用于治療腫瘤的免疫治療組合的制作方法

專利名稱：用于治療腫瘤的免疫治療組合的制作方法
技術領域：
本發明涉及免疫學，特別是癌癥免疫治療；并特別提供了誘導低生長速度和/或去除腫瘤細胞的免疫治療組合及治療方法。
現有技術EGF受體(EGF-R)及其配體系統構成了一個分子復合體，它們的相互作用通過一種特定方式調節細胞生長，并且其在上皮細胞來源的腫瘤的失控生長中的影響已經被證實。因為高合成率和/或受體突變，生長因子過度產生，造成腫瘤發生過程中EGF-R活化的旁分泌和自分泌控制失調。
EGF-R是一種有1186個氨基酸、分子量170kD的跨膜糖蛋白，它在正常組織中廣泛表達。它在胚胎發生發育的多個階段都有參與。
EGF-R的特異性配體EGF或TGFα的結合誘導了受體二聚作用，以及與ErbB家族的其它成員如HER-2的異二聚作用(Cohen BD等(1996)J Biol Chem 2717620-7629)。配體與受體的結合釋放一連串的胞內信號(Ullrich TO和Schlessinger J(1990)Cell 61203-212)驅使細胞生長和分化。受體的過量表達發生于某些類型的癌癥中，主要是上皮來源的，這已經成為癌癥免疫治療的目標。對于乳腺、膀胱、卵巢、子宮、結腸、肺、腦、前列腺以及頭頸部腫瘤就是這種情況。已證實EGF-R表達在乳腺癌中預示著不良預后(Pérez R等(1984)乳腺癌及治療(Breast Cancer and Treatment)4189-193)。盡管EGF-R及其配體在腫瘤生長中的作用還不清楚，有人提出腫瘤細胞中的EGF-R表達誘導了一種自分泌刺激機制，導致那些細胞的失控增殖(Schlessinger J等(1983)Crit Rev Biochem 14(2)93-111)。
這個系統的主要配體是表皮生長因子(EGF)和轉化生長因子α型(TGFα)。還有其它配體屬于EGF超家族，比如雙調蛋白(AR)、crypto-1(CR-1)、肝素生長因子、β動物纖維素、表皮調節素，及其它。
EGF是一種53個氨基酸的多肽，分子量6045Da，其對上皮來源的細胞可促有絲分裂。它的作用主要是通過它與EGF-R的結合而進行旁分泌。
TGFα是一種50個氨基酸的多肽，能夠與EGF競爭結合EGF-R。抗EGF抗體不能識別TGFα(Todaro G J等(1976)，Nature 26426-31)，說明這兩種生長因子是兩種免疫學不同的實體。
在有該受體高度表達的腫瘤中，EGFR-配體系統已經成為應用天然形式的抗EGF-R單克隆抗體(Mab)，聯合藥物、毒素或放射性同位素進行被動免疫治療(PI)的目標(Vollmar AM等(1987)J CellPhysiol 131418-425)。通過它們抑制EGF與其受體結合的能力選擇這些抗體(中和抗體)。幾項對Mab的臨床試驗正在進行，并且一些已經顯示了有希望的結果，比如Mab C225在乳腺、胰腺和腎癌中的II期臨床試驗，以及在頭頸部癌癥中的III期臨床試驗(Mendelsohn，J等(1999)American Society of Clinical Oncology Meeting)。其它顯示了良好結果的II期臨床試驗已經實施，在肺腫瘤中使用MabIOR-R3(Crombet T等(2000)癌癥生物治療和生物藥劑(CancerBiotherapy and Biopharmaceutical)，手稿已被接受待出版)。
使用特異性抗EGF-R的IOR-R3 Mab(EP586002B1)的被動免疫治療，證實了IOR-R3與該受體的特異性結合抑制EGF/EGF-R的結合，繼而抑制EGFR的自身磷酸化。而后，使用IOR-R3的被動免疫治療抑制了裸鼠中人類腫瘤細胞的生長，并且在一些臨床試驗患者中減緩了腫瘤的生長速度。該系統也成為癌癥特異性主動免疫治療的目標。一個例子是使用一種由EGF-R的主要配體之一EGF偶聯至載體蛋白而組成的疫苗(US 5,894,018)。該疫苗能夠誘導抗自身EGF的特異性抗體反應，抑制EGF/EGF-R結合，從而阻斷由該結合誘導的增殖機制。臨床前期研究顯示使用偶聯至載體蛋白的自身EGF免疫并施用有用的佐劑，使移植了Ehrlich腹水瘤(EAT)細胞的小鼠生存增加(González G等(1996)，Vaccine Research 5(4)233-243；González G等(1997)，Vaccine Research 6(2)91-100)。
對含有人類重組EGF的疫苗的I期臨床試驗結果已有報告，證實了疫苗接種的免疫原性和安全性(González G等(1998)，Annalsof Oncology 91-5)。

發明內容
本發明意在使用聯合免疫治療，針對具有酪氨酸激酶活性的受體(RTK)以及它們的配體，目的是增強以獨立方式應用現有技術中所述的僅針對該受體/配體系統中一種成分的不同免疫治療形式時所觀察到的效果。在包括兩種活性成分的治療方法中證明了該增強作用，其聯合阻斷配體和受體兩者。
特別地，本發明涉及一種用于治療腫瘤的免疫治療組合，它作用于那些生長依賴受體RTK系統的腫瘤細胞，所述組合包括同時或者序貫施用A+B；或A+C；或A+D；或B+C；或B+D；或C+D，其中A、B、C和D是A.-一種抗受體RTK的抗體；B.-一種抗受體RTK的配體的抗體；C.-一種包含受體RTK的疫苗，其誘導抗所述受體RTK的抗體；D.-一種包含受體RTK的配體的疫苗，其誘導抗所述配體的抗體；在本發明的優選實施方案中，抗受體RTK的單克隆抗體是一種抗表皮生長因子的受體R-EGF的抗體，更為具體地說，它是抗EGF-R的人源化抗體hR3，保藏于英國ECACC，保藏號951110101。
在本發明的另一個實施方案中，抗受體RTK的配體的抗體可以是抗EGF或抗TGFα的抗體。
本發明還涉及一種免疫治療組合，使用包含EGF-R、EGF、TGFα、或這些分子與腦膜炎奈瑟氏球菌的P64K蛋白的結合物的疫苗。
因此，在本發明的另一方面，它涉及一種用于控制其生長依賴于受體RTK系統的細胞的生長和/或增殖的方法，包括用本發明的治療組合進行治療，可以同時或序貫應用，并且可以以任何次序給予所述組合的成分。
本發明基于對RTK受體及其配體的阻斷，涉及抑制腫瘤細胞生長以消除這些細胞的免疫治療組合及治療方法。同時或序貫使用針對生長因子(即EGF、TGFα)及其受體(即EGF-R)的主動免疫治療(治療性疫苗)和被動免疫治療(Mab)的組合，實現該阻斷。
生長因子或其受體的阻斷使細胞增殖被抑制。在本發明中我們顯示了對配體和/或受體的同時阻斷增強對細胞增殖的抑制作用。這一治療概念對于治療在根本上是由細胞增殖速度增加而引起的惡性腫瘤非常重要。
本發明描述了通過主動和被動免疫治療組合而阻斷RTK受體和/或其受體的免疫治療組合。
所述方法可以用于處于不同臨床階段的患有過量表達EGF-R的上皮來源腫瘤的患者。
主動和被動免疫治療的組合可以是同時或序貫的，獨立于用于晚期疾病患者的治療方法，或作為輔助治療。
對于晚期疾病，所建議的治療組合是應用識別RTK受體的Mab和/或識別該受體配體的Mab的被動免疫治療，與特別選擇的腫瘤特異性治療相結合，作為一線治療，繼之以使用針對受體配體和/或受體的疫苗的主動免疫治療，以保持療效。
在輔助治療的情況下所建議的治療組合是應用識別RTK受體和/或其配體的Mab的被動免疫治療，與使用針對受體的配體或受體本身的疫苗的主動免疫治療相結合。或者將應用識別RTK受體或其配體的Mab的被動免疫治療作為攻擊治療，繼之以使用針對受體的配體或受體本身的疫苗的主動免疫治療作為維持治療。
本發明通過以下程序進行闡釋。
程序1治療組合，包括應用識別RTK受體(即EGF-R)和/或該受體配體(即EGF、TGFα)的Mab的被動免疫治療，繼之以使用指向該受體和/或其配體的疫苗的主動治療，用于患有晚期上皮性腫瘤的患者。
這將施用于不適于任何其它腫瘤特異性治療的晚期癌癥患者。
第一個治療步驟將是應用識別RTK受體(即EGF-R)具有抑制該受體的特性的Mab和/或識別該受體配體(即EGF、TGFα)的Mab的被動免疫治療。這將是以腫瘤消退為目標的一種急性治療，并可以與用于疾病該階段的已確立的腫瘤特異性治療一起使用。
跟隨其后的是使用誘導受體阻斷抗體(即抗EGF-R)和/或配體阻斷抗體(即抗EGF、抗TGFα)的疫苗的主動免疫治療，目的是長期維持疾病穩定，避免新的轉移。
該過程包括給予上皮來源腫瘤晚期患者4-20劑100-400mg識別并抑制EGF-R的Mab和/或識別該受體配體的Mab。各劑之間的時間間隔將為6到10天。完整的治療可持續1到24個月，伴隨已確立的腫瘤特異性治療。治療將持續到腫瘤部分或完全消退，或直到不良反應發生而需要停止治療的時候。
在該治療后1-4周之間，用與載體蛋白(即P64K腦膜炎奈瑟氏球菌重組蛋白)偶聯的針對EGF-R或其配體(即EGF、TGFα)的疫苗啟動免疫方案，施用時采用適當的佐劑即明礬(1-2mg/劑)或Montanide ISA 51(0.6-1.2ml/劑)。每一劑含有50-800μg偶聯至載體蛋白的活性成分(受體或配體)，終體積為0.6-5mL。免疫方案為5-8次初始免疫以誘導反應，每7-14天給予一次。可以在免疫之前給予環磷酰胺，在第1次免疫前的2-4天，根據體重按100-500mg/m2給藥。疫苗可以在任何其它疫苗載體中配制(即脂質體、DNA疫苗、病毒載體)。
疫苗可以作為獨立的產品或獨特的疫苗制劑來配制。
在此期間，將從患者身上取血以測定血液生化指標以及抗疫苗所針對的配體或受體的特異性抗體的滴度。取血將每周或每月進行一次。
此后，如果抗體滴度下降，將進行再次免疫，每1-4個月一次，持續1到2年。
程序2免疫治療組合，包括應用識別RTK受體(即EGF-R)和/或其配體(即EGF、TGFα)的Mab的被動免疫治療與使用針對該受體和/或其配體的疫苗的主動免疫治療相結合，作為輔助治療。
使用識別RTK受體(即EGF-R)并抑制其活性的Mab和/或識別受體的配體(即EGF、TGFα)的Mab的被動免疫治療，與使用誘導阻斷該受體和/或其配體的抗體反應的疫苗的主動治療相結合，將在診斷和/或手術治療后立即應用于患者。
這些同時給予的治療將產生協同作用，從而實現更高比例的緩解和/或臨床疾病穩定。
對患有上皮來源腫瘤的患者進行該治療，包括施用4-20劑100-400mg識別并抑制RTK受體和/或其配體的Mab。各劑之間的時間間隔為6到10天，治療可以持續1到24個月。治療將持續直至腫瘤部分或完全消退，或直到不良反應發生而需要停止治療的時候。
根據程序1中所述的方案給予伴隨的疫苗免疫。
程序3免疫治療組合，包括應用識別RTK受體(即EGF-R)和/或其配體(即EGF、TGFα)的Mab的被動免疫治療，繼之以使用針對該受體和/或其配體的疫苗的主動免疫治療，用作輔助治療。
這將在診斷和/或手術治療后立即應用于患者。
該治療的目標是通過應用識別并抑制RTK受體(即EGF-R)的Mab和/或識別其配體(即EGF、TGFα)的Mab的最初的被動免疫治療，使用急性治療以獲得腫瘤消退。繼而，使用誘導抗該受體(即EGF-R)或其配體(即EGF、TGFα)的阻斷抗體的疫苗開始主動免疫治療。第二步治療的目標是獲得更長的無病期，避免新的轉移出現。該程序包括給予處于上皮來源癌癥晚期的患者4-20劑100-400mg識別并抑制EGF-R和/或其配體的Mab。各劑之間的時間間隔為6到10天，治療持續時間可以為1到24個月。治療將持續直至腫瘤部分或完全消退，或直到任何不良反應發生而需要停止治療的時候。
在治療結束后1-4周之間，將根據程序1中所述的方案，用針對EGF-R或某些EGF-R配體(即EGF、TGFα)的疫苗開始免疫方案。
實施例實施例1在癌癥患者中實施EGF疫苗免疫方案，使用明礬作為佐劑。
以證實EGF的免疫原性和安全性作為主要目的，進行了對10名用EGF疫苗(US 5,894,018)進行免疫的臨床試驗，使用P64K作為載體蛋白，明礬作為佐劑。
患者1.1(MMG)被納入試驗，其被診斷為肺轉移性表皮樣癌，疾病進展，并且不適于任何其它腫瘤特異性治療。
對該患者按照初始5劑疫苗的方案在第1、7、14、21和51天進行免疫，疫苗含50μg的EGF和2mg的明礬。
在第0、15、30、45、60天及此后每個月取血，以進行血生化檢驗及EGF特異性抗體測定。
通過ELISA測試的方法測定抗體滴度，抗體滴度確定為ELISA測試中呈現陽性結果的最大血清稀釋度(O.D值等于或高于2倍空白)。
當測到抗體滴度下降時，使用相同的疫苗劑量進行再次免疫。
患者MMG產生了抗EGF抗體反應，最高滴度達1∶8000。抗體反應的動力學如

圖1所示。
免疫方案開始后患者顯示出疾病的臨床及放射學穩定達15個月。患者于第一次疫苗接種后23.2個月死亡。
實施例2在癌癥患者中實施EGF疫苗免疫方案，使用MontanideISA 51作為佐劑。
以證實EGF的免疫原性和安全性作為主要目的，使用P64K作為載體蛋白，Montanide ISA 51作為佐劑，進行了免疫10名患者的臨床試驗。
患者2.1(AMG)被納入試驗，其被診斷為肺表皮樣癌，疾病進展，不適于任何其它腫瘤特異性治療。
對該患者按照初始5劑疫苗的方案在第1、7、14、21和51天進行免疫，疫苗含50μg的EGF，總量0.6mL，在使用前即刻用0.6mL的Montanide ISA 51乳化。
在第0、15、30、45、60天及此后每個月取血，以進行血生化檢驗及特異性抗EGF抗體的測定。
通過ELISA測試的方法測定抗體滴度，抗體滴度確定為ELISA測試中呈現陽性結果的最大血清稀釋度(O.D值等于或高于2倍空白)。
當測到抗體滴度降低時，使用相同的疫苗劑量進行再次免疫。
患者AMG產生了抗EGF抗體反應，最高滴度達1∶32000。反應的動力學如圖2所示。
在免疫方案開始后，患者顯示出疾病穩定達12個月，此時診斷為臨床和放射學腫瘤消退。
在開始疫苗接種后第14個月，第2原發腫瘤出現。患者在納入試驗后18個月死于該第2腫瘤的手術并發癥。
實施例3在癌癥患者中實施EGF疫苗免疫方案，使用明礬作為佐劑及低劑量環磷酰胺預治療。
進行了于環磷酰胺預治療后免疫10名患者的臨床試驗，主要目的為證實EGF疫苗的免疫原性和安全性，使用P64K作為載體蛋白，明礬作為佐劑。
患者3.1，FNR，被納入試驗，其被診斷為肺表皮樣癌，疾病進展，不適于任何其它腫瘤特異性治療。
在第一次接種EGF疫苗前3天用環磷酰胺(100mg/m2體表面積)治療患者。疫苗接種方案為在第1、7、14、21和51天給予5劑疫苗組合物，疫苗含50μg的EGF和2mg的明礬。
在第0、15、30、45、60天及此后每個月取血，進行血液化學及特異性抗EGF抗體的測定。
通過ELISA測試的方法測定抗體滴度，抗體滴度確定為ELISA測試中呈現陽性結果的最大血清稀釋度(O.D值等于或高于2倍空白)。
當測到抗體滴度下降時，使用相同的疫苗劑量進行再次免疫。
該患者產生了抗EGF抗體反應，最高滴度達1∶8000，如圖4所示。
在免疫方案開始后，患者顯示出疾病穩定達19個月。
實施例4在癌癥患者中實施EGF疫苗免疫方案，使用MontanideISA 51作為佐劑及環磷酰胺預治療。
進行了于環磷酰胺預治療后免疫10名患者的臨床試驗，主要目的為證實EGF疫苗的免疫原性和安全性，使用P64K作為載體蛋白及Montanide ISA 51作為佐劑。患者4.1，JPG，被納入試驗，其被診斷為非小細胞肺腺癌，疾病進展，不適于任何其它腫瘤特異性治療。
在第一次接種EGF疫苗前3天用環磷酰胺(100mg/m2體表面積)治療患者。疫苗接種方案為在第1、7、14、21和51天給予5劑疫苗組合物，疫苗含50μg的EGF，總量0.6mL，在使用前即刻用0.6mL的Montanide ISA 51乳化。
在第0、15、30、45、60天及此后每個月取血，進行血液化學及特異性抗EGF抗體的測定。
通過ELISA測試的方法測定抗體滴度，抗體滴度確定為ELISA測試中呈現陽性結果的最大血清稀釋度(O.D值等于或高于2倍空白)。
當測到抗體滴度降低時，使用相同的疫苗劑量進行再次免疫。
患者JPG產生了抗EGF抗體反應，最高滴度達1∶400000，如圖5所示。
在免疫方案開始后，患者顯示出疾病穩定達6個月。
實施例5EGF疫苗接種的免疫原性及其與癌癥患者疾病穩定的關系。
對20名患者進行了I期試驗，其中患者被隨機分至使用不同佐劑的兩組中的一組。
對十名處于非小細胞肺癌(NSCLC)III或IV期的患者，在第1、7、14、21和51天用初始5劑疫苗組合物進行治療，疫苗含50μg的EGF和2mg的明礬。
對另外10名患者(NSCLC，III或IV期)，給予5劑疫苗組合物進行免疫，疫苗含50μg的EGF，總量0.6mL，用相同體積(0.6mL)的Montanide ISA 51乳化。
通過ELISA測試的方法測定抗體滴度，抗體滴度確定為ELISA測試中呈現陽性結果的最大血清稀釋度(O.D值等于或高于2倍空白)。
在該試驗中，50％的患者產生了抗EGF抗體反應，抗體滴度達1∶4000或更高(好的抗體反應者，GAR組)，另外50％患者抗體滴度低于1∶4000(差的抗體反應者，BAR組)。
在GAR組中，87.5％的患者在開始治療后表現出臨床和放射學疾病穩定至少3個月。
在BAR組中，僅11.1％的患者具有這樣的穩定表現(表1)。
這些數據證實了抗EGF抗體水平與腫瘤穩定之間的關系。
表1抗體反應與疾病臨床和放射學穩定的關系。

實施例6EGF疫苗接種的免疫原性及與接受該治療的癌癥患者生存的關系。
四十名III/IV期NSCLC患者，每組10人，用實施例1、2、3和4中詳述的方案進行治療。
根據實施例6中所提出的標準將他們表征為GAR和BAR。
在所有按前面所述方案治療的患者中，50％表現為GAR，50％為BAR。
在比較GAR和BAR患者之間的生存模式時，觀察到了統計學上的顯著差異，GAR的平均生存期為9.1個月，而BAR的平均生存期為4.5個月(p＜0.02)。該結果于圖6中顯示。
實施例7放射治療與Mab IOR-R3的組合的治療效果
患者RML，診斷為舌基底表皮樣癌IV期，被納入使用放射治療(RTP)與IOR-R3相結合的臨床試驗。患者接受200mg的Mab，每周一次，共6周。Mab的累積劑量為1200mg，總放射劑量為60Gy。
當聯合治療完成時，患者顯示出原發腫瘤及其轉移灶完全消退(圖7)。該反應維持了13個月以上。
實施例8放射治療與Mab IOR-R3的組合的治療效果患者EPG，診斷為扁桃體表皮樣癌III期，頸淋巴結腫大，被納入放射治療(RTP)與IOR-R3相結合的臨床試驗。患者接受200mg的Mab，每周一次，共6周，總放射劑量為64Gy。
治療后，患者表現出腫瘤病損完全消退(圖8)。該反應維持了13個月以上。
實施例9放射治療與Mab IOR-R3的組合的治療效果患者CHA，診斷為扁桃體腫瘤IV期，雙側頸淋巴結腫大，被納入放射治療(RTP)與IOR-R3相結合的臨床試驗。患者接受400mg的Mab，每周一次，共6周，累積劑量為2400mg。同時，患者接受總放射劑量64Gy。
當結束治療時，該患者的原發腫瘤和局部轉移完全消退(圖9)。反應維持了12個月。
實施例10在裸鼠中評價使用抗EGF-R抗體(IOR-R3)和抗EGF-R配體單克隆抗體(EGF-1)的組合的被動治療。
相對于用藥劑量評估抗腫瘤效果。本實驗還模擬了聯合施用抗EGF-R Mab和EGF疫苗的可能效果。疫苗引起抗EGF抗體反應，其效果與被動給予具有該特異性的Mab相同，額外的優勢是所產生的抗體反應能隨時間而維持，如實施例1、2、3和4所示(經免疫患者中抗EGF抗體滴度的動力學)。
用以下物質免疫七個不同組的NMRI基因來源(雜交繁殖種群)無胸腺小鼠1組10劑0.5mg的EGF-1 Mab，腹膜內途徑，每日給予。
2組10劑1mg的EGF-1 Mab，腹膜內途徑，每日給予。
3組10劑0.5mg的IOR-R3 Mab，腹膜內途徑，每日給予。
4組10劑1mg的IOR-R3 Mab，腹膜內途徑，每日給予。
5組10劑磷酸緩沖鹽水(PBS)，腹膜內途徑，每日給予(陰性對照)。
6組10劑0.5mg的EGF-1 Mab與0.5mg的IOR-R3 Mab相組合，腹膜內途徑，每日給予。
7組10劑1mg的EGF-1 Mab與1mg的IOR-R3 Mab相組合，腹膜內途徑，每日給予。
在開始用Mab治療的當天，給小鼠移植1×106 H125人腫瘤細胞。該細胞系過量表達EGF-R。
結果如圖10和11所示。當兩種治療相結合時，抗腫瘤效應增強，并隨劑量增加而增加。
實施例11在晚期腫瘤患者中實施Mab IOR-R3/EGF疫苗聯合治療方案患者ARP，診斷為頭頸部表皮樣癌，接受了Mab IOR-R3和EGF疫苗的序貫治療。
患者接受200mg的Mab，每周一次，共6周，與總計30劑放射治療相結合，每周5劑共6周，累積放射劑量60Gy。
結束治療時，患者的原發腫瘤完全消退。
在Mab治療結束后1個月，開始EGF疫苗的免疫方案。患者接受5劑，每劑含50μg偶聯至蛋白P64K的EGF，總量為0.6mL，在使用前即刻用0.6mL的Montanide ISA 51乳化。免疫在第1、7、14、21和51天進行。
患者仍處于隨診階段。
實施例12在晚期腫瘤患者中實施Mab IOR-R3/EGF疫苗聯合治療方案患者MRM，診斷為肺表皮樣癌，接受了手術治療干預。術后一個月患者開始Mab IOR R3被動免疫治療和同時施用EGF疫苗的聯合治療。
圖12詳細顯示了劑量間隔方案。患者處于隨診階段。
附圖簡要說明圖1如實施例1中所述免疫的患者MMG抗EGF抗體反應的動力學。箭頭指示再次免疫的時間。
圖2如實施例2中所述免疫的患者AMC抗EGF抗體反應的動力學。箭頭指示再次免疫的時間。
圖3在患者AMC身上觀察到的腫瘤消退。左圖中可見在治療開始時存在腫瘤塊。右圖中可見治療開始后12個月腫瘤塊消失。
圖4如實施例3中所述免疫的患者FNR抗EGF抗體反應的動力學。箭頭指示再次免疫的時間。
圖5如實施例4中所述免疫的患者JPG抗EGF抗體反應的動力學。箭頭指示再次免疫的時間。
圖6具有高抗EGF抗體反應(GAR)和低抗EGF抗體反應(BAR)的患者組以及歷史對照組的Kaplan-Maier生存曲線。
可以看到，GAR與BAR或歷史對照相比較，生存顯著增加。
圖7圖例證實如實施例7中所述治療的患者RML的腫瘤消退。
圖8圖例證實如實施例8中所述治療的患者EPG的腫瘤消退。
圖9圖例證實如實施例9中所述治療的患者CHA的的腫瘤。
圖10如實施例10所述，用0.5mg的Mab IOR-R3和EGF-1，以及用0.5mg的IOR-R3+0.5mg的EGF-1的組合進行免疫的小鼠組。在用兩種Mab的組合治療的組中觀察到了對減緩腫瘤生長的協同作用。
圖11如實施例10所述，用1mg的Mab IOR-R3和EGF-1，以及用1mg的IOR-R3+1mg的EGF-1的組合進行免疫的小鼠組。在用兩種Mab的組合治療的組中觀察到了對減緩腫瘤生長的協同作用。
圖12Mab IOR-R3與EGF疫苗的聯合治療時間軸上方的箭頭指示給予Mab的日子(1、7、14、21、28和35天)，時間軸下方的箭頭指示用EGF疫苗免疫的日子(2、8、15、22和52天)。
權利要求
1.用于治療腫瘤的免疫治療組合，它作用于其生長依賴于受體RTK系統的細胞，所述組合包括同時或者序貫給予A+B；或A+C；或A+D；或B+C；或B+D；或C+D，其中A、B、C和D是A.-一種抗受體RTK的抗體；B.-一種抗受體RTK的配體的抗體；C.-一種包含受體RTK的疫苗，其誘導抗所述受體RTK的抗體；D.-一種包含受體RTK的配體的疫苗，其誘導抗所述配體的抗體；a.-一種抗RTK受體的抗體。b.-一種疫苗，其中的活性成分是RTK受體，并且其誘導抗該受體的抗體。
2.根據權利要求1的免疫治療組合，其中抗受體RTK的抗體是抗EGF受體的抗體。
3.根據權利要求2的免疫治療組合，其中抗EGF受體的抗體是人源化抗體。
4.根據權利要求3的免疫治療組合，其中抗EGF受體的人源化抗體是IOR-R3，保藏于英國ECACC，保藏號951110101。
5.根據權利要求1的免疫治療組合，其中抗受體RTK的配體的抗體是抗EGF抗體。
6.根據權利要求1的免疫治療組合，其中抗受體RTK的配體的抗體是抗TGFα抗體。
7.根據權利要求1-6的免疫治療組合，其中所述疫苗包含EGF受體。
8.根據權利要求1-6的免疫治療組合，其中所述疫苗包含EGF。
9.根據權利要求8的免疫治療組合，其中所述疫苗包含EGF和來自腦膜炎奈瑟氏球菌的P64K蛋白的結合物。
10.根據權利要求1-6的免疫治療組合，其中所述疫苗包含TGFα。
11.根據權利要求10的免疫治療組合，其中所述疫苗包含TGFα和來自腦膜炎奈瑟氏球菌的P64K蛋白的結合物。
12.用于控制其生長依賴于受體酪氨酸激酶(RTK)系統中的受體及其配體間相互作用的細胞的生長和/或增殖的方法，該方法包括用之前權利要求1-11中任何一項所定義的一種治療組合來進行治療。
13.根據權利要求12的方法，包括同時或序貫給予之前權利要求1-11中任何一項所定義的治療組合。
14.根據權利要求13的方法，包括以任何順序給予之前權利要求1-11中任何一項所定義的治療組合。
全文摘要
本發明涉及免疫學領域，更具體涉及癌癥免疫治療，特別是用免疫治療組合和治療方法阻止腫瘤細胞生長和/或消除所述細胞。本發明中所公開的方法是基于阻斷在酪氨酸殘基中具有蛋白激酶活性的受體(RTK)及所述受體的配體。本發明描述了免疫治療組合，通過聯合針對所述受體的主動和/或被動免疫治療，阻斷RTK受體和/或其配體。所公開方法可以用于不同臨床階段的患有過量表達所述受體的上皮來源腫瘤的患者。主動和被動免疫治療組合可以同時或序貫使用，取決于該治療方法是用于處于晚期疾病狀態的患者還是作為輔助治療。
文檔編號A61K38/00GK1592636SQ01821685
公開日2005年3月9日 申請日期2001年12月6日 優先權日2000年12月8日
發明者R·佩雷斯羅德里格斯, G·M·岡薩雷斯馬里內羅, T·克羅姆貝特拉莫斯, I·博索利爾迪爾加多 申請人:分子免疫中心