專利名稱：芳基哌嗪和芳基哌啶及其作為金屬蛋白酶抑制劑的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及用于抑制金屬蛋白酶的化合物并且尤其涉及包含這些化合物的藥物組合物及其應用。
本發明化合物是一種或多種金屬蛋白酶的抑制劑。金屬蛋白酶是蛋白酶(酶)的總科，其數目近年來戲劇性地增加。基于結構和功能的考慮，這些酶已分類為科和亞科，如N.M.Hooper(1994)FEBS Letters3541-6中所述。金屬蛋白酶的實例包括基質金屬蛋白酶(MMP)如膠原酶(MMP1、MMP8、MMP13)，明膠酶(MMP2、MMP9)，基質溶素(MMP3、MMP10、MMP11)，metrilysin(MMP7)，金屬彈性蛋白酶(MMP12)，enamelysin(MMP19)，MT-MMPs(MMP14、MMP15、MMP16、MMP17)；reprolysin或adamalysin或MDC科，后者包括分泌酶和脫落酶(sheddase)如TNF轉換酶(ADAM10和TACE)；蝦紅素科，包括酶如前膠原加工蛋白酶(PCP)；和其他金屬蛋白酶如聚集蛋白聚糖酶，內皮轉換酶科和血管緊張素轉換酶科。
金屬蛋白酶被認為在生理性病變導致的多血癥中是重要的，所述生理性病變涉及組織改造如胚胎發育、骨形成和月經期間的子宮改變。這基于金屬蛋白酶具有將大量基質底物如膠原、蛋白聚糖和粘連蛋白裂解的能力。金屬蛋白酶也被認為在生物學重要的細胞介質，如腫瘤壞死因子(TNF)的加工或分泌中是重要的；在生物學重要的膜蛋白，如低親和力IgE受體CD23的轉換后蛋白水解加工或脫落中是重要的(詳見N.M.hooper等人，(1997)Biochem J.321265-279)。
金屬蛋白酶已經與很多疾病狀態發生有關。抑制一種或多種金屬蛋白酶的活性在這些疾病狀態中可能是非常有益的，這些疾病狀態的實例包括各種炎性和變應性疾病如關節炎癥(特別是類風濕性關節炎、骨關節炎和痛風)，胃腸道炎癥(特別是炎性腸道疾病、潰瘍性結腸炎和胃炎)，皮膚炎癥(特別是牛皮癬、濕疹、皮炎)；腫瘤轉移或侵入；與細胞外基質降解失控有關的疾病如骨關節炎；骨再吸收疾病(如骨質疏松癥和佩吉特氏病)；與血管生成異常有關的疾病；與糖尿病、牙周病(如齒齦炎)、角膜潰瘍、皮膚潰瘍、術后狀況(如結腸吻合術)和皮膚創傷修復有關的膠原改變增強；中樞和外周神經系統脫髓鞘性疾病(如多發性硬化)；早老性癡呆；在心血管疾病中觀察到的細胞外基質改變如restenosis和動脈粥樣硬化；和慢性阻塞性肺病，COPD(例如，MMPs如MMP12的作用在Anderson & Shinagawa，1999，CurrentOpinion in Anti-inflammatory and ImmunomodulatoryInvestigational Drugs，1(1)29-38中討論)。
許多金屬蛋白酶抑制劑是已知的；對于抑制各種金屬蛋白酶而言，不同種類的化合物可能具有不同程度的效力和選擇性。我們已發現了一類新的化合物，它們是金屬蛋白酶抑制劑并且是在抑制MMP-13以及MMP-9中是特別有效的。本發明化合物具有有益的效力和/或藥動學特性。
MMP13或膠原酶3最初是由得自乳房腫瘤的cDNA庫克隆的[J.M.P.Freije等人(1994)Journal of Biological Chemistry269(24)16766-16773]。來自大量組織的RNAs的PCR-RNA分析表明，MMP13的表達限制在乳房癌，因為在乳房纖維腺瘤、正常的或休止的乳腺、胎盤、肝臟、卵巢、子宮、前列腺或腮腺或在乳房癌細胞系(T47-D、MCF-7和ZR75-1)中未發現它。隨后，在轉化的表皮角質化細胞[N.Johansson等人，(1997)Cell Growth Differ.8(2)243-250]，鱗狀細胞癌[N.Johansson等人，(1997)Am.J.Pathol.151(2)499-508]和表皮腫瘤[K.Airola等人，(1997)J.Invest.Dermatol.109(2)225-231]中檢測到MMP13。這些結果提示，MMP13是由轉換的上皮細胞分泌的并且可以在與轉移有關的細胞外基質降解和細胞基質相互作用中涉及，特別是可在侵襲性癌細胞損害和皮膚癌發生時惡性上皮生長中觀察到。
新近公開的資料提示，MMP3在其他結締組織的更新中發揮作用。例如，與降解II型膠原時MMP13的底物特異性和優先性一致[P.G.Mitchell等人，(1996)J.Clin.Invest.97(3)761-768；V.Knauper等人，(1996)The Biochemical Journal 2711544-1550]，假設MMP13在初級骨化和骨架改型期間[M.Stahle-Backdahl等人，(1997)Lab.Invest.76(5)717-728；N.Johansson等人，(1997)Dev.Dyn.208(3)387-397]，在破壞性關節疾病如類風濕性關節炎和骨關節炎中[D.Wernicke等人，(1996)J.Rheumatol.23590-595；P.G.Mitchell等人，(1996)J.Clin.Invest.97(3)761-768；O.Lindy等人，(1997)Arthritis Rheum 40(8)1391-1399]；和在髖部復位無菌放松期間[S.Imai等人，(1998)J.Bone Joint Surg.Br.80(4)701-710]發揮作用。因為局限在粘膜長期發炎的人齦組織上皮，MMP13也包含在成人慢性牙周炎中[V.J.Uitto等人，(1988)Am.J.Pathol 152(6)1489-1499]和在慢性創傷膠原基質的改型中[M.Vaalamo等人，(1997)J.Invest.Dermatol.109(1)96-101]。
MMP9(明膠酶B；92kDa IV型膠原酶；92kDa膠原酶)是分泌蛋白，它在1989年首次提純，然后被克隆并進行測序(S.M.Wilhelm等人(1989)J.Biol Chem.264(29)17213-17221.Published erratumin J.Biol Chem.(1990)265(36)22570.)。MMP9的近期評論提供了關于蛋白酶詳細資料和參考的最佳原始資料T.H.Vu & Z.Werb(1989)(InMatrix Metalloproteinases 1998.Edited by W.C.Park & R.P.Mecham.Pp115-148.Academic Press.ISBN 0-12-545090-7)。根據T.H.Vu & Z.Werb(1998)的評論來描述下列要點。
MMP9的表達在正常情況下限定在幾種細胞，包括滋養層、破骨細胞、嗜中性白細胞和巨噬細胞。然而，其表達可在這些相同的細胞和在其他類型的細胞中由幾種介質誘導，包括將細胞暴露到生長因子或細胞因子中。這些是在引發炎性反應中經常涉及的相同的介質。與其他分泌MMPs一樣，MMP9以非活性的酶原形式釋放，然后斷裂形成具有酶活性的酶。體內激活所需要的蛋白酶是未知的。體內活性MMP9和非活性酶之間的平衡進一步通過與天然存在的蛋白質TIMP-1(組織金屬蛋白酶抑制劑-1)之間的相互作用調節。TIMP-1與MMP9的C-端結合，導致抑制MMP9的催化區。所誘導的前MMP9表達平衡、前MMP9斷裂成活性MMP9和TIMP-1存在，綜合決定局部存在的具有催化活性的MMP9的量。具有水解蛋白質活性的MMP9攻擊底物，所述底物包括明膠、彈性蛋白和天然的IV型和V型膠原；它對天然的I型膠原、蛋白聚糖或層粘連蛋白無活性。
表明MMP9在各種生理學和病理學過程中起作用的資料一直在不斷增加。生理學作用包括胚胎的滋養層在胚胎植入早期通過子宮上皮侵入；在骨生長和發育中的某些作用；和炎性細胞從脈管系統遷移到組織。已觀察到，在某些病理狀態下MMP表達增加，因此推斷，MMP9存在于疾病進程中，所述疾病如關節炎、腫瘤轉移、早老性癡呆、多發性硬化和動脈粥樣硬化中的蝕斑破裂，它導致急性冠心病如心肌梗塞。
WO-98/05635中提出了具有MMP和TNF抑制劑活性的下列通式化合物B-X-(CH2)n-CHR1-(CH2)m-COY我們現已發現了一些化合物，它們是有效的MMP13抑制劑并且具有所需要的活性特征。
在本發明第一方面，我們提供式I化合物 其中B表示在3-或4-位由鹵素或三氟甲基一取代的，或3-或4-位由鹵素(可以相同或不同)二取代的苯基；或者B表示在4-、5-或6-位由鹵素、三氟甲基、氰基或C1-4烷基一取代的2-吡啶基或2-吡啶氧基；或者B表示在6-位由鹵素或C1-4烷基任選取代的4-嘧啶基；X表示碳或氮原子；R1表示三甲基-1-乙內酰脲C2-4烷基或三甲基-3-乙內酰脲C2-4烷基；在3-或4-位由鹵素、三氟甲基、硫或C1-3烷基或C1-3烷氧基一取代的苯基或C2-4烷基苯基；苯基-SO2NHC2-4烷基；2-吡啶基或2-吡啶基C2-4烷基；3-吡啶基或3-吡啶基C2-4烷基；2-嘧啶-SCH2CH2；由鹵素、三氟甲基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、由鹵素任選取代的2-哌嗪基或由鹵素任選取代的2-哌嗪基C2-4烷基任選之一取代的2-或4-嘧啶基C2-4烷基；上述任何烷基都可以是直鏈或支鏈的。
優選的本發明化合物是那些化合物，其中任何一項或多項下列內容適用B表示4-氯苯基、4-氟苯基、4-溴苯基或4-三氟苯基；在4-或5-位一取代的2-吡啶基或2-吡啶氧基如5-氯-2-吡啶基、5-溴-2-吡啶基、5-氟-2-吡啶基、5-三氟甲基-2-吡啶基、5-氰基-2-吡啶基、5-甲基-2-吡啶基；特別是4-氟苯基、5-氯-2-吡啶基或5-三氟甲基-2-吡啶基；X表示氮原子；R1為苯基甲基(或芐基)、苯基乙基(或苯乙基)、苯基丙基、3-氯苯基、4-氯苯基、3-吡啶基、2-吡啶基丙基、2-或4-嘧啶基乙基(未取代的或由氟一取代的)、2-或4-嘧啶基丙基、2-(2-嘧啶基)丙基(未取代的或由氟一取代的)；特別是苯基甲基、苯基乙基、2-嘧啶基丙基、2-(2-嘧啶基)丙基(未取代的或由氟一取代的)或5-氟-2-嘧啶基乙基。
在式I化合物中，特定小組由化合物表示，在所述化合物中，B為在3-或4-位由鹵素或三氟甲基一取代，或在3-或4-位由鹵素(可以相同或不同)二取代的苯基；或者B為在5-或6-位由鹵素、三氟甲基或氰基一取代的2-吡啶基或2-吡啶氧基；或者B為未取代的或在6-位由鹵素或C1-4烷基取代的4-嘧啶基；X為碳或氮原子；R1為三甲基-1-乙內酰脲C2-4烷基或三甲基-3-乙內酰脲C2-4烷基；或者R1為在3-或4-位由鹵素、三氟甲基、硫或C1-3烷基或C1-3烷氧基一取代的苯基或C2-4烷基苯基；或者R1為苯基-SO2NHC2-4烷基；或者R1為2-吡啶基或2-吡啶基C2-4烷基；或者R1為3-吡啶基或3-吡啶基C2-4烷基；或者R1為2-嘧啶-SCH2CH2；或者R1為未取代的或由鹵素、三氟甲基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、2-哌嗪基或2-哌嗪基C2-4烷基一取代的2-或4-嘧啶基C2-4烷基；并且任何烷基都可以是直鏈的或支鏈的。
可以理解，為了避免在空間上不需要的結合，應選擇B和/或R1上特定的取代基和取代基的數目。
各范例化合物代表本發明特定的和獨立的方面。
對于存在光學活性中心的式I化合物，我們討論了所有獨立的光學活性形式和作為本發明特定實例的這些化合物的組合物及其相應的外消旋體。外消旋體可以用已知的方法(參見Advanced OrganicChemistry3rd Editionauthor J March，p104-107)拆分成獨立的光學活性形式，所述方法包括，例如形成具有輔助種的非對映異構體衍生物，其中所述輔助種具有適宜的光學活性，分離，然后將輔助種斷裂。
可以理解，本發明化合物可包含一種或多種不對稱取代的碳原子。在式I化合物中存在一個或多個這些不對稱中心(手性中心)可產生立體異構體，可以理解，在各情況下，本發明包含所有立體異構體，包括對映體和非對映體及其混合物包括其外消旋混合物。
對于存在互變異構體的式I化合物，我們討論了所有獨立的互變異體形式和作為本發明特定實例的這些化合物的組合物。
如上所述，本發明化合物是金屬蛋白酶抑制劑，特別地，它們是MMP13抑制劑。上述關于式I化合物的各適應癥代表本發明獨立的和特定的實例。盡管我們不希望受理論原因的束縛，但認為，相對于任何MMP1抑制劑活性而言，本發明化合物選擇性抑制上述任何適應癥，通過非限制性實施例，它們顯示，其選擇性為任何MMP1抑制活性的100-1000倍。
本發明某些化合物特別用作聚集蛋白聚糖酶抑制劑，即聚集蛋白聚糖降解抑制劑。本發明某些化合物特別用作MMP9和/或MMP12抑制劑。
本發明化合物可以以可藥用鹽的形式提供。這些包括酸加成鹽如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、枸櫞酸鹽和馬來酸鹽以及與磷酸和硫酸形成的鹽。另一方面，適宜的鹽是堿鹽如堿金屬鹽，例如鈉或鉀鹽，堿土金屬鹽，例如鈣或鎂鹽，或有機胺鹽，例如三乙胺鹽。
它們也可以以體內可水解酯的形式提供。這些是在人體水解產生母化合物的可藥用酯。例如，所述酯可通過靜脈內給予試驗動物試驗化合物并隨后測定試驗動物的體液來識別。羧基適宜的體內可水解酯包括甲氧基甲基酯并且羥基適宜的可水解酯包括甲酸酯和乙酸酯，特別是乙酸酯。
為了利用式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯來治療(包括預防性治療)哺乳動物包括人，通常將其按照標準制藥習慣配制成藥物組合物。
因此，另一方面，本發明提供包含式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯和可藥用載體的藥物組合物。
對于需要治療的疾病狀態，本發明藥物組合物可用標準方法給藥，例如，通過口服、局部、非腸道、口腔、鼻、陰道或直腸給藥或通過吸入給藥。為此，本發明化合物可通過本領域已知的方法配制成下列形式，例如片劑、膠囊劑、水或油溶液、懸浮液、乳劑、霜劑、軟膏劑、凝膠、鼻噴霧劑、栓劑、細碎的粉劑或吸入氣霧劑，和非腸道用(包括靜脈內、肌肉內或輸注)滅菌水或油溶液或懸浮液或滅菌乳劑。
除了本發明化合物外，本發明藥物組合物也可以包含一種或多種治療一種或多種上述疾病狀態有價值的藥物，或者與其聯合給予(同時或相繼給予)。
例如，本發明藥物組合物通常這樣給予人，使得所服用的每日劑量為0.5-75mg/kg體重(并且優選0.5-30mg/kg體重)。如果需要，所述每日劑量可以分劑量給予，所服用化合物的精確量和給藥途徑取決于所治療病人的體重、年齡和性別以及按照本領域已知的原則治療的特定疾病狀態。
典型地，單位劑量形式將包含大約1mg-500mg本發明化合物。
因此，另一方面，本發明提供在人或動物體治療方法中使用的本發明式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯。尤其，我們公開了在由MMP13和/或聚集蛋白聚糖酶和/或MMP9和/或MMP12介導的疾病或狀態的治療中的應用。
另一方面，本發明提供治療金屬蛋白酶介導的疾病狀態的方法，它包括給予溫血動物治療有效量式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯。金屬蛋白酶介導的疾病狀態包括關節炎(如骨關節炎)、動脈粥樣硬化、慢性阻塞性肺病(COPD)。
另一方面，本發明提供制備式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯的方法，它包括其中Y為前體或保護形式CONHOH的化合物II的轉化。化合物II可如下制備a)、將化合物III與方便地由化合物V獲得的化合物IV反應；b)、將方便地由化合物VII與化合物VIII反應獲得的化合物VI還原；c)、將化合物VII與化合物IX反應，其中Z為適宜的離去基團。 可以知道，很多有關的起始物是通過商業渠道獲得的或者可在指定文獻中發現。
例如，可通過下列方法評價本發明化合物。分離酶的分析基質金屬蛋白酶類包括例如MMP13可以如Knauper等人[V.Knauper等人，(1996)The BiochemicalJournal 2711544-1550(1996)]所述表達和提純重組人前MMP13。所提純的酶可如下用于監測抑制劑的活性在21℃下，將提純的前MMP13用1mM氨基苯汞酸(APMA)活化20小時；將活化的MMP13(每次分析11.25ng)在35℃下，在抑制劑存在或不存在下，使用合成底物7-甲氧基香豆素-4-基乙酰基.Pro.Leu.Gly.Leu.N-3-(2，4-二硝基苯)-L-2，3-二氨基丙酰基.Ala.Arg.NH2，在分析緩沖液(0.1M Tris-HCl，pH＝7.5，包含0.1M NaCl，20mM CaCl2，0.02mM ZnCl和0.05％(w/v)Brij 35)中溫育4-5小時。通過在λex 328nm和λem 393nm下測定熒光性來測定活性。如下計算抑制百分數％抑制等于[熒光加抑制劑-熒光背景]/[熒光減抑制劑-熒光背景]。
例如，如C.Graham Knight等人，(1992)FEBS Lett.296(3)263-266所述，可通過使用最適于特定MMP的底物和條件，用類似的方法來表達和提純其他前MMPs。Adamalysin類包括例如TNF轉換酶化合物抑制前TNFα轉換酶的能力可利用部分提純的分離酶的分析來評定，所述酶由THP-1膜獲得，如K.M.Mohler等人，(1994)Nature370218-220所述。通過在26℃下，將部分提純的酶在試驗化合物存在或不存在下，使用底物4’，5’-二甲氧基-熒光素基Ser.Pro.Leu.Ala.Gln.Ala.Val.Arg.Ser.Ser.Ser.Arg.Cys(4-(3-琥珀酰亞胺-1-基)-熒光素)-NH2，在分析緩沖液(50mM Tris HCl，pH＝7.4，包含0.1％(w/v)Triton X-100和2mM CaCl2)中溫育18小時來測定提純的酶的活性和抑制作用。除了使用λex 490nm和λem530nm外，如MMP13測定抑制量。底物如下合成。通過標準方法，包括用Foc-氨基酸和O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸鹽(HBTU)作為偶聯劑和至少4-或5-倍過量的Fmoc-氨基酸和HBTU，將底物的肽部分通過手工或自動的肽合成器裝配到Fmoc-NH-Rink-MBHA-聚苯乙烯樹脂上。Ser1和Pro2雙倍偶聯。使用下列側鏈保護策略；Ser1(But)，Gln5(三苯甲基)，Arg8，12(Pmc或Pbf)，Ser9，10，11(三苯甲基)，Cys13(三苯甲基)。裝配后，通過在DMF中處理Fmoc-肽基-樹脂除去N-端Fmoc保護基。所得到的氨基-肽基-樹脂通過在70℃下，用1.5-2當量預先經二異丙基碳化二亞胺和1-羥基苯并三唑的DMF液活化的4’，5’-二甲氧基-熒光素-4(5)-羧酸[Khanna & Ullman，(1980)Ahal Biochem.108156-161]處理1.5-2小時進行乙酰化。然后，通過用含5％水和5％三乙基硅烷的三氟乙酸處理，將二甲氧基熒光素-肽同時脫保護并從樹脂上裂解下來。通過蒸發，用乙醚研磨和過濾分離二甲氧基熒光素-肽。將所分離的肽與4-(N-馬來酰亞胺基)-熒光素在含二異丙基乙胺的DMF中反應，產物通過RP-HPLC純化并最后通過冷凍干燥從乙酸水溶液中分離。通過MALDI-TOF MS和氨基酸分析來確定產物的特性。中性底物例如，可使用以公開E.C.Arner等人，(1998)Osteoarthritisand Cartilage 6214-228；(1999)Journal of BiologicalChemistry，274(10)，6594-6601為基礎的方法和其中所描述的抗體來分析本發明化合物作為聚集蛋白聚糖降解抑制劑的活性。可如T.Cawston and A.Barrett(1979)Anal.Biochem.99340-345所述來測定化合物作為膠原酶抑制劑的效力。在基于細胞/組織活性試驗中作為抑制膜脫落酶(sheddase)(如TNF轉換酶)藥物的金屬蛋白酶活性的抑制作用基本上如K.M.Mohler等人，(1994)Nature 370218-220所述，可通過使用ELISA檢測所釋放的TNF，在THP-1細胞中評定本發明化合物抑制細胞處理TNFα產生的能力。用類似的方式，通過使用適宜的細胞系并用適宜的抗體檢測脫落蛋白來測試其他膜分子如N.M.Hooper等人(1997)Biochem.J.321265-279中所描述的那些膜分子的加工和脫落。作為抑制基于細胞侵襲性藥物的試驗如A.Albini等人，(1987)Caneer Research 473239-3245所述，可在侵襲分析中測定本發明化合物抑制細胞遷移的能力。作為抑制全血TNF脫落酶活性藥的試驗在用LPS刺激TNFα釋放的人全血分析中評定本發明化合物抑制TNFα產生的能力。將從志愿者獲得的肝素化(10單位/ml)人血用培養基(RPMI 1640+碳酸氫鹽，青霉素，鏈霉素和葡糖胺)稀釋1∶5并在加入20μl LPS(E.Coli.0111B4；最終濃度為10μg/ml)前，在37℃潮濕的(5％CO2/95％空氣)細菌培養器中，將該稀釋血(160μl)與20μl試驗化合物(一式三份)在DMSO或適宜的載體中培養30分鐘。每次分析包括單獨與培養基一起培養的稀釋血對照(6孔/平板)或已知的作為標準樣品的TNFα抑制劑。然后，將培平板在37℃下培養6小時(潮濕的細菌培養器)，離心(2000rpm，10分鐘；4℃)，收獲血漿(50-100μl)并在隨后通過ELISA分析TNFα濃度前，在-70℃下貯存在96孔平板中。作為體外抑制軟骨降解藥的試驗可基本上如K.M.Bottomley等人，(1997)Biochem J.323483-488所述評定本發明化合物抑制軟骨中聚集蛋白聚糖或膠原組分降解的能力。藥效學試驗采用體外藥效學試驗來評價本發明化合物的清除特性和生物利用度，該試驗利用了上述合成底物分析或HPLC或質譜分析。這是可用于在一系列物種中評價化合物清除率的一般試驗。靜脈內或口服給予動物(例如大鼠、狨)化合物的可溶性制劑(如20％ w/v DMSO，60％w/vPEG400)并且在接下來的時間點(例如5，15，30，60，120，240，480，720，1220分鐘)，將血樣從適宜的容器中取出加到10U肝素中。通過離心得到血漿并用乙腈(80％w/v最終濃度)沉淀血漿蛋白。在-20℃下放置30分鐘后，通過離心沉積血漿蛋白并用Savant speed vac將上清液部分蒸發至干。將沉積物在分析緩沖液中重新構成并隨后利用合成底物分析來分析化合物的含量。簡單地說，作進行評價化合物的濃度-反應曲線。評定重新構成血漿的系列稀釋液的活性并且通過使用濃度-反應曲線和考慮總血漿稀釋因素來計算原血漿樣品中存在的化合物的活性和量。體內評定作為抗TNF藥的試驗用大鼠評定本發明化合物作為體外TNFα抑制劑的能力。簡單地說，通過適宜的途徑，例如口服(p.o.)、腹膜內(i.p.)、皮下(s.c.)給予雄性Wistar Alderley Park(AP)鼠(180-210g)化合物(6只鼠)或藥物載體(10只鼠)。90分鐘后，用高濃度CO2將大鼠處死并通過后腔靜脈放血得到5單位肝素鈉/ml血的血樣。將血樣立即放到冰上并在4℃，以2000rpm的速度離心10分鐘，將所收獲的血漿在-20℃下冷凍以供分析它們對LPS-刺激的人血產生TNFα的作用。將大鼠血漿樣品解凍并將175μl各樣品加到96U孔平板的固定樣式的孔中。然后，將50μl肝素化的人血加到各孔中，混合并將平板在37℃(潮濕的細菌培養器)下培養30分鐘。將LPS(25μl；最終濃度10μg/ml)加到所述孔中并再繼續培養5.5小時。對照孔單獨與25μl培養基一起培養。然后，將平板在2000rpm下離心10分鐘，將200μl上清液轉移到96孔平板中并在-20℃下冷凍以供隨后通過ELISA分析TNF濃度時使用。
通過專用軟件分析數據來計算各化合物/劑量 作為抗關節炎藥的試驗如D.E.Trentham等人，(1977)J.Exp.Med.146，857所述，在膠原誘導的關節炎(CIA)中測試化合物作為抗關節炎藥的活性。在該模型中，當在Freunds不完全配料中給予時，酸可溶性天然II型膠原引起大鼠多關節炎。可使用類似的條件誘導老鼠和靈長目動物關節炎。作為抗癌藥的試驗基本上如I.J.Fidler(1978)Methods in Cancer Research15399-439所述，例如，使用B16細胞系(如B.Hibner等人，Abstract283 p75 10thNCI-EORTC Symposium，Amsterdam June 16-19 1998)來評定化合物作為抗癌藥的活性。
下面將通過下列實施例說明但不限制本發明。實施例1N-羥基-3-[4-氟苯基哌啶-1-基磺酰基]-2-芐基丙酰胺 將包含10％披鈀碳(8mg)的3-[4-氟苯基哌啶-1-基磺酰基]-2-芐基-N-芐氧基丙酰胺(75mg)的乙醇(2ml)溶液在氫氣罐下氫化。過濾催化劑并真空除去溶劑。殘渣通過Bond-洗脫柱，用乙酸乙酯和異己烷的混合物(1∶1)洗脫，得到標題化合物的白色泡沫物，收率29mg。
M+H＝421.1H nmr(300MHz，d6-DMSO+d3AcOD)d 1.45-1.65(m，2H，)；1.7-1.8(m，2H，)；2.5-2.6(m[partly obscured by solvent]，2H，)；2.65-2.9(m，5H，)；3.4-3.5(m，1H，)；3.5-3.6(m，2H，)；7.1(dd，2H，)；7.2-7.3(m，7H，)3-[4-氟苯基哌啶-1-基磺酰基]-2-芐基-N-芐氧基丙酰胺在0℃下，將3-氯磺酰基-2-芐基-N-芐氧基丙酰胺(720mg)的氯甲烷(2ml)溶液滴加到4-氟苯基哌啶(320mg)和三乙胺(306μl)的氯甲烷(6ml)溶液中。將該反應混合物攪拌14小時，用水洗滌并通過相分離紙過濾和蒸發至干。殘渣通過Bond-洗脫柱色譜層析并用乙酸乙酯和異己烷的混合物(1∶4)作為洗脫劑進行純化，得到標題化合物的白色固體，收率75mg。
M+H＝511.1H nmr(300MHz，CDCl3)d1.65-1.85(2×m，4H)；2.45-2.6(m，1H，)；2.65-3.1(m，6H)；3.6(dd，1H)；3.75-3.85(m，2H)；4.5(Abq，0.5H)；4.65-4.8(m，0.5H)；4.8(Abq，0.5H，)；4.95-5.1(m，0.5H)；6.9-7.0(m，2H)；7.1-7.15(m，2H)；7.15-7.2(m，2H)；7.3-7.4(m，8H)3-氯磺酰基-2-芐基-N-芐氧基丙酰胺在0℃下，將將氯通入充分攪拌下的3-乙酰基硫-2-芐基-N-芐氧基丙酰胺(750mg)的氯甲烷(5ml)和水(5ml)的混合物中。當反應混合物變黃時停止氯氣流并連續攪拌14小時。將反應混合物用氬氣凈化并用氯甲烷(3×10ml)提取。將合并的提取液干燥并除去溶劑，得到標題化合物的黃色油狀物，收率725mg。該化合物不需要進一步確定特性即可使用。3-乙酰基硫-2-芐基-N-芐氧基丙酰胺將N-芐氧基-2-芐基丙烯酰胺(0.61g)和硫羥乙酸(0.32ml)的混合物攪拌并在70℃下加熱3小時。將甲苯(5ml)加到該反應混合物中并蒸發至干，得到標題化合物的樹膠(M+H＝344)，該化合物不需要進一步確定特性即可使用。N-芐氧基-2-芐基丙烯酰胺將一滴DMF加到2-芐基丙烯酸(0.4g)(CAS No 5669-19-2)和草酰氯(0.22ml)的氯甲烷(5ml)混合物中并將該混合物攪拌30分鐘。除去溶劑并加入氯甲烷(5ml)，然后再依次除去。將殘渣溶解在氯甲烷(2ml)中并將該溶液加到O-芐基羥胺鹽酸鹽(0.39g)和三乙胺(0.69ml)的氯甲烷溶液中。將該混合物攪拌1小時，用水(2×10ml)洗滌并干燥。除去溶劑后得到的殘渣通過Bond-洗脫柱，先用氯甲烷洗脫，然后用乙酸乙酯(達10％乙酸乙酯/氯甲烷)梯度洗脫，得到標題化合物的樹膠，收率420mg。
M+H＝268.1H-NMR(CDCl3)3.6(s，2H)，4.83(s，2H)，5.25(s，1H)，5.58(s，1H)，7.1-7.37(m，10H)，8.1(s，1H).實施例2N-羥基-3-[4-氟苯基哌嗪-1-基磺酰基]-2-芐基丙酰胺 將包含10％披鈀碳(30mg)的3-[4-氟苯基哌嗪-1-基磺酰基]-2-芐基-N-芐氧基丙酰胺(234mg)的甲醇溶液在氫氣罐下氫化3.5小時。通過硅藻土過濾除去催化劑并將濾液蒸發至干，得到標題化合物，收率165mg。
M+H＝422.1H-NMR(CDCl3)2.8-3.6(m，14H)，6.8(dd，2H)，6.9(t，2H)，7.4-7.9(m，5H).3-[4-氟苯基哌嗪-1-基磺酰基]-2-芐基-N-芐氧基丙酰胺將3-[N-(4-氟苯基)哌嗪-1-基磺酰基]-2-芐基丙酸(203mg)、四溴化碳(182mg)、三乙胺(0.209ml)、O-芐基羥胺(76mg)和聚合物支撐三苯基膦(500mg)的氯甲烷(5ml)混合物攪拌14小時。將反應混合物用氯甲烷(10ml)稀釋并加入氨基甲基化聚苯乙烯(1g)，將該混合物攪拌4小時，通過硅石(2g)過濾，用氯甲烷洗滌。濾液蒸發至干，殘渣通過在硅石上色譜層析，用遞增乙酸乙酯量的乙酸乙酯/己烷(最初5％增至50％)洗脫。得到標題化合物的澄清樹膠，237mg。
M-H＝510.1H-NMR(CDCl3)2.75(b，1H)，2.95(m，3H)，3.1(b，4H)，3.35(b，4H)，3.6(m，1H)，4.6(d，1H)，4.8(d，1H)，6.85(q，2H)，6.95(t，2H)，7.15-7.35(m，10H)，8.0(b，1H).3-[N-(4-氟苯基)哌嗪-1-基磺酰基]-2-芐基丙酸將氫氧化鋰(14ml 1M水溶液)加到3-[N-(4-氟苯基)哌嗪-1-基磺酰基]-2-芐基-丙酸乙酯(1g)的THF(20ml)溶液中并充分攪拌4小時。將反應混合物用鹽酸(10ml 1.5M)酸化至pH1并用乙酸乙酯(3×25ml)提取。將乙酸乙酯提取液用水洗滌并干燥。蒸發至干得到的殘渣與乙醚一起研磨，得到標題化合物的白色固體，收率219mg。
1H-NMR(CDCl3)2.9(dd，1H)，3.0(dd，1H)，3.1(t，1H)，3.15(dd，1H)，3.25(m，1H)，3.35(m，2H)，3.45(dd，1H)，6.85(dd，2H)，6.95(t，2H)，7.2-7.25(m，5H).3-[N-(4-氟苯基)哌嗪-1-基磺酰基]-2-芐基丙酸乙酯將N-(4-氟苯基)-哌嗪(9.01g)和三乙胺(7.0ml)的氯甲烷(150ml)混合物以使內部溫度不超過-5℃的速度滴加到冷卻(-15℃)下的2-乙氧基羰基-3-苯基丙磺酰氯(15.0g)的氯甲烷(75ml)溶液中。將該混合物攪拌15分鐘并用稀HCl(15ml 1.5M)淬滅，用水(2×100ml)和鹽水(50ml)洗滌。將提取水溶液用氯甲烷(10ml)洗滌并將合并的有機提取液干燥。除去溶劑得到的殘渣通過在硅石上色譜層析，用乙酸乙酯和異己烷(1∶5)的混合物洗脫進行純化，得到標題化合物，收率12.02g。
M+H＝435(434).1H-NMR(CDCl3)1.2(t，3H)，2.85-3.0(b，2H)，3.0-3.2(b，5H)，3.25(b，1H)，3.35(b，2H)，3.45(dd，1H)，4.15(q，2H)，6.85(b，2H)，7.0(b，2H)，7.15-7.4(m，5H).2-乙氧基羰基-3-苯基丙磺酰氯將氯氣通入2-(乙酰基硫甲基)-3-苯基丙酸乙酯(16g)中直至反應混合物變成黃色。將反應混合物用氮氣凈化并減壓濃縮。殘渣用氯甲烷(2×200ml)提取，用鹽水(50ml)洗滌并干燥，得到標題化合物的黃色油狀物，收率15.0g，不需要進一步確定特性即可使用。
1H-NMR(CDCl3)1.2(t，3H)，2.95(dd，1H)，3.2(dd，1H)，3.45(q，1H)，3.65(dd，1H)，4.2(m，3H)，7.1-7.4(m，5H).2-(乙酰基硫甲基)-3-苯基丙酸乙酯將2-芐基丙烯酸乙酯(CAS No.20593-63-9)(20g)和硫羥乙酸(14.2g)在70℃下加熱14小時。將該混合物減壓濃縮，將殘渣通過硅石(50g)，用乙酸乙酯/異己烷混合物(1∶9)洗脫，得到標題化合物的黃色油狀物，收率31g。1H-NMR(CDCl3)1.15(t，3H)，2.3(s，3H)，2.8-3.2(m，5H)，4.1(q，2H)，7.1-7.3(m，5H).實施例3[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-N-羥基碳酰胺-4-苯基丁烷 將[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-羧酸-4-苯基丁烷(490mg)懸浮在二氯甲烷(5ml)中，冷卻至5℃并加入DMF(2μl)，然后以保持溫度在5-7℃的速度加入草酰氯(0.43ml)。在該溫度下保持1小時后，將該混合物蒸發至干并與甲苯共沸得到黃色油狀物。將該油狀物溶解在二氯甲烷(5ml)中并在5℃加到冷卻的50％羥胺(0.3ml)的THF(10ml)水溶液中。10分鐘后，將該混合物蒸發至干并在乙酸乙酯和水之間分配。將有機相干燥并蒸發至干。與乙醚一起研磨得到[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-N-羥基碳酰胺-4-苯基丁烷的固體(300mg)。NMR CDCl3d7.3-6.8，(m，9H)；3.5(m 1H)；3.1，(m，4H)；3.3，(m，4H)；2.8-2.5(m，4H)；1.9-.2.2.(br，2H)；Mass spec.MH+ 436[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-羧酸-4-苯基丁烷將[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-乙氧基羰基-4-苯基丁烷(1.7g)溶解在THF(25ml)和水(8ml)的混合物中并加入氫氧化鋰一水合物(190mg)。將該混合物在室溫下攪拌18小時，然后蒸發至幾乎干。加入1.0M氫氧化鋰溶液(200ml)并用乙醚(100ml)提取該溶液。將水相用枸櫞酸酸化至pH4并用乙酸乙酯提取。將提取液干燥并濃縮，得到[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-羧酸-4-苯基丁烷(540mg)。NMR DMSO d 7.3-6.8，(m，9H)；3.6(m 1H)；3.5，(m，1H)；3.4，(m，4H)；3.15，(m，4H)；2.8(m，2H)；2.7，(m，2H)；1.9-.2.2.(br，2H)；Mass spec.MH+ 421[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-乙氧基羰基-4-苯基丁烷在30-35℃下，將E-[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-乙氧基羰基-4-苯基丁-1-烯(10g，0.022M)溶解在四氫呋喃(50ml)和乙醇(500ml)中。分次加入硼氫化鈉(2.09g，0.055M)，保持溫度低于35℃。將該混合物攪拌15分鐘，加入水(100ml)并用1M枸櫞酸溶液酸化至pH4。將該混合物蒸發至干，將殘渣在二氯甲烷和水之間分配。將合并的有機相干燥并蒸發至干。將殘渣通過閃式柱色譜層析純化，用異己烷/乙酸乙酯3∶1洗脫，得到[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-乙氧基羰基-4-苯基丁烷的白色固體(1.9g)。NMRd 7.3-6.8，(m，9H)；4.2，(m，2H)；3.5，(m，1H)；3.4，(m，4H)；3.15，(m，4H)；3.0，(m，2H)；2.7，(m，2H)；2.2-2.1，(br，2H)；1.3，(t，3H)..MSMH+ 449.E-[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-乙氧基羰基-4-苯基丁-1-烯在氬氣環境下，將N-(4-氟苯基)-N’-(甲磺酰基)哌嗪(12.9g，0.05M)溶解在無水四氫呋喃(500ml)中并冷卻至-10℃。在-10℃下滴加1.0M雙(三甲硅烷基)酰胺鋰的四氫呋喃(100ml，0.1M)溶液，攪拌30分鐘，然后加入氯代三甲基硅烷(5.45g，6.36ml，0.05M)，保持溫度在-10℃。在-10℃下再攪拌30分鐘后，滴加2-氧-苯基丁酸乙酯(10.3g，9.5ml，0.05M)的四氫呋喃(20ml)溶液。在-10℃下攪拌1小時后，將反應用飽和氯化銨溶液淬滅。用乙酸乙酯稀釋后，收集有機相，干燥并蒸發至干。將殘余的油狀物，即E和Z異構體的混合物通過在硅膠上色譜層析，用異己烷/乙酸乙酯3∶1洗脫進行純化，得到E-[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-乙氧基羰基-4-苯基丁-1-烯低極性的異構體(6.6g)。NMRd 7.3-6.6，(m，9H)；5.8，(s 1H)；4.2，(m，2H)；3.0(m，4H)；2.9，(m，4H)；2.7，(m，2H)；2.55，(m，2H)；1.15，(t，3H)MSMH+ 447，M+Na 469，MH- 445N-(4-氟苯基)-N’-(甲磺酰基)哌嗪 在0℃下，向1-(4-氟苯基)哌嗪(35g，194mmol)和吡啶(17.5ml)的無水二氯甲烷(200ml)溶液中滴加甲磺酰氯(20ml，258mmol)。將該混合物在室溫下攪拌3小時。將該混合物用水洗滌并用二氯甲烷(2×100ml)提取。有機層用MgSO4干燥并真空蒸發。將殘渣研磨并用甲醇洗滌，得到1-(4-氟苯基)-4-(甲磺酰基)哌嗪(39.35g)的白色結晶。1H NMR(CDCl3)7.00(m，2H)，6.90(m，2H)，3.40(m，4H)，3.20(m，4H)，2.83(s，3H).實施例43{[4-(5-氯吡啶-2-基)哌嗪基]磺酰基}-N-羥基-2-苯基丙酰胺 在0℃和氬氣環境下，將3{[4-(5-氯吡啶-2-基)哌嗪基]磺酰基}-2-苯基丙酸(416mg，1.02mmol)的DCM(3.5ml)溶液與DMF(1滴)一起攪拌。滴加草酰氯(0.266ml，3.05mmol)并將反應物攪拌30分鐘。將混合物蒸發至干并與甲苯共沸。將所得到的黃色油狀物溶解在DCM(2.5ml)中并在0℃下滴加到羥胺(50％水溶液，0.333ml)的THF(2.5ml)溶液中。在5℃下攪拌30分鐘，然后真空蒸發得到樹膠。將殘渣溶解在EtOAC中，用水(×2)洗滌，然后用Na2SO4干燥并真空蒸發，得到淡黃色泡沫物(0.250g)。
1H NMR(DMSO)10.85(s，1H)，8.92(s，1H)，8.10(d，1H)，7.62(dd，1H)，7.40-7.18(m，5H)，6.90(d，1H)，4.40-3.80(m，2H)，3.56(m，3H)，3.48(m，1H)，3.25(m，1H)，3.20(m，3H)；MS(ES+)425.2(MH+).
如下制備起始物在氬氣環境下，將2-(N-甲磺酰基哌嗪)-5-氯吡啶(1.0g，3.63mmol)溶解在無水THF(50ml)中并冷卻至-10℃，然后加入Li(TMSA)(3.8ml 1.0M的THF溶液，3.81mmol)。將該混合物在-10℃下攪拌10分鐘，然后滴加預先制備的溶液[→-在-10℃和氬氣環境下用Li(TMSA)(6.1ml 1.0M的THF溶液，6.10mmol)處理的溴苯乙酸(1.24g，5.81mmol)的THF(40ml)溶液]。將懸浮液混合物在-10℃下攪拌30分鐘，然后放置至室溫。用氯化銨水溶液淬滅并用濃HCl酸化至pH2，然后用乙酸乙酯(×3)提取。有機層用NaSO4干燥并真空蒸發得到黃色樹膠。將該樹膠溶解在少量EtOAc中并用Et2O沉淀。過濾并用Et2O洗滌得到白色固體(0.522g)。
1H NMR(DMSO)7.95(d，1H)，7.45(dd，1H)，7.22-7.08(m，5H)，6.75(d，1H)，3.82-3.74(m，2H，)，3.38(m，4H)，3.23(m，1H)，3.04(m，4H)，2.50(m，1H)；MS(ES+)410.4(MH+).2-(N-甲磺酰基哌嗪)-5-氯吡啶 將5-氯-2-哌嗪基吡啶(95.1g，0.48M)溶解在CH2Cl2(1000ml)中并加入三乙胺(67.6ml，0.48M)。冷卻至0-5℃并緩慢地加入甲磺酰氯(37.4ml，0.48M)的CH2Cl2(50ml)溶液。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜。用H2O(300ml)洗滌反應混合物。收集有機相，用MgSO4干燥，過濾并蒸發至干，得到白色固體。將該固體在60℃下在乙醇(500ml)中攪拌。冷卻并收集白色固體。在40℃下真空干燥過夜。收率97.3g。NMR(CDCl3)d 8.1，d 1H；7.4，dd 1H；6.6，d 1H；3.7，m 4H；3.3，m 4H；2.8，s 3H.MS Found MH+ 2765-氯-2-哌嗪基吡啶 將2，5-二氯吡啶(148g，1.0M)溶解在無水二甲基乙酰胺(1000ml)中并加入無水哌嗪(258g，3.0M)。在120℃下攪拌4小時。在指形冷凍器上冷卻并在高真空下蒸發。殘渣在乙酸乙酯(3000ml)中攪拌。過濾固體，用乙酸乙酯(500ml)洗滌。合并的乙酸乙酯濾液用H2O洗滌，用MgSO4干燥，過濾并蒸發，得到黃色固體。收率182.5g。NMR(CDCl3)d 8.1，d 1H；7.4 dd 1H；6.6，d 1H；3.5，m 4H；3.0，m 1H；MS found MH+ 198實施例5(R，S)-N-羥基-3-[4-氟苯基哌嗪-1-基磺酰基]-2-[(R，S)-2-苯基丙基]丙酰胺用實施例1的方法制備化合物。下面列出中間體和終產物。 實施例6用實施例4的方法制備下列化合物。
R1 M+H4-Cl-PhCH2 473/475Ph(CH2)2 453/4554-Cl-Ph 459/4613，4-二氯-Ph 493/4952-嘧啶基(CH2)3 469實施例7用實施例4的方法制備下列化合物。 R1 M+HPh(CH2)2 468/470
權利要求
1.式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯 其中B為在3-或4-位由鹵素或三氟甲基一取代的，或在3-或4-位由鹵素(可以相同或不同)二取代的苯基；或者B為在4-、5-或6-位由鹵素、三氟甲基、氰基或C1-4烷基一取代的2-吡啶基或2-吡啶氧基；或者B為在6-位由鹵素或C1-4烷基任選取代的4-嘧啶基；X為碳或氮原子；R1為三甲基-1-乙內酰脲C2-4烷基或三甲基-3-乙內酰脲C2-4烷基；或者R1為在3-或4-位由鹵素、三氟甲基、硫或C1-3烷基或C1-3烷氧基一取代的苯基或C2-4烷基苯基；或者R1為苯基-SO2NHC2-4烷基；或者R1為2-吡啶基或2-吡啶基C2-4烷基；或者R1為3-吡啶基或3-吡啶基C2-4烷基；或者R1為2-嘧啶-SCH2CH2；或者R1為由鹵素、三氟甲基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、由鹵素取代的2-哌嗪基或由鹵素任選取代的2-哌嗪基C2-4烷基之一任選一取代的2-或4-嘧啶基C2-4烷基。
2.權利要求1的化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯，其中B為在3-或4-位由鹵素或三氟甲基一取代的，或在3-或4-位由鹵素(可以相同或不同)二取代的苯基；或者B為在5-或6-位由鹵素、三氟甲基或氰基一取代的2-吡啶基或2-吡啶氧基；或者B為在6-位由鹵素或C1-4烷基任選取代的4-嘧啶基；X為碳或氮原子；R1為三甲基-1-乙內酰脲C2-4烷基或三甲基-3-乙內酰脲C2-4烷基；或者R1為在3-或4-位由鹵素、三氟甲基、硫或C1-3烷基或C1-3烷氧基一取代的苯基或C2-4烷基苯基；或者R1為苯基-SO2NHC2-4烷基；或者R1為2-吡啶基或2-吡啶基C2-4烷基；或者R1為3-吡啶基或3-吡啶基C2-4烷基；或者R1為2-嘧啶-SCH2CH2；或者R1為由鹵素、三氟甲基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、2-哌嗪基或2-哌嗪基C2-4烷基之一任選一取代的2-或4-嘧啶基C2-4烷基。
3.權利要求1的化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯，其中B選自4-氯苯基、4-氟苯基、4-溴苯基、4-三氟苯基、5-氯-2-吡啶基、5-溴-2-吡啶基、5-氟-2-吡啶基、5-三氟甲基-2-吡啶基、5-氰基-2-吡啶基、5-甲基-2-吡啶基。
4.權利要求3的化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯，其中B為4-氟苯基、5-氯-2-吡啶基或5-三氟甲基-2-吡啶基。
5.上述任一權利要求的化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯，其中X為氮原子。
6.上述任一權利要求的化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯，其中R1選自苯基甲基、苯基乙基、苯基丙基、3-氯苯基、4-氯苯基、3-吡啶基、2-吡啶基丙基、2-或4-嘧啶基乙基(未取代的或由氟一取代的)、2-或4-嘧啶基丙基、2-(2-嘧啶基)丙基(未取代的或由氟一取代的)。
7.權利要求6的化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯，其中R1為苯基甲基、苯基乙基、2-嘧啶基丙基、2-(2-嘧啶基)丙基(未取代的或由氟一取代的)或5-氟-2-嘧啶基乙基。
8.權利要求1的化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯，其中以式I化合物作為本文的范例。
9.權利要求8的化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯，其中所述化合物選自(R，S)-N-羥基-3-[4-氟苯基哌嗪-1-基磺酰基]-2-[(R，S)-2-苯基丙基]丙酰胺，3-{[4-(5-氯吡啶-2-基)哌嗪基]磺酰基}-N-羥基-2-苯基丙酰胺，[(4-氟苯基)-4-(哌嗪基磺酰基)]-2-N-羥基碳酰胺-4-苯基丁烷，N-羥基-3-[4-氟苯基哌嗪-1-基磺酰基]-2-芐基丙酰胺，N-羥基-3-[4-氟苯基哌嗪-1-基磺酰基]-2-芐基丙酰胺。
10.一種藥物組合物，它包含權利要求1的式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯和可藥用載體。
11.在人或動物體的治療方法中使用的權利要求1的式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯。
12.用作治療劑的權利要求1的式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯。
13.治療金屬蛋白酶介導的疾病狀態的方法，它包括給予溫血動物治療有效量式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯。
14.權利要求13的治療金屬蛋白酶介導的疾病狀態的方法，它包括治療由一種或多種下列酶MMP13，聚集蛋白聚糖酶，MMP9，MMP12介導的疾病狀態。
15.式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解前體在制備治療由一種或多種金屬蛋白酶介導的疾病的藥物中的應用。
16.式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解前體在制備治療關節炎的藥物中的應用。
17.式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解前體在制備治療動脈粥樣硬化的藥物中的應用。
18.在藥物制劑中使用式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解前體在制備治療慢性阻塞性肺病的藥物中的應用。
19.制備式I化合物或其可藥用鹽或其體內可水解酯的方法，它包括將式II化合物轉化為式I化合物 其中Y為CONHOH的前體或保護形式，然后可有可無地形成式I化合物的可藥用鹽或其體內可水解酯。
全文摘要
本發明涉及用作金屬蛋白酶，特別是用作MMP13抑制劑的式(I)化合物。
文檔編號A61K31/496GK1404474SQ0180538
公開日2003年3月19日 申請日期2001年2月15日 優先權日2000年2月21日
發明者B·C·巴拉姆, R·I·多維爾, N·J·紐科姆, H·塔克, D·瓦特森 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司