專利名稱：燈盞花有效部位及制備工藝和制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及治療心血管疾病的藥物，具體地說是燈盞花有效部位及制備工藝和制劑。
燈盞花，又名燈盞細辛，屬菊科植物短亭飛蓬[Erigeron breviscapus(vant) Hand.-Mazz.]的全草，具有散寒解表、舒筋活血、心痛消積等功效，民間長期用于治療中風偏癱、冠心病、心絞痛等癥，效果顯著。自80年代以來，已有多家單位研究開發了與燈盞花有關的制劑并用于臨床，已職得了相當的社會和經濟效益。然而，過去一直認為燈盞花素〔燈盞乙素(黃芩素甙)為主和少量的燈盞甲素(芹菜素-7-β-D-葡萄糖醛酸甙)〕是主要活性成分，因此各種制劑均以燈盞花素或總黃酮為質量控制標準。
由于以往認識的局限，致使工藝不盡合理，藥物原料利用率低，產品不能完全真實反映該藥的療效。
本發明的目的是對燈盞花進行深入研究后，提供一種技術含量高，合理、安全，高得率、低成本的提取燈盞花新的有效部位的制備方法，及其有效部位用于臨床的各種制劑。
本發明是對燈盞花的化學活性成分進行了深入研究和再認識，發現燈盞花的活性成分不僅僅是盞花素等黃酮類化合物，而是包括三類物質黃酮類；咖啡酰奎寧酸類和焦袂康酸及其衍生物。在藥理配合下，對上述有效部位按以下方法進行了提取，即將燈盞花原料(全草)粗粉直接通過50-90％的稀甲醇或稀乙醇或稀丙酮提取，原料與提取液比例為1∶5-1∶20，提職液40-60℃低溫減壓濃縮，放置沉淀，除去葉綠素等雜質，濃縮液上聚苯乙烯樹脂(Dion-HP20，D101，DM130t等)柱層析，先用水洗脫，收集水洗液及其稀醇或烯丙酮洗脫部份，水液用濃鹽酸調至PH1-2，此酸性水溶液再上聚苯乙烯樹脂柱，最后用50-70％稀醇洗脫，該洗脫液減壓、濃縮，噴霧干躁，得黃色粉末，即為該有效部位。
上述的制備工藝得到的有效部位即為①黃酮類化合物，②咖啡酸及咖啡酰基奎寧酸類化合物，③焦袂康酸及其衍生物。
上述有效部位中的黃酮類化合物含燈盞甲素、乙素、黃芩素。
上述有效部位中的咖啡酸及咖啡酰奎寧酸類化合物含咖啡酸、氯原酸、3，4，一二咖啡酰基奎寧酸、3，5，一二咖啡酰基奎寧酸和飛蓬酯A(erigosterA)。
上述有效部位中的焦袂康酸及其衍生物含焦袂康酸、飛蓬甙、6-咖啡酰基飛蓬甙。
該有效部位質量穩定，經HPLC定性、定量分析，該有效成分含量在70-90％之間。
利用該有效部位可制成臨床上各種制劑注射針劑，注射用粉針劑，口服片劑、沖劑、膠囊和滴丸等。由該有效部位制備的各種制劑，在臨床上用于治療中風后癱瘓、冠心病等心腦血管病，療效顯著，是新一代的燈盞花制劑。
其中，靜脈注射液由以下成分組成(重量/體積比)燈盞花有效部位0.4-1.0％，藥用堿0.8-2.0％和少量藥用輔料。
上述的藥用堿可采用碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、碳酸鉀、氫氧化鉀、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉和乙二胺四中的一種或者數種組合。
上述藥用輔料為氯化鈉、苯甲醇、吐溫-60、土溫-80、山梨醇、甘油和丙二醇中的一種或數種組合。
上述制劑用于治療中風后癱瘓、冠心病，高血壓、腦栓塞等。
本發明與現有技術比較具有如下積極效果1、現有技術有效部位主要特征是燈盞花素，并以分光光度法測總黃酮作為質量控制指標，此法誤差很大。而本發明的有效部位包含了三類有效成分(黃酮類、咖啡酰基奎寧酸類和焦袂康酸及其衍生物)，以HPLC定性、定量分析，建立了嚴格質量控制標準，所認識的化學成分含量占有效部位70-90％之間。
2、現有技術的工藝得率為1％左右，本發明有效部位得率為2-3％，提高了利用率，降低了成本。
3、該有效部位在藥理作用方面與現有技術的產品顯著不同在于具有顯著的抗氧化、清除自由基作用。腦缺血后，特別是缺血/再灌后，生成大量的自由基和脂質迷氧化物，這加重了神經細胞缺血性損傷，該有效部位及其制劑能促進神精功能改善，恢復。因此，該有效部位在治療腦率中后遺癥方面優于現有產品。
本發明的有效部位制備的各種制劑用于治療中風后癱瘓、冠心病，高血壓、腦栓塞等，療效顯著，是新一代燈盞花制劑。
本發明涉及的有效部位具有顯著藥理作用1、抗血小板聚集，在濃度為500Kg/ml(體外)時，對ADD誘導的血小板聚集抑制率為75％，在體內，當靜注15mg/Kg時，對膠原所致聚集抑制率為60％。
2、抗血栓作用，劑量為40mg/KgI，P，對AA誘導的血栓形成抑制率為80％(P＜0.05)。
3、抗氧化、清除自由基作用，在有效部位濃度分別為10，30，100μg/ml時，對氧自由基消除率分別為75.6％，71.7％，52.9％。
以下結合實施例對本發明作進一步的詳述。
實施例11、燈盞花有效部位的制備方法職燈盞花全草粗粉50公斤，加入70％丙酮-水溶液1000升，分三次室溫浸提，合并提取液，低溫40-60℃減壓濃縮至約100升體積，室溫放置，過濾除去葉綠素等雜質。濾液在已預處理的80KgD 101柱上吸附分配，先用約250升水洗脫，繼以200升60％丙酮-水溶液洗脫。水洗液用6N鹽酸(HCl)酸化至PH1-2，訪該水溶液再次上D101柱吸附分配，依然是用水洗至無酸性(約為200升水)，繼以用約200立升60％丙酮-水洗脫。60％丙酮水洗部分低溫減壓濃縮至約100升，噴霧干躁，得黃色粉有效成分，得量為1.1公斤，得率為2.2％(以燈盞花粗原料計)。該有效部位主要含三類活性物質黃酮類、咖啡酰基奎寧酸類和焦袂康酸及其衍生物化學成分，經HPLC定性、定量分析，該化學成分含量達70-90％。
2、精制燈盞花靜脈注射液的制備方法精制燈盞花靜脈注射液由發以下成分組成(重量/體積比)燈盞花有效部位0.4-1.0％，藥用堿0.8-2.0％，和少量藥用輔料。
配制方法職配制量50％注射用水1000毫升，量于容器中，加熱至80℃左右，依次加入燈盞花有效部位(半成品)原料110克，藥用堿20克(？)，氯化鈉170克攪拌溶解，再加入藥用輔料20克攪拌，然后再加水10000毫升，攪拌均勻。調節PH值，測定含量，合格后用玻璃砂棒和微孔濾膜串聯過濾，濾液按每支2毫升分裝密封，100℃流通蒸汽進行15分鐘消毒滅菌，然后用冷水使其降溫。本品為黃色澄明液體，2ml/支，每毫升含有效部位5克，PH值為6.5-7.5，一般衛生學檢查和其它檢查均符合國家有關規定。
權利要求
1.一種燈盞花有效部位的制備工藝，其特征在于將燈盞花原料(全草)粗粉直接通過50-90％的稀甲醇或稀乙醇或稀丙酮提取，原料與提取液比例為1∶5-1∶20，提取液40-60℃低溫減壓濃縮，放置沉淀，除去葉綠素等雜質，濃縮液上聚苯乙烯樹脂柱層析，先用水洗脫，收集水洗液及其稀醇或烯丙酮洗脫部份，水液用濃鹽酸調至PH1-2，此酸性水溶液再上聚苯乙烯樹脂柱，最后用50-70％稀醇洗脫，該洗脫液減壓、濃縮，噴霧干躁，得黃色粉末，即為該有效部位。
2.按權利要求1所述的制備工藝得到的有效部位，其特征在于含以下三類物質①黃酮類化合物，②咖啡酸及咖啡酰基奎寧酸類化合物，③焦袂康酸及其衍生物。
3.按權利要求2所述的有效部位，其特征在于黃酮類化合物含燈盞甲素、乙素、黃芩素。
4.按權利要求2所述的有效部位，其特征在于咖啡酸及咖啡酰奎寧酸類化合物含咖啡酸、氯原酸、3，4，一二咖啡酰基奎寧酸、3，5，一二咖啡酰基奎寧酸和飛蓬酯A。
5.按權利要求2所述的有效部位，其特征在于焦袂康酸及其衍生物含焦袂康酸、飛蓬甙、6-咖啡酰基飛蓬甙。
6.按權利要求2所述的有效部位的制劑，其特征在于利用該有效成份可制成各種制劑注射針劑，注射用粉針劑，口服片劑、沖劑、膠囊和滴丸。
7.按權利要求6所述的制劑，其特征在于靜脈注射液由以下成分組成(重量/體積比)燈盞花有效部位0.4-1.0％，藥用堿0.8-2.0％和少量藥用輔料。
8.按權利要求6或7所述的制劑，其特征在于藥用堿可采用碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、碳酸鉀、氫氧化鉀、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉和乙二胺四中的一種或者數種組合。
9.按權利要求6或7所述的制劑，其特征在于藥用輔料為氯化鈉、苯甲醇、吐溫-60、土溫-80、山梨醇、甘油和丙二醇中的一種或數種組合。
10.按權利要求6所述的制劑，其特征在于此制劑用于治療中風后癱瘓、冠心病，高血壓、腦栓塞等。
全文摘要
本發明是一種燈盞花有效部位的制備工藝和制劑。其特征在于將燈盞花原料(全草)粗粉直接通過的稀甲醇或稀乙醇或稀丙酮提取,提取液低溫減壓濃縮,放置沉淀,除去葉綠素等雜質,濃縮液上聚苯乙烯樹脂柱層析,先用水洗脫,收集水洗液及其稀醇或烯丙酮洗脫部份,水液用濃鹽酸調至pH1－2,此酸性水溶液再上聚苯乙烯樹脂柱,最后用稀醇洗脫,該洗脫液減壓、濃縮,噴霧干躁,得黃色粉末,即為該有效部位。本發明的有效部位制備的各種制劑用于治療中風后癱瘓、冠心病,高血壓、腦栓塞等,療效顯著,是新一代燈盞花制劑。
文檔編號A61P9/00GK1327811SQ00113019
公開日2001年12月26日 申請日期2000年6月12日 優先權日2000年6月12日
發明者孫漢董, 趙勤實, 單振光, 楊春雷, 彭麗艷, 林中文 申請人:中國科學院昆明植物研究所, 云南施普瑞生物工程有限公司