治療高甘油三酯血癥的組合物和方法

專利名稱：治療高甘油三酯血癥的組合物和方法
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本發明涉及一種含多不飽和脂肪酸的組合物，該組合物可被配制成營養補充劑或藥物制劑，并且還涉及所述組合物在治療高甘油三酯血癥中的用途。
已知高脂血癥是心血管疾病(CVD)形成的重要危險因素。高脂血癥是指血清中血清膽固醇和中性脂肪，主要是甘油三酯(TG)，其中之一或者兩者的濃度升高。近幾十年的研究表明血漿中TG濃度升高是CVD的一項獨立危險因素。因此，作為預防和延緩CVD發生的方法，開發減少或控制血清中TG水平的制劑很受關注。
多不飽和脂肪酸(PUFAs)結合熱量攝取限制已被推薦用于高甘油三酯血癥的食療。此療法中，食用海洋魚油表現出強勁的降低血中高甘油三酯(降低TG)的特性，特別是對高甘油三酯血癥V型個體(Roche 1999；Harris 1999；Harris 1989)。
大量的研究表明日服用含少到2-4克n-3 PUFAs的魚油就可以顯著地降低循環TG水平，這對血脂正常和高甘油三酯血的個體效果都一樣(Harris 1989；Harris 1997)。盡管具有該降低苷油三酯效果的食用海洋魚油的具體有效成分尚不明確，但二十碳五烯酸(205n-3)(EPA)和二十二碳六烯酸(226n-3)(DHA)作為魚油的主要成分，他們的降低血中高甘油三酯作用已經有人體試驗證據(Weber 1999；Agren 1996)。但是此作用不是n-3 PUFAs的普遍特性，因為含有EPA和DHA前體α-亞麻酸(183-n)(ALA)的食用油沒有或者有極少的降低血中高甘油三酯的作用，即使每天服用含多達20克ALA的油也是一樣(Kelley 1993；Abbey 1990)。也有報道服用極高濃度的含ALA油(40-60克ALA/天)具有降低血中高甘油三酯作用(Singer 1990)，但是這個作用與食用海洋魚油比起來微不足道，也許是大劑量食用PUFAs的普遍效應，因為大劑量的亞油酸也有類似的特性。但是海洋魚油作為降低血中高甘油三酯制劑的飲食應用不太受歡迎，因為它的口感和氣味兒讓人不愉快，而且，研究服用海洋魚油可能益處的許多研究也報告了伴隨的胃腸道問題，如腹脹和產氣。
很少有關于研究人體消耗十八碳四烯酸(SDA)對體內轉化成較長鏈脂肪酸即花生四烯酸和二十二碳五烯酸(DPA)的影響程度的報道。已經發表的報告也得不出明確結論。例如，有報告說受驗者日服用0.65克ALA和0.17克SDA沒有增加長鏈n-3脂肪酸(Wu 1999)。也有報告說每日給予重癥監護病房病人5.7克ALA和0.7克SDA可使紅細胞膜的EPA含量升高20％，這是具有統計學意義的(Diboune1992)。還有研究表明對類似的重癥病人檢測血漿脂肪酸也觀察到顯著提高的DPA，但是沒有提到血漿中的EPA含量(Diboune 1993)。
另一種在食用油中較少見的脂肪酸是γ-亞麻酸(18:3 n-6)(GLA)。雖然對含有GLA的油如琉璃苣油和月見草油(EPO)的消炎作用已經有廣泛的研究，但是關于對循環TG水平的影響資料還不多。目前只報道了五個這樣的人體研究，這些形容中是在消耗含GLA油之后對循環TG進行監測。在這五個研究中，飲食中補充有EPO。其中三個研究沒有觀察到補充物EPO對受試者體內循環TG水平的影響，服用的劑量分別是0.3克、0.6克和2.7克GLA/天，時間長達四個月(Ishikawa 1989；Abraham 1990；Viikari 1986)。Abraham的研究(2.7克/天)對象是無高血脂癥健康男性，他們是在一個較大的群體選取的脂肪組織活檢中GLA含量分布最低的五分之一的那部分人。Ishikawa研究(0.3克GLA/天)中包括19個高膽固醇血癥的病人。其中按照150mg/dL的閾值，10個病人沒有相關的高甘油三酯血癥，9個人有。Viikari研究(0.6克GLA/天)用的是高血脂病人。另有兩個研究報告食物添加EPO分別顯著的降低循環TG水平48％和35％，而服用的劑量分別是0.24克GLA/天或2克GLA/天(Guivernau 1994；Chaintreuil1984)。在Chaintreuil的研究中，所有的對象都是每天注射皮下胰島素的糖尿病人，分組以兩個劑量給藥，一組是2克GLA/天，一組是0.5克GLA/天，前組降低血漿TG 35％，后組對TG水平沒有影響。Guivernau的研究包括12個高血脂的男性病人，服用劑量是0.24克GLA/天，對于那些正在服用降脂藥的人，在研究開始前至少停藥8個星期。所述內補充物在四個星期內降低血漿TG 48％，而且越是初期TG高的病人，效果越明顯。
EPO和琉璃苣油是很特別的，部分的原因是它們都含有GLA。時至今日，還沒有研究報告GLA是否是如上述兩研究報告的降低血中高甘油三酯作用的活性成分。所以，目前還沒有結論性的證據表明食用GLA具有降低血中高甘油三酯的作用，因為看到的文獻結論不一，研究也不夠。
已知的治療高甘油三酯血癥的藥劑包括貝特類藥物，例如氯貝丁酯、苯扎貝特和吉非貝齊，還有煙酸及其衍生物。煙酸在降低血清TG水平方面安全有效，但是治療劑量必須慢慢加上去以盡可能減少臉部充血和皮膚瘙癢，因為病人通常都忍受不了。臨床上，貝特類藥物可以跟其他抗高脂血癥藥物相互作用跟羥甲基戊二酰輔酶A(HMG CoA)-還原酶抑制劑(抑制素)聯用，可以導致橫紋肌溶解；跟某些膽汁酸螯合物聯用可導致生物利用率降低(Farmer and Gotto1994)。再者，香豆素的抗凝作用的增強可導致出血(Blum 1992)。
綜上所述，我們需要一種治療高甘油三酯血癥的既有效果又易為病人接受的組合物。
發明概要一方面，本發明提供一種組合物，該組合物包含脂肪酰基化合物的混合物和至少一種選自抗血脂藥、抗氧化劑和抗糖尿病藥的治療藥物，其中所述脂肪酰基化合物的混合物中多不飽和脂肪酸含量為至少65％重量，包括亞油酸約10-35％重量、γ-亞麻酸約5-50％重量、α-亞麻酸約15-60％重量和十八碳四烯酸約15-55％重量，上述量以脂肪酰基化合物混合物中多不飽和脂肪酸含量的總重量為基礎。
另一方面，本發明提供一種使用上述脂肪酰基化合物混合物來治療有需要的高甘油三酯血癥病人的方法，使用時可以和所述治療藥物聯用也可以不聯用。發明詳述本發明實際使用的含脂肪酰基化合物的混合物可以由各種脂肪酰基化合物配制，也可以從天然物質中提取。本文中，“脂肪酰基化合物”是指脂肪酸的各種形態，包括游離酸、單酯、甘油二酯、甘油三酯、磷脂等，沒有任何限制。磷脂包括卵磷脂、磷脂酸的其他脂肪酸衍生物、鞘磷脂和縮醛磷脂等，也沒有任何限制。所述脂肪酰基化合物混合物中多不飽和脂肪酸含量取決于游離酸的相對含量(當混合物中本身存在游離酸時)，或者是酯類、甘油二酯或三酯和磷脂等酸衍生物水解生成的游離酸。
本組合物的含脂肪酰基化合物的組分優選從藍薊屬植物種子取得，比如，Echium plantagineum和Echium vulgaris(此后就總稱藍薊油)。
藍薊油含有特別的脂肪酰基組成，人一經口服將顯著降低循環甘油三酯水平，該作用對血脂正常和低甘油三酯血癥的個體皆然。另外，對有高甘油三酯血癥傾向的人，每日食用藍薊油能降低血清中中性脂肪的水平，以延緩高甘油三酯血癥的發生。
藍薊油含有豐富的(各種均＞10％)四種不同多不飽和脂肪酸，如下表1所示。
表1Echium plantageneum和Echium vulgaris的種子油的脂肪酰基成分(％重量)
最優選的是從E.plantagineum得到的油，它含有大致等量的GLA、亞油酸和SDA。藍薊油還具有高濃度的ALA，是其他PUFAs的兩到三倍。ALA和SDA都是在海洋魚油中發現的長鏈n-3脂肪酸的18碳鏈前體。
從E.plantagineum提取的油在英國的Croda International PLC公司有售。有一種產品是堿性種子提取物，它的成份如上表1所示。或者如果需要，也可以使用濃縮的藍薊油。
由上表中可見，藍薊油還具有飽和脂肪酸和單-不飽和脂肪酸組分，這些組分中主要含有16碳和18碳脂肪酸。
還沒其他已知的天然油具有藍薊油的多不飽和脂肪酸構成。表2列出的是與藍薊油的脂肪酰基構成最接近的其他市售油的脂肪酰基構成。表2市售油的脂肪酰基構成
藍薊油還有個不尋常的特點，即SDA的含量高。黑茶藨子油具有占脂肪酸總量約4％的SDA含量，是唯一跟藍薊油的SDA含量相當的食用油。SDA是ALA的去飽和產物。該去飽和步驟在碳鏈中插入一個雙鍵，是ALA向EPA(在海洋魚油中發現存在)轉化所需三步驟之一，如下所示18∶3→18∶4→20∶4 →20∶5(ALA)(SDA) (EPA)跟ALA一樣，食物中SDA可在組織中轉化成EPA。然而似乎食物中SDA本身或者SDA在組織中轉化成EPA都不能必然導致降低血中高甘油三酯作用。事實上，盡管服用ALA可以小幅提高組織中EPA水平，但每天攝入多達20克ALA也不能導致循環TG水平下降。
不想受縛于某個具體的理論，我們相信食用藍薊油的降低血中高甘油三酯作用很可能是由于它的獨特組分構成即油中的亞油酸、GLA、ALA和SDA；而不是由于油中任何一種脂肪酸組分的單獨作用。
本文中所述的脂肪酰基化合物混合物可以獨立食用，或者作為食物的成分之一；可以作為食品補充劑或者食品添加劑的一部分；它可以做成液態、半固態或固態。例如，所述脂肪酰基化合物混合物可以作為片劑、膠囊、加味飲料、用于飲料的粉末、廚用燈油、色拉油或調味品、醬油、糖漿、蛋黃醬、人造奶油等等進行使用。優選所述脂肪酰基化合物混合物為可以獨自使用或者跟飲料或酸乳酪等混合的加味乳液形態。
本發明組合物的有益服用劑量是約0.04-0.35克脂肪酰基化合物混合物/千克患者體重/天。
如果需要，本脂肪酰基化合物混合物可以與具有抗血脂、抗氧化或抗糖尿病作用的的治療藥物結合同時或者依次給藥。代表性的抗血脂藥包括煙酸、氟伐他汀鈉、西立伐他汀鈉、辛伐他汀、阿托伐他汀鈣、洛伐他汀、氯貝丁酯、環丙貝特、吉非貝齊、苯扎貝特、非諾貝特和普伐他汀鈉。
煙酸(niacin)的作用是降低循環TG。貝特類藥物能同時降低循環TG和低密度脂蛋白(LDL)-膽固醇。上述各種伐他汀類藥物(statin)能阻斷膽固醇的合成；提高肝臟LDL受體功能從而加強肝內LDL-膽固醇的吸收。總的效果是降低循環LDL-膽固醇濃度。
適用的抗氧化劑包括維生素E、維生素C、生育三烯酚、硒、姜黃素、β-胡羅卜素和丙丁酚。這些化合物是抗致動脈粥樣化的，因為他們限制致動脈粥樣化的氧化脂蛋白的形成。維生素E、棕櫚酸抗壞血酸酯、維生素C和卵磷脂等抗氧化劑或者它們的混合物可以保護本組合物免受氧化。
可結合進本發明組合物的抗糖尿病藥物有曲格列酮、吡格列酮、羅西格列酮和二甲雙胍。格列酮類藥物能減少非胰島素依賴型糖尿病人的血漿TG、葡萄糖及胰島素水平。二甲雙胍能降低二型糖尿病高危個體中度(非糖尿病的)升高的高甘油三酯血癥。
本發明組合物可以經腸道給藥，而經口給藥為優選途徑。
適于經口給藥的組合物可以根據生產食用補充劑或藥物制劑的任何已知方法進行制備，這樣的組合物可以包括至少一種選自下列的成分甜味劑或香味劑等口味改進劑、穩定劑、乳化劑、著色劑和防腐劑等，這樣就可以提供適于特殊飲食的或藥學上適口的制劑。本發明組合物也可以包括來自于任何生理學上可接受的來源的各種維生素、礦物質和痕量元素等。
包含上述治療藥物的組合物的劑量和給藥途徑應當根據廠家的說明。
下面是如何實現本發明的兩個例子，本發明的使用不限于此。實施例I藍薊油降低高甘油三酯血癥的特性一種優選的組合物是可以單獨使用也易于與飲料、酸乳混合的穩定乳液。這樣的組合物的一個例子如下
本組合物適于在無氧條件下包裝在單一日劑量容器中，包裝材料要求是不能透氧的，如貼箔袋。推薦的日劑量為大約40克/日，由此可提供大約15克藍薊油/日的劑量。
對可能的試驗對象進行篩選訪問(治療前四周)，評估病史、用藥，獲得生命體征及血清脂類情況。飲食回顧和飲食指導也是必須的。如果受驗者滿足下面標準，就將篩選訪問中血清甘油三酯水平高于300mg/dl的人登記參加試驗，讓他(她)們兩周后返回實驗中心(治療前兩周)，再在兩周后返回(試驗前零周，基線數據)參加治療試驗。受驗者需為男性或非懷孕女性；20歲或以上；沒有明顯的可導致退出試驗的病癥；需簽署書面同意書；受驗者在篩選訪問到基線訪問的四周里，體重變化不超過2千克；受驗者必須愿意參加全部的研究項目，包括隨訪，抽餓血，正常飲食習慣，遵從每日三次，一次五丸的研究增補劑量；受驗者在試驗前兩周訪問和基期訪問時的脂類結果平均值中，其LDL-膽固醇必須小于160mg/dl，甘油三酯水平為300-450mg/dl。
有下列情況不能參加試驗孕期和哺乳期婦女；有病癥如活性消化性潰瘍；炎性腸病；腸胃出血或者任何影響本研究補充劑的吸收、代謝或排泄的病癥或先前的胃腸手術；心絞痛；心律不齊；充血性心力衰竭或者心肌梗塞或中風史；或者胰島素依賴型糖尿病(I型或II型)。在篩選前30天內有服用過或正在服用任何降膽固醇產品、成分或纖維的也不能參加。
在篩選時符合上述條件受驗者在簽署書面同意后，繼續參加如下調查
治療前兩周的隨訪(第二次訪問)要檢查下列項目副作用評估、聯合用藥評估(包括各種維生素和補充劑)、飲食回顧、飲食指導、血壓、心率、體重、餓血脂狀況和脂肪酸狀況。另外，受驗者被告之要在整個試驗期堅持目前的飲食習慣、用藥、維生素補充劑和平常的運動量。受驗者被告之大約2個星期后返回試驗中心，參加基線隨訪，前后不要差兩天。
試驗開始時候的基線隨訪(第三次訪問)，要檢查下列項目副作用評估、聯合用藥評估、血壓、心率、體重、餓血脂狀況、生化常規，如可能要用尿驗孕。分發藍薊油膠囊給受驗者，每天15粒，一次5粒，一日三次隨飯服用，總劑量是每天15克藍薊油。并告訴受驗者將這些膠囊隨飯服用。另外，受驗者被告之要在整個試驗期堅持目前的飲食習慣、用藥、維生素補充劑和平常的運動量。受驗者被告之大約26天后返回試驗中心，參加第26日隨訪，前后不要差一天。
在第26日隨訪(第四次訪問)，受驗者在研究中心只作餓血脂檢查，然后告知受驗者在第28日返回作治療四周后的隨訪(第五次訪問/最后一次)，前后不要差一天。
在四周后的隨訪(第五次訪問/最后一次)，要進行下列檢查副作用評估、聯合用藥評估、血壓、心率、體重、餓血脂狀況、生化常規，如可能要用尿驗孕，并且了解用藥依從性。未用的藍薊膠囊要歸還給研究中心。11名受驗者的研究結果見表3。表3血漿甘油三酯值(mg/dL)
表3的結果表明，每日攝取15克藍薊油對11個受驗者中8人有降低血中甘油三酯的作用。受驗者每日消耗15克藍薊油，持續四個星期。在表3所列出的11個受驗者中，有一人降低血中甘油三酯幅度是大約13％，四人降低約25％，一人降低約30％，一人降低約35％，一人降低約52％。只有三人沒什么效果或者血中甘油三酯水平反而升高。總的平均降低水平是20％，8個對治療有反應的人的平均降低幅度是28.3％。
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盡管對本發明的優選實施方案作了說明，特別是如上作了舉例說明，但這不并是說本發明就局限于這樣的實施方案。可以進行各種修改，只要不超出隨后權利要求中所列的本發明的范圍和精神即可。
權利要求
1.一種治療高甘油三酯血癥的組合物，該組合物包含脂肪酰基化合物的混合物和至少一種選自抗血脂藥、抗氧化劑和抗糖尿病藥的治療藥物，其中所述脂肪酰基化合物的混合物中多不飽和脂肪酸含量為至少65％重量，包括亞油酸約10-35％重量、γ-亞麻酸約5-50％重量、α-亞麻酸約15-60％重量和十八碳四烯酸約15-55％重量，所述量以所述混合物中多不飽和脂肪酸含量的總重量為基礎。
2.權利要求1的組合物，其中所述脂肪酰基化合物混合物還包括至少一種飽和脂肪酸和至少一種單不飽和脂肪酸。
3.權利要求2的組合物，其中所述至少一種飽和脂肪酸和所述至少一種單不飽和脂肪酸主要包含C16和C18脂肪酸。
4.權利要求3的組合物，其中所述脂肪酰基化合物混合物為藍薊油。
5.權利要求1的組合物，其中所述抗血脂藥選自煙酸、氟伐他汀鈉、西立伐他汀鈉、辛伐他汀、阿托伐他汀鈣、洛伐他汀、氯貝丁酯、環丙貝特、吉非貝齊、苯扎貝特、非諾貝特和普伐他汀鈉。
6.權利要求1的組合物，其中所述抗氧化劑選自維生素E、維生素C、生育三烯酚、硒、姜黃素、β-胡羅卜素和丙丁酚。
7.權利要求1的組合物，其中所述抗糖尿病藥選自曲格列酮、吡格列酮、羅西格列酮、吡格列酮。
8.一種對需要治療的病人進行高甘油三酯血癥治療的方法，該方法包括給予所述病人治療有效量的一種組合物，該組合物包含脂肪酰基化合物的混合物，并任選與至少一種選自抗血脂藥、抗氧化劑和抗糖尿病藥的治療藥物相結合，所述脂肪酰基化合物的混合物中多不飽和脂肪酸含量為至少65％重量，包括亞油酸約10-35％重量、γ-亞麻酸約5-50％重量、α-亞麻酸約15-60％重量和十八碳四烯酸約15-55％重量，所述量以所述混合物中多不飽和脂肪酸含量的總重量為基礎。
9.權利要求8的方法，其中所述組合物的給藥量為傳遞約0.04-約0.35g所述脂肪酰基化合物混合物/kg病人體重/日。
10.權利要求8的方法，其中所述組合物為經口給藥。
11.權利要求8的方法，其中所述組合物以單劑量給藥。
12.權利要求8的方法，其中所述單劑量包含藍薊油。
13.權利要求12的方法，其中所述組合物的給藥量為每日傳遞約15g藍薊油。
14.權利要求12的組合物，其中將所述藍薊油的多不飽和部分濃縮。
全文摘要
提供了治療高甘油三酯血癥的含有多不飽和脂肪酸的組合物及其使用方法。
文檔編號A61K31/015GK1471391SQ01817722
公開日2004年1月28日 申請日期2001年8月21日 優先權日2000年8月30日
發明者M·E·蘇雷特, M E 蘇雷特 申請人:百樂治療有限公司