專利名稱：羥基喜樹堿葡聚糖納米粒的制備方法
技術領域：
本發明屬于羥基喜樹堿納米粒的制備，具體涉及載體為葡聚糖的羥基喜樹堿納米粒的制備方法。
背景技術：
羥基喜樹堿為目前臨床上常用的抗腫瘤藥物，該藥物與適當載體制成納米粒后主要用于肝癌，肺癌的靶向治療。
羥基喜樹堿屬于細胞毒類藥物，它在殺死癌細胞的同時，對正常細胞有明顯的影響，其臨床副作用主要表現為抑制造血系統等。
目前臨床上用于治療肝癌、肺癌的藥物，絕大多數的毒副作用較強。其主要原因是因為這些藥物在體內的分布沒有選擇性，除了對癌變的細胞有殺滅作用之外，對正常細胞的代謝也同樣有影響，其結果是產生不必要副作用。使患者的治療難以繼續進行，導致癌癥病人生存質量下降，死亡率增加。
目前國內有用共沉淀法制備，免疫磁性納米粒報導，該法是將葡聚糖與FeCl3在NH4OH中聚合而形成磁性葡聚糖納米粒，這種方法的缺點是產品中含有鐵離子，患者使用肝臟鐵化。
發明內容
本發明的目的在于提供一種先將葡聚糖在堿性溶液中合成納米粒，再在有機溶劑中吸附羥基喜樹堿的制備方法，以克服上述制備方法存在的缺陷。
本發明通過如下制備步驟實現的(1)葡聚糖的蒸餾水溶液用堿調pH值8～12；(2)向上述溶液加入有機溶劑攪拌，使液體成乳白色混濁態；(3)將羥基喜樹堿水溶液加堿調pH值9～10；(4)將步驟(3)液體加入步驟(2)的溶液中，加堿調pH值11～12；(5)將步驟(4)的液體用酸調pH值4～8；
(1)將步驟(5)的液體進行超聲波處理1～10分鐘，靜置，離心去上清液，蒸餾水洗滌，得羥基喜樹堿葡聚糖納米粒。
葡聚糖與羥基喜樹堿的重量份比為1～100∶1～100。羥基喜樹堿的水溶液為1～100重量分羥基喜樹鹼溶于5～100重量分蒸餾水中。
本發明以葡聚糖為載體將羥基喜樹堿制成50～300nm超微粒。其載藥量較高，穩定性好。經靜脈給藥后，對肝臟有較高的選擇性，而其他器官中分布的量較少，從而達到提高羥基喜樹堿的抗癌效果，而減少對正常細胞的影響，最終實現提高抗腫瘤藥物治療的順應性，提高患者的生存質量，延長生存時間的效果。
附圖 羥基喜樹堿葡聚糖納米粒的制備流程圖具體實施方式
如附圖所示1.稱取葡聚糖234.1mg，溶入10ml蒸餾水中，用NaOH調節PH為9.18。
2.將10ml葡聚糖溶液緩緩注入40ml丙酮或三氯甲烷液中(磁力攪拌，70±1℃水浴加熱)。注入時即產生白色混濁，注入完畢后，在攪拌25秒的過程中，溶液呈乳白色混濁，仍可見細小混濁。
3.稱取6.3mg羥基喜樹堿，溶入6.3ml水中，滴加NaOH調pH值為9.5。再將此液加入葡聚糖液中，測PH值為11.80，再用HCL調PH值為6.86，溶液黃色變淺，可見大量細小混濁產生。
4.將上述混和液超聲振蕩5秒，靜置于室溫下24h。可見大量混濁產生，并保持穩定懸浮。
5.高速2000n/min離心棄去上清液，加新鮮蒸餾水洗滌二次，得羥基喜樹堿葡聚糖納米粒。
測定結果上述所得樣品，經透新電鏡觀察，并照像，粒徑為80～350nm，其中80～120ng占6％ 120～160nm占13％160～200nm占19％200～240nm占24％240～280nm占20％ 280～320nm占14％＞320nm占4％
取羥基喜樹鹼葡聚糖納米粒100mg溶于蒸餾水中，經酸處理后，用紫外分光光度法，測得吸收度A值，將A代入回歸方程計算濃度，計算得載量為47.6％。
應用相分離法所制得的納米粒成球形，載藥量較高，分散性好。
權利要求
1.羥基喜樹堿葡聚糖納米粒的制備方法，其特征是(2)葡聚糖的蒸餾水溶液用堿調pH值8～12；(3)向上述溶液加入有機溶劑攪拌，使液體成乳白色混濁態；(4)將羥基喜樹堿水溶液加堿調pH值9～10；(5)將步驟(3)液體加入步驟(2)的溶液中，加堿調pH值11～12；(6)將步驟(4)的液體用酸調pH值4～8；(7)將步驟(5)的液體進行超聲波處理1～10分鐘，靜置，離心去上清液，蒸餾水洗滌，得羥基喜樹堿葡聚糖納米粒。
2.如權利要求1所述羥基喜樹堿葡聚糖納米粒的制備方法，其特征是步驟(2)中的有機溶劑為丙酮或三氯甲烷。
3.如權利要求1所述羥基喜樹堿葡聚糖納米粒的制備方法，其特征是葡聚糖與羥基喜樹堿的重量份比為1～100∶1～100。
4.如權利要求1所述羥基喜樹堿葡聚糖納米粒的制備方法，其特征是步驟(2)中，在磁力和70℃水浴條件下攪拌。
5.如權利要求1所述羥基喜樹堿葡聚糖納米粒的制備方法，其特征是步驟(6)中高速2000r/min離心處理，洗滌兩次。
全文摘要
本發明公開了一種羥基喜樹堿葡聚糖納米粒的制備方法。它取葡聚糖1～100mg用蒸餾水溶解完后,用堿調節pH值8～12,然后加入羥基喜樹堿的水溶液。加入有機溶劑于羥莖基樹鹼的水溶液中,邊加邊攪拌,再用鹽酸調pH值,4～8,進行超聲波處理1－10分鐘后,高速離心棄去上清液,加新鮮蒸餾水洗滌二次,得羥基喜樹鹼葡聚糖納米粒。本發明以葡聚糖為載體將羥基喜樹堿制成50～300nm超微粒。經靜脈給藥后,對肝臟有較高的選擇性,而其他器官中分布的量較少,從而達到提高羥基喜樹堿的抗癌效果,而減少對正常細胞的影響,最終實現提高抗腫瘤藥物治療的順應性,提高患者的生存質量,延長生存時間的效果。
文檔編號A61P35/00GK1362060SQ0113825
公開日2002年8月7日 申請日期2001年12月6日 優先權日2001年12月6日
發明者易以木, 陳秀珍 申請人:黃石李時珍藥業集團武漢李時珍藥業有限公司