惰性稀釋劑或填充劑(例如，蔗糖、山梨糖醇、糖、甘露醇、微晶纖維素、淀粉(包括馬鈴薯淀粉)、碳酸鈣、氯化鈉、乳糖、磷酸鈣、硫酸鈣或磷酸鈉)；制粒或崩解劑(例如，纖維素衍生物，包括微晶纖維素、淀粉(如馬鈴薯淀粉)、交聯羧甲基纖維素鈉、藻酸鹽、或藻酸)；粘合劑(例如，蔗糖、葡萄糖、山梨糖醇、阿拉伯膠、藻酸、藻酸鈉、明膠、淀粉、預凝膠化淀粉、微晶纖維素、硅酸鎂鋁、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基纖維素、乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇)；以及潤滑劑、助流劑和抗粘劑(例如，硬脂酸鎂、硬脂酸鋅、硬脂酸、二氧化硅、氫化植物油或滑石粉)。其它藥學上可接受的賦形劑可以是著色劑、矯味劑、塑性劑、濕潤劑、緩沖劑等等。
片劑可以無包衣或者用已知技術將它們包衣，任選在胃腸道內延緩崩解和吸收并由此獲得更長時間段內的持續作用。可采用包衣以使以預定方式(例如，以獲得控釋制劑為目的)釋放活性藥物或可采用包衣以使直到通過胃部之后才釋放藥物(腸溶包衣)。包衣可以是糖包衣，薄膜包衣(例如，基于羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、甲基羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、丙烯酸酯共聚物、聚乙二醇和/或聚乙烯吡咯烷酮)，或腸溶包衣(例如，基于異丁烯酸共聚物、鄰苯二甲酸醋酸纖維素、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素、醋酸琥珀酸羥丙基甲基纖維素、聚醋酸鄰苯二甲酸乙烯酯、蟲膠和/或乙基纖維素)。此外，可以采用延時材料如，舉例來說，單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
固體片劑組合物可以包括適合預防組合物之有害化學變化的包衣，(例如，活性藥物釋放之前的化學降解)。可以用類似于上述Encyclopedia of Pharmaceutical Technology中所描述的方法對固體劑型進行包衣。
兩種藥物可以混合于片劑中，或者可以分開。在一種實例中，第一種藥物包含在片劑內部，而第二種藥物在其外部，使得大部分的第二種藥物的釋放先于第一種藥物的釋放。
用于口服的制劑也可為咀嚼片或硬明膠膠囊，其中將活性成分與惰性固體稀釋劑混合(例如，馬鈴薯淀粉、乳糖、微晶纖維素、碳酸鈣、磷酸鈣或白陶土)或軟明膠膠囊，其中將活性成分與水或油性介質混合，例如，花生油、液體石蠟或橄欖油。粉末劑及顆粒劑可以采用上述片劑及膠囊項下的組分，按照常規方法，采用，例如，混合機、流化床設備或噴霧干燥設備制備。
控釋口服劑型可將用于口服的控釋組合物例如，制備成通過控制活性藥物的溶解和/或擴散而釋放活性藥物的組合物。
控制釋溶解或擴散的釋放可以通過將化合物的片劑、膠囊、丸劑或顆粒制劑進行適當包衣實現，或者通過將所涉及的化合物與合適的基質混合實現。
控釋包衣可以包括一種或一種以上的上述包衣材料和/或，例如，蟲膠、蜂蠟、glycowax、蓖麻蠟、巴西棕櫚蠟、十八烷醇、單硬脂酸甘油酯、雙硬脂酸甘油酯、棕櫚酰硬脂酸甘油酯、乙基纖維素、丙烯酸樹脂、dl-聚合乳酸、乙酸丁酸纖維素、聚氯乙烯、聚醋酸乙烯酯、乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯、聚甲基丙烯酸酯、異丁烯酸甲酯、2-羥基異丁烯酸酯、異丁烯酸水凝膠、1，3-丁二醇、乙二醇異丁烯酸酯和/或聚乙二醇。在控釋基質制劑中，所述基質材料也可以包括，例如，水合甲基纖維素、巴西棕櫚蠟和十八烷醇、卡巴浦爾934、聚硅酮、三硬脂酸甘油酯、丙烯酸甲酯-異丁烯酸甲酯、聚氯乙烯、聚乙烯和/或鹵代碳氟化合物。
含有一種或一種以上的要求聯合用藥的化合物的控釋組合物也可以是漂浮片劑或膠囊劑型(即，一種片劑或膠囊劑，其在口服給藥時，在一定的時間段內漂浮于胃內容物之上)。化合物的漂浮片劑制劑可以通過將藥物與賦形劑及20％-75％w/w的水膠體，例如羥乙基纖維素、羥丙基纖維素及羥丙基甲基纖維素，混合制粒制備。然后可以將所得顆粒壓制成片劑。該片劑在與胃液接觸時，環其表面形成基本不透水的凝膠屏障。此凝膠屏障參與維持較之更小的密度，因而使得片劑保持漂浮于胃液中。
口服給藥的液體適合于通過加水制備的水溶性混懸液的粉末劑、可分散性粉末劑或顆粒劑是常用的口服給藥劑型。混懸液制劑是將所述活性成分與分散劑或濕潤劑、懸浮劑或一種或一種以上的防腐劑混合。合適的分散劑或濕潤劑有，例如，天然產物磷脂(例如，卵磷脂或環氧乙烷與脂肪酸、長鏈脂肪醇或脂肪酸的部分酯化產物的縮合物)和己糖醇或脫水己糖醇(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯、聚氧乙烯山梨聚糖單油酸酯等等)。合適的懸浮劑有，例如，羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、藻酸鈉等等。
腸道外組合物所述藥用組合物還可以通過注射、滴注或植入(靜脈內、肌內、皮下等)劑型、制劑或通過含有常規、無毒的藥學上可接受的載體或輔料的合適的給藥裝置或植入劑而進行腸道外給藥。此組合物的制劑與制備為藥物制劑領域內技術人員所熟知。具體的制劑可以見于上述Remington；The Science and Practise of Pharmacy。
腸道外使用的組合物可以以單位劑量形式(例如，單劑量安瓿)存在，或者存在于含有幾個劑量的小瓶中，并且可以加入合適防腐劑(參見下文)。這些組合物的劑型可以是溶液、混懸液、乳劑、輸液裝置或植入給藥裝置，或者其可以作為在使用前以水或其它合適的溶媒重新配制的干粉劑。除活性藥物外，組合物可以含有合適的腸道外可接受的載體和/或賦形劑。可將這些活性成分配制成控釋微球、微囊、納米顆粒、脂質體等等。此外，這些組合物可以包括懸浮劑、助溶劑、穩定劑、pH調節劑和/或分散劑。
如上文所述，本發明的藥用組合物可以是適合無菌注射的劑型。為制備這樣的組合物，將合適的活性藥物溶解或懸浮于一種腸道外可接受的液體溶媒中。在這些可接受的溶媒和溶劑中，可以采用的是水，通過加入適量鹽酸、氫氧化鈉或合適的緩沖液而調節至合適的pH值的水，1，3-丁二醇，林格氏溶液及等滲氯化鈉溶液。這些液體制劑還可以含有一種或一種以上的防腐劑(例如，對羥基苯甲酸的甲酯、乙酯或正丙酯)。在其化合物之一僅微溶或少量溶解于水的情況下，可以添加增溶劑或助溶劑，或者其溶劑可以含有10-60％w/w的丙二醇等。
腸道外控釋組合物腸道外控釋組合物可以是水溶性混懸液、微球、微囊、磁化微球、油性溶液、油性混懸液或乳化液。或者，可將所述活性藥物結合到生物相容性載體、脂質體、納米顆粒、植入劑或輸液裝置中。
用于制備微球和/或微囊的材料有，例如，可生物降解/可生物溶蝕的聚合物如polyglactin、聚(氰基丙烯酸酯異丁酯)、聚(2-羥乙基-L-谷氨酰胺)以及聚(乳酸)。
制備腸道外控釋制劑時可以采用的可生物降解的載體有碳氫化合物(例如，右旋糖酐)、蛋白質(例如，白蛋白)、脂蛋白或抗體。
用于植入劑的材料可以是非生物降解的(例如，聚合二甲基硅氧烷)或可生物降解的(例如，聚(己內酯)、聚(乳酸)、聚(羥基乙酸)或聚(原酸酯))。
直腸組合物對于直腸內應用，組合物合適的劑型包括栓劑(乳化或混懸型)及直腸用明膠膠囊(溶液或懸浮液)。在典型的栓劑制劑中，其活性藥物結合于合適的藥學上可接受的栓劑基質如可可脂、酯化脂肪酸、甘油酸化明膠以及多種水溶性或分散性基質如聚乙二醇和聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯。可以結合多種添加劑、促進劑或表面活性劑。
吸入組合物對于吸入給藥，典型劑型包括鼻腔噴霧劑和氣霧劑。在典型的鼻腔制劑中，活性成分被溶解或擴散于合適的溶媒中。其藥學上可接受的溶媒及賦形劑(以及存在于該組合物中的其它藥學上可接受的物質如稀釋劑、促進劑、矯味劑及防腐劑)以藥物制劑領域內技術人員所理解的方式，根據常規制藥方法選擇。
經皮及局部給藥組合物所述藥用組合物還可以以包括常規無毒的藥學上可接受的載體及賦形劑(包括微球和脂質體)的劑型或制劑形式對皮膚局部用藥，以供經皮吸收。這些制劑包括乳膏、軟膏、洗劑、擦劑、凝膠、水凝膠、溶液、混懸劑、膏藥、噴霧劑、糊劑、硬膏劑以及其它類型的透皮釋藥系統。所述藥學上可接受的載體或賦形劑可以包括乳化劑、抗氧劑、緩沖劑、防腐劑、濕潤劑、透皮促進劑、螯合劑、凝膠形成劑、軟膏基質、芳香劑和皮膚保護劑。
乳化劑的實例有天然樹膠(例如，阿拉伯膠或黃蓍樹膠)及天然磷脂(例如，大豆卵磷脂和去水山梨糖醇單油酸酯衍生物)。抗氧劑的實例有丁基化羥基茴香醚(BHA)、抗壞血酸及其衍生物、生育酚及其衍生物、丁基化羥基茴香醚和半胱氨酸。防腐劑的實例有對羥基苯甲酸酯類，如對羥基苯甲酸甲酯或丙酯以及苯扎氯銨。濕潤劑的實例有甘油、丙二醇、山梨糖醇和尿素。透皮促進劑的實例有丙二醇、DMSO、三乙醇胺、N，N-二甲基乙酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、2-吡咯烷酮及其衍生物、四氫糠醇、及Azone.RTM。螯合劑的實例有EDTA鈉、檸檬酸及磷酸。凝膠形成劑的實例有卡巴浦爾、纖維素衍生物、皂土、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮。軟膏基質的實例有蜂蠟、石蠟、鯨蠟素、植物油、脫水山梨糖醇脂肪酸酯(司盤)、聚乙二醇以及脫水山梨糖醇脂肪酸酯與環氧乙烷之間的縮合物(例如，聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯(吐溫))。
上述皮膚局部給藥之藥用組合物還可以與所治療的身體部位之上或附近的局部給藥相聯系。可將這些組合物直接應用于或引進到相關的身體入口(例如，直腸、尿道、陰道或口腔之入口)。應可通過特定的釋藥裝置途徑如包扎物或替換膏藥、藥墊、紗布、繃帶或其它形式的合適的彈性材料，應用這些組合物。
控釋經皮及局部給藥組合物提供控制藥物釋放及透皮滲透速率的方法有數種，包括膜調制系統、粘附擴散控制系統、基質分散型系統及微型儲庫系統。控釋經皮和/或局部給藥組合物可以采用上述方法之合適的混合物獲得。
在膜調制系統中，存放活性藥物的儲庫完全包封于由藥物不能透過的薄層，如金屬塑壓薄層，以及控速聚合物膜如微孔或無孔聚合物膜(例如，乙烯乙酸乙烯酯共聚物)所制成的窄淺隔層中。其活性化合物僅允許通過控速聚合物膜釋放。在藥物儲庫中，活性藥物可以分散于固體聚合物基質中或混懸于粘性液體介質如聚硅酮流質中。在該聚合物膜外表面，應用一種粘附性聚合物薄層以實現透皮系統與皮膚表面的緊密接觸。所述粘附性聚合物優選是與活性藥物相容的低過敏性聚合物。
在粘附擴散控制系統中，活性藥物儲庫的形成是通過將活性藥物直接分散于粘附性聚合物中，然后將含有活性藥物的粘附物涂布到藥物實際不能透過的金屬塑壓的背襯薄層上，以形成一層薄的藥物儲庫層來進行。基質分散型系統的特征是活性藥物儲庫的形成是通過將活性藥物徹底均勻地分布于親水性或親脂性的聚合物基質中，然后將含有藥物的聚合物模制成為具有非常清晰的表面與厚度的圓片。將粘附性聚合物沿圓片四周涂布以形成粘附條帶。
在微型儲庫系統中，活性藥物儲庫的形成首先是將固體藥物混懸于水溶性聚合物的水溶液中，然后將藥物混懸液分散于親脂性聚合物中以形成大量的儲藥微球進行。
劑量所要求的藥物聯合的各化合物的劑量取決于幾種因素，包括給藥方法、所治療的疾病、疾病的嚴重性、是治療還是預防疾病以及被治療的患者的年齡、體重和健康。
這些化合物的優選給藥劑量約為每天0.1-30mg/kg體重，更優選的劑量約為每天0.5-15mg/kg體重。如上文所述，所討論的化合物可以以片劑、膠囊劑、酏劑或糖漿劑形式口服給藥，或以栓劑形式直腸給藥。進行化合物的腸道外給藥的合適劑型是生理鹽水溶液或將化合物結合于脂質體中的形式。當化合物自身溶解性不足以溶解時，可以應用助溶劑如乙醇。為達到說明之目的，下文說明氯丙嗪和噴他脒的劑量。本領域內的技術人員應當理解如果氯丙嗪或噴他脒被第二種藥物替代，則其確切劑量可以通過檢測該化合物在細胞增殖試驗中的藥效以及它在人體中的毒性而確定。
口服給藥對于采用口服進行全身給藥的氯丙嗪，其劑量通常是在一天至一年、甚至是患者之一生中，每次給藥劑量約為1mg至1000mg(優選約5mg至500mg，且更優選約10mg至300mg)，每天給藥1至10次(優選每天給藥1至5次)，因為本發明之聯合用藥的作用主要為細胞抑制劑而不是細胞毒性劑，并且所表現的毒性低，慢性、長期給藥可能適合于許多病例。必要時，最高劑量可為每天8g。
對于噴他脒，其劑量通常是在一天至一年，與氯丙嗪類似，甚至是患者一生中，每次給予約0.1mg至300mg的劑量(優選約1mg至100mg)，每天給藥1至4次。給藥也可以按周期給予，因而有一段噴他脒不給藥的期間。這段期間可以大約是，例如，一天、一周、一個月、或一年或更長。
直腸給藥對于采用直腸給藥用于預防疾病的組合物，化合物劑量通常優選有一定程度的增加。因此，氯丙嗪的劑量通常是每次給藥劑量約為5-2000mg(優選10mg至1000mg，更優選25mg至500mg)，每天給藥1至4次。療程與所述口服給藥相同。噴他脒的劑量與所述的噴他脒口服給藥劑量一致。
腸道外給藥對于靜脈內或肌內給藥的氯丙嗪，推薦劑量約為每天0.1mg/kg至100mg/kg體重，優選劑量約1mg/kg至約25mg/kg，而最優選劑量約1mg/kg至約10mg/kg。噴他脒給藥劑量約為0.1mg/kg至約20mg/kg，優選劑量為約0.5mg/kg至約10mg/kg，而更優選劑量為約1mg/kg至約4mg/kg。
各化合物通常每天給藥直至約6-12個月或更長。一個化合物給藥可能需要1至3個小時的時間，這段時間可以延長至持續24小時或更長。如口服給藥所述，可以存在約一天至一年或更長的時段，期間不予給服至少一種藥物。
吸入給藥對于吸入給藥，氯丙嗪約以每天1mg至1000mg的劑量給藥，且優選每天約10mg至500mg的劑量。對于噴他脒，以每天約10mg至1000mg的劑量，且優選以約30mg至600mg的劑量給藥。
經皮給藥對于任一化合物的局部給藥，通常優選以約1mg至約5g的劑量，每天1至10次給藥一周至12個月。
下列實施例是對本發明的說明。它們不以任何方式對本發明構成任何限制。
實施例1制備氯丙嗪/羥乙磺酸噴他脒稀釋矩陣用二甲基亞砜(DMSO)配制濃度分別為的11.25mM和6.74mM氯丙嗪和羥乙磺酸噴他脒(Sigma目錄號分別為C8138和P0547)的儲存液。用含有10％胎牛血清(FBS)、200mM L-谷氨酰胺及1％抗生素/抗菌素溶液的Dulbecco’s改進的Eagle培養基(DMEM)(Gibcol1995-040)配制各化合物的8倍濃度儲存液(128μM)。用DMEM從該溶液中配制2倍稀釋液系列。該系列提供從64μM到240nM范圍內的9個濃度及一個0M濃度。制備該化合物的混合物矩陣是采用16通道移液器(Finnpipette)，以氯丙嗪的系列稀釋液按列填充384-孔板(第一列32μM；第二列16μM；第三列8μM；第四列4μM；第五列2μM；第六列1μM；第七列500nM；第八列250nM；第九列125nM；及第十列無化合物)，并按行填充噴他脒系列稀釋液(第一列32μM；第二列16μM；第三列8μM；第四列4μM；第五列2μM；第六列1μM；第七列500nM；第八列250nM；第九列125nM；及第十列無化合物)。此化合物混合板提供將被轉移到檢測板的4倍濃度的各化合物。因此，該稀釋矩陣含有100種不同的點--81個孔存在不同量的氯丙嗪和噴他脒，以及每個化合物各有10個系列稀釋點(2-倍)。
實施例2抗增殖活性檢測采用A549溴代脫氧尿苷(BrdU)細胞印跡法檢測所述化合物稀釋矩陣。采用多頭滴管(Labsystems)，將45微升含有A549肺腺癌細胞(ATCC#CCL-185)的混懸液植入無菌處理的白色不透明聚苯乙烯384孔板(NalgeNunc#164610)中，使其密度為每孔3000個細胞。將15微升的混合矩陣中的4倍濃度的化合物加入到含有細胞的培養板的每個孔中。采用16通道移液器(Finnpipette)轉移混合矩陣中的化合物。此外，在每個培養板上紫杉醇(終濃度4.6μM)、鬼臼毒素(9.6μM)和阿的平(8.5μM)對照孔。各實驗均以3塊平行板進行。
37℃下孵育48小時后，每孔以10μM濃度的加入BrdU。16小時后，吸出培養基，并在室溫下加入70％乙醇和磷酸緩沖液(PBS)，將細胞固定1小時。吸出固定液，每孔加入含吐溫20(聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯)的2N HCl，將培養板在室溫下孵育20分鐘。以2N NaOH中和HCl，將細胞用Hank氏平衡鹽溶液(HBSS)洗滌兩遍，再用含0.5％牛血清白蛋白(BSA)和0.1％吐溫20的PBS洗滌一遍。棄去洗滌溶液，將小鼠抗-BrdU初級抗體(PharMingen#555627)按1∶1000稀釋于含BSA、吐溫20以及1∶2000稀釋的二級抗體(Amersham # NA931)的PBS中。該二級抗體識別小鼠抗體并與山葵過氧化物酶(HRP)結合。孵育1小時后，移去抗體溶液，將細胞用PBS洗滌一遍。PBS洗滌后，向每個孔中加入HRP底物(其含有魯米諾、過氧化氫以及促進劑如對碘苯酚)。采用LJL分析儀檢測培養板。所有抽吸以及以PBS及HBSS洗滌均采用TECAN Power Washer 384進行。各個孔的發光量代表在這個孔中發生的DNA合成量。光線減弱表明該化合物的抗增殖活性。
將氯丙嗪/噴他脒稀釋矩陣中各個位置的熒光除以僅用DMSO溶媒處理的A549細胞的熒光值，得到氯丙嗪/噴他脒稀釋矩陣中各個位置的抗增殖比值。也計算紫杉醇、鬼臼毒素及阿的平的抗增殖比值，并用于比較。
表-抗增殖比值噴他脒濃度(μM)
在4.0μM下，單用羥乙磺酸噴他脒產生的抗增殖比值為3.9，在濃度加倍到8.0μM時，該比值上升到4.9。四微摩爾的氯丙嗪產生2.9的比值，并且該比值在濃度加倍到8.0μM時沒有進一步增加。當4.0μM的噴他脒與4.0μM氯丙嗪聯合進行實驗(兩種化合物總量為8.0μM)時，抗增殖比值達到了9.7。
在另一項分析中，單一化合物的強度受到另一個化合物存在的影響。噴他脒單用時所達到的最大抗增殖比值為4.9(在8.0μM下)，而這個值可見于在1μM噴他脒與低到125nM的氯丙嗪聯合應用時，使達到此作用所需的兩種藥物總量顯著減少。
我們證實氯丙嗪與羥乙磺酸噴他脒聯合使用可阻止A549細胞生長而不是殺死它們。將A549細胞植入6-孔板中，并以各4μM的藥物處理72小時。更換培養基，將細胞培養7天(以一種培養基更換)，此時對細胞計數并測定活性。未處理細胞在7天后已經生長至融合，而氯丙嗪/羥乙磺酸噴他脒處理的細胞沒有生長，但卻保持接近其植入時的密度。此外，氯丙嗪/羥乙磺酸噴他脒處理的細胞中的95％仍然有活性，僅比未處理細胞有少量減少。
這種聯合用藥對于正常的肺成纖維細胞(MRC9)活性有很小或沒有影響。下文敘述的對照實驗證明了這一點。將MRC9細胞植入384孔板以融合。加入氯丙嗪/羥乙磺酸噴他脒矩陣之稀釋液以獲得一系列交疊的兩倍稀釋的12×12矩陣，各化合物的最大劑量為16μM。將細胞與化合物孵育48小時，其后將6μL的Alamar Blue活性染料加入到各個孔中。將細胞與染料再孵育4小時。被還原的染料的數量采用Analyst AD通過熒光測定。無熒光(氧化的)形式的染料被活細胞還原成熒光形式。因此，沒加化合物的孔與加入了化合物的孔之間的熒光比值與化合物導致的細胞死亡量成比例。在這項實驗中，直至各藥物濃度達到16μM時，仍沒有毒性作用。而在低濃度時即發現其抗增殖作用。
采用其它癌細胞系可以類似地證明用A549細胞證實的抗增殖作用，例如MCF7乳腺癌、PA-1卵巢畸胎癌、HT29結腸直腸腺癌、H1299大細胞癌、U-2OS骨癌、U-373MG成膠質細胞瘤、Hep-3B肝細胞癌、BT-549乳腺癌、T-24膀胱癌、C-33A宮頸癌、HT-3轉移性宮頸癌、SiHa宮頸鱗狀細胞癌、CaSKi表皮樣宮頸癌、NCI-H292粘液表皮樣肺癌、NCI-2030、非小細胞肺癌、HeLa、宮頸上皮腺癌、KB口腔上皮腺癌、HT1080上皮纖維肉瘤、Saos-2上皮性骨癌、PC3上皮性前列腺癌、SW480結腸直腸癌、CCL-228及MS-751表皮樣宮頸癌細胞系。可以通過采用如NHLF肺成纖維細胞、NHDF表皮成纖維細胞、HMEC乳腺上皮細胞、PrEC前列腺上皮細胞、HRE腎上皮細胞、NHBE支氣管上皮細胞、CoSmC結腸平滑肌細胞、CoEC結腸內皮細胞、NHEK表皮角質細胞以及骨髓細胞，試驗其特異性。
其它實施方案上述說明書提及的全部文獻和專利均結合到本說明書中作參考。本發明所述方法和系統在不脫離本發明之范圍和實質下的多種調整和變化對于本領域內的技術人員是顯而易見的。盡管本發明已經描述了相關的具體的優選實施方案，但應當理解本發明之權利要求不應當受到這些特定實施方案的限制。事實上，為分子生物學或相關領域內的技術人員所顯而易見的對進行本發明的所述方法的調整均在本發明的范圍之內。
權利要求
1.一種治療腫瘤患者的方法，所述方法包括將足以抑制所述腫瘤生長的量的氯丙嗪和噴他脒同時或在14天內分別給予所述患者。
2.權利要求1的方法，其中氯丙嗪和噴他脒在十天內分別給予。
3.權利要求2的方法，其中氯丙嗪和噴他脒在五天內分別給予。
4.權利要求3的方法，其中氯丙嗪和噴他脒在二十四小時內分別給予。
5.權利要求1的方法，其中所述腫瘤是癌癥。
6.權利要求5的方法，其中所述癌癥是肺癌。
7.權利要求6的方法，其中所述肺癌選自鱗狀細胞癌、腺癌和大細胞癌。
8.權利要求5的方法，其中所述癌癥選自腦癌、乳癌、宮頸癌、結腸癌、胃癌、腎癌、白血病、肝癌、淋巴癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、直腸癌、肉瘤、皮膚癌、睪丸癌和子宮癌。
9.權利要求1的方法，其中氯丙嗪和噴他脒通過靜脈內、肌內、吸入、直腸或口服給予所述患者。
10.一種治療腫瘤患者的方法，所述方法包括給予所述患者(a)第一種化合物，其選自丙氯拉嗪、奮乃靜、甲哌啶嗪、左美丙嗪、乙酰丙嗪、乙酰哌非納嗪、培拉嗪、丙酰異丙嗪、putaperazine、硫乙哌丙嗪、甲氧丙嗪、chlorfenethazine、氰甲丙嗪、奮乃靜庚酸脂、三氟拉嗪、硫利達嗪和norchlorpromazine；和(b)第二種化合物，其選自普羅帕脒、丁氧苯脒、庚氧苯脒、壬氧苯脒、司替巴脒、羥茋巴脒、二脒那秦、苯甲脒、4，4’-(五亞甲基二氧基)二-，二鹽酸鹽、氧二苯脒、雙溴丙脒、1，3-雙(4-脒基-2-甲氧基苯氧基)丙烷、紡錘菌素、偏端霉素、氧二苯脒，雙脒苯脲、博來霉素、放線菌素D和柔紅霉素；其中所述第一種和第二種化合物同時或在14天內分別給予，其中所述第一種和第二種化合物以足以抑制所述腫瘤生長的量給予。
11.一種治療腫瘤患者的方法，所述方法包括給予所述患者a)具有式(I)的第一種化合物 其中R2選自一組包括以下的基團 R10選自包括以下的基團 R1、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9的每一個獨立為H、OH、F、OCF3或OCH3；且W是選自包括以下的基團 以及b)具有式(II)的第二種化合物 其中Y和Z相互獨立，各自為O或N；R11，和R12相互獨立，各自為H、Cl、Br、OH、OCH3、OCF3、NO2及NH2；n是2至6的整數，包括2和6；且R13和R14各自獨立選自包括以下的基團 其中所述第一種和第二種化合物以足以抑制所述腫瘤生長的量同時或在14天內分別給予。
12.一種治療腫瘤患者的方法，所述方法包括給予所述患者一種藥用組合物，它包括(i)共同降低所述腫瘤細胞增殖的劑量的氯丙嗪和噴他脒，及(ii)藥學上可接受的載體。
13.權利要求12的方法，其中氯丙嗪以10至2500毫克的劑量給予和噴他脒以1至1000毫克的劑量給予。
14.權利要求12的方法，其中所述組合物通過靜脈內、肌內、吸入、直腸或口服給予所述患者。
15.一種包括氯丙嗪、噴他脒以及藥學上可接受的載體的藥用組合物，其中氯丙嗪、噴他脒的存在量是，當一起給予腫瘤患者時，能減少所述腫瘤的細胞增殖的量。
16.權利要求15的組合物，其中氯丙嗪的劑量為10至2500毫克，而噴他脒的劑量為1至1000毫克。
17.權利要求15的組合物，其中所述組合物被配制成通過靜脈內、肌內、直腸吸入或口服給予患者的制劑。
18.一種包括氯丙嗪和噴他脒的藥用制劑盒。
19.權利要求18的藥用制劑盒，其中氯丙嗪和噴他脒以各自的劑量分別配制。
20.權利要求18的藥用制劑盒，其中氯丙嗪和噴他脒以各自的劑量在一起配制。
全文摘要
本發明以治療癌癥或其它腫瘤患者的方法為特征，其分別以足以抑制腫瘤生長的劑量同時或在14天內分別對患者給予(i)氯丙嗪或其代謝物或類似物；以及(ii)噴他脒或其代謝物或類似物。
文檔編號A61K31/54GK1484525SQ01821723
公開日2004年3月24日 申請日期2001年10月30日 優先權日2000年11月6日
發明者A·波里西, C·凱斯, M·A·福利, B·R·斯托克維爾, A 波里西, 斯托克維爾, 福利 申請人:康賓納特克斯公司