專利名稱：得自牛尿餾出物(‘Go－mutra’)的生物活性級分作為抗感染藥、抗癌劑和營養物的生物增 ...的制作方法
技術領域：
本發明涉及牛尿餾出物作為生物活性分子的活性增強劑和利用度促進劑的絕對新穎性的應用，其中所說的生物活性分子包括抗感染藥和抗癌劑。以抑制或促進一種生物功能的形式來表達任何形式的活性的分子在本發明中被稱為生物活性分子，例如抗生素、藥物、營養物(nutraceuticals)、心血管藥物、肝保護劑、神經滋補劑等等。在增加生物活性分子吸收效率的同時，本發明在顯著減少抗生素、藥物和抗癌劑的劑量方面具有直接的意義。
本發明是有計劃實驗的結果，提供了一種在不同的制劑中用‘牛尿餾出物’改善抗生素、藥物以及其它分子的生物活性和生物利用度的方法。
營養物的生物利用度和增強抗生素的作用是與人類、植物以及動物的健康有關的，因此預期本發明的組合物和方法也能用于農業和獸醫實踐中。
認為牛尿(Go-mutra)是具有一般健康改善能力的最有效的動物來源的物質/分泌物，但是這的確需要通過科學試驗來進行證明。因此，申請人認為值得對其進行系統地考慮并通過體外和體內試驗來確定該價值的分子基礎。因為這種性質使得其成為一種十分有用的天然物質，所以申請人首先舉例探察了其是否包含任何的藥物促進劑元素。在近日中，已經對作為一種生物利用度增強劑的“胡椒堿”進行了描述(美國專利5,616,593和5,972,382)。因此，時至今日，有文件證明的一種已知的生物利用度增強劑是胡椒堿，并且已經在下面的現有技術中對一系列涉及這種化合物的發明進行了描述。本發明的公開主要目的是要提供該生物活性級分作為生物增強劑和生物利用度促進劑的新應用。
本發明的另一個目的是要提供一種用牛尿餾出物的活性級分改善抗生素、藥物和其它分子的活性和生物利用度的方法。
本發明的另一個目的還在于要提供一種從牛尿中提取該活性級分的方法。
在本發明的一個實施方案中，一種藥物組合物包含有效量的作為生物利用度促進劑的牛尿餾出物和可藥用添加劑，其中所說的可藥用添加劑選自抗癌化合物、抗生素、藥物、治療和營養物質、能靶向于活體體系的離子和類似的分子。
在另一個實施方案中，牛尿餾出物被用作生物利用度促進劑來直接用于抗癌治療中或與其它抗癌分子一起用于抗癌治療中。
在又一個實施方案中，牛尿餾出物被用于真菌感染的抗真菌治療中。
在又一個實施方案中，該抗真菌藥物是吡咯類、克霉唑、制霉菌素(mystatin)、兩性霉素以及類似的物質。
在又一個實施方案中，真菌覆蓋性感染(fungi covering infections)是霉菌(mycetial)、念珠菌、酵母菌或其它的殺真菌化合物。
在又一個實施方案中，牛尿餾出物被用于TB治療，該治療包括與異煙肼和其它的抗結核劑結合進行的多種藥物抵抗肺結核的治療。
在又一個實施方案中，該生物利用度促進劑有助于化合物通過膜的轉運和在靶部位具有更強的效力。
在又一個實施方案中，該抗生素是喹諾酮類抗生素、氟代喹諾酮類抗生素如萘啶酮酸和其它物質如利福平、四環素、氨芐西林以及類似化合物。
在又一個實施方案中，該抗生素、離子和類似化合物是異煙肼和過氧化氫。
在又一個實施方案中，該生物利用度促進劑通過增加功效而有助于該抗生素和其它分子在靶目標處更好的進行作用。
在又一個實施方案中，該活體體系可以是細菌、真菌或任何活體細胞。
在又一個實施方案中，該抗菌劑選自喹諾酮類抗生素、利福平、四環素和氨芐西林。
在又一個實施方案中，該牛尿(Go-mutra)餾出物在0.001μl/ml至100μl/ml的范圍內。
在又一個實施方案中，所使用的被冷凍干燥的活性級分在0.1μg/ml至100μg/ml的范圍內。
在又一個實施方案中，該生物活性級分將抗菌劑、抗癌劑以及抗結核劑的活性增強了2至80倍。
在又一個實施方案中，該生物活性級分將抗菌劑的活性增強了2至80倍。
在又一個實施方案中，該抗菌劑是選自異煙肼、吡嗪酰胺以及其它類似化合物的抗結核劑。
在又一個優選的實施方案中，該生物活性級分將抗結核劑的活性增強了2至20倍。
還是在本發明的另一個實施方案中，該抗癌劑選自紫杉醇(泰素)。
還是在本發明的另一個實施方案中，該生物活性級分將抗癌劑的活性增強了2至20倍。
我們所進行篩分的方法包括所設計的如下所述的特定的生物測定。在本發明中所用的細菌和真菌菌株是從Institute of MicrobialTechnology(IMTECH)，Chandigarh購得的，其具有與所提及的ATCC菌株相當的性質。
1.抗感染劑的生物增強試驗a)在液體培養基和圓盤擴散試驗中，用大腸埃希氏桿菌(ATCC10536的等同物)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)(ATCC 6015的等同物)和包皮垢分支桿菌(ATCC 10231的等同物)對抗生素的最低抑制濃度(MIC)進行測定。
b)將1/4、1/3、1/2的MIC濃度和等于MIC濃度的抗生素物質單獨加入到圓盤上和液體培養基中并將其與各種濃度的試驗化合物一起加入到圓盤上和液體培養基中以便于對比較抑制作用進行評估。
c)與單獨使用的抗生素進行比較，根據對細菌生長所表現出來的增強的抑制作用(在圓盤擴散中有大范圍的抑制區域和在液體培養基試驗中較低濃度的活性)，將表現出顯著的優勢或更高的活性的這些組合挑選出來以進行進一步的試驗。
d)在液體培養基試驗中，通過對在特定處理中的有活力細胞的計數來對該活性進行定量，并且轉化成與將抗生素/藥物單獨使用時相比組合所產生的細胞殺傷百分數增強倍數。
e)進行預處理試驗以測定該化合物是需要與抗生素一起使用來增強其活性還是在抗生素進行處理后或處理前將其撤出會更有利。為此，將該細胞用化合物處理4至8小時，然后通過離心并用無菌水進行洗滌而來使其不含該化合物。然后再如步驟b至d所述的那樣用抗生物來對其進行處理。
2.抗癌劑的生物增強試驗a)在MEM介質中，在24孔板的孔中，將MCF-7(得自NationalCenter for Cell Sciences(NCCS)的乳腺癌的商品化的細胞，Pune)以約0.1×106個細胞的密度進行培養。
b)在18小時后，將各孔中的介質用新鮮的介質所取代。
c)就在進行介質置換后，以所需濃度向不同的孔中加入該試驗化合物。
d)在36小時后對于細胞計數的觀測結果進行記錄，為此需要進行如下的步驟。
i.將介質從這些孔中除去。
ii.將這些孔用1ml的PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)進行沖洗。
iii.向各孔中加入500μl新配制的胰蛋白酶(在PBS中0.1％)溶液。
iv.在30秒后除去該胰蛋白酶溶液并對該平板進行輕輕的叩擊直至該細胞從平板的表面上釋放下來。
v.向其中加入1ml新鮮的MEM生長介質并用一根吸管進行攪動以獲得一種細胞混懸液。
vi.將10μl的細胞混懸液放到血細胞計數器上并在該計數室上放置一塊蓋玻片。
vii.在5個大的正方形中對有活力的細胞數目進行計數，并且從5個顯微區域進行讀數以測定均值。
viii.然后計算最初樣品中的細胞計數(每ml的滴度)，將其記為平均讀數×103。
極限必需培養基(MEM)的組成100ml
MEM粉末(Sigma-Aldrich，USA)＝0.96gHEPES緩沖劑(Sigma-Aldrich，USA)＝0.26g碳酸氫鈉＝0.22g青霉素G＝10mg鏈霉素＝20mg慶大霉素＝5mg胎牛血清＝15ml胎牛血清＝15ml蒸餾水＝85ml3.通過生物學膜的生物利用度試驗a)使用專門設計的由兩部分(相反L型)所組成的玻璃的U-管，該管的L-型的一個開口末端是錐形漸尖的以便于與另一個L-管的非錐形漸尖的末端相配(
圖1)。
b)將山羊腸(最初部分)的膜鋪平并進行固定以作為當將兩個L-管連接起來時兩個末端之間的屏障，通過將兩個L-管連接起來而形成來一個U-管。
c)然后向兩側加入高度/水平相等的無菌蒸餾水。向該供給管(錐形漸尖的)中加入抗生素/化合物，并且通過分光光度計，使用UV來對分子的轉移進行觀察，并且通過在所規定的波長下，通過獲取OD來觀測各分子的最大吸收。
表2
實施例3.在抗生素對包皮垢分支桿菌的殺滅作用中牛尿(Go-mutra)餾出物所介導的增強作用表3
從上面的實驗可以推測出，當與牛尿餾出物一起使用時，抗生素的效力增強。實施例4在異煙肼和過氧化物對大腸埃希氏桿菌的oxyR突變體的殺滅作用中牛尿餾出物所介導的增強作用。牛尿餾出物濃度為0.001μl/ml。
表4
oxyR基因是在大腸埃希氏桿菌中誘導過氧化氫-誘導基因的調節子所必需的(Christman M F，Storz G and Ames BN(1989)，Oxy R，apositive regulator of hydrogen peroxide inducible genes in Escherichia coliand Salmonella typhimurium，is homologous to a family of bacterialregulatory protein(Proc.Natl.Acad.Sci.(USA).863484-3488.)。這些基因的突變體對于藥物如異煙肼和過氧化氫而言是敏感的，這些藥物能產生自由基，可損害細胞內的系統。所以這些化合物的殺滅活性可以被牛尿增加5至8倍。實施例5在抗癌化合物的活性中牛尿餾出物所介導的增強作用。牛尿餾出物的濃度為1μl/ml表5
在動物細胞培養物中申請人觀察到了類似的增強結果(癌細胞系MCF-7得自National Center for Cell Sciences(NCCS)，Pune)，在該培養物中抗癌的化學藥品‘泰素’的殺滅作用被增強了。在我們的研究中，牛尿餾出物的組分有助于其它化合物通過膜的轉運，從而可增加其在細菌、動物和植物細胞中的吸收。這又對藥物、藥劑、營養物和其它的相關化合物和離子的細胞吸收具有很重要的影響。實施例6生物活性級分Gm-IV對殺真菌劑克霉唑的生物增強作用。該活性級分的濃度被維持在10μg/ml的水平上。
表6
在其它的觀察中，該化合物牛尿餾出物增強了抗生素例如利福平、四環素、氨芐西林通過腸以及人造膜的轉運。這種在轉運中的增強約為2至7倍。
現在將大部分的重點放到保證在印度藥品體系中廣泛使用的得自可供選擇來源的粗制藥物的質量上。本發明詳細描述了牛尿餾出物在治療學和營養物應用中的范圍和應用。
粉末形式的研制為了提高牛尿(Go-mutra)的利用度和應用的便利度，申請人進一步進行了分餾以獲得沒有牛尿餾出物的典型味道的能更容易的被人接受的固體。為此，用如下所描述的方法來對該尿餾出物進行分餾從牛尿中獲得的白色固態結晶的分餾步驟1在一個不銹鋼容器中直接從牛無菌地收集牛尿，所述牛是維持在清潔的環境下的。
步驟2在玻璃蒸餾裝置中，在40-50℃下對十五升牛尿進行連續蒸餾以在16至18小時內獲得10-12升餾出物。
步驟3將該餾出物包裝于對其表面進行了消毒的塑料或玻璃容器中以便于進一步應用。
步驟4將200ml的牛尿餾出物與一半體積的甲醇進行混合，并用己烷對其進行提取。
步驟5將己烷級分(Gm-I)冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗。
步驟6將含水級分用乙酸乙酯進行提取，將乙酸乙酯級分(Gm-II)冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗。
步驟7此外，將包含白色沉淀的含水級分用丁醇進行提取，將具有灰黃色沉淀的丁醇級分(Gm-III)冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗。
步驟8將剩余的包含白色晶狀沉淀的含水級分進行干燥(Gm-IV)，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗。流程
每100ml的餾出物可以獲得10至20克的白色粉末(Gm-IV)，其在0.001至10μg/ml的濃度下表現出上面所描述的牛尿餾出物所具有的所有的活性，并且更穩定，而其避免了令人不愉快的味道，因此用作本發明的高級產物。本發明的新穎性還在于通過精確的實驗所揭露出的事實，即僅僅在字面上表示為毫微至微摩爾水平的濃度范圍內才可以獲得該增強作用和其效力。并且當在該制劑或組合物中使用更高的濃度/劑量時并不表現出該活性(活性們)。
Gm-IV級分的物理性質顏色白色物理狀態固體結晶溶解性水溶并且混合物包含水熔點高于400℃比重1.006在甲醇∶氯仿(50∶50)相中的RF值0.65牛尿(Go-mutra)餾出物的HPLC特性HPLC是用LC-8A Shimadzu HPLC，流動相為水∶乙腈(80∶20)，流速為1.0ml/min，在275nm下UV檢測和C-18 E MERCK(150×4mm)柱來進行的。在牛尿(Go-mutra)餾出物的圖線(圖1)上觀察到了兩個主峰(保留時間5.334和11.310分鐘)。
更進一步的特性描述是通過Feigl′s試驗來對該化合物的化學性質進行試驗來完成的(參見E Stahl，薄層色譜法(Thin LayerChromatography))，其表明了甙或糖的存在。
本發明的新穎性為可以從牛尿(Go-mutra)餾出物中分離出一種穩定的固體級分，其是水溶性的并且可以避免尿的味道，而且可以被直接用于任何制劑中。
Gm-IV級分也可以增強抗生素和維生素通過哺乳動物腸膜的轉運。下面給出了描述了由Gm-IV級分來增強利福平的轉運的實例。實施例8在穿越生物膜的生物利用度中牛尿(Go-mutra)餾出物的Gm-IV級分所介導的增加(利福平，1mg/ml和Gm-IV級分，1.0μg/ml)表7
因為牛尿(Go-mutra)餾出物和Gm-IV級分都通過增強抗生素通過半透膜和哺乳動物腸膜而表現出了增強的膜滲透性，所以可以假定上述物質可被用于增強分子的腸轉運和通過各種生物學功能膜的轉運，其中所說的各種生物學功能膜包括尿/腎系統。
在從1至5的所有實驗中，發現本發明凍干產物的增強活性具有與該餾出物的增強活性相同的增強活性。
本發明可以被進一步的解釋如下1.該樣品表現出利福平(抗生素)和維生素B-12在2小時內穿過哺乳動物腸膜(使用山羊腸膜)時的生物利用度的增加并且其在高至4小時的時間內可持續增加。
2.其清楚地表現對避免切開的蘋果氧化作用的抗壞血酸作用的抑制，表明其可能是通過與INH的藥物作用協同的氧化機理而增強異煙肼(INH)的作用的。
3.即使在將培養物最終體積稀釋10-50千倍的情況下，該餾出物仍然表現了對INH的增強作用。
4.更有趣的是觀察到1μl/ml的餾出物將泰素的活性增強了至少5倍。已經優先進行了這方面的進一步實驗。
權利要求書(按照條約第19條的修改)按PCT19條的修改按照專利合作條約第19條(1)提出的修改聲明國際申請號PCT/IN00/00106代理人卷號SCT030735-23我們已經對權利要求進行了略微的修改以使得它們更清楚。我們附上了修改的權利要求。在修改的權利要求中并沒有加入新的主題。當對這些權利要求進行修改時，我們認真考慮了審查員關于用詞的意見以及對比文件。對比文件XP000996728描述了給大鼠口服施用牛尿調制物，這是由于在血清中其能激第三補體組分。活化作用的產品具有一些組胺釋放作用，并且其在外周血液中還可引起嗜中性白細胞和單核細胞計數上的急劇下降。但是，對比文件并沒有公開本發明范圍內的牛尿的生物增強活性和生物利用度促進活性。本發明涉及牛尿作為包括抗感染藥和抗癌劑在內的生物活性分子的活性增強劑和利用度促進劑的一種新的應用。本發明直接涉及當增加生物活性分子的吸收功效時，抗生素、藥物和抗癌劑的劑量顯著降低。至于其它的對比文件而言，XP002167367描述了一系列被證明合格的參照物質——冷凍干燥的牛尿制劑。這些制劑是為了證明的目的被用于檢測1，2-二苯乙烯物質濃度，這篇參考文件并沒有任何關于本發明所提出的牛尿的任何生物活性的教導。第三篇對比文件US 3 248 295 A(K I Melville等人)，1966年4月26日(1966-04-26)，涉及一些新的具有抗過敏和抗緩激肽性質的哺乳動物尿提取物。其還描述了一種從尿中提取活性物質的方法。該活性提取物表現出抗組胺、抗乙酰膽堿、抗緩激肽和抗-5-羥色胺的性質以及預防過敏反應的性質。
所列舉的參考文件并沒有對本發明構成妨礙，這是因為這種研究并沒有涉及本發明的主題。本發明的目的是提供一種在不同制劑中使用‘牛尿’來改善抗生素、藥物和其它分子的活性和生物利用度的新方法，這與所列舉的參考文件完全不同。
在權利要求中并沒有引入新的主題。
1.一種包含有效量的作為生物利用度促進劑的牛尿餾出物和可藥用添加劑的藥物組合物，其中所說的可藥用添加劑選自抗癌化合物、抗生素、藥物、治療和營養物質、可靶向于活體體系的離子和類似分子。
2.如權利要求1所述的組合物，其中所說的牛尿餾出物被用作生物利用度促進劑直接用于抗癌治療中或與抗癌劑一起用于抗癌治療中。
3.如權利要求1所述的組合物，其中所說的牛尿餾出物被用于TB治療，該TB治療包括與異煙肼和其它抗結核劑結合進行的多重藥物抗結核的治療。
4.如權利要求1所述的組合物，其中所說的牛尿餾出物被用于真菌感染的抗真菌治療。
5.如權利要求1所述的組合物，其中所說的生物利用度促進劑有助于化合物通過膜的轉運和在靶部位具有更好的效力。
6.如權利要求1所述的組合物，其中所說的抗生素選自喹諾酮類抗生素、氟代喹諾酮類抗生素、萘啶酮酸、利福平、四環素、氨芐西林和類似的藥物。
7.如權利要求1所述的組合物，其中所說的抗生素、離子和類似化合物是異煙肼和過氧化氫。
8.如權利要求1所述的組合物，其中所說的生物利用度促進劑通過增加效力而有助于抗生素和其它的分子在靶部位更好的發揮作用。
9.如權利要求1所述的組合物，其中所說的殺真菌劑是吡咯類、克霉唑、制霉菌素、兩性霉素和類似的物質。
10.如權利要求1所述的組合物，其中真菌覆蓋性感染是霉菌、念珠菌、酵母菌或其它的殺真菌化合物。
11.如權利要求1所述的組合物，其中所說的活體體系是細菌、真菌或任何的活體細胞。
12.如權利要求1所述的組合物，其中所用的牛尿(Go-mutra)餾出物的濃度在0.001μl/ml至100μl/ml的范圍內。
13.如權利要求1所述的組合物，其中所說的牛尿(Go-mutra)增強了分子、藥物穿過半透膜和哺乳動物腸膜的膜滲透性，并且可被用于增強分子的腸轉運和通過其它生物功能膜的轉運。
14.一種由牛尿餾出物制備粉末(Gm-IV)的方法，所說的方法包括a.將牛尿餾出物與一半體積的甲醇進行混合，并用己烷進行提取；b.將己烷級分(Gm-I)冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗；c.將含水級分用乙酸乙酯進行提取，將乙酸乙酯級分(Gm-II)冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗；d.此外，將包含白色沉淀的含水級分用丁醇進行提取，將具有灰黃色沉淀的丁醇級分(Gm-III)冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗；
e.將剩余的包含白色晶狀沉淀(Gm-IV)的含水級分進行冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗。
15.如權利要求14所述的方法，其中所說的得自牛尿餾出物的冷凍干燥的提取物Gm-IV不具有典型的牛尿餾出物味道。
16.如權利要求14所述的方法，其中所說的冷凍干燥提取物Gm-IV具有如下的性質顏色白色物理狀態固體結晶溶解性水溶并且混合物包含水熔點高于400℃比重1.006在甲醇∶氯仿(50∶50)相中的RF值0.65。
17.如權利要求14所述的方法，其中起始的牛尿餾出物具有在5.334和11.310分鐘的保留時間處具有兩個主峰的HPLC性質。
18.如權利要求14所述的方法，其中所說的冷凍干燥提取物在0.1至100μg/ml的范圍內具有與餾出物的活性相似的所有活性，其在室溫下更穩定并且在水中的溶解度更高。
19.一種得自牛尿餾出物的冷凍干燥的生物活性產品，其具有如下的物理性質顏色白色物理狀態固體結晶溶解性水溶并且混合物包含水熔點高于400℃比重1.006在甲醇∶氯仿(50∶50)相中的RF值0.65。
20.如權利要求19所述的冷凍干燥產品，其中所說的生物活性產品GM-IV不具有典型的牛尿餾出物的味道。
21.如權利要求19所述的冷凍干燥產品，其中所說的生物活性產品的使用范圍在0.1至100μg/ml的濃度范圍內，其在室溫下更穩定并且在水中的溶解度更高。
22.如權利要求19所述的冷凍干燥產品被用于增強分子、藥物穿過半透膜和哺乳動物腸膜的膜滲透性，并且可被用于增強分子的腸轉運和通過各種生物功能性膜的轉運。
23.一種包含有效量的被作為生物增強劑和生物利用度促進劑的得自牛尿餾出物的生物活性的冷凍干燥級分和一種或多種營養物、抗生素、抗感染藥、抗癌劑的組合物。
24.如權利要求23所述的組合物，其中所說的生物活性級分可將抗菌劑、抗癌劑和抗結核劑的活性增加2至80倍。
25.如權利要求23所述的組合物，其中所說的抗菌劑選自但不限于喹諾酮類抗生素、利福平、四環素、氨芐西林和其它類似類別的物質。
26.如權利要求23所述的組合物，其中所說的抗菌劑是選自異煙肼、吡嗪酰胺、乙醇丁胺和其它類似化合物的抗結核劑。
27.如權利要求23所述的組合物，其中所說的生物活性級分可將抗結核劑的活性增加2至20倍。
28.如權利要求23所述的組合物，其中所說的抗癌劑選自紫杉醇(泰素)。
29.如權利要求23所述的組合物，其中所說的生物活性級分可將抗癌劑的活性增強2至20倍。
30.牛尿餾出物作為一種或多種營養物、抗生素、抗感染藥和抗癌劑的生物增強劑和生物利用度促進劑的新應用。
31.如權利要求30所述的應用，其中所說的抗菌劑選自喹諾酮類抗生素、利福平、四環素和氨芐西林以及類似的化合物。
32.如權利要求30所述的應用，其中所說的抗菌劑是選自異煙肼、吡嗪酰胺、乙醇丁胺和其它類似化合物的抗結核劑。
33.如權利要求30所述的應用，其中所說的抗癌劑選自紫杉醇(泰素)。
34.如權利要求30所述的應用，其中所說的牛尿餾出物被用作生物利用度促進劑直接用于抗癌治療中或與抗癌分子一起用于抗癌治療中。
35.如權利要求1-34所述的應用，其中所說的牛尿餾出物和冷凍干燥粉末的濃度十分關鍵，并且用量增加超出上限時可以損傷在制劑或給藥劑量中的作用/活性。
權利要求
1.一種包含有效量的作為生物利用度促進劑的牛尿餾出物和可藥用添加劑的藥物組合物，其中所說的可藥用添加劑選自抗癌化合物、藥物、治療和營養物質、能靶向于活體體系的離子和類似的分子。
2.如權利要求1所述的組合物，其中所說的牛尿餾出物被用作生物利用度促進劑直接用于抗癌治療中或與其它的抗癌分子一起用于抗癌治療中。
3.如權利要求1所述的組合物，其中所說的牛尿餾出物被用于TB治療中，該TB治療包括異煙肼與其它的抗結核劑結合進行的多重藥物抵抗肺結核的治療。
4.如權利要求1所述的組合物，其中所說的牛尿餾出物被用于真菌感染的抗真菌治療。
5.如權利要求1所述的組合物，其中所說的生物利用度促進劑有助于化合物通過膜的轉運和在靶部位具有更強的效力。
6.如權利要求l所述的組合物，其中所說的抗生素非限制性地是氟代喹諾酮類抗生素如萘啶酮酸和其它物質如利福平、四環素、氨芐西林和類似的化合物。
7.如權利要求1所述的組合物，其中所說的抗生素、離子和類似化合物是異煙肼和過氧化氫。
8.如權利要求1所述的組合物，其中所說的生物利用度促進劑通過增加效力而有助于抗生素和其它的分子在靶部位更好的發揮作用。
9.如權利要求1所述的組合物，其中所說的殺真菌劑是吡咯類、克霉唑、制霉菌素、兩性霉素和類似的物質。
10.如權利要求1所述的組合物，其中真菌覆蓋性感染是霉菌、念珠菌、酵母菌或其它的殺真菌化合物。
11.如權利要求1所述的組合物，其中所說的活體體系是細菌、真菌或任何活體細胞。
12.如權利要求1所述的組合物，其中所說的牛尿(Go-mutra)餾出物的濃度在0.001μl/ml至100μl/ml的范圍內。
13.如權利要求1所述的組合物，其中所說的牛尿(Go-mutra)可增強分子、藥物穿過半透膜和哺乳動物腸膜的膜滲透性，并且可用于增強分子的腸轉運和通過各種生物學功能膜的轉運。
14.一種從牛尿餾出物制備粉末(Gm-IV)的方法，該方法包括a.將牛尿餾出物與一半體積的甲醇進行混合，并用己烷對其進行提取。b.將己烷級分(Gm-I)冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗。c.將該含水級分用乙酸乙酯進行提取，將乙酸乙酯級分(Gm-II)冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗。d.此外，將包含白色沉淀的含水級分用丁醇進行提取，將具有灰黃色沉淀的丁醇級分(Gm-III)冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗。e.將剩余的包含白色晶狀沉淀(Gm-IV)的含水級分進行冷凍干燥，并且對與牛尿(Go-mutra)的活性相似的活性進行試驗。
15.如權利要求14所述的方法，其中所說的得自牛尿餾出物的冷凍干燥的提取物Gm-IV不具有典型的牛尿餾出物的味道。
16.如權利要求14所述的方法，其中所說的冷凍干燥的提取物Gm-IV具有如下的性質顏色白色物理狀態固體結晶溶解度水溶并且混合物包含水熔點高于400℃比重1.006在甲醇∶氯仿(50∶50)相中的RF值0.65。
17.如權利要求14所述的方法，其中起始的牛尿餾出物具有在5.334和11.310分鐘的保留時間處具有兩個主峰的HPLC性質。
18.如權利要求14所述的方法，其中在0.1至100μg/ml的范圍內，所說的冷凍干燥的提取物具有與餾出物的活性相似的所有活性，其在室溫下更穩定并且在水中的溶解度更高。
19.一種得自牛尿餾出物的冷凍干燥的生物活性產品，其具有如下的物理學性質顏色白色物理狀態固體結晶溶解性水溶并且混合物包含水熔點高于400℃比重1.006在甲醇∶氯仿(50∶50)相中的RF值0.65。
20.如權利要求19所述的冷凍干燥產品，其中所說的生物活性產品GM-IV不具有典型的牛尿餾出物的味道。
21.如權利要求19所述的冷凍干燥產品，其中所說的生物活性產品以0.1至100μg/ml的濃度被使用，并且在室溫下更穩定并且在水中的溶解度更高。
22.如權利要求19所述的冷凍干燥產物被用于增強分子、藥物穿過半透膜和哺乳動物腸膜的膜滲透性，并且可被用于增加分子的腸轉運和通過各種生物學功能膜的轉運。
23.一種包含有效量的可被用作生物增強劑和生物利用度促進劑的得自牛尿餾出物的生物活性的冷凍干燥級分和一種或多種營養物、抗生素、抗感染藥、抗癌劑的組合物。
24.如權利要求23所述的組合物，其中所說的生物活性級分可將抗菌劑、抗癌劑和抗結核劑的活性增強2至80倍。
25.如權利要求23所述的組合物，其中所說的抗菌劑非限制性的選自喹諾酮類抗生素、利福平、四環素、氨芐西林和其它類似的物質。
26.如權利要求23所述的組合物，其中所說的抗菌劑是選自異煙肼、吡嗪酰胺、乙醇丁胺和其它類似化合物的抗結核劑。
27.如權利要求23所述的組合物，其中所說的生物活性級分可將抗結核劑的活性增強2至20倍。
28.如權利要求23所述的組合物，其中所說的抗癌劑選自紫杉醇(泰素)。
29.如權利要求23所述的組合物，其中所說的生物活性級分可將抗癌劑的活性增強2至20倍。
30.牛尿餾出物作為一種或多種營養物、抗生素、抗感染藥和抗癌劑的生物增強劑和生物利用度促進劑的新應用。
31.如權利要求30所述的應用，其中所說的抗菌劑選自喹諾酮類抗生素、利福平、四環素和氨芐西林以及類似的化合物。
32.如權利要求30所述的應用，其中所說的抗菌劑是選自異煙肼、吡嗪酰胺、乙醇丁胺和其它類似化合物的抗結核劑。
33.如權利要求30所述的應用，其中所說的抗癌劑選自紫杉醇(泰素)。
34.如權利要求30所述的應用，其中所說的牛尿餾出物被用作生物利用度促進劑直接用于抗癌治療中或與其它的抗癌分子一起用于抗癌治療中。
35.如權利要求1-34所述的應用，其中所說的牛尿餾出物和冷凍干燥粉末的濃度十分關鍵，并且數量增加超出上限時可以損傷在制劑或給藥劑量中的功效/活性。
全文摘要
本發明涉及一種包含有效量的作為生物利用度促進劑的得自牛尿餾出物的生物活性級分和可藥用添加劑的藥物組合物，其中所說的可藥用添加劑選自抗癌化合物、抗生素、藥物、治療和營養物質、能靶向于活體體系的離子和類似分子。
文檔編號A61K47/46GK1454092SQ00819918
公開日2003年11月5日 申請日期2000年10月20日 優先權日2000年10月20日
發明者蘇曼·普里特·辛格·哈努賈, 蘇希爾·庫馬爾, 阿吉特·庫馬爾·沙薩尼, 賈伊·尚卡爾·阿里亞, 馬亨德拉·潘杜朗·達羅卡, 莫尼卡·辛格, 普拉奇·辛哈, 松亞·阿瓦斯蒂, 蘇巴什·錢德拉·古普塔, 維韋·庫馬爾·古普塔, 馬丹·莫漢·古普塔, 拉姆·基肖爾·維爾馬, 斯韋塔·阿加瓦爾, 蘇尼爾·巴爾克里什那·曼辛格卡, 蘇雷什·哈里布浩·道利 申請人:科學和工業研究委員會